一种PLEKHS1基因在制备化疗增敏剂联合用药中的应用

本发明涉及plekhs1基因在制备化疗增敏剂联合用药中的应用，属于生物医学领域。

背景技术：

1、结直肠癌（colorectal cancer, crc）是全球范围内发生率较高的致命性恶性肿瘤。作为全球第三大常见的恶性肿瘤，crc每年新增病例约180万，死亡病例超过86万，分别占全球新报告癌症病例的10%和肿瘤相关死亡病例的9%。预计到2030年，crc的发病率将增加60%，给社会带来沉重负担。对于早期crc患者，主要治疗手段为手术结合辅助化疗；而晚期crc患者则更多采用姑息性缓解手术、姑息性化疗以及靶向治疗的综合疗法。随着crc研究的不断深入，已成功开发出多种针对crc患者的靶向药物和免疫药物。这些药物通过精准识别并攻击癌细胞特定的分子标志物，显著提升了治疗效果。目前研究发现的crc常见驱动基因突变主要包括：braf v600e、kras g12c、her2、met和ntrk。

2、常规化疗药物仍是结直肠癌治疗领域的基石，包括奥沙利铂、伊利替康及氟尿嘧啶。然而，化疗耐药是临床治疗中不可避免的难题，也严重限制了crc患者的治疗获益：耐药可以分为原发性耐药与继发性耐药两类——部分肿瘤本身存在先天的药物抵抗机制，初始化疗就无法达到预期的治疗效果；而即便对化疗初始敏感的肿瘤，在持续用药的选择压力下，也会逐渐诱导出耐药克隆，最终发生继发性耐药，导致疾病进展。耐药的发生不仅会压缩后续治疗的选择空间，还会显著缩短患者的无进展生存期与总生存期，是当前crc诊疗领域亟待突破的核心挑战。破解化疗耐药一直是全球crc领域的研究热点，无论是探索提前预测耐药的生物标志物，还是开发能够逆转耐药的联合治疗策略，都还未取得能够完全解决问题的突破性成果，化疗耐药依然是当前crc诊疗领域亟待突破的核心挑战。

技术实现思路

1、针对上述现有技术的不足，本发明提供了plekhs1基因在制备化疗增敏剂联合用药中的应用，目的在于解决kras g12c抑制剂在crc中的反应率较低，超过50%的crc患者对其无明显反应的技术问题。

2、本发明提供的第一个技术方案为plekhs1基因或蛋白作为靶点在制备用于缓解、减轻和/或治疗结直肠癌药物中的应用，所述plekhs1基因的核苷酸序列如seq id no.1所示，所述plekhs1蛋白的氨基酸序列如seq id no.1所示。

3、在某些实施方式中，所述应用为所述药物能够抑制plekhs1基因或蛋白的表达。

4、在某些实施方式中，所述药物包括抑制plekhs1基因或蛋白表达的抑制剂。

5、在某些实施方式中，所述抑制剂包括但不限于干扰rna、基因敲除试剂或化学抑制剂。

6、优选地，所述药物为特异性敲降plekhs1基因的shrna，所述shrna核苷酸序列如下：

plekhs1:5’-ggaagagaatcattatcttac-3’ (shrna1，seq id no.3), 5’-ggaagaattgagtgtcattat-3’ (shrna2，seq id no.4)。

7、本发明提供的第二个技术方案为一种结直肠癌5-fu耐药增敏剂，所述结直肠癌5-fu耐药增敏剂包括抑制plekhs1基因或蛋白表达的抑制剂。

8、在某些实施方式在，所述抑制剂为特异性敲降plekhs1基因的shrna，所述shrna核苷酸序列如下：

plekhs1:5’-ggaagagaatcattatcttac-3’ (shrna1), 5’-ggaagaattgagtgtcattat-3’ (shrna2) 。

9、本发明提供的第三个技术方案为一种联合药物，所述联合药物含有抑制plekhs1基因或蛋白表达的抑制剂和5-氟尿嘧啶。

10、本发明提供的第四个技术方案为plekhs1基因或蛋白的抑制剂、第二个技术方案所述的结直肠癌5-fu耐药增敏剂或第三个技术方案所述的联合药物在制备用于缓解、减轻和/或治疗结直肠癌药物中的应用。

