工程化以定植肿瘤、肿瘤驻留免疫细胞和肿瘤微环境的免疫刺激性细菌的制作方法

技术特征：
1.来自非人物种的修饰的干扰素基因刺激物(sting)蛋白，其中所述非人sting是与人sting的nf
‑
κb信号传导活性相比具有较低nf
‑
κb信号传导活性的sting，及任选地是与人sting相比具有较高i型干扰素(ifn)途径信号传导活性的sting，其中：所述非人sting蛋白被修饰以包括一个或多个突变，使其在不存在胞质核酸的情况下具有增加的活性或组成型地作用；所述突变是氨基酸的插入、缺失和/或取代；及所述sting蛋白任选地具有traf6结合位点的缺失。2.来自非人物种的修饰的干扰素基因刺激物(sting)蛋白，或嵌合的人sting蛋白，或嵌合的sting蛋白的变体，其中所述修饰的sting蛋白和嵌合的sting蛋白的变体包含功能获得性(gof)相关的一个或多个突变，导致编码的sting蛋白的组成型激活和/或增强的敏感性，或增加的与内源性配体的亲和性或结合，其中：所述sting蛋白通过一个或多个氨基酸的插入、缺失和取代中的一项或多项而被修饰；所述嵌合的人sting蛋白包含人sting蛋白的一部分和非人sting蛋白的一部分；所述非人或嵌合的sting蛋白具有ifn
‑
β信号传导活性，及与人sting的激活的b细胞的核因子κ轻链增强子(nf
‑
κb)信号传导活性相比具有减弱的nf
‑
κb信号传导活性；以及产生变体或修饰的蛋白的一个或多个突变导致在诱导ifn
‑
β产生中增加的sting活性或组成型活性。3.权利要求1或权利要求2的修饰的sting蛋白，其中所述未修饰的人sting蛋白包含seq id no:305
‑
309任一所示氨基酸序列，或者是其与seq id no:305
‑
309任一所示氨基酸序列具有至少98％序列相同性的人等位基因变体。4.权利要求1至3任一项的修饰的sting蛋白，其中：所述sting蛋白是嵌合体，其包括用来自第二物种的sting蛋白的c末端尾部(ctt)取代的来自第一物种的sting蛋白中的ctt区；第二物种的sting蛋白的nf
‑
κb信号传导活性低于人sting的nf
‑
κb信号传导活性；及任选地ctt中的traf6结合位点是缺失的。5.权利要求1至4任一项的修饰的sting蛋白，其中所述一个或多个突变是对应于与人自身炎症性疾病sting相关的婴儿期发病血管病变(savi)相关的那些突变的任何突变。6.一种修饰的干扰素基因刺激物(sting)蛋白，其为嵌合体，包含用来自第二物种的sting的ctt(c末端尾部)取代的来自第一物种的sting中的ctt区，其中：所述第二物种的sting蛋白的nf
‑
κb信号传导活性低于人sting的nf
‑
κb信号传导活性；及ctt中的traf6结合位点是缺失的。7.权利要求2至6任一项的修饰的sting蛋白，其中：所述嵌合体包含人sting蛋白的一部分和非人sting蛋白的一部分；及所述人sting蛋白包含seq id no:305
‑
309任一所示氨基酸序列，或者是其与seq id no:305
‑
309任一所示氨基酸序列具有至少98％序列相同性的人等位基因变体。8.权利要求2和4至7任一项的修饰的sting蛋白，其是包含来自两个物种的sting蛋白的部分的嵌合体，由此所得sting蛋白具有ifn
‑
β信号传导活性，其中第一物种是人，且第二物种选自袋獾(tasmanian devil)、狨猴(marmoset)、牛(cattle)、猫(cat)、鸵鸟
(ostrich)、野猪(boar)、蝙蝠(bat)、海牛(manatee)、朱鹮(crested ibis)、腔棘鱼(coelacanth)、小鼠(mouse)和鬼鲨(ghost shark)。9.权利要求1至8任一项的修饰的sting蛋白，其中非人sting的i型ifn信号传导活性是野生型人sting蛋白的i型ifn信号传导活性的至少30％或至少约30％。10.权利要求1至9任一项的修饰的sting蛋白，其中所述非人sting的nf
‑
κb信号传导活性是野生型人sting的nf
‑
κb信号传导活性的小于30％、小于20％、小于15％、小于10％或小于5％。11.权利要求1至10任一项的修饰的sting蛋白，其中所述非人物种或第二物种选自袋獾、狨猴、牛、猫、鸵鸟、野猪、蝙蝠、海牛、朱鹮、腔棘鱼、小鼠和鬼鲨。12.权利要求1至11任一项的修饰的sting蛋白，其中sting的修饰是通过参照于人sting和与人sting比对而对应于在干扰素疾病中发生的突变的一个或多个突变，其中用于进行比对的人sting的序列如seq id no:305
‑
309任一所示。13.权利要求1至12任一项的修饰的sting蛋白，其包括用来自第二sting蛋白的c
‑
末端尾部(ctt)取代的ctt，所述第二sting蛋白与人sting的nf
‑
κb信号传导活性相比具有降低的nf
‑
κb信号传导活性。14.权利要求1至13任一项的修饰的sting蛋白，其中ctt中的traf6结合位点是缺失的。15.权利要求13或权利要求14的修饰的sting蛋白，其中所述第二ctt来自袋獾、狨猴、牛、猫、鸵鸟、野猪、蝙蝠、海牛、朱鹮、腔棘鱼、小鼠或鬼鲨的sting蛋白。16.权利要求13或权利要求14的修饰的sting蛋白，其中所述第二ctt来自袋獾、狨猴、牛、猫、鸵鸟、公猪、蝙蝠、海牛、朱鹮、腔棘鱼、小鼠或鬼鲨的sting蛋白，且其取代人sting ctt。17.权利要求13至16任一项的修饰的sting蛋白，其中取代ctt选自如下物种及具有如下序列：
或与其具有至少98％序列相同性的每个这些序列的等位基因变体。18.权利要求4至17任一项的修饰的sting蛋白，其中所述人sting ctt包含序列ekeevtvgslktsavpststsmsqepellisgmekplplrtdfs(seq id no:352)，或者是与其具有至少98％序列相同性的等位基因变体。19.权利要求4至18任一项的修饰的sting蛋白，其中所述修饰的sting蛋白是嵌合体，其中人sting ctt由来自袋獾sting的ctt取代。20.权利要求19的修饰的sting蛋白，其中来自袋獾sting的c端尾部(ctt)包含序列：rqeefaigpkramtvttsstlsqepqllisgmeqplslrtdgf(seq id no:353)，或者是与其具有至少98％序列相同性的等位基因变体。21.权利要求1至20任一项的修饰的sting蛋白，其包含traf6结合位点的缺失。22.权利要求21的修饰的sting蛋白，其中sting是人sting，且所述traf6结合位点包含在c末端的氨基酸残基dfs。23.权利要求1至22任一项的修饰的sting蛋白，其包含在不存在胞质核酸的情况下增加i型干扰素信号传导活性或使所述活性为组成型的修饰。24.权利要求23的修饰的sting蛋白，其中所述修饰通过参照于人sting和与人sting比对而对应于干扰素疾病中发生的突变，其中人sting具有seq id no:305
