1.本发明属于医药领域，具体涉及可用作ret抑制剂的吡唑[1，5-a]吡啶类化合物、该类化合物的制备方法、含有该类化合物的药物组合物以及该类化合物和其药物组合物在治疗由ret介导的疾病中的应用。
背景技术：
：：[0002]转染重排基因即ret(rearrangedduringtransfection)基因为原癌基因，位于10号染色体。ret基因所编码的ret蛋白是一种存在于细胞膜上的受体酪氨酸激酶(rtk)，属于钙黏蛋白超家族成员。ret的配体是胶质源性神经营养因子家族，包括glialcellline-derivedneurotrophicfactor(gdnf)、neurturin(nrtn)、artemin(artn)和persephin(pspn)。当配体与ret的胞外区域结合后，会导致ret二聚化和胞内激酶域自身磷酸化，从而激活ret，然后启动多条下游信号通路如ras/mapk/erk、pi3k/akt、jak/stat等发挥细胞增殖、迁移与分化的作用。[0003]ret基因的异常(包括融合和点突变)会导致ret信号通路过度激活和不受控制的细胞增长，与多种肿瘤的发生和进展密切相关。ret基因融合在非小细胞肺癌(nsclc)患者中的发生率约为1％～2％，在甲状腺乳头状癌(ptc)患者中的发生率为10％～20％；最常见的融合伴侣包括kif5b、trim33、ccdc6和ncoa4。ret基因点突变在甲状腺髓样癌(mtc)患者中的发生率为60％左右；常见的突变位点包括c634r、m918t、v804l、v804m、g810r等。此外，在结直肠癌、乳腺癌、胰腺癌和其他癌症中，也观察到低频率的ret融合；在携带egfr突变的nsclc患者中也观察到ret融合。[0004]目前针对ret基因的靶向药，包括(1)靶向多个靶点的多激酶抑制剂类药物，如卡博替尼(cabozantinib)、凡德他尼(vandetanib)、乐伐替尼(lenvatinib)等，虽能够抑制ret的活性，但由于选择性不高，通常会发生脱靶效应导致的特别是vegfr抑制相关的严重毒副作用，限制了临床应用；(2)选择性靶向ret基因的药物，如blu-667、loxo-292，其对野生型和突变型(如m918t、v804l/m等)的ret、以及常见的kif5b-ret融合和ccdc6-ret融合等都有很好的抑制活性，且毒性相对较小。[0005]blu-667于wo2017079140a1中公开，由blueprintmedicines公司开发，其结构如下，目前已向fda递交了新药上市滚动申请。loxo-292于wo2018071447a1中公开，由loxooncology开发，其结构如下，已于2020年5月获fda批准上市；但文献(journalofthoraciconcology，volume15，issue4，april2020，pages541-549)中报道有ret融合nsclc患者产生了retg810r耐药突变，导致loxo-292耐药。[0006][0007]此外，在胃肠道病症如肠易激综合征(irritablebowelsyndrome，ibs)中，也证实了异常ret表达和/或活性。[0008]开发新的有效、低毒性的选择性ret小分子抑制剂，用于治疗由ret介导的疾病，是人类所需。技术实现要素：[0009]本发明提供了一种结构新颖的吡唑[1，5-a]吡啶类化合物或其药学上可接受的盐，是一类选择性ret抑制剂，能够有效抑制野生型ret、突变型ret特别是g810r突变型ret、以及kif5b-ret和ccdc6-ret等ret融合，且安全性好，可用于治疗由ret介导的疾病，例如癌症和肠易激综合征。[0010]本发明提供了下述式(i)所示的化合物或其药学上可接受的盐，[0011][0012]其中：[0013]x选自cr6或n；[0014]y选自cr6或n；[0015]z选自cr6或n；[0016]其中x、y、z中的0、1或2个为n；[0017]r1选自氢、6-10元芳基或5-12元杂芳基，其中所述6-10元芳基或5-12元杂芳基各自任选地被1、2、3或4个各自独立地选自羟基、卤素、c1-6烷基、c1-6烷氧基、卤代c1-6烷基、卤代c1-6烷氧基、羟基c1-6烷基、3-6元环烷基、氰基、-nr7r8或-o-(ch2)n-nr7r8的取代基所取代；[0018]r2选自氢、c1-4烷基或卤代c1-4烷基；[0019]r3选自氢、c1-6烷基、3-6元环烷基、3-8元杂环基或5-12元杂芳基，其中所述c1-6烷基、3-6元环烷基、3-8元杂环基或5-12元杂芳基各自任选地被1、2、3或4个各自独立地选自卤素、c1-4烷基、c1-4烷氧基、卤代c1-4烷基、卤代c1-4烷氧基、氰基、羟基、羟基c1-4烷基、ꢀ-c(＝o)-nr7r8、-so2-c1-4烷基、5-6元杂芳基或3-6元杂环基的取代基所取代，其中所述5-6元杂芳基或3-6元杂环基各自任选地被1、2或3个各自独立地选自卤素、羟基、c1-4烷基、c1-4烷氧基-(ch2)m-或-c(＝o)-c1-4烷基的取代基所取代；[0020]r4选自氢、c1-4烷基或卤代c1-4烷基；[0021]r5选自氢、卤素、氰基、c1-4烷基或卤代c1-4烷基；[0022]每个r6独立地选自h、c1-4烷基、c1-4烷氧基、卤代c1-4烷基或卤素；[0023]每个r7独立地选自h、c1-4烷基或卤代c1-4烷基；[0024]每个r8独立地选自h、c1-4烷基或卤代c1-4烷基；[0025]n选自1、2或3；[0026]m选自0、1、2或3。[0027]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述x选自cr6或n，y选自cr6或n，z选自cr6或n，其中x、y、z中的0或1个为n；其中每个r6独立地选自h、c1-4烷基、卤代c1-4烷基或卤素。[0028]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述x为cr6，y为cr6，z为cr6；其中每个r6独立地选自h、c1-4烷基、卤代c1-4烷基或卤素。[0029]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述x为cr6，y为cr6，z为cr6；其中每个r6独立地选自h、甲基、乙基、一氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、cf3ch2-、chf2ch2-、ch2fch2-、f、cl或br。[0030]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述x为cr6，y为cr6，z为cr6，其中每个r6为h。[0031]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述r1选自苯基或5-6元杂芳基，其中所述苯基或5-6元杂芳基各自任选地被1、2或3个各自独立地选自羟基、卤素、c1-6烷基、c1-6烷氧基、卤代c1-6烷基、卤代c1-6烷氧基或氰基的取代基所取代。[0032]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述r1选自苯基或5-6元杂芳基，其中所述苯基或5-6元杂芳基各自任选地被1、2或3个各自独立地选自羟基、卤素、c1-4烷基、c1-4烷氧基、卤代c1-4烷基或卤代c1-4烷氧基的取代基所取代。[0033]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述r1选自苯基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、吡咯基、咪唑基或噻唑基，其中所述苯基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、吡咯基、咪唑基或噻唑基各自任选地被1、2或3个各自独立地选自羟基、卤素、c1-4烷基、c1-4烷氧基、卤代c1-4烷基或卤代c1-4烷氧基的取代基所取代。[0034]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述r1选自苯基、自苯基、其中所述苯基、各自任选地被1、2或3个各自独立地选自羟基、f、cl、br、c1-4烷基、c1-4烷氧基、卤代c1-4烷基或卤代c1-4烷氧基的取代基所取代。[0035]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述r1选自苯基、自苯基、其中所述苯基、其中所述苯基、各自任选地被1、2或3个各自独立地选自羟基、f、cl、br、甲基、乙基、正丙基、异丙基、甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、一氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、cf3ch2-、chf2ch2-、ch2fch2-、一氟甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、cf3ch2-o-、chf2ch2-o-或ch2fch2-o-的取代基所取代。[0036]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述r1选自苯基或吡啶基，其中所述苯基或吡啶基各自任选地被1、2或3个各自独立地选自羟基、卤素、c1-4烷基、c1-4烷氧基、卤代c1-4烷基或卤代c1-4烷氧基的取代基所取代。[0037]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述r1选自苯基、其中所述苯基、其中所述苯基、各自任选地被1、2或3个各自独立地选自羟基、f、cl、br、甲基、乙基、正丙基、异丙基、甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、一氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、cf3ch2-、chf2ch2-、ch2fch2-、一氟甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、cf3ch2-o-、chf2ch2-o-或ch2fch2-o-的取代基所取代。[0038]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述r1选自[0039]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述r1选自自[0040][0041]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述r2选自氢或c1-4烷基。[0042]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述r2为氢。[0043]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述r4选自氢或c1-4烷基。[0044]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述r4为氢。[0045]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述r5选自氢、卤素或氰基。[0046]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述r5为氰基。[0047]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述r3选自氢、c1-6烷基或3-6元环烷基，其中所述c1-6烷基或3-6元环烷基各自任选地被1、2或3个各自独立地选自卤素、c1-4烷基、c1-4烷氧基、卤代c1-4烷基、卤代c1-4烷氧基、氰基、羟基、-so2-c1-4烷基、5-6元杂芳基或3-6元杂环基的取代基所取代，其中所述5-6元杂芳基或3-6元杂环基各自任选地被1、2或3个各自独立地选自卤素、羟基或c1-4烷基的取代基所取代。[0048]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述r3选自氢、c1-4烷基、环丙基、环丁基或环戊基，其中所述c1-4烷基、环丙基、环丁基或环戊基各自任选地被1、2或3个各自独立地选自f、cl、br、c1-4烷基、c1-4烷氧基、卤代c1-4烷基、卤代c1-4烷氧基、氰基、羟基、-so2-c1-4烷基、烷基、烷基、的取代基所取代，其中所述，其中所述，其中所述各自任选地被1、2或3个各自独立地选自f、cl、br、羟基或c1-4烷基的取代基所取代。[0049]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述r3选自氢、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、环丙基、环丁基或环戊基，其中所述甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、环丙基、环丁基或环戊基各自任选地被1、2或3个各自独立地选自f、cl、br、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、一氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、cf3ch2-、chf2ch2-、ch2fch2-、一氟甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、cf3ch2-o-、chf2ch2-o-、ch2fch2-o-、氰基、羟基、-so2-ch3、-so2-ch2ch3、、、的取代基所取代，其中所述所述各自任选地被1、2或3个各自独立地选自f、cl、br、羟基、甲基或乙基的取代基所取代。[0050]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述r3选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、一氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、甲基、[0051]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述r3选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、一氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、甲基、[0052]本发明还提供了如下所示的化合物或其药学上可接受的盐：[0053][0054][0055][0056]本发明式(i)所示化合物可以通过本领域技术人员所熟知的各种合成方法来制备，没有特别限定，例如可以通过本发明提供的如下方案一或方案二的方法来制备，应了解的是本发明式(i)所示化合物的合成方法并不局限于方案一和方案二，本领域技术人员可进行常规的替换和改进。[0057]方案一：[0058][0059]其中，r1、r2、r3、r4、r5、x、y、z如上文所定义；l为离去基团，如卤素，优选为i；p为氨基保护基，各p可相同或不同，各自独立地优选叔丁氧羰基(boc)、苄氧羰基(cbz)、苄基(bn)。[0060]以化合物a-1和化合物a-2为起始原料，发生suzuki偶联反应得到化合物a-3；化合物a-3与化合物a-4发生取代反应得到中间体1；中间体1脱保护得到化合物a-5；化合物a-5与化合物a-6发生还原胺化反应得到中间体2；中间体2与发生偶联反应得到式(i)所示化合物。[0061]或者，在制备r4为h的式(i)化合物时，也可以使中间体2与p-nh2发生偶联反应得到化合物a-7；化合物a-7与r3-l发生取代反应得到化合物a-8；化合物a-8脱保护得到式(i)所示化合物。[0062]上述方案一中，suzuki偶联反应是在碱、催化剂存在下进行，其中所述催化剂包括但不限于pd(dppf)cl2、pd(pph3)4、pdcl2等，所述碱包括但不限于碳酸铯、碳酸钾、碳酸钠、碳酸锂、醋酸钾、醋酸钠、叔丁醇钾、叔丁醇钠等；制备中间体1和化合物a-8的取代反应，是在碱的存在下进行，所述碱包括但不限于碳酸铯、碳酸钾、碳酸钠、三乙胺等；中间体1和化合物a-8的脱保护反应是在酸性条件下或在催化剂/h2存在下进行，所述酸性条件包括但不限于hcl/meoh、hcl/ea、三氟乙酸等，所述催化剂包括但不限于pd/c、pdcl2/c、pd(oh)2/c等；制备中间体2的还原胺化反应是在还原剂存在下进行，所述还原剂包括但不限于nabh(oac)3、nabh4、nabh3cn等；中间体2与或p-nh2发生的偶联反应是在催化剂、碱存在下进行，所述催化剂包括但不限于pd2(dba)3/xantphos、pd2(dba)3/brettphos、pd(oac)2/xantphos等，所述碱包括但不限于碳酸铯、碳酸钾、碳酸钠、碳酸锂、醋酸钾、醋酸钠、叔丁醇钾、叔丁醇钠等。[0063]方案二：[0064][0065]其中，r1、r2、r3、r4、r5、x、y、z如上文所定义；l为离去基团，如卤素，优选为i；p为氨基保护基，各p可相同或不同，各自独立地优选叔丁氧羰基(boc)、苄氧羰基(cbz)、苄基(bn)。[0066]中间体1与发生偶联反应得到化合物b-1；化合物b-1脱保护得到中间体3；中间体3与化合物a-6发生还原胺化反应得到式(i)所示化合物。[0067]或者，在制备r4为h的式(i)化合物时，也可以使中间体1与p-nh2发生偶联反应得到化合物b-2；化合物b-2与r3-l发生取代反应得到化合物b-3；化合物b-3脱保护得到中间体3；中间体3与化合物a-6发生还原胺化反应得到式(i)所示化合物。[0068]上述方案二中，中间体1与或p-nh2发生的偶联反应是在催化剂、碱存在下进行，所述催化剂包括但不限于pd2(dba)3/xantphos、pd2(dba)3/brettphos、pd(oac)2/xantphos等，所述碱包括但不限于碳酸铯、碳酸钾、碳酸钠、碳酸锂、醋酸钾、醋酸钠、叔丁醇钾、叔丁醇钠等；化合物b-1和化合物b-3的脱保护是在酸性条件下或在催化剂/h2存在下进行，所述酸性条件包括但不限于hcl/meoh、hcl/ea、三氟乙酸等，所述催化剂包括但不限于pd/c、pdcl2/c、pd(oh)2/c等；中间体3与化合物a-6发生的还原胺化反应是在还原剂存在下进行，所述还原剂包括但不限于nabh(oac)3、nabh4、nabh3cn等；制备化合物b-3的取代反应，是在碱的存在下进行，所述碱包括但不限于碳酸铯、碳酸钾、碳酸钠、三乙胺等。[0069]本发明还提供了中间体化合物，包括如下结构所示的化合物a-7、化合物a-8、化合物b-1、化合物b-2、化合物b-3、中间体3，[0070][0071]其中，r1、r2、r3、r4、r5、x、y、z如上文所定义；p为氨基保护基，各p可相同或不同，各自独立地优选叔丁氧羰基(boc)、苄氧羰基(cbz)、苄基(bn)。[0072]本发明还进一步提供了如下结构的中间体化合物：[0073][0074]本发明还提供了药物组合物，包括上述化合物或其药学上可接受的盐以及任选的药学上可接受的载体。本发明的药物组合物包括任选的药学上可接受的载体是指，该组合物可以含有药学上可接受的载体，也可以不含有药学上可接受的载体。[0075]本发明还提供了上述化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物在制备用于治疗由ret介导的疾病的药物中的应用。[0076]本发明还提供了上述化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物在制备用于治疗由ret介导的疾病的药物中的应用。其中所述ret包括野生型ret、突变型ret、ret融合，所述突变型ret包括但不限于g810r突变型ret、m918t突变型ret、v804l突变型ret、v804m突变型ret，优选g810r突变型ret，所述ret融合包括但不限于kif5b-ret融合、ccdc6-ret融合，优选kif5b-ret融合；所述疾病包括癌症、肠易激综合征。[0077]本发明还提供了上述化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物在制备用于治疗由野生型ret、突变型ret、ret融合介导的疾病的药物中的应用；其中所述突变型ret包括但不限于g810r突变型ret、m918t突变型ret、v804l突变型ret、v804m突变型ret，优选g810r突变型ret，所述ret融合包括但不限于kif5b-ret融合、ccdc6-ret融合，优选kif5b-ret融合；所述疾病包括癌症、肠易激综合征。[0078]本发明还提供了上述化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物在制备用于治疗由ret介导的癌症、肠易激综合征的药物中的应用。其中所述ret包括野生型ret、突变型ret、ret融合，所述突变型ret包括但不限于g810r突变型ret、m918t突变型ret、v804l突变型ret、v804m突变型ret，优选g810r突变型ret，所述ret融合包括但不限于kif5b-ret融合、ccdc6-ret融合，优选kif5b-ret融合。[0079]本发明还提供了上述化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物在制备用于治疗由野生型ret、突变型ret、ret融合介导的癌症、肠易激综合征的药物中的应用。其中所述突变型ret包括但不限于g810r突变型ret、m918t突变型ret、v804l突变型ret、v804m突变型ret，优选g810r突变型ret；所述ret融合包括但不限于kif5b-ret融合、ccdc6-ret融合，优选kif5b-ret融合。[0080]本发明还提供了上述化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物在制备用于治疗癌症的药物中的应用。[0081]本发明还提供了上述化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物在制备用于治疗肠易激综合征的药物中的应用。[0082]本发明还提供了一种治疗由ret介导的疾病的方法，所述方法包括对需要的患者施用有效量的上述化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。其中所述ret包括野生型ret、突变型ret、ret融合，所述突变型ret包括但不限于g810r突变型ret、m918t突变型ret、v804l突变型ret、v804m突变型ret，所述ret融合包括但不限于kif5b-ret融合、ccdc6-ret融合；所述疾病包括癌症、肠易激综合征。[0083]本发明还提供了一种治疗癌症的方法，所述方法包括对需要的患者施用有效量的上述化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。[0084]本发明还提供了一种治疗肠易激综合征的方法，所述方法包括对需要的患者施用有效量的上述化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。[0085]本发明所述癌症，包括但不限于小细胞肺癌、非小细胞肺癌、甲状腺乳头状癌、甲状腺髓样癌、甲状腺滤泡状癌、甲状腺未分化癌、复发性甲状腺癌、多发性内分泌瘤形成2a或2b型(分别是men2a或men2b)、肝细胞癌、肺癌、头颈癌、神经胶质瘤、神经母细胞瘤、嗜铬细胞瘤、结肠直肠癌、睾丸癌、前列腺癌、输卵管癌、卵巢癌、宫颈癌、乳腺癌和胰腺癌。[0086]本发明所述肠易激综合征，包括但不限于腹泻主导型、便秘主导型或交替排便模式、功能性胃气胀、功能性便秘、功能性腹泻、非特异性功能性肠病、功能性腹痛综合征、慢性特发性便秘、功能性食管病、功能性胃十二指肠病、功能性肛门直肠疼痛和炎性肠病。[0087]本发明还包含式(i)所示化合物在药学上可接受的盐。所述“药学上可接受的盐”是指相对无毒的本发明化合物的酸加成盐或碱加成盐。所述酸加成盐为本发明式(i)所示化合物与合适的无机酸或者有机酸形成的盐，这些盐可通过使式(i)所示化合物与适宜的有机酸或无机酸在适当的溶剂中进行反应来制备。代表性酸加成盐包括氢溴酸盐、盐酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、亚硫酸盐、乙酸盐、草酸盐、戊酸盐、油酸盐、棕榈酸盐、硬脂酸盐、月硅酸盐、硼酸盐、苯甲酸盐、乳酸盐、硝酸盐、磷酸盐、磷酸氢盐、碳酸盐、碳酸氢盐、甲苯甲酸盐、柠檬酸盐、马来酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、苹果酸盐、抗坏血酸盐、鞣酸盐、扑酸盐、藻酸盐、萘磺酸盐、酒石酸盐、苯甲酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、葡萄糖酸盐、乳糖酸盐和月桂基磺酸盐等。所述碱加成盐为式(i)所示化合物与合适的无机碱或者有机碱形成的盐，这些盐可通过使式(i)所示化合物与适宜的无机碱或者有机碱在适当的溶剂中进行反应来制备。代表性碱加成盐包括例如与碱金属、碱土金属、季铵阳离子形成的盐，例如钠盐、锂盐、钾盐、钙盐、镁盐、四甲基季铵盐、四乙基季铵盐等；胺盐，包括与氨(nh3)、伯胺、仲胺或叔胺形成的盐，如甲胺盐、二甲胺盐、三甲胺盐、三乙胺盐、乙胺盐等。[0088]除了盐的形式，本发明所提供的化合物还存在前药形式。本发明所描述的前药是指可在生理学条件下或通过溶剂分解而转化成本发明所述的生物学活性化合物(如式(i)化合物)的化合物。因此，术语“前药”是指药物可接受的生物学活性化合物的前体。[0089]本发明的化合物可以在一个或多个构成该化合物的原子上包含非天然比例的原子同位素。例如，可用放射性同位素标记化合物，比如氘(d)，氚(3h)，碘-125(125i)或c-14(14c)。本发明的化合物的所有同位素组成的变换，无论放射性与否，都包括在本发明的范围之内。[0090]本发明的化合物可以存在特定的几何或立体异构体形式。本发明设想所有的这类化合物，包括顺式和反式异构体、(-)-和( )-对映体、(r)-ꢀ和(s)-对映体、非对映异构体、(d)-异构体、(l)-异构体，及其外消旋混合物和其他混合物，例如对映异构体或非对映体富集的混合物，所有这些混合物都属于本发明的范围之内。所有这些异构体以及它们的混合物，均包括在本发明的范围之内。[0091]可以通过的手性合成或手性试剂或者其他常规技术制备光学活性的(r)-和(s)-异构体以及d和l异构体。如果想得到本发明某化合物的一种对映体，可以通过不对称合成或者具有手性助剂的衍生作用来制备，其中将所得非对映体混合物分离，并且辅助基团裂开以提供纯的所需对映异构体。或者，当分子中含有碱性官能团(如氨基)或酸性官能团(如羧基)时，与适当的光学活性的酸或碱形成非对映异构体的盐，然后通过本领域所公知的常规方法进行非对映异构体拆分，然后回收得到纯的对映体。此外，对映异构体和非对映异构体的分离通常是通过使用色谱法完成的，所述色谱法采用手性固定相，并任选地与化学衍生法相结合(例如由胺生成氨基甲酸盐)。[0092]本发明中，“药学上可接受的”指其在合理的医学判断范围内，适于接触人类和动物的组织而没有过度毒性、刺激或其它问题或并发症，与合理的益处/风险比相称的那些化合物、物质、组合物和剂型。[0093]本发明中，“药学上可接受的载体”指的是一种或多种相容性固体或液体填料或凝胶物质，它们适合于人使用，而且必须有足够的纯度和足够低的毒性。“相容性”在此指的是组合物中各组份能与本发明的化合物以及它们之间相互掺和，而不明显降低化合物的药效。药理上可以接受的载体部分例子有纤维素及其衍生物(如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素、甲基纤维素、羟丙甲纤维素其及衍生物、醋酸纤维素及其衍生物、纤维素乙酸酯等)、明胶、滑石、固体润滑剂(如硬脂酸、硬脂酸镁/钙、氢化植物油、硬脂酸富马酸钠)、硫酸钙、植物油(如豆油、芝麻油、花生油、橄榄油等)、多元醇(如丙二醇、甘油、甘露醇、山梨醇等)、乳化剂、润湿剂(如十二烷基硫酸钠)、着色剂、调味剂、稳定剂、抗氧化剂、防腐剂等。[0094]本发明中，针对药物或药理学活性剂而言，“有效量”是指无毒的但能达到预期效果的药物或药理学活性剂的足够用量。