抗-CD6抗体组合物以及用于治疗和降低包括COVID-19在内的冠状病毒的不利效应的方法与流程

抗-cd6抗体组合物以及用于治疗和降低包括covid-19在内的冠状病毒的不利效应的方法
1.相关申请的交叉引用
2.本技术要求2020年4月4日提交的印度临时申请号202041014994和2020年4月17日提交的古巴临时申请号2020-0027的优先权，这些文献通过提及而以其整体合并入本文。
发明领域
3.本发明旨在抗-cd6抗体(包括非耗竭性抗-cd6抗体)、使用方法和组合物，其用于治疗和降低由感染因子例如细菌和病毒(特别是冠状病毒)引起的不利效应，其中所述不利效应包括触发细胞因子风暴或细胞因子释放综合征。
4.发明背景
5.最后一次大流行病(1918年)后100多年，世界今天处于由rna病毒(其已被国际病毒分类学委员会(ictv)命名为“严重急性呼吸综合征冠状病毒2(sars-cov-2)”，并且所引起的疾病被称为covid-19)引起的另一次大流行病之中。所述病毒属于冠状病毒科，并且截至今天已散播至所有洲并且因此被预期将会持续很长时间。
6.今天，在全世界超过1.15亿人被所述病毒感染。虽然许多人已恢复，但是大约15％的确诊病例进展至严重阶段，其中对于超过65岁的患者具有更高的进展入严重阶段的机会。从全世界的数据来看，致死率为在3％左右。
7.该病毒主要通过来自被感染的患者的飞沫(其进入另一个人的鼻道、口腔或眼睛)进行传播。在被感染的患者中发展出症状需要2至14天左右，平均5天。三种冠状病毒(严重急性呼吸综合征冠状病毒(sars-cov)、中东呼吸综合征冠状病毒(mers-cov)和sars-cov-2)经由飞沫进行传播，并且可以在下呼吸道中复制并引起肺炎。
8.世界卫生组织(who)已报道，几乎80％的病例具有轻度至中度感染(归类为咳嗽和发热，但不需要住院)，13.8％具有严重感染，和6.1％具有危重疾病。感染的中位潜伏期为在症状发作前大约4-5天，其中97.5％的有症状的患者在11.5天内发展出症状。在住院的情况下，具有covid-19的患者展现出发热、干咳和有时呼吸困难。在症状发作的5-6天内，sars-cov-2病毒载量达到其顶峰，并且在严重病例中，在症状发作后8-9天左右，感染进展至急性呼吸窘迫综合征(ards)。
9.最近的数据暗示，人致病性冠状病毒(严重急性呼吸综合症冠状病毒[sars-cov]和sars-cov-2(covid-19))通过血管紧张素转变酶2(ace2)与其靶细胞结合，所述ace2由肺(ii型，肺泡细胞)、肠、肾和血管的上皮细胞表达。ace2的表达在用ace抑制剂和血管紧张素ii i型受体阻断剂(arb)进行治疗的具有1型或2型糖尿病和高血压的患者中大量增加。这可能解释了为什么通常与这些共存病相关联的超过65岁的患者对于该疾病更易感。这些患者展现出与在2002-2003年爆发的sars(严重急性呼吸综合征)相似的症状，例如轻度的感冒样症状，包括发热、咳嗽、疲劳、呼吸短促、肌痛和味觉和/或嗅觉丧失。sars-cov-2感染在一些患者中触发促炎应答，其包括高水平的细胞因子，包括il-6、成纤维细胞生长因子(fgf)、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(gm-csf)、肿瘤坏死因子和血管内皮生长因子。已发
现il-6水平与增加的死亡率直接相关并且与淋巴细胞计数负相关，这暗示细胞因子释放综合征可能妨碍适应性免疫应答(li等人,“coronavirus infections and immune responses”j 322med virol.2020年4月,92(4):424-32)。
[0010]
一旦肺被感染，该病毒就使用rna聚合酶来在肺泡细胞中进行复制并且使用细胞机器来将rna翻译成蛋白质。最后，产生和释放多个病毒颗粒。这引起再感染，并且病毒可以被传播至其他人。
[0011]
不存在有用于由该新病毒引起的covid-19感染的标准治疗选项。但是，正在基于病毒感染途径来联合尝试多种药物。处于开发中或目前正在进行测试的其他药物包括聚焦于疫苗和单克隆抗体疗法的多家公司。来自roche的actemra(抗-il6)处于关于covid的临床试验中，该药物的用途已从自身免疫性疾病改变至用于该适应症。来自sanofi的kevzara也是一种阻断il6的抗体并且处于临床试验中。regeneron正在开发针对病毒刺突蛋白的抗体，希望阻止其与ace2受体的相互作用。takeda正在从作出应答的患者来开发超免疫球蛋白，以用于被动免疫。cytosorb疗法基于可以在危重患病患者中有效地降低过量水平的炎症介质的体外血液纯化程序。
[0012]
对于新的和更有效的用于治疗covid-19的不利效应的治疗学的需要继续增长，特别是以出现的和再出现的感染性疾病和病原体为目标的那些。如此，存在必要性以提供新的和有效的用于降低covid-19及其变体的不利效应的治疗。
[0013]
发明概述
[0014]
本发明提供了与cd6的结构域1特异性地结合的抗-cd6抗体(包括非耗竭性抗-cd6抗体)用于治疗和降低冠状病毒(特别是新型冠状病毒(covid-19)及其变体)的效应的用途。特别地，本发明的抗-cd6抗体通过降低过度活跃的免疫应答(例如高的细胞因子表达水平)来展现出治疗活性。
[0015]
本发明提供了与cd6的结构域1特异性地结合的抗-cd6抗体(包括非耗竭性抗-cd6抗体)用于治疗和降低细菌感染因子(特别是a族链球菌和肺炎球菌)的效应的用途。特别地，本发明的抗-cd6抗体通过降低过度活跃的免疫应答(例如高的细胞因子表达水平)来展现出治疗活性。
[0016]
累积的证据暗示，一些具有严重covid-19的患者正经历着细胞因子风暴综合征。细胞因子是在那里击退感染并且挡开癌症的炎性免疫学蛋白质，但是过多则可以导致免疫系统“发狂”。以如此的增加的量，身体自己的杀伤免疫细胞可以导致器官衰竭和死亡。目前，来自急性呼吸窘迫综合征(ards)的呼吸衰竭是covid-19患者的死亡率的主导原因。因此，本发明提供了用于减少炎性细胞因子蛋白质(其可以包括白介素il-1、il-6和il-2，和干扰素-γ)和用于治疗具有归因于covid-19及其变体的过度炎症的并发症的患病个体的新方法。
[0017]
在一个方面，本发明还提供了治疗被冠状病毒感染的细胞或生物体的方法，其包括用治疗有效量的根据本发明的抗-cd6抗体进行治疗，所述抗-cd6抗体包含有包含下述氨基酸序列的重链和轻链可变区：seq id no:1(重链可变区)和2(轻链可变区)中所示的氨基酸序列，或者包含seq id no:1(重链可变区)和3(轻链可变区)的与seq id no:1和2具有至少98％同一性的氨基酸序列。
[0018]
在另一个方面，本发明还提供了治疗被冠状病毒感染的细胞或生物体的方法，其
包括用治疗有效量的根据本发明的抗-cd6抗体进行治疗，所述抗-cd6抗体具有包含下述氨基酸序列或由下述氨基酸序列组成的重链和轻链区：seq id no:4(重链)和5(轻链)中所示的氨基酸序列，或者与seq id no:4和5具有至少98％同一性的氨基酸序列。包含或由seq id no:4和6组成的抗-cd6抗体被包括在本发明中。