‑
309任一所示序列。25.权利要求1至24任一项的修饰的sting蛋白，其中赋予增加的活性或组成型活性的修饰是通过参照seq id no:305
‑
309任一所示人sting序列而对应于如下的一项或多项的一个或多个氨基酸取代：s102p，v147l，v147m，n154s，v155m，g166e，c206y，g207e，s102p/f279l，f279l，r281q，r284g，r284s，r284m，r284k，r284t，r197a，d205a，r310a，r293a，t294a，e296a，r197a/d205a，s272a/q273a，r310a/e316a，e316a，e316n，e316q，s272a，r293a/t294a/e296a，d231a，r232a，k236a，q273a，s358a/e360a/s366a，d231a/r232a/k236a/r238a，s358a，e360a，s366a，r238a，r375a和s324a/s326a。
26.权利要求1至25任一项的修饰的sting蛋白，其中所述非人sting蛋白是seq id no:331的袋獾sting蛋白，或其与seq id no：331的sting蛋白具有至少98％序列相同性的等位基因变体。27.权利要求1至26任一项的修饰的sting蛋白，其包含通过参照如seq id no:305
‑
309任一所示人sting的序列而对应于c206y或r284g的取代。28.权利要求27的修饰的sting蛋白，其包含seq id no:332或333所示氨基酸序列。29.权利要求1至25任一项的修饰的sting蛋白，其中所述非人物种sting蛋白的序列是如seq id no:331、338及341至351所示那些，或者所述非人sting蛋白是与其具有至少98％序列相同性的如seq id no：331、338及341至351所示任一sting蛋白的等位基因变体。30.一种免疫刺激性细菌，包含编码权利要求1至29中任一项的修饰的sting蛋白或编码来自非人物种的sting蛋白的质粒，其中所述sting蛋白具有i型ifn信号传导活性和与人sting的nf
‑
κb信号传导活性相比减弱的nf
‑
κb信号传导活性。31.权利要求30的免疫刺激性细菌，其中所述非人物种选自袋獾、狨猴、牛、猫、鸵鸟、野猪、蝙蝠、海牛、朱鹮、腔棘鱼、小鼠和鬼鲨。32.一种免疫刺激性细菌，包含编码免疫刺激性蛋白的功能获得性变体的质粒，所述免疫刺激性蛋白在未修饰的形式中是导致i型干扰素(ifn)表达的胞质dna/rna传感器途径的一部分。33.权利要求32的免疫刺激性细菌，其中：所述功能获得性(gof)变体是免疫刺激性蛋白的组成型活性变体，其在人中促进或引起干扰素疾病；及所述免疫刺激性细菌的基因组被修饰，使得所述细菌优先感染肿瘤驻留免疫细胞，和/或所述免疫刺激性细菌的基因组被修饰，使得其在肿瘤驻留免疫细胞内诱导较少的细胞死亡(减少细胞焦亡)，由此所述免疫刺激性细菌在肿瘤中或在肿瘤微环境中或在肿瘤驻留免疫细胞中累积，从而将组成型活性免疫刺激性蛋白递送至宿主细胞以刺激或诱导i型ifn表达。34.权利要求32或权利要求33的免疫刺激性细菌，其中所述gof变体蛋白包含消除所述免疫刺激性蛋白中磷酸化位点的突变，从而降低激活的b细胞的核因子κ
‑
轻链增强子(nf
‑
κb)信号传导。35.权利要求32至34任一项的免疫刺激性细菌，其中诱导i型ifn的免疫刺激性蛋白是sting、rig
‑
i、irf
‑
3、irf
‑
7或mda5。36.一种免疫刺激性细菌，其包含编码诱导i型ifn表达的免疫刺激性蛋白或其具有增加的活性或组成型活性变体的质粒，其中所述免疫刺激性蛋白是sting、rig
‑
i、irf
‑
3、irf
‑
7或mda5。37.权利要求32至36任一项的免疫刺激性细菌，其中所述免疫刺激性蛋白是sting、rig
‑
i、irf
‑
3、irf
‑
7或mda5的变体，其包含导致i型ifn表达增加的功能获得性突变。38.权利要求32至37任一项的免疫刺激性细菌，其中所述免疫刺激性蛋白是sting、rig
‑
i、irf
‑
3、irf
‑
7或mda5的变体，其中由于病毒感染而被磷酸化的一个或多个丝氨酸(s)或苏氨酸(t)残基被天冬氨酸(d)残基取代，由此所得变体蛋白是组成型诱导i型干扰素的磷酸化模拟物(phosphomimetic)。39.权利要求38的免疫刺激性细菌，其中：
所述变体蛋白是irf
‑
3，且包含在参照seq id no:312对应于第385、386、396、398、402、404和405位的残基处的一个或多个取代；及所述残基由天冬氨酸残基取代。40.权利要求39的免疫刺激性细菌，其中所述变体irf
‑
3蛋白参照seq id no:312具有s396d取代。41.权利要求39的免疫刺激性细菌，其中所述变体irf
‑
3蛋白参照seq id no:312包含s396d/s398d/s402d/t404d/s405d取代，或其保守型取代。42.权利要求39的免疫刺激性细菌，其中所述变体irf
‑
3蛋白参照seq id no:312包含s396d/s398d/s402d/t404d/s405d取代。43.权利要求32至42任一项的免疫刺激性细菌，其中所述免疫刺激性蛋白是当在对象中表达时导致i型ifn组成型表达的变体。44.权利要求30至43任一项的免疫刺激性细菌，其中所述修饰的免疫刺激性蛋白或修饰的sting蛋白与相应的未修饰蛋白具有至少95％的序列相同性，或具有选自插入、缺失和取代的1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸修饰。45.权利要求32至44任一项的免疫刺激性细菌，其中所述免疫刺激性蛋白是当在对象中表达时导致i型ifn组成型表达的变体。46.权利要求32至44任一项的免疫刺激性细菌，其中所述免疫刺激性蛋白在其未修饰形式中感测胞质核酸、核苷酸、二核苷酸或环状二核苷酸或直接或间接与胞质核酸、核苷酸、二核苷酸或环状二核苷酸相互作用以诱导i型ifn的表达，及所述变体蛋白在不存在感测胞质核酸、核苷酸、二核苷酸或环状二核苷酸或不存在与胞质核酸、核苷酸、二核苷酸或环状二核苷酸相互作用的情况下诱导i型ifn的表达。47.权利要求46的免疫刺激性细菌，其中所述免疫刺激性蛋白是不需要胞质核酸、核苷酸、二核苷酸或环状二核苷酸以导致i型ifn表达的功能获得性(gof)变体。48.权利要求32至47任一项的免疫刺激性细菌，其中所述免疫刺激性蛋白在其未修饰形式中激活或诱导i型ifn的表达。49.权利要求32至48任一项的免疫刺激性细菌，其中所述免疫刺激性蛋白的未修饰形式参与激活i型ifn的先天胞质dna/rna识别。50.权利要求49的免疫刺激性细菌，其中i型ifn是干扰素
‑
α或干扰素
‑
β。51.权利要求32至50任一项的免疫刺激性细菌，其中所述免疫刺激性蛋白选自sting、rig
‑
i、mda
‑
5、irf
‑
3、irf
‑