有效量的确定因人而异，取决于患者的年龄、体重和病症情况，也取决于具体的活性物质，个案中合适的有效量可以由本领域技术人员根据常规试验确定。[0095]本发明中，“活性成分”、“活性物质”或“活性剂”是指一种化学实体，它可以有效地治疗目标紊乱、疾病或病症。[0096]本发明中，“患者”、“个体”或“对象”包括人、动物、脊椎动物、哺乳动物、啮齿动物(例如豚鼠、仓鼠、大鼠、小鼠)、鼠科动物(例如小鼠)、犬科动物(例如狗)、灵长目动物、类人猿(如猴或无尾猿)、猴(如狨猴、狒狒)、无尾猿(例如大猩猩、黑猩猩、猩猩、长臂猿)。在一些实施方案中，“患者”为人。[0097]本发明中，“治疗”意为将本发明所述化合物或制剂进行给药以预防、改善或消除疾病或与所述疾病相关的一个或多个症状，且包括：[0098](i)预防疾病或疾病状态在哺乳动物中出现，特别是当这类哺乳动物易患有该疾病或疾病状态，但尚未被诊断为已患有该疾病或疾病状态时；[0099](ii)抑制疾病或疾病状态，即，遏制其发展；[0100](iii)缓解疾病或疾病状态，即，使该疾病或疾病状态消退。[0101]本发明中，“任选”、“任选的”或“任选地”是指随后描述的事件或状况可以发生或不发生，该描述同时包括该事件或状况发生和不发生的情况。例如，“任选地被r取代”是指可以被r取代，也可以不被r取代，且该描述同时包括被r取代和不被r取代的情况。[0102]本发明中，“被取代的”或“被取代”是指基团中的一个或多个氢原子，优选为1-5个氢原子，更优选为1、2、3或4个氢原子彼此独立地被相应数目的取代基取代，只要取代后的化合物是稳定的。[0103]本发明中，“独立地”或“独立的”指其中多于一个取代基选自大量可能的取代基，那些取代基可以相同或不同。例如，“rx选自-or或-n(r)2；每个r独立地选自h或c1-c4烷基”，其中每一个取代基r都是独立的，它们可以相同也可以不同。[0104]本发明中，“基”和“基团”表示一价基团或者根据需要的符合化合价的二价以上的基团，例如“环烷基”包括从其中去除一个氢原子而得到的一价基团，也包括从其中的相同的碳原子或不同的两个以上碳原子上去除两个以上氢原子而得到的二价以上的基团。当“环烷基”作为末端基团时，其自然为一价基团，当环烷基在结构中作为连接基团时，其为二价以上的基团。本发明中，一价或二价以上的基团通常是指一价基团或二价基团，但是根据需要，该基团可以为更高的化合价(例如三价、四价、五价、六价等)。[0105]本发明中，“cd-e”(d和e表示1以上的整数，d＜e)包括d至e个碳的任何一种具体情况，例如c1-6包括c1、c2、c3、c4、c5、c6，也包括d至e中的任何一个范围，例如c1-6包括c1-3、c1-4、c1-5、c2-5、c2-4、c3-6等；同理，“d-e元”(d和e表示1以上的整数，d＜e)表示环上原子数为d至e个，例如3-6元环包括3元环、4元环、5元环、6元环，也包括d至e中的任何一个范围，例如3-6元环包括3-4元环、3-5元环、4-6元环、4-5元环等。[0106]本发明中，“卤素”是指氟、氯、溴、碘等，优选氟、氯、溴，更优选氟、氯。[0107]本发明中，“c1-6烷基”是指从含有1-6个碳原子的烷烃部分去除一个以上氢原子而衍生得到的直链或支链的烷基，具体的，c1-6烷基包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、2-甲基丁基、新戊基、1-乙基丙基、正己基、异己基、4-甲基戊基、3-甲基戊基、2-甲基戊基、1-甲基戊基、3，3-二甲基丁基、2，2-二甲基丁基、1，1-二甲基丁基、1，2-二甲基丁基、1，3-二甲基丁基、2，3-二甲基丁基、2-乙基丁基、1-甲基-2-甲基丙基等；所述“c1-4烷基”是指从含有1-4个碳原子的烷烃部分去除一个以上氢原子而衍生得到的直链或支链的烷基，具体的，c1-4烷基包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基。[0108]本发明中，“c1-6烷氧基”是指上文所定义的“c1-6烷基”通过氧原子与分子其余部分连接的基团，即“c1-6烷基-o-”基团，包括但不限于，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、新戊氧基、正己氧基等；所述的“c1-4烷氧基”是指上文所定义的“c1-4烷基”通过氧原子与分子其余部分连接的基团，即“c1-4烷基-o-”基团，包括但不限于，甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基。[0109]本发明中，“卤代c1-6烷基”是指一个或多个(优选1-5个，更优选1、2或3个)卤素原子取代上文所定义的“c1-6烷基”上相应个数的氢原子所形成的基团，其中当具有多个卤素原子取代时各卤素原子可以相同或不同，具体的，卤代c1-6烷基包括但不限于一氟甲基、三氟甲基、三氯甲基、二氟甲基、二氯甲基、一氯甲基、cf3ch2-、chf2ch2-、ch2fch2-、ch3chf-、ch2fchcl-、cf3ch2ch2-、cf3ch2ch(ch3)ch2-等；“卤代c1-4烷基”是指一个或多个(优选1-5个，更优选1、2或3个)卤素原子取代上文所定义的“c1-4烷基”上相应个数的氢原子所形成的基团，其中当具有多个卤素原子取代时各卤素原子可以相同或不同，具体的，包括但不限于一氟甲基、三氟甲基、三氯甲基、二氟甲基、二氯甲基、一氯甲基、cf3ch2-、chf2ch2-、ch2fch2-、ch3chf-、ch2fchcl-等。[0110]本发明中，“卤代c1-6烷氧基”是指一个或多个(优选1-5个，更优选1、2或3个)卤素原子取代上文所定义的“c1-6烷氧基”上相应个数的氢原子所形成的基团，其中当具有多个卤素原子取代时各卤素原子可以相同或不同，具体的，包括但不限于一氟甲氧基、三氟甲氧基、三氯甲氧基、二氟甲氧基、二氯甲氧基、一氯甲氧基、cf3ch2-o-、chf2ch2-o-、ch2fch2-o-、cf3ch2ch2-o-等；“卤代c1-4烷氧基”是指一个或多个(优选1-5个，更优选1、2或3个)卤素原子取代上文所定义的“c1-4烷氧基”上相应个数的氢原子所形成的基团，其中当具有多个卤素原子取代时各卤素原子可以相同或不同，具体的，包括但不限于一氟甲氧基、三氟甲氧基、三氯甲氧基、二氟甲氧基、二氯甲氧基、一氯甲氧基、cf3ch2-o-、chf2ch2-o-、ch2fch2-o-、cf3ch2ch2-o-等。[0111]本发明中，“羟基c1-6烷基”是指一个或多个(优选1、2或3个)羟基取代上文所定义的“c1-6烷基”上相应个数的氢原子所形成的基团，包括但不限于羟基甲基、1-羟基乙基、2-羟基乙基、2-羟基丙基、3-羟基丙基、2，3-二羟基丙基、2-羟基-2-甲基丙基、4-羟基丁基、5-羟基戊基、2-ꢀ羟基甲基-1-羟基丙基；“羟基c1-4烷基”是指一个或多个(优选1、2或3个)羟基取代上文所定义的“c1-4烷基”上相应个数的氢原子所形成的基团，包括但不限于羟基甲基、1-羟基乙基、2-羟基乙基、2-羟基丙基、3-羟基丙基、2，3-二羟基丙基、2-羟基-2-甲基丙基、4-羟基丁基。[0112]本发明中，“环原子”是指形成环的原子，包括但不限于c、n、o、p和s；“环碳原子”是指环原子c；“环杂原子”是指除c原子之外的环原子，包括但不限于环原子n、o、p和s。[0113]本发明中，“环烷基”是指饱和的或部分不饱和的环状烃基，它可以是一价基团或二价以上的基团，包括单环环烷基和多环环烷基，多环环烷基包括螺环环烷基、稠环环烷基和桥环环烷基，所述“螺环环烷基”是指单环之间共用一个环碳原子(称螺原子)的多环环烷基，所述“稠环环烷基”是指基团中的每个环与其他环共用相邻的一对环碳原子的多环环烷基，所述“桥环环烷基”是指任意两个环共用两个不直接连接的环碳原子的多环环烷基。本发明中，“3-6元环烷基”是指包括3至6个环碳原子的环烷基，包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环己二烯基等。[0114]本发明中，“杂环基”是指其中一个或多个(优选1个、2个、3个或4个)环原子为选自n、o或s的环杂原子的饱和或部分不饱和的环状烃基，它可以是一价基团或二价以上的基团，包括单环杂环基和多环杂环基，多环杂环基包括螺环杂环基、稠环杂环基和桥环杂环基，所述“螺环杂环基”是指单环之间共用一个环原子(称螺原子)的多环杂环基，所述“稠环环烷基”是指基团中的每个环与其他环共用相邻的一对环原子的多环杂环基，所述“桥环环烷基”是指任意两个环共用两个不直接连接的环原子的多环杂环基。另，杂环基同时还包括环原子c、s被氧代的情况，如环原子c、s被c(＝o)、s(＝o)、s(＝o)2替代。本发明中，“3-8元杂环基”是指包括3至8个环原子的杂环基，优选含有1个、2个或3个选自n、o或s的环杂原子，具体的，3-8元杂环基包括但不限于氮杂环丙基、氧杂环丙基、氮杂环丁基、氧杂环丁基、硫杂环丁基、四氢呋喃基、四氢吡咯基、吡咯烷酮基、四氢噻吩基、咪唑烷基、吡唑烷基、1，2-噁唑烷基、1，3-噁唑烷基、1，2-噻唑烷基、1，3-噻唑烷基、四氢-2h-ꢀ吡喃基、四氢-2h-噻喃基、哌啶基、哌啶酮基、哌嗪基、吗啉基、1，4-ꢀ二氧杂环己烷基、1，4-氧硫杂环己烷基、4，5-二氢异噁唑基、4，5-二氢噁唑基、2，5-二氢噁唑基、2，3-二氢噁唑基、3，4-二氢-2h-吡咯基、2，3-二氢ꢀ-1h-吡咯基、2，5-二氢-1h-咪唑基、4，5-二氢-1h-咪唑基、4，5-二氢-1h-ꢀ吡唑基、4，5-二氢-3h-吡唑基、4，5-二氢噻唑基、2，5-二氢噻唑基、2h-ꢀ吡喃基、4h-吡喃基、2h-噻喃基、4h-噻喃基、2，3，4，5-四氢吡啶基、1，2-ꢀ异噁嗪基、1，4-异噁嗪基或6h-1，3-噁嗪基等，优选优选优选等。本发明中，“3-6元杂环基”是指包括3至6个环原子的杂环基，优选含有1个、2个或3个选自n、o或s的环杂原子，具体的，3-6元杂环基包括但不限于氮杂环丙基、氧杂环丙基、氮杂环丁基、氧杂环丁基、硫杂环丁基、四氢呋喃基、四氢吡咯基、吡咯烷酮基、四氢噻吩基、咪唑烷基、吡唑烷基、1，2-噁唑烷基、1，3-噁唑烷基、1，2-噻唑烷基、1，3-噻唑烷基、四氢-2h-吡喃基、四氢-2h-噻喃基、哌啶基、哌啶酮基、哌嗪基、吗啉基、1，4-二氧杂环己烷基、1，4-氧硫杂环己烷基、4，5-二氢异噁唑基、4，5-二氢噁唑基、2，5-二氢噁唑基、2，3-ꢀ二氢噁唑基、3，4-二氢-2h-吡咯基、2，3-二氢-1h-吡咯基、2，5-二氢-1h-ꢀ咪唑基、4，5-二氢-1h-咪唑基、4，5-二氢-1h-吡唑基、4，5-二氢-3h-吡唑基、4，5-二氢噻唑基、2，5--二氢噻唑基、2h-吡喃基、4h-吡喃基、2h-噻喃基、4h-噻喃基、2，3，4，5-四氢吡啶基、1，2-异噁嗪基、1，4-异噁嗪基或6h-1，3-ꢀ噁嗪基等，优选等。[0115]本发明中，“芳基”是指具有芳香性的环状烃基，它可以是一价基团或二价以上的基团，包括单环芳基和稠环芳基，“稠环芳基”是指基团中的每个环与其他环共用相邻的一对环碳原子的含有多个环(优选含有2个或3个环)的芳基。本发明中，“6-10元芳基”是指包括6至10个环碳原子的芳基，包括苯基、萘基。[0116]本发明中，“杂芳基”是指其中一个或多个(优选1-5个，更优选1个、2个、3个或4个)环原子为选自n、o或s的环杂原子的具有芳香性的环状烃基，它可以是一价基团或二价以上的基团，包括单环杂芳基和稠环杂芳基，所述“稠环杂芳基”是指基团中的每个环与其他环共用相邻的一对环原子的含有多个环(优选含有2个或3个环)的杂芳基。本发明中，“5-12元杂芳基”是指包括5至12个环原子的杂芳基，优选含有1个、2个、3个或4个选自n、o或s的环杂原子，具体的，5-12元杂芳基包括但不限于呋喃基、咪唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、噁二唑基、噁唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吡唑基、吡咯基、四唑基、噻二唑基、噻吩基、三唑基、三嗪基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噁二唑基、苯并噻二唑基、苯并噻唑基、呋喃并吡啶基、吲唑基、吲哚基、异吲哚基、异喹啉基、嘌呤基、喹啉基、喹喔啉基、噻吩并吡啶基等，优选优选优选优选等。本发明中，“5-6元杂芳基”是指包括5至6个环原子的杂芳基，优选含有1个、2个、3个或4个选自n、o或s的环杂原子，具体的，5-6元杂芳基包括但不限于呋喃基、咪唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、噁二唑基、噁唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吡唑基、吡咯基、四唑基、噻二唑基、噻吩基、三唑基、三嗪基等，优选优选等。[0117]本发明中，“-c(＝o)-c1-4烷基”是指上文所定义的“c1-4烷基”与ꢀ-c(＝o)-连接所形成的基团；“-so2-c1-4烷基”是指上文所定义的“c1-4烷基”与-so2-连接所形成的基团。[0118]本发明中，所述“一个以上”是指取代基的数量可以为所取代基团所有化学上可以被取代的位置的数量，优选1-6个，更有选1-5个，更优选1-3个，更优选1-2个，更优选为1个。[0119]本发明中，“氨基保护基”是指连接在氨基上且在一定条件下容易脱除的化学基团，其包括但不限于烷氧羰基类、酰基类、烷基类；例如叔丁氧羰基、苄氧羰基、芴甲氧羰基、烯丙氧羰基、邻苯二甲酰基、苄基、对甲氧基苄基、三苯甲基等。本领域技术人员可以参照本领域常用教科书greene’sprotectivegroupsinorganicsynthesis(4thedition)进行适当的选择和操作。[0120]本发明所述的药物组合物，可以采用本领域众所周知的方法来制备，如常规的混合法、溶解法、制粒法、制糖衣药丸法、磨细法、乳化法和冷冻干燥法等。本发明所述药物组合物可以通过任何方便的给药途径施用给治疗对象，包括但不限于，经口服、直肠、肠胃外(例如注射，包括皮下、皮内、肌肉内、静脉内等)、局部(包括例如透皮、鼻内、眼部、口腔和舌下)、肺部(例如利用气溶胶经口或鼻的吸入或吹入治疗)等。[0121]适于口服给药的固体剂型包括片剂、丸剂、胶囊剂、散剂、粉剂、颗粒剂等。制备这些固体剂型时，除了本发明所述的化合物或其药学上可接受的盐外，可以加入本领域常规采用的赋形剂、填料或增容剂、粘合剂、崩解剂、稳定剂、润湿剂、吸附剂、润滑剂或包封材料中的一种或多种。[0122]适于口服给药的液体剂型包括溶液剂、悬浮剂、乳浊剂、糖浆剂或酊剂等。除了本发明所述的化合物或其药学上可接受的盐外，液体剂型可包含本领域常规采用的稀释剂、增溶剂、乳化剂、润湿剂、悬浮剂、甜味剂、矫味剂、芳香剂或防腐剂中的一种或多种。[0123]适于局部给药的剂型包括软膏剂、散剂、贴剂、滴剂、喷射剂、吸入剂等，作为活性成分的本发明所述化合物或其药学上可接受的盐在无菌条件下和药学上可接受的载体一起混合。[0124]适于直肠给药的剂型包括栓剂，包括本发明所述的化合物或其药学上可接受的盐以及合适的基质。[0125]适于肠胃外注射的剂型包括生理上可接受的无菌含水或无水溶液、分散液、悬浮液或乳液，以及用于重新溶解成无菌的可注射溶液或分散液的无菌粉末。[0126]药物制剂优选为单位剂量形式。在该形式中，制剂被细分成含有适当量的活性组分的单位剂量。可以将单位剂量形式包装成含有离散量的制剂的包装，如包装的片剂、胶囊剂。[0127]在治疗患者时，是将有效量的本发明化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物施用于需要治疗的患者(如人)。在一些实施方案中，本发明所述化合物或其药学上可接受的盐的治疗的有效量为约0.01至1000mg/天，优选地约0.1至500mg/天。精确剂量将视给药途径、化合物被施用时的形式、待治疗的受试者(患者)的健康状况和主治医师的经验等而定。[0128]本发明所述的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物也可以与其它抗肿瘤药物、例如化疗药物联合施用，或者与其它治疗如放射治疗或外科手术联合使用，作为手术前或手术后的辅药。[0129]本发明所使用的缩写具有以下含义：[0130]boc：叔丁氧羰基[0131]cbz：苄氧羰基[0132]bn：苄基[0133]pd(dppi)cl2：[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯[0134]pd2(dba)3：三(二亚苄基丙酮)二钯[0135]xantphos：4，5-双二苯基膦-9，9-二甲基氧杂蒽[0136]brettphos：二环己基[3，6-二甲氧基-2′，4′，6′-三异丙基[1，1′-联苯]-2-基]膦[0137]pto2：二氧化铂[0138]pd(pph3)4：四(三苯基膦)钯[0139]pdcl2：二氯化钯[0140]pd(oh)2：氢氧化钯[0141]pd(oac)2：醋酸钯[0142]pd：钯[0143]hcl：氯化氢[0144]hbr：溴化氢[0145]nabh(oac)3：三乙酰氧基硼氢化钠[0146]nabh4：硼氢化钠[0147]nabh3cn：氰基硼氢化钠[0148]dcm：二氯甲烷[0149]meoh：甲醇[0150]ea：乙酸乙酯[0151]cdcl3：氘代氯仿[0152]dmso：二甲基亚砜[0153]tlc：薄层层析附图说明：[0154]图1为实施例12化合物和loxo-292在每天两次10mg/kg给药剂量下的稳转细胞ba/f3kif5b-ret裸小鼠皮下移植瘤的肿瘤体积变化曲线。[0155]图2为实施例12化合物和loxo-292在每天两次30mg/kg给药剂量下的稳转细胞ba/f3kif5b-ret-g810r裸小鼠皮下移植瘤的肿瘤体积变化曲线。具体实施方式[0156]下面结合具体实施例，对本发明的方案进行解释。应理解，这些实施例仅用于举例说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体技术或条件的，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。[0157]i.本发明化合物制备实施例[0158]本发明的化合物结构是通过核磁共振(nmr)或/和液质联用色谱(lc-ms)来确定的。nmr化学位移(δ)以百万分之一(ppm)的单位给出。nmr的测定是用brukeravance-400核磁仪，测定溶剂为氘代二甲基亚砜(dmso-d6)和氘代氯仿(cdcl3)，内标为四甲基硅烷(tms)。[0159]液质联用色谱lc-ms的测定用agilent6410triplequadlc/ms。[0160]薄层层析硅胶板使用烟台黄海hsgf254或青岛gf254硅胶板，tlc采用的规格是0.15mm-0.20mm，薄层层析分离纯化产品采用的规格是0.4mm-0.5mm。柱层析一般使用烟台黄海硅胶200-300目硅胶为载体。[0161]实施例1：6-(2，2-二氟乙胺)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-ꢀ二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0162][0163]步骤1：6-溴-4-(6-氟吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0164][0165]向500ml三口瓶中加入4，6-二溴吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈(33.0g，0.11mol)，2-氟-5-吡啶硼酸(14.1g，0.10mmol)，[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(2.7g，3.70mmol)，二水氟化钾(31.0g，0.33mmol)和150mln，n-二甲基甲酰胺，氩气保护下，60℃反应过夜。反应完冷却至室温，加入500ml水。反应液过滤，滤饼用乙腈、乙酸乙酯淋洗。减压干燥得30g6-溴-4-(6-氟吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈。收率为86％。[0166]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ9.48(d，j＝1.6hz，1h)，8.73(s，1h)，8.51(d，j＝2.5hz，1h)，8.27(td，j＝8.1，2.6hz，1h)，7.86(d，j＝1.6hz，1h)，7.40(dd，j＝8.4，2.8hz，1h).[0167]步骤2：3-(5-(6-溴-3-氰基吡唑[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-氨基甲酸叔丁酯[0168][0169]向250ml三口瓶中加入6-溴-4-(6-氟吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈(4.35g，13.7mmol)，6-(叔丁氧羰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷(3.25g，16.3mmol)，碳酸钾(5.67g，41.1mmol)和60ml二甲亚砜，100℃反应过夜。反应完冷却至室温，加入200ml水。反应液过滤，滤饼用混合溶剂(dcm∶meoh＝10∶1)溶解后抽干，乙腈带水三次，硅胶柱层析得3.4g3-(5-(6-溴-3-氰基吡唑[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-ꢀ基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-氨基甲酸叔丁酯。收率为50％。[0170]msm/z：495.1/497.1[m 1] 。[0171]1hnmr(400mhz，cdcl3)δ8.68(d，j＝1.3hz，1h)，8.36(d，j＝2.1hz，1h)，8.25(s，1h)，7.72(dd，j＝8.8，2.3hz，1h)，7.39(d，j＝1.3hz，1h)，6.66(d，j＝8.8hz，1h)，4.31(d，j＝4.3hz，2h)，4.15(s，2h)，3.55(s，2h)，2.68(d，j＝7.6hz，1h)，1.53(d，j＝8.7hz，1h)，1.37(d，j＝5.2hz，9h).[0172]步骤3：4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-溴吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0173][0174]向250ml三口瓶中加入3-(5-(6-溴-3-氰基吡唑[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶ꢀ-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-氨基甲酸叔丁酯(3.4g，6.88mmol)和50ml4.0m氯化氢甲醇溶液，25℃反应过夜。ms监控反映完毕。将反应液抽干，乙腈带水三次，得3.66g4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-溴吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈粗品。收率为99％。[0175]msm/z：395.0/397.0[m 1] 。[0176]步骤4：6-溴-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0177][0178]向250ml三口瓶中加入4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶ꢀ-3-基)-6-溴吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈粗品(3.66g，6.88mmol)，6-甲氧基-3-吡啶甲醛(1.88g，13.76mmol)和100ml二氯乙烷，缓慢加入三乙酰基硼氢化钠(7.3g，34.4mmol)，在室温下反应过夜，tlc监控反应完毕。饱和碳酸氢钠淬灭反应，水洗，二氯甲烷萃取，有机相干燥，抽干，硅胶柱层析得2.8g6-溴-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈。收率为79％。[0179]msm/z：516.1/518.1[m 1] 。[0180]1hnmr(400mhz，cdcl3)δ8.70(d，j＝1.5hz，1h)，8.40(d，j＝2.2hz，1h)，8.26(s，1h)，8.11(d，j＝2.0hz，1h)，7.77(dd，j＝8.8，2.5hz，2h)，7.40(d，j＝1.5hz，1h)，6.71(dd，j＝15.8，8.7hz，2h)，3.90(d，j＝12.7hz，7h)，3.68(d，j＝9.2hz，4h)，2.84(s，1h)，1.71(d，j＝9.0hz，1h).[0181]步骤5：6-(2，2-二氟乙胺)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0182][0183]向50ml单口瓶中加入6-溴-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-ꢀ二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈(103mg，0.20mmol)，三(二亚苄基丙酮)二钯(18.3mg，0.02mmol)，二环己基[3，6-二甲氧基-2′，4′，6′-三异丙基[1，1′-联苯]-2-基]膦(10.8mg，0.02mmol)，碳酸铯(163mg，0.50mmol)，2，2-二氟乙胺(33mg，0.40mmol)和10ml二氧六环，氩气保护下，90℃反应过夜。硅藻土助滤，滤液减压蒸干，硅胶柱层析(二氯甲烷∶甲醇＝15∶1)，得到77mg产物6-(2，2-二氟乙胺)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈。收率为74％。[0184]msm/z：517.2[m 1] 。[0185]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.44(s，1h)，8.36(s，1h)，8.25(s，1h)，8.08(s，1h)，7.80(d，j＝8.0hz，1h)，7.69(d，j＝8.0hz，1h)，7.15(s，1h)，6.79(t，j＝8.0hz，2h)，6.32(t，j＝8.0hz，1h)，6.22(tt，j1＝56.0hz，j2＝4.0hz，1h)，3.83(s，3h)，3.79-3.61(m，4h)，3.59-3.46(m，4h)，3.39-3.28(m，2h)，2.50(s，1h)，1.60(d，j＝8.0hz，1h)。[0186]实施例2：6-(乙胺)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0187][0188]该化合物的合成同实施例1。以中间体2a和乙胺为原料，得目标化合物6-(乙胺)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈。收率为30％。[0189]msm/z：481.5[m 1] 。[0190]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.39(s，1h)，8.34(s，1h)，8.09(s，1h)，7.93(s，1h)，7.78(d，j＝8.7hz，1h)，7.71(s，1h)，7.07(s，1h)，6.90-6.67(m，2h)，6.01(s，1h)，3.82(s，3h)，3.72(s，4h)，3.53(s，4h)，3.14-2.98(m，2h)，2.07(s，1h)，1.59(s，1h)，1.22(t，j＝6.9hz，3h).[0191]实施例3：4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(正丙胺)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0192][0193]该化合物的合成同实施例1。