用于治疗葡萄糖依赖性促胰岛素肽依赖型库欣综合征的组合物及方法与流程

本发明涉及用于治疗和改善葡萄糖依赖性促胰岛素肽（gip）依赖型库欣综合征的组合物及方法。

背景技术：

1、在原发性肾上腺库欣综合征（cs）患者中，无论其病因是单侧肾上腺肿瘤还是双侧肾上腺增生，过量的皮质醇分泌都会导致下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素（crh）及垂体促肾上腺皮质激素（acth）的分泌逐渐受到抑制。acth是肾上腺皮质束状带细胞中类固醇生成的mc2r-gsα-camp-蛋白激酶a信号通路的主要刺激因子，然而皮质醇分泌如何在缺乏acth的情况下得以维持的机制，在过去二十年间仍尚不明确，直至近年多项综述研究中明确了若干细胞机制及遗传变异。

2、1971年，robert l. ney首次提出了肾上腺异位膜受体表达的概念。southerland通过证明肾上腺素能够激活腺苷酸环化酶（ac）产生camp，进而刺激磷酸化酶并促进肝脏释放葡萄糖，从而确定了g蛋白偶联受体（gpcrs）的初始作用机制。随后，grant w. liddle建议ney研究acth是否通过调控肾上腺皮质中的camp生成来调节类固醇合成。在正常大鼠肾上腺细胞膜制备物中，仅acth能够刺激ac并促进camp生成；然而，在产生皮质酮的大鼠肾上腺皮质癌494细胞膜中，除acth外，肾上腺素、去甲肾上腺素和促甲状腺激素（tsh）也能刺激camp生成。进一步研究表明，该肿瘤中的ac还可被卵泡刺激素（fsh）、黄体生成素（lh）刺激，并被前列腺素e1（pge1）轻微刺激，而胰高血糖素、胰岛素、加压素、甲状旁腺激素（pth）及降钙素则无此作用。这些非法激素均未产生叠加或协同效应，表明该肿瘤存在多种特异性受体一起激活同一ac。在大鼠肾上腺皮质癌494细胞膜中观察到高亲和力β-肾上腺素能结合位点及ac刺激，而正常肾上腺膜中则未发现。在从cs患者体内切除的一例雄激素分泌肿瘤中，tsh和acth可诱导ac刺激，而肾上腺素、lh或胰高血糖素则无此作用；在三例皮质醇分泌腺瘤中的一例中，ac仅被tsh和acth能轻微刺激。作者总结道：“目前这些异常肿瘤反应的生理意义尚不明确，其与肿瘤功能的关系仍有待推测。然而，在某些病例中，内分泌肿瘤的‘自主性’行为可能并非表面那样真实，而是由于肿瘤受到非亲本腺体适当激素之外的刺激所致。”

3、1978年，芝加哥的leslie j degroot博士报告了一例继发于肾上腺腺瘤的cs女性患者：其晨间血浆皮质醇水平较低，白天逐渐升高，然而，并未研究这种变化与进食之间的关系；回顾来看，她的“持续性昼夜皮质醇分泌节律”模式很可能继发于食物依赖型cs。

4、pavel hamet首次在一名41岁男性cs患者中鉴定出“食物依赖性”皮质醇产生——该患者继发于单侧皮质醇分泌腺瘤及周期性激素生成。其晨间或空腹时血浆皮质醇水平始终偏低，但餐后升至高水平；高剂量口服地塞米松也无法抑制食物引起的血浆皮质醇升高。切除的肾上腺腺瘤膜制备物中的腺苷酸环化酶活性被acth刺激27%，被加压素刺激62%，但不受fsh、胰高血糖素或ang-ii的刺激；该病例未对各种胃肠道激素的作用进行检测。

