类器官培养体系及类器官的培养方法与流程

技术特征：
1.一种类器官培养体系，其中，所述类器官培养体系包括：基质胶，和与所述基质胶相混合的细胞悬液；所述基质胶与所述细胞悬液的体积比为(3～4):(5～10)；所述细胞悬液中包含来源于细胞系的细胞，所述细胞附着于所述基质胶的表面和/或内部；并且，所述细胞悬液中，所述来源于细胞系的细胞含量为80
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1600个/100μl；优选地，所述基质胶与所述细胞悬液的体积比为3:4、3:5、3:6、3:7、3:8、3:9、3:10、4:5、4:6、4:7、4:8、4:9或4:10；更优选地，所述基质胶与所述细胞悬液的体积比为30:50、32:50、34:50、36:50、40:50、30:100、32:100、34:100、36:100、38:100或40:100；进一步优选地，所述细胞悬液中，所述来源于细胞系的细胞含量为80个、100个、200个、300个、400个、500个、600个、700个、800个、900个、1000个、1100个、1200个、1300个、1400个、1500个或1600个/100μl。2.根据权利要求1所述的类器官培养体系，其中，每32μl所述基质胶附着的细胞数量为80
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800个，优选为200、400、600、800个；优选地，所述基质胶选自rgf bme基质胶或matrigel基质胶；更优选地，所述基质胶为rgf bme基质胶。3.根据权利要求1或2所述的类器官培养体系，其中，所述来源于细胞系的细胞选自来源于下述任一种细胞系的细胞：293、293t、a549、mda
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mb
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231、pc
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3。4.根据权利要求1
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3任一项所述的类器官培养体系，其中，所述细胞悬液包括细胞培养基，和分散于所述细胞培养基内的细胞；优选地，所述细胞培养基为含有10％(v/v)胎牛血清的imdm培养基。5.一种类器官的培养方法，其中，所述培养方法包括如下步骤：制备步骤：制备细胞悬液，所述细胞悬液中包含来源于细胞系的细胞，所述来源于细胞系的细胞含量为80
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1600个/100μl；混合步骤：按照(3～4):(5～10)的体积比混合基质胶与所述细胞悬液，使所述细胞悬液液中的细胞附着于所述基质胶的内部和/或表面，得到类器官培养体系；培养步骤：对所述类器官培养体系进行培养，得到类器官；优选地，混合步骤中所述基质胶与所述细胞悬液的体积比为3:4、3:5、3:6、3:7、3:8、3:9、3:10、4:5、4:6、4:7、4:8、4:9或4:10；更优选地，所述基质胶与所述细胞悬液的体积比为30:50、32:50、34:50、36:50、40:50、30:100、32:100、34:100、36:100、38:100或40:100；优选地，制备步骤中所述来源于细胞系的细胞含量为80个、100个、200个、300个、400个、500个、600个、700个、800个、900个、1000个、1100个、1200个、1300个、1400个、1500个或1600个/100μl。6.根据权利要求5所述的培养方法，其中，所述制备步骤包括：培养来源于细胞系的细胞，然后将细胞消化、离心，将离心所得的细胞沉淀分散于细胞培养基中，得到细胞悬液；优选地，所述细胞来源于下述任一种细胞系的细胞：293、293t、a549、mda
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mb
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231、pc
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3；更优选地，所述细胞为293t细胞；优选地，所述细胞培养基为含有10％(v/v)胎牛血清的imdm培养基。7.根据权利要求5所述的培养方法，其中，所述混合步骤包括：(1)取液态基质胶铺设于细胞培养容器内，所述液态基质胶固化后，得到第一包被层；
(2)向所述第一包被层上加入细胞悬液，所述细胞悬液中的细胞被接种于所述第一包被层的内部和/或表面，得到第二包被层；优选地，所述混合步骤还包括：(3)静置一段时间，向所述第二包被层上加入含有基质胶的细胞培养基；优选地，所述基质胶为matrigel和/或rgf bme基质胶；更优选地，所述混合步骤包括：(1)取液态基质胶铺设于细胞培养容器内，所述液态基质胶固化后，得到第一包被层；(2)向所述第一包被层上加入细胞悬液，所述细胞悬液中的细胞被接种于所述包被层的内部和/或表面，得到第二包被层，静置10
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15min；(3)向所述第二包被层上加入含有液态基质胶的细胞培养基；其中，步骤(3)细胞培养基中液态基质胶的体积比为10％(v/v)，步骤(2)中细胞悬液和步骤(3)中细胞培养基的体积比为1:1。8.根据权利要求1
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4任一项所述的类器官培养体系或根据权利要求5
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7任一项所述的培养方法在培养类器官中的应用。9.一种类器官，其中，所述类器官使用根据权利要求1
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4任一项所述的类器官培养体系或根据权利要求5
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7任一项所述的培养方法而获得。10.根据权利要求9所述的类器官在如下(a1)
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(a3)至少一种中的应用：(a1)药物筛选，或构建药物筛选模型；(a2)药物毒性测试，或构建药物毒性测试模型；(a3)疾病研究，或构建疾病模型。

技术总结
本发明属于类器官和细胞培养技术领域，具体来说，本发明涉及一种类器官培养体系、类器官的培养方法，基于类器官培养体系或培养方法获得的类器官及其应用。本发明提供的类器官培养体系或培养方法实现了以来源于细胞系的细胞进行类器官培养，可有效简化类器官的培养过程，降低培养成本，适合各种组织的类器官模型的培养及应用，为疾病模型构建、药物筛选、药物毒性测试、个体化治疗等领域提供了重要的研究和应用平台。和应用平台。和应用平台。


技术研发人员：刘雪莲 卜婷婷
受保护的技术使用者：同宜医药（苏州）有限公司
技术研发日：2021.10.12
技术公布日：2021/12/7