一种槟榔碱的制备方法与流程

1.本技术涉及天然物质提取技术领域，尤其涉及一种槟榔碱的制备方法。


背景技术：

2.槟榔(areca catechu l.)是棕榈科(palmae)槟榔属(areca)常绿乔木，是中国重要的中药药材之一，槟榔花、槟榔果以及槟榔子是槟榔的重要药用部位。槟榔的药用和保健功效主要归因于活性成分槟榔碱，槟榔碱也是槟榔中最主要的生物碱，围绕槟榔碱的研究一直十分活跃。相关研究表明，槟榔碱在阿尔茨海默病(ad)、肿瘤、糖尿病、动脉粥样硬化等的治疗方面有积极作用。maiese等研究指出，临床注射槟榔碱能改善ad病人的认知能力和记忆力。chandra等研究也发现，在对wistar大鼠ad模型进行槟榔碱噻唑霉素干预后，大鼠的记忆细胞增加且学习能力得到改善。huang等研究表明，槟榔碱具有预防基底细胞癌发生的潜力。相关研究发现，槟榔碱5mg/kg和20mg/kg显著性降低大鼠的空腹血糖水平，明显改善ⅱ型糖尿病大鼠凝血功能和血液流变学的异常。槟榔碱(0.001、0.01和0.1mmol/l)以浓度依赖的方式抑制了高糖诱导的血管内皮依赖性舒张反应损伤。山丽梅等研究发现，槟榔碱能抑制血液及血管组织中重要的动脉粥样硬化相关因子的表达，可激活乙酰胆碱靶标，防止心脑血管疾病。临床上已经在使用槟榔茶治疗老年性高血脂等心脑血管疾病。
3.现有的槟榔碱提取方法，提取选择的都是槟榔果实，但槟榔的花枝、花、树枝、树皮、树根、叶子等均含有槟榔碱成分，然而，以这些部位均作为提取槟榔碱的原料的尚未见报道。另外，现有的槟榔碱提取方法有醇水回流提取、co2超临界流体萃取、酸碱水浸提等方法，这些传统的提取方法无法完全破坏细胞壁的束缚，不能最大限度的提取有效成分。


