具有吡咯并嘧啶骨架的新型碳酸酯化合物或其药学上可接受的盐的制作方法

1.本发明涉及具有优异的抗肿瘤效果的具有吡咯并嘧啶骨架的新型碳酸酯化合物或其药学上可接受的盐。另外，本发明涉及将具有吡咯并嘧啶骨架的新型碳酸酯体或其药学上可接受的盐与烷基化剂和/或放射线疗法联合使用的方法。


背景技术：

2.以细胞的增殖异常为特征的肿瘤是现在仍期待有效治疗方法的难治愈性疾病。肿瘤的细胞增殖中也需要核酸的生物合成，参与其生物合成的分子的模拟化合物已作为干扰肿瘤的核酸代谢的核酸代谢拮抗剂被深入开发。
3.然而，即使发现具有高效力的核酸代谢拮抗作用的化合物，由于其大多在毒性或药物动力学的观点方面存在问题，这样的化合物无法成为临床上有用的药剂。为了克服这些问题而最大限度发挥其本来的效力，这样的化合物有时被转换成前体药物。由此，只要化合物具有抗肿瘤效果，就能够期待改善该化合物的药物动力并提高对癌组织的作用选择性。然而，即使存在这样的期待，将具有高效力的核酸代谢拮抗作用的化合物转换成前体药物，制成临床上有用的药剂也并不容易。
4.为了解决上述问题，有人尝试了在众多核酸衍生物的游离的羟基、氨基等中导入碳酸酯或酯来转换成前体药物。例如，卡培他滨是在5-氟尿嘧啶(5-fu)的4位的氨基中导入了正戊基氧基羰基而得到的前体药物(非专利文献1)。另外，已知在核酸的2’位的羟基导入了羰基的化合物(数据库名：registry，cas no.145388-61-0)或在3’位的羟基导入了羰基的化合物(专利文献1的化合物28)。然而，具有吡咯并嘧啶骨架的核苷的碳酸酯化合物尚未被知晓。
5.另一方面，作为具有吡咯并嘧啶骨架的核酸衍生物，已经报告有具有4-氨基-5-卤代-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶骨架的脱氧核苷衍生物(非专利文献3、4、5、6)。其中，已报告有在5位具有碘的脱氧核苷衍生物(非专利文献3、专利文献2的化合物13)。然而，并没有提示与这些核苷衍生物对应的碳酸酯体的记载。
[0006]
作为提示与核苷衍生物对应的碳酸酯体的化合物，还报告了在3’位具有碳酸酯或硫代碳酸酯的脱氧核苷衍生物(非专利文献7的化合物7、专利文献1的化合物28)。然而，这些文献中并没有关于在吡咯并[2,3-d]嘧啶骨架的5位具有卤素的脱氧核苷衍生物化合物的记载，也没有提示对应的核苷衍生物的前体药物的记载。
[0007]
现有技术文献
[0008]
专利文献
[0009]
专利文献1：wo 2004/041203
[0010]
专利文献2：wo 2013/009735
[0011]
非专利文献
[0012]
非专利文献1：drug metab dispos.2002nov；30(11):1221-1229非专利文献2：
j.org.chem.1999,64(22),8319-8322
[0013]
非专利文献3：acta cryst.2014,e70,o120
[0014]
非专利文献4：chemmedchem,2013,8,832-846
[0015]
非专利文献5：bioorg.med.chem,20,2012,5202-5214
[0016]
非专利文献6：j med chem 2016；59(14):6860-6877
[0017]
非专利文献7：synthesis 1992,(5),477-481


技术实现要素：

[0018]
发明所要解决的课题
[0019]
本发明提供一种具有吡咯并嘧啶骨架的、具有比现有化合物更优异的安全性、并且显示高抗肿瘤效果的具有吡咯并嘧啶骨架的化合物。另外，本发明还提供将具有该嘧啶骨架的化合物与烷基化剂和/或放射线疗法联合使用的疗法。
[0020]
用于解决课题的技术方案
[0021]
本发明的发明人发现了通式(1)所表示的具有吡咯并[2,3-d]嘧啶骨架的脱氧核苷衍生物。这些化合物是在5位具有特定的卤素、在3’位具有碳酸酯的化合物。
[0022]
即，本发明的一个实施方式包括下述内容。
[0023]
[1]一种化合物或其药学上可接受的盐，其中，
[0024]
一种下述通式(1)所表示的化合物或其药学上可接受的盐。
[0025][0026]
[式中，
[0027]
x表示氯原子、溴原子或碘原子，
[0028]
y表示氧原子或硫原子，
[0029]
z表示氧原子或硫原子，
[0030]
r表示可以具有取代基的直链状的c1－c6烷基、可以具有取代基的c2－c6烯基、可以具有取代基的c2－c6炔基、可以具有取代基的c3－c10环烷基、可以具有取代基的c4－c10环烯基、可以具有取代基的c6－c10的芳香族烃基、可以具有取代基的4～10元的饱和杂环基或可以具有取代基的5～10元的不饱和杂环基。]
[0031]
[2]如上述[1]所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，r表示：
[0032]
直链状的c1－c6烷基，其分别可以具有1～3个c1－c6烷基、c1－c6烯基、c1－c6炔基、c1－c4烷氧基、c1－c4卤代烷基、羟基、卤原子或芳香族烃基作为取代基；
[0033]
c3－c10环烷基，其分别可以具有1～3个c1－c6烷基、c1－c6烯基、c1－c6炔基、c1－c4烷氧基、羟基、卤原子或芳香族烃基的作为取代基；
[0034]
c4－c10环烯基，其分别可以具有1～3个c1－c6烷基、c1－c6烯基、c1－c6炔基、c1－c4烷氧基、羟基、卤原子或芳香族烃基作为取代基；或者
[0035]
4～10元的饱和杂环基，其分别可以具有1～3个c1－c6烷基、c1－c6烯基、c1－c6炔基、c1－c4烷氧基、羟基、卤原子或芳香族烃基作为取代基；或者
[0036]
5～10元的不饱和杂环基，其分别可以具有1～3个c1－c6烷基，c1－c6烯基，c1－c6炔基，c1－c4烷氧基，羟基或卤原子或芳香族烃基作为取代基。
[0037]
[3]如[2]所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，r表示：
[0038]
直链状的c1－c6烷基，其分别可以具有1～3个c1－c6烷基、c1－c4烷氧基、c1－c4卤代烷基、卤原子或苯基作为取代基；
[0039]
c3－c10环烷基，其分别可以具有1～3个c1－c6烷基、c1－c4烷氧基、卤原子或苯基作为取代基；
[0040]
c4－c10环烯基，其分别可以具有1～3个c1－c6烷基、c1－c4烷氧基、卤原子或苯基作为取代基；或者
[0041]
4～10元的饱和杂环基，其分别可以具有1～3个c1－c6烷基、c1－c4烷氧基、卤原子或苯基作为取代基。
[0042]
[4]如上述[1]所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，x为溴原子、碘原子。
[0043]
[5]如上述[4]所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，x表示碘原子。
[0044]
[6]如上述[5]所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，y表示氧原子。
[0045]
[7]如上述[6]所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，r表示：
[0046]
直链状的c1－c3烷基，其分别可以具有1～3个c1－c2烷基、c1－c2烷氧基、c1－c2卤代烷基、氟原子或氯原子作为取代基；
[0047]
c3－c7环烷基，其分别可以具有1～2个c1－c2烷基或c1－c2烷氧基、氟原子或氯原子作为取代基；
[0048]
c4－c6环烯基，其分别可以具有1～2个c1－c2烷基或c1－c2烷氧基、氟原子或氯原子作为取代基；或者
[0049]
4～6元的饱和杂环基，其分别可以具有1～3个c1－c2烷基、c1－c2烷氧基、氟原子或氯原子作为取代基。
[0050]
[8]如上述[1]～[7]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，该化合物选自以下的化合物：
[0051]
o-((2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基)s-环戊基硫代碳酸酯；
[0052]
o-((2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基)s-异丙基硫代碳酸酯；
[0053]
o-((2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基)s-乙基硫代碳酸酯；
[0054]
(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基戊烷-3-基碳酸酯；
[0055]
(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基环戊基碳酸酯；
[0056]
(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基异丙基碳酸酯；
[0057]
(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基环戊-3-烯-1-基碳酸酯；
[0058]
(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基(二环[2.2.1]庚烷-2-基)碳酸酯。
[0059]
[9]如上述[1]～[8]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，该化合物选自以下的化合物：
[0060]
(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基环戊基碳酸酯；
[0061]
(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基异丙基碳酸酯。
[0062]
[10]一种抗肿瘤剂，其中，以上述[1]～[9]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐作为有效成分。
[0063]
[11]一种医药组合物，其中，含有上述[1]～[9]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、以及药学上可接受的载体。
[0064]
[12]如上述[10]所述的抗肿瘤剂或[11]所述的医药组合物，其中，其为制剂化成口服剂或注射剂的抗肿瘤剂或医药组合物。
[0065]
[13]一种肿瘤的预防和/或治疗方法，其中，包括将上述[1]～[9]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐向需要其的对象给药的步骤。
[0066]
[14]一种肿瘤的预防和/或治疗方法，其中，包括将制剂化成口服剂或注射剂的上述[1]～[9]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐向需要其的对象给药的步骤。
[0067]
[15]如上述[1]～[9]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，其用于作为医药组合物使用。
[0068]
[16]如上述[1]～[9]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，其用于在肿瘤的预防和/或治疗中使用。
[0069]
[17]如上述[1]～[9]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，其制剂化成口服剂或注射剂，并用于在肿瘤的预防和/或治疗中使用。
[0070]
[18]上述[1]～[9]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在抗肿瘤剂的制造中的应用。
[0071]
[19]上述[1]～[9]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在医药组合物的制造中的应用。
[0072]
[20]上述[1]～[9]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在制剂化成口服剂或注射剂的抗肿瘤剂的制造中的应用。
[0073]
[21]如上述[10]所述的抗肿瘤剂、上述[13]～[14]所述的方法、上述[15]～[17]所述的化合物或其药学上可接受的盐或上述[18]～[20]中任一项所述的应用，其中，
[0074]
上述肿瘤选自头颈部癌(口腔癌、咽癌、喉癌、鼻腔癌、鼻窦癌、唾液腺癌、甲状腺癌
等)、消化器官癌(食管癌、胃癌、十二指肠癌、肝癌、胆道癌(胆嚢-胆管癌等)、胰腺癌、大肠癌(结肠癌、直肠癌等)等)、肺癌(非小细胞肺癌、小细胞肺癌、间皮瘤等)、乳腺癌、生殖器官癌(卵巣癌、子宫癌(宫颈癌、子宫体癌等)等)、泌尿器官癌(肾癌、膀胱癌、前列腺癌、睾丸肿瘤等)、造血器官肿瘤(白血病、恶性淋巴瘤、多发性骨髄肿等)、骨-软组织肿瘤、皮肤癌和脑肿瘤。
[0075]
[22]如上述[21]所述的抗肿瘤剂、方法、应用、化合物或其药学上可接受的盐，其中，上述肿瘤为脑肿瘤。
[0076]
[23]下述通式(2)所表示的化合物或其药学上可接受的盐，
[0077][0078]
[式中，x表示氯原子，溴原子或碘原子。]。
[0079]
[24]一种抗肿瘤剂或医药组合物，其中，含有上述[23]所述的化合物或其药学上可接受的盐、以及药学上可接受的载体作为有效成分。
[0080]
[25]如上述[24]所述的抗肿瘤剂或医药组合物，其中，其为制剂化成口服剂或注射剂的抗肿瘤剂或医药组合物。
[0081]
[26]一种肿瘤的预防和/或治疗方法，其中，包括将上述[23]所述的化合物或其药学上可接受的盐给药的步骤。
[0082]
[27]如上述[23]所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，其用于预防和/或治疗肿瘤。
[0083]
[28]上述[23]所述的化合物或其药学上可接受的盐在医药组合物或抗肿瘤剂的制造中的应用。
[0084]
[29]如上述[24]或[25]所述的抗肿瘤剂或医药组合物、上述[26]所述的肿瘤的预防和/或治疗方法、上述[27]所述的化合物或其药学上可接受的盐、或者上述[28]所述的盐的应用，其中，
[0085]
上述肿瘤选自头颈部癌(口腔癌、咽癌、喉癌、鼻腔癌、鼻窦癌、唾液腺癌、甲状腺癌等)、消化器官癌(食管癌、胃癌、十二指肠癌、肝癌、胆道癌(胆嚢-胆管癌等)、胰腺癌、大肠癌(结肠癌、直肠癌等)等)、肺癌(非小细胞肺癌、小细胞肺癌、间皮瘤等)、乳腺癌、生殖器官癌(卵巣癌、子宫癌(宫颈癌、子宫体癌等)等)、泌尿器官癌(肾癌、膀胱癌、前列腺癌、睾丸肿瘤等)、造血器官肿瘤(白血病、恶性淋巴瘤、多发性骨髄肿等)、骨-软组织肿瘤、皮肤癌和脑肿瘤。
[0086]
[30]如上述[29]所述的抗肿瘤剂或医药组合物、肿瘤的预防和/或治疗方法、化合物或其药学上可接受的盐、或者应用，其中，上述肿瘤为脑肿瘤。
[0087]
[31]一种抗肿瘤剂或医药组合物，其中，含有上述[1]～[9]和[23]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，并且与烷基化剂联合使用。
