一种姜黄素黄连素共晶及其药用组合物的制作方法

1.本发明属于药学领域，具体涉及一种姜黄素黄连素共晶及其药用组合物。


背景技术：

2.小檗碱，亦称黄连素，是从中药黄连中分离的一种季铵生物碱，是黄连抗菌的主要有效成分。为黄色针状结晶，味苦。在植物界中分布较广，大约有4个科10个属内发现有小檗碱存在。其盐类例如盐酸小檗碱，又称盐酸黄连素，是一种异喹啉生物碱，长期以来作为清热解毒及抗菌药物应用于临床，常用于治疗菌痢、急性肠胃炎、慢性胆囊炎以及眼结膜炎、化脓性中耳炎等疾病，均有显着疗效。盐酸小檗碱也存在于小檗科等4科10属的许多植物中。
3.姜黄素是一种天然化合物，具有良好的抗炎和抗癌特性。姜黄素是从姜科、天南星科中的一些植物的根茎中提取的一种二酮类化合物，化学式为c
21h20
o6。其中，姜黄中约含姜黄素3％～6％，是植物界很稀少的具有二酮结构的色素。姜黄素为橙黄色结晶粉末，味稍苦，不溶于水，在食品生产中主要用于肠类制品、罐头、酱卤制品等产品的着色。姜黄素具有降血脂、抗肿瘤、抗炎、利胆、抗氧化等作用，另外，也有科学家发现姜黄素有助治疗耐药结核病。
4.姜黄素与黄连素是研究报道较多的天然产物成分，翟春颖，姜黄素和黄连素对胆汁酸诱导的人结肠癌细胞增生的抑制作用研究[d]，天津：天津医科大学，2004公开了姜黄素和黄连素以一种浓度和时间依赖模式抑制结肠癌细胞，有望开发成抗癌新药，但姜黄素水溶性较差，口服生物利用度较低；市场销售的黄连素则具有一定吸湿性，结晶水比例不太确定等，这些缺陷导致两种药物合用时药效发挥受到影响。