[0019]
以大约0.5mg/kg体重至大约8mg/kg体重的剂量范围以静脉内方式向患者施用所述抗体。1mg/kg至6mg/kg的剂量是优选的。优选地，向患者施用所述抗体至少两次，直至最多5个剂量。在两次连续施用之间流逝的时间将会为24至96小时。优选的施用规划为间隔72小时的两至三个剂量。
[0020]
在另一个方面，本发明提供了用于在人患者中减轻covid-19及其变体感染的致细胞病变破坏效应的方法，其包括向所述患者施用治疗量的根据本发明的抗-cd6抗体，所述抗-cd6抗体包含seq id no:1(重链可变区)和seq id no:2(轻链可变区)或3(轻链可变区)。
[0021]
在另外一个方面，本发明提供了治疗性组合物，其在药学上可接受的载体中包含治疗量的根据本发明的抗-cd6抗体，所述抗-cd6抗体包含seq id no:4(重链)和5或6(轻链)的氨基酸序列。
[0022]
另外，因为使用多于一种活性试剂可能提供更好的治疗性组合物，并且这在当不同的试剂通过不同的机制起作用时尤其如此，所以本发明还包括了这样的治疗性组合物，其包含根据本发明的抗-cd6抗体(其包含氨基酸序列seq id no:4(重链)和seq id no:5或6(轻链))，以及一种或多种其他抗病毒试剂，例如逆转录酶(rt)抑制剂-干扰在病毒生命周期期间的关键步骤并且阻止病毒产生它自己的拷贝；核苷类似物-核苷类似物由于致死诱变而抑制冠状病毒复制；蛋白酶抑制剂-干扰被病毒用于产生感染性病毒颗粒的蛋白质；融合抑制剂-阻断病毒进入身体细胞；整合酶抑制剂-可以阻断对于产生它自己的拷贝来说需要的酶；多药组合-将两种或更多种不同类型的药物组合成一个；和/或药物代谢动力学增强剂；以及生物反应调节物，包括例如干扰素(α、β或γ)、白介素-2和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(“gm-csf”)等。
[0023]
本发明的联合组合物可以包含较低剂量的活性抗病毒药，而同时保持作为较高剂量的特征的抗病毒活性水平。作为结果，通过施用本发明的联合组合物而使典型地与抗病毒试剂的施用相关联的细胞毒性最小化。因此，联合组合物可以包含减少用量的抗病毒试剂以及与之相组合的本发明的抗-cd6抗体，以取得大于通常所需要的抗病毒活性水平，而同时保持可接受水平的细胞毒性。
[0024]
在另外一个方面，本发明提供了通过调节由白介素表达的增加所引起的免疫应答来治疗受试者(例如，脊椎动物，例如人)的治疗性方法，所述方法包括向受试者施用治疗有效量的根据本发明的抗-cd6抗体，所述抗-cd6抗体包含seq id no:4和5或者与seq id no:4和5具有98％同一性的序列(包括包含seq id no:4和6的抗体)。
[0025]
在更进一步的方面，本发明提供了用于针对covid-19及其变体治疗受试者的试剂盒，其中所述试剂盒包含治疗有效量的根据本发明的抗-cd6抗体，所述抗-cd6抗体包含下述氨基酸序列或由下述氨基酸序列组成：seq id no:4(重链)和5(轻链)的氨基酸序列，或者包含或由seq id no:4(重链)和6(轻链)组成的与seq id no:4和5具有98％同一性的氨基酸序列。
[0026]
在一个进一步的方面，本发明提供了包含根据本发明的抗-cd6抗体的药物的制备，其中重链和轻链的可变区包含下述氨基酸序列：seq id no:1和2的氨基酸序列，或者包含seq id no:1和3的与seq id no:1和2具有98％同一性的可变区氨基酸序列。
[0027]
在另一个方面，本发明提供了根据本发明的包含或由seq id no:4(重链)和seq id no:5或seq id no:6(轻链)组成的抗-cd6抗体的用途，所述用途为用于在受试者(哺乳动物或人)中治疗冠状病毒(sars和mers-cov)，更特别地治疗covid-19冠状病毒的感染。
[0028]
另外一个方面提供了待在有此需要的受试者中使用的治疗方法，其包括以大约0.5mg/kg体重至8mg/kg体重的剂量范围，以间隔24至96小时的两个独个剂量直至最多5个剂量，静脉内施用抗-cd6单克隆抗体至少两次。
[0029]
本发明的这些和其他优点和特征将会在下面的优选实施方案的详细描述中更充分地进行描述。
[0030]
附图简述
[0031]
图1显示了covid-19疾病(sars-cov-2)的不同阶段。首先是具有或不具有可检测的病毒的无症状阶段；阶段2：具有病毒的存在的不严重的无症状期；和最后，阶段3：其是具有大的病毒载量和肺水肿的严重的有症状阶段。
[0032]
图2和图2(续)显示了在各种临床试验中的现有技术药物以及它们的预测的作用机制。(a)瑞德西韦(remdesivir)；(b)加利司韦(galidesivir)；(c)卡莫司他；(d)芬戈莫德；(e)法匹拉韦(favipiravir)；(f)达芦那韦/可比司他(cobicistat)；(g)氯喹；(h)巴瑞替尼(baricitinib)；(i)沙利度胺；(j)羟氯喹；(k)鲁索利替尼(ruxolitinib)；(l)umifenovir。
[0033]
图3显示了在两个臂中可比较的il-6的平均基线值，图3a显示了臂a，和图3b显示了臂b。在首次输注后，在臂a中看到平均il-6水平的显著下降。
[0034]
图4显示了在两个臂中可比较的tnfα的平均基线值。图4a显示了臂a，和图4b显示了臂b。在首次输注后，在臂a中看到平均il-6水平的显著下降。
[0035]
图5涉及在用伊托利珠单抗(itolizumab)进行治疗前在covid-19患者的血清中的il-6浓度。
[0036]
图6涉及具有归因于细菌感染的肺炎的患者的放射学影像。图6a)在用伊托利珠单抗进行治疗之前，和图6b)在治疗之后。
[0037]
图7涉及在伊托利珠单抗的第一个剂量后c-反应蛋白(crp)浓度的下降。已将covid患者中高的crp水平与更严重的疾病相关联(参见例如，liu等人,j clin virol.2020年6月,127:104370)。
[0038]
图8涉及在伊托利珠单抗的第一个剂量后铁蛋白浓度的下降。铁蛋白是免疫失调的关键介质；它有助于细胞因子风暴，并且代表了影响covid-19的严重度的潜在因素(参见例如，vargas-vargas m和cort
é
s-rojo c.ferritin levels and covid-19.rev panam salud publica.2020,44:e72)。
[0039]
图9显示了用伊托利珠单抗进行治疗的患者的恢复百分比。
[0040]
发明详述
[0041]
已知covid-19及其变体可以在肺中刺激细胞因子风暴，例如il-2、il-6、il-7、gscf、ip10、mcp1、mip1a和tnfα的增加，随后为水肿、气体交换失调、急性呼吸窘迫综合征、
急性心脏损伤和可能导致死亡的继发感染。
[0042]
