一种稻谷的酚类测定方法与流程

1.本发明涉及酚类测定领域，尤其涉及稻谷的酚类测定方法。


背景技术：

2.酚类物质属于高毒物质，人体摄入一定量时，可出现急性中毒症状，长期饮用被酚类污染的水或食物，可引起头昏、出疹、瘙痒、贫血及各种神经系统症状，稻米在生长过程需要吸收水分，如水源被酚类物质污染，稻米中可能会含有酚类物质，因大米是人们日常饮食的主食之一，因而对稻米中的酚类物质检测是有必要的，现有的酚类物质检测大都采用溶液与和分光光度法进行测定，这种酚类测定方法的测定效果不理想，且存在检测效率较慢的问题，为此，我们提出一种稻谷的酚类测定方法。


技术实现要素：

3.本发明的目的是为了解决现有技术中存在的缺点，而提出的一种稻谷的酚类测定方法。
4.为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：
5.一种稻谷的酚类测定方法，包括以下步骤：
6.步骤一，将田间取回的样品稻谷，置室外晒干，室内脱粒，脱壳后放置冷冻柜保存备用；
7.步骤二，取出七水合硫酸亚铁和酒石酸钾钠用水定容至容量瓶中，制成酒石酸亚铁溶液，现配现用；
8.步骤三，取0.1ml-0.5ml的没食子酸标准液到10ml的容量瓶中，再加入5ml-10ml的酒石酸亚铁溶液，用ph＝7.5的磷酸盐缓冲液定容，摇匀；
9.步骤四，将样本稻谷充分研磨至粉末状，称取0.3g-0.6g样本粉末，加入12ml-36ml的超纯水，摇匀，并进行浸提；
10.步骤五，待冷却后，进行过滤，充分洗涤，定容至25ml-50ml，静置1min；
11.步骤六，取出1ml-5ml样本待测溶液，加入5ml-10ml酒石酸亚铁溶液，加磷酸盐缓冲液定容至10ml，摇匀，静置10min；
12.步骤七，显色后通过uv-752型紫外分光光度计540nm下用石英比色皿，用清水做参比，测定其吸光度。
13.优选的，所述步骤一中稻谷晾晒时间控制在7天-14天，并通过脱壳机进行脱壳，脱壳后在冷冻柜中保存，冷冻温度控制在-4℃-6℃之间。
14.优选的，所述步骤一中的稻谷包括红米、黑米、糯米、紫米、白米，且均为水稻试验田中产出。
15.优选的，所述步骤二中的磷酸盐缓冲液包括磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸钠、焦磷酸钠中的任意一种或多种混合，所述磷酸盐缓冲液按质量百分比计，提供一种配方，磷酸二氢钠35％-50％，磷酸氢二钠50％-65％。
16.优选的，所述步骤二中的酒石酸亚铁溶液包含，七水合硫酸亚铁50mg-100mg，酒石酸钾钠400mg-500mg，以及余量的水，总容量为100ml。
17.优选的，所述步骤三中没食子酸标准液采用索莱宝solarbio公司生产的没食子酸标准品。
18.优选的，所述步骤四中的超纯水采用优普upt系列超纯水器制成。
19.优选的，步骤四中的浸提采用水浴的方式，水浴温度控制在50℃-70℃，浸提时间控制在1h-2h，并且为防止沉淀，需要每隔10min-20min摇晃一次。
20.优选的，所述步骤五中的过滤时间控制在2min-5min之间，过滤次数在5次-15次之间，过滤后摇晃30秒-1分钟，定容采用超纯水进行定容，定容后静置。
21.优选的，上述溶液的使用均采用滴管进行，所述步骤六的摇晃时间控制在35秒-1分钟之间。
22.与现有技术相比，本发明的有益效果是：可以更快捷的对稻谷中所含有的酚类物质进行检测，检测效率更高，且由于检测方法简单，所需要的检测设备较少，检测成本更低，解决了现有的部分酚类测定方法的测定效果不理想，且存在检测效率较慢的问题。
附图说明
