一种抑菌材料的抑菌性测试方法及其应用与流程

1.本发明涉及c12q1/18领域，尤其涉及一种抑菌材料的抑菌性测试方法及其应用。


背景技术：

2.产品包装尤其是食品包装的安全与消费者的健康问题息息相关，产品包装上的微生物菌群种类和总数是消费者所在意的安全问题，现有技术中，通常采用抑菌圈法和菌落总数检测的方法对包装材料的防霉功能和抑菌功能进行验证，但上述两种检测方法均未对包装材料的防霉效果进行分级的现象。
3.cn111321197a公开了一种测试材料抑制微生物性能的方法，通过选择标志物来测定微生物的性能，但具体操作时，待测材料与标志物的接触面积、接触时间，以及标志物选择的标准都难以界定，最后的实验结果对待测材料的抑菌性的强弱的判断结果是不够精准的。
4.针对这一问题，本发明针对性的提出了一种抑菌材料的抑菌性测试方法，该方法操作简单，无需仪器即可达到检测效果，具有广阔的应用前景。


技术实现要素：

5.本发明的第一个方面提供了一种抑菌材料的抑菌性测试方法，所述测试方法包括：将抑菌材料与培养体接触，将培养体置于适宜环境培养。
6.作为一种优选的实施方式，所述抑菌材料包括固体抑菌材料、液体抑菌材料中的任意一种。
7.作为一种优选的实施方式，所述抑菌性包括细菌抑菌性、真菌抑菌性、病毒抑制性。
8.作为一种优选的实施方式，所述培养体为固体薄片。
9.作为一种优选的实施方式，所述固体薄片的厚度为0.1-1cm。
10.作为一种优选的实施方式，所述固体薄片上包括固体培养基。
11.作为一种优选的实施方式，所述固体培养基包括牛肉膏蛋白胨培养基、营养琼脂培养基、沙氏琼脂培养基、改良马丁培养基、葡萄糖铵盐培养基、马铃薯蔗糖培养基、高盐察氏培养基、乳糖胆盐培养基、5wt％乳糖发酵培养基、苯丙氨酸培养基、硫酸亚铁培养基、尿素琼脂培养基、氰化钾培养基、四硫磺酸钠煌绿增菌液培养基、亚硒酸盐胱氨酸增菌液培养基、亚硫酸铋培养基、三铁塘培养基中的至少一种。
12.现有技术中，抑菌性检测的标志物的选择标准不一，如cn111321197a所述，采用市售馒头作为标志物，馒头本身并不适宜用作所有微生物适宜的培养，在馒头表面未长菌或菌落数量较少时，无法判断是抑菌材料的影响还是馒头本身不适宜微生物生长，因此测试结果的准确性有待提高。
13.针对这一技术问题，申请人采用了一种全新的测试技术，将微生物检测领域常用的真菌、细菌、病毒培养基通过技术手段制成培养体，进而用培养体去作为标志物检测微生
物，既满足了大部分的微生物的生长需求，又可以去除标志物本身精确度不高的影响。
14.作为一种优选的实施方式，所述培养体的制备方法包括：
15.(1)柔性聚合物灭菌处理后，在其表面划分出面积相等的若干个分割区，在每一个分割区内对应放置已凝固成型的灭菌处理的固体培养基，所述固体培养基与分割区面积相等；
16.(2)紫外光照射下，通过低温热固化的形式，将相邻的固体培养基彼此粘附，并使得所有的固体培养基黏附于柔性聚合物表面；
17.(3)紫外光照射下，将灭菌处理后的另一柔性聚合物贴合于柔性聚合物表面，密封，即得培养体。
18.本发明所述的柔性聚合物无特殊材料限制，包括但不限于聚氯乙烯。
19.本发明所述的培养体的面积无特殊限制，培养体中的分割区的面积也无特殊限制，可以根据抑菌材料的大小和形状改变。
20.作为一种优选的实施方式，所述培养体的使用方法包括：
21.(1)打开培养体上层的柔性聚合物；
22.(2)将培养体对折，把抑菌材料完全包裹起来；
23.(3)将包裹后的培养体-抑菌材料置于适宜环境培养后打开包裹体，肉眼或显微镜观察分割区内有无菌落或孢子。
24.作为一种优选的实施方式，所述适宜环境培养为具有适合真菌、细菌、病毒生长的温度和湿度的环境。
25.作为一种优选的实施方式，所述培养的时间不小于18小时。