术语“细胞因子风暴”和“细胞因子释放综合征”用于是指加重的免疫反应，其中存在过度的和不受控制的促炎细胞因子释放。细胞因子是一组通过介导在淋巴样细胞、炎性细胞和造血细胞之中的复杂相互作用而起作用的低分子量蛋白质。它们具有高度多样的功能，但是这些功能可以被归类为少数几个不同的类别：免疫系统细胞的分化和成熟，免疫系统的细胞之间的通讯，和直接的效应子功能。细胞因子在先天和适应性免疫应答期间产生。它们与在细胞膜上的特定受体相结合，在那里它们发挥其功能，从而起始细胞内信号转导级联，其改变基因表达模式，以致于导致靶细胞产生特定的生物学应答。
[0043]
细胞因子由多种细胞类型，主要由免疫系统细胞产生。在先天免疫系统中的最多的产生细胞因子的细胞之一是巨噬细胞，而辅助t细胞或t cd4 细胞是主要在适应性或特异性免疫系统中产生它的细胞。细胞因子产生通常是瞬时的，受限于刺激物(即诱导免疫应答的外来试剂)的持续时间。
[0044]
患者的免疫系统进入过度驱动以对付病毒。th1细胞被激活并且释放il6和gm-csf细胞因子，如在图1中所显示的，其然后将巨噬细胞和嗜中性粒细胞带入到肺泡中。这些巨噬细胞释放更多的促炎细胞因子，尤其是il6、tnfα和il1。这些细胞因子通过靶向下丘脑而引起发热，并且还有肺泡水肿，其塞满肺。患者在该阶段经历呼吸困难。肺泡周围的血管变得渗漏，并且观察到增加的血管通透性。体液丧失引起循环应激和低血压，其然后导致肾衰竭和最终多器官衰竭。
[0045]
目前，不存在有用于covid感染的标准治疗选项，因为这是一种非常新的病毒。但是，正在基于上面提及的病毒感染途径来联合尝试多种药物。图2显示了在各种临床试验中的药物以及它们的预测的作用机制。
[0046]
本发明涉及在被sars-cov-2感染的患者中降低发病率的方法，其包括向所述患者施用治疗量的抗-cd6抗体。在特别的实施方案中，所述抗-cd6抗体为单克隆抗体。在一些实施方案中，所述抗-cd6抗体为人源化单克隆抗体伊托利珠单抗。在一些实施方案中，所述抗-cd6抗体为fab或片段。在一些实施方案中，所述患者具有细菌感染。在一些实施方案中，所述被sars-cov-2感染的患者具有共存病。在另一些实施方案中，所述被sars-cov-2感染的患者具有多于一种共存病。在一些实施方案中，所述被sars-cov-2感染的患者具有多于两种共存病。在一些实施方案中，所述被sars-cov-2感染的患者展现出无、轻度或低于中度的症状。在一些实施方案中，所述被sars-cov-2感染的患者展现出中等症状。在一些实施方案中，所述被sars-cov-2感染的患者具有严重症状。在一些实施方案中，所述被sars-cov-2感染的患者展现出细胞因子释放综合征(crs)的一个或多个症状。在本发明的一些情况下，向关于covid-19测试阳性的患者施用伊托利珠单抗，在展现出一种或多种病态之前。在本发明的一些实施方案中，向患者施用伊托利珠单抗，此外还有一种或多种其他治疗试剂。
[0047]
本发明的抗体与白细胞分化抗原cd6相结合，所述cd6是主要在成熟的外周血淋巴细胞中和在较低程度上在成熟的b细胞中表达的糖蛋白。它在淋巴细胞的细胞粘附、激活、分化和存活中发挥至关重要的作用(alonso,r等人,(2008)hybridoma 27(4):291-301)。cd6分子在其细胞外部分中包含三个结构域(sarrias mr等人,(2004)crit rev immunol.24:1-37)，并且与其配体alcam(激活的白细胞-细胞粘附分子)分子的结合位点位于结构域3上(bodian dl等人,(1997)biochemistry 36:2637-2641)。
γ)、肿瘤坏死因子α(tnf-α)和转化生长因子β(tgf-β)。
[0058]
如在本文中所使用的，术语“淋巴细胞”具有本领域中的正常含义，并且是指在血液、淋巴和淋巴样组织中发现的单核的非吞噬性白细胞中的任一种，例如b和t淋巴细胞。
[0059]
covid-19病毒的变体可以包括在病毒的刺突蛋白中，但也在orf蛋白质区域中发现的氨基酸变化。例如，b.1.1.7变体具有值得注意的突变n501y。已发现其他突变是更感染性的，包括a222v、e484k、s477n和k417n/t。由于所述病毒散播和更多人被感染，因而另外的变体是不可避免的。
[0060]
如在本文中所使用的，术语“患者”和“受试者”可互换使用并且是指人患者。
[0061]
如在本文中所使用的，术语“治疗”包括施用本发明的抗体组合物、化合物或试剂以防止或延迟疾病的症状、并发症或生物化学指标的发作，减轻症状，或者阻止或抑制所述疾病、状况或病症(例如，癌症、转移性癌症或转移性乳腺癌)的进一步发展。治疗可以是预防性的(防止或延迟疾病的发作，或者防止其临床或亚临床症状的表现)，或者是在疾病表现后症状的治疗性抑制或减轻。
[0062]
如在本文中所使用的，术语“良好耐受的”是指不存在由于治疗而出现的并且可能会影响治疗决定的在健康状态方面的不利变化。
[0063]
如在本文中所使用的，短语“调节免疫应答”或“免疫应答的调节”包括在本文中所定义的免疫应答的下调、抑制或降低。
[0064]
如在本文中所使用的，术语“抗-cd6抗体”为与人cd6(hcd6)的srcr结构域1(d1)特异性地结合并且不干扰激活的白细胞细胞粘附分子(alcam)结合cd6的抗体。
[0065]
在本发明中所使用的cd6 mab(单克隆抗体)可以作为药学组合物的一部分进行施用，所述药学组合物包含mab作为活性试剂和包含与用于配制待通过静脉内途径进行施用的mab的那种相似的生理缓冲液作为合适的赋形剂。特别地，伊托利珠单抗的序列描述在美国专利号6,572,857和8,524,233中，其内容通过提及而合并入本文，在下表1中。
[0066]
表1：伊托利珠单抗的蛋白质序列
[0067]
[0068][0069]
值得注意的是，cd6主要在效应t细胞(teff细胞)上组成性地表达和很少在调节t细胞(treg)上表达。cd6刺激免疫应答并且在淋巴细胞激活后过表达。cd6将炎性细胞引导至损伤处，并且其配体alcam在激活后和在发炎的组织中上调。
[0070]
cd6和病毒：cd6在慢性siv感染期间在t-细胞上过表达，具有受损的抗病毒应答，并且与siv病进展相关联。htlv-1诱导alcam的过表达，从而促进被感染的淋巴细胞通过血脑屏障的运输。alcam在hiv 单核细胞上增加，并且抗-alcam抗体和ccr2/ccr5双抑制剂减少其移行。
[0071]
伊托利珠单抗是抗-cd6的人源化igg1 mab。伊托利珠单抗是没有靶细胞耗竭(无血细胞减少)的免疫调节分子。伊托利珠单抗在发炎的损伤中积累。伊托利珠单抗具有强有力的抗炎效应，其中减少促炎细胞因子il-6、tnf、ifnγ、il-17和il-1的产生。
[0072]
本文中显示，在covid-19患者中的伊托利珠单抗具有这样的能力，即通过t
eff
功能(th1/th2/th17细胞)的免疫调节来控制促炎细胞因子风暴综合征和防止淋巴细胞运输至
炎症位点(破坏alcam-cd6相互作用)，从而节省treg和保留抗病毒应答。预期这降低与细胞因子释放综合征相关联的具有covid-19阳性的患者的发病率和死亡率。
[0073]
