食物和添加剂组合物，以及木质素和添加剂组合物的用途的制作方法

(thao等)的文件公开了具有桉属叶的食物补充提升了水牛瘤胃中发酵的稳定性。可从桉属叶提取不同类型的精油。
11.在此背景下，存在着对低成本且能够大规模获得的来自天然和可再生来源的添加剂的需要。在本领域中研究的添加剂是木质素，一种低成本且能够大规模获得的来自天然和可再生来源的产品。
12.历史上，木质素被认为仅仅是废材料，纤维素提取的副产物。木质素大量存在于所有植物中。草含有17
‑
24％重量的木质素，软木(softwoods，针叶木)18
‑
25％以及硬木(hardwood，阔叶木)27
‑
33％重量。
13.其全世界产能估计为每年五千万吨，但是该量的绝大多数被用作纤维素生产中的热量和能量来源。随着市场及其中新参与者的演变，估计全球木质素市场在5年内增长约2.5％。
14.由于大量可得且成本低，木质素已被用作引人关注的替代物以消除在天然产物的使用中遭遇的可规模化问题。在此背景下，现有技术中有文件已描述了木质素在食物行业中的应用。
15.de 10106078描述了木质素在用于人类或动物消费的食物中的用途。在该文件中，食物组合物中存在的木质素充当毒素的吸附剂或结合剂且具有与真菌毒素结合并在排泄物中将其消除以防止食物中毒的功能。
16.us 2013/0164413则描述了木质素自身作为纤维的来源或作为纤维的来源材料的组分在猫和狗(特别地猫)的饲料中的用途。尽管提到木质素自身可被用作纤维的来源，但是该文件仅涉及包含在谷物和蔬菜中或存在于木浆中的粗木质素。该用途的目的是提供一种组合物，其使用木组分例如含有木质素的膳食纤维帮助清理由于梳理毛发(grooming，口梳毛)而在动物有机体(organism)内形成的毛团。在该文件中没有将从木材提取的木质素用作食物添加剂，而是将其作为膳食纤维中的功能性部分添加。显然地，没有纤维来源的系统性吸收，因此没有动物的畜牧业表现的改进。事实上，在猫胃肠道中的毛团形成有改进，这是通过加入含有木质素的膳食纤维促进的，因为其通过刺激毛团通过消化道并随后消除而起作用。
17.wo 2017/056275也解决了由于动物梳理毛发导致的毛团形成的问题。根据该文件，动物身体中毛团的形成诱发毛团以及作为结果地动物所吃食物的呕吐。作为对持续呕吐(平均每两天)问题的解决方案，出版物wo 2017/056275描述了包含含有小于1％重量、更优地0.3％重量或更小的木质素含量的精制纤维素的动物饲料。同样，没有动物对食物中包含的纤维素的系统性吸收且木质素的来源是纤维素中包含的粗木质素。
18.然而，尽管已描述了木质素在动物饮食中用作食物添加剂的用途，但是在本领域中仍有对于能够提升畜牧业表现的基于天然和可再生来源的食物添加剂的需要。包含最高达5％重量的木质素或包含含有最高达99％的木质素的添加剂组合物的本发明的食物组合物满足了这样的需求，其中木质素优选地是分离的木质素。不像本领域中所能看见的，本发明的组合物中存在的木质素被吸收并在动物有机体内以有益的方式起作用，甚至改进了源自所述动物的产品的特性。


技术实现要素：

19.本文描述了包含最高达5％重量的食物添加剂的食物组合物，其中食物添加剂是木质素。
20.在优选实施方案中，组合物包含1
‑
3％重量的食物添加剂。
21.本文还描述了包含最高达99％重量的木质素的添加剂组合物。
22.在本发明的一个实施方案中，添加剂组合物为补充物、浓缩物、预混物、核(core，芯)等。
23.在本发明的优选实施方案中，添加剂组合物用于制备包含最高达5％重量的食物添加剂的食物组合物，其中食物添加剂是木质素。
24.本文还描述了包含所述添加剂组合物的食物组合物。
25.在本发明的一个实施方案中，存在于本发明的食物组合物和添加剂组合物中的木质素是分离的木质素。在本发明的优选实施方案中，木质素是硫酸盐木质素。
26.在更优选实施方案中，硫酸盐木质素是硬木硫酸盐木质素。
27.在优选实施方案中，硬木是桉属木。
28.本发明的食物组合物包含典型的动物饲料组分例如糖、粉(flour，面粉)、糠、淀粉、甘蔗汁、甘蔗糖蜜、酵母、奶粉、油类、高粱、玉米、烤过的完整大豆、氨基酸、石灰石、磷酸二钙、盐、维生素、叶酸、氯化胆碱、抗氧化剂、矿物质、以及其它典型的食物组合物组分。
29.在优选实施方案中，本发明的食物组合物包含作为或不作为添加剂组合物一部分的木质素、玉米、大豆粉、磷酸二钙、石灰石、大豆油、盐、d
‑
甲硫氨酸、维生素a、d3、e、k3、硫胺素、核黄素、吡哆醇、b12、生物素和烟酸、泛酸钙、叶酸、氯化胆碱、抗氧化剂、铁、铜、锰、锌、碘、以及硒。
30.在本发明的一个实施方案中，食物组合物是动物饲料组合物。
31.在本发明的一个实施方案中，食物组合物改进动物的畜牧业表现。
32.在优选实施方案中，畜牧业表现的改进选自增加的重量增长、降低的食物消耗、降低的饲料转化、降低的脂肪水平、降低的腹腔内脂肪沉积、以及组织形态学肠变化。
33.在优选实施方案中，脂肪水平的降低是ldl、hdl、甘油三酯、血浆氧化、或tbars水平的降低。
34.在优选实施方案中，组织形态学肠变化是隐窝深度的增加或绒毛高度的增加。在另外的优选实施方案中，组织形态学肠变化发生在空肠和/或十二指肠中。
35.在本发明的一个实施方案中，食物组合物改进动物来源的产品的特性。
36.在优选实施方案中，动物来源的产品的特性的改进选自：延迟鸡肉中的死后氧化作用，降低的蛋中的氧化和胆固醇，以及蛋壳的抵抗力和重量的增加。
37.在本发明的一个实施方案中，食物组合物用于喂饲牲畜和伴侣动物。
38.在本发明的另外的优选实施方案中，牲畜是单胃动物。
39.在更优实施方案中，食物组合物用于喂饲家禽。
40.本文还描述了木质素在食物组合物或添加剂组合物中作为食物添加剂的用途。
41.在一个实施方案中，描述了木质素在食物组合物中作为食物添加剂的用途，其中所述食物组合物包含最高达5％重量的木质素。更优选地，食物组合物包含1
‑
3％重量的木质素。
42.在一个实施方案中，木质素是硫酸盐木质素，优选地硬木硫酸盐木质素，更优选地桉属木硫酸盐木质素。
43.在一个实施方案中，描述了木质素在食物组合物中作为食物添加剂的用途，其中所述食物组合物是动物饲料组合物。
44.在一个实施方案中，上述的食物组合物改进动物的畜牧业表现。
45.在一个实施方案中，畜牧业表现的改进选自增加的重量增长、降低的食物消耗、降低的饲料转化、降低的脂肪水平、降低的腹腔内脂肪沉积、以及组织形态学肠变化。
46.在优选实施方案中，脂肪水平的降低是ldl、hdl、甘油三酯、血浆氧化、或tbars水平的降低。
47.在优选实施方案中，组织形态学肠变化是隐窝深度的增加或绒毛高度的增加。在另外的优选实施方案中,组织形态学肠变化发生在空肠和/或十二指肠中。
48.在一个实施方案中，食物组合物改进动物来源的产品的特性。
49.在优选实施方案中，动物来源的产品的特性的改进选自：延迟鸡肉中的死后氧化作用，降低的蛋中的氧化和胆固醇，以及蛋壳的抵抗力和重量的增加。
50.在一个实施方案中，所述食物组合物用于喂饲牲畜或宠物。
51.在本发明的另外的优选实施方案中，牲畜是单胃动物。
52.在更优实施方案中，食物组合物是家禽饲料。
53.本文还描述了木质素用于制备食物组合物以改进动物的畜牧业表现和/或动物来源的产品的特性的用途。
54.在一个实施方案中，描述了木质素用于制备食物组合物以改进动物的畜牧业表现和/或动物来源的产品的特性的用途，其中所述食物组合物包含达最高达5％重量的木质素。更优地，食物组合物包含1
‑
3％重量的木质素。
55.本文还描述了木质素用于制备包含最高达99％木质素的添加剂组合物的用途以及所述添加剂组合物用于制备食物组合物以改进动物的畜牧业表现和/或动物来源的产品的特性的用途，其中所述食物组合物包含最高达5％重量的木质素。更优选地，食物组合物包含1
‑
3％重量的木质素。
56.在优选实施方案中，木质素是硫酸盐木质素，优选地硬木硫酸盐木质素，更优选地桉属木硫酸盐木质素。
57.在一个实施方案中，食物组合物是动物饲料组合物。
58.在一个实施方案中，畜牧业表现的改进选自：增加的重量增长，降低的食物消耗，降低的饲料转化，降低的脂肪水平，降低的腹腔内脂肪沉积，以及组织形态学肠变化。
59.在优选实施方案中，脂肪水平的降低是ldl、hdl、甘油三酯、血浆氧化、或tbars水平的降低。
