含I型聚酮合酶基因的质粒的制备方法与流程

技术特征：
1.一种制备包含编码pks的dna在内的质粒的方法，其包括以下工序：在枯草芽孢杆菌感受态细胞中导入包含编码i型聚酮合酶(pks)的dna串联重复序列在内的dna构建体的工序。2.根据权利要求1所述的方法，其包括以下工序：通过用typeii限制性核酸内切酶切割多个dna片段前体，来制备两端具有粘性末端的多个dna片段的工序；通过连接多个所述dna片段，来制备所述dna构建体的工序。3.根据权利要求2所述的方法，其包括以下工序：通过将包含不同种类的多个所述dna片段的溶液进行混合以使得各溶液中的dna片段的摩尔浓度比为0.8～1.2，来制备编码i型聚酮合酶(pks)的dna串联重复序列的工序。4.根据权利要求2或3所述的方法，其中，所述dna片段前体的gc含量为65％以下。5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中，所述导入工序是将所述dna构建体与枯草芽孢杆菌感受态细胞共培养的工序。6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中，其还包括从导入了所述dna构建体的枯草芽孢杆菌中回收质粒dna的工序。7.一种包含编码i型聚酮合酶(pks)的dna在内的质粒，其中，其通过根据权利要求1至6中任一项所述的方法而得到。8.一种制备pks的方法，其包括以下工序：用质粒转化宿主细胞的工序；培养转化后的所述宿主细胞的工序；其中，所述质粒是通过根据权利要求1至6中任一项所述的方法而得到的、且包含编码i型聚酮合酶(pks)的dna在内的质粒。9.根据权利要求8所述的方法，其中，所述宿主细胞是streptomyces属细菌。

技术总结
本发明涉及一种制备包含编码PKS的DNA在内的质粒的方法，其包括以下工序：在枯草芽孢杆菌感受态细胞中导入包含编码I型聚酮合酶(PKS)的DNA串联重复序列在内的DNA构建体的工序。序。


技术研发人员：大卫
受保护的技术使用者：丝芭博株式会社
技术研发日：2021.05.25
技术公布日：2023/1/31