以中间体2a和正丙胺为原料，得目标化合物4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷ꢀ-3-基)吡啶-3-基)-6-(正丙胺)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈。收率为13％。[0194]msm/z：495.3[m 1] 。[0195]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.40(s，1h)，8.35(d，j＝2.0hz，1h)，8.09(s，1h)，7.95(d，j＝2.0hz，1h)，7.80(d，j＝8.0hz，1h)，7.70(d，j＝8.0hz，1h)，7.07(d，j＝2.0hz，1h)，6.85-6.74(m，2h)，5.98(t，j＝8.0hz，1h)，3.83(s，3h)，3.80-3.63(m，4h)，3.62-3.45(m，4h)，3.10-2.98(m，2h)，2.50(s，1h)，1.68-1.54(m，3h)，0.99(t，j＝6.0hz，3h)。[0196]实施例4：4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2，2，2-三氟乙胺)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0197][0198]该化合物的合成同实施例1。以中间体2a和三氟乙胺为原料，得目标化合物4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2，2，2-三氟乙胺)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈。收率为68％。[0199]msm/z：535.4[m 1] 。[0200]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.46(s，1h)，8.37(d，j＝2.0hz，2h)，8.09(s，1h)，7.81(d，j＝8.0hz，1h)，7.74-7.66(m，1h)，7.18(d，j＝2.0hz，1h)，6.86-6.74(m，2h)，6.60(t，j＝8.0hz，1h)，4.18-4.05(m，2h)，3.83(s，3h)，3.80-3.63(m，4h)，3.62-3.40(m，4h)，2.50(s，1h)，1.60(s，1h)。[0201]实施例5：6-(异丁胺基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0202][0203]该化合物的合成同实施例1。以中间体2a和异丁胺为原料，得目标化合物6-(异丁胺基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈。收率为60％。[0204]msm/z：509.3[m 1] 。[0205]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.40(s，1h)，8.36(s，1h)，8.09(s，1h)，7.94(s，1h)，7.80(d，j＝8.0hz，1h)，7.70(d，j＝8.0hz，1h)，7.11(s，1h)，6.85-6.75(m，2h)，6.00(t，j＝8.0hz，1h)，3.83(s，3h)，3.79-3.63(m，4h)，3.62-3.42(m，4h)，2.89(t，j＝6.0hz，2h)，1.96-1.85(m，1h)，2.50(s，1h)，1.60(s，1h)，0.99(t，j＝6.4hz，6h)。[0206]实施例6：6-(3，3-二氟环丁胺基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0207][0208]该化合物的合成同实施例1。以中间体2a和3，3-二氟环丁胺为原料，得目标化合物6-(3，3-二氟环丁胺基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈。收率为50％。[0209]msm/z：543.2[m 1] 。[0210]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.45(s，1h)，8.36(d，j＝1.88hz，1h)，8.09(br.s.，1h)，7.98(s，1h)，7.80(d，j＝7.52hz，1h)，7.70(d，j＝5.91hz，1h)，7.02(s，1h)，6.73-6.86(m，2h)，6.56(d，j＝6.18hz，1h)，3.88-3.86(m，1h)，3.83(s，3h)，3.76-3.64(m，4h)，3.60-3.45(m，4h)，3.17(tt，j＝7.29，13.94hz，2h)，2.61-2.49(m，3h)，1.60(s，1h).[0211]实施例7：6-(氰基甲氨基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0212][0213]该化合物的合成同实施例1。以中间体2a和氨基乙腈为原料，得目标化合物6-(氰基甲氨基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈。收率为15％。[0214]msm/z：492.2[m 1] 。[0215]实施例8：6-(2-羟基乙胺)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0216][0217]该化合物的合成同实施例1。以中间体2a和氨基乙醇为原料，得目标化合物6-(2-羟基乙胺)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈。收率为15％。[0218]msm/z：497.4[m 1] 。[0219]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.41(s，1h)，8.35(s，1h)，8.10(s，1h)，8.02(s，1h)，7.80(d，j＝8.0hz，1h)，7.70(d，j＝8.0hz，1h)，7.15(s，1h)，6.86-6.73(m，2h)，5.99(t，j＝8.0hz，1h)，4.78(t，j＝5.2hz，1h)，3.96-3.85(m，2h)，3.83(s，3h)，3.79-3.63(m，4h)，3.61-3.44(m，4h)，3.30(s，2h)，3.21-3.10(m，2h)，2.50(s，1h)，1.60(s，1h)。[0220]实施例9：6-(2-羟基-2-甲基丙胺)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6--二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0221][0222]该化合物的合成同实施例1。以中间体2a和1-氨基2-甲基2-丙醇为原料，得目标化合物6-(2-羟基-2-甲基丙胺)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-ꢀ基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-ꢀ甲腈。收率为8％。[0223]msm/z：525.3[m 1] 。[0224]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.39(s，1h)，8.36(s，1h)，8.10(s，1h)，8.05(s，1h)，7.80(d，j＝8.0hz，1h)，7.70(d，j＝8.0hz，1h)，7.26(s，1h)，6.84-6.74(m，2h)，5.83(t，j＝8.0hz，1h)，4.56(s，1h)，3.82(s，3h)，3.78-3.66(m，4h)，3.59-3.42(m，4h)，3.00(d，j＝6.0hz，2h)，2.50(s，1h)，1.60(s，1h)，1.21(s，6h)。[0225]实施例10：6-((3-氟氮杂环丁烷-3-基)甲氨基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶ꢀ-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶ꢀ-3-甲腈[0226][0227]步骤1：3-((3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-6-基氨基)甲基)-3-氟氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯[0228][0229]该化合物的合成同实施例1。以中间体2a和3-(氨基甲基)-3-氟氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯为原料，得目标化合物3-((3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-6-基氨基)甲基)-3-氟氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯。收率为74％。[0230]msm/z：640.2[m 1] 。[0231]步骤2：6-((3-氟氮杂环丁烷-3-基)甲氨基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶ꢀ-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶ꢀ-3-甲腈[0232][0233]向25ml单口瓶中加入3-((3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-6-基氨基)甲基)-3-氟氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(95mg，0.15mmol)，4ml二氯甲烷和4ml三氟乙酸，氩气保护下，25℃反应2小时。将反应液减压蒸干，加入20ml二氯甲烷和10ml饱和碳酸氢钠，搅拌至无气泡后分出有机层，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。硅胶柱层析(二氯甲烷∶甲醇＝15∶1)，得到36mg产物6-((3-氟氮杂环丁烷-3-基)甲氨基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈。收率为44％。[0234]msm/z：540.2[m 1] 。[0235]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.43(s，1h)，8.35(d，j＝2.2hz，1h)，8.26(s，1h)，8.14(s，1h)，7.79(dd，j＝8.8，2.4hz，1h)，7.74(dd，j＝5.5，3.5hz，1h)，7.20(s，1h)，6.83-6.75(m，2h)，6.53(t，j＝5.9hz，1h)，4.18(d，j＝2.6hz，1h)，4.13(s，1h)，3.83(s，3h)，3.82-3.79(m，4h)，3.76-ꢀ3.73(m，4h)，3.64-3.60(m，5h)，2.64(d，j＝18.9hz，1h)，1.65(s，1h).[0236]实施例11：4-(6-(6-(3-氟-4-甲氧基苄基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷ꢀ-3-基)吡啶-3-基)-6-((3-氟氮杂环丁烷-3-基)甲氨基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0237][0238]步骤1：4-(6-(6-(3-氟-4-甲氧苄基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-溴吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0239][0240]该化合物的合成同中间体2a。中间体1脱保护基后，与3-氟-4-甲氧基苯甲醛还原胺化，得中间体2b。收率为44％。[0241]msm/z：533.0[m 1] 。[0242]1hnmr(400mhz，cdcl3)δ8.69(d，j＝1.5hz，1h)，8.40(d，j＝2.1hz，1h)，8.27(s，1h)，7.76(dd，j＝8.8，2.5hz，1h)，7.40(d，j＝1.5hz，1h)，7.15(dd，j＝12.2，1.7hz，1h)，7.06(d，j＝8.4hz，1h)，6.89(t，j＝8.5hz，1h)，6.69(d，j＝8.8hz，1h)，3.87(s，3h)，3.83(d，j＝6.1hz，4h)，3.59(d，j＝8.8hz，4h)，2.74(d，j＝6.9hz，1h)，1.66(d，j＝8.7hz，1h).[0243]步骤2：3-((4-(6-(6-(3-氟-4-甲氧基苄基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷ꢀ-3-基)吡啶-3-基)-3-氰基吡唑[1，5-a]吡啶-6-基氨基)甲基)-3-氟氮杂环丁烷ꢀ-1-羧酸叔丁酯[0244][0245]该化合物的合成同实施例10的步骤1。收率为34％。[0246]msm/z：657.3[m 1] 。[0247]步骤3：4-(6-(6-(3-氟-4-甲氧基苄基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-ꢀ基)吡啶-3-基)-6-((3-氟氮杂环丁烷-3-基)甲氨基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0248][0249]该化合物的合成同实施例10的步骤2。收率为30％。[0250]msm/z：557.0[m 1] 。[0251]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.43(s，1h)，8.35(d，j＝2.2hz，1h)，8.26(d，j＝1.2hz，1h)，7.79(dd，j＝8.8，2.3hz，1h)，7.25-7.05(m，4h)，6.78(d，j＝8.8hz，1h)，6.53(t，j＝6.2hz，1h)，4.17-4.12(m，1h)，4.11(s，1h)，3.81(s，3h)，3.78-3.70(m，6h)，3.65-3.48(m，6h)，2.60(s，1h)，1.62(d，j＝7.8hz，1h).[0252]实施例12：6-(2-氟乙胺)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0253][0254]步骤1：3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-6-基氨基甲酸叔丁酯[0255][0256]该化合物的合成同实施例1的步骤5。以中间体2a和氨基甲酸叔丁酯为原料合成。收率为68％。[0257]msm/z：553.4[m 1] 。[0258]步骤2：3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-6-基(2-氟乙基)氨基甲酸叔丁酯[0259][0260]向25ml单口瓶中加入3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-6-基氨基甲酸叔丁酯(55mg，0.10mmol)，碳酸铯(66mg，0.20mmol)，1-ꢀ氟-2-碘乙烷(35mg，0.20mmol)和5mldmf，氮气保护下，80℃反应4小时。向反应液中加入15ml水淬灭，乙酸乙酯(15ml)萃取三次。有机层减压蒸干，粗品硅胶柱层析(二氯甲烷∶甲醇＝30∶1)，得到60mg产物3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-6-基(2-氟乙基)氨基甲酸叔丁酯。收率为99％。[0261]msm/z：599.5[m 1] 。[0262]步骤3：6-(2-氟乙胺)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0263][0264]向10ml单口瓶中加入3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-6-基(2-ꢀ氟乙基)氨基甲酸叔丁酯(60mg，0.10mmol)和5ml4.0m氯化氢甲醇溶液，氩气保护下，25℃反应2小时。将反应液减压蒸干，加入20ml二氯甲烷和10ml饱和碳酸氢钠，搅拌至无气泡后分出有机层，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。硅胶柱层析(二氯甲烷∶甲醇＝15∶1)，得到20mg产物6-(2-氟乙胺)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6--二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈。收率为40％。[0265]msm/z：499.3[m 1] 。[0266]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.41(s，1h)，8.35(d，j＝1.6hz，1h)，8.11(d，j＝1.4hz，2h)，7.79(d，j＝7.5hz，1h)，7.70(s，1h)，7.12(s，1h)，6.80(d，j＝8.5hz，2h)，6.25(t，j＝5.8hz，1h)，4.62(dt，j＝47.8，4.7hz，2h)，3.83(s，3h)，3.80-3.61(m，4h)，3.60-3.50(m，4h)，3.43(ddd，j＝14.5，11.1，5.9hz，2h)，2.50(s，1h)，1.62(s，1h).[0267]实施例13：4-(6-(6-(3-氟-4-甲氧基苄基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷ꢀ-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0268][0269]步骤1：3-氰基-4-(6-(6-((3-氟-4-甲氧基苄基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-6-基氨基甲酸叔丁酯[0270][0271]该化合物的合成同实施例1的步骤5。以中间体2b和氨基甲酸叔丁酯为原料合成。[0272]msm/z：570.2[m 1] 。[0273]步骤2：3-甲腈-4-(6-(6-((3-氟-4-甲氧基苄基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-6-基(2-氟乙基)氨基甲酸叔丁酯[0274][0275]该化合物的合成同实施例12的步骤2。[0276]msm/z：616.2[m 1] 。[0277]步骤3：4-(6-(6-(3-氟-4-甲氧基苄基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-ꢀ基)吡啶-3-基)-6-(2-氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0278][0279]该化合物的合成同6-(2-氟乙胺)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈的步骤。收率为28％。[0280]msm/z：516.2[m 1] 。[0281]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.42(s，1h)，8.35(d，j＝1.5hz，1h)，8.11(d，j＝1.5hz，1h)，7.88-7.64(m，2h)，7.13(d，j＝1.7hz，2h)，6.80(d，j＝8.8hz，1h)，6.27(t，j＝5.9hz，1h)，4.63(dt，j＝47.8，4.8hz，2h)，3.83(s，3h)，3.78-3.66(m，4h)，3.63-3.50(m，4h)，3.44(ddd，j＝28.5，10.1，5.1hz，2h)，2.64-2.54(m，1h)，1.63(s，1h)。[0282]实施例14：4-(6-(6-(2-氟-5-甲氧基苄基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷ꢀ-3-基)吡啶-3-基)-6-(2，2-二氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0283][0284]步骤1：3-(5-(3-氰基-6-(2，2-二氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶ꢀ-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-氨基甲酸叔丁酯[0285][0286]该化合物的合成同实施例1的步骤5。以中间体1和2，2-二氟乙胺为原料合成。收率为61％。[0287]msm/z：496.2[m 1] 。[0288]步骤2：4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2，2-二氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0289][0290]向25ml三口瓶中加入3-(5-(3-氰基-6-(2，2-二氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-氨基甲酸叔丁酯(245mg，0.50mmol)和5ml4.0m氯化氢甲醇溶液，25℃反应过夜。ms监控反映完毕。将反应液抽干，乙腈带水三次，得300mg4-(6-(3，6-ꢀ二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2，2-二氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈粗品。收率为99％。[0291]msm/z：396.2[m 1] 。[0292]步骤3：4-(6-(6-(2-氟-5-甲氧基苄基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-ꢀ基)吡啶-3-基)-6-(2，2-二氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0293][0294]该化合物的合成同实施例1的步骤4。以中间体3a和2-氟-5-甲氧基苯甲醛合成。收率为23％。[0295]msm/z：534.2[m 1] 。[0296]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.43(s，1h)，8.35(d，j＝2.2，1h)，8.24(d，j＝1.6，1h)，7.79(dd，j＝8.7，2.2，1h)，7.18(d，j＝1.8，1h)，7.06(d，j＝8.3，2h)，6.81(t，j＝8.1，2h)，6.41(t，j＝6.5，1h)，6.22(t，j＝3.7，1h)，3.75(s，3h)，3.75-3.54(m，11h)，2.60(s，1h)，1.63(s，1h).[0297]实施例15：4-(6-(6-(4-甲氧基苄基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0298][0299]步骤1：3-(5-(6-((叔丁氧羰基)氨基)-3-氰基吡唑[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-氨基甲酸叔丁酯[0300][0301]向100ml单口瓶中加入3-(5-(6-溴-3-氰基吡唑[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶ꢀ-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-氨基甲酸叔丁酯(635mg，1.28mmol)，三(二亚苄基丙酮)二钯(118mg，0.13mmol)，二环己基[3，6-ꢀ二甲氧基-2′，4′，6′-三异丙基[1，1′-联苯]-2-基]膦(69mg，0.13mmol)，碳酸铯(1.26g，3.84mmol)，氨基甲酸叔丁酯(453mg，3.84mmol)和15ml二氧六环，氩气保护下，90℃反应过夜。硅藻土助滤，滤液减压蒸干，硅胶柱层析(二氯甲烷∶甲醇＝30∶1)，得到488mg产物3-(5-(6-((叔丁氧羰基)氨基)-3-氰基吡唑[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-ꢀ二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-氨基甲酸叔丁酯。收率为71％。[0302]msm/z：532.3[m 1] 。[0303]1hnmr(400mhz，cdcl3)δ9.12(s，1h)，8.36(s，1h)，8.23(s，1h)，7.76(d，j＝7.3，1h)，7.10(s，1h)，6.67(t，j＝7.3，2h)，4.32(d，j＝4.5，2h)，4.23-4.07(m，2h)，3.59-3.47(m，2h)，2.69(d，j＝6.5，1h)，1.55(s，9h)，1.43(s，1h)，1.39(s，9h).[0304]步骤2：3-(5-(6-((叔丁氧羰基)(2-氟乙基)氨基)-3-氰基吡唑[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-氨基甲酸叔丁酯[0305][0306]向250ml单口瓶中加入3-(5-(6-((叔丁氧羰基)氨基)-3-氰基吡唑[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-氨基甲酸叔丁酯(2900mg，5.46mmol)，碳酸铯(5340mg，16.4mmol)，1-氟-2-ꢀ碘乙烷(1430mg，8.17mmol)和100mldmf，氮气保护下，80℃反应12小时。向反应液中加入150ml水淬灭，乙酸乙酯(150ml)萃取三次。有机层减压蒸干，粗品硅胶柱层析(二氯甲烷∶甲醇＝30∶1)，得到2820mg产物。收率为89％。[0307]msm/z：578.3[m 1] 。[0308]1hnmr(400mhz，cdcl3)δ8.57(s，1h)，8.37(d，j＝1.8，1h)，8.28(s，1h)，7.76(d，j＝8.2，1h)，7.30(s，1h)，6.68(d，j＝8.7，1h)，4.69(dt，j＝47.5，4.5hz，2h)，4.32(d，j＝4.6，2h)，4.12(dd，j＝14.3，7.1，2h)，3.94(dt，j＝26.5，4.6hz，2h)3.57(s，2h)，2.69(dd，j＝13.7，6.2，1h)，1.53(s，1h)，1.48(s，9h)，1.39(s，9h).[0309]步骤3：4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0310][0311]向250ml单口瓶中加入3-(5-(6-((叔丁氧羰基)(2-氟乙基)氨基)-3-氰基吡唑[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-氨基甲酸叔丁酯(2820mg，4.88mmol)和50ml4.0m氯化氢乙酸乙酯溶液，氩气保护下，25℃反应2小时。将反应液减压蒸干，加入200ml二氯甲烷和100ml饱和碳酸氢钠，搅拌至无气泡后分出有机层，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。硅胶柱层析(二氯甲烷∶甲醇＝15∶1)，得到产物。收率为80％。[0312]msm/z：378.2[m 1] 。