用于鉴定罗氏沼虾性别的引物组、试剂盒、鉴别方法以及应用与流程

技术特征：
1.用于pcr扩增罗氏沼虾性染色体片段的引物组，包括如seq id no.1～2所示的第一引物对、如seq id no.3～4所示的第二引物对和如seq id no.5～6所示的第三引物对中的至少一对。2.根据权利要求1所述的引物组，其特征在于，所述第一引物对的靶标序列如seq id no.7所示，所述第二引物对的靶标序列如seq id no.8所示，所述第三引物对的靶标序列如seq id no.9所示。3.一种鉴定罗氏沼虾性别的试剂盒，包含如seq id no.1～2所示的第一引物对、如seq id no.3～4所示的第二引物对和如seq id no.5～6所示的第三引物对中的至少一对。4.一种罗氏沼虾的性别鉴定方法，包括以下步骤：提取罗氏沼虾肌肉组织的基因组dna；pcr扩增所述基因组dna，利用如seq id no.1～2所示的第一引物对、如seq id no.3～4所示的第二引物对和如seq id no.5～6所示的第三引物对中的至少一对进行pcr扩增得到扩增产物；检测所述扩增产物，根据检测结果确定所述罗氏沼虾的性别。5.根据权利要求4所述的性别鉴定方法，其特征在于，使用所述第一引物对扩增所述基因组dna，对扩增产物进行电泳检测；若电泳条带包括一545bp的条带，则罗氏沼虾为雄性；若电泳条带包括一545bp的条带和一390bp的条带，则罗氏沼虾为雌性。6.根据权利要求4所述的性别鉴定方法，其特征在于，使用所述第二引物对扩增所述基因组dna，对扩增产物进行电泳检测；若电泳条带包括一119bp条带，则罗氏沼虾为雌性；若电泳条带未扩增出条带，则罗氏沼虾为雄性。7.根据权利要求4所述的性别鉴定方法，其特征在于，使用所述第二引物对扩增所述基因组dna，对扩增产物进行定量分析，相对表达量大的样本对应的罗氏沼虾为超雌性，相对表达量小的样本对应的罗氏沼虾为雌性，无表达量的样本对应的罗氏沼虾为雄性个体。8.根据权利要求4所述的性别鉴定方法，其特征在于，使用所述第三引物对扩增所述基因组dna，对扩增产物进行定量分析，相对表达量大的样本对应的罗氏沼虾为雄性，相对表达量小的样本对应的罗氏沼虾为雌性，无表达量的样本对应的罗氏沼虾为超雌性个体。9.根据权利要求4所述的性别鉴定方法，其特征在于，所述pcr扩增的扩增体系包括：8.5μl mix体系、各0.25μl 10μm的上下游引物，1μl100 ng/μl的基因组dna作为模板；其中，所述mix体系包含100mm kcl、20mm tris
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cl、3mm mgcl2、0.4mm dntp混合物、0.1u/μltaq dna聚合酶；所述pcr扩增程序为，依次进行的95℃处理5min、95℃处理30s和60℃处理30s，共30个循环后，继续依次进行72℃处理30s和72℃处理10min。10.权利要求1或2所述的引物组、权利要求3所述的试剂盒在鉴定罗氏沼虾性别、杂交育种或基因分型中的应用。

技术总结
本申请公开了用于PCR扩增罗氏沼虾性染色体片段的引物组，包括如SEQ ID NO.1～2所示的第一引物对、如SEQ ID NO.3～4所示的第二引物对和如SEQ ID NO.5～6所示的第三引物对中的至少一对。该引物组能够有效扩增出特异性片段，根据这些片段能够有效鉴别罗氏沼虾的性别，甚至能够区分雄性、雌性和超雌性基因型，为其杂交育种和基因分型提供了帮助。其杂交育种和基因分型提供了帮助。其杂交育种和基因分型提供了帮助。


技术研发人员：刘雪 邱高峰 马克异
受保护的技术使用者：上海海洋大学
技术研发日：2021.10.25
技术公布日：2022/1/3