值得注意的是，较高百分比的cd14 cd16 炎性单核细胞存在于covid-19患者的外周血中。cd14 cd16 单核细胞的百分比在展现出ards的患者中高得多。而且，从这些炎性单核细胞中分泌出显著更高的il-6表达，尤其是在ards患者中。从理论上说，il-6 单核细胞的该增加与由可以迁移至肺区域的单核细胞所引起的细胞因子风暴相关。因此，在covid-19患者中，这些激活的免疫细胞可以大量地进入肺循环并且展现出在ards中的免疫损害作用。因此，本发明提供了用于减少炎性细胞因子蛋白质(其可以包括白介素il-1、il-6和il-2，和干扰素-γ)和用于治疗具有归因于covid-19及其变体的过度炎症的并发症的患病个体的新方法。
[0074]
在某些实施方案中，本发明的方法包括在covid-19患者中预防急性呼吸窘迫综合征(ards)，其中所述方法在于用治疗量的抗-cd6抗体治疗所述患者。在一些实施方案中，本发明的方法减少在covid-19患者中的ards死亡率。在某些实施方案中，本发明提供了减少被sars-cov-2感染的患者的住院期的方法，所述方法包括向所述患者施用治疗量的抗-cd6抗体。在一些实施方案中，本发明的方法在covid-19患者中预防心肌炎。在一些实施方案中，本发明的方法用于降低covid-19患者的icu死亡率机会比率(mortality odds ratio)。
[0075]
在某些实施方案中，本发明的方法包括在患者中预防由细菌因子引起的感染性疾病，其中所述方法包括用治疗量的抗-cd6抗体治疗所述患者。这些细菌因子包括但不限于a族链球菌和肺炎球菌。
[0076]
在本发明的一些实施方案中，向患者施用伊托利珠单抗，此外还有一种或多种其他治疗试剂。在某些实施方案中，所述另外的治疗试剂选自由下列各项组成的组：疫苗、抗病毒药、抗体、免疫疗法、免疫调节剂、细胞因子抑制剂、抗凝血药、补体抑制剂、微生物组调节剂和抗疟药。在本发明的一些实施方案中，所述另外的试剂为疫苗。在一些实施方案中，所述疫苗选自由下列各项组成的列表：bnt-162b2、chadox1 ncov-19或mrna-1273。在本发明的一些实施方案中，所述另外的试剂为抗病毒药。在某些实施方案中，所述抗病毒药选自由下列各项组成的列表：病毒神经氨酸酶抑制剂(例如奥塞米韦或扎那米韦)、病毒聚合酶抑制剂(例如利巴韦林)或m2离子通道阻断剂(例如金刚烷胺或金刚乙胺)、瑞德西韦、biomedivir、法匹拉韦或nanomedivir。在本发明的一些实施方案中，所述另外的治疗试剂为ii期抑制剂，例如t-705,toyama chemical co.(口服聚合酶抑制剂)，peramivir
tm
,biocryst(iv/im神经氨酸酶抑制剂)，或者i期抑制剂诸如cs-8958,biota/daiichi sankyo(吸入式神经氨酸酶抑制剂)。在本发明的一些实施方案中，所述另外的试剂为抗体。在某些实施方案中，所述另外的试剂为中和抗体。在一些实施方案中，所述中和抗体为ly-cov555或regn-cov2。在本发明的一些实施方案中，所述另外的试剂为免疫治疗试剂。在本发明的某些实施方案中，恢复期血浆为所述另外的试剂。在本发明的一些实施方案中，所述另外的试剂为免疫调节剂。在某些实施方案中，所述免疫调节剂为糖皮质激素。在一些实施方案中，所述免疫调节剂为激酶抑制剂。在一些实施方案中，所述另外的试剂为环索奈德。在某些实施方案中，所述另外的试剂为巴瑞替尼。在本发明的一些实施方案中，所述另外的试剂为鲁索利替尼。在本发明的一些实施方案中，所述另外的试剂为细胞因子抑制剂。在一些实施方案中，所述细胞因子抑制剂选自由下列各项组成的列表：托珠单抗、sarilumab、卡那单
抗(canakinumab)、仑兹鲁单抗(lenzilumab)。在本发明的一些实施方案中，所述另外的试剂为干细胞疗法。在一些实施方案中，所述干细胞疗法为瑞米干赛-l(remestemcel-l)或艾米盘赛(emiplacel)。在本发明的一些实施方案中，所述另外的试剂为抗凝血药。在某些实施方案中，所述另外的试剂为抗血栓药。在一些实施方案中，本发明的方法与从包括下列各项的列表中选择的另外的试剂一起进行使用：利伐沙班、舒洛地昔、阿哌沙班、肝素和阿司匹林。在本发明的一些实施方案中，所述另外的试剂为补体抑制剂。在一些实施方案中，所述补体抑制剂选自依库珠单抗或ravulizumab。在本发明的一些实施方案中，所述另外的试剂为微生物组调节剂。在某些实施方案中，所述另外的试剂为edp-1815。在本发明的一些实施方案中，所述另外的试剂为抗疟药。在某些实施方案中，所述抗疟药选自氯喹和羟氯喹。在一些实施方案中，本发明还包括与一种或多种其他抗病毒试剂(例如逆转录酶(rt)抑制剂、核苷类似物、融合抑制剂和/或整合酶抑制剂)一起进行施用的包含根据本发明的抗-cd6抗体的抗病毒组合物。在本发明的某些实施方案中，所述逆转录酶抑制剂包括但不限于：克来夫定、替比夫定、替诺福韦、dipovoxil、更昔洛韦、洛布卡韦、泛昔洛韦和喷昔洛韦。在一些实施方案中，所述核苷类似物包括但不限于：阿巴卡韦(abc)，阿德福韦(bis-pom pmea)，氨多索韦，阿立他滨(apricitabine)(avx754)，辛沙夫定(censavudine)，去羟肌苷(ddi)，艾夫西他滨，恩曲他滨(ftc)，恩替卡韦(etv)，拉米夫定(3tc)，racivir，stampidine，司他夫定(d4t)，替诺福韦酯(tenofovir disoproxil)(tdf)，替诺福韦艾拉酚胺(tenofovir alafenamide)(gs-7340)，扎西他滨(ddc)，齐多夫定(zdv)/叠氮胸苷(azt)，其衍生物，任选地其烷基化衍生物，进一步任选地三甲氧基-3tc，其在药学上可接受的盐，及其组合。在本发明的某些实施方案中，所述融合抑制剂包括但不限于：恩夫韦肽(“fuzeon”)、t-20、pro 140、维立韦罗和马拉韦罗。在本发明的另一些实施方案中，所述整合酶抑制剂包括但不限于：globoidnan a、l-000870812、s/gsk1349572、s/gsk1265744、雷特格韦(raltegravir)和埃替格韦(elvitegravir)。
[0077]
在表2中提及对于被covid-19感染的患者(包括具有有症状的或无症状的covid-19感染的受试者)的用伊托利珠单抗的治疗选项。
[0078]
表2：所有选项也可以包括阿奇霉素和抗逆转录病毒复制药物(抗-rna聚合酶)
[0079][0080][0081]
在本发明的范围内，伊托利珠单抗的施用是预防性的。本发明的伊托利珠单抗的施用可以在covid-19病毒的症状表现之前发生，从而防止或者备选地在其进展方面延迟该病毒。本发明的预防性方法可以以与在本文中所描述的治疗性方法相似的方式来进行，虽然用量和治疗方案可以相异。因此，认为作为预防性方法向未显示出病毒迹象的受试者预防性施用伊托利珠单抗是有益的。
[0082]
本发明包括被covid-19感染的患者(包括具有有症状的或无症状的covid-19感染的受试者)的治疗或疗法。
[0083]