[0313]步骤4：4-(6-(6-(4-甲氧基苄基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0314][0315]向25ml三口瓶中加入4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶ꢀ-3-基)-6-(2-氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-氰基(60mg，0.16mmol)，4-ꢀ甲氧基苯甲醛(18mg，0.13mmol)和6ml二氯乙烷，缓慢加入三乙酰基硼氢化钠(140mg，0.66mmol)，在室温下反应过夜，tlc监控反应完毕。饱和碳酸氢钠淬灭反应，水洗，二氯甲烷萃取，有机相干燥，抽干，硅胶柱层析得4-(6-(6-(4-甲氧基苄基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷ꢀ-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-氰基。[0316]msm/z：498.2[m 1] 。[0317]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.41(s，1h)，8.35(d，j＝1.9，1h)，8.10(d，j＝1.2，1h)，7.80(d，j＝7.5，1h)，7.31(s，2h)，7.14(d，j＝1.4，1h)，6.90(s，2h)，6.80(d，j＝8.8，1h)，6.30(t，j＝5.6，1h)，4.62(dt，j＝47.7，4.7hz，1h)，4.16-3.86(m，4h)，3.74(s，3h)，3.68-3.44(m，4h)，3.43-3.37(m，2h)，2.61(s，1h)，1.66(s，1h).[0318]实施例16：4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-氟乙胺)-吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0319][0320]该化合物的合成同实施例15。以中间体3b和5-氟-6-甲氧基烟醛为原料合成。[0321]msm/z：517.1[m 1] 。[0322]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.41(s，1h)，8.34(d，j＝2.5hz，1h)，8.10(d，j＝1.9hz，1h)，7.93(s，1h)，7.78(dd，j＝8.8，2.5hz，1h)，7.64(d，j＝11.5hz，1h)，7.12(d，j＝2.0hz，1h)，6.78(d，j＝8.8hz，1h)，6.27(t，j＝5.9hz，1h)，4.63(dt，j＝47.7，4.6hz，2h)，3.92(s，3h)，3.71(s，4h)，3.54(s，4h)，3.43(ddd，j＝28.5，9.9，5.0hz，2h)，2.55(s，1h)，1.59(d，j＝8.0hz，1h).[0323]实施例17：4-(6-(6-(3，5-二氟-4-甲氧基苄基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0324][0325]该化合物的合成同实施例15。以中间体3b和3，5-二氟-4-甲氧基苯甲醛为原料合成。[0326]msm/z：534.2[m 1] 。[0327]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.40(s，1h)，8.32(d，j＝2.3，1h)，8.08(d，j＝1.5，1h)，7.77(dd，j＝8.8，2.4，1h)，7.41-7.34(m，1h)，7.12(d，j＝8.2，2h)，6.77(d，j＝8.8，1h)，6.27(t，j＝5.8，1h)，4.62(dt，j＝47.7，4.7hz，2h)，3.87(s，3h)，3.72-3.65(m，4h)，3.69-3.50(m，6h)，2.56(dd，j＝12.9，6.6，1h)，1.64(s，1h).[0328]实施例18：4-(6-(6-(2-氟-4-甲氧基苄基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷ꢀ-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0329][0330]该化合物的合成同实施例15。以中间体3b和2-氟-4-甲氧基苯甲醛为原料合成。收率为37％。[0331]msm/z：516.2[m 1] 。[0332]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.41(s，1h)，8.35(d，j＝2.2，1h)，8.10(d，j＝1.7，1h)，7.79(dd，j＝8.7，1.9，1h)，7.40(s，1h)，7.14(d，j＝1.7，1h)，6.78(t，j＝8.3，3h)，6.25(t，j＝5.8，1h)，4.69(t，j＝4.7，1h)，4.57(t，j＝4.7，1h)，3.73(s，3h)，3.73-3.37(m，10h)，2.59(s，1h)，1.62(s，1h).[0333]实施例19：4-(6-(6-(4-(二氟甲氧基)苄基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷ꢀ-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0334][0335]该化合物的合成同实施例15。以中间体3b和4-(二氟甲氧基)苯甲醛为原料合成。收率为24％。[0336]msm/z：534.2[m 1] 。[0337]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.41(s，1h)，8.35(d，j＝2.1，1h)，8.10(d，j＝1.5，1h)，7.79(d，j＝8.5，1h)，7.42(s，2h)，7.25-6.98(m，4h)，6.77(t，j＝11.7，1h)，6.25(t，j＝5.8，1h)，4.69(t，j＝4.7，1h)，4.57(t，j＝4.7，1h)，3.82-3.37(m，10h)，2.57(s，1h)，1.63(s，1h).[0338]实施例20：4-(6-(6-((6-(二氟甲氧基)吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0339][0340]该化合物的合成同实施例15。以中间体3b和6-(二氟甲氧基)烟醛为原料合成。收率为29％。[0341]msm/z：535.2[m 1] 。[0342]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.41(s，1h)，8.35(d，j＝2.2，1h)，8.21(s，1h)，8.10(d，j＝1.6，1h)，7.91(d，j＝7.8，1h)，7.79(dd，j＝8.8，2.4，1h)，7.68(s，1h)，7.12(d，j＝1.7，1h)，7.04(d，j＝8.4，1h)，6.79(d，j＝8.8，1h)，6.25(t，j＝5.8，1h)，4.69(t，j＝4.7，1h)，4.57(t，j＝4.7，1h)，3.82-3.37(m，10h)，2.55(s，1h)，1.61(d，j＝7.7，1h).[0343]实施例21：4-(6-(6-((3-氟-4-(二氟甲氧基)苄基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0344][0345]该化合物的合成同实施例15。以中间体3b和3-氟-4-(二氟甲氧基)苯甲醛为原料合成。msm/z：552.2[m 1] 。[0346]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.42(s，1h)，8.34(d，j＝2.2，1h)，8.10(d，j＝1.5，1h)，7.78(dd，j＝8.8，2.4，1h)，7.38(d，j＝12.1，1h)，7.29(t，j＝8.2，1h)，7.23(d，j＝11.5，2h)，7.13(d，j＝1.6，1h)，6.78(d，j＝8.8，1h)，6.30(t，j＝5.8，1h)，4.63(dt，j＝47.7，4.7hz，2h)，3.72-3.68(m，4h)，3.58-3.53(m，4h)，3.43(ddd，j＝27.3，9.5，4.5hz，2h)，2.57(dd，j＝12.8，6.6hz，1h)，1.60(d，j＝8.4，1h).[0347]实施例22：4-(6-(6-((2，3-二氟-4-(甲氧基)苄基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0348][0349]该化合物的合成同实施例15。以中间体3b和2，3-二氟-4-(甲氧基)苯甲醛为原料合成。[0350]msm/z：534.2[m 1] 。[0351]实施例23：4-(6-(6-((2，5-二氟-4-(甲氧基)苄基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0352][0353]该化合物的合成同实施例15。以中间体3b和2，5-二氟-4-(甲氧基)苯甲醛为原料合成。[0354]msm/z：534.2[m 1] 。[0355]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.41(s，1h)，8.34(d，j＝2.3，1h)，8.10(d，j＝1.7，1h)，7.78(dd，j＝8.8，2.5，1h)，7.28(dd，j＝12.0，7.0，1h)，7.13(d，j＝1.8，1h)，7.06(dd，j＝11.5，7.3，1h)，6.77(d，j＝8.8，1h)，6.27(t，j＝5.8，1h)，4.62(dt，j＝47.7，4.7hz，2h)，3.82(s，3h)，3.74-3.68(m，4h)，3.60-3.40(m，6h)，2.53(d，j＝7.3，1h)，1.58(d，j＝8.4，1h).[0356]实施例24：4-(6-(6-((3-氯-4-(甲氧基)苄基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0357][0358]该化合物的合成同实施例15。以中间体3b和3-氯-4-(甲氧基)苯甲醛为原料合成。[0359]msm/z：532.2[m 1] 、534。[0360]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ＝8.42(s，1h)，8.34(d，j＝2.3，1h)，8.11(d，j＝1.6，1h)，7.78(dd，j＝8.8，2.4，1h)，7.41(s，1h)，7.28(d，j＝8.2，1h)，7.14(s，1h)，7.07(d，j＝8.5，1h)，6.78(d，j＝8.8，1h)，6.31(d，j＝4.1，1h)，4.63(dt，j＝47.7，4.7hz，2h)，3.83(s，3h)，3.69(s，4h)，3.56-3.45(m，4h)，3.43-3.38(m，2h)，2.57(s，1h)，1.60(d，j＝8.1，1h).[0361]实施例25：4-(6-(6-((2-氯-4-(甲氧基)苄基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0362][0363]该化合物的合成同实施例15。以中间体3b和2-氯-4-(甲氧基)苯甲醛为原料合成。[0364]msm/z：532.2[m 1] 、534。[0365]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.41(s，1h)，8.34(d，j＝2.2，1h)，8.11(d，j＝1.6，1h)，7.79(dd，j＝8.7，2.3，1h)，7.49(s，1h)，7.15(d，j＝1.0，1h)，7.00(s，1h)，6.93(d，j＝7.7，1h)，6.79(d，j＝8.8，1h)，6.30(s，1h)，4.63(dt，j＝47.7，4.7hz，2h)，3.83(s，3h)，3.82-3.66(m，4h)，3.61-3.51(m，4h)，3.49-3.38(m，2h)，2.58(s，1h)，1.62(s，1h).[0366]实施例26：4-(6-(6-((5-氯-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0367][0368]该化合物的合成同实施例15。以中间体3b和5-氯-6-甲氧基烟醛为原料合成。[0369]msm/z：532.2[m 1] 、534.2。[0370]实施例27：6-(4，4，4-三氟丁胺)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0371][0372]该化合物的合成同实施例12。中间体2a和氨基甲酸叔丁酯偶联后，与1，1，1-三氟-4-碘丁烷进行亲核取代，脱保护基即得。[0373]msm/z：563.2[m 1] 。[0374]1hnmr(400mhz，dmso)δ8.42(s，1h)，8.36(d，j＝2.3hz，1h)，8.09(s，1h)，8.03(d，j＝1.6hz，1h)，7.79(dd，j＝8.8，2.4hz，1h)，7.70(d，j＝7.8hz，1h)，7.05(d，j＝1.7hz，1h)，6.94-6.65(m，2h)，6.11(t，j＝5.6hz，1h)，3.83(s，3h)，3.79-3.65(m，4h)，3.55(d，j＝18.8hz，4h)，3.16(dd，j＝12.7，6.5hz，3h)，2.52(s，1h)，2.48-2.33(m，3h)，1.92-ꢀ1.74(m，2h)，1.60(d，j＝6.4hz，1h).[0375]实施例28：6-(3-甲磺酰基丙胺)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0376][0377]该化合物的合成同实施例1。以中间体2a和3-甲磺酰基丙胺为原料合成。[0378]msm/z：573.2[m 1] 。[0379]1hnmr(400mhz，dmso)δ8.42(s，1h)，8.35(d，j＝2.2hz，1h)，8.07(d，j＝11.5hz，2h)，7.79(dd，j＝8.8，2.2hz，1h)，7.69(d，j＝7.7hz，1h)，7.04(s，1h)，6.78(t，j＝7.6hz，2h)，6.13(t，j＝5.6hz，1h)，3.82(s，3h)，3.78-3.65(m，4h)，3.51(s，4h)，3.31-3.18(m，4h)，3.00(s，3h)，2.52(s，1h)，2.00(dd，j＝14.6，7.1hz，2h)，1.59(d，j＝7.1hz，1h).[0380]实施例29：6-(3-氟丙胺)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0381][0382]该化合物的合成同实施例12。中间体2a和氨基甲酸叔丁酯偶联后，与1-氟-3-碘丙烷进行亲核取代，脱保护基即得。[0383]msm/z：513.2[m 1] 。[0384]实施例30：6-(3，3，3-三氟丙胺)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0385][0386]该化合物的合成同实施例1。以中间体2a和3，3，3-三氟丙胺为原料合成。[0387]msm/z：549.2[m 1] 。[0388]实施例31：6-(2，2，3，3，3-五氟丙胺)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0389][0390]该化合物的合成同实施例1。以中间体2a和2，2，3，3，3-五氟丙胺为原料合成。[0391]msm/z：585.2[m 1] 。[0392]1hnmr(400mhz，dmso)δ8.46(s，1h)，8.35(d，j＝5.7hz，2h)，8.08(s，1h)，7.80(d，j＝7.7hz，1h)，7.69(d，j＝8.1hz，1h)，7.20(d，j＝1.6hz，1h)，6.78(t，j＝9.4hz，2h)，6.53(t，j＝6.8hz，1h)，4.17(td，j＝15.8，6.5hz，2h)，3.82(s，3h)，3.78-3.62(m，4h)，3.57-3.51(m，4h)，2.50(s，1h)，1.59(d，j＝8.0hz，1h).[0393]实施例32：6-((2-(1h-咪唑-1-基)乙胺基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-ꢀ基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-ꢀ甲腈[0394][0395]该化合物的合成同实施例1。以中间体2a和2-(1h-咪唑-1-基)乙胺为原料合成。[0396]msm/z：547.2[m 1] 。[0397]1hnmr(400mhz，dmso)δ8.42(s，1h)，8.34(d，j＝1.9hz，1h)，8.10(s，2h)，7.78(dd，j＝8.7，2.2hz，1h)，7.70(d，j＝8.1hz，2h)，7.28(s，1h)，7.07(s，1h)，6.91(s，1h)，6.78(dd，j＝8.6，4.2hz，2h)，6.20(t，j＝5.7hz，1h)，4.20(t，j＝5.7hz，2h)，3.83(s，3h)，3.78-3.65(m，4h)，3.63ꢀ-3.51(m，4h)，3.50-3.46(m，2h)，2.56(s，1h)，1.61(d，j＝8.2hz，1h).[0398]实施例33：6-((2-(1h-1，2，4-三唑-1-基)乙胺基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0399][0400]该化合物的合成同实施例1。以中间体2a和2-(1h-1，2，4-三唑-1-基)乙胺为原料合成。[0401]msm/z：548.2[m 1] 。[0402]1hnmr(400mhz，dmso)δ8.54(s，1h)，8.43(s，1h)，8.35(d，j＝2.2hz，1h)，8.11(s，2h)，8.01(s，1h)，7.78(dd，j＝8.7，2.1hz，1h)，7.70(d，j＝7.9hz，1h)，7.05(d，j＝1.0hz，1h)，6.79(dd，j＝8.5，3.3hz，2h)，6.17(t，j＝5.9hz，1h)，4.42(t，j＝5.7hz，2h)，3.83(s，3h)，3.77-3.74(m，4h)，3.60-3.56(m，6h)，2.55(s，1h)，1.61(s，1h).[0403]实施例34：6-((2-(1h-1，3，4-三唑-1-基)乙胺基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0404][0405]该化合物的合成同实施例1。以中间体2a和2-(1h-1，3，4-三唑-1-基)乙胺为原料合成。[0406]msm/z：548.2[m 1] 。[0407]1hnmr(400mhz，dmso)δ8.55(s，2h)，8.43(s，1h)，8.35(d，j＝2.3hz，1h)，8.17(d，j＝1.7hz，1h)，8.08(s，1h)，7.78(dd，j＝8.8，2.5hz，1h)，7.68(dd，j＝8.4，2.2hz，1h)，7.04(d，j＝1.8hz，1h)，6.86-6.72(m，2h)，6.17(t，j＝6.0hz，1h)，4.26(t，j＝5.8hz，2h)，3.82(s，3h)，3.74-ꢀ3.67(m，4h)，3.57-3.51(m，6h)，2.52(s，1h)，1.59(d，j＝8.3hz，1h).[0408]实施例35：6-((2-(4h-1，2，4-三唑-1-基)乙胺基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0409][0410]该化合物的合成同实施例12。中间体2a和氨基甲酸叔丁酯偶联后，与3-(2-碘乙基)-1-((2-(三甲基硅)乙氧基)甲基)-1h-1，2，4-三唑进行亲核取代，脱保护基即得。[0411]msm/z：548.2[m 1] 。[0412]实施例36：6-((2-(5-甲基-4h-1，2，4-三唑-3-基)乙胺基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0413][0414]该化合物的合成同实施例12。中间体2a和氨基甲酸叔丁酯偶联后，与3-(2-碘乙基)-5-甲基-4h-1，2，4-三唑-4-甲酸叔丁酯进行亲核取代，脱保护基即得。[0415]msm/z：562.2[m 1] 。[0416]ii.生物测试实施例[0417]测试实施例1：对ret激酶的抑制活性[0418]利用caliper公司研发的基于微流体芯片技术的迁移率检测技术(calipermobilityshiftassay)方法检测化合物对ret激酶(购自carnabiosciences，inc.，货号08-159)的抑制效果。本发明化合物、blu-667和loxo-292的测试终浓度为2μm或10μm起始，3倍稀释的10个浓度。使用分液器echo550向384孔反应板中转移250nl的100倍终浓度的各化合物，加入10μl激酶溶液(将ret激酶用缓冲液稀释至终浓度为1nm；缓冲液购自桑迪亚医药技术(上海)有限责任公司)，室温预孵育10分钟(阴性对照孔含10μl缓冲液和250nl100％dmso；阳性对照孔含10μl的激酶溶液和250nl100％dmso)。在上述384孔反应板上加入15μl终浓度为16μm的腺苷三磷酸(atp)和3μm荧光标记底物2号肽(购自吉尔生化(上海)有限公司，货号112394)，该混合溶液起始反应。室温反应60分钟，加入30μl终止检测液(缓冲液中加入乙二胺四乙酸)停止激酶反应。用caliper公司ezreader平台读取转化率，换算抑制率。[0419]抑制率％＝(阳性对照转化率均值％-各化合物转化率均值％)/(阳性对照转化率均值％-阴性对照转化率均值％)。[0420]以浓度的log值作为x轴，抑制率％为y轴，采用分析软件graphpadprism5的log(inhibitor)vs.response-variableslope拟合量效曲线，从而得出各个化合物对酶活性的ic50值，结果见表1。[0421]表1[0422][0423]注：loxo-292参考wo2018071447a1实施例163的方法制备[0424]blu-667参考wo2017079140a1实施例130的方法制备[0425]测试结果表明本发明化合物对ret激酶具有良好的抑制活性。[0426]测试实施例2：对稳转细胞ba/f3kif5b-ret、ba/f3kif5b-ret-g810r的增殖抑制活性[0427]用于测定化合物在体外对小鼠原b细胞ba/f3稳定表达kif5b-ret融合蛋白的ba/f3kif5b-ret细胞株以及小鼠原b细胞ba/f3稳定表达kif5b-ret融合蛋白(ret区域发生g810r点突变)的ba/f3kif5b-ret-g810r细胞株的增殖抑制活性。[0428]细胞来源：ba/f3kif5b-ret细胞购自康源博创生物科技(北京)有限公司，货号kc-1041；ba/f3kif5b-ret-g810r细胞购自康源博创生物科技(北京)有限公司，货号kc-1448。[0429]取处于对数生长期的ba/f3kif5b-ret、ba/f3kif5b-ret细胞接种在96孔板中(135μl/孔)，置于37℃含有5％co2的恒温培养箱中培养24小时。本发明化合物、blu-667和loxo-292已事先溶解在二甲基亚砜(dmso)中配制成10mm的储存液，当检测时再用完全培养基在另一96孔板中稀释到目的浓度的10倍，然后在接种细胞的96孔板中加入各化合物15μl/孔，即到达目的浓度。每个浓度设3个复孔，并设dmso空白对照。继续于37℃含有5％co2的恒温培养箱中培养72小时。从二氧化碳恒温培养箱中取出接种96孔细胞培养板，每孔加入已事先溶解在0.9％生理盐水中配制成5mg/ml并过滤除菌的噻唑蓝(即mtt)储存液20μl，然后于37℃含有5％co2的恒温培养箱中孵育4小时。每孔加入100μl的三联液(按十二烷基硫酸钠(sds)10g、异丁醇5ml、36％-38％盐酸0.1ml用纯化水溶解配成100ml配制溶液)，37℃孵育至沉淀完全溶解，在570nm波长处检测光密度值od并进行数据整理计算抑制率。使用graphpadprism5.0软件分析抑制率数据，利用非线性s曲线回归来拟合得出剂量-效应曲线，并由此计算ic50值，结果见表2。[0430]抑制率％＝[(od72小时含dmso培养基对照组-od72小时化合物组)/(od72小时含dmso培养基对照组-od0小时含dmso培养基对照组)]×100％。[0431]表2[0432][0433][0434]注：nd表示未测定[0435]loxo-292参考wo2018071447a1实施例163的方法制备[0436]blu-667参考wo2017079140a1实施例130的方法制备[0437]测试结果表明本发明化合物对稳转细胞ba/f3kif5b-ret、ba/f3kif5b-ret-g810r具有良好的增殖抑制活性；相对于blu-667、loxo-292，本发明化合物对稳转细胞ba/f3kif5b-ret-g810r具有更好的增殖抑制活性。[0438]测试实施例3：对稳转细胞ba/f3kif5b-ret、ba/f3kif5b-ret-g810r裸小鼠皮下移植瘤的生长抑制作用[0439]本实验用于研究化合物对稳转细胞ba/f3kif5b-ret、ba/f3kif5b-ret-g810r裸小鼠皮下移植瘤的生长抑制作用以及安全性情况。[0440]细胞培养：稳转细胞ba/f3kif5b-ret、ba/f3kif5b-ret-g810r各自培养在加有10％胎牛血清的rpmi-1640培养基中，放在37℃含有5％co2的恒温培养箱中培养。收取指数生长期的细胞并计数，以供接种。[0441]实验动物：balb/cnude裸小鼠，雌性，5周龄，30只，购自北京维通利华实验动物技术有限公司。[0442]针对稳转细胞ba/f3kif5b-ret和稳转细胞ba/f3kif5b-ret-g810r各设3个实验组，每组5只；3个实验组分别为：含有10％二甲基乙酰胺 5％聚乙二醇-15羟基硬脂酸酯 85％生理盐水的溶媒对照组(即vehicle组)、loxo-292组和实施例12化合物组。[0443]实验方案3a：稳转细胞ba/f3kif5b-ret细胞株(2×106个/只)接种于balb/cnude裸小鼠右侧背部皮下，每只小鼠接种量是0.1ml，定期观察肿瘤生长情况。待肿瘤生长至大于150mm3时，根据肿瘤大小随机分组。loxo-292组和实施例12化合物组各自按照10mg/kg灌胃给药，给药体积为10ul/g，溶媒对照组给予等量溶媒，每天两次，连续14天。整个实验过程中，每周测量两次小鼠的体重和肿瘤大小，观察是否出现毒性反应。[0444]实验方案3b：稳转细胞ba/f3kif5b-ret-g810r细胞株(2×106个/只)接种于balb/cnude裸小鼠右侧背部皮下，每只小鼠接种量是0.1ml，定期观察肿瘤生长情况。待肿瘤生长至大于150mm3时，根据肿瘤大小随机分组。loxo-292组和实施例12化合物组各自按照30mg/kg灌胃给药，给药体积为10ul/g，溶媒对照组给予等量溶媒，每天两次，连续14天。整个实验过程中，每周测量两次小鼠的体重和肿瘤大小，观察是否出现毒性反应。[0445]肿瘤体积(tumorvolume，tv)的计算公式为：tv＝1/2×a×b×b，其中a、b分别表示肿瘤长、宽。[0446]结果：实验方案3a、3b中溶媒对照组的动物在7天后均死亡，而loxo-292组和实施例12化合物组无动物死亡，且给药期间体重无明显下降；实验方案3a、3b中3个实验组的肿瘤体积变化曲线分别见图1和图2。[0447]测试结果表明本发明化合物对稳转细胞ba/f3kif5b-ret、ba/f3kif5b-ret-g810r裸小鼠皮下移植瘤的生长都具有良好的抑制作用；相对于loxo-292，本发明化合物对ba/f3kif5b-ret-g810r裸小鼠皮下移植瘤的生长具有更好的抑制作用；本发明化合物对裸小鼠体重影响较小，显示出较好的安全性。[0448]在本文中提及的所有文献均通过引用被并入本技术中。此外还应指明的是，在阅读了本技术的上述公开内容之后，本领域技术人员可以无需背离本发明的精神和范围，对本发明作出各种修饰、改动或修改，但这些变化形式同样都应落于本技术所附权利要求书所记载的范围。当前第1页12当前第1页12
