饲料添加剂凝结芽孢杆菌的开发研究的制作方法

1.本发明涉及一种凝结芽孢杆菌的开发研究，特别涉及饲料添加剂凝结芽孢杆菌的开发研究，属于凝结芽孢杆菌技术领域。


背景技术：

2.饲料添加剂是指在饲料生产加工、使用过程中添加的少量或微量物质，在饲料中用量很少但作用显著，饲料添加剂是现代饲料工业必然使用的原料，对强化基础饲料营养价值，提高动物生产性能，保证动物健康，节省饲料成本，改善畜产品品质等方面有明显的效果。
3.凝结芽孢杆菌(bacillus coagulans)，革兰阳性，属于硬(或厚)壁菌门。凝结芽孢杆菌分类学上属于芽孢杆菌属，细胞呈杆状，革兰氏阳性菌，端生芽孢，无鞭毛。分解糖类生成l-乳酸，为同型乳酸发酵菌。最适生长温度为45-50℃，最适ph为6.6-7.0。
4.凝结芽孢杆菌的活性，容易在饲料加工过程中因加热损耗，在消化过程中因胃肠液中盐、酸、酶作用再次损耗，最后到达消化道中益生菌的存活率是多少依然是一个不确定因素，凝结芽孢杆菌在维护肠道健康发挥了至关重要作用，但如何在避开过程中的高温、胃酸胃酶等条件作用保障其到达后肠道发挥其调节肠道功能的“有益作用”。