7、trim56、rip1、sec5、traf3、traf2、traf6、stat1、lgp2、ddx3、dhx9、ddx1、ddx21、dhx15、dhx33、dhx36、ddx60和snrnp200。52.权利要求32至50任一项的免疫刺激性细菌，其中所述免疫刺激性蛋白选自trim56、rip1、sec5、traf3、traf2、traf6、stat1、lgp2、ddx3、dhx9、ddx1、ddx21、dhx15、dhx33、dhx36、ddx60和snrnp200。53.权利要求32至52任一项所述的免疫刺激性细菌，其中是胞质dna/rna传感器途径的一部分的所述免疫刺激性蛋白是包含功能获得性突变的变体或是包含由此i型干扰素或其它免疫介导物/调节物的表达为组成型的突变的变体。54.权利要求53的免疫刺激性细菌，其中：感测胞质dna/rna的免疫刺激性蛋白是变体sting蛋白、变体mda5蛋白、变体rig
‑
i蛋
白、变体irf
‑
7蛋白或变体irf
‑
3蛋白；未修饰的sting具有seq id no:305
‑
309任一所示序列，未修饰的mda5具有seq id no:310所示序列，未修饰的rig
‑
i具有seq id no:311所示序列，未修饰的irf
‑
7具有seq id no:313所示序列，及未修饰的irf
‑
3具有seq id no:312所示序列；以及修饰的免疫刺激性蛋白具有选自取代、缺失和插入的1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸修饰。55.权利要求32至54任一项的免疫刺激性细菌，其中所述免疫刺激性蛋白选自sting、mda5、irf
‑
3、irf
‑
7和rig
‑
i，且包含使sting、mda5、irf
‑
3、irf
‑
7或rig
‑
i具有组成型活性的功能获得性突变，由此i型ifn的表达是组成型的。56.权利要求54或权利要求55的免疫刺激性细菌，其中是氨基酸取代的修饰如下选择：a)在sting中，参照seq id no:305
‑
309，选自以下的一个或多个：s102p，v147l，v147m，n154s，v155m，g166e，c206y，g207e，s102p/f279l，f279l，r281q，r284g，r284s，r284m，r284k，r284t，r197a，d205a，r310a，r293a，t294a，e296a，r197a/d205a，s272a/q273a，r310a/e316a，e316a，e316n，e316q，s272a，r375a，r293a/t294a/e296a，d231a，r232a，k236a，q273a，s358a/e360a/s366a，d231a/r232a/k236a/r238a，s358a，e360a，s366a，r238a和s324a/s326a；b)在mda5中，参照seq id no:310，以下的一个或多个：t331i，t331r，a489t，r822q，g821s，a946t，r337g，d393v，g495r，r720q，r779h，r779c，l372f和a452t；c)在rig
‑
i中，参照seq id no:311，e373a和c268f的一个或两者；d)在irf
‑
3中，参照seq id no:312，s396d；e)在irf
‑
7中，参照seq id no:313，以下的一个或多个：s477d/s479d，s475d/s477d/s479d，和s475d/s476d/s477d/s479d/s483d/s487d；及f)增加活性或使i型干扰素组成型表达的保守型氨基酸取代。57.根据权利要求54至56任一项的免疫刺激性细菌，其中所述免疫刺激性蛋白是包含参照seq id no:305
‑
309选自如下的一个或多个氨基酸取代的变体sting：s102p，v147l，v147m，n154s，v155m，g166e，c206y，g207e，s102p/f279l，f279l，r281q，r284g，r284s，r284m，r284k，r284t，r197a，d205a，r310a，r293a，t294a，e296a，r197a/d205a，s272a/q273a，r310a/e316a，e316a，e316n，e316q，s272a，r293a/t294a/e296a，d231a，r232a，k236a，q273a，s358a/e360a/s366a，d231a/r232a/k236a/r238a，s358a，e360a，s366a，r238a，r375a和s324a/s326a。58.一种免疫刺激性细菌，包含编码修饰的sting蛋白的核酸，所述修饰的sting蛋白是在未修饰的形式下感测胞质rna/dna的免疫刺激性蛋白，其中sting蛋白在质粒上被编码，及编码核酸可操纵地连接于由真核宿主识别的调节序列。59.权利要求58的免疫刺激性细菌，其中所述修饰的sting蛋白不需要环状二核苷酸(cdn)以发挥活性。60.权利要求58或权利要求59的免疫刺激性细菌，其包含编码修饰的sting蛋白的核苷酸序列，其中：sting中的修饰使其活性是组成型的，使得其不需要cgamp以发挥活性；修饰的sting蛋白由修饰的tmem173基因编码；
所述修饰包括氨基酸的插入、缺失或取代；及；与未修饰的sting蛋白相比，修饰的sting蛋白具有增强的免疫刺激性活性。61.权利要求59或权利要求60的免疫刺激性细菌，其中参照seq id no:305
‑
309，sting中的氨基取代为选自以下的一种或多种：s102p，v147l，v147m，n154s，v155m，g166e，c206y，g207e，s102p/f279l，f279l，r281q，r284g，r284s，r284m，r284k，r284t，r197a，d205a，r310a，r293a，t294a，e296a，r197a/d205a，s272a/q273a，r310a/e316a，e316a，e316n，e316q，s272a，r293a/t294a/e296a，d231a，r232a，k236a，q273a，s358a/e360a/s366a，d231a/r232a/k236a/r238a，s358a，e360a，s366a，r238a，r375a，和s324a/s326a，及其保守型氨基酸取代。62.权利要求30至61任一项的免疫刺激性细菌，其在所述细菌的基因组中包含降低在宿主中非免疫细胞的毒性或感染性的突变。63.权利要求30至62任一项的免疫刺激性细菌，其中所述免疫刺激性细菌的基因组被修饰，由此所述细菌是鞭毛蛋白
‑
(flic
‑
/fljb
‑
)和/或pagp
‑
。64.权利要求30至63任一项的免疫刺激性细菌，其中所述免疫刺激性细菌的基因组被修饰，由此所述细菌是鞭毛蛋白
‑
(flic
‑
/fljb
‑
)。65.权利要求30至64任一项的免疫刺激性细菌，其中所述免疫刺激性细菌的基因组被修饰，由此所述细菌是pagp
‑
/msbb
‑