本发明的伊托利珠单抗mab以与给药制剂相容的方式和以将会是在治疗上有效的量进行施用。待施用的量取决于待治疗的受试者，受试者的免疫系统生成细胞免疫应答的能力，和所希望的保护程度。活性成分施用的精确量取决于开业医生的判断并且对于每个个体是特有的。但是，伊托利珠单抗可以以大约0.1至25mg/kg体重/周，更优选地大约
0.5mg/kg至大约10mg/kg体重，和最优选地大约1至3mg/kg体重/周的有效量通过静脉内(iv)施用进行递送。
[0084]
在本发明的一个实施方案中，患者就共存病来进行筛选，并且用单剂量的伊托利珠单抗进行治疗。在一个实施方案中，以3.2mg/kg的用量用200mg伊托利珠单抗治疗具有共存病的covid-19患者。在一个实施方案中，在一天至十四天后重复所述治疗。
[0085]
本发明的联合组合物可以包含较低剂量的活性抗病毒药，而同时保持作为较高剂量的特征的抗病毒活性水平。作为结果，通过施用本发明的联合组合物而使典型地与抗病毒试剂的施用相关联的细胞毒性最小化。联合组合物可以包含减少用量的抗病毒试剂以及与之相组合的本发明的伊托利珠单抗，以取得大于通常所需要的抗病毒活性水平，而同时保持可接受水平的细胞毒性。
[0086]
本发明的一些方法包括首先就covid-19对患者进行测试，并且对于关于covid-19阳性的患者施用治疗剂量的抗-cd6抗体。本发明的一些方法提供了用于决定哪些covid-19患者用治疗剂量的伊托利珠单抗进行治疗的选择标准。本发明的一些方法包括施行covid-19测试和就恶化的肺部累及对患者进行评估，并且向经测试关于covid-19为阳性且具有恶化的肺部累及的患者施用抗-cd6抗体。在本发明的一些方法中，确定肺部累及是否恶化包括对患者进行评估以发现下列中的至少一项：a)恶化的氧饱和度；b)pao2的下降；c)对于增加fio2的需要；d)不稳定的so2；e)增加的对于呼吸机支持的需要；f)新的对于呼吸机支持的需要；f)实变肺区域的数目和/或程度的增加。在一些方法中，氧饱和度恶化超过1个百分点。在本发明的一些方法中，患者的氧饱和度恶化》3个百分点。在一些实施方案中，pao2下降》10％。
[0087]
在本发明的一些实施方案中，所述方法包括选择具有covid-19和怀疑的巨噬细胞激活综合征的患者，并且施用治疗剂量的伊托利珠单抗。在一些实施方案中，向经测试关于covid-19为阳性并且需要氧疗的患者施用治疗剂量的伊托利珠单抗。在一些实施方案中，本发明包括向具有确诊的多病灶间质性肺炎的covid-19患者施用治疗剂量的伊托利珠单抗。在一些实施方案中，向还需要氧疗以保持》93％的o2饱和度的关于covid-19阳性的患者施用治疗剂量的抗-cd6抗体。在一些实施方案中，本发明的方法用于治疗经测试关于covid-19为阳性并且具有下列中的一个或多个的患者：a)喘鸣或说话不规则；b)呼吸频率大于每分钟22次呼吸；c)po2：动脉血氧分压《65mmhg；d)恶化的放射学影像；e)发热》＝38℃；f)血红蛋白、血小板或嗜中性粒细胞的初始值降低；g)hb《90g/l；h)血小板《100
×
109/l；i)嗜中性粒细胞《1
×
109/l；j)白细胞《4
×
109/l；k)与pcr不匹配的降低的红细胞沉降(低的红细胞沉降并且pcr增加或不变化)；l)增加的甘油三酯的初始值或者大于3mmol/l的甘油三酯；m)从500ng/ml起的增加的初始铁蛋白值或者》＝2000ng/ml的绝对铁蛋白值；n)天冬氨酸氨基转移酶这种转氨酶》＝30iu/l；o)二聚体d的增加；p)纤维蛋白原《2.5g/l；q)神经学表现的发作。在一些实施方案中，本发明的方法包括使用排除标准以选择用于用抗-cd6抗体进行治疗的患者。在一些实施方案中，所述排除标准包括下列中的一个或多个：妊娠，哺乳，和一个或多个不良事件。
[0088]
本发明的一些实施方案包括通过测量一个或多个从由下列各项组成的列表中选择的初级结果测量值来决定治疗患者多久和以什么剂量：肺功能的减低或衰退；无需增加fio2以保持so2稳定和无需插管的患者比率；呼气末正压值(ppfe)下降的患者的比率。在一
些实施方案中，这些结果的测量时间在1和7天之间。本发明的一些实施方案包括通过测量一个或多个从由下列各项组成的列表中选择的次级结果测量值来决定治疗患者多久和以什么剂量：1)对于气管内插管的需要；2)当呼吸衰竭出现时非侵入式或侵入式机械通气比率的增加；3)非侵入式机械通气失败；4)机械通气的持续时间或者至机械通气结束的时间；5)患者死亡率；6)il1、il6和tnfα的患者血清浓度；7)hsh得分参数(温度、内脏肥大、血细胞减少、甘油三酯、纤维蛋白原、铁蛋白、aat(got))；8)c-反应蛋白，和绝对淋巴细胞计数(正的或负的)。
[0089]
本发明的一些方法包括向中度患病的covid-19患者施用治疗剂量的抗-cd6抗体。本发明的一些方法包括向高龄covid-19患者施用治疗剂量的抗-cd6抗体。在一些实施方案中，所述患者为64岁或更年长。在一些实施方案中，所述抗-cd6抗体为伊托利珠单抗。在本发明的一些实施方案中，关于covid-19阳性的住院患者用与抗病毒疗法相组合的伊托利珠单抗进行治疗，并且与接受标准抗病毒护理疗法且没有伊托利珠单抗的对照组进行比较。在本发明的一些实施方案中，通过实时转录酶聚合酶链反应(rt-pcr)就covid-19来对患者进行评估。
[0090]
治疗的统计学显著性通过平均值和标准偏差或者中位值和四分位数间距(取决于每个变量的分布)来确定。对于连续变量应用威尔科克森(wilcoxon)秩和检验，而对于分类变量使用卡方或费希尔(fisher)恰当检验。在一些实施方案中，本发明提供了从未接受免疫调节疗法的covid-19患者的相同的住院患者组中选择对照组。对照用洛匹那韦/利托那韦、氯喹、干扰素α2b和lmwh进行治疗。关于年龄、共存病和疾病严重度，对照受试者匹配良好。关于伊托利珠单抗相对于对照，估计了关于疾病进展和死亡率的机会比率。共存病包括高血压、痴呆、营养不良、心脏疾病、糖尿病、慢性阻塞性肺疾病。
[0091]
具有用于iv输注的溶液(无色和透明的溶液)的每个5ml小瓶包含伊托利珠单抗25mg(r-dna来源)。伊托利珠单抗被包装在用氯化丁基橡胶塞子封闭并且用翻转式密封盖密封的6r清亮玻璃小瓶(usp 1型)中。伊托利珠单抗注射液是无防腐剂的溶液，其在用于iv输注的一次性使用小瓶中提供。在使用之前，就微粒物质和变色目视检查小瓶中的溶液。如果观察到可见的不透明颗粒、变色或其他外来微粒，就弃去该小瓶并且不要将该溶液施用给患者。将合适体积的伊托利珠单抗注射液添加至250ml正常盐水并且轻轻地混合。可以将该经稀释的输注液袋避光储存在室温下或者冷藏在2℃至8℃下，并且它在室温下稳定达10小时。在施用给患者之前，允许输注溶液达到室温。在不少于120分钟的时间内并且使用具有管线内的、无菌的、非致热的、低蛋白质结合性的过滤器(1.2μm或更小的孔径)的输注装置来施行伊托利珠单抗输注。在头一个小时期间施用大致50ml的输注溶液，随后在下一个小时中施用剩余的溶液(大致200ml)。输注时间段可以因医学原因而延长直至8个小时。不可以将伊托利珠单抗与任何其他试剂一起在同一条iv管线中相伴地进行输注。不储存输注溶液的任何未使用部分用于再使用。
