一种抗疲劳的蛹虫草肽组合物及其制备方法和应用与流程

1.本发明属于功能食品技术领域，具体涉及一种抗疲劳的蛹虫草肽组合物及其制备方法和应用。


背景技术：

2.在当今经济快速发展的社会背景下，疲劳是一种普遍存在的生理现象，也是一个复杂的生理生化过程。1982年的第五届国际运动生化学术会议对疲劳进行了定义，疲劳是由机体运动本身所引起的机体生理过程中，不能持续其功能在特定水平和/或不能维持预定的运动强度的机体运动能力下降的现象。
3.根据疲劳表现不同，可将疲劳分为躯体疲劳和心理疲劳两个方面，躯体疲劳表现为动作迟缓，不灵敏，运动能力动作的协调能力下降；心理疲劳是由于心理活动造成的疲劳状态，主要表现为抑制行为的消极改变，如注意力不集中、记忆力障碍、精神萎靡不振等。根据发展阶段不同，疲劳分为急性疲劳、慢性疲劳和过度疲劳三个阶段。急性疲劳是一段时间运动后首先出现的疲劳感，经短时间休息后可完全恢复。慢性疲劳是在急性疲劳之后未能得到休息，疲劳加重并连续累计，机体组织结构劳损，经一段时期休息后不能完全恢复。疲劳进一步加重形成过度疲劳，加重损害健康，神经体液调节紊乱和组织器官的病理形态学改变。
4.目前产生疲劳的机制有一系列主流学说，其中以能量耗竭学说和代谢产物蓄积学说为主。但由于疲劳机制尚不明确，临床上缺乏有效的药物和理想的手段。目前主要通过补充能源物质，如糖类、蛋白质等，清除代谢产物如乳酸、氨等，补充抗氧化剂，使用强壮剂等来缓解疲劳。虽作用明显，见效快，但由于这类药物中含有兴奋剂等给机体造成危害的成分，使用受到限制。
5.专利cn 107212401 a公开了一种缓解体力疲劳的组合物，主要由下述重量份的原料制得：牡蛎肽8～12份、铁皮石斛7～12份、玛咖6～10份、蛹虫草4～8份、淫羊藿3～7份、肉苁蓉3～7份、巴戟天3～6份、海参2～5份、黄精1～5份。该组合物主要以铁皮石斛及玛咖作为抗疲劳成分，所公开的蛹虫草及牡蛎肽的功效主要为提高免疫、抗炎、抗癌、抗菌、抗衰老、降血脂等。
6.专利cn 114468310 a公开了一种提高免疫力的肽组合物，包括如下重量份的原料：人参低聚肽粉10-30份，蛹虫草肽粉10-30份，枸杞肽粉10-30份，黄精肽粉10-30份，核桃肽粉5-18份和牛磺酸0.1-0.2份；其中，所述人参低聚肽粉、所述蛹虫草肽粉、所述枸杞肽粉、所述黄精肽粉和所述核桃肽粉中的肽含量均不低于70wt％，平均分子量均小于1000da。该组合物主要通过六种肽粉原料之间的相互配合，能够发挥协同作用，并通过多种作用机制调理机体五脏六腑，使免疫细胞始终保持活力，显著提高人体免疫力。