60.在优选实施方案中，组织形态学肠变化是隐窝深度的增加或绒毛高度的增加。在另外的优选实施方案中，组织形态学肠变化发生在空肠和/或十二指肠中。
61.在一个实施方案中，动物来源的产品的特性的改进选自：延迟鸡肉中的死后氧化作用，降低的蛋中的氧化和胆固醇，以及蛋壳的抵抗力和重量的增加。
62.在一个实施方案中，所述食物组合物用于喂饲牲畜或宠物。
63.在本发明的另外的优选实施方案中，牲畜是单胃动物。
64.在更优选实施方案中，食物组合物是家禽饲料。
附图说明
65.图01显示了对木质素假设的一般化学结构。
66.图02显示了在四个生产周期期间以不同木质素水平喂饲的鸡批次的可行性图表。
67.图03显示了在四个生产周期后饲料消耗(g/禽/天)关于木质素包含至饮食的水平的回归方程图表。
68.图04显示了在四个生产周期后产蛋率(％)关于木质素包含至饮食的水平的回归方程图表。
69.图05显示了在四个生产周期后蛋重(g)关于木质素包含至饮食的水平的回归方程图表。
70.图06显示了在四个生产周期期间对于在饮食中喂饲不同木质素水平的禽发现的脏蛋百分率的回归方程图表。
71.图07显示了在四个生产周期后蛋的比重关于木质素包含至饮食的水平的回归方程图表。
72.图08显示了在四个生产周期后蛋壳的抵抗力关于木质素包含至饮食的水平的回归方程图表。
73.图09显示了在四个生产周期后蛋壳的百分率关于木质素包含至饮食的水平的回归方程图表。
74.图10
‑
15分别显示了指示蛋黄中的总胆固醇含量、蛋黄中的tbars含量、蛋壳的抵抗力、蛋壳的百分率、蛋黄的百分率以及蛋清的百分率相对于储存期间的图表，其中蛋来自以不同木质素包含水平和最高达30天的储存喂饲的蛋鸡。
具体实施方式
75.本发明涉及包含木质素或包含继而含有木质素的添加剂组合物作为食物添加剂的食物组合物，其引起动物畜牧业表现的改进和/或动物来源的产品的特性的改进。本发明还涉及包含木质素的添加剂组合物。
76.食物添加剂被定义为在动物营养中使用的旨在改进食物品质或改进动物的表现和健康的产品。添加剂可以是技术的(technological)、感觉的(sensory)、营养性的(nutritional)、畜牧学的、或抗球虫的和抑制组织滴虫的(histomonostatic)。添加剂可以作为包含其它添加剂的添加剂组合物的一部分或作为孤立的组分被包含在食物组合物中。当作为添加剂组合物的一部分被包含在食物组合物中时，其可以是主要包含添加剂组分的浓缩的组合物，或其可以是维生素补充物。
77.本发明的食物组合物可包含最高达5％重量、优选地1
‑
3％重量的木质素或包含木质素的添加剂组合物。
78.术语“添加剂组合物”意指任何添加至最终产品的包含维生素、营养物、或其它提升表现的组分的组合物，其中最终产品旨在喂饲动物。添加剂组合物的非限制性实例尤其为补充物、浓缩物、预混物、核等。
79.例如，本发明的添加剂组合物可以是包含最高达99％重量的木质素的浓缩物或包
含最高达5％重量的木质素的维生素补充物。
80.除了木质素或包含木质素的添加剂组合物之外，本发明的食物组合物进一步地包含动物饲料的常见组分，例如举例来说：糖；粉，例如来自角豆树(carob)、甘薯(sweet potato)、椰子、鱼、血、肉和骨、以及羽毛的粉；糠，例如棉籽、花生、芥花籽(canola)、大豆、稻和小麦的糠；淀粉；甘蔗汁；甘蔗糖蜜；酵母；奶粉；油类，例如芥花籽、玉米和大豆的油；高粱；玉米；烤过的完整大豆；氨基酸；石灰石；磷酸二钙；盐；维生素，例如维生素a、d3、e、k3，硫胺素，核黄素，吡哆醇，b12，生物素和烟酸；叶酸；氯化胆碱；抗氧化剂；矿物质，例如铁、铜、锰、锌、碘和硒；以及其它典型的食物组合物组分。
81.在优选实施方案中，本发明的食物组合物包含作为或不作为添加剂组合物一部分的木质素、玉米、大豆粉、磷酸二钙、石灰石、大豆油、盐、d
‑
甲硫氨酸、维生素a、d3、e、k3、硫胺素、核黄素、吡哆醇、b12、生物素和烟酸、泛酸钙、叶酸、氯化胆碱、抗氧化剂、铁、铜、锰、锌、碘和硒。
82.木质素可被大规模使用且具有低成本，相比于目前所使用的具有这种功能的天然产物是有利的选项。
83.任意类型的分离的木质素均可在本发明的组合物中使用，其中硫酸盐木质素是优选的。甚至更优地，本发明的食物组合物和添加剂组合物包含硬木(优选地桉属木)硫酸盐木质素。
84.木质素可以粉末、颗粒、丸、液体的形式或作为包含其它添加剂的添加剂组合物的一部分被并入到本发明的食物组合物中。在本发明的添加剂组合物中，木质素可以粉末、颗粒、丸、液体的形式被并入以被并入到食物组合物中。
85.木质素可以在技术上被定义为无定形材料，其衍生自以下三种类型的苯丙烷类化合物的脱氢反应：反
‑
松柏醇(类型
‑
g、反
‑
芥子醇(trans
‑
synaphyl)(类型
‑
s)以及反
‑
对
‑
香豆醇(类型
‑
h))，它们可以通过共价键以不同方式连接，其不具有重复单元(聚合物的特性)而是具有这样的前体单元的复杂排列而产生大分子。
86.作为全天然物质，木质素在其组成、结构和纯度方面呈现显著差异，这影响了其性质并因而影响其应用潜力。这样的变化取决于植物来源，因为这些产生单元(generating unit)(h/g/s)的比例根据植物类型而改变。例如所述比例在软木中是0
–
5/95
–
100/0，在硬木中是0
‑
8/25
‑
50/46
‑
75以及在草中是5
‑
33/33
‑
80/20
‑
54。
87.进一步地，有另外的变量：提取木质素的方法，因为不可能在不对其结构进行化学改变的情况下将其分离。受提取方法影响的要点之一是分离的木质素(也被称为工业木质素)的分子量，其可在260
‑
50,000,000g/mol的宽范围内。从木质纤维素材料提取木质素的主要方法是苏打、硫酸盐、亚硫酸盐以及有机溶剂。
88.来自生物质(原材料)的木质素是呈木质纤维素生物质的形式，其主要包含纤维素、半纤维素和木质素。从木质纤维素生物质分离木质素的工艺在天然木质素链中产生了结构变化和分割。因此，(分离的)提取的木质素具有不同于包含在木质纤维素纤维中的粗木质素的应用的特性和效果。优选地，本发明的食物组合物和添加剂组合物包含分离的木质素。
89.可以看出，木质素具有非常复杂的化学结构。有模型旨在描述这种结构但是没有完整的定义。图01显示了对其推测的结构式(formula)。
90.硫酸盐木质素通过硫酸盐提取方法获得。这样的方法在纸浆和纸行业中最常用。其中，将木颗粒用氢氧化钠和硫酸钠的溶液在150
‑
180℃下处理。该方法为木质素提供了更高的酚羟基含量、在碱性介质中稳定的碳
‑
碳键、以及大量硫的引入(introduction of quantities sulfur)。
91.在通过硫酸盐方法分离后，分离的木质素呈现片段化的和更有反应性的结构，这容许它被动物有机体吸收，而来自生物质的粗木质素不具有这种吸收能力。
92.包含最高达5％重量的木质素或包含含有最高达99％的木质素的添加剂组合物的本发明的食物组合促进了对动物的益生元效果(prebiotic effect)，除了针对阴性对照饮食优化了资源使用之外，还提供了对动物健康和畜牧业表现的改进。进一步地，本发明的组合物促进了源自消耗所述组合物的动物的产品的特性的改进。
93.益生元(prebiotic)是通过选择性刺激肠道菌群中的微生物的生长或活性而具有有益性质的不可消化的食物组分。
94.通过本发明的食物组合物促进的畜牧业表现的改进由以下组成：，当与阴性对照饮食相比时，增加的重量增长，降低的食物消耗，降低的饲料转化，增加的活重(live weight)，降低的脂肪水平，降低的腹腔内脂肪沉积，肠粘膜发育的促进和/或组织形态学肠变化。
95.根据本发明的阴性对照饮食由在其组成中不含木质素和/或任何其它食物添加剂的饮食组成。
96.表述“饲料转化”意指动物生产力的衡量，其通过总饲料消耗除以动物的重量增长来定义。
97.如本文所使用的术语“活重”是指活的动物的总重量。
98.如本文所使用的术语“脂肪水平的降低”被理解为ldl、hdl、甘油三酯、血浆氧化或tbars(与硫代巴比妥酸可反应的物质)的血清含量的降低，和/或腔体脂肪堆积水平(levels of fat accumulation cavitary)的降低。
99.术语“ldl”(或“低密度脂蛋白”)是指这样的形式的脂蛋白：在其中胆固醇在血流中被运输至身体的细胞和组织。
