一种抗新冠病毒双特异性纳米抗体及其制备方法和用途与流程

本发明属于生物医药，具体涉及一种抗新冠病毒双特异性纳米抗体及其制备方法和用途。

背景技术：

1、新冠病毒sars-cov-2是单链rna病毒，在传播过程中突变衍生成多种流行突变株。例如lambda、delta、omicron、xbb以及jn.1突变株。突变株的出现造成了中和抗体的免疫逃逸，具有威胁人民生命财产安全的潜在风险。

2、目前以rbd结构域为靶点的绝大多数被批准临床应用的单克隆抗体药物例如ly-cov016+ly-cov555 (bamlanivilab+etesevimab); s309 (sotrovimab)都被以xbb为代表的变异株逃逸，包括此前已初步进入国内市场的阿斯利康公司evusheld（“恩适得”）预防抗体药物。由于此类新突变株的流行，美国fda也取消了礼来公司bebtelovimab（贝特洛韦单抗）的使用授权。因此，开发广泛中和新冠病毒突变株的中和抗体是应对新冠病毒侵袭传播的有效手段。

3、与单克隆抗体相比，纳米抗体具有体积小（仅有10-15kda），免疫原性低，表达量高可大规模生产，稳定性好，耐高温，耐酸碱易于储存和运输，可以设计成多价纳米抗体，提高治疗效果等诸多优越特点。

4、综上所述，发明一种具备广谱的中和能力，生产成低本，耐热性好，可常温运输储存的抗新冠病毒双特异性纳米抗体，对于sars-cov-2预防和治疗具有良好的临床应用前景。

技术实现思路

1、为了解决现有技术存在的上述问题，本发明的目的在于提供一种抗新冠病毒双特异性纳米抗体及其制备方法和用途。

2、为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

3、本发明提供了一种抗新冠病毒纳米抗体，所述抗新冠病毒纳米抗体的互补决定区由cdr1、cdr2和cdr3组成，所述cdr1的氨基酸序列如seq id no .1、seq id no .4或seq idno .7所示，cdr2的氨基酸序列如seqid no .2、seq id no .5或seq id no .8所示，cdr3的氨基酸序列如seq id no .3、seq id no .6或seq id no .9所示。

4、进一步地，所述抗新冠病毒纳米抗体的cdr1、cdr2和cdr3的氨基酸序列分别如seqid no .1、seq id no .2和seq id no .3所示。

5、进一步地，所述抗新冠病毒纳米抗体的cdr1、cdr2和cdr3的氨基酸序列分别如seqid no .4、seq id no .5和seq id no .6所示。

6、进一步地，所述抗新冠病毒纳米抗体的cdr1、cdr2和cdr3的氨基酸序列分别如seqid no .7、seq id no .8和seq id no .9所示。

7、进一步地，所述抗新冠病毒纳米抗体的氨基酸序列如seq id no .15、seq id no.16或seq id no .17所示。

8、本发明还提供了一种表达抗新冠病毒纳米抗体的基因，所述基因的核苷酸序列如seq id no .10、seq id no .11或seq id no .12所示。

9、本发明还提供了一种抗新冠病毒双特异性纳米抗体，所述抗新冠病毒双特异性纳米抗体的氨基酸序列如seq id no .18或seq id no .19所示。

10、本发明还提供了一种表达上述抗新冠病毒双特异性纳米抗体的基因，所述基因的核苷酸序列如seq id no .13或seq id no .14所示。

11、本发明还提供了一种重组载体，所述重组载体包括如seq id no .10、seq id no.11、seq id no .12、seq id no .13或seq id no .14所示的核苷酸序列。

12、本发明还提供了一种重组细胞，所述重组细胞包括如上所述的重组载体。

13、本发明取得了以下有益效果：

14、本发明先制备了以sars-cov-2 lambda毒株s蛋白rbd结构域作为抗原的抗新冠病毒亲本纳米抗体，进一步构建了可识别不同抗原表位的双特异性纳米抗体。本发明纳米抗体可以在原核系统中高效表达，易于工业化制备生产，理化性质稳定，耐热性好，可常温运输和贮存，表达流程标准可控，降低生产成本，分子量小，可穿过生理屏障，识别抗原隐藏表位。本发明提供的可识别不同抗原表位的双特异性抗新冠病毒纳米抗体可有效解决新冠变异株逃逸的问题，具备潜在广谱的中和能力，具备开发成鼻喷剂的潜力，在预防和治疗新冠病毒感染具有重要应用价值。

15、显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。

16、以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

1.一种抗新冠病毒纳米抗体，其特征在于：所述抗新冠病毒纳米抗体的互补决定区由cdr1、cdr2和cdr3组成，所述cdr1的氨基酸序列如seq id no .1、seq id no .4或seq idno .7所示，cdr2的氨基酸序列如seq id no .2、seq id no .5或seq id no .8所示，cdr3的氨基酸序列如seq id no .3、seq id no .6或seq id no .9所示。

2.根据权利要求1所述抗新冠病毒纳米抗体，其特征在于：所述抗新冠病毒纳米抗体的cdr1、cdr2和cdr3的氨基酸序列分别如seq id no .1、seq id no .2和seq id no .3所示。

3.根据权利要求1所述抗新冠病毒纳米抗体，其特征在于：所述抗新冠病毒纳米抗体的cdr1、cdr2和cdr3的氨基酸序列分别如seq id no .4、seq id no .5和seq id no .6所示。

4.根据权利要求1所述抗新冠病毒纳米抗体，其特征在于：所述抗新冠病毒纳米抗体的cdr1、cdr2和cdr3的氨基酸序列分别如seq id no .7、seq id no .8和seq id no .9所示。

5.根据权利要求1所述抗新冠病毒纳米抗体，其特征在于：所述抗新冠病毒纳米抗体的氨基酸序列如seq id no .15、seq id no .16或seq id no .17所示。

6.一种表达抗新冠病毒纳米抗体的基因，其特征在于：所述基因的核苷酸序列如seqid no .10、seq id no .11或seq id no .12所示。

7.一种抗新冠病毒双特异性纳米抗体，其特征在于：所述抗新冠病毒双特异性纳米抗体的氨基酸序列如seq id no .18或seq id no .19所示。

8.一种表达权利要求7所述抗新冠病毒双特异性纳米抗体的基因，其特征在于：所述基因的核苷酸序列如seq id no .13或seq id no .14所示。

9.一种重组载体，其特征在于：所述重组载体包括如seq id no .10、seq id no .11、seq id no .12、seq id no .13或seq id no .14所示的核苷酸序列。

10.一种重组细胞，其特征在于：所述重组细胞包括如权利要求9所述的重组载体。