。66.权利要求30至63任一项的免疫刺激性细菌，其中所述细菌是鞭毛蛋白
‑
(flic
‑
/fljb
‑
)和pagp
‑
。67.权利要求30至66任一项的免疫刺激性细菌，其中所述免疫刺激性细菌是天冬氨酸
‑
半醛脱氢酶
‑
(asd
‑
)。68.权利要求30至66任一项的免疫刺激性细菌，其是天冬氨酸
‑
半醛脱氢酶
‑
(asd
‑
)，其中由于编码天冬氨酸
‑
半醛脱氢酶(asd)的内源基因的全部或部分破坏或缺失由此内源性asd不表达，因而所述细菌是asd
‑
。69.权利要求30至68任一项的免疫刺激性细菌，其在细菌启动子控制下在质粒上编码天冬氨酸
‑
半醛脱氢酶(asd)。70.权利要求30至69任一项的免疫刺激性细菌，其是msbb
‑
。71.权利要求30至70任一项的免疫刺激性细菌，其是puri
‑
(purm
‑
)。72.权利要求30至71任一项的免疫刺激性细菌，其是asd
‑
、puri
‑
、msbb
‑
、鞭毛蛋白
‑
(flic
‑
/fljb
‑
)和pagp
‑
。73.权利要求30至72任一项的免疫刺激性细菌，其中参与spi
‑
1依赖性侵入的一个或多个基因或操纵子被缺失或失活，由此所述免疫刺激性细菌不侵入或感染上皮细胞。74.权利要求73的免疫刺激性细菌，其中avra、hila、hild、inva、invb、invc、inve、invf、invg、invh、invi、invj、iacp、iagb、spao、spaq、spar、spas、orga、orgb、orgc、prgh、prgi、prgj、prgk、sica、sicp、sipa、sipb、sipc、sipd、sirc、sopb、sopd、sope、sope2、sprb和sptp的一个或多个被缺失或失活。75.权利要求30至72任一项的免疫刺激性细菌，其中参与spi
‑
1非依赖性侵入的一个或多个基因被缺失或失活，其中：所述免疫刺激性细菌不侵入或感染上皮细胞；及
所述一个或多个基因选自pagn、hlye、pefi、srgd、srga、srgb和srgc。76.权利要求30至75任一项的免疫刺激性细菌，其包含：细菌基因组的修饰，由此所述细菌在肿瘤驻留免疫细胞中诱导较少的细胞死亡；和/或细菌基因组的修饰，由此与其它细胞类型相比所述细菌优先感染肿瘤驻留免疫细胞。77.权利要求30至76任一项的免疫刺激性细菌，其中所述细菌在质粒上编码asd，且其表达受真核对象的肿瘤微环境(tme)中表达的启动子的控制。78.权利要求30至77任一项的免疫刺激性细菌，其对于腺苷和腺嘌呤是营养缺陷型的。79.权利要求30至77任一项的免疫刺激性细菌，其对于腺苷是营养缺陷型的。80.权利要求30至79任一项的免疫刺激性细菌，其对于腺苷是营养缺陷型的，且缺少鞭毛，其中所述野生型细菌具有鞭毛。81.权利要求30至80任一项的免疫刺激性细菌，其在所述细菌的基因组中包含降低在宿主中非免疫细胞的毒性或感染性的突变。82.权利要求30至81任一项的免疫刺激性细菌，其中所述细菌是pagp
‑
。83.权利要求30至82任一项的免疫刺激性细菌，其中所述免疫刺激性细菌是鞭毛蛋白
‑
(flic
‑
/fljb
‑
)和/或pagp
‑
，且是puri
‑
(purm
‑
)、msbb
‑
、purd
‑
、adra
‑
、csgd
‑
、qsec
‑
、和hila
‑
、lppa
‑
、或lppb
‑
的一种或多种。84.权利要求30至83任一项的免疫刺激性细菌，其中所述免疫刺激性细菌是hila
‑
、pagp
‑
和鞭毛蛋白
‑
(flic
‑
/fljb
‑
)。85.权利要求30至84任一项的免疫刺激性细菌，其包含编码cpg基序的核酸，其中所述编码cpg基序的核酸包含于在所述质粒上编码的细菌基因中或是在所述质粒上编码的细菌基因的一部分。86.权利要求85的免疫刺激性细菌，其中包含cpg的基因是asd，其中所述asd在所述质粒上编码。87.权利要求30至86任一项的免疫刺激性细菌，其是鞭毛蛋白缺陷的，其中所述野生型细菌包含鞭毛。88.权利要求30至87任一项的免疫刺激性细菌，其中所述质粒包含编码cytollo的核酸，所述cytollo是缺少信号序列的listeriolysin o(llo)蛋白。89.权利要求30至88任一项的免疫刺激性细菌，其包含在所述质粒上编码的dna核靶向序列(dts)。90.权利要求89的免疫刺激性细菌，其中所述dts是sv40 dts。91.权利要求30至90任一项的免疫刺激性细菌，其在编码核酸内切酶i(enda)的基因中具有缺失或修饰，由此enda活性被抑制或消除。92.权利要求30至91任一项的免疫刺激性细菌，其中所述质粒包含cpg基序、用于质粒维持的asd基因选择标记和dna核靶向序列中的一个或多个。93.权利要求30至92任一项的免疫刺激性细菌，其中所述免疫刺激性细菌包含puri缺失、msbb缺失、asd缺失和adra缺失。94.权利要求30至93任一项的免疫刺激性细菌，其中所述免疫刺激性细菌包含：一种或多种选自以下的基因的突变，其改变脂多糖的生物合成：rfal、rfag、rfah、rfad、rfap、rfb、rfa、msbb、htrb、fira、pagl、pagp、lpxr、arnt、epta和lpxt中的一种或多
种；和/或一种或多种选自以下的突变，其引入自杀基因：sacb、nuk、hok、gef、kil和phla中的一种或多种；和/或一种或多种选自以下的突变，其引入细菌裂解基因：hly和cly之一或二者；和/或一种或多种毒力因子中的突变，所述毒力因子选自isya、pag、prg、isca、virg、plc和act；和/或一种或多种选自以下的基因中的突变，其修饰应激应答：reca、htra、htpr、hsp和groel；和/或min中的突变，其破坏细胞周期；和/或一种或多种选自以下的基因的突变，其破坏或失活调节功能：cya、crp、phop/phoq和ompr。95.权利要求30至94任一项的免疫刺激性细菌，其是msbb
‑
/asd
‑
/puri
‑
。96.权利要求30至95任一项的免疫刺激性细菌，其中prgh和/或prgk被失活或缺失。97.权利要求30至96任一项的免疫刺激性细菌，其中在质粒上编码免疫刺激性蛋白或sting蛋白的核酸与编码分泌信号的核酸可操纵地连接，由此在宿主中表达时，产物被分泌。98.权利要求30至97任一项的免疫刺激性细菌，其中编码所述免疫刺激性蛋白的所述质粒以低拷贝数或中等拷贝数存在。99.权利要求30至98任一项的免疫刺激性细菌，其中所述质粒包含中等至低拷贝数复制起点。100.权利要求30至98任一项的免疫刺激性细菌，其中所述质粒包含低拷贝数复制起点。101.权利要求30至100任一项的免疫刺激性细菌，其中所述质粒以低拷贝数存在。102.权利要求98至101任一项的免疫刺激性细菌，其中中等拷贝数是小于150或小于约150且大于20或约20或在20或25和150之间。103.权利要求101的免疫刺激性细菌，其中低拷贝数是小于25或小于20或小于约25或小于约20个拷贝。104.权利要求30至103任一项的免疫刺激性细菌，其中所述质粒中的复制起点选自源自pbr322、p15a、psc101、pmb1、cole1、cole2、pps10、r6k、r1、rk2和puc的起点。105.权利要求30至104任一项的免疫刺激性细菌，其中编码免疫刺激性蛋白或sting蛋白的核酸在质粒上且与由真核宿主识别的调节序列可操纵地连接，所述免疫刺激性蛋白或sting蛋白的未修饰形式感测胞质rna/dna。106.权利要求30至105任一项的免疫刺激性细菌，其中所述质粒在真核启动子的控制下编码所述免疫刺激性蛋白或sting。107.权利要求105或权利要求106的免疫刺激性细菌，其中所述调节序列包含rna聚合酶ii启动子或rna聚合酶iii启动子。108.权利要求105或权利要求106的免疫刺激性细菌，其中所述调节序列包含选自sv40、hgh、bgh、鸡β