[0088]
[32]一种抗肿瘤效果增强剂，其中，含有上述[1]～[9]和[23]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，并且用于增强烷基化剂的抗肿瘤效果。
[0089]
[33]一种抗肿瘤剂，其中，含有上述[1]～[9]和[23]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，并且用于治疗接受了烷基化剂给药的癌症患者。
[0090]
[34]一种肿瘤的预防和/或治疗方法，其特征在于，
[0091]
包括将上述[1]～[9]和[23]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐给药的步骤，并且与烷基化剂联合使用。
[0092]
[35]一种用于增强烷基化剂的抗肿瘤效果的方法，其中，包括将上述[1]～[9]和[23]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐向患者给药的步骤。
[0093]
[36]一种肿瘤的预防和/或治疗方法，其中，包括将含有上述[1]～[9]和[23]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐的抗肿瘤剂和烷基化剂进行给药的步骤。
[0094]
[37]上述[1]～[9]和[23]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在治疗肿瘤中的应用，其中，将烷基化剂联合使用而给药。
[0095]
[38]上述[1]～[9]和[23]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在增强烷基化剂的抗肿瘤效果中的应用，其中，将烷基化剂联合使用而给药。
[0096]
[39]上述[1]～[9]和[23]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在治疗肿瘤中的应用，其中，对接受了烷基化剂给药的癌症患者进行治疗。
[0097]
[40]上述[1]～[9]和[23]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在用于增强烷基化剂的抗肿瘤效果中的应用，其中，对接受了烷基化剂给药的癌症患者进行治疗。
[0098]
[41]上述[1]～[9]和[23]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在抗肿瘤剂的制造中的应用，其中，上述抗肿瘤剂与烷基化剂联合使用而给药。
[0099]
[42]上述[1]～[9]和[23]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在烷基化剂的抗肿瘤效果增强剂的制造中的应用，其中，上述抗肿瘤效果增强剂与烷基化剂联合使用而给药。
[0100]
[43]上述[1]～[9]和[23]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在抗肿瘤剂的制造中的应用，其中，上述抗肿瘤剂向接受了烷基化剂给药的癌症患者或向即将接受烷基化剂给药的癌症患者给药。
[0101]
[44]上述[1]～[9]和[23]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在烷基化剂的抗肿瘤效果增强剂的制造中的应用，其中，上述抗肿瘤效果增强剂向接受了烷基化剂给药的癌症患者或即将接受烷基化剂给药的癌症患者给药。
[0102]
[45]如上述[31]或[33]所述的抗肿瘤剂、上述[32]所述的抗肿瘤效果增强剂、上述[34]～[36]所述的方法、或者上述[37]～[44]所述的应用，其中，烷基化剂为替莫唑胺。
[0103]
[46]如上述[31]或[33]所述的抗肿瘤剂、上述[32]所述的抗肿瘤效果增强剂、上述[34]～[36]所述的方法、或者上述[37]～[44]所述的应用，其中，在烷基化剂之外，还联合使用放射线疗法。
[0104]
[47]一种抗肿瘤剂或医药组合物，其特征在于，其含有上述[1]～[9]和[23]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，且与放射线疗法联合使用。
[0105]
[48]一种抗肿瘤效果增强剂，其含有上述[1]～[9]和[23]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，且用于增强放射线疗法的抗肿瘤效果。
[0106]
[49]一种抗肿瘤剂，其含有上述[1]～[9]和[23]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，且用于治疗接受放射线疗法的癌症患者。
[0107]
[50]一种肿瘤的预防和/或治疗方法，其特征在于，其含有上述[1]～[9]和[23]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，且与放射线疗法联合使用。
[0108]
[51]一种用于增强放射线疗法的抗肿瘤效果的方法，其中，包括将上述[1]～[9]和[23]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐向患者给药的步骤。
[0109]
[52]一种肿瘤的预防和/或治疗方法，其中，包括将含有上述[1]～[9]和[23]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐的抗肿瘤剂向接受了放射线疗法的癌症患者给药的步骤。
[0110]
[53]上述[1]～[9]和[23]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在治疗肿瘤中的应用，其中，联合使用放射线疗法。
[0111]
[54]上述[1]～[9]和[23]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在增强抗肿瘤效果中的应用，其中，联合使用放射线疗法。
[0112]
[55]上述[1]～[9]和[23]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在治疗肿瘤中的应用，其中，治疗接受了放射线疗法的癌症患者。
[0113]
[56]上述[1]～[9]和[23]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在增强抗肿瘤效果中的应用，其中，治疗接受了放射线疗法的癌症患者。
[0114]
[57]上述[1]～[9]和[23]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在抗肿瘤剂的制造中的应用，其中，上述抗肿瘤剂与放射线疗法联合使用。
[0115]
[58]上述[1]～[9]和[23]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在抗肿瘤效果增强剂的制造中的应用，其中，上述抗肿瘤效果增强剂与放射线疗法联合使用。
[0116]
[59]上述[1]～[9]和[23]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在抗肿瘤剂的制造中的应用，其中，上述抗肿瘤剂对于接受了放射线疗法的癌症患者给药。
[0117]
[60]上述[1]～[9]和[23]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在抗肿瘤效果增强剂的制造中的应用，其中，上述抗肿瘤效果增强剂对于接受了放射线疗法的癌症患者给药。
[0118]
[61]如上述[47]或[49]所述的抗肿瘤剂、上述[48]所述的抗肿瘤效果增强剂、上述[50]～[52]所述的方法、或者上述[53]～[60]所述的应用，其中，在放射线疗法之外，与烷基化剂联合使用。
[0119]
[62]如上述[61]所述的抗肿瘤剂、抗肿瘤效果增强剂、方法或其应用，其中，烷基化剂为替莫唑胺。
[0120]
[63]一种组合物，其包含：含有上述[1]～[9]和[23]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐的医药组合物、和烷基化剂。
[0121]
[64]一种复方制剂，其包含：含有上述[1]～[9]和[23]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、和烷基化剂。
[0122]
[65]如上述[63]所述的组合物或上述[64]所述的复方制剂，其特征在于，与放射线疗法联合使用。
[0123]
[66]如上述[63]所述的组合物或上述[64]所述的复方制剂，其中，其被制剂化成口服剂或注射剂。
[0124]
发明效果
[0125]
本发明的具有吡咯并嘧啶骨架的核苷的新型碳酸酯化合物或其药学上可接受的盐具有优异的安全性，且作为显示高抗肿瘤效果的抗肿瘤剂是有用的。另外，本发明的新型碳酸酯化合物或其药学上可接受的盐在与烷基化剂和/或放射线疗法联合使用时表现出优异的联合使用效果。
附图说明
[0126]
图1示出了向移植了人脑肿瘤细胞株(u-87mg)的balb/ca jcl-nu/nu小鼠投予了比较例2和实施例1的化合物时的评价最终日的ir(纵轴)。
[0127]
图2示出了向移植了人脑肿瘤细胞株(u-87mg)的balb/ca jcl-nu/nu小鼠投予了比较例2和实施例1的化合物时的各评价日(横轴)中的bwc(纵轴)。
○
表示对照组(无处置)，
■
表示比较例2的化合物给药组，
▲
表示实施例1的化合物给药组。
[0128]
图3示出了向移植了人脑肿瘤细胞株(u-87mg)的balb/ca jcl-nu/nu小鼠投予了比较例2和实施例5的化合物时的给药第6日的效果指数。
[0129]
图4示出了向移植了人造血器官肿瘤细胞株(mv-4-11)的balb/ca jcl-nu/nu小鼠投予了比较例2的化合物时的各评价日(横轴)的rtv(纵轴)。
○
表示对照组(无处置)，
■
表示比较例2的化合物给药组。
[0130]
图5示出了向移植了人造血器官肿瘤细胞株(mv-4-11)的balb/ca jcl-nu/nu小鼠投予了比较例2的化合物时的各评价日(横轴)的bwc(纵轴)。
○
表示对照组(无处置)，
■
表示比较例2的化合物给药组。
[0131]
图6示出了向移植了人造血器官肿瘤细胞株(mv-4-11)的balb/ca jcl-nu/nu小鼠投予了实施例1的化合物时的各评价日(横轴)的rtv(纵轴)。
○
表示对照组(无处置)，
▲
表示实施例1的化合物给药组。
[0132]
图7示出了向移植了人造血器官肿瘤细胞株(mv-4-11)的balb/ca jcl-nu/nu小鼠投予了实施例1的化合物时的各评价日(横轴)的bwc(纵轴)。
○
表示对照组(无处置)，
▲
表示实施例1的化合物给药组。
[0133]
图8示出了向移植了人造血器官肿瘤细胞株(mv-4-11)的balb/ca jcl-nu/nu小鼠投予了实施例1的化合物或比较例2的化合物时，淋巴细胞(lymph)在评价最终日相对于对照组(无处置)的变动。
[0134]
图9示出了利用比较例2的化合物和放射线疗法以单剂或联合使用对人脑肿瘤细胞株(u-87mg)处理时的细胞生存率。
[0135]
图10示出了利用比较例2的化合物和替莫唑胺(tmz)以单剂或联合使用对人脑肿瘤细胞株(u-87mg)处理时的细胞生存率。
具体实施方式
[0136]
以下对于本发明进行详细说明，但没有意图将本发明的范围限定解释为以下说明的实施方式。
[0137]
＜术语的定义＞
[0138]
在本说明书中使用的术语在没有特别明示的情况下，具有在该技术领域常规使用的含意。
[0139]
在本说明书中的基团的记载中，作为“ca－cb”是指碳原子数为a～b的基团。例如，“c1－c6烷基”表示碳原子数1～6的烷基，“c6－c14芳香族烃氧基”表示结合有碳原子数6～14的芳香族烃基的氧基。另外“a～b元”表示构成环的原子数(环元数)为a～b。具体而言，“4～10元的饱和杂环基”是指环元数为4～10的饱和杂环基。
[0140]
在本说明书中，“取代基”在未明示为不是的情况下，可以列举例如氢原子、卤原子、羟基、羧基、烷基、烯基、炔基、烷氧基、环烷基、环烯基、环烷基－烷基、卤代烷基、烷氧基烷基、芳香族烃基、芳烷基、饱和杂环基、不饱和杂环基等，但不限于这些。存在上述取代基的情况下，在未明示为不是的情况下，其个数典型的为1个、2个或3个，优选为1个或2个。
[0141]
在本说明书中，作为“卤原子”，具体而言可以列举氯原子、溴原子、氟原子、碘原子，优选氯原子、氟原子、溴原子，较优选氯原子、氟原子。
[0142]
在本说明书中，作为“烷基”表示直链状或支链状的饱和烃基，可以列举例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、1-甲基丙基、异丁基、叔丁基、2,2-二甲基丙基、正戊基、异戊基、仲戊基、1-乙基丙基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、正己基、异己基、3-甲基戊基、2,3-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、3,3-二甲基丁基等c1－c6烷基，但不限于这些。在本发明的实施方式中，烷基优选甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、1-甲基丙基、异丁基、叔丁基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基，较优选甲基、乙基、正丙基、异丙基、1-乙基丙基。
[0143]
在本说明书中，作为“烯基”表示具有至少1个(例如，1～2个，优选1个)双键的直链状或支链状的不饱和烃基，可以列举例如乙烯基、烯丙基、1-丙烯基、2-甲基-2-丙烯基、异丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基或3-丁烯基、2-戊烯基、3-戊烯基或4-戊烯基、2-甲基-2-丁烯基、3-甲基-2-丁烯基、5-己烯基等c2－c6烯基，但不限于这些。在本发明的实施方式中，烯基优选乙烯基、烯丙基、1-丙烯基、2-甲基-2-丙烯基。
[0144]
在本说明书中，作为“炔基”表示具有至少1个(例如，1～2个，优选1个)三键的直链状或支链状的不饱和烃基，可以列举例如乙炔基、1-丙炔基或2-丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔基或3-丁炔基、1-甲基-2-丙炔基等c2－c6炔基，但不限于这些。在本发明的实施方式中，炔基优选乙炔基、2-丙炔基。
[0145]
在本说明书中，作为“烷氧基”表示具有上述烷基的氧基，可以列举例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、戊基氧基、异戊基氧基和己基氧基等c1－c6烷氧基，但不限于这些。在本发明的实施方式中，烷氧基优选甲氧基、乙氧基，较优选甲氧基。
[0146]