100.术语“hdl”(或“高密度脂蛋白”)是指这样的形式的脂蛋白：在其中胆固醇在血流中从组织被运输至肝脏。
101.术语“脂蛋白”是指含有脂质和被称为载脂蛋白或脱辅基蛋白的蛋白质的大分子。
102.术语“甘油三酯”是指由一分子甘油和三分子一种或多种脂肪酸所形成的酯的脂质。
103.术语“血浆氧化”是指脂质过氧化。
104.术语“tbars”是指脂质过氧化的量化并可定义为与硫代巴比妥酸反应的物质。
105.表述“肠粘膜发育”意指有肠绒毛的高度和密度的增加，肠绒毛被肠隐窝不断再生。
106.表述“组织形态学肠变化”意指有胃肠道的隐窝深度或绒毛高度的增加。
107.术语“绒毛(villus)”或“绒毛(villi)”是指肠绒毛，其是在肠腔内保护自身的结构。
108.术语“隐窝”是指肠隐窝，其是位于绒毛间的凹坑中的管状腺。
109.通过本发明的食物组合物促进的动物健康的改进由脂肪和/或血浆氧化的血清水平的降低组成，后者由木质素的抗氧化作用提供。
110.动物健康的改进可被理解为当与阴性对照饮食相比式ldl、hdl、甘油三酯、血浆氧化或tbars含量的降低。
111.hdl的含量高于ldl的含量被认为是理想的，因为高密度脂蛋白从细胞收集胆固醇和将其运输回至肝脏以重新加工并减少了循环的胆固醇。
112.本发明的食物组合物具有促进8
‑
14％的重量增长的增加和/或8
‑
14％的活重的增加的能力。
113.本发明的食物组合物还具有促进9
‑
20％的饲料转化的降低和/或最高达16％的饲料消耗的降低的能力。
114.本发明的食物组合物还具有促进以下的能力：10
‑
40％的腔体脂肪堆积的降低；2
‑
24％的血液ldl水平的降低；8
‑
24％的血液hdl水平的降低；13
‑
24％的甘油三酯水平的降低和/或15
‑
35％的血浆氧化的降低。
115.本发明的食物组合物具有促进最高达24％的绒毛高度的增加和/或10
‑
40％的隐窝深度的增加的能力。
116.这些组织形态学肠变化可增加动物的营养物吸收，优化食物资源的利用。
117.本发明的食物组合物与阳性对照饮食相似地促进了畜牧业表现。
118.阳性对照饮食可被理解为含有典型地用于改进畜牧业表现的食物添加剂例如抗生素、天然提取物或用作生长促进剂的精油的饮食。
119.在本发明的一个实施方案中，食物组合物是动物饲料组合物。优选地，饲料组合物用于喂饲牲畜和伴侣动物。
120.如本文所用的表述“牲畜”意指其出生目的是获得肉、奶、蛋、毛、皮、革、以及蜜、或任何其它用于商业目的的产品的动物。牲畜的非限制性实例包括牛、鸡、鱼、猪、羊、蜂、甲壳纲动物、兔、鸭、火鸡、鸵鸟等。
121.如本文所用的表述“伴侣动物”意指属于为了娱乐而出生并由人类供养的物种而不带有提供具有经济利益的产品或副产品的目的的动物。宠物动物的非限制性实例包括狗、猫、鱼、鸟、龟等。
122.动物有机体中观察到的效果，例如氧化应激的降低，可以被外推至从该动物获得的产品，因为产品是动物有机体的一部分或衍生自动物有机体。然而，畜牧业表现的改进不必然地与获得改进的动物产品关联。
123.尽管如此，从以本发明的食物组合物喂饲的牲畜获得的产品还具有已在消耗了该食物组合物的动物中观察到的抗氧化效果。因此，这样的产品具有更低的氧化水平和速度以及因此更长的耐久性/货架期。这样的产品的实例是肉、奶和蛋。
124.由于本发明的组合物被动物摄入，举例说明，鸡肉中的死后氧化作用的延迟，蛋中的氧化和胆固醇的降低，以及蛋壳的抵抗力的重量的增加。
125.在本发明中观察到以本文公开的组合物喂饲的鸡的更高的产蛋率导致了更厚的蛋壳。此效果令人惊喜，因为预期的是禽类的更高的产蛋率导致这样的蛋中的蛋壳更薄。该预料不到的效果代表益处，因为更厚的蛋壳孔更少，其允许更好地保护气体交换，产生了随时间的更少的蛋的氧化。
126.本发明的食物组合物可以通过任意用于食物或制药行业中的常规技术制备且包含广泛用于该行业中的额外组分。与食物组合物相似，本发明的添加剂组合物可以通过任何用于食物或制药行业中的常规技术制备且包含广泛用于这些行业中的额外食物添加剂。
127.本发明还涉及木质素作为市场上添加剂的替代品在以上所描述的本发明的食物组合物和添加剂组合物中作为食物添加剂的用途。
128.木质素作为食物添加剂的所述用途为本发明的食物组合物提供了相同的以上所描述的特性。
129.本发明还涉及木质素作为市场上添加剂的替代品作为用于制备以上所描述的本发明的食物组合物或添加剂的食物添加剂的用途。
130.本发明进一步地涉及包含最高达99％的木质素的添加剂组合物作为用于制备本发明的食物组合物的食物添加剂的用途。
131.实施例
132.本文呈现的实施例是非穷举的(non
‑
exhaustive)，其唯一目的是说明本发明，且不应用作限制本发明的依据。
133.将本文的实施例呈现以证明本发明的食物组合物对于动物和对于由其衍生的产品的益处。
134.实施例1中的研究评价了动物的表现数据。所评价的参数为身体重量和身体重量获得、饲料摄入、修正的饲料转化和死亡率。
135.实施例2中的研究评估了以不同食物组合物喂饲的动物的躯体产率(carcass yield，屠宰率)。
136.实施例3显示了研究中的动物的血液学参数的评价。
137.实施例4中呈现了所进行的为了评价以本发明的食物组合物喂饲的动物的肠组织形态计量学实验。
138.对于实施例1
‑
4所呈现的研究，使用了600只来自相同肉鸡饲养者(breeder)的父系para
í
so pedr
ê
z血统(male para
í
so pedr
ê
z lineage)的1日龄雄性和雌性雏鸡，雏鸡均接种了针对马立克氏病(marek)和冈博罗病(鸡传染性法氏囊病，gumboro)的疫苗且均源自aves do para
í
so(itatiba
‑
sp)孵化场。使用完全随机设计(crd)，以4种处理和6次重复，每次25只禽(with four treatments and six replications of 25birds each)。
139.在实验1
‑
4中获得的结果列于表中并在统计程序sas(2002)的一般线性模型(glm)的帮助下使用方差分析(anova)来分析，并且在显着时通过图基(tukey)检验以5％的概率来比较处理之间的平均值。死亡率数据被转化为(x 0.5)/100的根，其中x是死亡率的百分率(steel和torrie,1980)。
140.在实施例1
‑
4中，配制不包含抗球虫离子载体(ionophore anticoccidial)且不含任何其它添加剂的对照饮食和具有木质素粉末的单独的补充的其他饮食，描述如下：
141.·
处理1：对照饮食(cd) 1％木质素；
142.·
处理2：cd 2％木质素；
143.·
处理2：cd 3％木质素；以及
144.·
处理4：对照饮食。
145.在实施例1
‑
4中呈现的研究中的实验饮食的组成基于玉米、大豆粉、磷酸二钙、石
灰石、大豆油、盐、dl
‑
甲硫氨酸、维生素a、d3、e、k3、硫胺素、核黄素、吡哆醇、b12、生物素和烟酸、泛酸钙、叶酸、氯化胆碱、抗氧化剂、铁、铜、锰、锌、碘、以及硒；其浓度与动物所需的营养物的百分率一致，如根据参考文献“rostagno,h.s.(ed.).tabelas brasileiras para aves e su
í
nos: de alimentos e exig
ê
ncias nutricionais.3rd ed.ufv,2011”所述。木质素被包含以替代对照饮食中存在的惰性材料，且所有饮食是营养相等的(isonutrive)，其被配制以满足散养鸡在三个阶段中的要求：初始阶段(1
‑
21天)，成长阶段(21
‑
35天)，以及最终阶段(35
‑
63天)。无论哪个阶段，所有饲料均在同一天制作并以糊状物(mash)供应。
146.实施例5代表了分为两个实验的对在肉鸡的饲料中使用木质素的研究。在研究的第一个实验中，评价了表现数据(performance data)以及醚提取物、蛋白质和氨基酸的可消化性。在第二个实验中，评价了表现数据、躯体特性、骨矿物质、肠形态计量学、甘油三酯水平和血液胆固醇以及肉的品质。
147.最后，实施例6显示了对在用于蛋鸡的饮食中使用木质素的研究，指示了所述蛋鸡的表现及其所产的蛋的特性中的优势。
