梨S基因型鉴定方法及其配套试剂盒与流程

技术特征：
1.一组用于鉴定梨s基因型的引物组，其特征在于：该引物组包含(1)
‑
(29)所示的引物对中的至少两对：(1)s1‑
rnase基因的引物对：由如seq id no.1和seq id no.2所示的核苷酸片段组成的引物对；(2)s2‑
rnase基因的引物对：由如seq id no.3和seq id no.4所示的核苷酸片段组成的引物对；(3)s3‑
rnase基因的引物对：由如seq id no.5和seq id no.6所示的核苷酸片段组成的引物对；(4)s4‑
rnase基因的引物对：由如seq id no.7和seq id no.8所示的核苷酸片段组成的引物对；(5)s5‑
rnase基因的引物对：由如seq id no.9和seq id no.10所示的核苷酸片段组成的引物对；(6)s7‑
rnase基因的引物对：由如seq id no.11和seq id no.12所示的核苷酸片段组成的引物对；(7)s8‑
rnase基因的引物对：由如seq id no.13和seq id no.14所示的核苷酸片段组成的引物对；(8)s
12
‑
rnase基因的引物对：由如seq id no.15和seq id no.16所示的核苷酸片段组成的引物对；(9)s
13
‑
rnase基因的引物对：由如seq id no.17和seq id no.18所示的核苷酸片段组成的引物对；(10)s
15
‑
rnase基因的引物对：由如seq id no.19和seq id no.20所示的核苷酸片段组成的引物对；(11)s
16
‑
rnase基因的引物对：由如seq id no.21和seq id no.22所示的核苷酸片段组成的引物对；(12)s
17
‑
rnase基因的引物对：由如seq id no.23和seq id no.24所示的核苷酸片段组成的引物对；(13)s
19
‑
rnase基因的引物对：由如seq id no.25和seq id no.26所示的核苷酸片段组成的引物对；(14)s
21
‑
rnase基因的引物对：由如seq id no.27和seq id no.28所示的核苷酸片段组成的引物对；(15)s
22
‑
rnase基因的引物对：由如seq id no.29和seq id no.30所示的核苷酸片段组成的引物对；(16)s
28
‑
rnase基因的引物对：由如seq id no.31和seq id no.32所示的核苷酸片段组成的引物对；(17)s
29
‑
rnase基因的引物对：由如seq id no.33和seq id no.34所示的核苷酸片段组成的引物对；(18)s
32
‑
rnase基因的引物对：由如seq id no.35和seq id no.36所示的核苷酸片段组成的引物对；(19)s
35
‑
rnase基因的引物对：由如seq id no.37和seq id no.38所示的核苷酸片段组
成的引物对；(20)s
37
‑
rnase基因的引物对：由如seq id no.39和seq id no.40所示的核苷酸片段组成的引物对；(21)s
38
‑
rnase基因的引物对：由如seq id no.41和seq id no.42所示的核苷酸片段组成的引物对；(22)s
39
‑
rnase基因的引物对：由如seq id no.43和seq id no.44所示的核苷酸片段组成的引物对；(23)s
41
‑
rnase基因的引物对：由如seq id no.45和seq id no.46所示的核苷酸片段组成的引物对；(24)s
42
‑
rnase基因的引物对：由如seq id no.47和seq id no.48所示的核苷酸片段组成的引物对；(25)s
51
‑
rnase基因的引物对：由如seq id no.49和seq id no.50所示的核苷酸片段组成的引物对；(26)s
57
‑
rnase基因的引物对：由如seq id no.51和seq id no.52所示的核苷酸片段组成的引物对；(27)s
64
‑
rnase基因的引物对：由如seq id no.53和seq id no.54所示的核苷酸片段组成的引物对；(28)s
65
‑
rnase基因的引物对：由如seq id no.55和seq id no.56所示的核苷酸片段组成的引物对；(29)s
67
‑
rnase基因的引物对：由如seq id no.57和seq id no.58所示的核苷酸片段组成的引物对。2.一种用于鉴定梨s基因型的试剂盒，其特征在于：该试剂盒中包含权利要求1所述的引物组。3.一种鉴定梨s基因型的方法，其特征在于：该方法以待鉴定梨品种的基因组dna为扩增模板，采用权利要求1所述引物组中的引物对分别进行pcr扩增，根据扩增产物的有无以及大小确定待鉴定梨品种的s基因型。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述根据扩增产物的有无以及大小确定待鉴定梨品种的s基因型的方法为：检验所述的引物对是否以待鉴定梨品种的基因组dna为模板扩增得到预期的核苷酸片段；如果所述扩增梨s1‑
rnase基因的引物对扩增得到预期的核苷酸片段，则所述待鉴定梨品种含有s1‑
rnase基因，如果所述扩增梨s2‑
rnase基因的引物对扩增得到预期的核苷酸片段，则所述待鉴定梨品种含有s2‑