技术实现要素：

[0005]
针对现有技术的缺陷，本发明提供一种共晶体，它是小檗碱、或其药学上可接受的盐、或其衍生物，与姜黄素或其衍生物的药物共晶体；所述小檗碱、或其药学上可接受的盐、或其衍生物，与姜黄素或其衍生物的摩尔比为1～5：1。
[0006]
进一步地，它是盐酸小檗碱与姜黄素的药物共晶体。
[0007]
更进一步地，所述共晶体的x射线粉末衍射图谱以衍射角角表示至少在6.85
±
0.2
°
，8.86
±
0.2
°
，9.10
±
0.2
°
，17.20
±
0.2
°
，23.25
±
0.2
°
，24.69
±
0.2
°
，25.55
±
0.2
°
，26.30
±
0.2
°
有特征峰。
[0008]
更进一步地，所述共晶体的x射线粉末衍射图谱以衍射角角表示至少在6.85
±
0.2
°
，8.86
±
0.2
°
，9.10
±
0.2
°
，13.76
±
0.2
°
，17.20
±
0.2
°
，18.13
±
0.2
°
，19.41
±
0.2
°
，21.14
±
0.2
°
，23.25
±
0.2
°
，23.66
±
0.2
°
，24.69
±
0.2
°
，25.55
±
0.2
°
，26.30
±
0.2
°
，27.04
±
0.2
°
，27.43
±
0.2
°
，29.08
±
0.2
°
有特征峰。
[0009]
更进一步地，所述共晶体的x射线粉末衍射图谱以衍射角角表示至少在6.85
±
0.2
°
、7.92
±
0.2
°
、8.86
±
0.2
°
、9.10
±
0.2
°
、12.24
±
0.2
°
、13.76
±
0.2
°
、14.11
±
0.2
°
、
14.51
±
0.2
°
、17.20
±
0.2
°
、18.13
±
0.2
°
、18.57
±
0.2
°
、19.44
±
0.2
°
、21.14
±
0.2
°
、23.25
±
0.2
°
、23.66
±
0.2
°
、24.69
±
0.2
°
、25.55
±
0.2
°
、26.30
±
0.2
°
、27.04
±
0.2
°
、27.43
±
0.2
°
、29.08
±
0.2
°
、30.15
±
0.2
°
有特征峰。
[0010]
更进一步地，所述姜黄素与盐酸小檗碱的分子摩尔比为1:1。
[0011]
本发明还提供了一种前述共晶体的制备方法，它包括如下步骤：
[0012]
1)取姜黄素和盐酸小檗碱，混合，加溶剂搅拌，过滤，得固体；
[0013]
2)取固体，加溶剂重结晶，得共晶体。
[0014]
进一步地，所述溶剂为醇或含醇的水溶液，优选95乙醇。
[0015]
本发明还提供了一种前述共晶体在制备治疗癌症的药物中的用途。
[0016]
进一步地，所述药物为治疗结肠癌的药物。
[0017]
本发还提供了一种前述共晶体在制备预防和/或治疗皮肤病的药物中的用途。
[0018]
进一步地，所述药物是预防和/或治疗银屑病的药物。
[0019]
本发明最后提供了一种预防和/或治疗癌症或银屑病的药用组合物，它是以前述的共晶体为活性成分，加上药学上可以接受的辅料制备而成的制剂。
[0020]
进一步地，所述制剂为片剂、胶囊、混悬剂、注射剂、膏剂或贴剂。
[0021]
本发明姜黄素盐酸小檗碱共晶体，具有良好的水溶性和吸湿稳定性，在抑制人结肠癌细胞ht-29方面，明显优于盐酸小檗碱、姜黄素以及它们的组合物，同时对小鼠咪喹莫特银屑病模型也具有明显的治疗作用，在结肠癌和银屑病治疗方面应用前景广阔。
[0022]
药物共晶体是两种或者多种药物分子通过氢键等作用力形成的新的结晶固体。对共晶体的研究表明，不是所有的药物分子都能形成共晶体，不是所有的共晶体都具有适宜的成药性。另外，药物分子之间形成的共晶体，与药物分子之间的机械混合物是否具有非显而易见的物化性质，是否具有非显而易见的生物学效应也是难以预测的。因此，开发出具有成药性，并且具有意想不到的生物学效应的共晶体仍然具有较大的挑战性。
[0023]
然而，本发明人发现盐酸小檗碱与姜黄素不但能形成共晶体，还能使共晶体的物化性质相对机械混合物发生巨大的变化，如明显提高溶解度，降低吸湿性，同时出乎意料的提高成分的药理活性。
[0024]
显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
[0025]
以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
附图说明
[0026]
图1为试验例4中各组小鼠体重变化曲线。
[0027]
图2为试验例4中各组小鼠皮损总体评分曲线。
[0028]
图3为试验例4中各组小鼠鳞屑评分曲线。
[0029]
图4为试验例4中各组小鼠皮肤增厚评分曲线。
具体实施方式
[0030]
本发明具体实施方式中使用的原料、设备均为已知产品，通过购买市售产品获得。由本发明共晶体制成的片剂、胶囊、混悬剂、注射剂、膏剂、贴剂的制备工艺成熟，参照现有技术常规方法即可制成。
[0031]
实施例1、本发明共晶体i-1的制备
[0032]
取盐酸小檗碱水合物10.0克、姜黄素9.9克于250毫升单口瓶中，并与100毫升95乙醇混合，室温下搅拌过夜，过滤得黄色固体。该固体用95乙醇重结晶，得黄色晶体，即本发明共晶体i-1；共晶体i-1的结构特征如下：