148.其旨在增加动物产品的货架期的主要效果可在鸡肉和鸡蛋的老化评估中看出。在这个意义上，实施例5和6中所评价的参数之一是tbars，其旨在量化与硫代巴比妥酸反应性的脂质氧化的产物。
149.实施例1
150.本研究显示了接受具有木质素的食物组合物以及对照饮食食物组合物的动物的表现评价。
151.表现评价在polo leste paulista进行。将禽安置在位于apta regional do leste paulista的砖砌棚中，其具有长23米和宽9米的尺寸，装备有24个1.75
×
1.65米的具有25只禽的容量的格子(boxes)。对于禽生长的每个阶段，格子都装备有单独的电罩(electric hood)、独立的喂饲器以及饮用器。棚用砖砌成，具有未铺砌的地面、风扇、粘土瓦盖(clay tile cover)、砖砌的侧壁(0.5米高)、侧面屏风(side screen)以及滑动的塑料帘(sliding plastic curtains)。使用了24个实验单元。每个单元衬有新的乱放的木屑(lined with a new litter of wood shavings)，木屑被均匀铺展，高度约10厘米。
152.每个实验单元都装备有半自动的管状幼鸡喂饲器(金属的，具有塑料托盘，10kg容量)、乳头型饮水器、用作加热源的250瓦红外灯；在家禽养殖的第十天，格子装备有成年鸡管状喂饲器(金属的，具有塑料托盘，20kg容量)。
153.禽被随机地从格子中移出，以25只禽的批次称重并被分配到实验单元中。
154.直到年龄为14天前，格子内的温度控制通过电钟罩实施，将温度保持在禽的舒适温度范围内。在此阶段之后直到家禽养殖结束(14
‑
63天)，棚的加热管理根据环境温度和禽的行为进行，气候通过风扇(正压)和帘子的操作来控制，帘子在白天保持打开并在下雨时或晚上(若温度预测低于15℃)关闭。室内温度每天用最高和最低温度计( de m
á
xima e minima,hi
‑
low temperature)测量。
155.所使用的光照程序是23小时天明和1小时天黑(在一天结束时)，用人造光补充自然光。
156.每天移出死亡的禽，并且死亡率通过实验单元编号、禽的重量以及发生日期来记录。从安置的那天直到实验的结束(于饲养的63天)，每周称重禽和未吃完的饲料。具有15.0kg容量的秤被用于初始称重和用于死禽，以及150kg的秤用于其它的每周称量。喂饲器被每天两次地从格子外侧清洁，并且将死禽用抓持工具(grabber)移出。按照处理次序(从对照开始)在对于每个处理特定的桶中进行饲料的摄入。
157.水和饲料在贯穿整个饲养期间被任意地提供。使用的饲养程序由三个饲养阶段组成：初始(1
‑
21天)，成长(21
‑
35天)，以及最终(35
‑
63天)阶段。饲料以糊状物的形式被随意提供。水在贯穿整个实验期间被随意提供。
158.表现的数据是在累积的期间内获得并分析的。以下数据被收集和/或计算。
159.身体重量和身体重量获得：在每个实验部分中的所有的禽在日龄1、7、14、21、28、35、42、49、56和63天称重以计算平均身体重量。重量增长在累积的期间内通过每周开始时禽的重量与每周结束时禽的重量之间的差来计算。
160.饲料消耗：饲料消耗通过每个一周期间的开始时提供的饲料量与其结束时剩余的未吃完的饲料量之间的差来确定，所获得的结果除以每个实验部分中的禽的平均数量。
161.修正的饲料转化：饲料转化通过被该部分中的禽所消耗的饲料的总重量(用千克表达)除以在相同期间中禽的总重量(也用千克表达)来计算。在计算中，考虑了在每个评价期间中的死亡的禽的重量和饲料消耗。
162.死亡率：死亡率以及死亡的禽的重量被每天收集，且从该数据计算由在每个期间结束时死亡的禽相对于安置的禽的初始数量的百分率给出的结果。
163.在1
‑
21日龄的养殖期间中的平均表现结果在表1中显示。没有处理
‑
性别的相互作用。
164.表1：被提供具有不同木质素包含水平的饮食的21日龄的散养鸡的表现
[0165][0166][0167]
awg＝平均重量增长；fc＝饲料转化；lw＝活重；mort＝死亡率；afc＝平均饲料消耗；以及a,b,c＝行中跟随不同字母的每个因素(factor，因子)的平均值通过图基检验彼此不同(p<0.05)。
[0168]
*cv:变异系数.
[0169]
观察到了处理在变量平均重量增长(awg)、饲料转化(fc)、活重(lw)以及平均饲料消耗(afc)的平均结果上的效果(表1)。当与单独的对照饮食对比时，含有木质素的饮食提
供了更好的结果。在21天结束时接受1％木质素的禽消耗更少的食物，获得更好的饲料转化、更好的平均重量增长以及更高的活重。
[0170]
在21
‑
42日龄的养殖期间内的平均表现结果在表2中显示。
[0171]
表2：被提供具有不同木质素包含水平的饮食的21
‑
42日龄的散养鸡的表现
[0172]
％木质素awg(kg)fclw(kg)mort.afc(kg)0％0.7852.351.230.0001.841％0.7372.531.150.0021.862％0.7872.411.220.0001.883％0.7832.401.220.0001.88平均0.7732.421.200.0671.86cv*5.5513.054.26244.9512.39prob0.160.790.620.0220.98
[0173]
awg＝平均重量增长；fc＝饲料转化；lw＝活重；mort＝死亡率，以及afc＝平均饲料消耗。
[0174]
*cv：变异系数。
[0175]
与在用具有添加剂的饲料在最初的家禽养殖阶段中观察到的结果相反，木质素在禽的饮食中的包含在21
‑
42日龄的养殖期间并未改变所研究的表现变量。其发生是因为在生命的最初几天动物具有有缺陷的免疫系统，本发明的食物组合物更可能帮助免疫系统的防御并因而显示可见的变量中差异。对于21
‑
42天养殖期间，禽的免疫系统已经被巩固，也因而动物并未被挑战——因此没有差异。
[0176]
在42
‑
63日龄的养殖期间中的平均表现结果在表3中显示。没有处理
‑
性别的相互作用。
[0177]
表3：被提供具有不同木质素包含水平的饮食的42
‑
63日龄的散养鸡的表现
[0178]
％木质素awg(kg)fclw(kg)mort.afc(kg)0％0.7603.2131.99020.028332.42751％0.7793.1811.91380.040002.44872％0.7943.1192.0000.026672.47353％0.7773.2671.97930.006672.5250平均0.7773.1961.97080.025422.4687cv*9.3712.955.1914810.75prob0.88210.94010.47330.50230.9284
[0179]
awg＝平均重量增长；fc＝饲料转化；lw＝活重；mort＝死亡率，以及afc＝平均饲料消耗。
[0180]
*cv:变异系数。
[0181]
关于平均重量增长，与对照相比，接受具有1、2和3％的木质素作为添加剂的饲料的禽具有更大的重量增长。饲料转化在接受具有1和2％的木质素作为添加剂的饲料的禽的组中更好，且接受补充有2％的木质素的饲料的禽的活重高于其它三个被研究的组。
[0182]
在全部1
‑
63日龄的养殖期间中的平均表现结果在表4中显示。没有处理
‑
性别的相互作用。
[0183]
表4：被提供具有不同木质素包含水平的饮食的63日龄的散养鸡的表现
[0184][0185][0186]
awg＝平均重量增长；fc＝饲料转化；lw＝活重；mort＝死亡率，以及afc＝平均饲料消耗。
[0187]
*cv:变异系数。
[0188]
如以上所解释的，其发生是因为在生命的最初几天动物具有有缺陷的免疫系统，本发明的食物组合物更可能帮助免疫系统的防御也因而显示可见的变量中差异。因此，禽在21天期间的表现更好。对于21
‑
63天的养殖期间，禽的免疫系统已经被巩固，动物也因此未被挑战。
[0189]
实施例2
[0190]
本研究显示了本发明的食物组合物对动物的躯体产率以及重要器官(vital organs)的影响。
[0191]
禽的管理(handling)和实验场地如实施例1所描述。
[0192]