5、一名48岁的法裔加拿大女性患者患有原发性双侧大结节性肾上腺增生症（pbmah），在过去2至3年间出现明显的cs症状。值得注意的是，其晨间空腹血浆皮质醇水平较低，日间波动幅度较大，而血浆acth始终被抑制。我们证明了进食与餐后皮质醇峰值之间的相关性，这与此前的食物依赖性皮质醇分泌性单侧腺瘤病例相似。胃肠道激素的核心作用的鉴定源于观察到口服75克葡萄糖或富含脂质/蛋白质的餐食均可刺激血浆皮质醇，而静脉注射葡萄糖则不能；此外，生长抑素预处理可抑制口服葡萄糖对皮质醇的刺激作用。对各类胃肠道激素促分泌素的综述表明，仅gip和胰高血糖素样肽-i在口服葡萄糖和脂质受到同等程度刺激，蛋白质刺激作用较弱。在不同试验餐中，血浆皮质醇水平与血浆gip浓度相关。体内输注gip以重现其生理餐后浓度时，可刺激pbmah患者的皮质醇生成，但对四名健康对照者无此效果；该患者血浆皮质醇受acth给药刺激，但不受crh、胰高血糖素、胰岛素诱导的低血糖、五肽胃泌素或加压素刺激。肾上腺组织中存在功能性异位gip受体（gipr）的假说得到了体内注射[123i]-gip后的肾上腺显像结果的支持。对双侧切除的分散pbmah肾上腺细胞进行体外孵育证实：该患者的细胞存在gip介导的皮质醇分泌，而正常成人或胎儿肾上腺细胞、或其他分泌皮质醇或醛固酮的腺瘤中则没有；在与促胰液素、胆囊收缩素、血管活性肠肽（vip）、p物质、蛙皮素、降钙素基因相关肽、胰高血糖素、加压素、心房钠尿肽（anp）、促肾上腺皮质激素释放激素（crh）、促甲状腺素释放激素（trh）、生长激素释放激素（ghrh）、神经降压素或神经激肽a进行体外孵育后，患者的肾上腺细胞没有皮质醇产生刺激。由此得出结论：食物依赖性皮质醇分泌源于肾上腺细胞对gip生理分泌的异常反应；肾上腺细胞上的异位gipr表达可能是这种新型cs病因的原因，但因该受体尚未被克隆，尚无法证实。

6、大鼠和人源gipr cdna的克隆使得能够研究此类患者组织中的gipr表达。原位杂交显示，一例gip依赖性cs患者的单侧肾上腺腺瘤细胞中存在丰富的gipr mrna；该信号在非食物依赖性cs患者的腺瘤中不存在，但未在正常肾上腺皮质中检查到。通过rt-pcr扩增，与正常人胰腺、正常成人或胎儿肾上腺皮质或非gip依赖性肾上腺cs组织相比，在两例gip依赖性cs的指标病例的肾上腺腺瘤和pbmah组织中证实了明显的肾上腺gipr过表达。在至少35个循环的扩增和用标记的cdna杂交后，在正常胎儿和成人肾上腺组织中检测到少量gipr mrna，但该mrna未有效偶联至类固醇生成。对正常和gip依赖性肾上腺全长cdna的序列分析显示，受影响的肾上腺组织中gipr无突变；在正常肾上腺和gip依赖性肿瘤中鉴定出缺少外显子4和9的类似比例的异构体。chabre等人通过逆转录-聚合酶链反应（rt-pcr）和测序证实了gip依赖性腺瘤中存在相同的过表达gipr异构体；在肿瘤附近的萎缩性肾上腺皮质或正常成人肾上腺中未检测到gipr条带。与正常组织相比，gip依赖性腺瘤中acth受体（mc2r）的表达水平较低。

7、研究已证实其他组织能异位过表达gip受体。umahara于2003年首次提出，在部分肢端肥大症患者中，在口服葡萄糖后会出现生长激素（gh）水平反常升高，这些患者表达功能性gip/ gipr轴。在4例肢端肥大症患者中，有2例在接受口服（而非静脉注射）葡萄糖负荷后引起血浆gh水平升高；而仅对口服葡萄糖产生反常反应的患者通过静脉输注gip才能重现类似的升高。切除垂体肿瘤后这两种反应均消失。后续两项独立研究在大约30%生长激素分泌型垂体腺瘤（gh-pas）中鉴定出较高的gipr表达水平，这与口服葡萄糖后gh的反常升高相关，并始终仅限于gnas1基因突变阴性的病例。在gip刺激后，表达gipr的生长激素瘤来源的原代培养物中，大部分也能诱导细胞分泌gh。在诊断时，gipr阳性患者（占32%）中男性比例显著更高，且血清igf-1水平更高。gh反常升高与高催乳素血症可能性较低、肿瘤表型较温和（体积较小、侵袭性较弱的肿瘤）以及对第一代生长抑素类似物（ssa）治疗反应更佳之间存在显著关联。