技术实现要素：

7.针对现有技术存在的抗疲劳组合物配方不合理，对机体造成危害的不足，本发明
的首要目的在于提供一种抗疲劳的蛹虫草肽组合物。
8.本发明的另一目的在于提供上述抗疲劳的蛹虫草肽组合物的制备方法。
9.本发明的再一目的在于提供上述抗疲劳的蛹虫草肽组合物在制备抗疲劳功能食品中的应用。
10.本发明目的通过以下技术方案实现：
11.一种抗疲劳的蛹虫草肽组合物，由如下重量百分含量的组分组成：蛹虫草提取物5-15％，肽类30-60％，益生元15-30％。
12.进一步地，所述肽类包括玉米低聚肽、大豆肽、海洋鱼低聚肽、牡蛎肽、胶原蛋白肽中的一种或几种。
13.进一步地，所述益生元包括低聚果糖、低聚半乳糖、菊粉、低聚木糖、低聚异麦芽糖中的一种或几种。
14.上述抗疲劳的蛹虫草肽组合物的制备方法，包括如下制备步骤：
15.(1)蛹虫草提取物的制备：将干燥的蛹虫草和提取溶剂以1:8-12的料液比(质量比)浸泡后加热提取，过滤，滤液经浓缩、干燥，得到蛹虫草提取物；
16.(2)混合：将步骤(1)所得蛹虫草提取物与肽类、益生元混合均匀，得到所述抗疲劳的蛹虫草肽组合物。
17.进一步地，步骤(1)中所述提取溶剂为水、乙醇、乙酸乙酯中的任意一种或两种以上的混合溶剂。更优选提取溶剂为水。
18.进一步地，步骤(1)中所述浸泡时间为30-60min。
19.进一步地，步骤(1)中所述加热提取的次数为2-3次，每次提取1-3h。
20.进一步地，步骤(1)中所述浓缩的方式包括常温浓缩、真空浓缩、单效浓缩、双效浓缩中的一种或多种的组合。
21.进一步地，步骤(1)中所述干燥的方式包括喷雾干燥、真空干燥、带式干燥中的一种或多种的组合。
22.进一步地，步骤(1)中所得蛹虫草提取物控制水分质量百分含量≤5％。
23.进一步地，步骤(2)中所述混合是指以等量递增的方式混合2-3次，每次10-40min。
24.进一步地，步骤(2)最终所得蛹虫草肽组合物控制水分质量百分含量≤7％。
25.上述抗疲劳的蛹虫草肽组合物在制备抗疲劳功能食品中的应用。
26.进一步地，所述应用步骤为：将抗疲劳的蛹虫草肽组合物与辅料、矫味剂等制剂成型，得到片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊剂、饮料或糖果等形态的功能食品。
27.与现有技术相比，本发明的有益效果是：
28.(1)本发明组合物通过合理的配方，按比例添加“蛹虫草提取物 肽”及益生元，起到抗疲劳和改善肠道环境的双重效果。同时，蛹虫草提取物和肽均为天然食物来源，益生元是对身体有益的膳食纤维，原料安全，弥补了现有抗疲劳产品易损害机体健康的不足。
29.(2)本发明采用束缚应激疲劳动物模型实验进行验证，结果表明蛹虫草肽组合物可以显著提高小鼠的自由活动次数，延长小鼠的力竭游泳时间；抑制血清urea指标，且效果显著优于蛹虫草提取物、肽类单独使用和不添加益生元的组合物。
30.(3)本发明的组合物采用现代化的提取工艺精制而成，操作简便易行，适合大规模生产。
具体实施方式
31.下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
32.实施例1
33.本实施例的一种具有抗疲劳作用的蛹虫草肽组合物，所述蛹虫草肽组合物由下述重量的原料制备而成：蛹虫草提取物8.3kg，玉米低聚肽25kg，大豆肽8.3kg，牡蛎肽0.17kg，低聚果糖8.29kg，菊粉8.3kg。
34.所述蛹虫草肽组合物的制备方法如下：
35.(1)将干燥的蛹虫草加水提取两次，第一次料液比为1:10，浸泡30min，100℃提取1.5h，第二次料液比为1:8，100℃提取1h，过滤，滤液减压浓缩，喷雾干燥，控制提取物水分≤5％，得蛹虫草提取物。