技术实现要素：

4.本技术提供一种槟榔碱的制备方法，旨在拓展制备槟榔碱的原料来源。
5.本技术提供一种槟榔碱的制备方法，以槟榔植株的花枝、花、树枝、树皮、树根、叶子中的至少一个部位来制备槟榔碱。
6.通过从槟榔植株的不同部位来制备槟榔碱，拓展了制备槟榔碱的原料来源。
7.在一些方案中，将所述至少一个部位进行粉碎，再通过酶解、固液分离、萃取以及溶解得到所述槟榔碱。
8.通过酶解能够破坏细胞壁的束缚，最大限度的提取槟榔植株的花枝、花、树枝、树皮、树根、叶子中的至少一个部位的有效成分，实现了槟榔碱的高效提取。
9.在一些方案中，所述方法具体为：
10.步骤a：粉碎，将所述至少一个部位进行粉碎，得到槟榔植株粗粉；
11.步骤b：酶解，将槟榔植株粗粉加入激活的复合酶制剂缓冲液中进行酶解，得到酶解液；
12.步骤c：固液分离，将酶解液进行固液分离、浓缩，得到槟榔碱浓缩液；
13.步骤d：萃取，调节槟榔碱浓缩液为碱性后，用有机溶剂进行萃取，得到有机溶剂层
和水层；
14.步骤e：溶解，取有机溶剂层进行浓缩，与乙醇溶解后进行过滤，回收乙醇即得到液体状槟榔碱。
15.在一些方案中，在步骤b中，所述复合酶制剂选自纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶、β-葡聚糖酶、漆酶、脂肪酶、蛋白酶、淀粉酶中的至少一种。
16.在一些方案中，在步骤b中，所述缓冲液包括柠檬酸-柠檬酸盐缓冲液、乙酸-乙酸盐缓冲液、tris-盐酸缓冲液、磷酸-磷酸盐缓冲液中的一种。
17.在一些方案中，在步骤b中，所述缓冲液的ph值为3～7，优选的为4～7，进一步优选的为4～6.5，进一步优选的为4～6。
18.在一些方案中，在步骤b中，槟榔植株粗粉加入激活的复合酶制剂缓冲液中，在温度为40～60℃的水浴中酶解3～15h。
19.在一些方案中，在步骤c中，所述固液分离选自滤布过滤、抽滤、板框过滤、离心机离心过滤中的一种。
20.在一些方案中，所述固液分离采用离心机离心过滤，离心分离的转速为6000～12000r/min，离心分离的时间为5～30min。
21.在一些方案中，在步骤d中，调节后的槟榔碱浓缩液的ph值为7～10，优选的为8～10，进一步优选的为8～9。
22.在一些方案中，在步骤d中，所述有机溶剂选自以下至少之一：
23.乙酸乙酯、苯、甲苯、二甲苯、石油醚、甲醚、乙醚、甲基叔丁基醚、二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯、四氢呋喃、正丁醇；优选的为乙酸乙酯。
24.在一些方案中，在步骤e中，所述乙醇的浓度为70％～90％，优选的为70％～85％，进一步优选的为70％～80％。
附图说明
25.一个或多个实施例通过与之对应的附图中的图片进行示例性说明，这些示例性说明并不构成对实施例的限定。
26.图1是本技术实施例提供的提取槟榔碱的方法流程示意图。
具体实施方式
27.本技术将结合以下实施例作进一步描述。
28.本技术实施方式提供一种槟榔碱的制备方法，以槟榔植株的花枝、花、树枝、树皮、树根、叶子中的至少一个部位来制备槟榔碱。
29.发明人对槟榔植株的不同部位进行检测发现，上述部位均含有槟榔碱成分，具体如下表格所示：
30.部位槟榔碱含量％花枝0.0446％树枝0.0285％叶子0.0040％树皮0.0239％
树根0.1486％
31.通过从槟榔植株的不同部位来制备槟榔碱，拓展了制备槟榔碱的原料来源。
32.在一些方案中，将所述至少一个部位进行粉碎，再通过酶解、固液分离、萃取以及溶解得到槟榔碱。
33.通过酶解能够破坏细胞壁的束缚，最大限度的提取槟榔植株的花枝、花、树枝、树皮、树根、叶子中的至少一个部位的有效成分，实现了槟榔碱的高效提取。
34.在一些方案中，所述方法具体为：
35.步骤a：粉碎，将所述至少一个部位进行粉碎，得到槟榔植株粗粉；
36.步骤b：酶解，将槟榔植株粗粉加入激活的复合酶制剂缓冲液中进行酶解，得到酶解液；
37.步骤c：固液分离，将酶解液进行固液分离、浓缩，得到槟榔碱浓缩液；
38.步骤d：萃取，调节槟榔碱浓缩液为碱性后，用有机溶剂进行萃取，得到有机溶剂层和水层；
39.步骤e：溶解，取有机溶剂层进行浓缩，与乙醇溶解后进行过滤，回收乙醇即得到液体状槟榔碱。
40.在一些方案中，在步骤b中，所述复合酶制剂选自纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶、β-葡聚糖酶、漆酶、脂肪酶、蛋白酶、淀粉酶中的至少一种。
41.在一些方案中，在步骤b中，所述缓冲液包括柠檬酸-柠檬酸盐缓冲液、乙酸-乙酸盐缓冲液、tris-盐酸缓冲液、磷酸-磷酸盐缓冲液中的一种。
42.在一些方案中，在步骤b中，所述缓冲液的ph值为3～7，优选的为4～7，进一步优选的为4～6.5，进一步优选的为4～6。
43.在一些方案中，在步骤b中，槟榔植株粗粉加入激活的复合酶制剂缓冲液中，在温度为40～60℃的水浴中酶解3～15h。
44.在一些方案中，在步骤c中，所述固液分离选自滤布过滤、抽滤、板框过滤、离心机离心过滤中的一种。
45.在一些方案中，所述固液分离采用离心机离心过滤，离心分离的转速为6000～12000r/min，离心分离的时间为5～30min。
46.在一些方案中，在步骤d中，调节后的槟榔碱浓缩液的ph值为7～10，优选的为8～10，进一步优选的为8～9。
47.在一些方案中，在步骤d中，所述有机溶剂选自以下至少之一：
48.乙酸乙酯、苯、甲苯、二甲苯、石油醚、甲醚、乙醚、甲基叔丁基醚、二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯、四氢呋喃、正丁醇；优选的为乙酸乙酯。
49.在一些方案中，在步骤e中，所述乙醇的浓度为70％～90％，优选的为70％～85％，进一步优选的为70％～80％。
50.实施例一：
51.请参考图1所示，将槟榔植株的花枝、花、树枝、树皮、树根、叶子等部位进行粉碎、过筛，过筛目数为40，在40℃条件下烘干至质量恒定，得到槟榔粉末，置于4℃冰箱保存；
52.取含有纤维素酶40％、半纤维素酶30％、果胶酶20％、蒸馏水10％的复合酶制剂，溶于0.1～0.2mol/l且ph值为4～7的柠檬酸-柠檬酸盐缓冲液中，形成浓度为1～10mg/ml的
复合酶制剂缓冲液，在45-65℃水浴中激活5-20min；
53.将槟榔粉末加入激活的复合酶制剂缓冲液中，在温度为40～60℃的水浴中酶解3～15h。
54.将酶解液离心过滤，离心分离的转速为10000r/min，离心分离的时间为15min，得到槟榔碱液。
55.取上清液进行减压浓缩得到槟榔碱浓缩液。
56.将浓缩液用10％氢氧化钠溶液调节ph值为8～10，用乙酸乙酯萃取3次，其中调节后的槟榔碱浓缩液的体积与乙酸乙酯的体积比为1：1。
57.合并萃取液减压浓缩，待浓缩液挥发至恒定体积，用高浓度食用酒精(75％)溶解后过滤，回收酒精，即得液体状槟榔碱。
58.本书面描述使用实例来公开本发明，包括最佳模式，且还使本领域技术人员能够制造和使用本技术。本技术的可授予专利的范围由权利要求书限定，且可以包括本领域技术人员想到的其它实例。如果这种其它实例具有不异于权利要求书的字面语言的结构元素，或者如果这种其它实例包括与权利要求书的字面语言无实质性差异的等效结构元素，则这种其它实例旨在处于权利要求书的范围之内。在不会造成不一致的程度下，通过参考将本文中参考的所有引用之处并入本文中。