躯体产率的评价在prdta leste paulista进行。在饲养的63天，将每个实验单元中的2只禽(1雄1雌)捆绑(banded)，共12只禽/处理。这些禽被禁食8小时并在塑料容器中被运输至手术场所(procedure site)，在那里它们通过电击后放血被宰杀。获得的切块(cut)为去除内脏的躯体(不含脚、颈和头)、带骨胸、腿(大腿和下段腿)、背和翅。躯体产率的计算基于临近宰杀前在平台上的活重和去除内脏并冷却的无头、颈和脚的躯体重量。胸和腿(大腿和下段腿)的产率相对于去内脏躯体重量计算。
[0193]
对于腹部脂肪％有显著的处理的影响，其它特性没有显示显著的处理的影响(表5.1和5.2)。产率被作为相对于活重的百分率((部分的重量x 100)/活重)计算。
[0194]
表5.1和5.2：被提供具有不同木质素包含水平的饮食的63日龄的散养雄性(m)与雌性(f)鸡的躯体产率(％)和重要器官。
[0195]
表5.1
[0196]
[0197][0198]
lw＝活重；carw＝去除内脏的躯体重量；cy＝躯体产率；翅y＝翅产率；胸y＝胸产率；腿y＝腿产率，以及a和b＝行中跟随不同字母的每个因素的平均值通过图基检验彼此不同(p<0.05)。
[0199]
*trat*s＝处理
‑
性别相互作用。
[0200]
**cv：变异系数。
[0201]
表5.2
[0202][0203]
[0204]
背y＝背产率；心y＝心产率；砂囊y＝砂囊产率；肝y＝肝产率；abfaty＝腹部脂肪产率，以及a和b＝行中跟随不同字母的每个因素的平均值通过图基检验彼此不同(p<0.05)。
[0205]
*trat*s＝处理
‑
性别相互作用。
[0206]
**cv：变异系数。
[0207]
尽管雄性在宰杀时的活重更高(p<0.05)，但是动物的性别没有影响(p>0.05)对于躯体、心和翅产率所观察到的数值。切块产率的结果反馈如预期，其中雌性显示对于砂囊、脂肪、肝和胸产率的更高的结果，而雄性显示更好的背和腿产率，无论木质素补充的作用如何。
[0208]
没有处理
‑
性别相互作用的显著影响。
[0209]
获得的结果证明了接受具有木质素作为添加剂的饲料的动物没有呈现更好的躯体产率。然而，这些动物与接受对照饮食的动物相比具有更低的腹部脂肪百分率。在接受具有木质素作为添加剂的饲料的动物之中，那些接受1％的木质素的具有更低的脂肪百分率。更低的腔内脂肪堆积直接与更好的表现相关，支持了在实验的最初21天中获得的表现数据(实施例1)。
[0210]
实施例3
[0211]
本研究显示了本发明的食物组合物对动物的血液学参数的影响。
[0212]
禽的管理和实验场地如实施例1中所描述。
[0213]
宰杀期间放血时，每个重复组中1只禽的血被移出，放在肝素化的管中，离心，并冷冻，为了进一步的tbars、ldl、hdl和甘油三酯的分析。
[0214]
获得的对于血液参数的结果在表6中显示。
[0215]
表6：被提供具有不同木质素包含水平的饮食的63日龄的雄性(m)和雌性(f)散养鸡的血液参数
[0216]
[0217][0218]
a，b和c＝行中跟随不同字母的每个因素的平均值通过图基检验彼此不同(p<0.05)
[0219]
*t*s：处理
‑
性别相互作用
[0220]
**cv：变异系数。
[0221]
获得的关于hdl与处理的相互作用的结果在表7中显示
[0222]
表7：在指定性别内对于hdl:处理的相互作用的展示
[0223][0224]
a和b＝行中跟随不同字母的每个因素的平均值通过图基检验彼此不同(p<0.05)。
[0225]
在63日龄，甘油三酯、tbars、ldl胆固醇和hdl胆固醇的血浆浓度被处理影响(p>0.05)。使用gonz
á
lez等人(2001)所描述的对于健康鸡的甘油酸酯(136
‑
164)和ldl(72
‑
130)的变化范围作为参考，结论是，无论何处理，所得的数值均可以被认为是正常的；但是木质素在饲料中的包含提供了在禽血中的ldl和hdl胆固醇、甘油三酯和tbars的更低的水平。虽然所呈现的hdl和ldl胆固醇数值对于雄性更高，但是其大体上表明雄性和雌性鸡没有呈现有害的健康状况。
[0226]
关于血浆氧化(tbars)，具有更低木质素百分率的处理具有更高的丙二醛/ml血液的浓度，证明了在此情形中木质素带来体内过氧化物浓度降低的抗氧化性质。尽管如此，就所使用的残留物(used residue)的量而言，在添加木质素的处理之间没有差异。
[0227]
实施例4
[0228]
本研究的目标在于评价以本发明的食物组合物喂饲的动物的肠的组织形态计量学。
[0229]
禽的管理和实验场地如实施例1中描述。
[0230]
肠的组织形态计量学评价在laborat
ó
rio dede aves，fmvz/unesp，botucatu校区进行，如以下所描述。
[0231]
在宰杀时，十二指肠、回肠(
í
leo，ileus)和空肠的片段被收集以制作组织学载玻片。每肠段对应一载玻片(correspond to a slide)。绒毛高度和隐窝深度通过图像的方法确定，在带有10x平场复消色差镜(planapochromatic lens)的光学显微镜下获得。图像用连接至显微镜的相机捕获，并转移至图像分析仪(leica)。每个载玻片取20个绒毛高度和隐窝深度的读数。绒毛高度从顶端区域至对应隐窝上方部分的基底区域进行测量。隐窝从基底至隐窝和绒毛之间的过度区域进行测量。
[0232]
63日龄鸡的肠的组织形态计量学结果在表8.1、8.2和8.3中显示。
[0233]
表8.1、8.2和8.3：63日龄肉鸡的小肠段的绒毛高度(vh)、隐窝深度(cd)和绒毛:隐窝比(vc)
[0234]
表8.1
[0235][0236][0237]
a和b＝行中跟随不同字母的每个因素的平均值通过图基检验彼此不同(p<0.05)。
[0238]
表8.2
[0239][0240]
表8.3
[0241][0242][0243]
a和b＝行中跟随不同字母的每个因素的平均值通过图基检验彼此不同(p<0.05)。
[0244]
在来自被分析的禽的肠粘膜的空肠部分中，接受具有木质素作为添加剂的饲料的动物具有更高的绒毛高度和隐窝深度(p>0.05)，其中雄性显示比对于雌性观察到的更高的数值。在来自被分析的禽的肠粘膜的回肠和十二指肠部分中，接受具有木质素作为添加剂
的饲料的动物具有更大的隐窝深度(p>0.05)，且对于接受具有2和3％的木质素作为添加剂的饲料的组绒毛高度值也更高。
[0245]
这些发现表明鸟的更高的营养物吸收。
[0246]
没有所使用的处理在回肠粘膜水平上的营养效果(trophic effect)的统计学证据(p>0.05)，也没有处理
‑
性别相互作用。没有绒毛:隐窝比的变化。
[0247]
可观察到向食物组合物添加木质素是有益的，除食物资源的优化以外还导致了动物表现和健康的改进。因此，木质素是对于提升表现的抗生素以及其它类型的畜牧业添加剂的替代物。
[0248]
实施例5
[0249]
本研究的目标在于评价在1
‑
42日龄肉鸡的饮食中的木质素补充的效果。
[0250]
评价在圣保罗大学(university ofpaulo)(usp)畜牧学与食品工程学院(school of zootechnics and food engineering)畜牧学系(department of zootechnics)，pirassununga校区进行。
[0251]
本研究被分为两个实验(以下被称作实验i和ii)。
[0252]
在实验i中，使用490只来自cobb500血统的雄性肉鸡雏鸡，其被安置在代谢笼中，以完全随机的设计而分布的，以5种处理和14次重复，每次7只禽，总共70个实验部分。5种所实施的处理为：阳性对照饮食：具有抗生素、0％的木质素(t1)；阴性对照饮食：无木质素添加(t2)；阴性对照饮食 1％的木质素(t3)；阴性对照饮食 2％的木质素(t4)；阴性对照饮食 3％的木质素(t5)。
[0253]
实验的饮食基于玉米和大豆粉并在表9中显示：
[0254]
表9：实验饮食
[0255][0256]
禽从出生第一天(first day of age)起以实验饮食喂饲，并且实验排泄物的收集从第18天开始持续3天。收集期间后，排泄物被均匀化和冷冻以进行储存。从每个重复中取出200克样品，在强制通风烘箱中干燥，随后样品被研磨并送至实验室以进行食品学(bromatological)分析。计算醚提取物、蛋白质和氨基酸的可消化性(digestibility)。
