一种检测口腔护理产品中溶菌酶的方法与流程

技术特征：
1.一种检测口腔护理产品中溶菌酶的方法，其特征在于：将待检样品和活性底物混合并孵育，然后加入终止液，再离心取上清，检测上清的od
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值，获得待检样品的吸光光度值；所述活性底物中含有标记有活性艳红k-2bp的藤黄微球菌；所述待检样品来源于口腔护理用品，所述口腔护理用品为液体类制剂或固体/半固体类制剂；所述液体类制剂包括漱口水和口喷中的至少一种；所述固体/半固体类制剂包括牙膏、牙粉和固体清洁片的至少一种。2.根据权利要求1所述的一种检测口腔护理产品中溶菌酶的方法，其特征在于：标记有活性艳红k-2bp的藤黄微球菌在活性底物中的含量为1.75-3wt.％。3.根据权利要求2所述的一种检测口腔护理产品中溶菌酶的方法，其特征在于：所述孵育的时间为4-14h、温度为36
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1℃。4.根据权利要求3所述的一种检测口腔护理产品中溶菌酶的方法，其特征在于：所述离心的转速为3000-4000r/min,时间为10-15min。5.根据权利要求1所述的一种检测口腔护理产品中溶菌酶的方法，其特征在于：标记有活性艳红k-2bp的藤黄微球菌由如下方法制备：使用营养肉汤培养基培养藤黄微球菌，然后取菌体，并对菌体进行冷冻干燥处理，获得冻干菌粉；在冻干菌粉中加入活性艳红k-2bp和naoh溶液，经染色孵育后，收集染色菌体；染色菌体经洗涤去除游离染料后，获得标记有活性艳红k-2bp的藤黄微球菌。6.根据权利要求5所述的一种检测口腔护理产品中溶菌酶的方法，其特征在于：冻干菌粉和活性艳红k-2bp的质量比为1:0.5。7.根据权利要求6所述的一种检测口腔护理产品中溶菌酶的方法，其特征在于：所述染色孵育的时间为18-24h，温度为25
±
1℃；所述营养肉汤培养基的配方为胰化蛋白胨10g/l,酵母提取物5g/l,氯化钠10g/l；使用营养肉汤培养基培养藤黄微球菌的方法为：取3-5代藤黄微球菌接种于营养肉汤培养基中，37℃振荡培养16h；所述终止液包括体积比为1:4吐温80溶液和盐酸溶液。8.根据权利要求1所述的一种检测口腔护理产品中溶菌酶的方法，其特征在于：待检样品由如下方法获取：将口腔护理用品分散于缓冲液中，获得待检样品。9.根据权利要求1所述的一种检测口腔护理产品中溶菌酶的方法，其特征在于：将溶菌酶做梯度稀释，获得若干不同浓度的溶菌酶溶液；将所述溶菌酶溶液与所述活性底物混合，经孵育后加入终止液，再离心取上清，检测上清的od
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值，获得标准品的吸光光度值；建立标准品的吸光光度值相对于溶菌酶溶液浓度的标准曲线；将待检样品的吸光光度值代入所述标准曲线，计算获得待检样品的酶活数值。10.一种检测口腔护理产品中溶菌酶的试剂盒，其特征在于，包括用于制备活性底物的试剂组合和终止液；所述活性底物中含有1.75-3wt.％的标记有活性艳红k-2bp的藤黄微球菌；用于制备活性底物的试剂组合包括藤黄微球菌的冻干菌粉、活性艳红k-2bp和naoh溶液；所述终止液包括终止液a和终止液b；终止液a为吐温80溶液，终止液b为盐酸溶液。

技术总结
本发明涉及溶菌酶检测技术领域，具体涉及一种检测口腔护理产品中溶菌酶的方法以及试剂盒。该方法为将待检样品和活性底物混合并孵育，然后加入终止液，再离心取上清，检测上清的OD


技术研发人员：肖博文 张环 卢静 邓全富 刘莉 陆瑜 王雄英 邱琳 邓嵘
受保护的技术使用者：重庆登康口腔护理用品股份有限公司
技术研发日：2021.11.30
技术公布日：2022/3/3