一种改良小鼠卵巢切除手术模型的构建方法与流程

1.本发明涉及生物建模技术领域，具体为一种改良小鼠卵巢切除手术模型的构建方法。


背景技术：

2.雌激素是一种体内常见的类固醇激素，主要由雌性动物卵巢分泌产生。此外，妊娠胎盘、滤泡、黄体也能产生少量的雌激素。雌激素的受体广泛分布在机体多器官中，如子宫、乳房以及膀胱、尿道、大脑及皮肤等。因此，雌激素不仅有促进和维持女性生殖器官和第二性征的生理作用，并对内分泌系统、心血管系统、代谢系统、骨骼的生长和成熟、皮肤的稳态等均有明显的影响，在体内发挥重要的调节作用。此外，雌激素的调节失衡也与多种疾病的发生发展密切有关，如乳腺癌、子宫内膜癌、骨质疏松、脱发等。
3.为了更好的研究体内雌激素对人体疾病中的影响，小鼠卵巢去势模型及抗雌激素药物干预模型是常用的两种动物模型。但由于抗雌激素药物干预存在给药方式复杂、药物干预存在体内激素水平波动等不便因素，小鼠卵巢去势模型是目前首选的研究模型，能使小鼠体内雌激素平稳降低，从而模拟人体内绝经后状态，或因病理导致卵巢功能丧失的状态。
4.目前多项研究均有采用多种小鼠体内卵巢去势模型，但存在各自的缺陷：
5.1、关于手术切口的选择
6.1)腹部切口卵巢去势小鼠模型
7.缺点：腹部切口离卵巢位置较远，操作需从前腹部进入，对腹部其他器官存在损伤的风险。
8.2)背部双切口卵巢去势小鼠模型
9.缺点：背部双切口，切口较长，感染风险与出血风险增加，且双切口对卵巢的定位不明确，同时由于皮肤切口及深部切口处于同一位置，术后感染风险更高，对后续的恢复不利。
10.2、关于卵巢切除伤口的缝合方式
11.目前对于卵巢切除后输卵切口的缝合常用丝线进行结扎缝合。但是外科结扎与操作人员的技术水平存在极大关系。潜在的风险包括结扎不紧密导致的切口感染、切口出血等术后并发症。同时由于体内的术后并发症往往难以判断，其潜在的风险可能导致模型数据的不稳定。
12.3、关于背部皮肤的缝合方式
13.目前对于背部皮肤缝合，多采用丝线 角针进行间断缝合。但是小鼠在饲养笼中存在相互间撕扯等对伤口愈合不良因素。尤其在c57小鼠中，切口裂开情况不少见。开放的创面易引起小鼠术后感染，同时新鲜创面造成小鼠失血，上述因素都是引起小鼠模型间数据不稳定、小鼠死亡率增加、手术不成功的潜在风险。


