一种陈皮传统加工中采用桑根皮减少黄曲霉毒素B1方法与流程

一种陈皮传统加工中采用桑根皮减少黄曲霉毒素b1方法
技术领域
1.本发明涉及陈皮加工技术领域，特别是涉及一种陈皮传统加工中采用桑根皮减少黄曲霉毒素 b1方法。


背景技术：

2.黄曲霉毒素是一种毒性极强的剧毒物质，也分为多个种类，其中黄曲霉毒素b1的毒性是砒霜的68倍，是氰化钾的10倍，对肝脏的破坏性极强，是诱发肝癌的主要物质之一。
3.对于陈皮来说，特别是南方的陈皮，受潮发霉是常见的事情。发霉的陈皮跟发霉的水果一样，也会在黄曲霉菌的作用下，导致黄曲霉毒素的产生。一旦发霉的陈皮都不建议再食用，不然会引起腹泻、腹痛、头晕、恶心、呕吐等身体不适感。
4.因此，如何降低陈皮中黄曲霉毒素b1的含量具有重要意义。


技术实现要素：

5.本发明主要解决的技术问题是提供一种陈皮传统加工中采用桑根皮减少黄曲霉毒素 b1方法，通过桑根皮红糖混合液或桑根皮食盐混合液的处理能够显著降低陈皮中的黄曲霉毒素b1的含量。
6.为解决上述技术问题，本发明采用的一个技术方案是：提供一种陈皮传统加工中采用桑根皮减少黄曲霉毒素b1方法，包括如下步骤：a、将半干生陈皮浸渍在桑根皮混合液中，然后漂洗并脱水晒干，在干燥通风处贮存一年，制得一年生陈皮；b、将一年生陈皮浸渍在桑根皮混合液中，然后漂洗并脱水晒干，在干燥通风处再贮存一年，制得两年生陈皮；c、将两年生陈皮在干燥通风处再贮存一年，制得三年生陈皮；d、将三年生陈皮在干燥通风处再贮存一年，制得四年生陈皮。
7.在本发明一个较佳实施例中，所述半干生陈皮的制备步骤包括：1）、选用新鲜黄色甜橙或香橙，用刨刀刨下橙皮最外层，剥下的小皮为片状圆形；2）、将剥下的小皮晒干或者低温烘干制得半干生陈皮，控制其含水率为30.1
‑
35.9%。
8.在本发明一个较佳实施例中，桑根皮混合液为为桑根皮红糖混合液、桑根皮食盐混合液或桑根皮与红糖和食盐的混合液。
9.在本发明一个较佳实施例中，所述桑根皮红糖混合液的制备步骤包括：1）、称取桑树树龄3年以上的桑根皮，用自来水浸泡1
‑
2h，得桑根皮提取液，其中自来水与桑根皮的重量比为1:1
‑
1:3，提取次数1
‑
3次；2）、将提取1
‑
3次的桑根皮提取液合并，用不锈钢锅将合并后的桑根皮提取液煮沸，煮沸时间为1.5~3h；3）、向煮沸后的桑根皮提取液中添加红糖，其质量浓度为1.1
‑
3.5%，制作成桑根皮
红糖混合液，然后再煮沸0.5~2h后，过滤取汁，得到桑根皮红糖混合液。
10.在本发明一个较佳实施例中，所述桑根皮食盐混合液的制备步骤包括：1）、称取桑树龄3年以上的桑根皮，用自来水浸泡1
‑
2h，得桑根皮提取液，其中自来水与桑根皮的重量比为1:1
‑
1:3，提取次数1
‑
3次；2）、将提取1
‑
3次的桑根皮提取液合并，用不锈钢锅将合并后的桑根皮提取液煮沸，煮沸时间为1.5
‑
3h；3）、向煮沸后的桑根皮提取液中添加食盐，其质量浓度为18
‑
22%，制作成桑根皮食盐混合液，然后再煮沸0.5
‑
2h后，过滤取汁，得到桑根皮食盐混合液。
11.在本发明一个较佳实施例中，半干生陈皮和一年生陈皮与相应的桑根皮混合液的重量比为1.5:1
‑
4:1。
12.在本发明一个较佳实施例中，半干生陈皮和一年生陈皮与相应的桑根皮混合液的重量比为2:1。
13.在本发明一个较佳实施例中，半干生陈皮和一年生陈皮与相应的桑根皮混合液的浸渍时间为36
‑
48h，漂洗时间为3
‑
12h。
14.在本发明一个较佳实施例中，不同年份陈皮在桑根皮混合液中浸泡后脱水晒干，控制含水率为11.5
‑
13.6%。