8、神经内分泌肿瘤是一类异质性肿瘤，其起源部位、激素分泌及临床表现均存在差异。神经内分泌肿瘤普遍表现出多种激素受体的过度表达，这种肿瘤表型使其在诊断、成像和治疗方面非常有用。在这些受体中，生长抑素受体（sstr）已成为广泛靶点，在神经内分泌肿瘤中的利用特异性配体来定位原发性病灶和转移性病灶，并使约50%患者的症状得到改善、肿瘤缩小或疾病稳定。目前葡萄糖依赖性促胰岛素肽受体（glp1r）在net中的研究越来越多，尤其针对表达很少或不表达sstr和/或glp1r的肿瘤（如胰岛素瘤和未分化型net）。waser等人通过体外受体放射自显影技术对260例人类肿瘤样本进行检查，报告称在多种主要为sstr阴性的胃肠道及支气管net中，gipr呈均匀强分布，其肿瘤与正常组织比值（t/n比值）较高。另外两项研究证实了gipr在胰腺型、小肠型（si-）、胃及十二指肠型（gd-）net中的表达上调；74%的小肠神经内分泌肿瘤（sinet）中观察到gipr的高甲基化，且gipr表达升高与肝转移的发生呈正相关。近80%的甲状腺髓样癌病例（尤其是较大的散发性晚期病例）也观察到类似的gipr高t/n比值；体外gip与降钙素分泌偶联。

9、sglt的亚型包括主要于小肠中表达sglt1以及于肾近端小管中表达sglt2。它们分别负责小肠中的葡萄糖吸收以及近端小管中的葡萄糖重吸收。美国专利号7,635,684（全文通过引用并入本文）描述了对人sglt1具有抑制活性的化合物；美国专利号9,200,025（全文通过引用并入本文）描述了sglt1的强效抑制剂，特别是针对sglt1的选择性抑制剂以及全身暴露并在肠道局部起作用的特定抑制剂；美国专利号11,596,644的公开内容通过体外放射性标记的甲基-α-d-吡喃葡萄糖苷（α-mg）的细胞摄取来评估，证实了米扎格列净对sglt1相较于sglt2具有选择性。

10、米扎格列净（3-(3-{4-[3-(β-d-吡喃葡萄糖氧基)-5-异丙基-1h-吡唑-4-甲基]-3-甲基苯氧基}丙基氨基)-2,2-二甲基丙酰胺）是由kissei pharmaceutical co., ltd开发的一种sglt1抑制剂。目前尚未有sglt1抑制剂获得批准。米扎格列净通过选择性抑制sglt1，抑制胃肠道抑制肽1（gip-1）—一种已知的胰岛素促分泌素—从消化道的分泌。当未被吸收的葡萄糖量较少时，出现胃肠道症状的可能性较低。

11、由于小肠中sglt1活性的增强被认为会促进胰岛素促分泌素的生成，因此一直需要开发对人类sglt1具有强效抑制活性的药剂，用于预防或治疗糖尿病。例如参见美国专利号8,324,176。米扎格列净的结晶化合物已被描述用于预防或治疗与高血糖相关的疾病，如糖尿病、葡萄糖耐量异常、空腹血糖异常、糖尿病并发症或肥胖症，以及与血半乳糖水平升高相关的疾病，如半乳糖血症。美国专利号8,399,418描述了米扎格列净的单癸二酸盐；美国专利号8,354,382描述了米扎格列净的半富马酸脱水盐；而美国专利号11,596,644描述了米扎格列净在治疗减重手术后低血糖的应用。

技术实现思路

1、根据本发明原理及示例性实施方式所述的方法与组合物，可用于治疗有需要的受试者的gip依赖型库欣综合征。

2、根据本发明的一个方面，一种治疗受试者gip依赖性库欣综合征的方法，包括向受试者口服给药有效量的式i或式ii所示的sglt1抑制剂化合物或有效量的式i或式ii所示sglt1抑制剂化合物的药学上可接受盐。

3、其中式i化合物为：

4、

5、式i；

6、其中

7、r1为h或任选取代的c1-6烷基；

8、q与t中的一者为基团：

9、或，

10、而另一者为c1-6烷基、卤代(c1-6烷基)、c1-6烷氧基取代的(c1-6烷基)或c3-7环烷基；

11、r2为氢原子、卤素原子、羟基、c1-6烷基、c1-6烷氧基、c1-6烷硫基、卤代(c1-6烷基)、卤代(c1-6烷氧基)、c1-6烷氧基取代的(c1-6烷氧基)、c3-7环烷基取代的(c2-6烷氧基)或-a-ra，其中a为单键、氧原子、亚甲基、亚乙基、-och2-或-ch2o-；且ra为c3-7环烷基、c2-6杂环烷基、芳基或杂芳基，其中所述芳基可具有1至3个相同或不同的取代基，所述取代基选自卤素原子、羟基、氨基、c1-6烷基、c1-6烷氧基、c2-6烯氧基、卤代(c1-6烷基)、羟基(c1-6烷基)、羧基、c2-7烷氧羰基、氰基和硝基或杂芳基；所述杂芳基可具有取代基，所述取代基选自卤素原子和c1-6烷基；