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：：[0002]转染重排基因即ret(rearrangedduringtransfection)基因为原癌基因，位于10号染色体。ret基因所编码的ret蛋白是一种存在于细胞膜上的受体酪氨酸激酶(rtk)，属于钙黏蛋白超家族成员。ret的配体是胶质源性神经营养因子家族，包括glialcellline-derivedneurotrophicfactor(gdnf)、neurturin(nrtn)、artemin(artn)和persephin(pspn)。当配体与ret的胞外区域结合后，会导致ret二聚化和胞内激酶域自身磷酸化，从而激活ret，然后启动多条下游信号通路如ras/mapk/erk、pi3k/akt、jak/stat等发挥细胞增殖、迁移与分化的作用。[0003]ret基因的异常(包括融合和点突变)会导致ret信号通路过度激活和不受控制的细胞增长，与多种肿瘤的发生和进展密切相关。ret基因融合在非小细胞肺癌(nsclc)患者中的发生率约为1％～2％，在甲状腺乳头状癌(ptc)患者中的发生率为10％～20％；最常见的融合伴侣包括kif5b、trim33、ccdc6和ncoa4。ret基因点突变在甲状腺髓样癌(mtc)患者中的发生率为60％左右；常见的突变位点包括c634r、m918t、v804l、v804m、g810r等。此外，在结直肠癌、乳腺癌、胰腺癌和其他癌症中，也观察到低频率的ret融合；在携带egfr突变的nsclc患者中也观察到ret融合。[0004]目前针对ret基因的靶向药，包括(1)靶向多个靶点的多激酶抑制剂类药物，如卡博替尼(cabozantinib)、凡德他尼(vandetanib)、乐伐替尼(lenvatinib)等，虽能够抑制ret的活性，但由于选择性不高，通常会发生脱靶效应导致的特别是vegfr抑制相关的严重毒副作用，限制了临床应用；(2)选择性靶向ret基因的药物，如blu-667、loxo-292，其对野生型和突变型(如m918t、v804l/m等)的ret、以及常见的kif5b-ret融合和ccdc6-ret融合等都有很好的抑制活性，且毒性相对较小。[0005]blu-667于wo2017079140a1中公开，由blueprintmedicines公司开发，其结构如下，目前已向fda递交了新药上市滚动申请。loxo-292于wo2018071447a1中公开，由loxooncology开发，其结构如下，已于2020年5月获fda批准上市；但文献(journalofthoraciconcology，volume15，issue4，april2020，pages541-549)中报道有ret融合nsclc患者产生了retg810r耐药突变，导致loxo-292耐药。[0006][0007]此外，在胃肠道病症如肠易激综合征(irritablebowelsyndrome，ibs)中，也证实了异常ret表达和/或活性。[0008]开发新的有效、低毒性的选择性ret小分子抑制剂，用于治疗由ret介导的疾病，是人类所需。技术实现要素：[0009]本发明提供了一种结构新颖的吡唑[1，5-a]吡啶类化合物或其药学上可接受的盐，是一类选择性ret抑制剂，能够有效抑制野生型ret、突变型ret特别是g810r突变型ret、以及kif5b-ret和ccdc6-ret等ret融合，且安全性好，可用于治疗由ret介导的疾病，例如癌症和肠易激综合征。[0010]本发明提供了下述式(i)所示的化合物或其药学上可接受的盐，[0011][0012]其中：[0013]x选自cr6或n；[0014]y选自cr6或n；[0015]z选自cr6或n；[0016]其中x、y、z中的0、1或2个为n；[0017]r1选自氢、6-10元芳基或5-12元杂芳基，其中所述6-10元芳基或5-12元杂芳基各自任选地被1、2、3或4个各自独立地选自羟基、卤素、c1-6烷基、c1-6烷氧基、卤代c1-6烷基、卤代c1-6烷氧基、羟基c1-6烷基、3-6元环烷基、氰基、-nr7r8或-o-(ch2)n-nr7r8的取代基所取代；[0018]r2选自氢、c1-4烷基或卤代c1-4烷基；[0019]r3选自氢、c1-6烷基、3-6元环烷基、3-8元杂环基或5-12元杂芳基，其中所述c1-6烷基、3-6元环烷基、3-8元杂环基或5-12元杂芳基各自任选地被1、2、3或4个各自独立地选自卤素、c1-4烷基、c1-4烷氧基、卤代c1-4烷基、卤代c1-4烷氧基、氰基、羟基、羟基c1-4烷基、ꢀ-c(＝o)-nr7r8、-so2-c1-4烷基、5-6元杂芳基或3-6元杂环基的取代基所取代，其中所述5-6元杂芳基或3-6元杂环基各自任选地被1、2或3个各自独立地选自卤素、羟基、c1-4烷基、c1-4烷氧基-(ch2)m-或-c(＝o)-c1-4烷基的取代基所取代；[0020]r4选自氢、c1-4烷基或卤代c1-4烷基；[0021]r5选自氢、卤素、氰基、c1-4烷基或卤代c1-4烷基；[0022]每个r6独立地选自h、c1-4烷基、c1-4烷氧基、卤代c1-4烷基或卤素；[0023]每个r7独立地选自h、c1-4烷基或卤代c1-4烷基；[0024]每个r8独立地选自h、c1-4烷基或卤代c1-4烷基；[0025]n选自1、2或3；[0026]m选自0、1、2或3。[0027]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述x选自cr6或n，y选自cr6或n，z选自cr6或n，其中x、y、z中的0或1个为n；其中每个r6独立地选自h、c1-4烷基、卤代c1-4烷基或卤素。[0028]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述x为cr6，y为cr6，z为cr6；其中每个r6独立地选自h、c1-4烷基、卤代c1-4烷基或卤素。[0029]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述x为cr6，y为cr6，z为cr6；其中每个r6独立地选自h、甲基、乙基、一氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、cf3ch2-、chf2ch2-、ch2fch2-、f、cl或br。[0030]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述x为cr6，y为cr6，z为cr6，其中每个r6为h。[0031]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述r1选自苯基或5-6元杂芳基，其中所述苯基或5-6元杂芳基各自任选地被1、2或3个各自独立地选自羟基、卤素、c1-6烷基、c1-6烷氧基、卤代c1-6烷基、卤代c1-6烷氧基或氰基的取代基所取代。[0032]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述r1选自苯基或5-6元杂芳基，其中所述苯基或5-6元杂芳基各自任选地被1、2或3个各自独立地选自羟基、卤素、c1-4烷基、c1-4烷氧基、卤代c1-4烷基或卤代c1-4烷氧基的取代基所取代。[0033]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述r1选自苯基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、吡咯基、咪唑基或噻唑基，其中所述苯基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、吡咯基、咪唑基或噻唑基各自任选地被1、2或3个各自独立地选自羟基、卤素、c1-4烷基、c1-4烷氧基、卤代c1-4烷基或卤代c1-4烷氧基的取代基所取代。[0034]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述r1选自苯基、自苯基、其中所述苯基、各自任选地被1、2或3个各自独立地选自羟基、f、cl、br、c1-4烷基、c1-4烷氧基、卤代c1-4烷基或卤代c1-4烷氧基的取代基所取代。[0035]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述r1选自苯基、自苯基、其中所述苯基、其中所述苯基、各自任选地被1、2或3个各自独立地选自羟基、f、cl、br、甲基、乙基、正丙基、异丙基、甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、一氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、cf3ch2-、chf2ch2-、ch2fch2-、一氟甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、cf3ch2-o-、chf2ch2-o-或ch2fch2-o-的取代基所取代。[0036]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述r1选自苯基或吡啶基，其中所述苯基或吡啶基各自任选地被1、2或3个各自独立地选自羟基、卤素、c1-4烷基、c1-4烷氧基、卤代c1-4烷基或卤代c1-4烷氧基的取代基所取代。[0037]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述r1选自苯基、其中所述苯基、其中所述苯基、各自任选地被1、2或3个各自独立地选自羟基、f、cl、br、甲基、乙基、正丙基、异丙基、甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、一氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、cf3ch2-、chf2ch2-、ch2fch2-、一氟甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、cf3ch2-o-、chf2ch2-o-或ch2fch2-o-的取代基所取代。[0038]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述r1选自[0039]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述r1选自自[0040][0041]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述r2选自氢或c1-4烷基。[0042]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述r2为氢。[0043]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述r4选自氢或c1-4烷基。[0044]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述r4为氢。[0045]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述r5选自氢、卤素或氰基。[0046]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述r5为氰基。[0047]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述r3选自氢、c1-6烷基或3-6元环烷基，其中所述c1-6烷基或3-6元环烷基各自任选地被1、2或3个各自独立地选自卤素、c1-4烷基、c1-4烷氧基、卤代c1-4烷基、卤代c1-4烷氧基、氰基、羟基、-so2-c1-4烷基、5-6元杂芳基或3-6元杂环基的取代基所取代，其中所述5-6元杂芳基或3-6元杂环基各自任选地被1、2或3个各自独立地选自卤素、羟基或c1-4烷基的取代基所取代。[0048]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述r3选自氢、c1-4烷基、环丙基、环丁基或环戊基，其中所述c1-4烷基、环丙基、环丁基或环戊基各自任选地被1、2或3个各自独立地选自f、cl、br、c1-4烷基、c1-4烷氧基、卤代c1-4烷基、卤代c1-4烷氧基、氰基、羟基、-so2-c1-4烷基、烷基、烷基、的取代基所取代，其中所述，其中所述，其中所述各自任选地被1、2或3个各自独立地选自f、cl、br、羟基或c1-4烷基的取代基所取代。[0049]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述r3选自氢、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、环丙基、环丁基或环戊基，其中所述甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、环丙基、环丁基或环戊基各自任选地被1、2或3个各自独立地选自f、cl、br、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、一氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、cf3ch2-、chf2ch2-、ch2fch2-、一氟甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、cf3ch2-o-、chf2ch2-o-、ch2fch2-o-、氰基、羟基、-so2-ch3、-so2-ch2ch3、、、的取代基所取代，其中所述所述各自任选地被1、2或3个各自独立地选自f、cl、br、羟基、甲基或乙基的取代基所取代。[0050]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述r3选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、一氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、甲基、[0051]在本发明式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐的另一实施方案中，上述r3选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、一氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、甲基、[0052]本发明还提供了如下所示的化合物或其药学上可接受的盐：[0053][0054][0055][0056]本发明式(i)所示化合物可以通过本领域技术人员所熟知的各种合成方法来制备，没有特别限定，例如可以通过本发明提供的如下方案一或方案二的方法来制备，应了解的是本发明式(i)所示化合物的合成方法并不局限于方案一和方案二，本领域技术人员可进行常规的替换和改进。[0057]方案一：[0058][0059]其中，r1、r2、r3、r4、r5、x、y、z如上文所定义；l为离去基团，如卤素，优选为i；p为氨基保护基，各p可相同或不同，各自独立地优选叔丁氧羰基(boc)、苄氧羰基(cbz)、苄基(bn)。[0060]以化合物a-1和化合物a-2为起始原料，发生suzuki偶联反应得到化合物a-3；化合物a-3与化合物a-4发生取代反应得到中间体1；中间体1脱保护得到化合物a-5；化合物a-5与化合物a-6发生还原胺化反应得到中间体2；中间体2与发生偶联反应得到式(i)所示化合物。[0061]或者，在制备r4为h的式(i)化合物时，也可以使中间体2与p-nh2发生偶联反应得到化合物a-7；化合物a-7与r3-l发生取代反应得到化合物a-8；化合物a-8脱保护得到式(i)所示化合物。[0062]上述方案一中，suzuki偶联反应是在碱、催化剂存在下进行，其中所述催化剂包括但不限于pd(dppf)cl2、pd(pph3)4、pdcl2等，所述碱包括但不限于碳酸铯、碳酸钾、碳酸钠、碳酸锂、醋酸钾、醋酸钠、叔丁醇钾、叔丁醇钠等；制备中间体1和化合物a-8的取代反应，是在碱的存在下进行，所述碱包括但不限于碳酸铯、碳酸钾、碳酸钠、三乙胺等；中间体1和化合物a-8的脱保护反应是在酸性条件下或在催化剂/h2存在下进行，所述酸性条件包括但不限于hcl/meoh、hcl/ea、三氟乙酸等，所述催化剂包括但不限于pd/c、pdcl2/c、pd(oh)2/c等；制备中间体2的还原胺化反应是在还原剂存在下进行，所述还原剂包括但不限于nabh(oac)3、nabh4、nabh3cn等；中间体2与或p-nh2发生的偶联反应是在催化剂、碱存在下进行，所述催化剂包括但不限于pd2(dba)3/xantphos、pd2(dba)3/brettphos、pd(oac)2/xantphos等，所述碱包括但不限于碳酸铯、碳酸钾、碳酸钠、碳酸锂、醋酸钾、醋酸钠、叔丁醇钾、叔丁醇钠等。[0063]方案二：[0064][0065]其中，r1、r2、r3、r4、r5、x、y、z如上文所定义；l为离去基团，如卤素，优选为i；p为氨基保护基，各p可相同或不同，各自独立地优选叔丁氧羰基(boc)、苄氧羰基(cbz)、苄基(bn)。[0066]中间体1与发生偶联反应得到化合物b-1；化合物b-1脱保护得到中间体3；中间体3与化合物a-6发生还原胺化反应得到式(i)所示化合物。[0067]或者，在制备r4为h的式(i)化合物时，也可以使中间体1与p-nh2发生偶联反应得到化合物b-2；化合物b-2与r3-l发生取代反应得到化合物b-3；化合物b-3脱保护得到中间体3；中间体3与化合物a-6发生还原胺化反应得到式(i)所示化合物。[0068]上述方案二中，中间体1与或p-nh2发生的偶联反应是在催化剂、碱存在下进行，所述催化剂包括但不限于pd2(dba)3/xantphos、pd2(dba)3/brettphos、pd(oac)2/xantphos等，所述碱包括但不限于碳酸铯、碳酸钾、碳酸钠、碳酸锂、醋酸钾、醋酸钠、叔丁醇钾、叔丁醇钠等；化合物b-1和化合物b-3的脱保护是在酸性条件下或在催化剂/h2存在下进行，所述酸性条件包括但不限于hcl/meoh、hcl/ea、三氟乙酸等，所述催化剂包括但不限于pd/c、pdcl2/c、pd(oh)2/c等；中间体3与化合物a-6发生的还原胺化反应是在还原剂存在下进行，所述还原剂包括但不限于nabh(oac)3、nabh4、nabh3cn等；制备化合物b-3的取代反应，是在碱的存在下进行，所述碱包括但不限于碳酸铯、碳酸钾、碳酸钠、三乙胺等。[0069]本发明还提供了中间体化合物，包括如下结构所示的化合物a-7、化合物a-8、化合物b-1、化合物b-2、化合物b-3、中间体3，[0070][0071]其中，r1、r2、r3、r4、r5、x、y、z如上文所定义；p为氨基保护基，各p可相同或不同，各自独立地优选叔丁氧羰基(boc)、苄氧羰基(cbz)、苄基(bn)。[0072]本发明还进一步提供了如下结构的中间体化合物：[0073][0074]本发明还提供了药物组合物，包括上述化合物或其药学上可接受的盐以及任选的药学上可接受的载体。本发明的药物组合物包括任选的药学上可接受的载体是指，该组合物可以含有药学上可接受的载体，也可以不含有药学上可接受的载体。[0075]本发明还提供了上述化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物在制备用于治疗由ret介导的疾病的药物中的应用。[0076]本发明还提供了上述化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物在制备用于治疗由ret介导的疾病的药物中的应用。其中所述ret包括野生型ret、突变型ret、ret融合，所述突变型ret包括但不限于g810r突变型ret、m918t突变型ret、v804l突变型ret、v804m突变型ret，优选g810r突变型ret，所述ret融合包括但不限于kif5b-ret融合、ccdc6-ret融合，优选kif5b-ret融合；所述疾病包括癌症、肠易激综合征。[0077]本发明还提供了上述化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物在制备用于治疗由野生型ret、突变型ret、ret融合介导的疾病的药物中的应用；其中所述突变型ret包括但不限于g810r突变型ret、m918t突变型ret、v804l突变型ret、v804m突变型ret，优选g810r突变型ret，所述ret融合包括但不限于kif5b-ret融合、ccdc6-ret融合，优选kif5b-ret融合；所述疾病包括癌症、肠易激综合征。[0078]本发明还提供了上述化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物在制备用于治疗由ret介导的癌症、肠易激综合征的药物中的应用。其中所述ret包括野生型ret、突变型ret、ret融合，所述突变型ret包括但不限于g810r突变型ret、m918t突变型ret、v804l突变型ret、v804m突变型ret，优选g810r突变型ret，所述ret融合包括但不限于kif5b-ret融合、ccdc6-ret融合，优选kif5b-ret融合。[0079]本发明还提供了上述化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物在制备用于治疗由野生型ret、突变型ret、ret融合介导的癌症、肠易激综合征的药物中的应用。其中所述突变型ret包括但不限于g810r突变型ret、m918t突变型ret、v804l突变型ret、v804m突变型ret，优选g810r突变型ret；所述ret融合包括但不限于kif5b-ret融合、ccdc6-ret融合，优选kif5b-ret融合。[0080]本发明还提供了上述化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物在制备用于治疗癌症的药物中的应用。[0081]本发明还提供了上述化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物在制备用于治疗肠易激综合征的药物中的应用。[0082]本发明还提供了一种治疗由ret介导的疾病的方法，所述方法包括对需要的患者施用有效量的上述化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。其中所述ret包括野生型ret、突变型ret、ret融合，所述突变型ret包括但不限于g810r突变型ret、m918t突变型ret、v804l突变型ret、v804m突变型ret，所述ret融合包括但不限于kif5b-ret融合、ccdc6-ret融合；所述疾病包括癌症、肠易激综合征。[0083]本发明还提供了一种治疗癌症的方法，所述方法包括对需要的患者施用有效量的上述化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。[0084]本发明还提供了一种治疗肠易激综合征的方法，所述方法包括对需要的患者施用有效量的上述化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。[0085]本发明所述癌症，包括但不限于小细胞肺癌、非小细胞肺癌、甲状腺乳头状癌、甲状腺髓样癌、甲状腺滤泡状癌、甲状腺未分化癌、复发性甲状腺癌、多发性内分泌瘤形成2a或2b型(分别是men2a或men2b)、肝细胞癌、肺癌、头颈癌、神经胶质瘤、神经母细胞瘤、嗜铬细胞瘤、结肠直肠癌、睾丸癌、前列腺癌、输卵管癌、卵巢癌、宫颈癌、乳腺癌和胰腺癌。[0086]本发明所述肠易激综合征，包括但不限于腹泻主导型、便秘主导型或交替排便模式、功能性胃气胀、功能性便秘、功能性腹泻、非特异性功能性肠病、功能性腹痛综合征、慢性特发性便秘、功能性食管病、功能性胃十二指肠病、功能性肛门直肠疼痛和炎性肠病。[0087]本发明还包含式(i)所示化合物在药学上可接受的盐。所述“药学上可接受的盐”是指相对无毒的本发明化合物的酸加成盐或碱加成盐。所述酸加成盐为本发明式(i)所示化合物与合适的无机酸或者有机酸形成的盐，这些盐可通过使式(i)所示化合物与适宜的有机酸或无机酸在适当的溶剂中进行反应来制备。代表性酸加成盐包括氢溴酸盐、盐酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、亚硫酸盐、乙酸盐、草酸盐、戊酸盐、油酸盐、棕榈酸盐、硬脂酸盐、月硅酸盐、硼酸盐、苯甲酸盐、乳酸盐、硝酸盐、磷酸盐、磷酸氢盐、碳酸盐、碳酸氢盐、甲苯甲酸盐、柠檬酸盐、马来酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、苹果酸盐、抗坏血酸盐、鞣酸盐、扑酸盐、藻酸盐、萘磺酸盐、酒石酸盐、苯甲酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、葡萄糖酸盐、乳糖酸盐和月桂基磺酸盐等。所述碱加成盐为式(i)所示化合物与合适的无机碱或者有机碱形成的盐，这些盐可通过使式(i)所示化合物与适宜的无机碱或者有机碱在适当的溶剂中进行反应来制备。代表性碱加成盐包括例如与碱金属、碱土金属、季铵阳离子形成的盐，例如钠盐、锂盐、钾盐、钙盐、镁盐、四甲基季铵盐、四乙基季铵盐等；胺盐，包括与氨(nh3)、伯胺、仲胺或叔胺形成的盐，如甲胺盐、二甲胺盐、三甲胺盐、三乙胺盐、乙胺盐等。[0088]除了盐的形式，本发明所提供的化合物还存在前药形式。本发明所描述的前药是指可在生理学条件下或通过溶剂分解而转化成本发明所述的生物学活性化合物(如式(i)化合物)的化合物。因此，术语“前药”是指药物可接受的生物学活性化合物的前体。[0089]本发明的化合物可以在一个或多个构成该化合物的原子上包含非天然比例的原子同位素。例如，可用放射性同位素标记化合物，比如氘(d)，氚(3h)，碘-125(125i)或c-14(14c)。本发明的化合物的所有同位素组成的变换，无论放射性与否，都包括在本发明的范围之内。[0090]本发明的化合物可以存在特定的几何或立体异构体形式。本发明设想所有的这类化合物，包括顺式和反式异构体、(-)-和( )-对映体、(r)-ꢀ和(s)-对映体、非对映异构体、(d)-异构体、(l)-异构体，及其外消旋混合物和其他混合物，例如对映异构体或非对映体富集的混合物，所有这些混合物都属于本发明的范围之内。所有这些异构体以及它们的混合物，均包括在本发明的范围之内。[0091]可以通过的手性合成或手性试剂或者其他常规技术制备光学活性的(r)-和(s)-异构体以及d和l异构体。如果想得到本发明某化合物的一种对映体，可以通过不对称合成或者具有手性助剂的衍生作用来制备，其中将所得非对映体混合物分离，并且辅助基团裂开以提供纯的所需对映异构体。或者，当分子中含有碱性官能团(如氨基)或酸性官能团(如羧基)时，与适当的光学活性的酸或碱形成非对映异构体的盐，然后通过本领域所公知的常规方法进行非对映异构体拆分，然后回收得到纯的对映体。此外，对映异构体和非对映异构体的分离通常是通过使用色谱法完成的，所述色谱法采用手性固定相，并任选地与化学衍生法相结合(例如由胺生成氨基甲酸盐)。[0092]本发明中，“药学上可接受的”指其在合理的医学判断范围内，适于接触人类和动物的组织而没有过度毒性、刺激或其它问题或并发症，与合理的益处/风险比相称的那些化合物、物质、组合物和剂型。[0093]本发明中，“药学上可接受的载体”指的是一种或多种相容性固体或液体填料或凝胶物质，它们适合于人使用，而且必须有足够的纯度和足够低的毒性。“相容性”在此指的是组合物中各组份能与本发明的化合物以及它们之间相互掺和，而不明显降低化合物的药效。药理上可以接受的载体部分例子有纤维素及其衍生物(如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素、甲基纤维素、羟丙甲纤维素其及衍生物、醋酸纤维素及其衍生物、纤维素乙酸酯等)、明胶、滑石、固体润滑剂(如硬脂酸、硬脂酸镁/钙、氢化植物油、硬脂酸富马酸钠)、硫酸钙、植物油(如豆油、芝麻油、花生油、橄榄油等)、多元醇(如丙二醇、甘油、甘露醇、山梨醇等)、乳化剂、润湿剂(如十二烷基硫酸钠)、着色剂、调味剂、稳定剂、抗氧化剂、防腐剂等。[0094]本发明中，针对药物或药理学活性剂而言，“有效量”是指无毒的但能达到预期效果的药物或药理学活性剂的足够用量。有效量的确定因人而异，取决于患者的年龄、体重和病症情况，也取决于具体的活性物质，个案中合适的有效量可以由本领域技术人员根据常规试验确定。