技术实现要素：

5.本发明的目的在于提供一种饲料添加剂凝结芽孢杆菌的开发研究，以解决上述背景技术中提出的问题。
6.为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：饲料添加剂凝结芽孢杆菌的开发研究，包括以下步骤：
7.s1：通过原生质体融合技术得到第一亲本和室温常压等离子体诱变得到第二亲本，将第一亲本和第二亲本置于同一培养基进行无性杂交，得到耐热、耐盐酸和抗酶的凝结芽孢杆菌；
8.s2：凝结芽孢杆菌种子液按比例接种量接种进入发酵液，装液量为10l，35-37.7℃，1000rpm/min，通气量3立方/h条件下培养6h；将发酵液移种进入次级发酵池，添加装液量800l，37-39℃，2000rpm/min，通气量5立方/h条件下培养10h；
9.s3：得到的发酵液经过浓缩处理得到活菌数达到150亿cfu/ml的浓缩液，加入12％脱脂奶粉、6％海藻糖作为保护剂及1％海藻酸钠作为包被剂，溶解、混合均匀后进行喷雾干燥，采用离心式喷雾干燥设备，进风温度300℃，出风温度150℃，得到菌粉；
10.s4：通过微囊化技术，在低温环境下短时间内将菌粉保护于一个稳定的载体中，制成微胶囊状态，进行存储。
11.作为本发明的一种优选技术方案，所述培养基的培养底物配置条件如下：耐热温度为40-45℃、耐盐酸值为2.5-3.5。
12.作为本发明的一种优选技术方案，所述发酵液的配置成份如下：葡萄糖70-80g/l、
酵母膏30-45g/l、蛋白胨30-35g/l、琼脂10-15g/l、氯化钾1-1.5g/l、磷酸氢二钾1-2g/l、硫酸锰0.01-0.03g/l、氯化铵0.5-1g/l和碳酸钙5-10g/l。
13.作为本发明的一种优选技术方案，所述饲料添加剂凝结芽孢杆菌的应用在动物肠道健康，能预防动物拉稀，提高饲料转化率，促进动物生长的功效。
14.与现有技术相比，本发明的有益效果是：
15.1.本发明饲料添加剂凝结芽孢杆菌的开发研究，本发明能够避免凝结芽孢杆菌的活性在饲料加工过程中因加热损耗，在消化过程中因胃肠液中盐、酸、酶作用再次损耗，最后到达消化道中益生菌的存活率减低的问题，在凝结芽孢杆菌驯化选育基础上采用先进的乳化技术，在低温环境下短时间内将菌体保护于一个稳定的载体中制成微胶囊状态，制成产品能抵御饲料加工过程的受热问题，能顺应胃肠道吸收功能，最终安全到达动物肠道，发挥其名副其实的“益生”作用。
具体实施方式
16.下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
17.本发明提供了饲料添加剂凝结芽孢杆菌的开发研究的技术方案：
18.饲料添加剂凝结芽孢杆菌的开发研究，包括以下步骤：
19.s1：通过原生质体融合技术得到第一亲本和室温常压等离子体诱变得到第二亲本，将第一亲本和第二亲本置于同一培养基进行无性杂交，得到耐热、耐盐酸和抗酶的凝结芽孢杆菌；
20.s2：凝结芽孢杆菌种子液按比例接种量接种进入发酵液，装液量为10l，35-37.7℃，1000rpm/min，通气量3立方/h条件下培养6h；将发酵液移种进入次级发酵池，添加装液量800l，37-39℃，2000rpm/min，通气量5立方/h条件下培养10h；
21.s3：得到的发酵液经过浓缩处理得到活菌数达到150亿cfu/ml的浓缩液，加入12％脱脂奶粉、6％海藻糖作为保护剂及1％海藻酸钠作为包被剂，溶解、混合均匀后进行喷雾干燥，采用离心式喷雾干燥设备，进风温度300℃，出风温度150℃，得到菌粉；
22.s4：通过微囊化技术，在低温环境下短时间内将菌粉保护于一个稳定的载体中，制成微胶囊状态，进行存储。
23.培养基的培养底物配置条件如下：耐热温度为40-45℃、耐盐酸值为2.5-3.5；发酵液的配置成份如下：葡萄糖70-80g/l、酵母膏30-45g/l、蛋白胨30-35g/l、琼脂10-15g/l、氯化钾1-1.5g/l、磷酸氢二钾1-2g/l、硫酸锰0.01-0.03g/l、氯化铵0.5-1g/l和碳酸钙5-10g/l；饲料添加剂凝结芽孢杆菌的应用在动物肠道健康，能预防动物拉稀，提高饲料转化率，促进动物生长的功效。
24.具体使用时，本发明饲料添加剂凝结芽孢杆菌的开发研究，s1：通过原生质体融合技术得到第一亲本和室温常压等离子体诱变得到第二亲本，将第一亲本和第二亲本置于同一培养基进行无性杂交，得到耐热、耐盐酸和抗酶的凝结芽孢杆菌；凝结芽孢杆菌种子液按比例接种量接种进入发酵液，装液量为10l，35-37.7℃，1000rpm/min，通气量3立方/h条件
下培养6h；将发酵液移种进入次级发酵池，添加装液量800l，37-39℃，2000rpm/min，通气量5立方/h条件下培养10h；得到的发酵液经过浓缩处理得到活菌数达到150亿cfu/ml的浓缩液，加入12％脱脂奶粉、6％海藻糖作为保护剂及1％海藻酸钠作为包被剂，溶解、混合均匀后进行喷雾干燥，采用离心式喷雾干燥设备，进风温度300℃，出风温度150℃，得到菌粉；通过微囊化技术，在低温环境下短时间内将菌粉保护于一个稳定的载体中，制成微胶囊状态，进行存储，综上所述，本发明能够避免凝结芽孢杆菌的活性在饲料加工过程中因加热损耗，在消化过程中因胃肠液中盐、酸、酶作用再次损耗，最后到达消化道中益生菌的存活率减低的问题，在凝结芽孢杆菌驯化选育基础上采用先进的乳化技术，在低温环境下短时间内将菌体保护于一个稳定的载体中制成微胶囊状态，制成产品能抵御饲料加工过程的受热问题，能顺应胃肠道吸收功能，最终安全到达动物肠道，发挥其名副其实的“益生”作用。
25.实施例一
26.第一步：通过原生质体融合技术得到第一亲本和室温常压等离子体诱变得到第二亲本，将第一亲本和第二亲本置于同一培养基进行无性杂交，得到耐热、耐盐酸和抗酶的凝结芽孢杆菌；
27.第二步：选育出耐热、耐盐酸和抗酶的表现性的凝结芽孢杆菌种子液，凝结芽孢杆菌种子液按比例接种量接种进入发酵液，装液量为10l，37.7℃，1000rpm/min，通气量3立方/h条件下培养6h；将发酵液移种进入次级发酵池，添加装液量800l，39℃，2000rpm/min，通气量5立方/h条件下培养10h；
28.第三步：得到的发酵液经过浓缩处理得到活菌数达到150亿cfu/ml的浓缩液，加入12％脱脂奶粉、6％海藻糖作为保护剂及1％海藻酸钠作为包被剂，溶解、混合均匀后进行喷雾干燥，采用离心式喷雾干燥设备，进风温度300℃，出风温度150℃，得到菌粉；
29.第四步：通过微囊化技术，在低温环境下短时间内将菌粉保护于一个稳定的载体中，制成微胶囊状态，进行存储。
30.在本发明的描述中，需要理解的是，指示的方位或位置关系为基于实施例所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本发明的限制。
31.在本发明中，除非另有明确的规定和限定，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或成一体；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通或两个元件的相互作用关系，除非另有明确的限定，对于本领域的普通技术人员而言，可以根据具体情况理解上述术语在本发明中的具体含义。
32.尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。