12、x为单键、氧原子或硫原子；

13、y为可被羟基取代的c1-6亚烷基或c2-6亚烯基；

14、z为-rb、-corc、-so2rc、-con(rd)re、-so2nhrf或-c(═nrg)n(rh)ri；rc为芳基、杂芳基或c1-6烷基，所述芳基可具有1至3个相同或不同的取代基，所述取代基选自卤素原子、羟基、氨基、c1-6烷基磺酰氨基、c1-6烷基和c1-6烷氧基，所述杂芳基可具有取代基，所述取代基选自卤素原子、氨基和c1-6烷基；所述c1-6烷基可具有选自以下取代基组（i）的1至5个相同或不同的基团；

15、r4、rb、rd、re及rf相同或不同，各自为氢原子、芳基、杂芳基或c1-6烷基；其中所述芳基可具有1至3个相同或不同取代基，所述取代基选自卤素原子、羟基、氨基、c1-6烷基磺酰氨基、c1-6烷基和c1-6烷氧基，所述杂芳基可具有取代基，所述取代基选自卤素原子、氨基和c1-6烷基，所述c1-6烷基可具有选自以下取代基组(i)的1至5个相同或不同的基团，或r4和rb二者与相邻氮原子一起形成c2-6环氨基，所述c2-6环氨基可具有取代基，所述取代基选自羟基、氨基甲酰基、c1-6烷基、氧代基、氨基甲酰基(c1-6烷基)、羟基(c1-6烷基)和c1-6烷基磺酰氨基取代的c1-6烷基，或rd和re二者与相邻氮原子一起形成c2-6环氨基，所述c2-6环氨基可具有取代基，所述取代基选自羟基、氨基甲酰基、c1-6烷基、氧代基、氨基甲酰基(c1-6烷基)、羟基(c1-6烷基)和c1-6烷基磺酰氨基取代的c1-6烷基；rg、rh和ri相同或不同，各自为氢原子、氰基、氨基甲酰基、c2-7酰基、c2-7烷氧羰基、芳基(c2-7烷氧羰基)、硝基、c1-6烷基磺酰基、磺酰胺基、甲脒基（carbamimidoyl）或c1-6烷基，所述c1-6烷基可具有选自以下取代基组(i)的1至5个相同或不同的基团，或rg和rh二者结合形成亚乙基，或rh和ri二者与相邻氮原子一起形成c2-6环氨基，所述c2-6环氨基可具有取代基，所述取代基选自羟基、氨基甲酰基、c1-6烷基、氧代基、氨基甲酰基(c1-6烷基)、羟基(c1-6烷基)及c1-6烷基磺酰氨基取代的c1-6烷基；

16、r3、r5和r6相同或不同，各自为氢原子、卤素原子、c1-6烷基或c1–6烷氧基；且

17、所述取代基组（i）由羟基、c1-6烷氧基、c1-6烷硫基、氨基、单(c1-6烷基)氨基或二(c1-6烷基)氨基、单[羟基(c1-6烷基)]氨基或二[羟基(c1-6烷基)]氨基、脲基、磺酰胺基、单(c1-6烷基)脲基或二(c1-6烷基)脲基、单(c1-6烷基)磺酰胺基或二(c1-6烷基)磺酰胺基、c2-7酰氨基、c1-6烷基磺酰氨基、c1-6烷基磺酰基、羧基、c2-7烷氧羰基、-con(rj)rk组成，其中所述rj与rk相同或不同，且各自为氢原子或c1-6烷基，其中所述c1-6烷基可具有1至3个相同或不同的取代基，所述取代基选自羟基、氨基、单(c1-6烷基)氨基或二(c1-6烷基)氨基、单[羟基(c1-6烷基)]氨基或二[羟基(c1-6烷基)]氨基、脲基、单(c1-6烷基)脲基或二(c1-6烷基)脲基、c2-7酰氨基、c1-6烷基磺酰氨基和氨基甲酰基，或rj与rk二者与相邻氮原子一起结合形成c2-6环氨基、芳基(c1-6烷氧基)、芳基(c1-6烷硫基)、c3-7环烷基、c2-6杂环烷基、芳基、杂芳基、c2-6环氨基或c1-4芳香环氨基，所述c2-6环氨基可具有取代基，所述取代基选自羟基、氨基甲酰基、c1-6烷基、氧代基、氨基甲酰基(c1-6烷基)、羟基(c1-6烷基)以及c1-6烷基磺酰氨基取代的c1-6烷基，所述芳基(c1-6烷氧基)可在环上具有1至3个相同或不同的取代基，所述取代基选自卤素原子、羟基、氨基、c1-6烷基及c1-6烷氧基，所述芳基(c1-6烷硫基)可在环上具有1至3个相同或不同的取代基，所述取代基选自卤素原子、羟基、氨基、c1-6烷基及c1-6烷氧基，所述芳基可具有1至3个相同或不同的取代基，所述取代基选自卤素原子、羟基、氨基、c1-6烷基磺酰氨基、c1-6烷基及c1-6烷氧基，所述杂芳基可具有取代基，所述取代基选自卤素原子、氨基及c1-6烷基，所述c2-6环氨基可具有取代基，所述取代基选自羟基、氨基甲酰基、c1-6烷基、氧代基、氨基甲酰基(c1-6烷基)、羟基(c1-6烷基)、c1-6烷基磺酰氨基取代的c1-6烷基，所述c1-4芳香环氨基可具有c1-6烷基作为取代基；