[0092]
调节给药方案以提供所希望的最佳应答(例如，治疗应答)。例如，可以施行单次推注，可以在一定时间内施用几个分开的剂量，或者可以按比例地减小或增大剂量，如通过治疗情况的急迫所指示的。关于在本发明中所使用的抗-cd6单克隆抗体的有效用量和给药方案取决于covid-19疾病及其变体的严重度，并且可以由开业医师来决定。在一个实施方案中，以每周给药通过输注来施用所述抗-cd6单克隆抗体。这样的施用可以重复，例如1至8
次，例如2至4次，或3至5次。备选地，所述施用可以在2至24小时，例如2至12小时的时间段内通过连续输注来进行。
[0093]
关于在本发明中所使用的抗-cd6单克隆抗体的治疗有效量的一个示例性的、非限制性的范围为大约0.01-100mg/kg/受试者体重，例如大约0.01-50mg/kg，例如大约0.01-25mg/kg。在一些实施方案中，使用对于患者身高来说理想的体重以决定剂量。在一些实施方案中，对于患者给予多于一个剂量。在一些实施方案中，对于患者给予较大的初始剂量。在一些实施方案中，在一周后施用第二个剂量。在一些实施方案中，在两周后施用第二个剂量。在一些实施方案中，所述第二个剂量处于与所述第一个剂量相同的强度。在一些实施方案中，所述第二个剂量是初始剂量的四分之三或更少。在一些实施方案中，所述第二个剂量是初始剂量的一半。在一些实施方案中，施用第三个治疗。在一些实施方案中，每两周施用治疗有效量的抗-cd6单克隆抗体，直至确定患者正在恢复或出院。在一些实施方案中，所述剂量为0.8mg/kg或1.6mg/kg。在一些实施方案中，所施用的剂量为1.6mg/kg和0.8mg/kg。关于在本发明中所使用的抗-cd6单克隆抗体的治疗有效量的示例性的、非限制性的剂量为0.8mg/kg和1.6mg/kg。具有本领域普通技术的医学专业人员可以容易地确定和开处方出所需要的药学组合物的有效量。例如，医师可以以比所需要的低的水平开始所述抗-cd6单克隆抗体的剂量以便取得所希望的治疗效果，并且逐渐增加用量直至取得所希望的效果。
[0094]
在一个实施方案中，以0.1至50mg/kg/受试者体重，例如0.5至3mg/kg的周用量通过输注来施用所述抗-cd6单克隆抗体。这样的施用可以重复，例如1至8次，例如2至4次，或3至5次。备选地，所述施用可以在2至24小时，例如2至12小时的时间段内通过连续输注来进行。在一个实施方案中，以每周给药来施用所述抗-cd6单克隆抗体。在这些实施方案的一些中，施用50mg至350mg的伊托利珠单抗的用量直至7次，例如2至4次。在一些实施方案中，双周地施用所述抗-cd6抗体。所述施用可以在2至24小时，例如2至12小时的时间段内通过连续输注来进行。这样的方案可以在需要时重复一次或多次，例如在一周后或在两周后。
[0095]
大多数的评估和研究程序按照由参与的研究中心所制定的标准治疗规程和来自icmr的covid-19疾病管理指南。在治疗期间和直至第一个治疗剂量后30天，按照关于不良事件的通用术语标准(ctcae)(v5.0)对治疗意外不良事件(treatment emergent adverse event；teae)进行评级。
[0096]
阐述了下面的实施例以帮助理解本发明，但是并不意欲并且不应当被解释为以任何方式限制其范围。所述实施例不包括关于在测定法程序中所采用的常规方法的详细描述。此类方法是本领域普通技术人员熟知的，并且描述在许多出版物中，包括通过例子。
[0097]
实施例1
[0098]
关于来自印度各个中心的登记，将经测试关于sars-cov2感染的病毒学诊断(rt-pcr)阳性的患者随机化。
[0099]
对于患者的主要纳入标准为：
[0100]-确证的sars-cov2感染的病毒学诊断(rt-pcr)；
[0101]-由于covid-19感染的临床恶化而住院；
[0102]-≤94％的在环境空气中的静息氧饱和度；
[0103]-处于中度至严重ards的患者，如通过《200或比紧接的先前值超过25％衰减的pao2/fio2(氧分压/吸入氧分数)比率所定义的；
[0104]-≥400ng/ml的基线血清铁蛋白水平或者大于4倍uln(如果已知)的il-6水平。
[0105]
对于患者的主要排除标准为：
[0106]-已知的严重的对于单克隆抗体的变态反应；
[0107]-活动性结核(tb)感染；不适当地治疗的结核或潜伏的结核的病史；
[0108]-依赖于侵入性机械呼吸机支持的患者；
[0109]-在过去6个月之内已接受口服抗排斥或免疫抑制药物；
[0110]-参与其他药物临床试验，例如使用抗-il-6疗法例如托珠单抗(可以允许参与covid-19抗病毒试验，如果得到赞助者批准)；
[0111]-依赖于作为支持性护理的一部分的抗-il-6治疗或血浆疗法的患者；
[0112]-妊娠或母乳喂养的，或者在剂量前检查中具有阳性妊娠测试；
[0113]-具有已知的乙型肝炎、丙型肝炎或hiv病史的患者；
[0114]-绝对嗜中性粒细胞计数(anc)《1000/mm3；血小板计数《50,000/mm3；绝对淋巴细胞计数(alc)《500/mm3。
[0115]
在大致36名患者中在两个臂中进行为期6周的治疗研究。
[0116]
治疗臂a：最好的支持性护理 伊托利珠单抗(seq id no:4和5)；其中连同伊托利珠单抗一起，施行按照研究所的规划所给予的最好的支持性护理(例如抗病毒药/抗生素/羟氯喹；氧疗等)。在输注之前，在臂a患者中施行用氢化可的松100mg i.v.(或等价的短效糖皮质激素)和非尼拉敏30mg i.v.的前驱用药大约30
±
10分钟。
[0117]
治疗臂b：最好的支持性护理；其中施行按照研究所的规划所给予的最好的支持性护理(例如抗病毒药/抗生素/羟氯喹；氧疗等)而无伊托利珠单抗。
[0118]
将所有进入该研究的合格患者都以2:1比例进行随机化，以分别接受治疗a(最好的支持性护理 伊托利珠单抗)或治疗b(最好的支持性护理)。通过使用合适的系统例如sas来生成计算机衍生随机化规划，以将患者分配至治疗组。随机化是中心的，并且使用远程电话和基于计算机的电子邮件系统来将随机化规划分发至站点。如果患者被随机分至臂a，并且未起始伊托利珠单抗或未施用一个完全输注，那么患者不被认为是随机化的。对于在那个特别站点中的随后患者，使用相同的随机化代码。
[0119]
允许支持性护理，其包括氧疗、肝素、抗病毒药、抗生素、短期类固醇和维生素。不允许用口服抗排斥或免疫抑制药物(在最后6个月内连续地/有规律地)、il-6疗法例如托珠单抗、恢复期血浆进行之前或伴随的治疗。
[0120]
伊托利珠单抗注射液是无防腐剂的溶液，其在用于iv输注的一次性使用小瓶中提供。在使用之前，就微粒物质和变色目视检查小瓶中的溶液。如果观察到可见的不透明颗粒、变色或其他外来微粒，就弃去该小瓶并且不将该溶液施用给患者。将合适体积的伊托利珠单抗注射液添加至250ml正常盐水并且轻轻地混合。可以将该经稀释的输注液袋避光储存在室温下或者冷藏在2℃至8℃下，并且它在室温下稳定达10小时。在施用给患者之前，允许输注溶液达到室温。