rnase基因，如果所述扩增梨s3‑
rnase基因的引物对扩增得到预期的核苷酸片段，则所述待鉴定梨品种含有s3‑
rnase基因，如果所述扩增梨s4‑
rnase基因的引物对扩增得到预期的核苷酸片段，则所述待鉴定梨品种含有s4‑
rnase基因，如果所述扩增梨s5‑
rnase基因的引物对扩增得到预期的核苷酸片段，则所述待鉴定梨品种含有s5‑
rnase基因，如果所述扩增梨s7‑
rnase基因的引物对扩增得到预期的核苷酸片段，则所述待鉴定梨品种含有s7‑
rnase基因，如果所述扩增梨s8‑
rnase基因的引物对扩增得到预期的核苷酸片段，则所述待鉴定梨品种含有s8‑
rnase基因，如果所述扩增梨s
12
‑
rnase基因的引物对扩增得到预期的核苷酸片段，则所述待鉴定梨品种含有s
12
‑
rnase基因，如果所述扩增梨s
13
‑
rnase基因的引物对扩增得到预期的核苷酸片段，则所述待
鉴定梨品种含有s
13
‑
rnase基因，如果所述扩增梨s
15
‑
rnase基因的引物对扩增得到预期的核苷酸片段，则所述待鉴定梨品种含有s
15
‑
rnase基因，如果所述扩增梨s
16
‑
rnase基因的引物对扩增得到预期的核苷酸片段，则所述待鉴定梨品种含有s
16
‑
rnase基因，如果所述扩增梨s
17
‑
rnase基因的引物对扩增得到预期的核苷酸片段，则所述待鉴定梨品种含有s
17
‑
rnase基因，如果所述扩增梨s
19
‑
rnase基因的引物对扩增得到预期的核苷酸片段，则所述待鉴定梨品种含有s
19
‑
rnase基因，如果所述扩增梨s
21
‑
rnase基因的引物对扩增得到预期的核苷酸片段，则所述待鉴定梨品种含有s
21
‑
rnase基因，如果所述扩增梨s
22
‑
rnase基因的引物对扩增得到预期的核苷酸片段，则所述待鉴定梨品种含有s
22
‑
rnase基因，如果所述扩增梨s
28
‑
rnase基因的引物对扩增得到预期的核苷酸片段，则所述待鉴定梨品种含有s
28
‑
rnase基因，如果所述扩增梨s
29
‑
rnase基因的引物对扩增得到预期的核苷酸片段，则所述待鉴定梨品种含有s
29
‑
rnase基因，如果所述扩增梨s
32
‑
rnase基因的引物对扩增得到预期的核苷酸片段，则所述待鉴定梨品种含有s
32
‑
rnase基因，如果所述扩增梨s
35
‑
rnase基因的引物对扩增得到预期的核苷酸片段，则所述待鉴定梨品种含有s
35
‑
rnase基因，如果所述扩增梨s
37
‑
rnase基因的引物对扩增得到预期的核苷酸片段，则所述待鉴定梨品种含有s
37
‑
rnase基因，如果所述扩增梨s
38
‑
rnase基因的引物对扩增得到预期的核苷酸片段，则所述待鉴定梨品种含有s
38
‑
rnase基因，如果所述扩增梨s
39
‑
rnase基因的引物对扩增得到预期的核苷酸片段，则所述待鉴定梨品种含有s
39
‑
rnase基因，如果所述扩增梨s
41
‑
rnase基因的引物对扩增得到预期的核苷酸片段，则所述待鉴定梨品种含有s
41
‑
rnase基因，如果所述扩增梨s
42
‑
rnase基因的引物对扩增得到预期的核苷酸片段，则所述待鉴定梨品种含有s
42
‑
rnase基因，如果所述扩增梨s
51
‑
rnase基因的引物对扩增得到预期的核苷酸片段，则所述待鉴定梨品种含有s
51
‑
rnase基因，如果所述扩增梨s
57
‑
rnase基因的引物对扩增得到预期的核苷酸片段，则所述待鉴定梨品种含有s
57
‑
rnase基因，如果所述扩增梨s
64
‑
rnase基因的引物对扩增得到预期的核苷酸片段，则所述待鉴定梨品种含有s
64
‑
rnase基因，如果所述扩增梨s
65
‑
rnase基因的引物对扩增得到预期的核苷酸片段，则所述待鉴定梨品种含有s
65
‑
rnase基因，如果所述扩增梨s
67
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rnase基因的引物对扩增得到预期的核苷酸片段，则所述待鉴定梨品种含有s
67
‑
rnase基因，该待鉴定梨品种含有的所有s
‑
rnase基因的组合即为该梨品种的s基因型。5.根据权利要求3或4所述的方法，其特征在于：所述待鉴定梨品种的基因组dna是以待鉴定梨品种幼嫩叶片为材料提取得到的。6.权利要求1中所述的引物组或权利要求2所述的试剂盒在为自交不亲和梨品种选配授粉梨品种中的应用。7.权利要求3～5中任意一项所述的方法在为自交不亲和梨品种选配授粉梨品种中的应用。8.根据权利要求7或8所述的应用，其特征在于：确定梨品种的s基因型，含有不同s基因型且所含s基因均不相同的梨品种可互为授粉梨品种。

技术总结
本发明公开了一种鉴定梨S基因型的方法及配套试剂盒。本发明是以待鉴定梨品种的基因组DNA为模板，用鉴定梨品种的S基因引物对进行扩增，并用琼脂糖凝胶电泳分离并检测扩增产物，以此确定待检测梨品种的S基因型。该方法能在较短时间内快速鉴定自交不亲和梨品种的S基因型，可以根据鉴定结果筛选合适的授粉树，在梨的生产以及育种中有着重大的应用价值。的生产以及育种中有着重大的应用价值。的生产以及育种中有着重大的应用价值。


技术研发人员：张绍铃 谷超 何敏 齐开杰 谢智华 徐颖
受保护的技术使用者：南京农业大学
技术研发日：2021.07.17
技术公布日：2021/11/9