在本说明书中，“环烷基”是指单环式或多环式的饱和烃基，可以列举例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环癸基、[2.2.0]双环己基、[2.2.1]双环庚基、[3.1.1]双环庚基等c3－c10环烷基，但不限于这些。在本发明的实施方式中，环烷基优选环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、[2.2.1]双环庚基、[3.1.1]双环庚基，特别优选环丁基、环戊基。
[0147]
在本说明书中，“环烯基”是指具有至少1个(例如，1～2个，优选1个)碳碳双键的单
环式或多环式的不饱和烃基，可以列举例如环丁烯基、环戊烯基、环己烯基、环庚烯基、环癸烯基、1h,2h,3h-茚基等c4－c10环烯基，但不限于这些。在本发明的实施方式中，环烯基优选环丁烯基、环戊烯基、1h,2h,3h-茚基，特别优选环戊烯基。
[0148]
在本说明书中，“环烷基－烷基”是指具有至少1个上述环烷基的上述烷基，可以列举例如环丙基甲基、环丁基甲基、环戊基甲基、环己基甲基和环庚基甲基等c3－c10环烷基－c1－c4烷基，但不限于这些。
[0149]
在本说明书中，“卤代烷基”是指具有至少1个(优选1～10个，较优选1～3个)卤原子的上述烷基，可以列举例如氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、三氯甲基、1-氟乙基、2-氟乙基、1,1-二氟乙基、1,1,1-三氟乙基、2,2,2-三氯乙基、1-(氟甲基)-2-氟乙基、单氟正丙基、1,1,1-三氟正丙基、全氟正丙基、全氟异丙基等c1－c6卤代烷基，但不限于这些。在本发明的实施方式中，卤代烷基优选具有1～3个氯或氟的c1－c4烷基，具体而言为三氟甲基、1-氟乙基、1,1-二氟乙基、1,1,1-三氟乙基、2,2,2-三氯乙基、1-(氟甲基)-2-氟乙基，较优选2,2,2-三氯乙基、1-(氟甲基)-2-氟乙基。
[0150]
在本说明书中，“烷氧基烷基”是指具有至少1个上述烷氧基的上述烷基，可以列举例如甲氧基甲基、乙氧乙基、甲氧基乙基、甲氧基丙基等c1－c6烷氧基－c1－c6烷基，但不限于这些。在本发明的实施方式中，烷氧基烷基优选c1－c3烷氧基－c1－c4烷基，具体而言为甲氧基甲基、乙氧基甲基，较优选甲氧基甲基。
[0151]
在本说明书中，“芳香族烃基”表示具有不饱和键的由碳和氢构成的环状取代基，并且环状的π电子系中含有4e 2个(e为1以上的整数)的电子的单环式或多环式的芳香族烃基，可以列举例如苯基、萘基、四氢萘基、蒽基等，但不限于这些。在本发明的实施方式中，芳香族烃基优选苯基。
[0152]
在本说明书中，“芳烷基”表示取代有芳香族烃基的上述烷基，可以列举例如苄基、1-苯基乙基、苯基丙基、萘基甲基、萘基乙基等c7－c16芳烷基，但不限于这些。在本发明的实施方式中，芳烷基为c7－c10芳烷基，优选苄基、1-苯基乙基。
[0153]
在本说明书中，“饱和杂环基”表示具有至少1个(优选1～5个，较优选1～3个)选自氮原子、氧原子和硫原子中的杂原子的单环式或多环式的饱和的杂环基，可以列举例如氮丙啶基、氮杂环丁烷基、咪唑烷基、吗啉基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、四氢苯硫基、噻唑烷基、噁唑烷基等，但不限于这些。在本发明的实施方式中，饱和杂环基是含有至少1个氮原子或氧原子的4～10元的饱和杂环基，优选氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、四氢呋喃基，较优选氮杂环丁烷基、吡咯烷基、四氢呋喃基，最优选四氢呋喃基。
[0154]
在本说明书中，“不饱和杂环基”表示具有至少1个(优选1～5个，较优选1～3个)选自氮原子、氧原子和硫原子中的杂原子的单环式或多环式的完全不饱和或部分不饱和的杂环基，可以列举例如咪唑基、噻吩基、吡咯基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、噁二唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、吲哚基、异吲哚基、吲唑基、三唑并吡啶基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并噻吩基、呋喃基、苯并呋喃基、嘌呤基、喹啉基、异喹啉基、喹唑啉基、喹啉基、亚甲基二氧基苯基、亚乙基二氧基苯基、二氢苯并呋喃基等，但不限于这些。在本发明的实施方式中，不饱和杂环基为5～10元的不饱和杂环基，较优选咪唑基、吡唑基、噻唑基、异噁唑基、呋喃基，较优选咪唑基、吡唑基、噻唑基，最优选咪唑基。
[0155]
在本说明书中，“不饱和烃基”表示具有至少一个碳碳双键或三键的直链状或分支状的不饱和烃基，可以列举例如乙烯基、烯丙基、甲基乙烯基、1-丙烯基、丁烯基、戊烯基、己烯基、乙炔基、2-丙炔基等c2－c6不饱和烃基，但不限于这些。在本发明的实施方式中，不饱和烃基优选具有至少一个碳碳双键或三键的碳原子数2～4的直链状或分支状的烃基，较优选乙烯基、烯丙基、1-丙烯基。
[0156]
＜式(1)的化合物＞
[0157]
在本发明的一个实施方式中，提供下述式(1)所表示的化合物。
[0158][0159]
[式中，
[0160]
x表示氯原子、溴原子或碘原子，
[0161]
y表示氧原子或硫原子，
[0162]
z表示氧原子或硫原子，
[0163]
r表示可以具有取代基的直链状的c1－c6烷基、可以具有取代基的c2－c6烯基、可以具有取代基的c2－c6炔基、可以具有取代基的c3－c10环烷基、可以具有取代基的c4－c10环烯基、可以具有取代基的c6－c10的芳香族烃基、可以具有取代基的4～10元的饱和杂环基或可以具有取代基的5～10元的不饱和杂环基。]
[0164]
本发明的上述的化合物是以吡咯并[2,3-d]嘧啶作为基本骨架的化合物，是新型的化合物。
[0165]
在本发明的通式(i)所表示的化合物中，x表示氯原子、溴原子或碘原子。在本发明的一个实施方式中，x可以为溴原子。在本发明的另外的实施方式中，x可以为碘原子。在本发明的优选实施方式中，x可以为溴原子或碘原子，在更优选的实施方式中，x可以为碘原子。
[0166]
在本发明的一个实施方式中，提供下述式(1)所表示的化合物。
[0167][0168]
[式中，
[0169]
x表示溴原子或碘原子，
[0170]
y表示氧原子或硫原子，
[0171]
z表示氧原子或硫原子，
[0172]
r表示可以具有取代基的直链状的c1－c6烷基、可以具有取代基的c2－c6烯基、可以具有取代基的c2－c6炔基、可以具有取代基的c3－c10环烷基、可以具有取代基的c4－c10环烯基、可以具有取代基的c6－c10的芳香族烃基、可以具有取代基的4～10元的饱和杂环基或可以具有取代基的5～10元的不饱和杂环基。]
[0173]
本发明的上述的化合物是以吡咯并[2,3-d]嘧啶作为基本骨架的化合物，是新型的化合物。
[0174]
在本发明的通式(i)所表示的化合物中，y表示氧原子或硫原子。
[0175]
在本发明的一个实施方式中，y可以为氧原子。在本发明的另外的实施方式中，y可以为硫原子。在本发明的优选实施方式中，y可以为氧原子。
[0176]
在本发明的通式(i)所表示的化合物中，z表示氧原子或硫原子。
[0177]
在本发明的一个实施方式中，z可以为氧原子。在本发明的另外的实施方式中，z可以为硫原子。在本发明的优选实施方式中，z可以为氧原子。
[0178]
在本发明的通式(i)所表示的化合物中，r表示可以具有取代基的直链状的c1－c6烷基、可以具有取代基的c2－c6烯基、可以具有取代基的c2－c6炔基、可以具有取代基的c3－c10环烷基、可以具有取代基的c4－c10环烯基、可以具有取代基的c6－c10的芳香族烃基、可以具有取代基的4～10元的饱和杂环基或可以具有取代基的5～10元的不饱和杂环基。
[0179]
作为以r所示的“直链状的c1－c6烷基”，可以列举上述那样的c1－c6烷基，例如甲基、乙基、正丙基、正丁基、正戊基、正己基等，优选甲基、乙基、正丙基、正丁基，较优选甲基、乙基、正丙基。
[0180]
作为以r所示的“可以具有取代基的直链状的c1－c6烷基”中的“取代基”，可以列举上述那样的取代基，但优选c1－c6烷基、c1－c4烷氧基、c1－c4卤代烷基、卤原子或芳香族烃基，较优选c1－c3烷基、c1－c3烷氧基、氟原子、氯原子或苯基，较优选甲基、乙基、甲氧基、氯、氟化烷基、苯基，更加优选甲基、乙基。
[0181]
作为以r所示的“可以具有取代基的直链状的c1－c6烷基”，优选分别可以具有1～3个c1－c6烷基、c1－c4烷氧基、c1－c4卤代烷基、卤原子或芳香族烃基作为取代基的直链状的c1－c6烷基，
[0182]
较优选分别可以具有1～3个c1－c6烷基、c1－c4烷氧基、c1－c4卤代烷基、卤原子或苯基作为取代基的直链状的c1－c6烷基，
[0183]
更加优选分别可以具有1～3个c1－c3烷基、c1－c3烷氧基、c1－c3卤代烷基、氟原子、氯原子或苯基作为取代基的直链状的c1－c4烷基，
[0184]
更加优选分别可以具有1～3个c1－c2烷基、c1－c2烷氧基、c1－c2卤代烷基、氟原子或氯原子作为取代基的直链状的c1－c3烷基，
[0185]
进一步优选甲基、乙基、正丙基、异丙基、1-乙基-丙基、1-(氟甲基)-2-氟乙基、2-甲氧基-1-甲基乙基、叔丁基、2,2-二甲基丙基、苄基、1-苯基乙基、1-甲基苄基、2,2,2-三氯乙基、三氯甲基，
[0186]
最优选乙基、异丙基、1-乙基丙基。
[0187]
作为以r所示的“c2－c6烯基”，可以列举上述那样的c2－c6烯基，优选1-丙烯基、2-丙烯基。
[0188]
作为以r所示的“可以具有取代基的c2－c6烯基”中的“取代基”，能够例示上述那样的取代基，优选c1－c4烷基，较优选甲基。
[0189]
作为以r所示的“可以具有取代基的c2－c6烯基”，优选1-甲基-2-丙烯基。
[0190]
作为以r所示的“c2－c6炔基”，可以列举上述那样的c2－c6炔基，优选2-丙炔基。
[0191]
作为以r所示的“可以具有取代基的c2－c6炔基”中的“取代基”，能够例示上述那样的取代基，优选甲基。
[0192]
作为以r所示的“可以具有取代基的c2－c6炔基”，优选1-甲基-2-丙炔基。
[0193]
作为以r所示的“c3－c10环烷基”，可以列举上述那样的c3－c10环烷基，优选c3－c8环烷基，较优选环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、[2.2.1]双环庚基、[3.1.1]双环庚基，较优选环戊基。
[0194]
作为以r所示的“可以具有取代基的c3－c10环烷基”，优选c3－c8环烷基，较优选环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、[2.2.1]双环庚基、[3.1.1]双环庚基，较优选环戊基。
[0195]
作为以r所示的“c4－c10环烯基”，可以列举上述那样的c4－c10环烯基，优选1h,2h,3h-茚基、环戊烯基，较优选环戊烯基。
[0196]
作为以r所示的“可以具有取代基的c4－c10环烯基”，优选环戊烯基、1h,2h,3h-茚基，较优选环戊烯基。
[0197]
作为以r所示的“c6－c10的芳香族烃基”，可以列举上述那样的c6－c10的芳香族烃基，优选苯基、萘基，较优选苯基。
[0198]
以r所示的“可以具有取代基的c6－c10的芳香族烃基”优选苯基。
[0199]
以r所示的“4～10元的饱和杂环基”可以列举上述那样的4～10元的饱和杂环基，优选4～8元的饱和杂环基，较优选4～6元的饱和杂环基，较优选具有至少1个氧原子的4～6元的饱和杂环基，最优选四氢呋喃基。
[0200]
以r所示的“可以具有取代基的4～10元的饱和杂环基”优选4～8元的饱和杂环基，
较优选4～6元的饱和杂环基，较优选具有至少1个氧原子的4～6元的饱和杂环基，最优选四氢呋喃基。
[0201]
以r所示的“5～10元的不饱和杂环基”可以列举上述那样的5～10元的不饱和杂环基，优选咪唑基、吡唑基、噻唑基，较优选咪唑基。
[0202]
以r所示的“可以具有取代基的5～10元的不饱和杂环基”是指咪唑基、吡唑基、噻唑基，较优选咪唑基。
[0203]
在本发明的通式(i)所表示的化合物中，r优选表示：
[0204]
直链状的c1－c6烷基，其分别可以具有1～3个c1－c6烷基、c1－c4烷氧基、c1－c4卤代烷基、卤原子或芳香族烃基作为取代基；
[0205]
c3－c10环烷基，其分别可以具有1～3个c1－c6烷基、c1－c4烷氧基、卤原子或芳香族烃基的作为取代基；
[0206]
c4－c10环烯基，其分别可以具有1～3个c1－c6烷基、c1－c4烷氧基、卤原子或芳香族烃基的作为取代基；
[0207]
4～10元的饱和杂环基，其分别可以具有1～3个c1－c6烷基、c1－c4烷氧基、卤原子或芳香族烃基的作为取代基；或者
[0208]
5～10元的不饱和杂环基，其分别可以具有1～3个c1－c6烷基、c1－c6烯基、c1－c6炔基、c1－c4烷氧基、羟基或卤原子或芳香族烃基作为取代基。
[0209]
在本发明的通式(i)所表示的化合物中，r较优选表示：
[0210]
直链状的c1－c6烷基，其分别可以具有1～3个c1－c6烷基、c1－c4烷氧基、c1－c4卤代烷基、卤原子或苯基作为取代基；
[0211]
c3－c10环烷基，其分别可以具有1～3个c1－c6烷基、c1－c4烷氧基、卤原子或苯基的作为取代基；
[0212]
c4－c10环烯基，其分别可以具有1～3个c1－c6烷基、c1－c4烷氧基、卤原子或苯基的作为取代基；或者
[0213]
4～10元的饱和杂环基，其分别可以具有1～3个c1－c6烷基、c1－c4烷氧基、卤原子或苯基的作为取代基。
[0214]
在本发明的通式(i)所表示的化合物中，r较优选表示：
[0215]
直链状的c1－c4烷基，其分别可以具有1～3个c1－c3烷基、c1－c3烷氧基、c1－c3卤代烷基、氟原子、氯原子或苯基作为取代基；
[0216]
c3－c8环烷基，其分别可以具有1～2个c1－c3烷基、c1－c3烷氧基或卤原子作为取代基；
[0217]
c4－c8环烯基，其分别可以具有1～2个c1－c3烷基、c1－c3烷氧基或卤原子作为取代基；或
[0218]
4～8元的饱和杂环基，其分别可以具有1～3个c1－c3烷基、c1－c3烷氧基或卤原子作为取代基。
[0219]
在本发明的通式(i)所表示的化合物中，r更加优选表示：
[0220]
直链状的c1－c3烷基，其分别可以具有1～3个c1－c2烷基、c1－c2烷氧基、c1－c2卤代烷基、氟原子或氯原子作为取代基；
[0221]
c3－c7环烷基，其分别可以具有1～2个c1－c2烷基或c1－c2烷氧基、氟原子或氯
原子作为取代基；
[0222]
c4－c6环烯基，其分别可以具有1～2个c1－c2烷基或c1－c2烷氧基、氟原子或氯原子作为取代基；或
[0223]
4～6元的饱和杂环基，其分别可以具有1～3个c1－c2烷基、c1－c2烷氧基、氟原子或氯原子作为取代基。
[0224]