[0033]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ：9.89(s，1h)，9.69(d，j＝2.4hz，2h)，8.94(s，1h)，8.20(d，j＝9.2hz，1h)，8.00(d，j＝9.1hz，1h)，7.80(s，1h)，7.55(s，1h)，7.52(s，1h)，7.32(d，j＝2.0hz，2h)，7.14(dd，j＝8.3，1.9hz，2h)，7.09(s，1h)，6.83(d，j＝8.1hz，2h)，6.77(s，1h)，6.73(s，1h)，6.17(s，2h)，6.05(s，1h)，4.93(t，j＝6.4hz，2h)，4.09(s，3h)，4.07(s，3h)，3.83(s，6h)，3.20(t，j＝6.3hz，2h)。
[0034]
x射线粉末衍射图谱以衍射角角表示在：6.85、7.92、8.86、9.10、12.24、13.76、14.11、14.51、17.20、18.13、18.57、19.44、21.14、23.25、23.66、24.69、25.55、26.30、27.04、27.43、29.08、30.15处有峰，误差
±
0.2
°
。
[0035]
实施例2、本发明共晶体i-1的药用片剂组合物制备
[0036]
配方：实施例1制备的共晶体i-1 1重量份，乳糖0.1-0.3重量份，淀粉0.4-0.2重量份，羧甲基淀粉钠0.008-0.014重量份，聚维酮k30适量，硬脂酸镁0.01-0.05重量份，40％乙醇0.5重量份；
[0037]
按照上述比例制备成片剂，即得本发明共晶体i-1药用片剂，每片含共晶体i-150-1500毫克。
[0038]
实施例3、本发明共晶体i-1的药用乳膏剂组合物制备
[0039]
配方：实施例1制备的共晶体i-1 1重量份，水包油型乳膏基质99重量份；
[0040]
按上述配比称取各原料，80摄氏度下将共晶体i-1与乳膏基质搅拌20分钟至均匀，乳膏剂中共晶体含量为1％。
[0041]
以下通过实验例进一步说明本发明的有益效果：
[0042]
实验例1、本发明共晶体i-1水溶解度测试
[0043]
分别取3份纯净水各1毫升，每一份在室温下分别加入适量的本发明实施例1制备的共晶体i-1、姜黄素，直至有明显固体颗粒不溶解于纯净水中。室温下放置10分钟，取上层清液测试并比较溶解度。溶解度记录如下表1：
[0044]
表1本发明共晶体i-1水溶解度
[0045]
化合物溶解度(g/100g)i-10.1姜黄素《0.01
[0046]
结果表明，本发明共晶体显著提高了水溶解度，其溶解度是姜黄素的10倍以上。
[0047]
实验例2、本发明共晶体i-1吸湿性测试
[0048]
取适量本发明共晶体i-1与适量市售二水盐酸小檗碱，放置在40℃/75％rh条件下，一周后检测两者所含水分的变化，结果记录如下表2：
[0049]
表2本发明共晶体吸湿性
[0050]
化合物水分(％)i-10.6二水盐酸小檗碱10
[0051]
实验结果表明，市售二水盐酸小檗碱在40℃/75％条件下放置一周水分增加10％，而本发明共晶体水分增加0.6％，本发明共晶体具有更高的稳定性。
[0052]
实验例3、本发明共晶体i-1对结肠癌ht29细胞增殖的抑制活性测试
[0053]
分别收集对数生长期的人结肠癌细胞ht-29，计数，用完全培养基重新悬浮细胞，调整细胞浓度20个/μl，得人结肠癌细胞悬浮液，接种96孔板，每孔加100μl细胞悬液。细胞在37℃，100％相对湿度，5％co2培养箱中孵育24小时后，用培养基将待测化合物稀释至所设置的相应作用浓度，按25μl/孔加入细胞中。化合物作用终浓度从0nm至400nm，4倍梯度稀释，共10个浓度点。加入待化合物后，细胞置于37℃，100％相对湿度，5％co2培养箱中孵育72小时。吸弃培养基，然后每孔加入100μl的含10％cck-8的新鲜培养基，置于37℃培养箱中孵育2-4小时，轻轻震荡后在spectramaxm5 microplate reader上测定450nm波长处的吸光度，以650nm处吸光度作为参比，待测化合物对人结肠癌细胞ht-29的抑制活性ic
50
，结果见表3：
[0054]
表3本发明共晶体i-1对人结肠癌细胞ht-29的抑制活性
[0055][0056]
注：盐酸小檗碱与姜黄素联用组中盐酸小檗碱与姜黄素等摩尔比混合，即1摩尔盐酸小檗碱与1摩尔姜黄素混合，视作1摩尔的混合物。
[0057]
实验结果表明，本发明共晶体i-1对人结肠癌细胞ht-29的抑制作用显著于盐酸小檗碱和姜黄素，以及他们的组合物，说明本发明化合物对结肠癌细胞具有良好的抑制效果，可以用于防治结肠癌。
[0058]
实验例4、本发明共晶体i-1对小鼠咪喹莫特银屑病模型治疗效果
[0059]
5-6周的balb/c雌性小鼠，适应性喂养一周后，随机将balb/c小鼠随机分为6组，分别为空白组、模型组、共晶体i-1组(实施例1制备的共晶体)、水包油型乳膏基质组、阳性对照地奈德组、姜黄素组；空白组只对皮肤剃毛处理，其余各组每日上午给予62.5mg的5％咪喹莫特，除此之外，模型组不做其他处理，共晶体i-1组每日下午给予50mg的1％共晶体i-1乳膏，基质组给予50mg的水包油型乳膏基质，地奈德组给予60mg的0.05％地奈德乳膏，姜黄素组给予50mg的0.5％姜黄素乳膏，共给药7天。评价7天内小鼠的体重、皮损、鳞屑、增厚程度，结果如图1-图4所述。
[0060]
实验结果表明，与乳膏基质、地奈德组和姜黄素组相比，本发明共晶体i-1对小鼠
咪喹莫特银屑病模型有更好的治疗作用，其中总体皮损评分、鳞屑评分和皮肤增厚评分中，本发明共晶体评分明显低于乳膏基质、阳性化合物地奈德和姜黄素，由此可见，本发明共晶体在治疗银屑病方面效果显著。
[0061]
综上，本发明共晶体不但提高了水溶性和吸湿稳定性，且对人结肠癌细胞ht-29具有明显的抑制活性，同时对小鼠咪喹莫特银屑病模型具有明显的治疗作用，在结肠癌和银屑病治疗方面应用前景广阔。