15.本发明的有益效果是：本发明陈皮传统加工中采用桑根皮减少黄曲霉毒素 b1方法通过桑根皮红糖混合液或桑根皮食盐混合液的处理能够显著降低陈皮中的黄曲霉毒素b1的含量。
附图说明
16.为了更清楚地说明本发明实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图，其中：图1是本发明中桑根皮的不同混合液处理的各龄陈皮黄曲霉毒素b1含量对比的柱状图；图2是本发明中桑根皮的不同混合液处理的各龄陈皮黄曲霉毒素b1降低效果比较的柱状图。
具体实施方式
17.下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。
18.请参阅图1至图2，本发明实施例包括：实施例一采用桑根皮红糖混合液处理半年生陈皮得到一年生陈皮，具体步骤如下：1、制备半干生陈皮
选用新鲜黄色甜橙或香橙，用刨刀刨下橙皮最外层，剥下的小皮为片状圆形；将剥下的小皮晒干或者低温烘干制得半干生陈皮，控制其含水率为30.1
‑
35.9%。
19.2、制备桑根皮红糖混合液称取桑树龄3年以上的桑根皮，用自来水浸泡1.2h，得桑根皮提取液，其中自来水与桑根皮的重量比为1:1，提取次数1
‑
3次；将提取1
‑
3次的桑根皮提取液合并，用不锈钢锅将合并后的桑根皮提取液煮沸，煮沸时间为1.8h；向煮沸后的桑根皮提取液中添加1.5%红糖，制作成桑根皮红糖混合液，然后再煮沸0.5h后，过滤取汁，得到桑根皮红糖混合液。
20.3、制备具有一年生陈皮将半干生陈皮浸渍在上述桑根皮红糖混合液中，半干生陈皮与桑根皮红糖混合液的重量比为2:1，放入缸内浸渍，经过36h后捞出陈皮，然后立即在自来水中漂洗，漂洗时间为6h，将漂洗过的陈皮沥干水分，用脱水机脱水，在太阳下晒干至含水率为12.1%，然后用食品级塑料袋封装，置于干燥避光通风室内贮存一年，制得一年生陈皮。
21.实施例二采用桑根皮食盐混合液处理一年生陈皮得到两年生陈皮，具体步骤如下：1、制备桑根皮食盐混合液称取桑树龄3年以上的桑根皮，用自来水浸泡1.5h，得桑根皮提取液，其中自来水与桑根皮的重量比为1:1.5，提取次数1
‑
3次；将提取1
‑
3次的桑根皮提取液合并，用不锈钢锅将合并后的桑根皮提取液煮沸，煮沸时间为2h；向煮沸后的桑根皮提取液中添加20%食盐，制作成桑根皮食盐混合液，然后再煮沸1h后，过滤取汁，得到桑根皮食盐混合液。
22.2、制备两年生陈皮将一年生陈皮浸渍在上述桑根皮食盐混合液中，一年生陈皮与桑根皮食盐混合液的重量比为2.5:1，放入缸内浸渍，经过40h后捞出陈皮，然后立即在自来水中漂洗，漂洗时间为8h，将漂洗过的陈皮沥干水分，用脱水机脱水，在太阳下晒干至含水率为12.5%，然后用食品级塑料袋封装，置于干燥避光通风室内贮存一年，制得两年生陈皮。
23.实施例三将两年生陈皮置于干燥避光通风室内贮存一年，制得三年生陈皮。
24.实施例四将三年生陈皮置于干燥避光通风室内贮存一年，制得四年生陈皮。
25.取一年生陈皮、两年生陈皮、三年生陈皮和四年生陈皮样品适量，低温下粉碎，过50目筛，然后用塑料自封袋包装，保证每袋样品约70g，进行黄曲霉毒素 b1检测，检测方法为：一、在一年生陈皮、两年生陈皮、三年生陈皮和四年生陈皮的自封袋包装上对样品进行标记描述，分别即为：样品一、样品二、样品三和样品四，每袋样品约70g；
二、参考2020年版《中华人民共和国药典》的2351通则中真菌毒素测定法中黄曲霉毒素测定法第三法（酶联免疫法）；三、检测基本信息检测原理：采用固相直接竞争性酶联免疫原理，制作成聚苯乙烯微孔板，微孔中包被有对黄曲霉毒素(aflatoxin，af）b1具有高亲和力的抗体，它可与黄曲霉毒素的四种亚型发生交叉反应。