[0095]本发明中，“活性成分”、“活性物质”或“活性剂”是指一种化学实体，它可以有效地治疗目标紊乱、疾病或病症。[0096]本发明中，“患者”、“个体”或“对象”包括人、动物、脊椎动物、哺乳动物、啮齿动物(例如豚鼠、仓鼠、大鼠、小鼠)、鼠科动物(例如小鼠)、犬科动物(例如狗)、灵长目动物、类人猿(如猴或无尾猿)、猴(如狨猴、狒狒)、无尾猿(例如大猩猩、黑猩猩、猩猩、长臂猿)。在一些实施方案中，“患者”为人。[0097]本发明中，“治疗”意为将本发明所述化合物或制剂进行给药以预防、改善或消除疾病或与所述疾病相关的一个或多个症状，且包括：[0098](i)预防疾病或疾病状态在哺乳动物中出现，特别是当这类哺乳动物易患有该疾病或疾病状态，但尚未被诊断为已患有该疾病或疾病状态时；[0099](ii)抑制疾病或疾病状态，即，遏制其发展；[0100](iii)缓解疾病或疾病状态，即，使该疾病或疾病状态消退。[0101]本发明中，“任选”、“任选的”或“任选地”是指随后描述的事件或状况可以发生或不发生，该描述同时包括该事件或状况发生和不发生的情况。例如，“任选地被r取代”是指可以被r取代，也可以不被r取代，且该描述同时包括被r取代和不被r取代的情况。[0102]本发明中，“被取代的”或“被取代”是指基团中的一个或多个氢原子，优选为1-5个氢原子，更优选为1、2、3或4个氢原子彼此独立地被相应数目的取代基取代，只要取代后的化合物是稳定的。[0103]本发明中，“独立地”或“独立的”指其中多于一个取代基选自大量可能的取代基，那些取代基可以相同或不同。例如，“rx选自-or或-n(r)2；每个r独立地选自h或c1-c4烷基”，其中每一个取代基r都是独立的，它们可以相同也可以不同。[0104]本发明中，“基”和“基团”表示一价基团或者根据需要的符合化合价的二价以上的基团，例如“环烷基”包括从其中去除一个氢原子而得到的一价基团，也包括从其中的相同的碳原子或不同的两个以上碳原子上去除两个以上氢原子而得到的二价以上的基团。当“环烷基”作为末端基团时，其自然为一价基团，当环烷基在结构中作为连接基团时，其为二价以上的基团。本发明中，一价或二价以上的基团通常是指一价基团或二价基团，但是根据需要，该基团可以为更高的化合价(例如三价、四价、五价、六价等)。[0105]本发明中，“cd-e”(d和e表示1以上的整数，d＜e)包括d至e个碳的任何一种具体情况，例如c1-6包括c1、c2、c3、c4、c5、c6，也包括d至e中的任何一个范围，例如c1-6包括c1-3、c1-4、c1-5、c2-5、c2-4、c3-6等；同理，“d-e元”(d和e表示1以上的整数，d＜e)表示环上原子数为d至e个，例如3-6元环包括3元环、4元环、5元环、6元环，也包括d至e中的任何一个范围，例如3-6元环包括3-4元环、3-5元环、4-6元环、4-5元环等。[0106]本发明中，“卤素”是指氟、氯、溴、碘等，优选氟、氯、溴，更优选氟、氯。[0107]本发明中，“c1-6烷基”是指从含有1-6个碳原子的烷烃部分去除一个以上氢原子而衍生得到的直链或支链的烷基，具体的，c1-6烷基包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、2-甲基丁基、新戊基、1-乙基丙基、正己基、异己基、4-甲基戊基、3-甲基戊基、2-甲基戊基、1-甲基戊基、3，3-二甲基丁基、2，2-二甲基丁基、1，1-二甲基丁基、1，2-二甲基丁基、1，3-二甲基丁基、2，3-二甲基丁基、2-乙基丁基、1-甲基-2-甲基丙基等；所述“c1-4烷基”是指从含有1-4个碳原子的烷烃部分去除一个以上氢原子而衍生得到的直链或支链的烷基，具体的，c1-4烷基包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基。[0108]本发明中，“c1-6烷氧基”是指上文所定义的“c1-6烷基”通过氧原子与分子其余部分连接的基团，即“c1-6烷基-o-”基团，包括但不限于，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、新戊氧基、正己氧基等；所述的“c1-4烷氧基”是指上文所定义的“c1-4烷基”通过氧原子与分子其余部分连接的基团，即“c1-4烷基-o-”基团，包括但不限于，甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基。[0109]本发明中，“卤代c1-6烷基”是指一个或多个(优选1-5个，更优选1、2或3个)卤素原子取代上文所定义的“c1-6烷基”上相应个数的氢原子所形成的基团，其中当具有多个卤素原子取代时各卤素原子可以相同或不同，具体的，卤代c1-6烷基包括但不限于一氟甲基、三氟甲基、三氯甲基、二氟甲基、二氯甲基、一氯甲基、cf3ch2-、chf2ch2-、ch2fch2-、ch3chf-、ch2fchcl-、cf3ch2ch2-、cf3ch2ch(ch3)ch2-等；“卤代c1-4烷基”是指一个或多个(优选1-5个，更优选1、2或3个)卤素原子取代上文所定义的“c1-4烷基”上相应个数的氢原子所形成的基团，其中当具有多个卤素原子取代时各卤素原子可以相同或不同，具体的，包括但不限于一氟甲基、三氟甲基、三氯甲基、二氟甲基、二氯甲基、一氯甲基、cf3ch2-、chf2ch2-、ch2fch2-、ch3chf-、ch2fchcl-等。[0110]本发明中，“卤代c1-6烷氧基”是指一个或多个(优选1-5个，更优选1、2或3个)卤素原子取代上文所定义的“c1-6烷氧基”上相应个数的氢原子所形成的基团，其中当具有多个卤素原子取代时各卤素原子可以相同或不同，具体的，包括但不限于一氟甲氧基、三氟甲氧基、三氯甲氧基、二氟甲氧基、二氯甲氧基、一氯甲氧基、cf3ch2-o-、chf2ch2-o-、ch2fch2-o-、cf3ch2ch2-o-等；“卤代c1-4烷氧基”是指一个或多个(优选1-5个，更优选1、2或3个)卤素原子取代上文所定义的“c1-4烷氧基”上相应个数的氢原子所形成的基团，其中当具有多个卤素原子取代时各卤素原子可以相同或不同，具体的，包括但不限于一氟甲氧基、三氟甲氧基、三氯甲氧基、二氟甲氧基、二氯甲氧基、一氯甲氧基、cf3ch2-o-、chf2ch2-o-、ch2fch2-o-、cf3ch2ch2-o-等。[0111]本发明中，“羟基c1-6烷基”是指一个或多个(优选1、2或3个)羟基取代上文所定义的“c1-6烷基”上相应个数的氢原子所形成的基团，包括但不限于羟基甲基、1-羟基乙基、2-羟基乙基、2-羟基丙基、3-羟基丙基、2，3-二羟基丙基、2-羟基-2-甲基丙基、4-羟基丁基、5-羟基戊基、2-ꢀ羟基甲基-1-羟基丙基；“羟基c1-4烷基”是指一个或多个(优选1、2或3个)羟基取代上文所定义的“c1-4烷基”上相应个数的氢原子所形成的基团，包括但不限于羟基甲基、1-羟基乙基、2-羟基乙基、2-羟基丙基、3-羟基丙基、2，3-二羟基丙基、2-羟基-2-甲基丙基、4-羟基丁基。[0112]本发明中，“环原子”是指形成环的原子，包括但不限于c、n、o、p和s；“环碳原子”是指环原子c；“环杂原子”是指除c原子之外的环原子，包括但不限于环原子n、o、p和s。[0113]本发明中，“环烷基”是指饱和的或部分不饱和的环状烃基，它可以是一价基团或二价以上的基团，包括单环环烷基和多环环烷基，多环环烷基包括螺环环烷基、稠环环烷基和桥环环烷基，所述“螺环环烷基”是指单环之间共用一个环碳原子(称螺原子)的多环环烷基，所述“稠环环烷基”是指基团中的每个环与其他环共用相邻的一对环碳原子的多环环烷基，所述“桥环环烷基”是指任意两个环共用两个不直接连接的环碳原子的多环环烷基。本发明中，“3-6元环烷基”是指包括3至6个环碳原子的环烷基，包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环己二烯基等。[0114]本发明中，“杂环基”是指其中一个或多个(优选1个、2个、3个或4个)环原子为选自n、o或s的环杂原子的饱和或部分不饱和的环状烃基，它可以是一价基团或二价以上的基团，包括单环杂环基和多环杂环基，多环杂环基包括螺环杂环基、稠环杂环基和桥环杂环基，所述“螺环杂环基”是指单环之间共用一个环原子(称螺原子)的多环杂环基，所述“稠环环烷基”是指基团中的每个环与其他环共用相邻的一对环原子的多环杂环基，所述“桥环环烷基”是指任意两个环共用两个不直接连接的环原子的多环杂环基。另，杂环基同时还包括环原子c、s被氧代的情况，如环原子c、s被c(＝o)、s(＝o)、s(＝o)2替代。本发明中，“3-8元杂环基”是指包括3至8个环原子的杂环基，优选含有1个、2个或3个选自n、o或s的环杂原子，具体的，3-8元杂环基包括但不限于氮杂环丙基、氧杂环丙基、氮杂环丁基、氧杂环丁基、硫杂环丁基、四氢呋喃基、四氢吡咯基、吡咯烷酮基、四氢噻吩基、咪唑烷基、吡唑烷基、1，2-噁唑烷基、1，3-噁唑烷基、1，2-噻唑烷基、1，3-噻唑烷基、四氢-2h-ꢀ吡喃基、四氢-2h-噻喃基、哌啶基、哌啶酮基、哌嗪基、吗啉基、1，4-ꢀ二氧杂环己烷基、1，4-氧硫杂环己烷基、4，5-二氢异噁唑基、4，5-二氢噁唑基、2，5-二氢噁唑基、2，3-二氢噁唑基、3，4-二氢-2h-吡咯基、2，3-二氢ꢀ-1h-吡咯基、2，5-二氢-1h-咪唑基、4，5-二氢-1h-咪唑基、4，5-二氢-1h-ꢀ吡唑基、4，5-二氢-3h-吡唑基、4，5-二氢噻唑基、2，5-二氢噻唑基、2h-ꢀ吡喃基、4h-吡喃基、2h-噻喃基、4h-噻喃基、2，3，4，5-四氢吡啶基、1，2-ꢀ异噁嗪基、1，4-异噁嗪基或6h-1，3-噁嗪基等，优选优选优选等。本发明中，“3-6元杂环基”是指包括3至6个环原子的杂环基，优选含有1个、2个或3个选自n、o或s的环杂原子，具体的，3-6元杂环基包括但不限于氮杂环丙基、氧杂环丙基、氮杂环丁基、氧杂环丁基、硫杂环丁基、四氢呋喃基、四氢吡咯基、吡咯烷酮基、四氢噻吩基、咪唑烷基、吡唑烷基、1，2-噁唑烷基、1，3-噁唑烷基、1，2-噻唑烷基、1，3-噻唑烷基、四氢-2h-吡喃基、四氢-2h-噻喃基、哌啶基、哌啶酮基、哌嗪基、吗啉基、1，4-二氧杂环己烷基、1，4-氧硫杂环己烷基、4，5-二氢异噁唑基、4，5-二氢噁唑基、2，5-二氢噁唑基、2，3-ꢀ二氢噁唑基、3，4-二氢-2h-吡咯基、2，3-二氢-1h-吡咯基、2，5-二氢-1h-ꢀ咪唑基、4，5-二氢-1h-咪唑基、4，5-二氢-1h-吡唑基、4，5-二氢-3h-吡唑基、4，5-二氢噻唑基、2，5--二氢噻唑基、2h-吡喃基、4h-吡喃基、2h-噻喃基、4h-噻喃基、2，3，4，5-四氢吡啶基、1，2-异噁嗪基、1，4-异噁嗪基或6h-1，3-ꢀ噁嗪基等，优选等。[0115]本发明中，“芳基”是指具有芳香性的环状烃基，它可以是一价基团或二价以上的基团，包括单环芳基和稠环芳基，“稠环芳基”是指基团中的每个环与其他环共用相邻的一对环碳原子的含有多个环(优选含有2个或3个环)的芳基。本发明中，“6-10元芳基”是指包括6至10个环碳原子的芳基，包括苯基、萘基。[0116]本发明中，“杂芳基”是指其中一个或多个(优选1-5个，更优选1个、2个、3个或4个)环原子为选自n、o或s的环杂原子的具有芳香性的环状烃基，它可以是一价基团或二价以上的基团，包括单环杂芳基和稠环杂芳基，所述“稠环杂芳基”是指基团中的每个环与其他环共用相邻的一对环原子的含有多个环(优选含有2个或3个环)的杂芳基。本发明中，“5-12元杂芳基”是指包括5至12个环原子的杂芳基，优选含有1个、2个、3个或4个选自n、o或s的环杂原子，具体的，5-12元杂芳基包括但不限于呋喃基、咪唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、噁二唑基、噁唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吡唑基、吡咯基、四唑基、噻二唑基、噻吩基、三唑基、三嗪基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噁二唑基、苯并噻二唑基、苯并噻唑基、呋喃并吡啶基、吲唑基、吲哚基、异吲哚基、异喹啉基、嘌呤基、喹啉基、喹喔啉基、噻吩并吡啶基等，优选优选优选优选等。本发明中，“5-6元杂芳基”是指包括5至6个环原子的杂芳基，优选含有1个、2个、3个或4个选自n、o或s的环杂原子，具体的，5-6元杂芳基包括但不限于呋喃基、咪唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、噁二唑基、噁唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吡唑基、吡咯基、四唑基、噻二唑基、噻吩基、三唑基、三嗪基等，优选优选等。[0117]本发明中，“-c(＝o)-c1-4烷基”是指上文所定义的“c1-4烷基”与ꢀ-c(＝o)-连接所形成的基团；“-so2-c1-4烷基”是指上文所定义的“c1-4烷基”与-so2-连接所形成的基团。[0118]本发明中，所述“一个以上”是指取代基的数量可以为所取代基团所有化学上可以被取代的位置的数量，优选1-6个，更有选1-5个，更优选1-3个，更优选1-2个，更优选为1个。[0119]本发明中，“氨基保护基”是指连接在氨基上且在一定条件下容易脱除的化学基团，其包括但不限于烷氧羰基类、酰基类、烷基类；例如叔丁氧羰基、苄氧羰基、芴甲氧羰基、烯丙氧羰基、邻苯二甲酰基、苄基、对甲氧基苄基、三苯甲基等。本领域技术人员可以参照本领域常用教科书greene’sprotectivegroupsinorganicsynthesis(4thedition)进行适当的选择和操作。[0120]本发明所述的药物组合物，可以采用本领域众所周知的方法来制备，如常规的混合法、溶解法、制粒法、制糖衣药丸法、磨细法、乳化法和冷冻干燥法等。本发明所述药物组合物可以通过任何方便的给药途径施用给治疗对象，包括但不限于，经口服、直肠、肠胃外(例如注射，包括皮下、皮内、肌肉内、静脉内等)、局部(包括例如透皮、鼻内、眼部、口腔和舌下)、肺部(例如利用气溶胶经口或鼻的吸入或吹入治疗)等。[0121]适于口服给药的固体剂型包括片剂、丸剂、胶囊剂、散剂、粉剂、颗粒剂等。制备这些固体剂型时，除了本发明所述的化合物或其药学上可接受的盐外，可以加入本领域常规采用的赋形剂、填料或增容剂、粘合剂、崩解剂、稳定剂、润湿剂、吸附剂、润滑剂或包封材料中的一种或多种。[0122]适于口服给药的液体剂型包括溶液剂、悬浮剂、乳浊剂、糖浆剂或酊剂等。除了本发明所述的化合物或其药学上可接受的盐外，液体剂型可包含本领域常规采用的稀释剂、增溶剂、乳化剂、润湿剂、悬浮剂、甜味剂、矫味剂、芳香剂或防腐剂中的一种或多种。[0123]适于局部给药的剂型包括软膏剂、散剂、贴剂、滴剂、喷射剂、吸入剂等，作为活性成分的本发明所述化合物或其药学上可接受的盐在无菌条件下和药学上可接受的载体一起混合。[0124]适于直肠给药的剂型包括栓剂，包括本发明所述的化合物或其药学上可接受的盐以及合适的基质。[0125]适于肠胃外注射的剂型包括生理上可接受的无菌含水或无水溶液、分散液、悬浮液或乳液，以及用于重新溶解成无菌的可注射溶液或分散液的无菌粉末。[0126]药物制剂优选为单位剂量形式。在该形式中，制剂被细分成含有适当量的活性组分的单位剂量。可以将单位剂量形式包装成含有离散量的制剂的包装，如包装的片剂、胶囊剂。[0127]在治疗患者时，是将有效量的本发明化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物施用于需要治疗的患者(如人)。在一些实施方案中，本发明所述化合物或其药学上可接受的盐的治疗的有效量为约0.01至1000mg/天，优选地约0.1至500mg/天。精确剂量将视给药途径、化合物被施用时的形式、待治疗的受试者(患者)的健康状况和主治医师的经验等而定。[0128]本发明所述的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物也可以与其它抗肿瘤药物、例如化疗药物联合施用，或者与其它治疗如放射治疗或外科手术联合使用，作为手术前或手术后的辅药。[0129]本发明所使用的缩写具有以下含义：[0130]boc：叔丁氧羰基[0131]cbz：苄氧羰基[0132]bn：苄基[0133]pd(dppi)cl2：[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯[0134]pd2(dba)3：三(二亚苄基丙酮)二钯[0135]xantphos：4，5-双二苯基膦-9，9-二甲基氧杂蒽[0136]brettphos：二环己基[3，6-二甲氧基-2′，4′，6′-三异丙基[1，1′-联苯]-2-基]膦[0137]pto2：二氧化铂[0138]pd(pph3)4：四(三苯基膦)钯[0139]pdcl2：二氯化钯[0140]pd(oh)2：氢氧化钯[0141]pd(oac)2：醋酸钯[0142]pd：钯[0143]hcl：氯化氢[0144]hbr：溴化氢[0145]nabh(oac)3：三乙酰氧基硼氢化钠[0146]nabh4：硼氢化钠[0147]nabh3cn：氰基硼氢化钠[0148]dcm：二氯甲烷[0149]meoh：甲醇[0150]ea：乙酸乙酯[0151]cdcl3：氘代氯仿[0152]dmso：二甲基亚砜[0153]tlc：薄层层析附图说明：[0154]图1为实施例12化合物和loxo-292在每天两次10mg/kg给药剂量下的稳转细胞ba/f3kif5b-ret裸小鼠皮下移植瘤的肿瘤体积变化曲线。[0155]图2为实施例12化合物和loxo-292在每天两次30mg/kg给药剂量下的稳转细胞ba/f3kif5b-ret-g810r裸小鼠皮下移植瘤的肿瘤体积变化曲线。具体实施方式[0156]下面结合具体实施例，对本发明的方案进行解释。应理解，这些实施例仅用于举例说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体技术或条件的，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。[0157]i.本发明化合物制备实施例[0158]本发明的化合物结构是通过核磁共振(nmr)或/和液质联用色谱(lc-ms)来确定的。nmr化学位移(δ)以百万分之一(ppm)的单位给出。nmr的测定是用brukeravance-400核磁仪，测定溶剂为氘代二甲基亚砜(dmso-d6)和氘代氯仿(cdcl3)，内标为四甲基硅烷(tms)。[0159]液质联用色谱lc-ms的测定用agilent6410triplequadlc/ms。[0160]薄层层析硅胶板使用烟台黄海hsgf254或青岛gf254硅胶板，tlc采用的规格是0.15mm-0.20mm，薄层层析分离纯化产品采用的规格是0.4mm-0.5mm。柱层析一般使用烟台黄海硅胶200-300目硅胶为载体。[0161]实施例1：6-(2，2-二氟乙胺)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-ꢀ二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0162][0163]步骤1：6-溴-4-(6-氟吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0164][0165]向500ml三口瓶中加入4，6-二溴吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈(33.0g，0.11mol)，2-氟-5-吡啶硼酸(14.1g，0.10mmol)，[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(2.7g，3.70mmol)，二水氟化钾(31.0g，0.33mmol)和150mln，n-二甲基甲酰胺，氩气保护下，60℃反应过夜。反应完冷却至室温，加入500ml水。反应液过滤，滤饼用乙腈、乙酸乙酯淋洗。减压干燥得30g6-溴-4-(6-氟吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈。收率为86％。[0166]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ9.48(d，j＝1.6hz，1h)，8.73(s，1h)，8.51(d，j＝2.5hz，1h)，8.27(td，j＝8.1，2.6hz，1h)，7.86(d，j＝1.6hz，1h)，7.40(dd，j＝8.4，2.8hz，1h).[0167]步骤2：3-(5-(6-溴-3-氰基吡唑[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-氨基甲酸叔丁酯[0168][0169]向250ml三口瓶中加入6-溴-4-(6-氟吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈(4.35g，13.7mmol)，6-(叔丁氧羰基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷(3.25g，16.3mmol)，碳酸钾(5.67g，41.1mmol)和60ml二甲亚砜，100℃反应过夜。反应完冷却至室温，加入200ml水。反应液过滤，滤饼用混合溶剂(dcm∶meoh＝10∶1)溶解后抽干，乙腈带水三次，硅胶柱层析得3.4g3-(5-(6-溴-3-氰基吡唑[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-ꢀ基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-氨基甲酸叔丁酯。收率为50％。[0170]msm/z：495.1/497.1[m 1] 。[0171]1hnmr(400mhz，cdcl3)δ8.68(d，j＝1.3hz，1h)，8.36(d，j＝2.1hz，1h)，8.25(s，1h)，7.72(dd，j＝8.8，2.3hz，1h)，7.39(d，j＝1.3hz，1h)，6.66(d，j＝8.8hz，1h)，4.31(d，j＝4.3hz，2h)，4.15(s，2h)，3.55(s，2h)，2.68(d，j＝7.6hz，1h)，1.53(d，j＝8.7hz，1h)，1.37(d，j＝5.2hz，9h).[0172]步骤3：4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-溴吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0173][0174]向250ml三口瓶中加入3-(5-(6-溴-3-氰基吡唑[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶ꢀ-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-氨基甲酸叔丁酯(3.4g，6.88mmol)和50ml4.0m氯化氢甲醇溶液，25℃反应过夜。ms监控反映完毕。将反应液抽干，乙腈带水三次，得3.66g4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-溴吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈粗品。收率为99％。[0175]msm/z：395.0/397.0[m 1] 。[0176]步骤4：6-溴-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0177][0178]向250ml三口瓶中加入4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶ꢀ-3-基)-6-溴吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈粗品(3.66g，6.88mmol)，6-甲氧基-3-吡啶甲醛(1.88g，13.76mmol)和100ml二氯乙烷，缓慢加入三乙酰基硼氢化钠(7.3g，34.4mmol)，在室温下反应过夜，tlc监控反应完毕。饱和碳酸氢钠淬灭反应，水洗，二氯甲烷萃取，有机相干燥，抽干，硅胶柱层析得2.8g6-溴-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈。收率为79％。[0179]msm/z：516.1/518.1[m 1] 。[0180]1hnmr(400mhz，cdcl3)δ8.70(d，j＝1.5hz，1h)，8.40(d，j＝2.2hz，1h)，8.26(s，1h)，8.11(d，j＝2.0hz，1h)，7.77(dd，j＝8.8，2.5hz，2h)，7.40(d，j＝1.5hz，1h)，6.71(dd，j＝15.8，8.7hz，2h)，3.90(d，j＝12.7hz，7h)，3.68(d，j＝9.2hz，4h)，2.84(s，1h)，1.71(d，j＝9.0hz，1h).[0181]步骤5：6-(2，2-二氟乙胺)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0182][0183]向50ml单口瓶中加入6-溴-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-ꢀ二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈(103mg，0.20mmol)，三(二亚苄基丙酮)二钯(18.3mg，0.02mmol)，二环己基[3，6-二甲氧基-2′，4′，6′-三异丙基[1，1′-联苯]-2-基]膦(10.8mg，0.02mmol)，碳酸铯(163mg，0.50mmol)，2，2-二氟乙胺(33mg，0.40mmol)和10ml二氧六环，氩气保护下，90℃反应过夜。硅藻土助滤，滤液减压蒸干，硅胶柱层析(二氯甲烷∶甲醇＝15∶1)，得到77mg产物6-(2，2-二氟乙胺)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈。收率为74％。[0184]msm/z：517.2[m 1] 。[0185]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.44(s，1h)，8.36(s，1h)，8.25(s，1h)，8.08(s，1h)，7.80(d，j＝8.0hz，1h)，7.69(d，j＝8.0hz，1h)，7.15(s，1h)，6.79(t，j＝8.0hz，2h)，6.32(t，j＝8.0hz，1h)，6.22(tt，j1＝56.0hz，j2＝4.0hz，1h)，3.83(s，3h)，3.79-3.61(m，4h)，3.59-3.46(m，4h)，3.39-3.28(m，2h)，2.50(s，1h)，1.60(d，j＝8.0hz，1h)。[0186]实施例2：6-(乙胺)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0187][0188]该化合物的合成同实施例1。以中间体2a和乙胺为原料，得目标化合物6-(乙胺)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈。收率为30％。[0189]msm/z：481.5[m 1] 。[0190]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.39(s，1h)，8.34(s，1h)，8.09(s，1h)，7.93(s，1h)，7.78(d，j＝8.7hz，1h)，7.71(s，1h)，7.07(s，1h)，6.90-6.67(m，2h)，6.01(s，1h)，3.82(s，3h)，3.72(s，4h)，3.53(s，4h)，3.14-2.98(m，2h)，2.07(s，1h)，1.59(s，1h)，1.22(t，j＝6.9hz，3h).[0191]实施例3：4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(正丙胺)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0192][0193]该化合物的合成同实施例1。以中间体2a和正丙胺为原料，得目标化合物4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷ꢀ-3-基)吡啶-3-基)-6-(正丙胺)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈。收率为13％。[0194]msm/z：495.3[m 1] 。[0195]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.40(s，1h)，8.35(d，j＝2.0hz，1h)，8.09(s，1h)，7.95(d，j＝2.0hz，1h)，7.80(d，j＝8.0hz，1h)，7.70(d，j＝8.0hz，1h)，7.07(d，j＝2.0hz，1h)，6.85-6.74(m，2h)，5.98(t，j＝8.0hz，1h)，3.83(s，3h)，3.80-3.63(m，4h)，3.62-3.45(m，4h)，3.10-2.98(m，2h)，2.50(s，1h)，1.68-1.54(m，3h)，0.99(t，j＝6.0hz，3h)。[0196]实施例4：4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2，2，2-三氟乙胺)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0197][0198]该化合物的合成同实施例1。以中间体2a和三氟乙胺为原料，得目标化合物4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2，2，2-三氟乙胺)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈。收率为68％。[0199]msm/z：535.4[m 1] 。[0200]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.46(s，1h)，8.37(d，j＝2.0hz，2h)，8.09(s，1h)，7.81(d，j＝8.0hz，1h)，7.74-7.66(m，1h)，7.18(d，j＝2.0hz，1h)，6.86-6.74(m，2h)，6.60(t，j＝8.0hz，1h)，4.18-4.05(m，2h)，3.83(s，3h)，3.80-3.63(m，4h)，3.62-3.40(m，4h)，2.50(s，1h)，1.60(s，1h)。[0201]实施例5：6-(异丁胺基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0202][0203]该化合物的合成同实施例1。以中间体2a和异丁胺为原料，得目标化合物6-(异丁胺基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈。收率为60％。[0204]msm/z：509.3[m 1] 。[0205]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.40(s，1h)，8.36(s，1h)，8.09(s，1h)，7.94(s，1h)，7.80(d，j＝8.0hz，1h)，7.70(d，j＝8.0hz，1h)，7.11(s，1h)，6.85-6.75(m，2h)，6.00(t，j＝8.0hz，1h)，3.83(s，3h)，3.79-3.63(m，4h)，3.62-3.42(m，4h)，2.89(t，j＝6.0hz，2h)，1.96-1.85(m，1h)，2.50(s，1h)，1.60(s，1h)，0.99(t，j＝6.4hz，6h)。[0206]实施例6：6-(3，3-二氟环丁胺基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0207][0208]该化合物的合成同实施例1。以中间体2a和3，3-二氟环丁胺为原料，得目标化合物6-(3，3-二氟环丁胺基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈。收率为50％。[0209]msm/z：543.2[m 1] 。[0210]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.45(s，1h)，8.36(d，j＝1.88hz，1h)，8.09(br.s.，1h)，7.98(s，1h)，7.80(d，j＝7.52hz，1h)，7.70(d，j＝5.91hz，1h)，7.02(s，1h)，6.73-6.86(m，2h)，6.56(d，j＝6.18hz，1h)，3.88-3.86(m，1h)，3.83(s，3h)，3.76-3.64(m，4h)，3.60-3.45(m，4h)，3.17(tt，j＝7.29，13.94hz，2h)，2.61-2.49(m，3h)，1.60(s，1h).[0211]实施例7：6-(氰基甲氨基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0212][0213]该化合物的合成同实施例1。以中间体2a和氨基乙腈为原料，得目标化合物6-(氰基甲氨基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈。收率为15％。[0214]msm/z：492.2[m 1] 。[0215]实施例8：6-(2-羟基乙胺)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0216][0217]该化合物的合成同实施例1。以中间体2a和氨基乙醇为原料，得目标化合物6-(2-羟基乙胺)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈。收率为15％。[0218]msm/z：497.4[m 1] 。[0219]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.41(s，1h)，8.35(s，1h)，8.10(s，1h)，8.02(s，1h)，7.80(d，j＝8.0hz，1h)，7.70(d，j＝8.0hz，1h)，7.15(s，1h)，6.86-6.73(m，2h)，5.99(t，j＝8.0hz，1h)，4.78(t，j＝5.2hz，1h)，3.96-3.85(m，2h)，3.83(s，3h)，3.79-3.63(m，4h)，3.61-3.44(m，4h)，3.30(s，2h)，3.21-3.10(m，2h)，2.50(s，1h)，1.60(s，1h)。[0220]实施例9：6-(2-羟基-2-甲基丙胺)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6--二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0221][0222]该化合物的合成同实施例1。以中间体2a和1-氨基2-甲基2-丙醇为原料，得目标化合物6-(2-羟基-2-甲基丙胺)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-ꢀ基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-ꢀ甲腈。收率为8％。[0223]msm/z：525.3[m 1] 。[0224]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.39(s，1h)，8.36(s，1h)，8.10(s，1h)，8.05(s，1h)，7.80(d，j＝8.0hz，1h)，7.70(d，j＝8.0hz，1h)，7.26(s，1h)，6.84-6.74(m，2h)，5.83(t，j＝8.0hz，1h)，4.56(s，1h)，3.82(s，3h)，3.78-3.66(m，4h)，3.59-3.42(m，4h)，3.00(d，j＝6.0hz，2h)，2.50(s，1h)，1.60(s，1h)，1.21(s，6h)。[0225]实施例10：6-((3-氟氮杂环丁烷-3-基)甲氨基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶ꢀ-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶ꢀ-3-甲腈[0226][0227]步骤1：3-((3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-6-基氨基)甲基)-3-氟氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯[0228][0229]该化合物的合成同实施例1。以中间体2a和3-(氨基甲基)-3-氟氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯为原料，得目标化合物3-((3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-6-基氨基)甲基)-3-氟氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯。收率为74％。[0230]msm/z：640.2[m 1] 。[0231]步骤2：6-((3-氟氮杂环丁烷-3-基)甲氨基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶ꢀ-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶ꢀ-3-甲腈[0232][0233]向25ml单口瓶中加入3-((3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-6-基氨基)甲基)-3-氟氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(95mg，0.15mmol)，4ml二氯甲烷和4ml三氟乙酸，氩气保护下，25℃反应2小时。将反应液减压蒸干，加入20ml二氯甲烷和10ml饱和碳酸氢钠，搅拌至无气泡后分出有机层，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。硅胶柱层析(二氯甲烷∶甲醇＝15∶1)，得到36mg产物6-((3-氟氮杂环丁烷-3-基)甲氨基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈。收率为44％。[0234]msm/z：540.2[m 1] 。[0235]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.43(s，1h)，8.35(d，j＝2.2hz，1h)，8.26(s，1h)，8.14(s，1h)，7.79(dd，j＝8.8，2.4hz，1h)，7.74(dd，j＝5.5，3.5hz，1h)，7.20(s，1h)，6.83-6.75(m，2h)，6.53(t，j＝5.9hz，1h)，4.18(d，j＝2.6hz，1h)，4.13(s，1h)，3.83(s，3h)，3.82-3.79(m，4h)，3.76-ꢀ3.73(m，4h)，3.64-3.60(m，5h)，2.64(d，j＝18.9hz，1h)，1.65(s，1h).[0236]实施例11：4-(6-(6-(3-氟-4-甲氧基苄基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷ꢀ-3-基)吡啶-3-基)-6-((3-氟氮杂环丁烷-3-基)甲氨基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0237][0238]步骤1：4-(6-(6-(3-氟-4-甲氧苄基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-溴吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0239][0240]该化合物的合成同中间体2a。中间体1脱保护基后，与3-氟-4-甲氧基苯甲醛还原胺化，得中间体2b。收率为44％。[0241]msm/z：533.0[m 1] 。[0242]1hnmr(400mhz，cdcl3)δ8.69(d，j＝1.5hz，1h)，8.40(d，j＝2.1hz，1h)，8.27(s，1h)，7.76(dd，j＝8.8，2.5hz，1h)，7.40(d，j＝1.5hz，1h)，7.15(dd，j＝12.2，1.7hz，1h)，7.06(d，j＝8.4hz，1h)，6.89(t，j＝8.5hz，1h)，6.69(d，j＝8.8hz，1h)，3.87(s，3h)，3.83(d，j＝6.1hz，4h)，3.59(d，j＝8.8hz，4h)，2.74(d，j＝6.9hz，1h)，1.66(d，j＝8.7hz，1h).[0243]步骤2：3-((4-(6-(6-(3-氟-4-甲氧基苄基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷ꢀ-3-基)吡啶-3-基)-3-氰基吡唑[1，5-a]吡啶-6-基氨基)甲基)-3-氟氮杂环丁烷ꢀ-1-羧酸叔丁酯[0244][0245]该化合物的合成同实施例10的步骤1。收率为34％。[0246]msm/z：657.3[m 1] 。[0247]步骤3：4-(6-(6-(3-氟-4-甲氧基苄基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-ꢀ基)吡啶-3-基)-6-((3-氟氮杂环丁烷-3-基)甲氨基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0248][0249]该化合物的合成同实施例10的步骤2。收率为30％。[0250]msm/z：557.0[m 1] 。[0251]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.43(s，1h)，8.35(d，j＝2.2hz，1h)，8.26(d，j＝1.2hz，1h)，7.79(dd，j＝8.8，2.3hz，1h)，7.25-7.05(m，4h)，6.78(d，j＝8.8hz，1h)，6.53(t，j＝6.2hz，1h)，4.17-4.12(m，1h)，4.11(s，1h)，3.81(s，3h)，3.78-3.70(m，6h)，3.65-3.48(m，6h)，2.60(s，1h)，1.62(d，j＝7.8hz，1h).[0252]实施例12：6-(2-氟乙胺)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0253][0254]步骤1：3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-6-基氨基甲酸叔丁酯[0255][0256]该化合物的合成同实施例1的步骤5。以中间体2a和氨基甲酸叔丁酯为原料合成。收率为68％。[0257]msm/z：553.4[m 1] 。[0258]步骤2：3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-6-基(2-氟乙基)氨基甲酸叔丁酯[0259][0260]向25ml单口瓶中加入3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-6-基氨基甲酸叔丁酯(55mg，0.10mmol)，碳酸铯(66mg，0.20mmol)，1-ꢀ氟-2-碘乙烷(35mg，0.20mmol)和5mldmf，氮气保护下，80℃反应4小时。向反应液中加入15ml水淬灭，乙酸乙酯(15ml)萃取三次。有机层减压蒸干，粗品硅胶柱层析(二氯甲烷∶甲醇＝30∶1)，得到60mg产物3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-6-基(2-氟乙基)氨基甲酸叔丁酯。收率为99％。[0261]msm/z：599.5[m 1] 。[0262]步骤3：6-(2-氟乙胺)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0263][0264]向10ml单口瓶中加入3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-6-基(2-ꢀ氟乙基)氨基甲酸叔丁酯(60mg，0.10mmol)和5ml4.0m氯化氢甲醇溶液，氩气保护下，25℃反应2小时。将反应液减压蒸干，加入20ml二氯甲烷和10ml饱和碳酸氢钠，搅拌至无气泡后分出有机层，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。硅胶柱层析(二氯甲烷∶甲醇＝15∶1)，得到20mg产物6-(2-氟乙胺)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6--二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈。收率为40％。[0265]msm/z：499.3[m 1] 。[0266]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.41(s，1h)，8.35(d，j＝1.6hz，1h)，8.11(d，j＝1.4hz，2h)，7.79(d，j＝7.5hz，1h)，7.70(s，1h)，7.12(s，1h)，6.80(d，j＝8.5hz，2h)，6.25(t，j＝5.8hz，1h)，4.62(dt，j＝47.8，4.7hz，2h)，3.83(s，3h)，3.80-3.61(m，4h)，3.60-3.50(m，4h)，3.43(ddd，j＝14.5，11.1，5.9hz，2h)，2.50(s，1h)，1.62(s，1h).[0267]实施例13：4-(6-(6-(3-氟-4-甲氧基苄基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷ꢀ-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0268][0269]步骤1：3-氰基-4-(6-(6-((3-氟-4-甲氧基苄基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-6-基氨基甲酸叔丁酯[0270][0271]该化合物的合成同实施例1的步骤5。以中间体2b和氨基甲酸叔丁酯为原料合成。[0272]msm/z：570.2[m 1] 。[0273]步骤2：3-甲腈-4-(6-(6-((3-氟-4-甲氧基苄基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-6-基(2-氟乙基)氨基甲酸叔丁酯[0274][0275]该化合物的合成同实施例12的步骤2。[0276]msm/z：616.2[m 1] 。[0277]步骤3：4-(6-(6-(3-氟-4-甲氧基苄基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-ꢀ基)吡啶-3-基)-6-(2-氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0278][0279]该化合物的合成同6-(2-氟乙胺)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈的步骤。收率为28％。[0280]msm/z：516.2[m 1] 。[0281]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.42(s，1h)，8.35(d，j＝1.5hz，1h)，8.11(d，j＝1.5hz，1h)，7.88-7.64(m，2h)，7.13(d，j＝1.7hz，2h)，6.80(d，j＝8.8hz，1h)，6.27(t，j＝5.9hz，1h)，4.63(dt，j＝47.8，4.8hz，2h)，3.83(s，3h)，3.78-3.66(m，4h)，3.63-3.50(m，4h)，3.44(ddd，j＝28.5，10.1，5.1hz，2h)，2.64-2.54(m，1h)，1.63(s，1h)。[0282]实施例14：4-(6-(6-(2-氟-5-甲氧基苄基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷ꢀ-3-基)吡啶-3-基)-6-(2，2-二氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0283][0284]步骤1：3-(5-(3-氰基-6-(2，2-二氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶ꢀ-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-氨基甲酸叔丁酯[0285][0286]该化合物的合成同实施例1的步骤5。以中间体1和2，2-二氟乙胺为原料合成。收率为61％。[0287]msm/z：496.2[m 1] 。[0288]步骤2：4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2，2-二氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0289][0290]向25ml三口瓶中加入3-(5-(3-氰基-6-(2，2-二氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-氨基甲酸叔丁酯(245mg，0.50mmol)和5ml4.0m氯化氢甲醇溶液，25℃反应过夜。ms监控反映完毕。将反应液抽干，乙腈带水三次，得300mg4-(6-(3，6-ꢀ二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2，2-二氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈粗品。收率为99％。[0291]msm/z：396.2[m 1] 。[0292]步骤3：4-(6-(6-(2-氟-5-甲氧基苄基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-ꢀ基)吡啶-3-基)-6-(2，2-二氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0293][0294]该化合物的合成同实施例1的步骤4。以中间体3a和2-氟-5-甲氧基苯甲醛合成。收率为23％。[0295]msm/z：534.2[m 1] 。[0296]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.43(s，1h)，8.35(d，j＝2.2，1h)，8.24(d，j＝1.6，1h)，7.79(dd，j＝8.7，2.2，1h)，7.18(d，j＝1.8，1h)，7.06(d，j＝8.3，2h)，6.81(t，j＝8.1，2h)，6.41(t，j＝6.5，1h)，6.22(t，j＝3.7，1h)，3.75(s，3h)，3.75-3.54(m，11h)，2.60(s，1h)，1.63(s，1h).[0297]实施例15：4-(6-(6-(4-甲氧基苄基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0298][0299]步骤1：3-(5-(6-((叔丁氧羰基)氨基)-3-氰基吡唑[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-氨基甲酸叔丁酯[0300][0301]向100ml单口瓶中加入3-(5-(6-溴-3-氰基吡唑[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶ꢀ-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-氨基甲酸叔丁酯(635mg，1.28mmol)，三(二亚苄基丙酮)二钯(118mg，0.13mmol)，二环己基[3，6-ꢀ二甲氧基-2′，4′，6′-三异丙基[1，1′-联苯]-2-基]膦(69mg，0.13mmol)，碳酸铯(1.26g，3.84mmol)，氨基甲酸叔丁酯(453mg，3.84mmol)和15ml二氧六环，氩气保护下，90℃反应过夜。硅藻土助滤，滤液减压蒸干，硅胶柱层析(二氯甲烷∶甲醇＝30∶1)，得到488mg产物3-(5-(6-((叔丁氧羰基)氨基)-3-氰基吡唑[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-ꢀ二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-氨基甲酸叔丁酯。收率为71％。[0302]msm/z：532.3[m 1] 。[0303]1hnmr(400mhz，cdcl3)δ9.12(s，1h)，8.36(s，1h)，8.23(s，1h)，7.76(d，j＝7.3，1h)，7.10(s，1h)，6.67(t，j＝7.3，2h)，4.32(d，j＝4.5，2h)，4.23-4.07(m，2h)，3.59-3.47(m，2h)，2.69(d，j＝6.5，1h)，1.55(s，9h)，1.43(s，1h)，1.39(s，9h).[0304]步骤2：3-(5-(6-((叔丁氧羰基)(2-氟乙基)氨基)-3-氰基吡唑[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-氨基甲酸叔丁酯[0305][0306]向250ml单口瓶中加入3-(5-(6-((叔丁氧羰基)氨基)-3-氰基吡唑[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-氨基甲酸叔丁酯(2900mg，5.46mmol)，碳酸铯(5340mg，16.4mmol)，1-氟-2-ꢀ碘乙烷(1430mg，8.17mmol)和100mldmf，氮气保护下，80℃反应12小时。向反应液中加入150ml水淬灭，乙酸乙酯(150ml)萃取三次。有机层减压蒸干，粗品硅胶柱层析(二氯甲烷∶甲醇＝30∶1)，得到2820mg产物。收率为89％。[0307]msm/z：578.3[m 1] 。[0308]1hnmr(400mhz，cdcl3)δ8.57(s，1h)，8.37(d，j＝1.8，1h)，8.28(s，1h)，7.76(d，j＝8.2，1h)，7.30(s，1h)，6.68(d，j＝8.7，1h)，4.69(dt，j＝47.5，4.5hz，2h)，4.32(d，j＝4.6，2h)，4.12(dd，j＝14.3，7.1，2h)，3.94(dt，j＝26.5，4.6hz，2h)3.57(s，2h)，2.69(dd，j＝13.7，6.2，1h)，1.53(s，1h)，1.48(s，9h)，1.39(s，9h).[0309]步骤3：4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0310][0311]向250ml单口瓶中加入3-(5-(6-((叔丁氧羰基)(2-氟乙基)氨基)-3-氰基吡唑[1，5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-氨基甲酸叔丁酯(2820mg，4.88mmol)和50ml4.0m氯化氢乙酸乙酯溶液，氩气保护下，25℃反应2小时。将反应液减压蒸干，加入200ml二氯甲烷和100ml饱和碳酸氢钠，搅拌至无气泡后分出有机层，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。硅胶柱层析(二氯甲烷∶甲醇＝15∶1)，得到产物。收率为80％。[0312]msm/z：378.2[m 1] 。[0313]步骤4：4-(6-(6-(4-甲氧基苄基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0314][0315]向25ml三口瓶中加入4-(6-(3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶ꢀ-3-基)-6-(2-氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-氰基(60mg，0.16mmol)，4-ꢀ甲氧基苯甲醛(18mg，0.13mmol)和6ml二氯乙烷，缓慢加入三乙酰基硼氢化钠(140mg，0.66mmol)，在室温下反应过夜，tlc监控反应完毕。