一种高精密组织芯片的制备方法及应用与流程

技术特征：
1.一种高精密组织芯片的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤一，将组织块用预冷凝胶进行包埋，凝固后根据组织大小进行修剪；步骤二，在修剪后的组织芯片中加入培养基，于37℃、5％co2浓度下培养2～7天，培养过程中每隔2
‑
3天更换一次培养基。2.根据权利要求1所述的一种高精密组织芯片的制备方法，其特征在于：所述凝胶为浓度2～8mg/ml的人源i型胶原溶液与质量百分比为0.1～0.5％的1,4
‑
丁二醇缩水甘油醚溶液交联而成。3.根据权利要求1或2所述的一种高精密组织芯片的制备方法，其特征在于：所述凝胶为浓度4mg/ml的人源i型胶原溶液与质量百分比为0.25％的1,4
‑
丁二醇缩水甘油醚溶液交联而成。4.根据权利要求1所述的一种高精密组织芯片的制备方法，其特征在于：修剪后组织芯片的厚度为250
‑
350μm。5.根据权利要求1所述的一种高精密组织芯片的制备方法，其特征在于：所述培养基包括以下终浓度组分：20
‑
500ng/ml的noggin；20
‑
500ng/ml的r
‑
spondin 1；20
‑
500ng/ml的wnt3a；1
‑
50ng/ml的wnt7a；10
‑
2000nm的a
‑
83
‑
01
‑
hcl；100
‑
1000nm的pd 169316
‑
hcl；1
‑
100μm的ripasudil(k
‑
115)hydrochloride dihydrate；100u/ml的青霉素；0.1mg/ml的链霉素，以上成分溶于dmem/f12培养基中。6.根据权利要求5所述的一种高精密组织芯片的制备方法，其特征在于：所述培养基还包括：1
‑
10mg/ml的osrhsa。7.一种高精密组织芯片，其特征在于：是采用权利要求1～6任意一项所述的制备方法获得。8.权利要求1～6任意一项所述的制备方法获得的高精密组织芯片或者权利要求7所述的高精密组织芯片在免疫功能评价中的应用。9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于：所述高精密组织芯片具体为肿瘤高精密组织芯片。10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：所述应用包括：(1)将肿瘤高精密组织芯片分为实验组及对照组，在实验组中加入40μg/ml的pd1抗体，对照组中加入等体积的培养基，孵育24
‑
96小时；(2)将实验组和对照组的培养基移除，用hbss清洗2次，加入100ul hoechst 33342dye(1：2000)、epcam
‑
fitc(1:20)、pi(1:1000)，充分混匀后放置37℃培养箱中孵育20
‑
30分钟；(3)移除染色试剂，然后加入预热hbss，孵育5
‑
10分钟，移除hbss，重复前述过程2
‑
3次；(4)将染色的肿瘤组织芯片进行高内涵分析设备层扫拍照，分析计算细胞活性。

技术总结
本发明提供一种高精密组织芯片的制备方法及应用，制备方法包括以下步骤：步骤一，将组织块用预冷凝胶进行包埋，凝固后根据组织大小进行修剪；步骤二，在修剪后的组织芯片中加入培养基，于37℃、5％CO2浓度下培养2～7天，培养过程中每隔2


技术研发人员：邱培 朱宇 陈泽新 黄敏
受保护的技术使用者：创芯国际生物科技（广州）有限公司
技术研发日：2021.07.30
技术公布日：2021/10/18