‑
球蛋白和rbglob(兔球蛋白)基因的终止子和/或启动子。109.权利要求107的免疫刺激性细菌，其中所述启动子是rna聚合酶ii启动子。
110.权利要求107的免疫刺激性细菌，其中所述启动子是rna聚合酶ii启动子，其是病毒启动子或哺乳动物rna聚合酶ii启动子。111.权利要求110的免疫刺激性细菌，其中所述启动子是选自巨细胞病毒(cmv)启动子、sv40启动子、eb病毒(ebv)启动子、疱疹病毒启动子、呼吸道合胞病毒(rsv)启动子和腺病毒启动子的病毒启动子。112.权利要求105至110任一项的免疫刺激性细菌，其中控制质粒上一种或多种编码的异源蛋白表达的启动子是延伸因子
‑
1(ef
‑
1)α启动子，或ubc启动子，或pgk启动子，或mnd启动子，或cagg启动子。113.权利要求105至110任一项的免疫刺激性细菌，其中所述启动子是ef
‑
1α启动子、cmv启动子、sv40启动子、pgk启动子、mnd启动子、eif4a1启动子、cag启动子或cd68启动子。114.权利要求113的免疫刺激性细菌，其中所述启动子是ef
‑
1α启动子。115.权利要求105至113任一项的免疫刺激性细菌，其中所述启动子是病毒启动子，所述病毒启动子是晚期启动子。116.权利要求30至115任一项的免疫刺激性细菌，其中所述细菌是革兰氏阴性细菌。117.权利要求30至116任一项的免疫刺激性细菌，其中所述细菌是：rickettsia rickettsiae、普氏立克次体(rickettsia prowazekii)、rickettsia tsutsugamuchi、莫氏立克次体(rickettsia mooseri)、西伯利亚立克次体(rickettsia sibirica)、支气管败血波氏杆菌(bordetella bronchiseptica)、脑膜炎双球菌(neisseria meningitidis)、淋病奈瑟氏菌(neisseria gonorrhoeae)、嗜矿泉气单胞菌(aeromonas eucrenophila)、鲑产气单胞菌(aeromonas salmonicida)、土轮病菌(francisella tularensis)、假结核棒状杆菌(corynebacterium pseudotuberculosis)、弗氏柠檬酸杆菌(citrobacter freundii)、肺炎衣原体(chlamydia pneumoniae)、睡眠嗜血杆菌(haemophilus somnus)、流产布鲁氏菌(brucella abortus)、胞内分枝杆菌(mycobacteriumintracellulare)、嗜肺军团杆菌(legionella pneumophila)、马红球菌(rhodococcus equi)、铜绿假单胞菌(pseudomonas aeruginosa)、伶鼬鼠螺杆菌(helicobacter mustelae)、霍乱弧菌(vibrio cholerae)、枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)、猪红斑丹毒丝菌(erysipelothrix rhusiopathiae)、小肠结肠炎耶尔森氏菌(yersinia enterocolitica)、五日热罗卡利马氏体菌(rochalimaea quintana)，或根癌土壤杆菌(agrobacterium tumerfacium)，或任一前述所列细菌菌株的其减毒菌株或其修饰菌株。118.权利要求30至116任一项的免疫刺激性细菌，其中所述细菌是沙门氏菌(salmonella)、志贺氏杆菌(shigella)、大肠杆菌(e.coli)、双歧杆菌(bifidobacteriae)、立克次体(rickettsia)、弧菌(vibrio)、李斯特菌(listeria)、克雷伯氏菌(klebsiella)、博德特氏菌(bordetella)、奈瑟氏菌(neisseria)、气单胞菌(aeromonas)、弗朗西斯氏菌(francisella)、霍乱菌(cholera)、棒状杆菌(corynebacterium)、柠檬酸杆菌(citrobacter)、衣原体(chlamydia)、嗜血杆菌(haemophilus)、布鲁氏菌(brucella)、分枝杆菌(mycobacterium)、支原体(mycoplasma)、军团杆菌(legionella)、红球菌(rhodococcus)、假单胞菌(pseudomonas)、螺杆菌(helicobacter)、芽孢杆菌(bacillus)或丹毒丝菌(erysipelothrix)的菌株，或任一前述所列细菌菌株的其减毒菌株或其修饰菌株。
119.权利要求30至118任一项的免疫刺激性细菌，其为减毒细菌。120.权利要求30至119任一项的免疫刺激性细菌，其是沙门氏菌菌株。121.权利要求120的免疫刺激性细菌，其是鼠伤寒沙门氏菌(salmonella typhimurium)菌株。122.权利要求120或权利要求121的免疫刺激性细菌，其中未修饰的沙门氏菌是野生型菌株。123.权利要求120或权利要求121的免疫刺激性细菌，其中未修饰的沙门氏菌菌株是减毒的。124.权利要求30至123任一项的免疫刺激性细菌，其中所述免疫刺激性细菌源自选自命名为以下菌株的减毒鼠伤寒沙门氏菌菌株：ast
‑
100、vnp20009、ys1646(atcc#202165)、re88、sl7207、χ8429、χ8431和χ8468，或源自具有以atcc保藏号no.14028保藏的菌株的所有鉴定特征的野生型细菌，或者是菌株atcc 14028。125.权利要求30至124任一项的免疫刺激性细菌，其包含在所述质粒上编码的以下组合：a)编码sting、rig
‑
i、mda5、irf3和irf7的功能获得性突变体的一种或多种的核酸；及b)编码如下一种或多种的核酸：il
‑
2，il
‑
7，il
‑
12p70(il
‑
12p40 il
‑
12p35)，il
‑
15，il
‑
15/il
‑
15rα链复合物，已经减弱结合il
‑
2ra的il
‑
2，修饰为不结合il
‑
