一种耐寒型枯草芽孢杆菌及其应用的制作方法

1.本发明属于植物病害生物防治技术领域，具体涉及一种具有广谱抑菌作用的耐寒型枯草芽孢杆菌。


背景技术：

2.东北黑土壤肥沃，农作物多为一年一季或者多年一季，由于严寒居多，冬季气温最低可达
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20℃，而春季气温也勉强维持在
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10
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5℃。土壤温度热量来源为日辐射，受土壤孔隙率和土壤湿度影响。土壤温度经常年测量，以多年测量，东北土壤气温最高出现在7月，为15
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25℃（不考虑地表温度，以地下20cm
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40cm土温为准），最低土温出现在二月，为
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10—5℃。
3.东北黑土壤中原生微生物经过长时间演变、环境胁迫，可以度过严寒，有益菌和病原菌均具备度过严寒的能力，而额外施加的有机菌肥则会被冻死，休眠。即便是环境适宜，微生物活化也需要2
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3代复壮。尤其是多年生植物，比如人参、三七，菌肥效果不明显，需要每年补肥，成本高昂。
4.这就出现了，很难干预东北植物，尤其是珍稀植物生长的进程，而连作后，土壤的有益菌丰度下降，病原菌累计，即便是刚开垦的新土地，植物仍然受到了土壤中自带的病原菌的危害，而上述两种情况，由于天寒地冻，人为很难干预，只能任由植物遭受自然侵害。


技术实现要素：

5.针对现有技术中存在的，东北黑土壤种植过程中的菌肥施用效果差，生防效果差的问题，本发明提供一种耐寒型枯草芽孢杆菌。
6.一种耐寒型枯草芽孢杆菌，所述菌株为枯草芽孢杆菌（bacillus subtilis）jq
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0101d，该菌株于2021年3月19日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为 cgmcc no.22039，保藏单位地址：中国北京。
7.所述的耐寒型枯草芽孢杆菌应用于作为土壤有益菌。
8.所述的应用方法具体为：所述的耐寒性枯草芽孢杆菌经培养发酵后，在种植五加科人参属植物过程中，添加施用，提高植物抗逆性，抑制土传病害。
9.所述的五加科人参属植物为三七，人参，西洋参。
10.所述的土传病害为根腐病。
11.所述的耐寒型枯草芽孢杆菌应用于在东北种植五加科人参属植物。
12.本发明有益效果本领域公知，枯草芽孢杆菌最适合的生长温度为30
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35℃，10℃以下不再生长繁殖，0℃以下休眠，若长时间处于
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10℃以下，由于土壤水分导致大冰晶出现，枯草芽孢杆菌出现冻死情况。东北土壤温度（20
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40cm深度）为
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10
‑
25℃，土温10
‑
15℃占据全年一半。因此，对于人参，三七，西洋参这种长年生植物，尤其是在寒冷的东北黑土地上种植，微生物菌肥肥效差，偶遇极端天气（连日低温），则会直接冻死，就需要年年追肥，增加了种植成本。
13.本发明提供了一种耐寒型枯草芽孢杆菌，该菌于15℃左右，生长速度明显高于其他枯草芽孢杆菌，属于耐寒型品种，5℃即可萌发复壮，适合东北黑土地的低温土壤的种植。
具体实施方式
14.以下结合具体实施例进一步说明实施例一，枯草芽孢杆菌jq
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0101d菌株的分离与筛选1、分离（1）土壤分离，从黑龙江建三江农场连作五年的水稻田的20
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40cm深度采集土壤100g，一个地点平行采集5个样本，混合过40目分级筛。取100g筛下土壤用做分离。
15.（2）培养基配置pda培养基：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂粉20g，蒸馏水1000ml；（3）准确称取1g土壤置于250ml三角瓶中，加入99ml无菌水，摇床200rpm，30
‑
37℃震荡30min。制成土壤悬浊液，按10倍梯度稀释至10
‑8。在pda培养基上分离出单菌落，并活化4个周期。
16.2、筛选在pda培养基平板中央，接种本公司已有的不同菌种，每个接种重复三次，分别置于
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5℃，5℃，15℃，35℃生化培养箱培养，观察各菌落直径，结果如下：（重复三次后取平均值）由此可以看出，虽然jq
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0101d在35℃下，繁殖速度不快，但是5℃即可萌发，15℃生长繁殖速度最快，考虑到东北黑土地的土壤温度，不可能达到35℃的最优生长温度，因此仅考虑萌发温度和全年最长时长温度（15℃），jq
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0101d最适合作为有益菌，广泛应用于东北黑土地种植上。


技术特征：
1.一种耐寒型枯草芽孢杆菌，其特征在于，所述菌株为枯草芽孢杆菌（bacillus subtilis ）jq
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0101d，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为 cgmcc no.22039。2.根据权利要求1所述的耐寒性枯草芽孢杆菌，其特征在于，所述的耐寒型枯草芽孢杆菌应用于作为土壤有益菌。3.根据权利要求2所述的耐寒性枯草芽孢杆菌，其特征在于，所述的应用方法具体为：所述的耐寒性枯草芽孢杆菌经培养发酵后，在种植五加科人参属植物过程中，添加施用，提高植物抗逆性，抑制土传病害。4.根据权利要求3所述的耐寒性枯草芽孢杆菌，其特征在于，所述的五加科人参属植物为三七，人参，西洋参。5.根据权利要求3所述的耐寒性枯草芽孢杆菌，其特征在于，所述的土传病害为根腐病。6.根据权利要求3或4所述的耐寒性枯草芽孢杆菌，其特征在于，所述的耐寒型枯草芽孢杆菌应用于东北种植五加科人参属植物。

技术总结
本发明提供一种广谱抑菌作用的耐寒型枯草芽孢杆菌，属于植物病害生物防治技术领域，具体的，本发明从东北土壤中分离得到一种耐寒性枯草芽孢杆菌，编号为JQ


技术研发人员：郭中信 王延刚 耿进华 尤龙
受保护的技术使用者：山东京青农业科技有限公司
技术研发日：2021.08.24
技术公布日：2021/11/28