[0257]
在实验ii中，使用了1300只来自cobb 500血统的雄性肉鸡雏鸡，其被安置在以完全随机的设计分布在实验格子中的代谢笼里，以5种处理和20次重复，每次13只禽，总共100个实验部分。
[0258]
处理与此前实验中的相同，并且所提出的木质素水平通过替代饮食中存在的惰性
材料实现，以与包含50g/吨的阳性对照饮食中相同的方式发生。所有处理都在制造后取样(每个200g)并送实验室分析(干物质，ee，粗蛋白质，粗能量)。
[0259]
贯穿整个实验期间内将禽安置在格子中，伴随任意的水与饲料的提供，采用的照明程序为24小时照明。实验饮食在表10中显示：
[0260]
表10：实验饮食
[0261][0262][0263]
为促进健康挑战，使用推荐剂量的十倍使禽接种球虫病疫苗以引发实验挑战
(provoke experimental challenge)。同样地，将禽用来自商业化农场的重复利用的废弃物(litter)饲养，并且在11日龄时经由饮用水制造挑战。为此，用1kg的与4升混合的重复利用的废弃物制造溶液。
[0264]
对于骨灰分析，每种处理的9只21和42日龄的禽接受左胫骨收集。将肉残留物去除并随后将左胫骨用纱布覆盖并在烘箱中于105℃干燥12小时。随后，将胫放置在含有90％乙醚和10％甲醇的密封容器中脱脂。两天后，将骨头在新的90％乙醚和10％甲醇的溶液中放置24小时，在烘箱中于105℃干燥，并在精密天平(0.0001g)的帮助下称重以计算脱脂的干物质。将骨头在烘箱中于600℃的温度焚化24小时以确定在脱脂的干物质中的灰分。
[0265]
关于动物的血液参数，在21和42天，通过肝素化的真空采集管(vacutainer tube)从每种处理的8部分的具有接近平均重量(比平均值多或少5％)的禽中收集血液样品。将样品离心并冷冻，以进一步分析hdl、ldl、hldl、甘油三酯和脂质氧化(tbars)。
[0266]
关于动物的肠特性，在21和42日龄，将每种处理的8部分(parcels)的具有接近平均重量(比平均值多或少5％)的鸟宰杀以收集十二指肠、空肠和回肠。将样品收集、用蒸馏水洗涤、并在含有布因(bouin)的烧瓶中放置24小时以进行组织固定和进一步的组织学分析。所评价的形态计量学的特性为肠绒毛长度、隐窝深度以及绒毛/隐窝比。绒毛长度从绒毛的顶端末端至绒毛与隐窝的连接处进行测量，并且隐窝深度被定义为邻近的绒毛之间的内陷深度。
[0267]
为了确定表现和产量，将禽和剩余的饲料在7、21、35和42日龄称重以计算平均重量(kg)、重量增长(kg)、饲料消耗(kg)以及饲料转化(kg/kg)。死亡率被每天记录以修正饲料摄入并计算可行性(100
‑
死亡率，％)。基于此信息，也计算了生产因素(fp＝(wg(kg)x可行性(％)/fc x年龄)x 100)。
[0268]
将每个重复的2只禽宰杀以估计在42日龄的躯体产率和腹部脂肪。
[0269]
为评估肉品质，在宰杀后从每种处理的5个部分中收集2个胸、去骨并剥皮。从每个胸中取出4个100克样品，1个用于胆固醇分析和3个用于tbars分析。将样品装在单独的膨胀聚乙烯托盘中，用透明塑料膜覆盖，并在1
‑
3度的温度保存0、7和14天。在每个阶段结束时进行分析。
[0270]
对于实验i，在饮食中被补充有不同水平的木质素的禽的长达21天的表现结果在表11中显示。没有观察到处理之间的对于饲料摄入的差异(p>0.439)。接受在饮食中具有1％的木质素包含的禽在统计上具有与来自使用了提升表现的抗生素的阳性对照处理的禽相同的重量增长和相同的饲料转化(p<0.001)。然而，饮食中的木质素的高于1％的包含水平导致鸟的表现的降低。
[0271]
表11：以木质素喂饲的肉鸡的表现
[0272]
处理消耗,g获得fc,g/g阳性对照1,132895
a
1.266
a
阴性对照
–
nc1,106837
b
1.322
b
nc 1％的木质素1,101878
a
1.275
a
nc 2％的木质素1,093807
c
1.357
c
nc 3％的木质素1,105831
b
1.331
b
无处理7170.009
p,％0.439<0.001<0.001
[0273]
关于实验i中的营养物可消化性，对于向饮食包含1％的纤维，观察到了正面效果(见表12)。观察到能量可消化性的1.65％以及蛋白质和氨基酸的可消化性的1.5％的改进；该结果可能有助于禽在1
‑
21日龄阶段令人满意的表现。
[0274]
表12：以在饮食中的木质素喂饲的肉鸡中的营养物可消化性
[0275][0276][0277]
关于实验ii，来自在饮食中以不同的木质素水平喂饲的禽的表现、躯体和消化器官特性在以下表13
‑
18中显示。
[0278]
通过实验ii中获得的数据，对于以来自不同处理的饮食喂饲的禽在1
‑
7天的阶段中没有观察到对于最终重量、重量增长、饲料消耗和饲料转化的统计上的差异(表13)。在养殖的1
‑
21天的阶段中，当与阳性对照处理(pc)中的禽对比时，在阴性对照处理(nc)中的禽中观察到了更低的消耗和更差的饲料转化(表14)。然而，以向饮食包含2％木质素喂饲的禽在统计上具有与以pc禽喂饲的禽相同的重量、相同的重量增长以及饲料转化。这些结果不同于那些在实验i中发现的，原因是在此前的实验中禽在笼子中养育并且不存在如在本研究中所观察到的健康挑战。在1
‑
35天的阶段中(表15)，观察到nc禽呈现最差的最终重量和重量增长。如此前的阶段中所证明的，接受饮食中2％的木质素的禽具有比其它处理更大的重量、更大的重量增长，以及更好的饲料转化。可以在表16(显示了来自完整的实验期间(1
‑
42天)的数据)中看到以2％木质素喂饲的禽提供了与pc禽表现可比的最好的表现，因此证明了在此前阶段中获得的结果。在以来自不同处理的饮食喂饲的禽之间没有对于躯体产率的统计上的差异。然而，木质素至饮食的包含减少了脂肪百分率(表17)。表18显示了砂囊百分率没有被处理影响。然而，当与来自pc和nc处理的禽相比时，接受饮食中的木质素的禽的肠百分率和长度更高。
[0279]
表13：以木质素喂饲的肉鸡的表现(1
‑
7天)
[0280][0281][0282]
表14：以木质素喂饲的肉鸡的表现(1
‑
21天)
[0283][0284]
表15：以木质素喂饲的肉鸡的表现(1
‑
35天)
[0285][0286]
表16：以木质素喂饲的肉鸡的表现(1
‑
42天)
[0287][0288][0289]
表17：以木质素喂饲的肉鸡的躯体特性(1
‑
42天)
[0290]
处理躯体产率,％腹部脂肪,％阳性对照69.611.17
d
阴性对照
–
nc68.631.11
c
nc 1％的木质素68.711.02
b
nc 2％的木质素69.361.01
b
nc 3％的木质素68.550.83
a
无处理0.150.02p,％0.066<0.001
[0291]
表18：以木质素喂饲的肉鸡中的消化器官特性
[0292][0293]
进一步地，在血液参数(在以下表19中示出)被观察的21日龄时，观察到所评价的特性无一被处理影响。不存在在此年龄的统计上的差异可能是由于向动物的饮食提供木质素的阶段不够长以至于不足以促进处理间的差异而发生。然而，当在42日龄观察这些相同的特性时，当木质素被添加至肉鸡的饮食时发现了血液胆固醇、hdl和ldl水平的降低并且
没有甘油三酯和vldl水平的变异。
[0294]
表19：以在饮食中的木质素喂饲的肉鸡的血液参数
[0295][0296][0297]
关于tbars指数(以下表20)，观察到指数随着储存时间增加的增加。然而，在相同的储存日期内，木质素在饮食中的使用增加了该参数的值。
[0298]
表20：以木质素喂饲的肉鸡的胸tars指数
[0299]
处理0d7d14d阳性对照0.54
d
1.27
b
1.39
c
阴性对照
–
nc0.44
e
1.12
c
1.14
d
nc 1％的木质素0.72
b
1.58
a
2.05
a
nc 2％的木质素0.63
c
1.04
d
1.14
d
nc 3％的木质素0.85
a
1.53
a
1.58
b
无处理0.030.060.07p,％<0.0010.0220.001
[0300]
