人源化和变体TGF-β3特异性抗体及其方法和用途与流程

技术特征：
1.分离的抗体或其活性片段，所述分离的抗体或其活性片段识别人和小鼠转化生长因子β3(tgf
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β3)并且中和tgf
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β3的活性，其中所述抗体或片段包含重链可变区序列，所述重链可变区序列包含：(a)cdr1序列sswih(seq id no:1)、cdr2序列riypgdgdtdysekfq(seq id no:34)，和cdr3序列rmittqaaldy(seq id no:35)或arrmittqaal(seq id no:30)；(b)cdr1序列sswih(seq id no:1)、cdr2序列riypgdgdtdysekfq(seq id no:34)和cdr3序列rmittqaaldy(seq id no:35)；或(c)cdr1序列gytfssswih(seq id no:28)、cdr2序列wigriypgdgdtdysekfq(seq id no:29)和cdr3序列arrmittqaal(seq id no:30)。2.根据权利要求1所述的分离的抗体或片段，所述分离的抗体或片段是进一步包含轻链可变区的抗体或片段，所述轻链可变区包含：(a)cdr1序列kasqsvinava(seq id no:4)、cdr2序列yasnryt(seq id no:5)和cdr3序列qqdysspy(seq id no:33)；(b)cdr1序列kasqsvinava(seq id no:4)、cdr2序列yasnryt(seq id no:5)，和cdr3序列qqdysspy(seq id no:33)或qqdysspyt(seq id no:6)；或(c)cdr1序列kasqsvinavawy(seq id no:31)、cdr2序列lliyyasnryt(seq id no:32)，和cdr3序列qqdysspy(seq id no:33)或qqdysspyt(seq id no:6)。3.根据权利要求1或2所述的分离的抗体或片段，所述分离的抗体或片段不与tgf
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β1或tgf
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β2反应。4.根据权利要求1或2所述的分离的抗体或片段，所述分离的抗体或片段包含重链可变区序列lcr1901_vh_1g10m(seq id no:18)或其变体，所述变体与重链可变区序列lcr1901_vh_1g10m(seq id no:18)具有至少90％氨基酸同一性或包含图7中的一个或多个重链cdr区中的1至3个氨基酸取代，其中所述变体保留tgf
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β3反应性和中和作用。5.根据权利要求1或2所述的分离的抗体或片段，所述分离的抗体或片段包含重链可变区序列lcr1901_vh_1g10m_03(k)(seq id no:19)或其变体，所述变体与重链可变区序列lcr1901_vh_1g10m_03(k)(seq id no:19)具有至少90％氨基酸同一性或包含图7中的一个或多个重链cdr区中的1至3个氨基酸取代，其中所述变体保留tgf
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β3反应性和中和作用。6.根据权利要求1或2所述的分离的抗体或片段，所述分离的抗体或片段包含重链可变区序列lcr1901_vh_1g10m_02(j)(seq id no:36)或其变体，所述变体与重链可变区序列lcr1901_vh_1g10m_02(j)(seq id no:36)具有至少90％氨基酸同一性或包含图7中的一个或多个重链cdr区中的1至3个氨基酸取代，其中所述变体保留tgf
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β3反应性和中和作用。7.根据权利要求1或2所述的分离的抗体或片段，所述分离的抗体或片段包含轻链可变区序列lcr1901_vk_glv1_03(f)(seq id no:22)或其变体，所述变体与轻链可变区序列lcr1901_vk_glv1_03(f)(seq id no:22)具有至少90％氨基酸同一性或包含图8中的一个或多个重链cdr区中的1至3个氨基酸取代，其中所述变体保留tgf
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β3反应性和中和作用。8.根据权利要求1或2所述的分离的抗体或片段，所述分离的抗体或片段包含轻链可变区序列lcr1901_vk_glv1_05(h)(seq id no:23)或其变体，所述变体与轻链可变区序列lcr1901_vk_glv1_05(h)(seq id no:23)具有至少90％氨基酸同一性或包含图8中的一个或多个重链cdr区中的1至3个氨基酸取代，其中所述变体保留tgf
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β3反应性和中和作用。
9.根据权利要求1所述的分离的抗体，所述分离的抗体选自：(a)抗体1901
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1c，所述抗体1901