[0121]
在不少于120分钟的时间内并且使用具有管线内的、无菌的、非致热的、低蛋白质结合性的过滤器(1.2μm或更小的孔径)的输注装置来施行伊托利珠单抗输注。在头一个小时期间施用大致50ml的输注溶液，随后在下一个小时中施用剩余的溶液(大致200ml)。输注时间段可以因医学原因而延长直至8个小时。不可以将伊托利珠单抗与任何其他试剂一起
在同一条iv管线中相伴地进行输注。不储存输注溶液的任何未使用部分用于再使用。
[0122]
大多数的评估和研究程序按照由参与的研究中心所制定的标准治疗规程和来自icmr的covid-19疾病管理指南。在治疗期间和直至第一个治疗剂量后30天，按照关于不良事件的通用术语标准(ctcae)(v5.0)对治疗意外不良事件(teae)进行评级。
[0123]
如上面所叙述的，筛选了总共36名患者，其中4名患者被认为筛选失败。在符合纳入标准或不符合排除标准的32名患者中，2名患者在完成第一次按剂量给药之前意欲不连续的伊托利珠单抗治疗并且按照方案替换他们。在臂a中的患者的中位年龄为50.5岁，而在臂b中为49.5岁。他们中的大部分在所述两个治疗臂中都是男性，并且所有患者都是亚洲人。在臂a中的所有患者和在臂b中的大部分患者(所有活着的患者)完成了该研究；这包括提早退出的分别在臂a和b中的16名(80％)和6名(60％)患者。在臂b中关于研究不连续的最常见原因是死亡(n＝3)。在臂a中没有死亡。臂a患者接受最好的支持性护理，连同每两周1.6mg/kg用量的伊托利珠单抗；其中臂b患者接受最好的支持性护理。
[0124]
伊托利珠单抗治疗通过在1-月死亡率方面的降低而对于患者的生存具有值得注意的改善。在治疗臂a和b之间观察到在1-月死亡率方面的在统计学上显著的差异(p＝0.0098)。所有用伊托利珠单抗进行按剂量给药的患者都一致地显现出肺功能参数的改善：
[0125]
·
显著地稳定的/经改善的氧饱和度(spo2)和pao2，而没有增加fio2。
[0126]
·
按剂量给药后o2需求降低。
[0127]
·
pao2/fio2比率在所有患者中一致地得到改善。
[0128]
·
总之，在臂a中较高比例的患者具有稳定的/经改善的spo2，而没有增加fio2。总之，在所有基线后评估访问中，在臂a中较高比例的患者具有稳定的pao2，而没有增加fio2。对于所述两个参数，在所述两个治疗臂之间从第21天起都观察到在统计学上显著的差异。
[0129]
·
在臂a和b中pfr(pao2/fio2比率)随时间逐渐地增加。在21天内平均pfr在臂a中为350.25，和在臂b中为398.33。
[0130]
·
生物标志物例如il-6、il-17a和tnf-α在伊托利珠单抗治疗后显现出降低。相比于对照臂而言，患者显现出在从基线水平的平均变化方面的更大减小。
[0131]
il-6是一种促炎细胞因子。如在图3中所看到的，il-6的平均基线值在所述两个臂中是相当的；在臂a中为159.1pg/ml，和在臂b中为162.2pg/ml。相比于臂b(212pg/ml)而言，在臂a(43pg/ml)中看到在第一次输注后平均il-6水平的显著下降(p＝0.0269)。使用威尔科克森配对符号秩检验来估计p-值。
[0132]
tnf-α是一种促炎细胞因子。如在图4中所看到的，tnfα的平均基线值在臂a中(44pg/ml)比在臂b中(11pg/ml)更高。相比于在臂b中的增加(39pg/ml)而言，在臂a(9pg/ml)中看到在第一次输注后平均tnf-α水平的显著下降(p＝0.0253)。在第二个剂量前，tnf-α水平在臂a和b中分别为68pg/ml和108pg/ml。在第二个剂量后，在臂a中也看到tnf-α水平下降(50pg/ml)，而在臂b中增加(185pg/ml)。使用威尔科克森配对符号秩检验来估计p-值。
[0133]
il-17a是一种促炎细胞因子。在所述两个臂中il-17a的平均基线值是相当的；在臂a中为10.36pg/ml，和在臂b中为9.83pg/ml。在臂a中看到在第一次输注后平均il-17a水平的明显下降(6.75pg/ml)，这不同于在臂b中，在那里存在增加(14.75pg/ml)。在臂a中在第二个剂量后也看到il-17a水平轻微降低，而在臂b中增加。
[0134]
·
相比于对照臂而言，器官功能障碍和凝血病的其他重要标志物例如ldh(乳酸脱
氢酶)和d-二聚体在臂a中也显现出更大的平均降低。
[0135]
死亡率的首要终点是在统计学上高度显著的，有利于伊托利珠单抗臂；p值＝0.0098。伊托利珠单抗一致地显现出肺功能参数的改善和炎性生物标志物水平的降低。伊托利珠单抗在covid-19患者中是安全的。输注反应在放慢输注速率的情况下是可管理的。伊托利珠单抗有效地控制响应于covid-19病毒的免疫系统的过度激活，并且降低与细胞因子风暴相关的发病率和死亡率。
[0136]
总之，当与bsc(最好的支持性护理)一起施用给covid-19患者时，伊托利珠单抗治疗是被良好耐受的，没有由于该疗法而出现的新的安全性担忧。
[0137]
实施例2.伊托利珠单抗(seq id no:4和6)的使用在严重和危重患病患者中降低死亡率
[0138]
向48名被诊断有sars-cov-2或者有高度临床怀疑covid-19肺炎以及细胞因子释放综合征的临床、放射学或实验室证据的患者以静脉内方式施用200mg剂量的单克隆抗体伊托利珠单抗。在这些患者中，22名患者(14名是危重患病的和8名是严重患病的)在72小时后接受第二个剂量的所述抗体，和3名危重患病患者接受第三个剂量，因为他们具有呼吸功能不全或巨噬细胞激活综合征的持久征候。为了评价正被研究的产品的使用的影响，选择每名具有报告给公共卫生部的恢复或死亡信息的covid-19阳性患者作为对照，所述患者具有至少一种被认为是对于严重/致命covid-19结果的风险因素的共存病(高血压、缺血性心脏疾病、糖尿病、癌症、慢性肾脏疾病、肥胖症、营养不良或copd)的病史，或者在那个国家已被收入icu，并且未被包括在任何正在进行的关于covid-19的临床试验中。对于数据的统计学处理，采用χ2检验。
[0139]
如可以在表3中观察到的，经伊托利珠单抗治疗的患者的死亡率为15％，低于对照组的死亡率。此外，用伊托利珠单抗进行治疗的严重患病患者的死亡率相比于对照组的严重患病患者的死亡率而言是显著更低的。
[0140]
表3：严重或危重患病患者的死亡率
[0141][0142][0143]
实施例3.伊托利珠单抗的使用降低具有高的变为严重或危重患病的风险的中度患病患者的死亡率
[0144]
向14名具有2种或更多种预测死亡率的共存病的中度患病患者的样本以静脉内方
式施用200mg[3.2mg/kg体重的用量]的单克隆抗体伊托利珠单抗(seq id no:4和6)。选择未被诊断(虽然在重症护理病房中)并且具有2种或更多种共存病的患者作为未治疗的对照。对于数据的统计学处理，使用χ2检验。
[0145]
如可以在表4中看到的，在处于高的变成严重或危重患病患者的风险下的患者的死亡率降低了27％。
[0146]
表4：中度患病患者的死亡率
[0147][0148]