在本发明的通式(i)所表示的化合物中，r更加优选表示甲基、乙基、正丙基、异丙基、1-乙基丙基、2-乙基丙基、2,2-二甲基丙基、1-(氟甲基)-2-氟乙基、2-甲氧基-1-甲基乙基、叔丁基、2,2,2-三氯甲基、苄基、1-苯基乙基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、[2.2.1]双环庚基、[3.1.1]双环庚基、环戊烯基、环戊基、1h,2h,3h-茚基、四氢呋喃基。
[0225]
在本发明的通式(i)所表示的化合物中，r最优选表示乙基，异丙基，1-乙基丙基，环戊基，[2.2.1]双环庚基，[3.1.1]双环庚基，环戊烯基。
[0226]
在本发明的一个实施方式中，提供下述化合物或其药学上可接受的盐，即，式(i)中，
[0227]
x表示氯原子、溴原子或碘原子，
[0228]
y表示氧原子或硫原子，
[0229]
z表示氧原子或硫原子，
[0230]
r表示：直链状的c1－c6烷基，其分别可以具有1～3个c1－c6烷基、c1－c4烷氧基、c1－c4卤代烷基、卤原子或苯基作为取代基；
[0231]
c3－c10环烷基，其分别可以具有1～3个c1－c6烷基、c1－c4烷氧基、卤原子或苯基作为取代基；
[0232]
c4－c10环烯基，其分别可以具有1～3个c1－c6烷基、c1－c4烷氧基、卤原子或苯基作为取代基；或者
[0233]
4～10元的饱和杂环基，其分别可以具有1～3个c1－c6烷基、c1－c4烷氧基、卤原子或苯基作为取代基。
[0234]
在本发明的一个实施方式，提供下述化合物或其药学上可接受的盐，即，式(i)中，
[0235]
x表示氯原子、溴原子或碘原子，
[0236]
y表示氧原子或硫原子，
[0237]
z表示氧原子或硫原子，
[0238]
r表示：直链状的c1－c4烷基，其分别可以具有1～3个c1－c3烷基、c1－c3烷氧基、c1－c3卤代烷基、氟原子、氯原子或苯基作为取代基；
[0239]
c3－c8环烷基，其分别可以具有1～2个c1－c3烷基、c1－c3烷氧基或卤原子作为取代基；
[0240]
c4－c8环烯基，其分别可以具有1～2个c1－c3烷基、c1－c3烷氧基或卤原子作为取代基；或
[0241]
4～8元的饱和杂环基，其分别可以具有1～3个c1－c3烷基、c1－c3烷氧基或卤原子作为取代基。
[0242]
在本发明的一个实施方式中，提供下述化合物或其药学上可接受的盐，即，式(i)中，
[0243]
x表示溴原子或碘原子，
[0244]
y表示氧原子或硫原子，
[0245]
z表示氧原子或硫原子，
[0246]
r表示：直链状的c1－c3烷基，其分别可以具有1～3个c1－c2烷基、c1－c2烷氧基、c1－c2卤代烷基、氟原子或氯原子；
[0247]
c3－c7环烷基，其分别可以具有1～2个c1－c2烷基、c1－c2烷氧基、氟原子或氯原子作为取代基；
[0248]
c4－c6环烯基，其分别可以具有1～2个c1－c2烷基、c1－c2烷氧基、氟原子或氯原子作为取代基；或
[0249]
4～6元的饱和杂环基，其分别可以具有1～3个c1－c2烷基、c1－c2烷氧基、氟原子或氯原子作为取代基。
[0250]
在本发明的一个实施方式中，提供下述化合物或其药学上可接受的盐，即，式(i)中，
[0251]
x表示碘原子，
[0252]
y表示氧原子或硫原子，
[0253]
z表示氧原子或硫原子，
[0254]
r表示：直链状的c1－c6烷基，其可以具有1～3个c1－c2烷基或c1－c2卤代烷基作为取代基；
[0255]
c3－c6环烷基，其可以具有1～3个c1－c2烷基作为取代基；或
[0256]
c4－c6环烯基，其可以具有1～3个c1－c2烷基作为取代基。
[0257]
在本发明的一个实施方式中，提供下述化合物或其药学上可接受的盐，即，式(i)中，
[0258]
x表示碘原子，
[0259]
y表示氧原子或硫原子，
[0260]
z表示氧原子或硫原子，
[0261]
r表示甲基、乙基、正丙基、异丙基、1-乙基丙基、2-乙基丙基、2,2-二甲基丙基、1-(氟甲基)-2-氟乙基、2-甲氧基-1-甲基乙基、叔丁基、2,2,2-三氯甲基、苄基、1-苯基乙基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、[2.2.1]双环庚基、环戊烯基、环戊基、1h,2h,3h-茚基、四氢呋喃基。
[0262]
在本发明的一个实施方式中，提供下述化合物或其药学上可接受的盐，即，式(i)中，
[0263]
x表示碘原子，
[0264]
y表示氧原子，
[0265]
z表示氧原子或硫原子，
[0266]
r表示：乙基、异丙基、1-乙基丙基、环戊基、[2.2.1]双环庚基、环戊烯基。
[0267]
在本发明的一个实施方式中，提供下述化合物或其药学上可接受的盐，即，式(i)中，
[0268]
x表示碘原子，
[0269]
y表示氧原子或硫原子，
[0270]
z表示氧原子或硫原子，
[0271]
r表示可以具有取代基的直链状的c1－6烷基；可以具有取代基的c3－10环烷基；可以具有取代基的c4－10环烯基；
[0272]
r中与z键合的碳为仲碳原子。
[0273]
在本发明的实施方式中，式(i)所表示的化合物能够通过使用r-oh或r-sh来导入r而得到。r中与z键合的碳为仲碳原子的情况下，z为氧原子原子时r-oh选自仲醇，z为硫原子原子时r-sh选自仲硫醇。r-oh为仲醇的情况下，作为能够使用的r-oh，可以列举例如异丙醇、环戊醇、1-乙基丙烷-1-醇、环戊烯醇、1-苯基乙烷-1-醇、[2.2.1]双环庚烷-1-醇、1-(氟甲基)-2-氟乙烷-1-醇等，但不限于这些。另外，r－sh为仲硫醇的情况下，作为能够使用的r-sh，可以列举例如异丙基硫醇等，但不限于此。
[0274]
在本发明的优选实施方式中，提供下述化合物或其药学上可接受的盐，即，式(i)中，
[0275]
x表示碘原子，
[0276]
y表示氧原子，
[0277]
z表示氧原子，
[0278]
r表示：直链状的c1－6烷基，其可以具有直链状的c1－6烷基、c1－c4卤代烷基、卤素或c6－10的芳香族烃基作为取代基；
[0279]
c3－10环烷基，其可以具有直链状的c1－6烷基、卤素或c6－10的芳香族烃基作为取代基；或
[0280]
c4－10环烯基，其可以具有直链状的c1－6烷基、卤素或c6－10的芳香族烃基作为取代基；
[0281]
r中与z键合的碳为仲碳原子。
[0282]
本发明的较优选的实施方式中，提供下述化合物或其药学上可接受的盐，即，式(i)中，
[0283]
x表示碘原子，
[0284]
y表示氧原子，
[0285]
z表示氧原子，
[0286]
r表示：直链状的c1－6烷基，其可以具有1个直链状的c1－6烷基、1个c1－c4卤代烷基、1～2个氟、或1个c6－10的芳香族烃基作为取代基；
[0287]
c3－10环烷基，其可以具有1个直链状的c1－6烷基、1～2个氟、或1个c6－10的芳香族烃基作为取代基；或
[0288]
c4－10环烯基，其可以具有1个直链状的c1－6烷基、1～2个氟、或1个c6-10的芳香族烃基作为取代基；
[0289]
r中与z键合的碳为仲碳原子。
[0290]
本发明的更优选的实施方式中，提供下述化合物或其药学上可接受的盐，即，式(i)中，
[0291]
x表示碘原子，
[0292]
y表示氧原子，
[0293]
z表示氧原子，
[0294]
r表示：直链状的c1－3烷基，其可以具有1个直链状的c1－3烷基、1个c1－c3卤代
烷基、1～2个氟、或1个苯基作为取代基；
[0295]
c4－8环烷基，其可以具有1个直链状的c1－3烷基、1～2个氟、或1个苯基作为取代基；或
[0296]
c4－6环烯基，其可以具有1个直链状的c1－3烷基、1～2个氟、或1个苯基作为取代基；
[0297]
r中与z键合的碳为仲碳原子。
[0298]
在本发明的另外的实施方式中，提供下述化合物或其药学上可接受的盐，即，式(i)中，
[0299]
x表示氯原子、溴原子或碘原子，
[0300]
y表示氧原子，
[0301]
z表示氧原子或硫原子，
[0302]
r表示：可以具有取代基的直链状的c1－c6烷基、可以具有取代基的c2－c6烯基、可以具有取代基的c2－c6炔基、可以具有取代基的c3－c10环烷基、可以具有取代基的c4－c10环烯基、可以具有取代基的c6－c10的芳香族烃基、可以具有取代基的4～10元的饱和杂环基或可以具有取代基的5～10元的不饱和杂环基。
[0303]
在本发明的优选实施方式中，提供下述化合物或其药学上可接受的盐，即，式(i)中，
[0304]
x表示溴原子或碘原子，
[0305]
y表示氧原子，
[0306]
z表示氧原子，
[0307]
r表示，可以具有取代基的直链状的c1－c6烷基、可以具有取代基的c2－c6烯基、可以具有取代基的c2－c6炔基、可以具有取代基的c3－c10环烷基、可以具有取代基的c4－c10环烯基、可以具有取代基的c6－c10的芳香族烃基、可以具有取代基的4～10元的饱和杂环基或可以具有取代基的5～10元的不饱和杂环基。
[0308]
在本发明的另外的实施方式中，提供下述化合物或其药学上可接受的盐，即，式(i)中，
[0309]
x表示溴原子或碘原子，
[0310]
y表示氧原子或硫原子，
[0311]
z表示氧原子，
[0312]
r表示：可以具有取代基的直链状的c1－c6烷基、可以具有取代基的c2－c6烯基、可以具有取代基的c2－c6炔基、可以具有取代基的c3－c10环烷基、可以具有取代基的c4－c10环烯基、可以具有取代基的c6－c10的芳香族烃基、可以具有取代基的4～10元的饱和杂环基或可以具有取代基的5～10元的不饱和杂环基。
[0313]
在本发明的优选实施方式中，提供下述化合物或其药学上可接受的盐，即，式(i)中，
[0314]
x表示溴原子，
[0315]
y表示氧原子，
[0316]
z表示氧原子，
[0317]
r表示：可以具有取代基的直链状的c1－c6烷基、可以具有取代基的c2－c6烯基、
可以具有取代基的c2－c6炔基、可以具有取代基的c3－c10环烷基、可以具有取代基的c4－c10环烯基、可以具有取代基的c6－c10的芳香族烃基、可以具有取代基的4～10元的饱和杂环基或可以具有取代基的5～10元的不饱和杂环基。
[0318]
在本发明的另外的实施方式中，提供下述化合物或其药学上可接受的盐，即，式(i)中，
[0319]
x表示碘原子，
[0320]
y表示氧原子或硫原子，
[0321]
z表示氧原子或硫原子，
[0322]
y和z为氧原子的情况下，r表示可以具有取代基的直链状的c1－c6烷基、可以具有取代基的c2－c6烯基、可以具有取代基的c2－c6炔基、可以具有取代基的c3－c10环烷基、可以具有取代基的c4－c10环烯基、可以具有取代基的c6－c10的芳香族烃基、可以具有取代基的4～10元的饱和杂环基或可以具有取代基的5～10元的不饱和杂环基；y为硫原子和z为氧原子的情况下，r表示取代有直链状c1－c6烷基的直链状c1－c6烷基；y为氧原子、z为硫原子的情况下，r表示可以取代有直链状的c1－c6烷基的直链状的c1－c6烷基。
[0323]
在本发明的一个实施方式中，作为具体的本发明的化合物，能够例示以下的化合物或其药学上可接受的盐，但并不限于这些。
[0324]
(1)o-((2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基)s-环戊基硫代碳酸酯；
[0325]
(2)o-((2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基)s-异丙基硫代碳酸酯；
[0326]
(3)o-((2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基)s-乙基硫代碳酸酯；
[0327]
(4)(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基戊烷-3-基碳酸酯；
[0328]
(5)(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基环戊基碳酸酯；
[0329]
(6)(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基异丙基碳酸酯；
[0330]
(7)(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基环戊-3-烯-1-基碳酸酯；
[0331]
(8)(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基(二环[2.2.1]庚烷-2-基)碳酸酯。
[0332]
在本发明的优选实施方式中，本发明的化合物可以是上述(1)～(8)的化合物或其药学上可接受的盐中的优选选自以下中的化合物或其药学上可接受的盐。
[0333]
(1)(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基环戊基碳酸酯；
[0334]
(2)(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基异丙基碳酸酯。
[0335]
在本发明的一个实施方式中，提供下述式(2)所表示的化合物或其药学上可接受
的盐。
[0336][0337]
[式中，
[0338]
x表示氯原子，溴原子或碘原子。]
[0339]
在本发明的一个实施方式中，提供本发明的化合物为选自以下化合物或其药学上可接受的盐。
[0340]
(1)(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-醇；
[0341]
(2)(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-溴-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-醇；或
[0342]
(3)(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-氯-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-醇
[0343]
＜式(1)所表示的化合物的制造方法＞
[0344]
下面，对本发明所涉及化合物的制造法进行说明。
[0345]
本发明的式(1)所表示的化合物例如能够通过下述制造法或实施例所示方法等制造。但是，本发明的式(1)所表示的化合物的制造法不限于这些反应例。在各工序中得到的生成物能够通过已知的分离纯化手段，例如浓缩、减压浓缩、结晶化、溶剂萃取、再沉淀、色谱法等分离纯化，或者也能够不进行分离纯化而直接用于下一工序。另外，在下述制造法中，无论有无记载，都可以依照需要导入保护基或脱保护，各工序的顺序也能够适当变更。
[0346]
关于在各工序中得到的生成物和原料，依照需要，通过导入能够容易地转换成该官能团的保护基能够对于各工序有效的情况下，或者也可以变更各工序顺序。作为这里所使用的保护基，例如，能够使用文献记载的方法[greene和wuts著，“protective groups in organic synthesis”，第5版，john wiley&sons inc，2014年]所述的保护基等，依照在各工序中使用的反应条件适当选择即可。在进行了导入该保护基的反应后，依照需要去除保护基，能够得到所期望的化合物。
[0347]
[制造法1]通式(1a)(通式(1)中，z为氧原子)的化合物的制造法
[0348][0349]