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1c包含重链序列lcr1901_vh_1g10m(seq id no:18)和轻链序列lcr1901_vk_glv1_03(f)(seq id no:22)；(b)抗体1901
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1a，所述抗体1901
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1a包含重链序列lcr1901_vh_1g10m(seq id no:18)和轻链序列lcr1901_vk_glv1_05(h)(seq id no:23)；(c)抗体1901
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1d，所述抗体1901
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1d包含重链序列lcr1901_vh_1g10m_03(k)(seq id no:19)和轻链序列lcr1901_vk_glv1_03(f)(seq id no:22)；和(d)抗体1901
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1b，所述抗体1901
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1b包含重链序列lcr1901_vh_1g10m_03(k)(seq id no:19)和轻链序列lcr1901_vk_glv1_05(h)(seq id no:23)。10.根据权利要求1所述的分离的抗体或片段，所述分离的抗体或片段是包含重链可变区和轻链可变区的抗体或抗体片段，所述重链可变区包含cdr1序列gytfssswih(seq id no:28)、cdr2序列wigriypgdgdtdysekfq(seq id no:29)和cdr3序列arrmittqaal(seq id no:30)，所述轻链可变区包含cdr1序列kasqsvinavawy(seq id no:31)、cdr2序列lliyyasnryt(seq id no:32)和cdr3序列qqdysspy(seq id no:33)。11.根据权利要求4至10中任一项所述的分离的抗体或片段，所述分离的抗体或片段不与tgf
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β1或tgf
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β2反应。12.根据权利要求1所述的分离的抗体或片段，所述分离的抗体或片段识别人和小鼠tgf
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β3并且不识别或结合人或小鼠tgf
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β1或tgf
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β2，所述分离的抗体或片段包含重链可变区序列lcr1901_vh_1g10m(seq id no:18)或lcr1901_vh_1g10m_03(k)(seq id no:19)或lcr1901_vh_1g10m_02(j)(seq id no:36)或其变体，所述变体与重链可变区序列lcr1901_vh_1g10m(seq id no:18)或lcr1901_vh_1g10m_03(k)(seq id no:19)或lcr1901_vh_1g10m_02(j)(seq id no:36)具有至少90％氨基酸同一性或包含图7中的一个或多个重链cdr区中的1至3个氨基酸取代，其中所述变体保留tgf
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β3反应性和中和作用并且缺乏tgf
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β1和tgf
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β2反应性。13.根据权利要求12所述的分离的抗体或片段，所述分离的抗体或片段进一步包含轻链可变区，所述轻链可变区包含氨基酸序列lcr1901_vk_glv1_03(f)(seq id no:22)或lcr1901_vk_glv1_05(h)(seq id no:23)或其变体，所述变体与轻链可变区序列lcr1901_vk_glv1_03(f)(seq id no:22)或lcr1901_vk_glv1_05(h)(seq id no:23)具有至少90％氨基酸同一性或包含图8中的一个或多个重链cdr区中的1至3个氨基酸取代，其中所述变体保留tgf
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β3反应性和中和作用并且缺乏tgf
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β1和tgf