2ra的il
‑
2，il
‑
18，il
‑
36γ，cxcl9，cxcl10，cxcl11，ccl3，ccl4，ccl5，参与或影响或加强t细胞募集/持续性的蛋白质，cd40，cd40配体(cd40l)，ox40，ox40配体(ox40l)，4
‑
1bb，4
‑
1bb配体(4
‑
ibbl)，b7
‑
cd28家族成员，tgf
‑
β多肽拮抗剂，以及肿瘤坏死因子受体(tnfr)超家族的成员。126.权利要求125的免疫刺激性细菌，其包含编码a)中的两种蛋白质和b)中的两种蛋白质的核酸。127.权利要求125或权利要求126的免疫刺激性细菌，其中不同的启动子和终止子控制每种蛋白质的表达。128.权利要求125或权利要求126的免疫刺激性细菌，其中所述基因从单个启动子表达并包含单个终止子，且编码每种蛋白质的序列包含内部核糖体进入位点(ires)，由此编码的核酸为多顺反子性的。129.权利要求125至128任一项的免疫刺激性细菌，其中所述启动子选自ef
‑
1α、cmv和gapdh启动子，且所述终止子选自sv40、hgh、bgh和rbglob。130.权利要求30至129任一项的免疫刺激性细菌，其中编码蛋白质的质粒包含构建体，所述构建体包括增强子、启动子、编码蛋白质的开放读框和polya尾。131.权利要求30至130任一项的免疫刺激性细菌，其中编码蛋白质的质粒包含构建体，所述构建体包含增强子、启动子、ires、编码蛋白质的开放读框和polya尾。132.权利要求30至131任一项的免疫刺激性细菌，其中编码蛋白质的质粒包含构建体，所述构建体包括增强子、启动子、ires、定位序列、编码蛋白质的开放读框和polya尾。133.权利要求30至132任一项的免疫刺激性细菌，其中编码蛋白质的质粒上的构建体包含土拨鼠肝炎病毒(woodchuck hepatitis virus，whp)转录后调节元件(wpre)或乙型肝炎病毒转录后调节元件(hpre)。134.权利要求30至133任一项的免疫刺激性细菌，其在spi
‑
2复合物中具有缺失。
135.权利要求30至134任一项的免疫刺激性细菌，其中将细菌用多粘菌素(polymoxin)处理以降低产热原性。136.一种递送载具，其包含编码权利要求1至29任一项的修饰的sting蛋白的核酸。137.一种递送载具，其包含编码来自非人物种的sting蛋白的核酸，其中所述sting蛋白具有i型ifn信号传导活性，及与人sting的nf
‑
κb信号传导活性相比具有减弱的nf
‑
κb信号传导活性。138.权利要求136或权利要求137的递送载具，其中所述人sting蛋白包含seq id no:305
‑
309任一所示序列，或者是其与seq id no:305
‑
309任一所示氨基酸序列具有至少98％序列相同性的人等位基因变体。139.权利要求136至138任一项的递送载具，其中所述i型ifn信号传导活性是野生型人sting的i型ifn信号传导活性的至少30％或至少约30％。140.权利要求136至139任一项的递送载具，其中所述nf
‑
κb信号传导活性是人sting的nf
‑
κb信号传导活性的小于30％、小于20％、小于15％、小于10％或小于5％。141.权利要求136至140任一项的递送载具，其中所述非人物种是袋獾、狨猴、牛、猫、鸵鸟、野猪、蝙蝠、海牛、朱鹮、腔棘鱼、小鼠、斑马鱼或鬼鲨。142.一种递送载具，其包含编码免疫刺激性蛋白的核酸，所述蛋白当在对象中表达时导致i型ifn的组成型表达，其中所述递送载具选自纳米颗粒、脂质体、外泌体、细菌、病毒、细胞和微泡。143.权利要求142的递送载具，其中所述免疫刺激性蛋白处于感测胞质核酸、核苷酸、二核苷酸、环状核苷酸或环状二核苷酸或直接或间接与胞质核酸、核苷酸、二核苷酸、环状核苷酸或环状二核苷酸相互作用的信号传导途径中。144.权利要求143的递送载具，其中处于感测胞质核酸、核苷酸、二核苷酸、环状核苷酸或环状二核苷酸或直接或间接与胞质核酸、核苷酸、二核苷酸、环状核苷酸或环状二核苷酸相互作用的途径中的所述免疫刺激性蛋白激活i型ifn。145.权利要求142至144任一项的递送载具，其中所述免疫刺激性蛋白参与激活i型干扰素的先天dna/rna识别，及选自sting、rig
‑
i、mda
‑
5、irf
‑
3、irf
‑
7、trim56、rip1、sec5、traf3、traf2、traf6、stat1、lgp2、ddx3、dhx9、ddx1、ddx21、dhx15、dhx33、dhx36、ddx60和snrnp200。146.权利要求142至145任一项的递送载具，其中所述免疫刺激性蛋白选自sting、mda5、irf
‑
3、irf
‑
7和rig
‑
1。147.权利要求146的递送载具，其中：未修饰的sting蛋白具有seq id no:305
‑
309任一所示序列；未修饰的mda5蛋白具有seq id no:310所示序列；未修饰的rig
‑
i蛋白具有seq id no:311所示序列；未修饰的irf
‑
3蛋白具有seq id no:312所示序列；及未修饰的irf
‑
7蛋白具有seq id no:313所示序列。148.权利要求142至147任一项的递送载具，其中所述免疫刺激性蛋白含有使其活性为组成型的氨基酸取代。149.权利要求142至148任一项的递送载具，其中所述免疫刺激性蛋白在对象中出现时
导致干扰素疾病。150.权利要求142至149任一项的递送载具，其中所述免疫刺激性蛋白选自包含一个或多个功能获得性突变的变体sting、变体mda5、变体irf
‑
3、变体irf
‑
7和变体rig
‑
i。151.权利要求150的递送载具，其中所述功能获得性突变导致i型干扰素组成型表达。152.权利要求150或权利要求151的递送载具，其中所述突变如下所示：a)在sting中，参照seq id no:305
‑
309，选自以下的一个或多个：s102p，v147l，v147m，n154s，v155m，g166e，c206y，g207e，s102p/f279l，f279l，r281q，r284g，r284s，r284m，r284k，r284t，r197a，d205a，r310a，r293a，t294a，e296a，r197a/d205a，s272a/q273a，r310a/e316a，e316a，e316n，e316q，s272a，r293a/t294a/e296a，d231a，r232a，k236a，q273a，s358a/e360a/s366a，d231a/r232a/k236a/r238a，s358a，e360a，s366a，r238a，r375a，和s324a/s326a；b)在mda5中，参照seq id no:310，以下的一个或多个：t331i，t331r，a489t，r822q，g821s，a946t，r337g，d393v，g495r，r720q，r779h，r779c，l372f和a452t；c)在rig
‑
i中，参照seq id no:311，e373a和c268f的一个或两者；d)在irf