23.图1为本发明中没食子酸标准曲线图。
24.图2为本发明中吸光度标准曲线图。
25.图3为本发明中实施例1的稻谷吸光度实验图。
26.图4为本发明中实施例2的稻谷吸光度实验图。
具体实施方式
27.为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
28.参考图1-图4所示，本发明提供如下技术方案：
29.实施例1
30.一种稻谷的酚类测定方法，包括以下步骤：
31.步骤一，将田间取回的样品稻谷，置室外晒干，室内脱粒，脱壳后放置冷冻柜保存备用，所述步骤一中稻谷晾晒时间控制在7天，并通过脱壳机进行脱壳，脱壳后在冷冻柜中保存，冷冻温度控制在-4℃，且所述步骤一中的稻谷包括红米、黑米、糯米、紫米、白米，且均为水稻试验田中产出；
32.步骤二，取出七水合硫酸亚铁和酒石酸钾钠用水定容至容量瓶中，制成酒石酸亚铁溶液，现配现用，所述步骤二中的磷酸盐缓冲液包括磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸钠、焦磷酸钠中的任意一种或多种混合，所述磷酸盐缓冲液按质量百分比计，提供一种配方，磷酸二氢钠35％，磷酸氢二钠65％；所述步骤二中的酒石酸亚铁溶液包含，七水合硫酸亚铁50mg，酒石酸钾钠400mg，以及余量的水，总容量为100ml；
33.步骤三，取0.1ml-的没食子酸标准液到10ml的容量瓶中，再加入5ml的酒石酸亚铁溶液，用ph＝7.5的磷酸盐缓冲液定容，摇匀，所述步骤三中没食子酸标准液采用索莱宝
solarbio公司生产的没食子酸标准品；
34.步骤四，将样本稻谷充分研磨至粉末状，称取0.3g样本粉末，加入12ml的超纯水，摇匀，并进行浸提，所述步骤四中的超纯水采用优普upt系列超纯水器制成，所述步骤四中的浸提采用水浴的方式，水浴温度控制在50℃，浸提时间控制在1h，并且为防止沉淀，需要每隔10min摇晃一次；
35.步骤五，待冷却后，进行过滤，充分洗涤，定容至25ml，静置1min，所述步骤五中的过滤时间控制在2min，过滤次数在5次，过滤后摇晃30秒，定容采用超纯水进行定容，定容后静置；
36.步骤六，取出1ml样本待测溶液，加入5ml酒石酸亚铁溶液，加磷酸盐缓冲液定容至10ml，摇匀，静置10min，步骤六的摇晃时间控制在35秒；
37.步骤七，显色后通过uv-752型紫外分光光度计540nm下用石英比色皿，用清水做参比，测定其吸光度，具体数值参照图3。
38.实施例2
39.一种稻谷的酚类测定方法，包括以下步骤：
40.步骤一，将田间取回的样品稻谷，置室外晒干，室内脱粒，脱壳后放置冷冻柜保存备用，所述步骤一中稻谷晾晒时间控制在14天，并通过脱壳机进行脱壳，脱壳后在冷冻柜中保存，冷冻温度控制在6℃之间，所述步骤一中的稻谷包括红米、黑米、糯米、紫米、白米，且均为水稻试验田中产出；
41.步骤二，取出七水合硫酸亚铁和酒石酸钾钠用水定容至容量瓶中，制成酒石酸亚铁溶液，现配现用，所述步骤二中的磷酸盐缓冲液包括磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸钠、焦磷酸钠中的任意一种或多种混合，所述磷酸盐缓冲液按质量百分比计，提供一种配方，磷酸钠50％，焦磷酸钠50％，所述步骤二中的酒石酸亚铁溶液包含，七水合硫酸亚铁100mg，酒石酸钾钠500mg，以及余量的水，总容量为100ml；
42.步骤三，取0.5ml的没食子酸标准液到10ml的容量瓶中，再加入10ml的酒石酸亚铁溶液，用ph＝7.5的磷酸盐缓冲液定容，摇匀，所述步骤三中没食子酸标准液采用索莱宝solarbio公司生产的没食子酸标准品；