技术实现要素：

14.针对上述存在的技术不足，本发明的目的是提供一种改良小鼠卵巢切除手术模型的构建方法。
15.为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：
16.本发明提供一种改良小鼠卵巢切除手术模型的构建方法，包括以下步骤：
17.s1、材料准备：手术垫巾、消毒器械、剃毛刀、电凝笔、戊巴比妥钠、碘伏、小鼠皮肤缝合器；
18.s2、术前准备：使用2.5％戊巴比妥钠给小鼠进行腹腔麻醉，使用剃毛刀对小鼠背部皮肤进行剃毛，使用碘伏进行手术视野消毒；
19.s3、置小鼠俯卧位，以小鼠背部脊柱最高点为起始点，沿小鼠背部正中线剪1cm切口；
20.s4、使用眼科镊沿切口钝性分离背部皮肤与筋膜层；
21.s5、置小鼠侧卧位，自手术切口处找到小鼠侧面最低点，该处为小鼠腹膜后隙，可透过壁层腹膜看到白色脂肪组织，即为小鼠卵巢部位；
22.s6、使用眼科镊轻轻撕开0.3-0.5cm的筋膜组织，可暴露腹膜后脂肪组织；
23.s7、拨开脂肪组织，可从中找到直径为0.1cm的红色圆形组织，即为卵巢；
24.s8、使用1号线对卵巢与输卵管连接处进行环形结扎；
25.s9、使用电凝笔对结扎好的卵巢及卵巢动脉进行烫除并止血，剪除多余的线头；
26.s10、回纳脂肪组织及输卵管；
27.s11、使用可吸收线缝合筋膜组织；
28.s12、相同方法处理对侧卵巢；
29.s13、双侧卵巢切除后，对切口部位进行再次消毒；
30.s14、使用皮肤缝合器对小鼠切口进行闭合；
31.s15、手术结束。
32.相比于现有技术，本发明的有益效果在于：
33.1、容易操作：(1)手术窗口经小鼠背部进入，有明确的手术解剖指示点，无需损伤其他内脏及肌肉组织；(2)使用结扎和电凝双重去除卵巢的操作，有效增加手术成功率。
34.2、有效减少术中感染风险：(1)手术仅通过腹膜后路径，对前方内脏没有感染的风险；(2)手术野仅一个切口，外切口与内切口交错，减少内脏经切口外露感染的风险；(3)使用电凝笔进行伤口处高温灭菌，减少感染风险；(4)使用小鼠皮肤缝合器，防止小鼠苏醒后因相互撕咬引起伤口暴露与感染。
35.3、有效减少出血量，降低死亡率：(1)术中窗口小，高效避开血管部位，总出血量不足100μl；(2)使用电凝笔闭合了卵巢动脉是避免出血的重要措施，有效降低小鼠死亡率。
36.4、手术创口小，缩短恢复周期。
附图说明
37.为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以
根据这些附图获得其他的附图。
38.图1为本发明手术组和对照组方法切除下的小鼠卵槽与输卵管的对比图。
具体实施方式
39.下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
40.一、仪器、材料
41.手术垫巾、消毒器械、剃毛刀、电凝笔、戊巴比妥钠、碘伏、小鼠皮肤缝合器；
42.二、模型构建方法
43.选取8周龄spf级icr雌性小鼠12只，随机分为手术组和对照组，每组6只，对照组采取常规方法处理，手术组按照实施例下述方法处理：
44.s1、术前准备：使用2.5％戊巴比妥钠给小鼠进行腹腔麻醉后，置小鼠俯卧位；
45.s2、使用剃毛刀对小鼠背部皮肤进行剃毛，使用碘伏进行手术视野消毒，
46.s3、以小鼠背部脊柱最高点为起始点，沿小鼠背部正中线剪1cm切口；
47.s4、使用眼科镊沿切口钝性分离背部皮肤与筋膜层；
48.s5、置小鼠侧卧位，自手术切口处找到小鼠侧面最低点；
49.s6、透过壁层腹膜找到白色脂肪组织；
50.s7、使用眼科镊轻轻撕开0.3-0.5cm的筋膜组织，暴露腹膜后脂肪组织；
51.s8、拨开脂肪组织，可从中找到直径为0.1cm的红色圆形组织，即为卵巢；
52.s9、使用1号线对卵巢与输卵管连接处进行环形结扎；
53.s10、使用电凝笔对结扎好的卵巢及卵巢动脉进行烫除并止血，剪除多余的线头；
54.s11、回纳脂肪组织及输卵管；
55.s12、使用可吸收线缝合筋膜组织并用相同方法处理对侧组织；
56.s13、双侧卵巢切除后，对切口部位进行再次消毒；
57.s14、使用皮肤缝合器对小鼠切口进行闭合；
58.s15、手术结束。
59.三、模型构建的评价方法与结果
60.(一)评价指标
61.小鼠子宫附件缩小程度。
62.(二)结果分析
63.如图1所示，手术组小鼠子宫附件缩小程显著高于对照组。因此，本方法可显著改良原有方法的不足。
64.显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。