[式中，x、y、r与前面所述相同，a1表示酰基]
[0350]
(第一工序)
[0351]
本工序中，在碱的存在下，使通式(2)所表示的化合物与通式(3)所表示的化合物反应，得到通式(4)所表示的化合物。
[0352]
通式(2)所表示的化合物的a1只要是能够通过利用氨而脱保护的基团，就没有特别限制，但可以列举苯甲酰基、乙酰基等酰基。
[0353]
作为在本反应中使用的碱，可以列举氢氧化钠、氢化钠、氢氧化锂、氢化钾、氢氧化钾等无机碱。作为在本反应中使用的溶剂，只要是不参与反应就没有特别限制，可以列举例如乙腈、二噁烷、四氢呋喃、n,n-二甲基乙酰胺、n,n-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜等，这些能够单独使用或者混合后使用。在反应时，依照需要也可以使用三(2-(2-甲氧基乙氧基)乙基)胺等有机叔胺。在该反应中，相对于通式(2)所表示的化合物1摩尔，使用通式(3)所表示的化合物0.5～20摩尔量左右，优选0.7～5摩尔量左右，使用碱1.0～40摩尔量，优选1.4～10摩尔量左右，使用有机叔胺0.01～10摩尔量，优选0.02～5摩尔量左右。反应温度为－30～100℃，优选－20～60℃，反应时间为0.1～48小时，优选1～24小时。
[0354]
(第二工序)
[0355]
本工序中，通过使通式(4)所表示的化合物与氨反应，能够制造通式(5)所表示的化合物。
[0356]
作为在本反应中使用的溶剂，只要不参与反应，就没有特别限制，可以列举例如二噁烷、二甲氧基乙烷、四氢呋喃、n,n-二甲基乙酰胺、二甲基亚砜、水等，这些能够单独使用或混合后使用。该反应中，相对于通式(4)所表示的化合物1摩尔，使用氨3～1000摩尔量左
右，优选5～500摩尔量左右。反应温度为0～200℃，优选20～150℃，反应时间为0.1～48小时，优选1～24小时。
[0357]
(第三工序)
[0358]
本工序中，使通式(5)所表示的化合物与叔丁基二甲基硅烷基化试剂反应，能够制造仅5’位得到保护的通式(6)所表示的化合物。
[0359]
作为在本反应中使用的叔丁基二甲基硅烷基化试剂，可以列举叔丁基二甲基氯硅烷等。作为在本反应中使用的溶剂，只要不参与反应，就没有特别限制，可以列举例如二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、四氢呋喃、二噁烷、甲苯、n,n-二甲基甲酰胺、n,n-二甲基乙酰胺、二甲基亚砜等，这些能够单独使用或混合后使用。反应时，依照需要也可以是使用碱。作为碱，可以列举咪唑、1-甲基咪唑、三乙胺、三丙胺、二异丙基乙胺、n-甲基吗啉、吡啶、4-(n,n-二甲基氨基)吡啶、二甲基吡啶、三甲基吡啶等有机胺类或者碳酸氢钠、碳酸钠、碳酸钾等无机碱，也可以是仅使用碱作为溶剂。该反应中，相对于通式(5)所表示的化合物1摩尔，使用叔丁基二甲基硅烷基化试剂1～20摩尔量左右，优选1～10摩尔量左右，使用碱1～5000摩尔量左右，优选1～1000摩尔量左右。反应温度为－30～100℃，优选－10～60℃，反应时间为0.1～100小时，优选1～48小时。
[0360]
(第四工序)
[0361]
本工序中，通式(6)所表示的化合物与ro－c(＝y)－wa(r、y与上述相同，wa表示卤素、对硝基苯氧基或1h-咪唑-1-基)所表示的碳酸酯化试剂或烷氧基硫代羰基化试剂进行反应，能够制造通式(7)所表示的化合物。
[0362]
本反应中使用的ro－c(＝y)－wa所表示的化合物可以通过通常已知的方法调节。例如也能够将三碳酰氯与对应于r－oh(r与上述相同)表示的醇进行反应来得到。ro－c(＝y)－wa所表示的化合物能够依照需要进行分离纯化，但也能够不经过纯化而用于本工序。本反应依照通常已知的方法即可，但作为所使用的溶剂，只要不参与反应，就没有特别限制，可以列举例如二氯甲烷、二氯乙烷、氯仿、乙酸乙酯、四氢呋喃、二噁烷、甲苯、n,n-二甲基甲酰胺、n,n-二甲基乙酰胺、二甲基亚砜等，这些能够单独使用或混合后使用。反应时，依照需要可以使用碱。作为碱，可以列举咪唑、1-甲基咪唑、三乙胺、三丙胺、二异丙基乙胺、n-甲基吗啉、吡啶、4-(n,n-二甲基氨基)吡啶、二甲基吡啶、三甲基吡啶、1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯等有机胺类或碳酸氢钠、碳酸钠、碳酸钾等无机碱，能够单独使用这些或者将这些混合后使用，另外，也仅使用碱作为溶剂。该反应中，相对于通式(6)所表示的化合物1摩尔，使用ro－c(＝y)－wa所示的化合物1～20摩尔量左右，优选1～10摩尔量左右，使用碱1～5000摩尔量左右，优选1～1000摩尔量左右。反应温度为－30～130℃，优选－10～100℃，反应时间为0.1～100小时，优选1～48小时。
[0363]
(第五工序)
[0364]
本工序中，通过使通式(7)所表示的化合物与脱保护化试剂反应，仅使5’位脱保护，能够制造通式(1a)所表示的化合物。
[0365]
作为所使用的溶剂，只要不参与反应，就没有特别限制，可以列举例如二氯甲烷、甲苯、乙酸乙酯、四氢呋喃、二噁烷、异丙醇、乙醇、甲醇、水等，这些能够单独使用或混合后使用。作为所使用的脱保护化试剂，只要是通常用于硅烷基的脱保护所使用的试剂就没有特别限制，但可以列举例如四丁基氟化铵、氟化氢、氟化钾等氟化物离子试剂、盐酸、溴化
氢、硫酸、磷酸等无机酸或三氟乙酸、乙酸、丙酸、甲酸、甲磺酸、对甲苯磺酸等有机酸。该反应中，相对于通式(7)所表示的化合物1摩尔，使用脱保护化试剂0.5～1000摩尔量左右，优选1～100摩尔量左右，反应温度为－30～130℃，优选－10～80℃，反应时间为0.1～100小时，优选0.5～24小时。
[0366]
[制造法2]
[0367]
通式(1b)(通式(1)中，z为硫原子)的化合物的制造法
[0368][0369]
[式中，x、y、r与前面所述相同，za表示硫原子]
[0370]
(第一工序)
[0371]
本工序中，使通式(6)所表示的化合物与wb－c(＝y)－wb(y与上述相同，wb表示对硝基苯氧基或1h-咪唑-1-基)所表示的试剂反应后，再与以r－sh(r与上述相同)表示的硫醇反应，能够制造通式(8)所表示的化合物。
[0372]
作为在本反应中使用的溶剂，只要不参与反应，就没有特别限制，例如二氯甲烷、二氯乙烷、氯仿、乙酸乙酯、四氢呋喃、二噁烷、甲苯、n,n-二甲基甲酰胺、n,n-二甲基乙酰胺、二甲基亚砜等，这些能够单独使用或混合后使用。反应时，依照需要也可以是使用碱。作为碱，可以列举咪唑、1-甲基咪唑、三乙胺、三丙胺、二异丙基乙胺、n-甲基吗啉、吡啶、4-(n,n-二甲基氨基)吡啶、二甲基吡啶、三甲基吡啶、1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯等有机胺类、碳酸氢钠、碳酸钠、碳酸钾等无机碱，能够单独使用这些或者将这些混合后使用，另外，也可以仅使用碱作为溶剂。作为本反应中使用的wb－c(＝y)－wb所表示的化合物，可以列举例如双(对硝基苯基)碳酸酯、羰基二咪唑、硫代羰基二咪唑等。该反应中，相对于通式(6)所表示的化合物1摩尔，使用wb－cy－wb所表示的化合物1～20摩尔量左右，优选1～10摩尔量左右，使用以r－sh所表示的硫醇1～1000摩尔量左右，优选1～100摩尔左右，使用碱1～5000摩尔量左右，优选1～1000摩尔量左右。反应温度为－30～130℃，优选－10～100℃，反应时间为0.1～100小时，优选1～48小时。
[0373]
(第二工序)
[0374]
本工序中，通过使通式(8)所表示的化合物与脱保护化试剂反应，仅使5’位脱保护，能够制造通式(1b)所表示的化合物。
[0375]
作为所使用的溶剂，只要不参与反应，就没有特别限制，可以列举例如二氯甲烷、甲苯、乙酸乙酯、四氢呋喃、二噁烷、异丙醇、乙醇、甲醇、水等，这些能够单独使用或混合后使用。作为所使用的脱保护化试剂，只要是通常用于硅烷基的脱保护所使用的试剂就没有特别限制，但可以列举例如四丁基氟化铵、氟化氢、氟化钾等氟化物离子试剂、盐酸、溴化氢、硫酸、磷酸等无机酸或三氟乙酸、乙酸、丙酸、甲酸、甲磺酸、对甲苯磺酸等有机酸。该反应中，相对于通式(8)所表示的化合物1摩尔，使用脱保护化试剂0.5～1000摩尔量左右，优选1～100摩尔量左右，反应温度为－30～130℃，优选－10～80℃，反应时间为0.1～100小时，优选0.5～24小时。
[0376]
这样，能够制造通式(1)所表示的化合物或其药学上可接受的盐之中，在3’位具有碳酸酯的通式(1a)或在3’位具有硫代碳酸酯的通式(1b)。
[0377]
这样制造的通式(1)所表示的化合物或其药学上可接受的盐能够通过通常使用的方法纯化。作为具体的纯化方法，可以列举使用了二氧化硅凝胶色谱法或逆相色谱法的分取、利用有机层和水层的萃取等，但不限于这些纯化方法。
[0378]
本发明化合物是具有吡咯并嘧啶骨架的新型碳酸酯化合物或其药学上可接受的盐，也能够称为新型的核苷衍生物。本发明化合物能够用作通过在生物体内去除碳酸酯而转换成具有抗肿瘤效果活性的核苷衍生物的前体药物。由此，能够进一步改善具有活性核苷衍生物的药物动力，还能够缓和活性核苷衍生物所具有的毒性，因此本发明化合物能够作为极为优异的抗肿瘤剂使用。
[0379]
本发明化合物所实现的对于毒性的缓和与投予本发明化合物的动物物种无关。该缓和能够通过例如抑制被给药的动物种类的体重减少、抑制血液成分减少等来确认。
[0380]
本发明化合物具有光学异构体、立体异构体、旋转异构体、互变异构体等异构体的情况下，在没有特别说明时，任何异构体及混合物都能够包含于本发明化合物中。
[0381]
本发明化合物的盐是指药学上可以接受的盐，可以举出碱加成盐或酸加成盐。
[0382]
本发明化合物或其药学上可接受的盐可以是非结晶的，也可以是结晶的。另外，晶形无论是单一的还是多形混合物，都包括在本发明化合物或其药学上可接受的盐之中。本发明化合物或其药学上可接受的盐无论是溶剂合物(例如，水合物等)，还是无溶剂合物，都包括在本发明化合物或其药学上可接受的盐之中。由同位素(例如3h、
14
c、
35
s、
125
i等)等标识的化合物也包括在本发明化合物或其药学上可接受的盐之中。
[0383]
本发明的化合物或其药学上可接受的盐在用于医药时，可以依照需要配合药学上可接受的载体，依照预防或治疗目的，能够采用各种给药方式，作为该医药的形态，可以是例如口服剂、注射剂、栓剂、软膏剂、贴付剂等任意种，优选采用口服剂或注射剂，较优选采用口服剂。
[0384]
作为本发明化合物的给药方式，可以列举含有(1)～(8)所述的化合物或其药学上可接受的盐的口服剂或注射剂，但不限于这些。
[0385]
(1)o-((2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基)s-环戊基硫代碳酸酯；
[0386]
(2)o-((2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基)s-异丙基硫代碳酸酯；
[0387]
(3)o-((2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基)s-乙基硫代碳酸酯；
[0388]
(4)(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基戊烷-3-基碳酸酯；
[0389]
(5)(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基环戊基碳酸酯；
[0390]
(6)(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基异丙基碳酸酯；
[0391]
(7)(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟
甲基)四氢呋喃-3-基环戊-3-烯-1-基碳酸酯；
[0392]
(8)(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基(二环[2.2.1]庚烷-2-基)碳酸酯。
[0393]
作为本发明化合物中的各种给药方式，较优选举出(1)、(2)所述的化合物或其药学上可接受的盐的口服剂或注射剂。
[0394]
(1)(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基环戊基碳酸酯；
[0395]
(2)(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基异丙基碳酸酯。
[0396]
作为本发明化合物中的各种给药方式，优选(1)所述的化合物或其药学上可接受的盐的口服剂、(1)所述的化合物或其药学上可接受的盐的注射剂、(2)所述的化合物或其药学上可接受的盐的口服剂或(2)所述的化合物或其药学上可接受的盐的注射剂。
[0397]
本发明化合物的给药方式较优选上述(1)的口服剂或上述(2)的口服剂。
[0398]
这些给药方式能够分别由本领域技术人员通过已知的制剂方法制造。
[0399]
本说明书中使用的“进行治疗”或“治疗”包括以治愈或改善癌症为目的的治疗或抑制癌的发展、发生或复发的治疗或者以缓和症状为目的的治疗。
[0400]
本说明书中使用的“有效量”是指具有引发组织、系统、动物或人类的生物学上的或医学上的应答的药学活性的药剂量。其由研究者、兽医、医师或其他的临床医生决定。在本发明的一个实施方式中，“有效量”是缓和人类患者的至少1种临床症状的医药活性剂的量。在本发明的一个实施方式中，“有效量”是“预防性有效量”，即，可以是能够预防癌的充分量。在本发明的一个实施方式中，与烷基化剂联合使用而给药时的“有效量”可以是在分别考虑到本发明的化合物或其药学上可接受的盐以及烷基化剂的药剂的药效和副作用这两者后，从单剂的有效量中适当减量。在本发明的一个实施方式中，与放射线疗法联合使用时的“有效量”可以是分别考虑到本发明的化合物或其药学上可接受的盐和放射线疗法的效果和副作用这两者后，从单剂的有效量中适当减量。
[0401]
本说明书中使用的“对象”之中，包括哺乳动物和非哺乳动物两者的动物，优选包含人类。在本发明的一个实施方式中，对象为人类患者，可以是被诊断需要治疗与本说明书中公开的癌相关联的临床症状或医学状态的人类。对象有时处于需要治疗已有的癌症的情况或有时处于需要预防或降低发生癌症的风险的预防性治疗的情况。在本说明书中使用时，“需要”进行已有的癌症的治疗或预防性治疗的对象包括由医疗专家确定必要性以及患者期望该治疗这两者。
[0402]
在本发明的一个实施方式中提供含有本发明的化合物或其药学上可接受的盐作为有效成分的抗肿瘤剂。另外，在本发明的另外的实施方式中提供一种肿瘤的预防和/或治疗方法，其包括对于需要的对象投予本发明的化合物或其药学上可接受的盐的步骤。另外，在本发明的另外的实施方式中，提供本发明的化合物或其药学上可接受的盐在制造抗肿瘤剂中的应用。另外，在本发明的另外的实施方式中，提供用于肿瘤的预防和/或治疗的本发明的化合物或其药学上可接受的盐。
[0403]
在本发明的一个实施方式中，提供一种含有本发明的化合物或其药学上可接受的盐的医药组合物。本发明的一个实施方式的医药组合物中含有本发明的化合物或其药学上
可接受的盐以及药学上可接受的载体。另外，在本发明的另外的实施方式中，提供本发明的化合物或其药学上可接受的盐在制造医药组合物中的应用。本发明的另外的一个实施方式中，提供用于作为医药使用的本发明的化合物或其药学上可接受的盐。
