一种基于葡萄糖氧化酶的人工改造酶及其表达应用的制作方法

技术特征：
1.一种基于葡萄糖氧化酶的人工改造酶，其特征在于，其氨基酸序列如seq id no.2所示。2.编码权利要求1所述基于葡萄糖氧化酶的人工改造酶的基因。3.根据权利要求2所述基因，其核苷酸序列如seq id no.3所示。4.一种重组表达载体，其包含如权利要求3中所述的核苷酸序列。5.一种宿主细胞，其包含如权利要求4中所述的重组表达载体。6.权利要求2中所述基因在分泌表达葡萄糖氧化酶中的应用。7.根据权利要求6中所述的基因在分泌表达葡萄糖氧化酶中的应用，其特征在于：将所述的通过理性设计、定点突变得到的新的人工改造的葡萄糖氧化酶基因在原核细胞中，与用于原核细胞进行基因操作所用的穿梭表达质粒连接构成重组表达质粒；将重组表达质粒转化入真核细胞表达蛋白并整合入真核细胞基因组中得到重组酵母；培养重组酵母，诱导葡萄糖氧化酶的分泌表达。8.根据权利要求7中所述的应用，原核细胞为大肠杆菌。9.根据权利要求7中所述的应用，其特征在于：真核细胞表达蛋白是毕赤酵母pichia pastoris gs115表达蛋白。

技术总结
本发明提供了一种基于葡萄糖氧化酶的人工改造酶及其表达应用，通过理性设计、定点突变技术改造来自于黑曲霉的葡萄糖氧化酶M8基因，最后得到热稳定性显著提高的突变体，将其应用到了真核细胞表达系统。由此解决了全价饲料高温制粒过程中葡萄糖氧化酶酶活过多丧失的问题。的问题。的问题。


技术研发人员：支凤东 张鲁嘉 缪雨露 赵玥 潘月 崔令蒙 方波欢 冯英慧 沈涛
受保护的技术使用者：宁夏夏盛实业集团有限公司 沧州夏盛酶生物技术有限公司
技术研发日：2021.11.16
技术公布日：2022/3/15