饱和碳酸氢钠淬灭反应，水洗，二氯甲烷萃取，有机相干燥，抽干，硅胶柱层析得4-(6-(6-(4-甲氧基苄基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷ꢀ-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-氰基。[0316]msm/z：498.2[m 1] 。[0317]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.41(s，1h)，8.35(d，j＝1.9，1h)，8.10(d，j＝1.2，1h)，7.80(d，j＝7.5，1h)，7.31(s，2h)，7.14(d，j＝1.4，1h)，6.90(s，2h)，6.80(d，j＝8.8，1h)，6.30(t，j＝5.6，1h)，4.62(dt，j＝47.7，4.7hz，1h)，4.16-3.86(m，4h)，3.74(s，3h)，3.68-3.44(m，4h)，3.43-3.37(m，2h)，2.61(s，1h)，1.66(s，1h).[0318]实施例16：4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-氟乙胺)-吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0319][0320]该化合物的合成同实施例15。以中间体3b和5-氟-6-甲氧基烟醛为原料合成。[0321]msm/z：517.1[m 1] 。[0322]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.41(s，1h)，8.34(d，j＝2.5hz，1h)，8.10(d，j＝1.9hz，1h)，7.93(s，1h)，7.78(dd，j＝8.8，2.5hz，1h)，7.64(d，j＝11.5hz，1h)，7.12(d，j＝2.0hz，1h)，6.78(d，j＝8.8hz，1h)，6.27(t，j＝5.9hz，1h)，4.63(dt，j＝47.7，4.6hz，2h)，3.92(s，3h)，3.71(s，4h)，3.54(s，4h)，3.43(ddd，j＝28.5，9.9，5.0hz，2h)，2.55(s，1h)，1.59(d，j＝8.0hz，1h).[0323]实施例17：4-(6-(6-(3，5-二氟-4-甲氧基苄基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0324][0325]该化合物的合成同实施例15。以中间体3b和3，5-二氟-4-甲氧基苯甲醛为原料合成。[0326]msm/z：534.2[m 1] 。[0327]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.40(s，1h)，8.32(d，j＝2.3，1h)，8.08(d，j＝1.5，1h)，7.77(dd，j＝8.8，2.4，1h)，7.41-7.34(m，1h)，7.12(d，j＝8.2，2h)，6.77(d，j＝8.8，1h)，6.27(t，j＝5.8，1h)，4.62(dt，j＝47.7，4.7hz，2h)，3.87(s，3h)，3.72-3.65(m，4h)，3.69-3.50(m，6h)，2.56(dd，j＝12.9，6.6，1h)，1.64(s，1h).[0328]实施例18：4-(6-(6-(2-氟-4-甲氧基苄基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷ꢀ-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0329][0330]该化合物的合成同实施例15。以中间体3b和2-氟-4-甲氧基苯甲醛为原料合成。收率为37％。[0331]msm/z：516.2[m 1] 。[0332]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.41(s，1h)，8.35(d，j＝2.2，1h)，8.10(d，j＝1.7，1h)，7.79(dd，j＝8.7，1.9，1h)，7.40(s，1h)，7.14(d，j＝1.7，1h)，6.78(t，j＝8.3，3h)，6.25(t，j＝5.8，1h)，4.69(t，j＝4.7，1h)，4.57(t，j＝4.7，1h)，3.73(s，3h)，3.73-3.37(m，10h)，2.59(s，1h)，1.62(s，1h).[0333]实施例19：4-(6-(6-(4-(二氟甲氧基)苄基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷ꢀ-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0334][0335]该化合物的合成同实施例15。以中间体3b和4-(二氟甲氧基)苯甲醛为原料合成。收率为24％。[0336]msm/z：534.2[m 1] 。[0337]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.41(s，1h)，8.35(d，j＝2.1，1h)，8.10(d，j＝1.5，1h)，7.79(d，j＝8.5，1h)，7.42(s，2h)，7.25-6.98(m，4h)，6.77(t，j＝11.7，1h)，6.25(t，j＝5.8，1h)，4.69(t，j＝4.7，1h)，4.57(t，j＝4.7，1h)，3.82-3.37(m，10h)，2.57(s，1h)，1.63(s，1h).[0338]实施例20：4-(6-(6-((6-(二氟甲氧基)吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0339][0340]该化合物的合成同实施例15。以中间体3b和6-(二氟甲氧基)烟醛为原料合成。收率为29％。[0341]msm/z：535.2[m 1] 。[0342]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.41(s，1h)，8.35(d，j＝2.2，1h)，8.21(s，1h)，8.10(d，j＝1.6，1h)，7.91(d，j＝7.8，1h)，7.79(dd，j＝8.8，2.4，1h)，7.68(s，1h)，7.12(d，j＝1.7，1h)，7.04(d，j＝8.4，1h)，6.79(d，j＝8.8，1h)，6.25(t，j＝5.8，1h)，4.69(t，j＝4.7，1h)，4.57(t，j＝4.7，1h)，3.82-3.37(m，10h)，2.55(s，1h)，1.61(d，j＝7.7，1h).[0343]实施例21：4-(6-(6-((3-氟-4-(二氟甲氧基)苄基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0344][0345]该化合物的合成同实施例15。以中间体3b和3-氟-4-(二氟甲氧基)苯甲醛为原料合成。msm/z：552.2[m 1] 。[0346]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.42(s，1h)，8.34(d，j＝2.2，1h)，8.10(d，j＝1.5，1h)，7.78(dd，j＝8.8，2.4，1h)，7.38(d，j＝12.1，1h)，7.29(t，j＝8.2，1h)，7.23(d，j＝11.5，2h)，7.13(d，j＝1.6，1h)，6.78(d，j＝8.8，1h)，6.30(t，j＝5.8，1h)，4.63(dt，j＝47.7，4.7hz，2h)，3.72-3.68(m，4h)，3.58-3.53(m，4h)，3.43(ddd，j＝27.3，9.5，4.5hz，2h)，2.57(dd，j＝12.8，6.6hz，1h)，1.60(d，j＝8.4，1h).[0347]实施例22：4-(6-(6-((2，3-二氟-4-(甲氧基)苄基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0348][0349]该化合物的合成同实施例15。以中间体3b和2，3-二氟-4-(甲氧基)苯甲醛为原料合成。[0350]msm/z：534.2[m 1] 。[0351]实施例23：4-(6-(6-((2，5-二氟-4-(甲氧基)苄基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0352][0353]该化合物的合成同实施例15。以中间体3b和2，5-二氟-4-(甲氧基)苯甲醛为原料合成。[0354]msm/z：534.2[m 1] 。[0355]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.41(s，1h)，8.34(d，j＝2.3，1h)，8.10(d，j＝1.7，1h)，7.78(dd，j＝8.8，2.5，1h)，7.28(dd，j＝12.0，7.0，1h)，7.13(d，j＝1.8，1h)，7.06(dd，j＝11.5，7.3，1h)，6.77(d，j＝8.8，1h)，6.27(t，j＝5.8，1h)，4.62(dt，j＝47.7，4.7hz，2h)，3.82(s，3h)，3.74-3.68(m，4h)，3.60-3.40(m，6h)，2.53(d，j＝7.3，1h)，1.58(d，j＝8.4，1h).[0356]实施例24：4-(6-(6-((3-氯-4-(甲氧基)苄基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0357][0358]该化合物的合成同实施例15。以中间体3b和3-氯-4-(甲氧基)苯甲醛为原料合成。[0359]msm/z：532.2[m 1] 、534。[0360]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ＝8.42(s，1h)，8.34(d，j＝2.3，1h)，8.11(d，j＝1.6，1h)，7.78(dd，j＝8.8，2.4，1h)，7.41(s，1h)，7.28(d，j＝8.2，1h)，7.14(s，1h)，7.07(d，j＝8.5，1h)，6.78(d，j＝8.8，1h)，6.31(d，j＝4.1，1h)，4.63(dt，j＝47.7，4.7hz，2h)，3.83(s，3h)，3.69(s，4h)，3.56-3.45(m，4h)，3.43-3.38(m，2h)，2.57(s，1h)，1.60(d，j＝8.1，1h).[0361]实施例25：4-(6-(6-((2-氯-4-(甲氧基)苄基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0362][0363]该化合物的合成同实施例15。以中间体3b和2-氯-4-(甲氧基)苯甲醛为原料合成。[0364]msm/z：532.2[m 1] 、534。[0365]1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.41(s，1h)，8.34(d，j＝2.2，1h)，8.11(d，j＝1.6，1h)，7.79(dd，j＝8.7，2.3，1h)，7.49(s，1h)，7.15(d，j＝1.0，1h)，7.00(s，1h)，6.93(d，j＝7.7，1h)，6.79(d，j＝8.8，1h)，6.30(s，1h)，4.63(dt，j＝47.7，4.7hz，2h)，3.83(s，3h)，3.82-3.66(m，4h)，3.61-3.51(m，4h)，3.49-3.38(m，2h)，2.58(s，1h)，1.62(s，1h).[0366]实施例26：4-(6-(6-((5-氯-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-氟乙胺基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0367][0368]该化合物的合成同实施例15。以中间体3b和5-氯-6-甲氧基烟醛为原料合成。[0369]msm/z：532.2[m 1] 、534.2。[0370]实施例27：6-(4，4，4-三氟丁胺)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0371][0372]该化合物的合成同实施例12。中间体2a和氨基甲酸叔丁酯偶联后，与1，1，1-三氟-4-碘丁烷进行亲核取代，脱保护基即得。[0373]msm/z：563.2[m 1] 。[0374]1hnmr(400mhz，dmso)δ8.42(s，1h)，8.36(d，j＝2.3hz，1h)，8.09(s，1h)，8.03(d，j＝1.6hz，1h)，7.79(dd，j＝8.8，2.4hz，1h)，7.70(d，j＝7.8hz，1h)，7.05(d，j＝1.7hz，1h)，6.94-6.65(m，2h)，6.11(t，j＝5.6hz，1h)，3.83(s，3h)，3.79-3.65(m，4h)，3.55(d，j＝18.8hz，4h)，3.16(dd，j＝12.7，6.5hz，3h)，2.52(s，1h)，2.48-2.33(m，3h)，1.92-ꢀ1.74(m，2h)，1.60(d，j＝6.4hz，1h).[0375]实施例28：6-(3-甲磺酰基丙胺)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0376][0377]该化合物的合成同实施例1。以中间体2a和3-甲磺酰基丙胺为原料合成。[0378]msm/z：573.2[m 1] 。[0379]1hnmr(400mhz，dmso)δ8.42(s，1h)，8.35(d，j＝2.2hz，1h)，8.07(d，j＝11.5hz，2h)，7.79(dd，j＝8.8，2.2hz，1h)，7.69(d，j＝7.7hz，1h)，7.04(s，1h)，6.78(t，j＝7.6hz，2h)，6.13(t，j＝5.6hz，1h)，3.82(s，3h)，3.78-3.65(m，4h)，3.51(s，4h)，3.31-3.18(m，4h)，3.00(s，3h)，2.52(s，1h)，2.00(dd，j＝14.6，7.1hz，2h)，1.59(d，j＝7.1hz，1h).[0380]实施例29：6-(3-氟丙胺)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0381][0382]该化合物的合成同实施例12。中间体2a和氨基甲酸叔丁酯偶联后，与1-氟-3-碘丙烷进行亲核取代，脱保护基即得。[0383]msm/z：513.2[m 1] 。[0384]实施例30：6-(3，3，3-三氟丙胺)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0385][0386]该化合物的合成同实施例1。以中间体2a和3，3，3-三氟丙胺为原料合成。[0387]msm/z：549.2[m 1] 。[0388]实施例31：6-(2，2，3，3，3-五氟丙胺)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0389][0390]该化合物的合成同实施例1。以中间体2a和2，2，3，3，3-五氟丙胺为原料合成。[0391]msm/z：585.2[m 1] 。[0392]1hnmr(400mhz，dmso)δ8.46(s，1h)，8.35(d，j＝5.7hz，2h)，8.08(s，1h)，7.80(d，j＝7.7hz，1h)，7.69(d，j＝8.1hz，1h)，7.20(d，j＝1.6hz，1h)，6.78(t，j＝9.4hz，2h)，6.53(t，j＝6.8hz，1h)，4.17(td，j＝15.8，6.5hz，2h)，3.82(s，3h)，3.78-3.62(m，4h)，3.57-3.51(m，4h)，2.50(s，1h)，1.59(d，j＝8.0hz，1h).[0393]实施例32：6-((2-(1h-咪唑-1-基)乙胺基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-ꢀ基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-ꢀ甲腈[0394][0395]该化合物的合成同实施例1。以中间体2a和2-(1h-咪唑-1-基)乙胺为原料合成。[0396]msm/z：547.2[m 1] 。[0397]1hnmr(400mhz，dmso)δ8.42(s，1h)，8.34(d，j＝1.9hz，1h)，8.10(s，2h)，7.78(dd，j＝8.7，2.2hz，1h)，7.70(d，j＝8.1hz，2h)，7.28(s，1h)，7.07(s，1h)，6.91(s，1h)，6.78(dd，j＝8.6，4.2hz，2h)，6.20(t，j＝5.7hz，1h)，4.20(t，j＝5.7hz，2h)，3.83(s，3h)，3.78-3.65(m，4h)，3.63ꢀ-3.51(m，4h)，3.50-3.46(m，2h)，2.56(s，1h)，1.61(d，j＝8.2hz，1h).[0398]实施例33：6-((2-(1h-1，2，4-三唑-1-基)乙胺基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0399][0400]该化合物的合成同实施例1。以中间体2a和2-(1h-1，2，4-三唑-1-基)乙胺为原料合成。[0401]msm/z：548.2[m 1] 。[0402]1hnmr(400mhz，dmso)δ8.54(s，1h)，8.43(s，1h)，8.35(d，j＝2.2hz，1h)，8.11(s，2h)，8.01(s，1h)，7.78(dd，j＝8.7，2.1hz，1h)，7.70(d，j＝7.9hz，1h)，7.05(d，j＝1.0hz，1h)，6.79(dd，j＝8.5，3.3hz，2h)，6.17(t，j＝5.9hz，1h)，4.42(t，j＝5.7hz，2h)，3.83(s，3h)，3.77-3.74(m，4h)，3.60-3.56(m，6h)，2.55(s，1h)，1.61(s，1h).[0403]实施例34：6-((2-(1h-1，3，4-三唑-1-基)乙胺基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0404][0405]该化合物的合成同实施例1。以中间体2a和2-(1h-1，3，4-三唑-1-基)乙胺为原料合成。[0406]msm/z：548.2[m 1] 。[0407]1hnmr(400mhz，dmso)δ8.55(s，2h)，8.43(s，1h)，8.35(d，j＝2.3hz，1h)，8.17(d，j＝1.7hz，1h)，8.08(s，1h)，7.78(dd，j＝8.8，2.5hz，1h)，7.68(dd，j＝8.4，2.2hz，1h)，7.04(d，j＝1.8hz，1h)，6.86-6.72(m，2h)，6.17(t，j＝6.0hz，1h)，4.26(t，j＝5.8hz，2h)，3.82(s，3h)，3.74-ꢀ3.67(m，4h)，3.57-3.51(m，6h)，2.52(s，1h)，1.59(d，j＝8.3hz，1h).[0408]实施例35：6-((2-(4h-1，2，4-三唑-1-基)乙胺基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0409][0410]该化合物的合成同实施例12。中间体2a和氨基甲酸叔丁酯偶联后，与3-(2-碘乙基)-1-((2-(三甲基硅)乙氧基)甲基)-1h-1，2，4-三唑进行亲核取代，脱保护基即得。[0411]msm/z：548.2[m 1] 。[0412]实施例36：6-((2-(5-甲基-4h-1，2，4-三唑-3-基)乙胺基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲腈[0413][0414]该化合物的合成同实施例12。中间体2a和氨基甲酸叔丁酯偶联后，与3-(2-碘乙基)-5-甲基-4h-1，2，4-三唑-4-甲酸叔丁酯进行亲核取代，脱保护基即得。[0415]msm/z：562.2[m 1] 。[0416]ii.生物测试实施例[0417]测试实施例1：对ret激酶的抑制活性[0418]利用caliper公司研发的基于微流体芯片技术的迁移率检测技术(calipermobilityshiftassay)方法检测化合物对ret激酶(购自carnabiosciences，inc.，货号08-159)的抑制效果。本发明化合物、blu-667和loxo-292的测试终浓度为2μm或10μm起始，3倍稀释的10个浓度。使用分液器echo550向384孔反应板中转移250nl的100倍终浓度的各化合物，加入10μl激酶溶液(将ret激酶用缓冲液稀释至终浓度为1nm；缓冲液购自桑迪亚医药技术(上海)有限责任公司)，室温预孵育10分钟(阴性对照孔含10μl缓冲液和250nl100％dmso；阳性对照孔含10μl的激酶溶液和250nl100％dmso)。在上述384孔反应板上加入15μl终浓度为16μm的腺苷三磷酸(atp)和3μm荧光标记底物2号肽(购自吉尔生化(上海)有限公司，货号112394)，该混合溶液起始反应。室温反应60分钟，加入30μl终止检测液(缓冲液中加入乙二胺四乙酸)停止激酶反应。用caliper公司ezreader平台读取转化率，换算抑制率。[0419]抑制率％＝(阳性对照转化率均值％-各化合物转化率均值％)/(阳性对照转化率均值％-阴性对照转化率均值％)。[0420]以浓度的log值作为x轴，抑制率％为y轴，采用分析软件graphpadprism5的log(inhibitor)vs.response-variableslope拟合量效曲线，从而得出各个化合物对酶活性的ic50值，结果见表1。[0421]表1[0422][0423]注：loxo-292参考wo2018071447a1实施例163的方法制备[0424]blu-667参考wo2017079140a1实施例130的方法制备[0425]测试结果表明本发明化合物对ret激酶具有良好的抑制活性。[0426]测试实施例2：对稳转细胞ba/f3kif5b-ret、ba/f3kif5b-ret-g810r的增殖抑制活性[0427]用于测定化合物在体外对小鼠原b细胞ba/f3稳定表达kif5b-ret融合蛋白的ba/f3kif5b-ret细胞株以及小鼠原b细胞ba/f3稳定表达kif5b-ret融合蛋白(ret区域发生g810r点突变)的ba/f3kif5b-ret-g810r细胞株的增殖抑制活性。[0428]细胞来源：ba/f3kif5b-ret细胞购自康源博创生物科技(北京)有限公司，货号kc-1041；ba/f3kif5b-ret-g810r细胞购自康源博创生物科技(北京)有限公司，货号kc-1448。[0429]取处于对数生长期的ba/f3kif5b-ret、ba/f3kif5b-ret细胞接种在96孔板中(135μl/孔)，置于37℃含有5％co2的恒温培养箱中培养24小时。本发明化合物、blu-667和loxo-292已事先溶解在二甲基亚砜(dmso)中配制成10mm的储存液，当检测时再用完全培养基在另一96孔板中稀释到目的浓度的10倍，然后在接种细胞的96孔板中加入各化合物15μl/孔，即到达目的浓度。每个浓度设3个复孔，并设dmso空白对照。继续于37℃含有5％co2的恒温培养箱中培养72小时。从二氧化碳恒温培养箱中取出接种96孔细胞培养板，每孔加入已事先溶解在0.9％生理盐水中配制成5mg/ml并过滤除菌的噻唑蓝(即mtt)储存液20μl，然后于37℃含有5％co2的恒温培养箱中孵育4小时。每孔加入100μl的三联液(按十二烷基硫酸钠(sds)10g、异丁醇5ml、36％-38％盐酸0.1ml用纯化水溶解配成100ml配制溶液)，37℃孵育至沉淀完全溶解，在570nm波长处检测光密度值od并进行数据整理计算抑制率。使用graphpadprism5.0软件分析抑制率数据，利用非线性s曲线回归来拟合得出剂量-效应曲线，并由此计算ic50值，结果见表2。[0430]抑制率％＝[(od72小时含dmso培养基对照组-od72小时化合物组)/(od72小时含dmso培养基对照组-od0小时含dmso培养基对照组)]×100％。[0431]表2[0432][0433][0434]注：nd表示未测定[0435]loxo-292参考wo2018071447a1实施例163的方法制备[0436]blu-667参考wo2017079140a1实施例130的方法制备[0437]测试结果表明本发明化合物对稳转细胞ba/f3kif5b-ret、ba/f3kif5b-ret-g810r具有良好的增殖抑制活性；相对于blu-667、loxo-292，本发明化合物对稳转细胞ba/f3kif5b-ret-g810r具有更好的增殖抑制活性。[0438]测试实施例3：对稳转细胞ba/f3kif5b-ret、ba/f3kif5b-ret-g810r裸小鼠皮下移植瘤的生长抑制作用[0439]本实验用于研究化合物对稳转细胞ba/f3kif5b-ret、ba/f3kif5b-ret-g810r裸小鼠皮下移植瘤的生长抑制作用以及安全性情况。[0440]细胞培养：稳转细胞ba/f3kif5b-ret、ba/f3kif5b-ret-g810r各自培养在加有10％胎牛血清的rpmi-1640培养基中，放在37℃含有5％co2的恒温培养箱中培养。收取指数生长期的细胞并计数，以供接种。[0441]实验动物：balb/cnude裸小鼠，雌性，5周龄，30只，购自北京维通利华实验动物技术有限公司。[0442]针对稳转细胞ba/f3kif5b-ret和稳转细胞ba/f3kif5b-ret-g810r各设3个实验组，每组5只；3个实验组分别为：含有10％二甲基乙酰胺 5％聚乙二醇-15羟基硬脂酸酯 85％生理盐水的溶媒对照组(即vehicle组)、loxo-292组和实施例12化合物组。[0443]实验方案3a：稳转细胞ba/f3kif5b-ret细胞株(2×106个/只)接种于balb/cnude裸小鼠右侧背部皮下，每只小鼠接种量是0.1ml，定期观察肿瘤生长情况。待肿瘤生长至大于150mm3时，根据肿瘤大小随机分组。loxo-292组和实施例12化合物组各自按照10mg/kg灌胃给药，给药体积为10ul/g，溶媒对照组给予等量溶媒，每天两次，连续14天。整个实验过程中，每周测量两次小鼠的体重和肿瘤大小，观察是否出现毒性反应。[0444]实验方案3b：稳转细胞ba/f3kif5b-ret-g810r细胞株(2×106个/只)接种于balb/cnude裸小鼠右侧背部皮下，每只小鼠接种量是0.1ml，定期观察肿瘤生长情况。待肿瘤生长至大于150mm3时，根据肿瘤大小随机分组。loxo-292组和实施例12化合物组各自按照30mg/kg灌胃给药，给药体积为10ul/g，溶媒对照组给予等量溶媒，每天两次，连续14天。整个实验过程中，每周测量两次小鼠的体重和肿瘤大小，观察是否出现毒性反应。[0445]肿瘤体积(tumorvolume，tv)的计算公式为：tv＝1/2×a×b×b，其中a、b分别表示肿瘤长、宽。[0446]结果：实验方案3a、3b中溶媒对照组的动物在7天后均死亡，而loxo-292组和实施例12化合物组无动物死亡，且给药期间体重无明显下降；实验方案3a、3b中3个实验组的肿瘤体积变化曲线分别见图1和图2。[0447]测试结果表明本发明化合物对稳转细胞ba/f3kif5b-ret、ba/f3kif5b-ret-g810r裸小鼠皮下移植瘤的生长都具有良好的抑制作用；相对于loxo-292，本发明化合物对ba/f3kif5b-ret-g810r裸小鼠皮下移植瘤的生长具有更好的抑制作用；本发明化合物对裸小鼠体重影响较小，显示出较好的安全性。[0448]在本文中提及的所有文献均通过引用被并入本技术中。此外还应指明的是，在阅读了本技术的上述公开内容之后，本领域技术人员可以无需背离本发明的精神和范围，对本发明作出各种修饰、改动或修改，但这些变化形式同样都应落于本技术所附权利要求书所记载的范围。当前第1页12当前第1页12
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