[0404]
在本发明的一个实施方式中，本发明的化合物或其药学上可接受的盐能够包括与烷基化剂和/或与放射线疗法联合使用。
[0405]
在本发明的一个实施方式中，提供以与烷基化剂联合使用为特征的本发明的化合物或其药学上可接受的盐。在本发明的另外的实施方式中，提供以与烷基化剂联合使用为特征的本发明的化合物或其药学上可接受的盐在制造抗肿瘤剂中的应用。在本发明的另外的一个实施方式中，提供以用于治疗肿瘤且与烷基化剂联合使用为特征的本发明的化合物或其药学上可接受的盐。
[0406]
在本发明中，“烷基化剂”是指在体内对癌症具有活性，并且与本发明的化合物不同的任意的医药活性剂(或其医药上可接受的盐)。联合使用的烷基化剂中，包括联合使用烷基化剂的前体药物、游离酸、游离碱和药学上可接受的盐。一般来说，任意的适当的追加抗癌剂是与本发明的化合物或其药学上可接受的盐的任意的组合，可以是单次给药制剂(例如，固定用量药物的组合)或者以1个以上的不同形态使用。单次给药制剂能够将医药活性剂向对象同时给药(将各个医药活性剂同时给药)、依次给药或分开给药。在特定的实施方式中，本发明的化合物和联合使用的烷基化剂能够每间隔数分钟、每间隔数小时的或每间隔数日给药。在一个实施方式中，1种或多种追加抗癌剂也如上述那样包含于医药制剂中。
[0407]
在本发明中，作为“烷基化剂”的例子，可以列举苯丁酸氮芥、萘氮芥、环磷酰胺(cyclophosphamide)、环磷酰胺(cytophosphane)、雌莫司汀、异环磷酰胺、甘露醇氮芥、氮芥、盐酸氮芥、美法仑、新恩比兴(novembichin)、苯芥胆甾醇、泼尼莫司汀、三氯氮芥(trimustine)氯乙胺、曲洛磷胺(trofosfamide)和尿嘧啶氮芥；白消安、英丙舒凡、哌泊舒凡等磺酸烷基酯；卡莫司汀、氯脲霉素、福莫司汀、洛莫司汀、尼莫司汀、雷莫司汀、链佐星、ta-07等亚硝基脲；六甲密胺、噻替哌、三亚乙基三聚氰胺、三亚乙基硫代磷酰胺、三亚乙基磷酰胺、三羟甲基三聚氰胺等亚乙基亚胺和甲基三聚氰胺；氨莫司汀；苯达莫司汀；达卡巴嗪；依托格鲁；伊洛福芬；马磷酰胺；二溴甘露醇；二溴卫矛醇；哌泊溴烷；甲基苄肼(procarbazine)；替莫唑胺；苏消安；三亚胺醌(triaziquone)、二脱水半乳糖醇等，但不限于这些。
[0408]
在本发明的优选实施方式中，“烷基化剂”为苯丁酸氮芥、雌莫司汀、异环磷酰胺、美法仑、卡莫司汀、福莫司汀、洛莫司汀、尼莫司汀、雷莫司汀、六甲密胺、苯达莫司汀、达卡巴嗪、甲基苄肼、替莫唑胺、二脱水半乳糖醇。在本发明的更优选实施方式中，“烷基化剂”为雌氮芥、卡莫司汀、洛莫司汀、尼莫司汀、雷莫司汀、苯达莫司汀、甲基苄肼、替莫唑胺、二脱水半乳糖醇。在本发明的最优选实施方式中，“烷基化剂”为替莫唑胺。
[0409]
在本发明的一个实施方式中，这些“烷基化剂”可以使用1种，也可以将2种以上组合使用。
[0410]
在本发明的一个实施方式中，在与烷基化剂联合使用而给药之外，还可以联合使用放射线疗法。
[0411]
在本发明的一个实施方式中，提供以与放射线疗法联合使用为特征的本发明的化
合物或其药学上可接受的盐。在本发明的另外的实施方式中，提供以与放射线疗法联合使用为特征的本发明的化合物或其药学上可接受的盐在制造抗肿瘤剂中的应用。在本发明的另外的一个实施方式中，提供以用于肿瘤的治疗且与放射线疗法联合使用为特征的本发明的化合物或其药学上可接受的盐。
[0412]
用于实施放射线疗法的技术在本技术领域中被广泛使用，例如在《放射線治療計画
ガイドライン
2016》等中均有记载。这些技术能够在本说明书记载的发明中使用。
[0413]
放射线疗法大致可分为外部照射疗法和内部放射线疗法。外部照射疗法是指从体外照射放射线来治疗癌症的方法，内部放射线疗法是指从体内照射放射线来治疗癌症的方法。在外部照射疗法中，通常选择高能放射线治疗、三维原体照射、调强放射治疗(imrt)、图像引导放射治疗(igrt)、立体定向放射治疗(srt)、立体定向放射手术(srs)等治疗方法或照射方法。内部放射线疗法中，选择密封小线源治疗和利用非密封放射性同位素的治疗。这些放射线疗法中，放射线的种类可以依照肿瘤适当选择电子线、x线、α(阿尔法)射线、β(贝塔)射线、γ(伽马)射线、质子线、重粒子线等。在本发明中，能够组合使用上述放射线治疗和放射线的种类，也并不限定于这些。
[0414]
在本发明的一个实施方式中，在与放射线疗法联合使用之外，也能够与烷基化剂联合使用而给药。
[0415]
在本发明的一个实施方式中，本发明的化合物或其药学上可接受的盐能够单独用于癌症的治疗，也能够与放射线疗法联合使用。而且，在将本发明的化合物或其药学上可接受的盐单独用于癌症的治疗的情况下或与放射线疗法联合使用的情况下，也能够与烷基化剂联合使用而给药。
[0416]
在本发明的一个实施方式中，与烷基化剂和/或放射线疗法组合使用的式(i)的化合物选自以下所示的化合物和其药学上可接受的盐。
[0417]
(1)o-((2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基)s-环戊基硫代碳酸酯；
[0418]
(2)o-((2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基)s-异丙基硫代碳酸酯；
[0419]
(3)o-((2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基)s-乙基硫代碳酸酯；
[0420]
(4)(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基戊烷-3-基碳酸酯；
[0421]
(5)(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基环戊基碳酸酯；
[0422]
(6)(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基异丙基碳酸酯；
[0423]
(7)(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基环戊-3-烯-1-基碳酸酯；
[0424]
(8)(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基(二环[2.2.1]庚烷-2-基)碳酸酯。
[0425]
在本发明的一个实施方式中，本发明的化合物较优选可以为选自以下所示化合物
或其药学上可接受的盐。
[0426]
(1)(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基环戊基碳酸酯；
[0427]
(2)(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基异丙基碳酸酯。
[0428]
在本发明的一个实施方式中，与烷基化剂和/或放射线疗法组合使用的式(2)的化合物选自以下所示物质和其药学上可接受的盐。
[0429]
(1)(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-醇；
[0430]
(2)(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-溴-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-醇；或
[0431]
(3)(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-氯-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-醇
[0432]
本发明的特定的实施方式中，将本发明的化合物投予有效量。
[0433]
在一个实施方式中，将烷基化剂投予有效量。
[0434]
在特定的实施方式中，将与本发明的化合物或其药学上可接受的盐联合使用的烷基化剂投予治疗上的有效量。
[0435]
在一个实施方式中，将本发明的化合物和烷基化剂同时给药。
[0436]
在一个实施方式中，将本发明的化合物和烷基化剂分开给药。
[0437]
在一个实施方式中，将本发明的化合物和烷基化剂依次给药。在一个实施方式中，将本发明的化合物在投予烷基化剂前给药。在一个实施方式中，将本发明的化合物在投予烷基化剂后给药。
[0438]
在一个实施方式中，同时实施本发明的化合物的给药和放射线疗法。
[0439]
在一个实施方式中，依次实施本发明的化合物的给药和放射线疗法。在一个实施方式中，在放射线疗法之前投予本发明的化合物。在一个实施方式中，在放射线疗法之后投予本发明的化合物。
[0440]
在一个实施方式中，本发明所述的化合物或其药学上可接受的盐和烷基化剂通过还含有至少1种医药上可接受的载体的单一医药制剂给药。
[0441]
作为药学上可接受的载体，可以列举作为制剂材料被常规使用的各种有机或者无机载体物质，在固体制剂中可以配合赋形剂、粘合剂、崩解剂、光滑剂、包衣剂、着色剂，在液状制剂中可以配合溶剂、溶解助剂、助悬剂、等张剂、缓冲剂、无痛化剂等。另外，依照需要也可以使用防腐剂、抗氧化剂、甜味剂、稳定剂等制剂添加物。
[0442]
制备口服用固体制剂的情况下，通过向本发明的化合物中添加赋形剂，依照需要添加粘合剂、崩解剂、光滑剂、着色剂、矫味矫臭剂等后，通过常规方法能够制造成片剂、包衣片剂、颗粒剂、散剂、胶囊剂等。
[0443]
制备注射剂的情况下，向本发明的化合物中添加ph调节剂、缓冲剂、稳定剂、等张剂、局部麻醉剂等，依照常规方法能够制造皮下、肌肉内和静脉内用注射剂。
[0444]
在上述的各给药单位形态中应配合的本发明的化合物的有效量因其适用对象的症状、其剂形等而并不一定，但一般来说，每给药单位形态，在口服剂中作为前体药物可以
为是0.05～10000mg，在注射剂中作为前体药物可以为0.01～5000mg，在栓剂中作为前体药物可以为1～10000mg。在本发明的一个实施方式中，在给药单位形态中应配合的本发明的化合物的有效量优选在每给药单位形态中，在口服剂中作为前体药物可以为0.05～1000mg，在注射剂中作为前体药物可以为0.01～500mg，在栓剂中作为前体药物可以为1～1000mg。
[0445]
另外，具有上述给药方式的药剂的每1日的给药量因对象的症状、体重、年龄、性别等而异，无法一概地确定，但对于通常成人(体重50kg)，本发明的化合物每1日以前体药物计可以为0.05～50000mg，优选为0.1～10000mg，优选在口服剂中以前体药物计为0.05～1000mg，在注射剂中以前体药物计为0.01～500mg，在栓剂中以前体药物计为1～1000mg。
[0446]
作为本发明化合物的适用对象的肿瘤没有特别限制，可以列举例如头颈部癌(口腔癌、咽癌、喉癌、鼻腔癌、鼻窦癌、唾液腺癌、甲状腺癌等)、消化器官癌(食管癌、胃癌、十二指肠癌、肝癌、胆道癌(胆嚢-胆管癌等)、胰腺癌、大肠癌(结肠癌、直肠癌等)等)、肺癌(非小细胞肺癌、小细胞肺癌、间皮瘤等)、乳腺癌、生殖器官癌(卵巣癌、子宫癌(宫颈癌、子宫体癌等)等)、泌尿器官癌(肾癌、膀胱癌、前列腺癌、睾丸肿瘤等)、造血器官肿瘤(白血病、恶性淋巴瘤、多发性骨髄肿等)、骨-软组织肿瘤、皮肤癌、脑肿瘤等。
[0447]
利用本发明的化合物治疗的脑肿瘤包含转移性脑肿瘤和原发性脑肿瘤。
[0448]
脑肿瘤没有特别限制，但可以列举例如转移性脑肿瘤(例如肺癌、乳腺癌、胃癌、结肠直肠癌、膀胱癌、胆道癌、子宫癌等的脑转移)、毛细胞型星形细胞瘤、弥漫性星形细胞瘤、少突神经胶质瘤-少突星形细胞瘤、间变型星形细胞瘤-间变型少突神经胶质瘤、间变型少突神经星形细胞瘤、成胶质细胞瘤、室管膜瘤、间变型室管膜瘤、神经节胶质细胞瘤、中枢神经细胞瘤、髓母细胞瘤、生殖细胞瘤(germinoma)、中枢神经系统恶性淋巴瘤、脑膜瘤、神经鞘瘤、垂体gh腺瘤、垂体prl腺瘤、垂体acth腺瘤、非功能性垂体腺瘤、颅咽管瘤、脊索瘤、成血管细胞瘤、表皮样瘤等。
[0449]
由于本发明的化合物是作为前体药物被使用，其活性化合物为：
[0450]
(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-醇；
[0451]
(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-溴-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-醇；或
[0452]
(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-氯-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-醇，
[0453]
作为成为上述活性化物的下述的化合物或其药学上可接受的盐的适用对象的癌症肿瘤，也可以列举与上述同样的肿瘤。
technology)、avance neo(400mhz；bruker)、avance iii hd(500mhz；bruker)型光谱仪，在氘代溶剂中含有四甲基硅烷的情况下使用四甲基硅烷作为内部基准，其他情况下使用nmr溶剂作为内部基准进行测定，将全部δ值以ppm示出。
[0466]
lcms光谱使用waters公司制sqd以下述2个条件进行测定，以[m h] 值示出。
[0467]
ms检出：esi positive
[0468]
uv检出：254和210nm色谱柱流速：0.5ml/分
[0469]
流动相：水/乙腈(0.1％甲酸)注射量：1μl
[0470]
色谱柱：acquity beh，2.1x50mm，1.7μm
[0471]
浓度梯度：
[0472][0473]
将简称的含意示于下方。
[0474]
s：单峰
[0475]
d：二重峰
[0476]
t：三重峰
[0477]
q：四重峰
[0478]
dd：双二重峰
[0479]
m：多重峰
[0480]
br：宽峰
[0481]
brs：宽单峰
[0482]
d6-dmso：氘代二甲基亚砜
[0483]
d2o：重水
[0484]
hpmc：羟丙基甲基纤维素
[0485]
[比较例1]
[0486]
(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-溴-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-醇的合成
[0487][0488]
(工序1)
[0489]
将5-溴-4-氯-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(2.2g)悬浊于乙腈(80ml)，加入三(2-(2-甲氧基乙氧基)乙基)胺(0.17ml)和粉末状的氢氧化钾(1.1g)，在50℃加热搅拌5小时。向该混合液在室温添加通过文献(bioorg.med.chem,20,2012,5202-5214)记载方法得到的((2r,3r,4s,5r)-3-(苯甲酰氧基)-5-溴-4-氟四氢呋喃-2-基)甲基苯甲酸酯(4.5g)的乙腈(20ml)溶液，在该温度搅拌1.5小时。采集一部分该溶液，通过lcms光谱确认存在((2r,3r,4s,5r)-3-(苯甲酰氧基)-5-(5-溴-4-氯-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟四氢呋喃-2-基)甲基苯甲酸酯后，通过通常使用的方法进行纯化，得到了该苯甲酸酯(5.1g)。