‑
3中，参照seq id no:312，s396d；以及e)在irf
‑
7中，参照seq id no:313，以下的一个或多个：s477d/s479d，s475d/s477d/s479d，和s475d/s476d/s477d/s479d/s483d/s487d。153.权利要求152的递送载具，其中未修饰的sting具有seq id no:305
‑
309任一所示序列，未修饰的mda5具有seq id no:310所示序列，未修饰的rig
‑
i具有seq id no:311所示序列，未修饰的irf
‑
3具有seq id no:312所示序列，且未修饰的irf
‑
7具有seq id no:313所示序列，且每个修饰的蛋白质与未修饰蛋白质具有至少95％的序列相同性。154.权利要求136至153任一项的递送载具，其是细胞、外泌体、溶瘤病毒或病毒载体、脂质体或其它基于脂质的载具，或免疫刺激性细菌。155.权利要求154的递送载具，其中所述递送载具是细胞，其是干细胞或免疫细胞。156.权利要求136至154任一项的递送载具，其是外泌体。157.权利要求136至154任一项的递送载具，其是溶瘤病毒。158.权利要求136至154中任一项的递送载具，其是溶瘤病毒，选自溶瘤腺病毒(oncolytic adenovirus)、腺相关病毒(adeno
‑
associated virus)、逆转录病毒(retrovirus)、单纯疱疹病毒(herpes simplex virus)、弹状病毒(rhabdovirus)、乳头瘤病毒(papillomavirus)、水泡性口炎病毒(vesicular stomatitis virus)、麻疹病毒(measles virus)、新城疫病毒(newcastledisease virus)、小核糖核酸病毒(picornavirus)、辛德毕斯病毒(sindbis virus)、痘病毒(poxvirus)、细小病毒(parvovirus)、呼肠孤病毒(reovirus)、柯萨奇病毒(coxsackievirus)、流感病毒(influenza virus)、腮腺炎病毒(mumps virus)、脊髓灰质炎病毒(poliovirus)、塞内卡河谷病毒(seneca valley virus)、仙台病毒(sendai virus)、登革热病毒(dengue virus)、脊髓灰质炎病毒(poliovirus)、塞姆利基森林病毒(semliki forest virus)、甲病毒(alphavirus)和黄病毒(flavivirus)。159.权利要求158的递送载具，其中所述溶瘤病毒是痘苗病毒、疱疹病毒、麻疹病毒或呼肠孤病毒。
160.权利要求136至159任一项的递送载具，其中编码免疫刺激性蛋白的核酸在真核调节序列的控制下表达。161.权利要求136至160任一项的递送载具，其中编码免疫刺激性蛋白的核酸在真核启动子的控制下表达。162.权利要求136至161任一项的递送载具，其中所述免疫刺激性蛋白是组成型活性的sting蛋白。163.权利要求136至162任一项的递送载具，其进一步包含编码免疫刺激性蛋白的核酸，所述免疫刺激性蛋白在哺乳动物对象中表达时赋予或有助于在肿瘤微环境中的抗肿瘤免疫性。164.权利要求163的递送载具，其中所述免疫刺激性蛋白是细胞因子、趋化因子、共刺激蛋白或受体，或具有缺失的细胞质结构域的共刺激受体。165.权利要求136至164任一项的递送载具，其是细胞。166.权利要求165的递送载具，其中所述细胞是干细胞。167.权利要求166的递送载具，其中所述干细胞是间充质干细胞(msc)。168.权利要求167的递送载具，其中所述msc被遗传修饰以表达免疫调节性细胞因子的组合。169.权利要求168的递送载具，其中所述细胞因子是白介素12(il
‑
12)和白介素21(il
‑
21)。170.权利要求1至169任一项的递送载具、sting蛋白、免疫刺激性蛋白或免疫刺激性细菌，其中所述i型干扰素是干扰素
‑
α或干扰素
‑
β。171.一种分离的细胞，包含权利要求136
‑
164任一项的递送载具。172.权利要求171的细胞，其是免疫细胞、干细胞、肿瘤细胞或原代细胞系。173.权利要求172的细胞，其是造血细胞。174.权利要求172的细胞，其是t细胞。175.权利要求171
‑
174任一项的细胞，其是通过用所述递送载具感染细胞而离体产生的。176.一种分离的细胞，其包含免疫刺激性细菌，其中：所述免疫刺激性细菌被修饰以使其优先感染肿瘤驻留免疫细胞，和/或所述免疫刺激性细菌的基因组被修饰以使其在肿瘤驻留免疫细胞中诱导较少的细胞死亡；以及所述细胞是免疫细胞、干细胞、来自原代细胞系的细胞、或肿瘤细胞。177.权利要求176的细胞，其中所述免疫刺激性细菌是鞭毛蛋白
‑
(flic
‑
/fljb
‑
)的沙门氏菌种。178.一种分离的细胞或培养的细胞，包含权利要求30至135中任一项的免疫刺激性细菌。179.权利要求176至178任一项的细胞，其是t细胞或造血细胞。180.权利要求177至179任一项的细胞，其是通过用所述免疫刺激性细菌感染细胞而离体产生的。181.一种治疗癌症的方法，包括将权利要求176至180任一项的细胞施用于患有包括实体瘤的癌症或患有血液恶性病的癌症的对象。
182.权利要求181的方法，其中所述癌症包括实体瘤。183.权利要求181或权利要求182的方法，其中所述癌症是转移性的。184.权利要求181至183任一项的方法，其中所述癌症选自乳腺癌、心脏癌、肺癌、小肠癌、结肠癌、脾癌、肾癌、膀胱癌、头颈癌、结肠直肠癌、卵巢癌、前列腺癌、脑癌、胰腺癌、皮肤癌、骨癌、骨髓癌、血癌、胸腺癌、子宫癌、睾丸癌、子宫颈癌、和肝癌、胃癌、淋巴瘤、和白血病。185.权利要求176
‑
180任一项的细胞在治疗癌症中的用途。186.权利要求185的用途，其中所述癌症包括实体瘤或血液恶性病。187.权利要求185或权利要求186的用途，其中所述癌症是转移性的。188.权利要求185至187中任一项的用途，其中所述癌症选自乳腺癌、心脏癌、肺癌、小肠癌、结肠癌、脾癌、肾癌、膀胱癌、头颈癌、结肠直肠癌、卵巢癌、前列腺癌、脑癌、胰腺癌、皮肤癌、骨癌、骨髓癌、血癌、胸腺癌、子宫癌、睾丸癌、子宫颈癌、和肝癌、胃癌、淋巴瘤、和白血病。189.一种药物组合物，其包含在药学上可接受的载体中的权利要求1至29任一项的修饰的sting蛋白、权利要求30至135任一项的免疫刺激性细菌、权利要求136至170任一项的递送载具或权利要求171
‑