43.步骤四，将样本稻谷充分研磨至粉末状，称取0.6g样本粉末，加入36ml的超纯水，摇匀，并进行浸提，所述步骤四中的超纯水采用优普upt系列超纯水器制成，所述步骤四中的浸提采用水浴的方式，水浴温度控制在70℃，浸提时间控制在2h，并且为防止沉淀，需要每隔20min摇晃一次；
44.步骤五，待冷却后，进行过滤，充分洗涤，定容至50ml，静置1min，所述步骤五中的过滤时间控制在5min，过滤次数在15次，过滤后摇晃1分钟，定容采用超纯水进行定容，定容后静置；
45.步骤六，取出5ml样本待测溶液，加入10ml酒石酸亚铁溶液，加磷酸盐缓冲液定容至10ml，摇匀，静置10min，所述步骤六的摇晃时间控制在1分钟；
46.步骤七，显色后通过uv-752型紫外分光光度计540nm下用石英比色皿，用清水做参比，测定其吸光度，具体数值参照图4。
47.实施例3
48.稻谷的酚类测定方法，包括以下步骤：
49.步骤一，将田间取回的样品稻谷，置室外晒干，室内脱粒，脱壳后放置冷冻柜保存备用，所述步骤一中稻谷晾晒时间控制在7天-14天，并通过脱壳机进行脱壳，脱壳后在冷冻柜中保存，冷冻温度控制在-4℃-6℃之间，所述步骤一中的稻谷包括红米、黑米、糯米、紫米、白米，且均为水稻试验田中产出；
50.步骤二，取出七水合硫酸亚铁和酒石酸钾钠用水定容至容量瓶中，制成酒石酸亚铁溶液，现配现用，所述步骤二中的磷酸盐缓冲液包括磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸钠、焦磷酸钠中的任意一种或多种混合，所述磷酸盐缓冲液按质量百分比计，提供一种配方，磷酸二氢钠35％，磷酸钠65％，所述步骤二中的酒石酸亚铁溶液包含，七水合硫酸亚铁70mg，酒石酸钾钠450mg，以及余量的水，总容量为100ml；
51.步骤三，取0.4ml的没食子酸标准液到10ml的容量瓶中，再加入7ml的酒石酸亚铁溶液，用ph＝7.5的磷酸盐缓冲液定容，摇匀，所述步骤三中没食子酸标准液采用索莱宝solarbio公司生产的没食子酸标准品；
52.步骤四，将样本稻谷充分研磨至粉末状，称取0.5g样本粉末，加入30ml的超纯水，摇匀，并进行浸提，所述步骤四中的超纯水采用优普upt系列超纯水器制成，所述步骤四中的浸提采用水浴的方式，水浴温度控制在60℃，浸提时间控制在1.5h，并且为防止沉淀，需要每隔15min摇晃一次；
53.步骤五，待冷却后，进行过滤，充分洗涤，定容至35ml，静置1min，所述步骤五中的过滤时间控制在3min，过滤次数在10次，过滤后摇晃45秒，定容采用超纯水进行定容，定容后静置；
54.步骤六，取出4ml样本待测溶液，加入6ml酒石酸亚铁溶液，加磷酸盐缓冲液定容至10ml，摇匀，静置10min，所述步骤六的摇晃时间控制在45秒；
55.步骤七，显色后通过uv-752型紫外分光光度计540nm下用石英比色皿，用清水做参比，测定其吸光度。
56.单项实验：
57.控制质量及水浴浸提时间相同的条件下，开展不同的温度条件下的单因素试验，通过其吸光度值的波动大小，在60℃的条件下，溶液相对稳定，对实验结果的误差较小，但通过平均值比较分析，在60℃的条件下，并非为最佳的实验条件，由下表可看出，在70℃与50℃有两个峰值，所以选择在60℃的条件下水浴浸提样品，所测定的酚类含量较低。因此在同一水平下，所测定的酚类含量的高低水平的一个区间反映，不能最大程度地反映测定样品的最高含量测定值，表格如下：
[0058][0059]
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。