18、其中式ii所示化合物为：

19、

20、式ii

21、其中

22、r7为氢、任选取代的c1-10烷基、c1-5环烷基或五元杂环，所述任选取代为被一个或多个r7a取代；每个r7a独立地为氨基、酯基、酰胺基（amide）、巯基（thiol）、羧基、氰基、卤素、羟基、或任选取代的c1-4烷氧基、c1-5环烷基或五元杂环，所述任选取代为被一个或多个r7b取代；每个r7b独立地为c1-4烷基、卤素或羟基；n为0、1或2；

23、每个r8独立地为f或or8a，其中每个r8a独立地为氢、c1-4烷基或酰基；

24、每个r9独立地为卤素、羟基、或任选取代的c1-10烷基或c1-10烷氧基，所述任选取代为被一个或多个r9a取代；每个r9a独立地为氨基、酯基、酰胺基、巯基、羧基、氰基、卤素、羟基、或任选取代的c1-4烷氧基、c1-5环烷基或五元杂环，所述任选取代为被一个或多个r9b取代；每个r9b独立地为c1-4烷基、氨基、氰基、卤素或羟基；

25、p为0、1或2；

26、每个r10独立地为r10a、-n(r10a)(r10b)、-or10a、-sr10a、-s(o)r10a或-s(o)2r10a；r10a为任选取代的c4-20烷基或4-20元杂烷基，所述任选取代为被一个或多个r10c取代，并且r10c任选地连接至另一个r10a部分形成二聚体或三聚体；r10b为氢或r10a；

27、每个r10c独立地为氨基、酰胺基、偶氮基、羰基、羧基、氰基、甲酰基、胍基、卤素、羟基、酰亚胺基（imido）、亚氨基（imino）、异硫氰酸酯基、腈基、硝基、亚硝基、硝氧基（nitroxy）、氧代基、硫烷基（sulfanyl）、亚磺酰基（sulfinyl）、磺酰基、硫醛基（thial）、硫氰酸酯基、硫酮基、硫脲基、脲基或x1、x1-l1-x2或x1-l1-x2-l2-x3，其中x1、x2和x3各自独立地为任选取代的c1-4烷基、c1-6环烷基、5元或6元杂环或芳基；所述任选取代为被一个或多个r10d取代，l1和l2各自独立地为任选取代的c1-6烷基或1-10元杂烷基，所述任选取代为被一个或多个r10e取代；

28、每个r10d独立地为r10e或被一个或多个r10e任选取代的c1-6烷基；

29、每个r10e独立地为氨基、酰胺基、偶氮基、羰基、羧基、氰基、甲酰基、胍基、卤素、羟基、酰亚胺基、亚氨基、异硫氰酸酯基、腈基、硝基、亚硝基、硝氧基、氧代基、硫烷基（sulfanyl）、亚磺酰基、磺酰基、硫醛基、硫氰酸酯基、硫酮基或脲基；且m为1、2或3；和

30、其中所述sglt1抑制剂化合物在受试者的肠道内具有主要药理作用位点。

31、所述方法治疗gip依赖性库欣综合征，以及包括但不限于：异位表达gipr的促生长激素（gh）分泌型垂体肿瘤、异位表达gipr的神经内分泌肿瘤，或任何异位表达gipr的器官或组织。

32、本发明所述方法可使用多种sglt1抑制剂化合物，包括但不限于：

33、、、、、和。

34、根据本发明，sglt1抑制剂化合物或其药学上可接受的盐的给药剂量可约为0.1mg/天至约60mg/天，但不限于该剂量范围。

35、在本发明的另一方面，所述sglt1抑制剂化合物或其药学上可接受的盐在进餐前给药。