180任一项的细胞。190.一种分离的细胞，其包含权利要求1至29任一项的修饰的sting蛋白、权利要求30至135任一项的免疫刺激性细菌或权利要求136至170任一项的递送载具，其中所述细胞不是受精的人卵细胞的合子。191.权利要求190的细胞，其是免疫细胞、干细胞、肿瘤细胞、或原代细胞系。192.权利要求191的细胞，其是造血细胞，其中所述造血细胞是嵌合抗原髓样细胞，所述嵌合抗原髓样细胞是巨噬细胞。193.权利要求191的细胞，其是t细胞。194.权利要求190至193中任一项的细胞，其是通过用修饰的sting蛋白、免疫刺激性细菌或递送载具感染细胞而离体产生的。195.一种治疗癌症的方法，包括将权利要求1至29任一项的修饰的sting蛋白、或权利要求30至135任一项的免疫刺激性细菌、或权利要求136至170任一项的递送载具、或权利要求171至180和190至194任一项的细胞、或权利要求189的药物组合物、或权利要求190至194任一项的细胞，施用于患有包括实体瘤的癌症或患有血液恶性病的癌症的对象。196.权利要求195的方法，其中所述癌症包括实体瘤。197.权利要求195或权利要求196的方法，其中所述癌症是转移性的。198.权利要求195至197任一项的方法，其中所述癌症选自淋巴瘤、白血病、胃癌、和乳腺癌、心脏癌、肺癌、小肠癌、结肠癌、脾癌、肾癌、膀胱癌、头颈癌、结肠直肠癌、卵巢癌、前列腺癌、脑癌、胰腺癌、皮肤癌、骨癌、骨髓癌、血癌、胸腺癌、子宫癌、睾丸癌、子宫颈癌和肝癌。199.权利要求1至29任一项的修饰的sting蛋白、或权利要求30至135任一项的免疫刺激性细菌、或权利要求136至170任一项的递送载具、或权利要求171至180和190至194任一项的细胞、或权利要求189的药物组合物、或权利要求190至194中任一项的细胞在治疗癌症中的用途。200.权利要求199的用途，其中所述癌症包括实体瘤或血液恶性病。
201.权利要求199或权利要求200的用途，其中所述癌症是转移性的。202.权利要求199至201任一项的用途，其中所述癌症选自淋巴瘤、白血病、胃癌、和乳腺癌、心脏癌、肺癌、小肠癌、结肠癌、脾癌、肾癌、膀胱癌、头颈癌、结肠直肠癌、卵巢癌、前列腺癌、脑癌、胰腺癌、皮肤癌、骨癌、骨髓癌、血癌、胸腺癌、子宫癌、睾丸癌、子宫颈癌和肝癌。203.权利要求1至202中任一项的修饰的sting蛋白、递送载具、免疫刺激性细菌、药物组合物、细胞、方法或用途，其中所述非人sting蛋白具有seq id no:331、338或341至351任一所示氨基酸序列，或者是与seq id no:331、338或341至351任一所示氨基酸序列具有至少98％序列相同性的每个物种的sting蛋白的等位基因变体。204.权利要求1至202任一项的修饰的sting蛋白、递送载具、免疫刺激性细菌、药物组合物、细胞、方法或用途，其中所述非人sting蛋白或嵌合体具有seq id no:332至337、339或340任一所示氨基酸序列。205.一种药物组合物，包含在药学上可接受的载体中的权利要求30至135任一项的免疫刺激性细菌。206.权利要求189或权利要求205的药物组合物，其被配制为不用稀释而施用。207.权利要求189、205和206任一项的药物组合物，其被配制成单剂量。208.权利要求189和205至207任一项的药物组合物，其被配制用于肠胃外施用。209.一种在对象中治疗包括实体瘤或血液恶性病的癌症的方法，包括施用权利要求189和205至208任一项的药物组合物。210.权利要求189和205至208任一项的药物组合物在治疗对象中的包括实体瘤或血液恶性病的癌症中的用途。211.权利要求30至135任一项的免疫刺激性细菌，其用于治疗对象中包括实体瘤或血液恶性病的癌症。212.权利要求195至202和209至211任一项的方法或用途或免疫刺激性细菌，其中所述对象是人。213.权利要求195至202和209至212任一项的方法或用途或免疫刺激性细菌，其中所述治疗包括联合治疗，在所述联合治疗中施用第二抗癌剂或治疗。214.权利要求213的方法或用途或免疫刺激性细菌，其中所述第二抗癌剂或治疗是在所述免疫刺激性细菌之前、同时、之后或间歇施用。215.权利要求214的方法或用途或免疫刺激性细菌，其中所述第二抗癌剂或治疗是免疫疗法。216.权利要求195至202和209至215任一项的方法或用途或免疫刺激性细菌，其中所述蛋白质、细胞、递送载具、药物组合物或免疫刺激性细菌的施用是肠胃外的。217.权利要求195至202和209至216任一项的方法或用途或免疫刺激性细菌，其中所述施用是口服的或直肠的或通过气雾剂进入肺的或瘤内的。218.权利要求195至202和209至216任一项的方法或用途或免疫刺激性细菌，其中所述施用是静脉内、肌肉内或皮下的。219.权利要求195至202和209至218任一项的方法或用途或免疫刺激性细菌，其中所述癌症选自白血病、淋巴瘤、胃癌、和乳腺癌、心脏癌、肺癌、小肠癌、结肠癌、脾癌、肾癌、膀胱癌、头颈癌、结肠直肠癌、卵巢癌、前列腺癌、脑癌、胰腺癌、皮肤癌、骨癌、骨髓癌、血癌、胸腺
癌、子宫癌、睾丸癌、子宫颈癌、和肝癌。220.权利要求215的方法或用途或免疫刺激性细菌，其中所述免疫疗法包括施用抗pd
‑
1、或抗pd
‑
l1、或抗ctla
‑
4抗体。221.一种增加治疗性细菌定植肿瘤的能力的方法，包括修饰基因组，由此所述细菌是鞭毛蛋白
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(flic
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/fljb
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)和/或pagp
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的。222.权利要求221的方法，其中所述治疗型细菌是免疫刺激性细菌。223.权利要求221或权利要求222的方法，其中所述细菌是沙门氏菌种。224.一种产生免疫刺激性细菌或溶瘤病毒以治疗癌症的方法，包括：鉴别突变的功能获得性、组成型活性的免疫刺激性蛋白，其促进人患者中的干扰素疾病；以及将编码鉴别的蛋白质的核酸导入靶向肿瘤的细菌或病毒中，由此所得细菌或病毒在导入对象中时促进肿瘤微环境的免疫刺激。

技术总结
提供了具有增强的肿瘤、肿瘤微环境和/或肿瘤驻留免疫细胞的定植以及增强的抗肿瘤活性的递送型免疫刺激性细菌。免疫刺激性细菌通过缺失编码鞭毛的基因或通过修饰所述基因从而不产生功能性鞭毛来进行修饰，和/或通过缺失pagP或修饰pagP以产生无活性的PagP产物来进行修饰。因此，免疫刺激性细菌是鞭毛蛋白"和/或pagP'。免疫刺激性细菌任选地具有额外的基因组修饰，使得细菌是腺苷和/或嘌呤营养缺陷型。细菌任选地是asct、purl'和msbB'中的一种或多种'。免疫刺激性细菌，例如沙门氏菌种，其被修饰以编码诱导I型干扰素(IFN)表达的蛋白质，或者所述蛋白质为具有增加的诱导I型干扰素表达的活性的其变体，或者所述蛋白质为导致I型IFN的组成型表达的其变体。细菌可以编码来自非人类物种的修饰的干扰素基因刺激物(STING)蛋白，其相比于人类STING，具有较低的NF


技术研发人员：C
受保护的技术使用者：阿克蒂姆治疗有限公司
技术研发日：2020.02.27
技术公布日：2021/12/3