[0490]
(工序2)
[0491]
将在本比较例工序1中得到的苯甲酸酯(3.0g)悬浊于25％氨水溶液(16ml)和1,4-二噁烷(16ml)的混合液中，在120℃搅拌5小时。采集一部分该溶液，通过lcms光谱确认存在标题化合物后，通过通常使用的方法进行纯化，得到了br体的标记化合物(1.3g)。
[0492]
1h-nmr(d6-dmso)δ(ppm)：3.55-3.67(2h,m),3.74-3.78(1h,m),4.29-4.37(1h,m),5.02-5.17(1h,m),5.06(1h,t,j＝5.6hz),5.87(1h,d,j＝4.8hz),6.52(1h,dd,j＝4.4,14hz),6.83(2h,brs),7.48(1h,d,j＝2.0hz),8.09(1h,s)
[0493]
esi－ms：m/z 347,349(mh )
[0494]
[比较例2]
[0495]
(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-醇的合成
[0496][0497]
通过文献(bioorg.med.chem,20,2012,5202-5214)记载的方法合成。
[0498]
[比较例6]
[0499]
(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-氯-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-醇的合成
[0500]
[0501]
通过比较例1中记载的方法由5-氯-4-氯-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶合成。
[0502]
1h-nmr(d6-dmso)δ(ppm)：3.63-3.79(3h,m),4.34-4.39(1h,m),5.09-5.20(2h,m),5.90(1h,s),6.56(1h,d,j＝12hz),6.93(2h,brs),7.46(1h,s),8.12(1h,s)
[0503]
esi－ms：m/z 303,305(mh )
[0504]
[比较例7]
[0505]
(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4,4-二氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-醇的合成
[0506][0507]
通过文献(chem med chem,8,2013,832-846)中记载的方法合成。
[0508]
[实施例1]
[0509]
(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基环戊基碳酸酯的合成
[0510]
(工序1)
[0511]
将通过比较例2得到的(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-醇(500mg)溶解于吡啶(3ml)中，加入叔丁基二甲基氯硅烷(249mg)，在室温搅拌了12小时。将甲醇(1ml)加入至反应液，搅拌20分钟后，将反应液在减压下浓缩。将得到的残渣悬浊于乙酸乙酯(5ml)和1n盐酸(5ml)，过滤产生的固体，得到(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)甲基)-4-氟四氢呋喃-3-醇(460mg)。
[0512]
(工序2)
[0513]
将环戊醇(1g)溶解于吡啶(10ml)中，加入1,1
’‑
羰基二咪唑(2.0g)，在冰冷下搅拌3小时。将反应液在减压下浓缩后，加入乙酸乙酯(10ml)和饱和氯化铵水溶液(10ml)，进行分液。将有机层利用饱和氯化铵水溶液(10ml)、之后利用水(10ml)、再利用饱和食盐水(10ml)洗涤，利用硫酸钠干燥。过滤去除硫酸钠，在减压下浓缩后，利用甲苯(10ml)共沸2次，得到了环戊基1h-咪唑-1-羧酸酯(1.5g)。
[0514]
(工序3)
[0515]
将通过本实施例的工序1得到的(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)甲基)-4-氟四氢呋喃-3-醇(460mg)溶解于吡啶(3ml)中，加入通过本实施例的工序2得到的环戊基1h-咪唑-1-羧酸酯(163mg)之后加入1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯(145mg)，在70℃搅拌5小时。向反应液中加入乙酸乙酯(10ml)和水(10ml)，进行分液，对于有机层利用1n盐酸(5ml)洗涤2次后，利用饱和食
盐水(10ml)洗涤，利用硫酸钠干燥。将硫酸钠过滤去除，将减压下浓缩后得到的残渣利用二氧化硅凝胶色谱柱色谱法(己烷/乙酸乙酯60％)纯化，得到了(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)甲基)-4-氟四氢呋喃-3-基环戊基碳酸酯(470mg)。
[0516]
(工序4)
[0517]
将通过本实施例工序3得到的(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)甲基)-4-氟四氢呋喃-3-基环戊基碳酸酯(440mg)溶解于乙醇(5ml)中，加入1n盐酸(1ml)，在60℃搅拌2小时。将反应液直接利用二氧化硅凝胶色谱柱色谱法(己烷/乙酸乙酯90％)进行纯化，得到了(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基环戊基碳酸酯(i体)(230mg)。
[0518]
实施例2～21依照实施例1的制造法进行合成。表1的原料栏所记载的“比较例1”和“比较例2”分别表示在实施例的工序1中作为比较例2的替代使用比较例1的化合物(br体)或比较例2的化合物(i体)中的哪个。表1的“醇(r－oh)”栏所述的醇表示在实施例1的工序2中作为环戊醇的替代使用的醇。这些醇均为能够通过市售获得。另外，实施例1～21的化合物的化合物名、化学结构式和物性值均示于以下的表1-1至表1-6中。
[0519]
[表1-1]
[0520][0521]
[表1-2]
[0522][0523]
[表1-3]
[0524][0525]
[表1-4]
[0526][0527]
[表1-5]
[0528][0529]
[表1-6]
[0530][0531]
[实施例22]o-(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基)s-乙基硫代碳酸酯的合成
[0532]
(工序1)
[0533]
将通过实施例1的工序1得到的(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)甲基)-4-氟四氢呋喃-3-醇(80mg)和n,n-二异丙基乙胺(0.15ml)溶解于n,n-二甲基甲酰胺(1.5ml)中，加入双(4-硝基苯基)碳酸酯(72mg)，在室温搅拌了1小时。之后加入乙烷硫醇(0.15ml)再搅拌1小时。加入乙酸乙酯(5ml)和0.5n氢氧化钠水溶液(5ml)，进行分液，进一步将有机层利用0.5n氢氧化钠水溶液(5ml)，之后利用饱和食盐水(5ml)洗涤，在减压下进行浓缩。将得到的残渣利用二氧化硅凝胶色谱柱色谱法(甲醇/氯仿5％)纯化，得到了o-((2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)甲基)-4-氟四氢呋喃-3-基)s-乙基硫代碳酸酯(57mg)。
[0534]
(工序2)
[0535]
通过本实施例的工序1得到的o-((2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)甲基)-4-氟四氢呋喃-3-基)s-乙基硫代碳酸酯(57mg)溶解于乙醇(3ml)中，加入6n盐酸(0.5ml)，在室温搅拌2小时。将反应溶液直接利用二氧化硅凝胶色谱柱色谱法(甲醇/氯仿10％)纯化，得到了o-((2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基)s-乙基硫代碳酸酯(23mg)。
[0536]
实施例23～25依照实施例22的制造法进行合成。表2的原料栏所记载的“比较例1”和“比较例2”分别表示在实施例的工序1中作为比较例2的替代使用比较例1的化合物(br体)或比较例2的化合物(i体)中的哪个。表2的“硫醇(r－sh)”栏所述的硫醇表示在实施例22的工序1中作为乙烷硫醇的替代使用的硫醇。这些硫醇均能够通过市售获得。另外，实施例22～25的化合物的化合物名、化学结构式和物性值均示于以下的表2中。
[0537]
[表2]
[0538][0539]
[实施例26]o-((2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基)o-异丙基硫代碳酸酯的合成
[0540][0541]
作为工序2的1,1
’‑
羰基二咪唑的替代使用1,1
’‑
硫代羰基二咪唑，或作为环戊醇的替代使用异丙醇，依照实施例1的合成法进行了合成。
[0542]
1h-nmr(d6-dmso)δ(ppm)：1.41(6h,dd,j＝6.4,2.0hz),3.69-3.81(2h,m),4.17-4.20(1h,m),5.27(1h,t,j＝6.0hz),5.35-5.93(3h,m),6.58(1h,dd,j＝3.6,20hz),6.79(2h,brs),7.61(1h,d,j＝2.8hz),8.18(1h,s)
[0543]
esi－ms：m/z 497(mh )
[0544]
[实施例27](2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-氯-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基环戊基碳酸酯的合成
[0545][0546]
将通过比较例6得到的(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-氯-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-醇(500mg)与环戊醇依照实施例1的合成方法进行了合成。
[0547]
1h-nmr(d6-dmso)：1.56-1.89(8h,m),3.62-3.73(2h,m),4.05-4.06(1h,m),5.06-5.09(1h,m),5.20(1h,t,j＝5.6hz),5.29-5.55(2h,m),6.56(1h,dd,j＝18,4.0hz),6.96(2h,brs),7.49(1h,d,j＝2.0hz),8.14(1h,s)
[0548]
esi－ms：m/z 415,417(mh )
[0549]
[比较例3]((2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-3-羟基四氢呋喃-2-基)甲基环戊基碳酸酯的合成
[0550][0551]
作为(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)甲基)-4-氟四氢呋喃-3-醇的替代，使用了通过比较例2得到的(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-醇，利用实施例1的工序2中得到的环戊基1h-咪唑-1-羧酸酯依照实施例1的工序3的方法进行了合成。
[0552]
1h-nmr(d6-dmso)δ(ppm)：1.49-1.86(8h,m),3.96-4.00(1h,m),4.27-4.39(3h,m),4.97-5.19(2h,m),6.07(1h,d,j＝4.8hz),6.56(1h,dd,j＝16,4.4hz),6.70(2h,brs),7.40(1h,d,j＝2.0hz),8.10(1h,s)
[0553]
esi－ms：m/z 507(mh )
[0554]
[比较例4]((2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((乙氧基羰基)氧基)-4-氟四氢呋喃-2-基)甲基乙基碳酸酯的合成
[0555][0556]
依照实施例1的工序2的方法，作为环戊醇的替代使用乙醇得到了乙基1h-咪唑-1-羧酸酯。依照实施例1的工序3的方法，作为(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)甲基)-4-氟四氢呋喃-3-醇的替代，使用从比较例2得到的(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-4-氟-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-醇，另外，作为环戊基1h-咪唑-1-羧酸酯的替代使用通过上述工序得到的乙基1h-咪唑-1-羧酸酯进行了合成。
[0557]
1h-nmr(d6-dmso)δ(ppm)：1.18-1.23(6h,m),4.09-4.19(4h,m),4.25-4.47(3h,m),5.31-5.56(2h,m),6.55(1h,dd,j＝4.4,18hz),6.72(2h,brs),7.42(1h,d,j＝2.8hz),8.10(1h,s)
[0558]
esi－ms：m/z 539(mh )
[0559]
[比较例5]异丙基(7-((2r,3s,4r,5r)-3-氟-4-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基甲酸酯的合成
[0560][0561]
(工序1)
[0562]
将通过实施例1的工序1得到的(2r,3r,4s,5r)-5-(4-氨基-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)甲基)-4-氟四氢呋喃-3-醇(200mg)溶解于吡啶(2ml)中，加入氯甲酸异丙酯(0.064ml)，在室温搅拌4小时，之后再加入氯甲酸异丙酯(0.050ml)，在室温搅拌1小时。加入甲醇(1ml)，搅拌10分钟后，将反应液在减压下浓缩，加入乙酸乙酯(5ml)和0.5n盐酸，进行分液。将有机层在减压下浓缩，将得到的残渣利用二氧化硅凝胶色谱柱色谱法(己烷/乙酸乙酯90％)纯化，得到了异丙基(7-((2r,3s,4r,5r)-5-(((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)甲基)-3-氟-4-羟基四氢呋喃-2-基)-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基甲酸酯(190mg)。
[0563]
(工序2)
[0564]
将通过本实施例的工序2得到的异丙基(7-((2r,3s,4r,5r)-5-(((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)甲基)-3-氟-4-羟基四氢呋喃-2-基)-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基甲酸酯(190mg)溶解于乙醇(3ml)，加入1n盐酸(0.6ml)，在50℃搅拌1小时。将反应溶液直接利用二氧化硅凝胶色谱柱色谱法(甲醇/氯仿10％)纯化，得到了异丙基(7-((2r,3s,4r,5r)-3-氟-4-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基甲酸酯(63mg)。