如可在表21中看见，在来自不同的所评价的处理的禽的矿物质中没有统计上的差异。
[0301]
表21：以木质素水平喂饲的肉鸡的骨矿物质(％)
[0302]
处理21天42天阳性对照42.6441.79阴性对照
–
nc40.3243.12nc 1％的木质素39.5843.91nc 2％的木质素38.942.05nc 3％的木质素40.0242.16无处理0.490.33p,％0.1510.205
[0303]
对于十二指肠和空肠在21日龄的肠形态，通过评价在以下表22中显示的肠形态计量学数据没有观察到统计上的差异。然而，3％木质素在饮食中的使用降低了禽回肠中的vh:cd比。相对于隐窝深度的更大的肠绒毛长度与肠健康改进相关联，由于吸收表面的增加，除提供了更大的营养物吸收以外还提供了更好的粘膜均匀性和完整性。在42日龄，木质素的使用降低了十二指肠中的vh:cd比。然而，在接受饮食中2％的木质素的禽中对于空肠和回肠，以及1％的木质素对于十二指肠，观察到了最深的隐窝深度。
[0304]
表22：以木质素喂饲的肉鸡肠的肠绒毛高度(vh，mm)、隐窝深度(cp，mm)及其比(av:pc)
[0305]
[0306][0307]
从本研究(来自实验i和ii的数据)，可总结出对于木质素在肉鸡中的使用，具有改进的表现和成分可消化性的巨大潜力。
[0308]
由于表现的改进以及在其中进行研究的条件，在肉鸡的饮食中的2％的木质素的使用被视为可用以替代在家禽生产中的提升表现的抗生素的使用的工具。
[0309]
本研究中发现的另外的重大信息是动物血流中的胆固醇和ldl降低。
[0310]
实施例6
[0311]
本研究的目标是评价木质素在用于蛋鸡的饮食中的使用。如将在以下详细显示的，研究表明禽中的表现的改进以及通过其获得的蛋的特性的优势。
[0312]
评价在圣保罗州立大学(paulo state university，unisersidade estatual paulista)(unesp)兽医学与动物科学学院(school of veterinary medicine and animal science)(fmvz)动物产品系(department of animal production)，botucatu校区进行。
[0313]
为了评价，将蛋鸡安置在常规的系统中，在加利福尼亚型鸟舍中，具有1.00m长x 0.45m深x 0.40m高的金属笼子，被分为2区室，其中每区室中安置了4只禽，每个笼子中总共8只禽。笼子分别地装备有金属喂饲器和乳头型饮水器。384只h&n nick chick血统的禽被用于本实验。
[0314]
本研究中的384只禽接受了不同的处理，其被如以下分类：
[0315]
t1
–
不具有木质素的饮食(96只禽)；
[0316]
t2
–
具有0.5％的木质素的饮食(96只禽)；
[0317]
t3
–
具有1.0％的木质素的饮食(96只禽)；以及
[0318]
t4
–
具有1.5％的木质素的饮食(96只禽)。
[0319]
实验阶段被细分为4个21天的周期，总共84实验日，在此期间禽为59
‑
71周龄。在每个实验阶段的最后三天中，对于每种处理收集72枚蛋，每个21天的周期收集总共288枚蛋。这些蛋被用以评价蛋重、比重、蛋黄百分率、蛋清百分率、和蛋壳百分率及抵抗力。
[0320]
肠粘膜的品质特性也被评价以验证吸收容量(absorptive capacity)的可能的变化。为此，收集小肠的部分(十二指肠、空肠和回肠段)以评估绒毛高度、隐窝深度和绒毛x隐窝比。
[0321]
因此，将48只禽(每种处理12只)在实验开始时安乐死，并且将48只禽(每种处理12只)在实验结束时安乐死，制作了288个组织学载玻片。在实验阶段的开始时，还从48只禽还收集了血和蛋用于hdl(高密度脂蛋白)和ldl(低密度脂蛋白)、总胆固醇、以及tbars(硫代巴比妥酸反应性的物质
–
nmol mda/ml)的分析。在实验结束时，为了对比目的，使用每种处理12只禽重复该评价。
[0322]
在上个实验周期结束时收集蛋并储存最高达30天以进行被称为货架期的品质评估。为了该评价，每10天通过比重、蛋壳抵抗力、蛋壳、蛋清和蛋黄百分率、总胆固醇、以及tbars来验证蛋的品质，以便可评价来自禽饮食中木质素的包含的蛋品质的改进。
[0323]
在每个实验周期的结束，通过如下分析评价动物的生产表现：
[0324]
‑
饲料消耗(g/禽/天)：每当饲料被分配至禽时，将其称重并且在每周结束时，将喂饲器中的剩余物称重，从而计算每周的饲料消耗。
[0325]
‑
产蛋率(％)：将蛋每天收集并且在特定文件中记录生产。因而，可计算在21天阶段中所生产的蛋相对于在实验中所安置的禽的数量的百分率。
[0326]
‑
蛋重(g)：将每天收集的蛋在30个蛋的托盘中称重减去托盘的重量。因而，可计算在每个21天阶段中所生产的蛋的平均重量。
[0327]
‑
可行性(％)：禽的死亡率在每当其发生时被注意。因而，可计算对于21天期间的批次的可行性(100
–
死亡率＝可行性)。
[0328]
‑
饲料转化：一旦获得了蛋重、生产的蛋的数量以及禽的饲料消耗，则可计算每千克消耗的饲料以及每打所生产的蛋的饲料转化。
[0329]
由本实验的禽所获得的蛋的品质也使用如下标准评价：
[0330]
‑
比重：为了该评价，制备了具有密度1.060、1.070、1.080、1.090和1.100的5种盐溶液并以升序放置在指定的容器(identified containers)中。首先，将蛋放置在1.060容器中，并以此类推，直到蛋在溶液中漂浮。蛋的比重由蛋在其中浮出的密度较低的溶液代表。
[0331]
‑
对破损的蛋壳抵抗力(kgf)：该评价使用装备有75mm断裂探头(rupture probe)(p/75)的ta.xt plus texture analyzer质构仪进行，对于1mm/秒的下降的测试速率校准。装置标记了破损蛋壳所需要的力，其以kgf/cm2表示。
[0332]
‑
蛋黄和蛋清百分率：根据以下方程，考虑总的蛋重和蛋黄重量获得蛋黄百分率并且对于蛋清进行相同测量：
[0333][0334]
[0335]
‑
蛋壳百分率：考虑总的蛋重和蛋壳重量获得蛋壳百分率，其在蛋壳在烘箱中于60℃干燥三天之后测量。以下方程表示该测量：
[0336][0337]
‑
脏蛋(％)：每天在蛋收获期间，注意蛋壳中具有污垢的蛋。因而，可估计在每种处理种的脏蛋百分率。
[0338]
在本研究中获得的来自以上指出的分析的数据被提交至sas 9.2统计软件包(statistical package)用于方差分析，且平均值通过图基检验对比(p<0.05)。产蛋率和品质的数据也被提交至回归评价(p<0.05)，以估计最好的木质素包含水平。
[0339]
图02显示了说明在每个生产周期中对于本发明的处理t1
‑
t4的可行性数据的图。如图中可见，不同木质素包含水平没有影响批次的禽的可行性(p>0.05)，每1.04％代表1只禽。
[0340]
此外，以下表23显示了所研究的禽的表现数据，以及指脏蛋％的产品特性。
[0341]
表23：被补充有不同木质素水平的禽的表现
[0342][0343]
列中跟随不同字母的平均值通过图基检验(p<0.05)彼此不同。
[0344]
从以上表中，在处理之间对于数个特性发现了差异(p<0.05)，例如饲料消耗、产蛋率、脏蛋百分率、以及对于在4个生产周期结束时所生产的1打蛋的饲料转化。
[0345]
通常，最好的结果在接受具有1％的木质素的饲料(t3)的禽中发现。不可探测到对于每千克所生产的蛋的饲料转化的差异(p>0.05)。可以推断该特性在所测试的处理之间没有差异，因为考虑了饲料消耗以及所生产的蛋的总重量，其间接考虑了批次的可行性。由于没有对于蛋重和可行性特性的差异，每千克所生产蛋的饲料转化没有被影响。
[0346]
在对于鸟的表现特性的回归评价之后，发现了对于饲料消耗特性的显著的立方回归以及对于产蛋率和蛋重的平方回归，如可在图03
‑
05的图表中看到。通过这些图，发现这
些特性对于0.50
‑
1.00％的木质素的包含具有更高值。
[0347]
对于脏蛋百分率的回归评价可以继而通过图06中的图表验证。该评价证明了在第三和第四个生产周期之间有减少的趋势，与所使用的处理无关。然而，不能说该行为是否将对其它后续周期继续。
[0348]
