均衡诱导抗病毒细胞与体液免疫的核酸-纳米乳的构建与应用

技术特征：
1.一种均衡诱导抗病毒细胞与体液免疫的核酸-纳米乳的构建方法，其特征在于，通过以下方案实现：(1)纳米乳的构建与带电性质：以磷脂、维生素e和阳离子脂质作为油相，不含核酸酶的水溶液作为水相，制备水包油型阳离子纳米乳，其中，阳离子脂质占总脂质质量的10％-80％；(2)纳米乳负载核酸分子：将步骤(1)制备的阳离子纳米乳与带负电的编码病毒特异性抗原的核酸分子共孵育，通过静电相互作用得到核酸-纳米乳复合物，其中，核酸与纳米乳的氮磷比为1:3-1:8。2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，步骤(1)所述油相中的磷脂是天然磷脂，选用蛋黄卵磷脂或合成磷脂，合成磷脂选用氢化大豆磷脂酰胆碱。3.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，步骤(1)所述油相中的维生素e选用是琥珀酸酯、醋酸酯或α-生育酚。4.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，步骤(1)所述油相中的阳离子脂质选用(2,3-二油酰基-丙基)三甲基氯化铵、二甲基双十八烷基铵、1,2-二甲基-3-三甲基铵-丙烷、1,2-硬脂酰-3-三甲基铵-丙烷或3β-[n-(n’,n
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二甲基胺乙基)胺基甲酰基]胆固醇。5.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述的核酸-纳米乳复合物通过探头超声法、高压均质法或微流控技术一步或多步制备。6.根据权利要求1所述的构建，其特征在于，步骤(2)中编码病毒特异性抗原的核酸分子是信使rna或质粒dna。7.权利要求1所述方法构建的核酸-纳米乳复合物在制备抗病毒核酸疫苗中的应用，其特征在于，所述病毒为新型冠状病毒sars-cov-2。8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，利用步骤(1)所述的纳米乳递送编码新型冠状病毒sars-cov-2刺突蛋白受体结合域的信使核糖核苷酸，以诱导均衡的抗病毒细胞免疫与体液免疫。9.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，利用步骤(1)所述的纳米乳递送编码病毒特异性抗原的核酸以制备针对不同病毒的抗病毒核酸疫苗，所述病毒抗原包括流感病毒血凝素、人类免疫缺陷病毒包膜蛋白和埃博拉病毒糖蛋白的核酸分子。

技术总结
本发明提供均衡诱导抗病毒细胞与体液免疫的核酸-纳米乳的构建与应用。本发明所述的纳米乳表面带正电，可通过静电相互作用吸附编码病毒特异性抗原的核酸分子，形成的核酸-纳米乳复合物在被抗原呈递细胞摄取后可通过强大的溶酶体逃逸实现核酸分子的高翻译和高表达。本发明所述的纳米乳在递送编码新型冠状病毒SARS-CoV-2刺突蛋白受体结合域的信使核糖核苷酸序列(RBD mRNA)时，相比基于脂质纳米粒(LNP)的递送系统能诱导更均衡的抗病毒特异性细胞免疫与体液免疫，具有促进抗病毒疫苗疗效的临床应用前景。的临床应用前景。


技术研发人员：游剑 施莹莹
受保护的技术使用者：浙江大学
技术研发日：2022.09.05
技术公布日：2022/12/8