26.四、利用70%的甲醇分别提取样品一、样品二、样品三和样品四中的黄曲霉毒素 b1，然后把提取的试样和辣根过氧化物酶hrp标记的黄曲霉毒素 b1混匀并加入对应的孔检测，酶标记毒素与标准品或者样品中黄曲霉毒素竞争与包被在微孔底部的抗体结合。
27.孵育一段时间后，倒出孔里的液体，清洗后加入显色底物，在酶的作用下孔里将会出现蓝色。显色颜色的深浅与结合物的量成正比例的关系，与标准品或样品中afm的量成反比例关系。
28.所以，标准品或样品中的afm浓度越高，显色的蓝色将会越浅。加入酸，终止反应，底物颜色由蓝色变为棕黄色。
29.微孔板放进酶标仪里，在450nm读取吸光度od值，样品的吸光度值与试剂盒中标准od值相比较，相对应得出结果。
30.检测过程采用美国helica公司黄曲霉毒素b1检测试剂盒。
31.检测步骤如下：
①
使用前将试剂拿到室温：准确称取15 g样品于120 ml离心管中，加入3 g氯化钠及75 ml甲醇
‑
水溶液（7:3，v/v），12000r/min搅拌速度下均质2 min，离心5 min（离心转速4000 r/min）；准确量取15 ml上层提取液于50 ml容量瓶中，用水定容，取30 ml至50 ml离心管中，离心10 min（离心转速4000 r/min），后准确移取20 ml上清液至80 ml玻璃上样管，待净化用。
32.②
取出相应数量的稀释孔置于微孔架上（每个标准品或待测样品对应一个稀释孔），再取出等量包被抗体的微孔置于另一个微孔架上，向每个稀释孔加入200μl黄曲霉素bi酶标物。
33.③
向每个稀释孔中加入100ul标准品或样品( 每次移取均使用新的枪头)，吸打混均，至少3次，注：全程记录每个标准品和样品的位置。
34.④
从每个稀释孔中移取 100ul混合液，转移至相应的抗体包被微孔中（每次移取均使用新的枪头），室温孵育15分钟。
35.⑤
孵育完成后，将微孔中内容物倒入废液缸，采用蒸馏水或去离子水洗涤微孔，共洗涤4次，然后拍打微孔板，去除残留的洗涤液。
36.⑥
根据样品和标准品个数，计算所需底物试剂的体积（1ml/条或 120μl/孔），将所需底物置于单独容器中，然后移取100ul至每个微孔中，温室孵育5分钟。
37.⑦
计算所需终止液的体积（1ml条或120μl/孔），将所需终止液置于单独容器内，然后按照与底物相同的添加顺序和速度向每个孔中添加100μl终止液。
38.⑧
使用酶标仪在 450nm下读取并记录每个微孔的od值：使用原有的od值或实验获得的od值与标准曲线中黄曲霉毒素浓度为0时od值的百分比值与标准中黄曲霉毒素含量建立剂量效应曲线，通过在标准品曲线中添加新数值计算
被测物质中黄曲霉毒素的浓度。
39.表1桑根皮的不同混合液处理的各龄陈皮黄曲霉毒素b1含量实测（μg/kg）表2 桑根皮的不同混合液处理的各龄陈皮黄曲霉毒素b1减少率（%）
由表1可知：经过桑根皮混合液两次处理的各年生陈皮中黄曲霉毒素b1含量，低于《中华人民共和国药典》（2020年版）中药材的规定陈皮aftb1的 5μg/kg限值2个数量级；由表2可知：经过桑根皮混合液两次处理的各年生陈皮中黄曲霉毒素b1降低率均达到99%以上。
40.综上所述，通过桑根皮红糖食盐混合液的处理，能够显著降低陈皮中的黄曲霉毒素b1的含量，并具有很好的现实意义。
41.本发明的陈皮传统加工中采用桑根皮减少黄曲霉毒素 b1方法的有益效果是：通过桑根皮红糖食盐混合液的处理能够显著降低陈皮中的黄曲霉毒素b1的含量。
42.以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其它相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。