最终，被提供具有不同木质素包含水平饮食的禽的蛋品质在以下表24中显示。
[0349]
表24：被补充有不同木质素水平的禽的蛋品质
[0350][0351][0352]
列中跟随不同字母的平均值通过使用图基检验彼此不同(p<0.05)。
[0353]
如可从以上表中对于蛋品质的数据看到，木质素的包含被发现在蛋壳品质的改进中非常有效，尤其在0.50
‑
1.00％的水平(分别地t2和t3)。应注意蛋的比重特性、蛋壳抵抗
力以及蛋壳的百分率对于接受这些木质素至食物的包含水平的禽更好(p<0.05)。对于比重，具有1.50％的木质素包含的处理也提供了好的结果。其它特性没有被处理影响。
[0354]
对于蛋品质特性的回归评价遵循了与常规的统计评价相同的趋势，具有仅对于比重的特性、蛋壳抵抗力、和蛋壳百分率的显著影响，对于0.50
‑
1.00％之间的包含水平呈现具有更好结果的平方行为，如可在图07、08和09中看到。
[0355]
在本文描述的实验开始前与结束后，从48只禽收集血液以评估血液血清中的总胆固醇、ldl(低密度脂蛋白)、甘油三酯、hdl(高密度脂蛋白)和tbars(硫代巴比妥酸反应性的物质
–
nmol mda/ml)。这些数据见于表25中。
[0356]
表25：被补充有不同木质素水平的蛋鸡的血液血清中的总胆固醇、ldl、甘油三酯、hdl和tbars值。
[0357][0358][0359]
列中跟随不同字母的平均值通过使用图基检验彼此不同(p<0.05)。
[0360]
cv％＝变异系数(％)
[0361]
因此注意在实验开始一天前发现了以下值：82.43mg/dl的总胆固醇(总胆固醇的最大限制被接受在120mg/dl)，12.35mg/dl的ldl，1169.67mg/dl的甘油三酯，48.71mg/dl的hdl胆固醇，以及1.64nmol mda/ml的tbars。这些值在对于40
‑
80周的蛋鸡的正常限度内。
[0362]
然而，在84天即4个生产周期的结束时，木质素在禽饮食中的包含提供了对于总胆固醇、ldl、hdl和tbars的特性的差异，具有对于所有在其中使用了木质素的处理的降低(p<0.05)。总胆固醇和hdl的水平的最大降低在1.50％木质素包含中发现(
‑
13.70％的胆固醇以及
‑
42.93％的hdl)，对于ldl水平的最好结果在具有1.00％的木质素包含的处理中发现(46.15％)，然而，对于tbars，最好的结果在用0.50和1.00％的木质素处理的禽中发现(
‑
13.89％)。
[0363]
关于总胆固醇和tbars的评价也在四个生产周期结束时对于实验开始前的禽蛋进行并持续30天(货架期)。数据包含在以下表26中。
[0364]
表26：在来自被补充有不同木质素水平的蛋鸡的蛋中的总胆固醇和tbars值
[0365][0366][0367]
列中跟随不同字母的平均值通过图基检验彼此不同(p<0.05)。cv％＝变异系数(％)
[0368]
在实验开始时蛋中的tbars的平均值是0.123mg mda/kg，其为对于新鲜蛋足够的值(可接受最高达0.540mg mda/kg)。以上表中的数据是对于在实验开始和结束时的总胆固醇和tbars。再次地，0.50％和1.00％的木质素包含被验证了提供对于蛋黄中的总胆固醇水平更好的结果(p<0.05)。通过tbars测量的脂质氧化速率在被补充有不同木质素包含百分率的禽的蛋中减小。
[0369]
以下表27
‑
29显示了对于来自本研究中的禽并在冰箱中储存最高达30天的蛋的品质的货架期数据。
[0370]
表27：在不同储存阶段期间的来自被补充有不同木质素水平的蛋鸡的蛋中的总胆固醇和tbars值。
[0371][0372]
列中跟随a、b；行中跟随a、b、c的平均值通过图基检验彼此不同(p<0.05)。cv％＝变异系数(％)
[0373]
表28：以不同的木质素至饮食的包含水平喂饲的蛋鸡的蛋的品质参数
[0374][0375]
列中跟随a、b；行中跟随a、b、c的平均值通过图基检验彼此不同(p<0.05)。
[0376]
表29：对于来自以在饮食中的不同木质素包含水平喂饲的蛋鸡的蛋的组成百分数参数。
[0377][0378]
列中跟随a、b；行中跟随a、b、c的平均值通过图基检验彼此不同(p<0.05)。
[0379]
注意到对于新鲜蛋(0天)的tbars的最低值在来自以1.00和1.50％的木质素喂饲的鸡的蛋中发现，尽管该产品的0.50％包含水平也提供了较低的tbars值(p<0.05)，相对于来自以对照饮食(0.00％包含)喂饲的禽的蛋，依据表27。
[0380]
该特性的值在不同木质素包含水平之间具有关于储存时间的显著不同的行为。只有所测试的产品的具有0.00和1.50％包含的处理具有tbars值随着时间的差异(p<0.05)。数据证明了处理2和3(分别地0.50％和1.00％包含)具有恒定的脂质氧化(即没有峰值脂质氧化)，然而处理1和4(0.00和1.50％)允许在储存阶段开始时的蛋黄脂质的高氧化，峰值最高达10天。
[0381]
因此，可以推断来自以具有0.50和1.00％的木质素包含的饮食喂饲的禽的蛋的品质提供了针对蛋黄脂质氧化的更好的保护。
[0382]
此外，可以在表28中看到，在相同的评价日的蛋重未在处理间有差异(p>0.05)。在评价阶段之间，注意到蛋重在20天的储存后降低(p<0.05)。对于处理3(1.00％)发现了重量的最大变异，其为
‑
3.46％。
[0383]
比重也仅在评价的第0天在处理间有差异(此行为之后未被重复)。然而，注意到该特性在20天的储存后恶化(p<0.05)。
[0384]
蛋壳的抵抗力继而被处理和储存时间影响，且具有0.50和1.00％的木质素包含的处理具有贯穿整个储存阶段的最好的结果(见表28)。
[0385]
可以从表29看到蛋中的蛋黄和蛋清的百分率被储存时间影响(p<0.05)，具有蛋黄的百分率的明显增加以及蛋清的百分率的降低。木质素包含的水平不是在所述变化(p>0.05)中的决定性因素。这些变化证明水从蛋中的损失，然而该水分从蛋中的损失不足以显著改变在储存阶段期间蛋壳的百分率(p>0.05)。然而，在储存30天时，具有0.50和1.00％包含的处理显示较低的蛋壳百分率，支持了以下说法：来自消耗具有这些木质素水平的饮食的禽的蛋具有较小的水损失。
[0386]
图10
‑
15显示了证明在30天的储存期间蛋的总胆固醇和tbars水平的行为、以及蛋
壳抵抗力特性、蛋壳、蛋黄和蛋清的百分率的图表。
[0387]
在本研究中，以木质素喂饲的鸡的肠品质也被评价。该分析的数据在以下表30中显示。
[0388]
十二指肠已知为负责大部分的营养物的消化和吸收的部分。空肠继而主要负责油类、脂肪和脂溶性维生素的吸收。回肠是最负责水、矿物质和水溶性维生素的吸收的部分。因此，这些部分的绒毛高度的改进对于改进禽的表现有大的重要性。隐窝负责新的肠细胞的形成。当隐窝深度非常高以及因此绒毛:隐窝比更低时，理解的是一些应激剂(stress agent)促进活性肠细胞的死亡并因此更大的更新(renovation，修复)是必须的。
[0389]
该实验中所发现的结果非常引人关注，因为木质素的施用对于大部分所评价的肠部分改进了(p<0.05)肠品质，尤其对于处理2(0.50％包含)。
[0390]
表30：补充不同木质素水平的蛋鸡的肠品质
[0391][0392]
列中跟随不同字母的平均值通过图基检验彼此不同(p<0.05)。
[0393]
从在本发明的实施方案的本实施例中描述的研究观察到木质素至蛋鸡饮食中的包含是非常引人关注的。可从本研究得出结：1.00％包含水平对于蛋的生产提供了最好的结果，尽管0.50和1.50％的水平也改进了所评价的特性。在此背景下，脏蛋百分率的显著改进尤为突出，其为对于60周龄以后的蛋鸡反复出现的问题。
[0394]
对于来自补充有木质素的鸡的蛋的蛋品质特性也改进了，并且对于经历该产品的0.50和1.00％包含的禽发现了最有表现力的结果。所标记的蛋壳品质的改进可被突出。
[0395]
货架期的评价支持了来自被补充有木质素的禽的蛋壳品质的改进的结果。这些数据被tbars结果强化，其在来自被补充有木质素(0.50和1.00％包含)的禽的蛋中更好。
[0396]
木质素的使用(主要在0.50和1.00％包含下)在大大改进小肠的品质、促进更大的
营养物吸收面积方面也高效。