[0565]
1h-nmr(d6-dmso)δ(ppm)：1.25-1.27(6h,m),3.59-3.70(2h,m),3.80-3.84(1h,m),4.35-4.43(1h,m),4.86-5.26(3h,m),5.92(1h,d,j＝5.2hz),6.65(1h,dd,j＝4.4,14hz),7.86(1h,d,j＝1.6hz),8.60(1h,s),9.75(1h,s)
[0566]
esi－ms：m/z 481(mh )
[0567]
将上述实施例和比较例的化合物通过以下试验法进行了评价。
[0568]
[试验例1]小鼠中的前体药物的确认和吸收性的评价1
[0569]
比较例1～5和实施例1～26的各给药量是以成为表中所示摩尔量/10ml/kg的方式，利用0.5％hpmc水溶液制备了给药液。
[0570]
需要说明的是，“摩尔量/10ml/kg”的含义是指，例如在为“10mmol/10ml/kg”时，对于每1kg的小鼠体重将10mmol的评价对象化合物溶解或分散于10ml的给药液中，后面的记载也是同样。
[0571]
将这些给药液分别利用经口给药灌胃管经口给药于非绝食条件下的小鼠(balb/ca，雄)。
[0572]
在给药0.5、1、2、4、6小时后，在异氟醚麻酔下，利用专用的针(动物刺血针)和肝素处理后的血细胞比容管，从面部静脉进行采血。
[0573]
采集的血液立即经过离心分离(13000rpm,2分,4℃)制备成血浆，进行除蛋白处理后，利用lc/ms/ms测定了本化合物的血浆中浓度。
[0574]
药物血中浓度－时间曲线下面积(auc)的值使用解析软件phoenix(注册商标)winnonlin(注册商标)算出。
[0575]
将给药后0～6小时的auc(auc 0-6hr)的结果示于表3和表4。表3中，“比较例1”和“比较例2”分别表示“比较例1的化合物”(br体)和“比较例2的化合物”(i体)。表4中，“比较例6”表示“比较例6的化合物”(cl体)。
[0576]
[表3]
[0577]
[0578]
[表4]
[0579][0580]
由此可知实施例21为活性本体的比较例1的化合物(br体)的前体药物。另外可知实施例1～20、22～26是活性本体的比较例2的化合物(i体)的前体药物。另外可知实施例27是活性本体的比较例6的化合物(cl体)的前提药物。而且，实施例1～27之中，确认了与直接经口给药比较例1～2、6所对应的活性本体本身相比，使auc增加的化合物。
[0581]
[试验例2]人类肿瘤细胞株中的增殖抑制活性的评价1
[0582]
将各种人类肿瘤细胞株悬浮于培养基中，接种到多孔板的各孔中，进行培养。从培养开始次日添加阶段稀释的化合物溶液，再培养3日。细胞数的测量使用celltiter-glo(promega公司制)，基于promega公司推荐的操作顺序进行。基于下式算出细胞生存率，求得50％抑制的化合物的浓度(ic50(μm))。
[0583]
细胞生存率(％)＝(t/c)
×
100
[0584]
t：添加了化合物的孔的发光强度
[0585]
c：未添加化合物的孔的发光强度
[0586]
将比较例1的化合物(br体)的结果示于表5，将比较例2的化合物(i体)的结果示于表6。在表5和表6中，“比较例1”和“比较例2”分别表示“比较例1的化合物”(br体)和“比较例2的化合物”(i体)。
[0587]
[表5]
[0588][0589]
[表6]
[0590][0591]
由此可知，比较例1和比较例2所述的化合物对于多种肿瘤具有广谱的抗肿瘤作用。
[0592]
[试验例3]人类肿瘤细胞株中的增殖抑制活性的评价2
[0593]
将各种人类肿瘤细胞株悬浮于培养基中，接种到多孔板的各孔中，进行培养。从培养开始次日，添加阶段稀释的化合物溶液，再培养3日。细胞数的测量使用celltiter-glo(promega公司制)，基于promega公司推荐的操作顺序进行。基于下式算出细胞生存率，求得50％抑制的化合物的浓度(ic50(nm))。
[0594]
细胞生存率(％)＝(t/c)
×
100
[0595]
t：添加了化合物的孔的发光强度
[0596]
c：未添加化合物的孔的发光强度
[0597]
将结果示于表7。表7中，“比较例1”和“比较例2”分别表示“比较例1的化合物”(br体)和“比较例2的化合物”(i体)。另外，表8中，“比较例6”表示“比较例6的化合物”(cl体)。
[0598]
[表7]
[0599][0600]
[表8]
[0601][0602]
由此可知，比较例1、比较例2和比较例6所述的化合物对于多种肿瘤具有广谱的抗肿瘤作用。
[0603]
[试验例4]人类肿瘤细胞株中的增殖抑制活性的评价3
[0604]
将各种人类肿瘤细胞株悬浮于培养基中，接种到多孔板的各孔中，进行培养。从培养开始次日，添加阶段稀释的化合物溶液，再培养3日。细胞数的测量使用celltiter-glo(promega公司制)，基于promega公司推荐的操作顺序进行。基于下式算出细胞生存率，求得50％抑制的化合物的浓度(ic50(nm))。
[0605]
细胞生存率(％)＝(t/c)
×
100
[0606]
t：添加了化合物的孔的发光强度
[0607]
c：未添加化合物的孔的发光强度
[0608]
将结果示于表9。表9中“比较例2”和“比较例7”分别表示“比较例2的化合物”(i体)和“比较例7的化合物”(二氟体)。
[0609]
[表9]
[0610][0611]
由此可知，比较例2与比较例7相比，ic50低10倍以上，具有优异的抗肿瘤作用。
[0612]
[试验例5]小鼠中的抗肿瘤效果和毒性的评价1
[0613]
将人类脑肿瘤细胞株(u-87mg)移植至balb/ca jcl-nu/nu小鼠的右侧胸部皮下。肿瘤移植后测定肿瘤的长径(mm)和短径(mm)，算出肿瘤体积(tumor volume：tv)后，以使各组的平均tv均等的方式将小鼠分至各组，将实施了分组的那一天作为day0。
[0614]
从day1起，将比较例2的化合物(i体)以12mg/kg/day进行连日经口给药，将实施例1的化合物以15.4mg/kg/day进行连日经口给药。之后继续给药至体重减少达到可接受的程度，进行评价。参考以下的文献，继续给药和评价观察直至体重减少达到20％以上。
[0615]
labio 21,no.30,oct.2007,p27
[0616]
作为抗肿瘤效果和毒性的指标，评价各组的肿瘤体积(tumor volume：tv)和体重(body weight：bw)，通过下式求得相对于day0的以相对肿瘤体积(relative tumor volume：rtv)为基准的肿瘤增殖抑制率(inhibition rate：ir)和体重变化(body weight change：bwc)，比较了对照组(无处置)、实施例1给药组、比较例2给药组的ir和bwc。
[0617]
tv(mm3)＝(长径
×
短径2)/2
[0618]
rtv＝(评价日的tv)/(day0时的tv)
[0619]
ir(％)＝(1－(评价日的给药组的rtv)/(评价日的对照组的rtv))
×
100
[0620]
bwc(％)＝(评价日的bw－day0时的bw)/(day0时的bw)
×
100
[0621]
将给药了比较例2和实施例1的组的评价最终日(比较例2中为day6，实施例1中为day13)的ir示于图1，将bwc的经日变化示于图2。
[0622]
由以上的评价结果可以发现，实施例1的化合物给药组与比较例2的化合物给药组相比，增加了给药持续性，对于体重的影响也较为缓和，而且观察到了高抗肿瘤效果。由此可知，实施例1的化合物具有高抗肿瘤效果，而且在安全性方面也优异。
[0623]
实施例1的化合物所代表的本发明的化合物具有高抗肿瘤效果，而且在安全性方面也优异。
[0624]
[试验例6]小鼠中的抗肿瘤效果和毒性的评价2
[0625]
将人类脑肿瘤细胞株(u-87mg)移植至balb/ca jcl-nu/nu小鼠的右侧胸部的皮下。肿瘤移植后测定肿瘤的长径(mm)和短径(mm)，算出肿瘤体积(tumor volume：tv)后，以使各组的平均tv均等的方式将小鼠分至各组，将实施了分组的那一天作为day0。
[0626]
从day1起，将比较例2的化合物(i体)以12mg/kg/day进行连日经口给药，将实施例5的化合物以14.6mg/kg/day进行连日经口给药。
[0627]
作为抗肿瘤效果和毒性的指标，评价各组的肿瘤体积(tumor volume：tv)和体重(body weight：bw)，通过下式求得相对于day0的以相对肿瘤体积(relative tumor volume：rtv)为基准的肿瘤增殖抑制率(inhibition rate：ir)和体重变化(body weight change：bwc)。而且，为了进行对毒性效果的评价，基于ir和bwc求得比(效果指数)，比较了
实施例5的化合物给药组和比较例2的化合物给药组。
[0628]
tv(mm3)＝(长径
×
短径2)/2
[0629]
rtv＝(评价日的tv)/(day0时的tv)
[0630]
ir(％)＝(1－(评价日的给药组的rtv)/(评价日的对照组的rtv))
×
100
[0631]
bwc(％)＝(评价日的bw－day0时的bw)/(day0时的bw)
×
100
[0632]
效果指数＝ir(％)/(－bwc(％))
[0633]
将给药了比较例2的化合物(i体)和实施例5的化合物的给药组的给药第6日的效果指数示于图3。
[0634]
由以上的评价结果可以发现，实施例5的化合物给药组与比较例2的化合物给药组相比，对毒性效果提高了。
[0635]
由此可知，实施例5的化合物的抗肿瘤效果与安全性的平衡优异。
[0636]
实施例5的化合物所代表的本发明的化合物的抗肿瘤效果与安全性的平衡优异。
[0637]
[试验例7]小鼠中的抗肿瘤效果和毒性的评价3
[0638]
将人类造血器官肿瘤细胞株(mv-4-11)移植至balb/ca jcl-nu/nu小鼠的右侧胸部的皮下。肿瘤移植后测定肿瘤的长径(mm)和短径(mm)，算出肿瘤体积(tumor volume：tv)后，以使各组的平均tv均等的方式将小鼠分至各组，将实施了分组的那一天作为day0。
[0639]
从day1起，将比较例2的化合物(i体)以12mg/kg/day进行连日经口给药，将实施例1的化合物以10.8mg/kg/day进行连日经口给药。之后继续给药至体重减少达到可接受的程度，由此进行评价。参考以下的文献，继续给药和评价观察直至体重减少达到20％以上。
[0640]
labio 21,no.30,oct.2007,p27
[0641]
作为抗肿瘤效果和毒性的指标，评价各组的肿瘤体积(tumor volume：tv)和体重(body weight：bw)，通过下式求得相对于day0的相对肿瘤体积(relative tumor volume：rtv)和体重变化(body weight change：bwc)并绘图，比较了对照组(无处置)、实施例1给药组、比较例2给药组的rtv和bwc的经日变化。
[0642]
tv(mm3)＝(长径
×
短径2)/2
[0643]
rtv＝(评价日的tv)/(day0时的tv)
[0644]
bwc(％)＝(评价日的bw－day0时的bw)/(day0时的bw)
×
100
[0645]
图4和图5中示出给药比较例2的化合物(i体)时的rtv和bwc的经日变化，图6和图7中示出给药实施例1的化合物时的经日变化。
[0646]
进一步作为毒性的指标，在评价最终日进行了各组的血细胞成分的分析(淋巴细胞：lymph(lymphocyte)，通过下式求得了实施例1的化合物给药组相对于比较例2的化合物给药组的对照组的变动(t/c，％)。将其结果示于图8。
[0647]
t/c(％)＝(给药组中的血球成分的个数/对照组中的血球成分的个数)
×
100
[0648]
由以上的评价结果可以发现，实施例1给药组与比较例2给药组相比，即使给药持续性增加，对体重的影响和血液毒性也轻微，同时确认到肿瘤缩小，观察到显著的抗肿瘤效果。
[0649]
由此可知，实施例1具有高抗肿瘤效果，而且在安全性方面也优异。
[0650]
实施例1的化合物所代表的本发明的化合物具有高抗肿瘤效果，而且在安全性方面也优异。
[0651]
[试验例8]放射线联合使用效果的评价
[0652]
将人类脑肿瘤细胞株(u-87mg)悬浮于培养基中，接种到多孔板的各孔中，进行培养。进行同日操作时在培养开始次次日进行放射线照射和化合物添加。进行先添加化合物时，从培养开始次日添加阶段稀释的化合物溶液，在培养开始次次日进行放射线的照射。进行先照射放射线时，从培养开始次日照射放射线，在培养开始次次日进行添加阶段稀释的化合物溶液。接种日的5日后使用25％戊二醛水溶液将细胞固定，使用染色液(0.05w/v％结晶紫的20％甲醇溶液)染色。添加萃取液(0.1n nah2po4:100％乙醇＝1:1)混和后，通过测定在540nm处的吸光度测定了细胞数。通过下式算出细胞生存率。统计处理通过斯图尔特的t检验进行。
[0653]
细胞生存率(％)＝(t/c)
×
100
[0654]
t：放射线照射或添加了化合物的孔的吸光度
[0655]
c：放射线照射和未添加化合物的孔的吸光度
[0656]
结果示于图9。
[0657]
由以上的评价结果可以知道，无论何种联合使用顺序(同日、先使用化合物、先照射放射线)，与分别单独使用比较例2的化合物和放射线的处理相比，通过联合使用，观察到了显著的细胞生存率的降低。
[0658]
由此可知，比较例2与放射线显示对于抗肿瘤性的联合使用效果。
[0659]
[试验例9]替莫唑胺(tmz)联合使用效果的评价
[0660]
将人类脑肿瘤细胞株(u-87mg)悬浮于培养基中，接种到多孔板的各孔中，进行培养。进行同日操作时在培养开始次次日添加两剂的化合物。进行先添加化合物时，从培养开始次日添加阶段稀释的化合物溶液，在培养开始次次日添加阶段稀释后的tmz溶液。进行先添加tmz时，在培养开始次日添加阶段稀释后的tmz溶液，在培养开始次次日添加阶段稀释的化合物溶液。在接种日的5日后使用25％戊二醛水溶液将细胞固定，使用染色液(0.05w/v％结晶紫的20％甲醇溶液)染色。添加萃取液(0.1n nah2po4:100％乙醇＝1:1)混和后，通过测定在540nm处的吸光度测定了细胞数。通过下式算出细胞生存率。统计处理是通过斯图尔特的t检验进行。
[0661]
细胞生存率(％)＝(t/c)
×
100
[0662]
t：tmz或添加了化合物的孔的吸光度
[0663]
c：tmz和未添加化合物的孔的吸光度
[0664]
结果示于图10。
[0665]
由以上的评价的结果可以知道，无论何种联合使用顺序(同日、先使用化合物、先使用tmz)中，与分别单独使用比较例2的化合物和tmz的处理相比，通过联合使用，观察到了显著的细胞生存率的降低。
[0666]
由此可知，比较例2与tmz显示对于抗肿瘤性的联合使用效果。
[0667]
如上所述，本发明的化合物具有优异的安全性，且作为显示高抗肿瘤效果的抗肿瘤剂是有用的。另外，本发明的化合物在与烷基化剂和/或放射线疗法联合使用时，显示优异的联合使用效果。