一种冠状病毒抗体联检试纸条、试剂卡及其制备方法与流程

技术特征：
1.一种新型冠状病毒igm、igg抗体的检测试纸条，包括pvc底板，在pvc底板的一面顺次相互搭接地粘附有样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，其特征在于：所述结合垫为涂覆有重组新型冠状病毒抗原-胶体金复合物及鸡igy抗体-胶体金复合物的玻璃纤维素膜，所述硝酸纤维素膜分别包被有鼠抗人igm抗体的检测线、鼠抗人igg抗体的检测线、羊抗鸡igy抗体的质控线。2.根据权利要求1所述冠状病毒igm、igg抗体的检测试纸条，其特征在于：重组新型冠状病毒抗原-胶体金复合物及鸡igy抗体-胶体金复合物混合溶液喷至结合垫上，在37℃烘箱里干燥12-24h。3.根据权利要求1所述冠状病毒igm、igg抗体的检测试纸条，其特征在于：所述鼠抗人igg抗体、鼠抗人igm抗体、羊抗鸡igy抗体用抗体稀释液稀释后划到硝酸纤维素膜上包被并干燥而得，干燥条件为37℃干燥4小时。4.根据权利要求1所述冠状病毒igm、igg抗体的检测试纸条，其特征在于：所述抗原选自重组新型冠状病毒s蛋白、重组新型冠状病毒n蛋白中的一种或两种。5.根据权利要求3所述冠状病毒igm、igg抗体的检测试纸条，其特征在于：所述抗体稀释液由ph7.4磷酸盐缓冲液溶解蔗糖制备而成。6.一种新型冠状病毒igm、igg抗体的检测试剂卡，其特征在于：所述试剂卡包括权利要求1所述的检测试纸条和检测卡壳。7.一种新型冠状病毒igm、igg抗体的检测试剂盒，包括样本稀释液和权利要求6所述的检测试剂卡。8.根据权利要求7所述冠状病毒igm、igg抗体的检测试剂盒，其特征在于：所述的样本稀释液为ph7.0
±
0.2的磷酸盐缓冲液。9.一种新型冠状病毒igm、igg抗体的试纸条的制备方法，其特征在于包括如下步骤：1）标记溶液制备：于1000ml沸水中加入10%氯金酸溶液1.0ml，边加边搅拌，充分沸腾10秒钟，加入10%柠檬酸钠溶液1.8ml，维持加热，反应30分钟后停止加热，继续搅拌至室温；2）标记重组新型冠状病毒抗原溶液制备：取100ml标记溶液中逐滴加入0.05m k2co
3 5.0ml，充分混匀，逐滴加入0.1mg/ml的重组新型冠状病毒抗原水溶液，充分混匀30min，逐滴加入10% 牛血清蛋白溶液13ml，缓慢搅拌30min，低温高速离心30min，弃上清，沉淀用胶体金稀释液溶解即得；3）标记抗体溶液制备：100ml标记溶液中逐滴加入0.05m k2co
3 5.0ml，充分混匀，逐滴加入0.1mg/ml的鸡igy抗体水溶液，充分混匀30min，逐滴加入10% 牛血清蛋白溶液13ml，缓慢搅拌30min，低温高速离心30min，弃上清，沉淀用胶体金稀释液溶解即得；4）抗体包被液配制：于100ml的0.2m ph7.4 磷酸盐缓冲液溶解蔗糖2g，以0.22
µ
m孔径的微孔滤膜滤过，2～8℃保存；5）c、t线包被溶液的配制：用抗体包被液分别稀释羊抗鸡igy抗体、鼠抗人igm抗体、鼠抗人igg至0.3-0.5mg/ml、0.5-0.8mg/ml、0.5-0.8mg/ml；6）玻璃纤维素膜标记：将标记重组新型冠状病毒抗原溶液与标记抗体溶液按照3:1-4:1的比例混合喷至裁剪好的结合垫上，喷液量4-5μl/cm，在37℃烘箱里干燥12-24h；7）硝酸纤维素膜划线处理：用喷金划膜仪在硝酸纤维素膜上均按1μl/cm将c、t线包被溶液划线，划线完成后将nc膜在37℃烘箱里干燥12-24h；
8）试纸条制备：在温度18～28℃，湿度小于30%的环境下，取pvc底板，在pvc底板的一面顺次相互搭接地粘附样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫；用裁剪机将贴好的pvc底板切成宽度≥2.5mm的试纸条。10.一种新型冠状病毒igm、igg抗体的试剂卡的制备：取试纸条装入检测卡壳卡底卡位处，卡盖的加样孔对准样品垫，观察窗对准检测线及质控线，卡盖和卡底组装成试剂卡，即可。

技术总结
本发明涉及一种联合检测新型冠状病毒（SARS-CoV-2）IgM、IgG抗体的检测试纸条，由PVC底板、样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫粘贴构成；本发明的胶体金层析法检测新型冠状病毒抗体的试剂，能够在10分钟内判断结果，从而及早预防疫情扩散。及早预防疫情扩散。及早预防疫情扩散。


技术研发人员：周卫明 陈静仪 杜丽丽 汪艳涛
受保护的技术使用者：广州市微米生物科技有限公司
技术研发日：2020.05.06
技术公布日：2021/11/8