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β2反应性。14.根据权利要求1至13中任一项所述的分离的抗体或片段，所述分离的抗体或片段是人源化或嵌合抗体或其片段。15.根据权利要求1至13中任一项所述的分离的抗体或片段，所述分离的抗体或片段是其中所述分离的抗体是抗体f(ab’)2、scfv片段、结构域抗体、微抗体、双抗体、三抗体或四抗体的形式的抗体或其片段。16.根据权利要求1至13中任一项所述的分离的抗体或片段，所述分离的抗体或片段进一步包含可检测标记或功能性标记。17.根据权利要求16所述的分离的抗体或片段，其中所述可检测标记或功能性标记是共价附接的药物。
18.根据权利要求16所述的分离的抗体或片段，其中所述可检测标记或功能性标记是放射性标记。19.分离的核酸，所述分离的核酸包含编码根据权利要求1至13中任一项所述的抗体或片段的序列。20.制备如权利要求1至13中任一项所限定的抗体或片段的方法，所述方法包括在引起所述抗体或片段的表达的条件下表达根据权利要求19所述的核酸，并且回收所述抗体或片段。21.根据权利要求1至18中任一项所述的抗体或片段，所述抗体或片段用于在治疗或诊断人体或动物体的方法中使用。22.治疗哺乳动物的癌症或预防癌症的复发或转移的方法，所述方法包括向所述哺乳动物施用有效量的如权利要求1至18中任一项所限定的抗体或片段。23.根据权利要求22所述的方法，所述方法包括进一步施用化学治疗剂。24.根据权利要求22或23所述的方法，所述方法包括进一步施用免疫调节剂或免疫调节性药剂。25.根据权利要求22或23所述的方法，所述方法进一步包括放射疗法。26.根据权利要求22或23所述的方法，其中经由瘤内注射进行施用。27.根据权利要求22所述的方法，所述方法包括进一步施用放射疗法。28.根据权利要求22或27所述的方法，所述方法包括进一步施用免疫调节剂或免疫调节性药剂。29.根据权利要求22或24所述的方法，其中经由瘤内注射进行所述抗体或片段或所述免疫调节剂或免疫调节性药剂的施用。30.用于刺激或增强哺乳动物中对疫苗或抗原的免疫反应或免疫调节性药剂或放射疗法的方法，所述方法包括向所述哺乳动物施用有效量的如权利要求1至18中任一项所限定的抗体或片段。31.根据权利要求30所述的方法，所述方法包括进一步施用化学治疗剂。32.根据权利要求30或31所述的方法，所述方法包括进一步施用免疫调节剂或免疫调节性药剂。33.根据权利要求30或31所述的方法，其中经由瘤内注射进行施用。34.用于治疗或减轻哺乳动物的纤维化病症或纤维化疾病的方法，所述方法包括向所述哺乳动物施用有效量的如权利要求1至18中任一项所限定的抗体或片段。35.根据权利要求34所述的方法，所述方法包括进一步施用抗炎剂、免疫抑制剂、免疫反应调节剂、抗氧化剂或抗纤维化药物或药剂中的一种或多种。36.用于诊断或预后其中表达tgf
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β3抗原的癌症的试剂盒，所述试剂盒包含根据权利要求1至18中任一项所述的抗体或片段，任选地具有试剂和/或使用说明书。37.药物组合物，所述药物组合物包含如权利要求1至18中任一项所限定的抗体或片段以及药学上可接受的媒介物、载体或稀释剂。38.免疫学组合物，所述免疫学组合物包含如权利要求1至18中任一项所限定的抗体或片段以及药学上可接受的媒介物、载体或稀释剂，任选地包含佐剂和/或一种或多种抗原、免疫调节性抗体、或针对免疫调节剂的小分子抑制剂。
39.用于治疗人类患者的肿瘤的试剂盒，所述试剂盒包含根据权利要求37所述的药物组合物或根据权利要求38所述的免疫学组合物的药物剂型，和单独的包含额外的抗癌剂的药物剂型，所述额外的抗癌剂选自由以下项组成的组：一种或多种癌症或肿瘤抗原、化学治疗剂、放射免疫治疗剂及其组合。40.用于检测哺乳动物中癌症的存在或确定癌症的预后的方法，其中通过确定tgf
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β3的存在和/或量来测量所述癌症或确定预后，所述方法包括：(a)在允许所述tgf
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β3与所述抗体发生结合的条件下使来自怀疑存在癌症的哺乳动物的生物样品与根据权利要求1至18中任一项所述的抗体或片段接触；以及(b)检测来自所述样品的所述tgf
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β3与所述抗体之间是否已发生结合或确定来自所述样品的所述tgf
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β3与抗体之间已发生的结合的量；其中对结合的检测指示所述样品中癌症的存在，并且结合的量指示所述样品中癌症的预后。41.淋巴样细胞，所述淋巴样细胞经基因工程改造以表达和分泌根据权利要求1至18中任一项所述的抗体或片段。42.根据权利要求41所述的淋巴样细胞，其中所述细胞经进一步工程改造以表达受体。43.根据权利要求42所述的淋巴样细胞，其中所述受体是嵌合抗原受体(car)。44.根据权利要求42所述的淋巴样细胞，其中所述受体是t细胞受体。45.根据权利要求41至44所述的淋巴样细胞，其中所述细胞经进一步工程改造以表达和分泌一种或多种可溶性蛋白质。46.治疗哺乳动物的癌症或预防癌症的复发或转移的方法，所述方法包括向所述哺乳动物施用根据权利要求41至45中任一项所述的经基因工程改造的淋巴样细胞以进行过继细胞疗法(act)。

技术总结
本发明提供了与转化生长因子β3(TOP


技术研发人员：G
受保护的技术使用者：佛多斯大学医学研究中心
技术研发日：2019.11.04
技术公布日：2021/11/4