11、在某些实施方式中，所述药物的剂型可以是医学上可接受的常规剂型，作为优选的例子，没有限定，可以是注射液、注射用冻干粉针、混悬剂、植入剂、栓塞剂、胶囊剂、片剂、丸剂或口服液。

12、在某些实施方式中，所述药物中含有药用辅料。

13、在某些实施方式中，所述药用辅料包括溶剂、抛射剂、增溶剂、助溶剂、乳化剂、着色剂、黏合剂、崩解剂、填充剂、润滑剂、润湿剂中的至少一种。

14、在某些实施方式中，所述药用辅料还包含渗透压调节剂、稳定剂、助流剂、矫味剂、防腐剂、助悬剂、包衣材料、芳香剂、抗黏合剂、整合剂、渗透促进剂、ph值调节剂、缓冲剂、增塑剂、表面活性剂、发泡剂、消泡剂、增稠剂、包合剂、保湿剂、絮凝剂与反絮凝剂、助滤剂或释放阻滞剂中的至少一种。

15、在某些实施方式中，所述药物中含有药用载体。

16、在某些实施方式中，所述药用载体选自微囊、微球、纳米粒或脂质体。

17、本发明提供的第五个技术方案为plekhs1基因或蛋白作为靶点在制备缓解、减轻和/或逆转结直肠癌5-氟尿嘧啶耐药性的药物中的应用。

18、相比于现有技术，本发明的有益效果如下：

19、比较plekhs1基因敲低组和对照组的抑制细胞增殖情况，结果如下：在细胞水平上，与对照组的结直肠癌细胞相比，敲低plekhs1显著增强结直肠癌细胞对化疗药物的敏感性，而过表达plekhs1显著诱导/加重结直肠癌细胞对化疗药物的耐药性。在裸鼠体内荷瘤实验中，与对照组相比，plekhs1基因敲低组和单纯化疗组的肿瘤体积、瘤重均较对照组显著降低，证明两种干预方式单独应用均具有明确的抑瘤效果；而plekhs1敲低联合化疗的处理组，可取得显著优于单干预的肿瘤生长抑制效果。这表明靶向plekhs1能够增强crc对化疗药物的敏感性。

1.plekhs1基因或蛋白作为靶点在制备用于缓解、减轻和/或治疗结直肠癌药物中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述应用为所述药物能够抑制plekhs1基因或蛋白的表达。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述药物包括抑制plekhs1基因或蛋白表达的抑制剂，所述抑制剂包括但不限于干扰rna、基因敲除试剂或化学抑制剂。

4. 根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述药物为特异性敲降plekhs1基因的shrna，所述shrna核苷酸序列如seq id no.3、seq id no.4所示。

5.一种结直肠癌5-fu耐药增敏剂，其特征在于，所述结直肠癌5-fu耐药增敏剂包括抑制plekhs1基因或蛋白表达的抑制剂。

6. 根据权利要求5所述的结直肠癌5-fu耐药增敏剂，其特征在于，所述抑制剂为特异性敲降plekhs1基因的shrna，所述shrna核苷酸序列如seq id no.3、seq id no.4所示。

7.一种联合药物，其特征在于，所述联合药物含有抑制plekhs1基因或蛋白表达的抑制剂和5-氟尿嘧啶。

8. plekhs1基因或蛋白的抑制剂、权利要求5~6任一项所述的结直肠癌5-fu耐药增敏剂或权利要求7所述的联合药物在制备用于缓解、减轻和/或治疗结直肠癌药物中的应用。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述药物中含有药用辅料，所述药用辅料包括溶剂、抛射剂、增溶剂、助溶剂、乳化剂、着色剂、黏合剂、崩解剂、填充剂、润滑剂、润湿剂中的至少一种。

10. plekhs1基因或蛋白作为靶点在制备缓解、减轻和/或逆转结直肠癌5-氟尿嘧啶耐药性的药物中的应用。