26.为了提高测试的准确度，所述培养的时间可以为24h、48h、96h等等，具体依实际情况而定。
27.本发明的第二个方面提供了一种抑菌材料的抑菌性测试方法在微生物检测中的应用。
28.与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
29.1.本发明所述的抑菌性测试方法相比于现有技术具有更高的准确性，避免了因传统标志物自身限制，而无法判断是材料的抑菌性强还是标志物自身不适合微生物生长的问题。
30.2.本发明所述的抑菌性测试方法操作灵活，柔性聚合物表面的固体培养基无具体种类限制，可以根据实际情况添加或删除，也可以定制某几类微生物专用的培养体。
31.3.本发明所述的抑菌性测试方法对抑菌材料的类型没有限制，可以满足固体、液体抑菌材料的抑菌性检测，检测方法经济便捷。
32.4.本发明所述的抑菌性测试方法适合大规模生产，尤其适合实验室内抑菌材料的检验。
33.5.本发明所述的培养体的制备方法简单易懂，培养体自身轻便易携带，适合外出工作的携带，尤为方便。
具体实施方式
34.实施例1
35.本实施例第一个方面提供了一种抑菌材料的抑菌性测试方法，所述测试方法包括：将抑菌材料与培养体接触，将培养体置于适宜环境培养。
36.所述抑菌材料为固体抑菌材料，具体为抑菌pbt塑料，购买自惠州市铭铠防霉抗菌科技有限公司。
37.所述培养体的制备方法包括：
38.(1)柔性聚合物灭菌处理后，在其表面划分出面积相等的15个分割区，在每一个分割区内对应放置已凝固成型的灭菌处理的固体培养基，所述固体培养基与分割区面积相等；
39.(2)紫外光照射下，通过低温热固化的形式，将相邻的固体培养基彼此粘附，并使得所有的固体培养基黏附于柔性聚合物表面；
40.(3)紫外光照射下，将灭菌处理后的另一柔性聚合物贴合于柔性聚合物表面，密封，即得培养体。
41.所述柔性聚合物为聚乙烯薄膜。
42.所述固体培养基分别为牛肉膏蛋白胨培养基、营养琼脂培养基、沙氏琼脂培养基、改良马丁培养基、葡萄糖铵盐培养基、马铃薯蔗糖培养基、高盐察氏培养基、乳糖胆盐培养基、5wt％乳糖发酵培养基、苯丙氨酸培养基、硫酸亚铁培养基、尿素琼脂培养基、氰化钾培养基、四硫磺酸钠煌绿增菌液培养基、亚硒酸盐胱氨酸增菌液培养基、亚硫酸铋培养基、三铁塘培养基。上述15种培养基在柔性聚合物表面的涂覆面积均为1*1cm，涂覆厚度均为0.5cm。
43.所述培养体为厚度为1cm的固体薄片。
44.所述培养体的使用方法包括：
45.(1)打开培养体上层的柔性聚合物；
46.(2)将培养体对折，把抑菌材料完全包裹起来；
47.(3)将包裹后的培养体-抑菌材料置于适宜环境培养后打开包裹体，显微镜观察分割区内有无菌落或孢子。
48.所述适宜环境培养为在温度为25℃、相对湿度为85％的环境中培养28天。
49.本实施例第二个方面提供了一种抑菌材料的抑菌性测试方法在微生物检测中的应用。
50.实施例2
51.本实施例第一个方面提供了一种抑菌材料的抑菌性测试方法，具体实施方式同实施例1，不同之处在于，所述抑菌材料为液体抑菌材料，具体为宠物抑菌喷雾，购买自广州市蔻妍化妆品有限公司。
52.所述培养体的使用方法包括：
53.(1)打开培养体上层的柔性聚合物，将培养体表面的固体培养基暴露于环境下5min；
54.(2)将液体抑菌材料均匀喷涂在固体培养基表面，喷涂量为0.5ml/cm2；
55.(3)将培养体置于适宜环境培养后，显微镜观察分割区内有无菌落或孢子。
56.本实施例第二个方面提供了一种抑菌材料的抑菌性测试方法在微生物检测中的应用。
57.性能测试
58.显微镜观察分割区内有无菌落或孢子，在有菌落或孢子的分割区内，计算菌落或孢子的总面积占含有菌落或孢子的分割区总面积的百分比。
59.