实施例4.伊托利珠单抗治疗在covid-19阳性的危重和严重患病患者中降低il-6血清浓度，并且在中度患病患者中使此类水平稳定
[0149]
在21名用单克隆抗体伊托利珠单抗(seq id no:4和6)进行治疗的covid-19阳性患者中，在开始治疗前和在施用后48小时，通过elisa(quantikine)来测定il-6血清浓度。将患者归类为：中度患病：n＝12；严重患病：n＝4；和危重患病：n＝5。
[0150]
如可以在图5中看到的，在开始用伊托利珠单抗的治疗前，患者的il-6水平随疾病进展而增加。危重患病患者的血清浓度显著高于中度患病患者的血清浓度(kruskal-wallis检验；p＝0.0015)。通过应用roc曲线，将基线il-6水平与疾病的严重度相关，所选择的il-6血清浓度的截止值为27.4pg/ml。
[0151]
在接受伊托利珠单抗的16名患者的组中，在首次施用前和48小时后评价了il-6血清浓度。表5显示了在48小时处il-6值的变化，依照所建立的截止值。
[0152]
所有具有大于27.4pg/ml的循环il-6水平的患者都通过一个剂量的伊托利珠单抗而降低了他们的值，其在施用后24和48小时之间进行测量。在具有在截止值以上的浓度的患者之中，il-6浓度的变化幅度具有50.9pg/ml的中位降低。但是，在具有小于27.4pg/ml的基线水平的患者之中，il-6浓度的中位变化为1.5pg/ml。
[0153]
表5：在48小时处il-6值的变化，依照区别疾病严重度的阈值
[0154][0155]
实施例5.用伊托利珠单抗进行治疗的、具有由细菌来源的呼吸道感染引起的细胞因子风暴的严重患病患者的临床改善
[0156]
罹患支气管哮喘的、具有有着谨慎预后的院外支气管肺炎诊断(图6a)和作为顽固吸烟者的历史的女性患者以静脉内方式接受大约200mg的mab伊托利珠单抗(seq id no:4
和6)的剂量。她的生命参数在入院之时为：温度38.20℃，呼吸频率120和心率89，血压90/60，sato
2 98，po
2 116，pco
2 88.6，肌酸酐50，血细胞比容0.32，白细胞象16.5
×
109，淋巴细胞0.24和单核细胞0.02，血小板350
×
109，这些参数表明该患者正在经历细胞因子风暴。除了所述mab外，她还接受了用美罗培南和万古霉素、庆大霉素、奥塞米韦、奥美拉唑、flaxiheparin、吗啡、咪达唑仑、维生素疗法、0.1％的氯己定口腔冲洗的伴随治疗。
[0157]
在48小时处观察到放射学改善以及生命参数的显著改善(图6b)。在施用所述抗体后十天进行的计算机辅助轴向体层摄影术未显示出间质性肺炎的征候，仅在肺的基底中有钙化结节，其通常发现于诸如该患者的顽固吸烟者中。此外，未报告与施用所述抗体相关联的不良事件。没有随后的感染。在入院后十四天，该患者出院。
[0158]
实施例6.伊托利珠单抗治疗在未通过pcr确诊的covid-19疑似患者中显示出高的恢复率
[0159]
由于临床怀疑covid-19肺炎(未通过pcr确诊)而被收入roberto rodr
í
guez医院(mor
ó
n,ciego de)的总共22名患者以静脉内方式接受200mg剂量的伊托利珠单抗(seq id no:4和6)，和在所述病例之一之中接受两个剂量的该抗体。所述患者在被收入该医院时处于危重、严重或中度状况(具有高的加重风险)。在施用所述抗体之前和48小时之后，测定炎性参数的浓度。c-反应蛋白浓度(图7)和铁蛋白浓度(图8)的中位值在治疗后48小时降低，这证明伊托利珠单抗疗法引起了与严重covid疾病和/或细胞因子风暴相关联的标志物的降低。图9显示，尽管在施用所述抗体之前观察到高水平的炎症，但是在所有中度和严重患者中和在86％的所有经治疗的患者中存在恢复。
[0160]
实施例7.需要住院的covid-19患者的治疗
[0161]
该试验包括18岁以上的男性或女性成人，其具有用rt-pcr确诊的sars-cov-2感染的病毒学诊断，和由于covid-19感染的临床恶化(具有≤94％的在环境空气中的静息氧饱和度)而需要住院。包括了具有中度至严重ards(如通过《200或比紧接的先前值超过25％衰减的pao2/fio2比率所定义的)的患者，和具有≥400ng/ml的基线血清铁蛋白水平或者大于4倍正常值上限(uln)的il-6水平的患者。
[0162]
以1.6mg/kg施用伊托利珠单抗(seq id no:4和6)的第一个剂量。评价了体外cd6受体占位率，并且1.6mg/kg剂量显示出99％受体占位率。在一些患者中，在1周后施用0.8mg/kg的另一个剂量，如果需要。因为所述患者经历了不同程度的宿主炎症反应，因而随后的周剂量不是在所有患者中都是必需的。基于临床状况和炎症标志物，留给研究者自行决定。在该研究中允许多达四个周剂量。
[0163]
实施例8.在细胞因子风暴的症状之前治疗covid-19患者
[0164]
以1.6mg/kg施用伊托利珠单抗(seq id no:4和6)的第一个剂量。选择该1.6mg/kg的负荷剂量，因为它是在慢性斑块状银屑病患者中的得到批准的剂量，并且已在几个2期和3期临床试验中作为静脉内输注施用了直至1.6mg/kg的剂量，而没有任何剂量限制性毒性的证据。由于伊托利珠单抗是一种抗-cd6抗体，因而评价了体外cd6受体占位率，并且由于1.6mg/kg剂量显示出99％受体占位率，因而选择它作为第一个剂量。在一些患者中，在1周后施用0.8mg/kg的另一个剂量，如果需要。因为所述患者经历了不同程度的宿主炎症反应，因而随后的周剂量不是在所有患者中都是必需的。基于临床状况和炎症标志物，留给研究者自行决定。在该研究中允许多达四个周剂量。
[0165]
实施例9.用伊托利珠单抗治疗住院的covid-19患者
[0166]
向接受标准护理疗法的二十名具有covid-19的受试者施行伊托利珠单抗(seq id no:4和6)的初始1.6mg/kg静脉内输注。在没有或具有轻微的来自该初始剂量的不良症状并且继续经历covid-19症状的受试者中，向他们每两周施用另一个1.6mg/kg。六名受试者接受一个处于1.6mg/kg的剂量的伊托利珠单抗；七名受试者接受两个处于1.6mg/kg的剂量，治疗之间相隔两周；三名受试者接受一个1.6mg/kg剂量的伊托利珠单抗，并且在一周后他们接受0.8mg/kg和在另一周后他们接受0.8mg/kg伊托利珠单抗的最后治疗；四名受试者接受一个1.6mg/kg剂量的伊托利珠单抗，并且在接下来的三周中，以每个剂量之间相隔一周，他们接受三个另外的处于0.8mg/kg的剂量，总共四个治疗。
[0167]
实施例10.除了标准护理疗法之外，用伊托利珠单抗或安慰剂治疗covid-19患者
[0168]
将covid-19患者分为两个组，其中一个组接受标准护理疗法 安慰剂，和一个组除了标准护理疗法之外还接受伊托利珠单抗的初始1.6mg/kg(基于理想体重)静脉内输注。在第8天，治疗组中的患者接受另一个0.8mg/kg，如果他们：a)还未出院；b)还未在医院中恢复；c)用第一个剂量没有过敏反应；d)不具有alc 0.5；和d)未被诊断为具有活动性结核。