36.(2)将步骤(1)所得蛹虫草提取物与玉米低聚肽、大豆肽、牡蛎肽、低聚果糖、菊粉分3次，以等量递增的方法混合，分别混合10、10、20min，控制水分≤7％，即得本实施例的蛹虫草肽组合物。
37.实施例2
38.本实施例的一种具有抗疲劳作用的蛹虫草肽组合物，所述蛹虫草肽组合物由下述重量的原料制备而成的：蛹虫草提取物4.2kg，玉米低聚肽25kg，大豆肽8.3kg，牡蛎肽0.17kg，低聚果糖8.29kg，菊粉8.3kg。
39.所述蛹虫草肽组合物的制备方法如下：
40.(1)将干燥的蛹虫草加水提取两次，第一次料液比为1:10，浸泡40min，100℃提取1.5h，第二次料液比为1:8，100℃提取1h，过滤，滤液减压浓缩，喷雾干燥，控制提取物水分≤5％，得蛹虫草提取物。
41.(2)将步骤(1)所得蛹虫草提取物与玉米低聚肽，大豆肽、牡蛎肽、低聚果糖、菊粉分3次，以等量递增的方法混合，分别混合10、10、20min，控制水分≤7％，即得本实施例的蛹虫草肽组合物。
42.实施例3
43.本实施例的一种具有抗疲劳作用的蛹虫草肽组合物，所述蛹虫草肽组合物由下述重量的原料制备而成的：蛹虫草提取物8.3kg，大豆肽33.3kg，海洋鱼低聚肽0.17kg，低聚果糖8.29kg，菊粉8.3kg。
44.所述蛹虫草肽组合物的制备方法如下：
45.(1)将干燥的蛹虫草加水提取两次，第一次料液比为1:10，浸泡40min，100℃提取1.5h，第二次料液比为1:10，100℃提取1.5h，过滤，滤液减压浓缩，喷雾干燥，控制提取物水分≤5％，得蛹虫草提取物。
46.(2)将步骤(1)所得蛹虫草提取物与大豆肽、海洋鱼低聚肽、低聚果糖、菊粉分3次，以等量递增的方法混合，分别混合5、10、20min，控制水分≤7％，即得本实施例的蛹虫草肽组合物。
47.实施例4
48.本实施例的一种具有抗疲劳作用的蛹虫草肽组合物，所述蛹虫草肽组合物由下述重量的原料制备而成的：蛹虫草提取物8.3kg，大豆肽33.3kg，海洋鱼低聚肽0.17kg，低聚半乳糖8.29kg，菊粉8.3kg。
49.所述蛹虫草肽组合物的制备方法如下：
50.(1)将干燥的蛹虫草加水提取两次，第一次料液比为1:10，浸泡40min，100℃提取1.5h，第二次料液比为1:8，100℃提取1h，过滤，滤液减压浓缩，喷雾干燥，控制提取物水分≤5％，得蛹虫草提取物。
51.(2)将步骤(1)所得蛹虫草提取物与大豆肽、海洋鱼低聚肽、低聚半乳糖、菊粉分3次，以等量递增的方法混合，分别混合5、10、20min，控制水分≤7％，即得本实施例的蛹虫草肽组合物。
52.实施例5
53.本实施例的一种蛹虫草肽固体饮料，原料配比如下：实施例1组合物58.4％、牛磺酸0.13％，姜黄0.17％，蔗糖8.4％，山梨糖醇8.29％，赤藓糖醇8.29％，异麦芽酮糖醇8.29％，麦芽糖醇6.2％，柠檬酸0.83％，苹果酸0.50％，二氧化硅0.50％。
54.所述组合物的制备方法如下：
55.(1)称取部分实施例1组合物、姜黄、牛磺酸、三氯蔗糖、柠檬酸、苹果酸、二氧化硅投入混合设备中，先预混合5min，再分3次加入等量异麦芽酮糖醇进行混合，每次混合5min形成预混料，再将剩余异麦芽酮糖醇加入设备中，与预混料进行混合10min。
56.(2)将剩余实施例1组合物、山梨糖醇、赤藓糖醇、蔗糖、麦芽糖醇与步骤(1)的物料投入混合设备，混合20min，即得。
57.对比例1
58.本对比例的一种组合物a，与实施例1相比，不加入蛹虫草提取物组分，采用等量牡蛎肽成分替代，其余组分含量及制备方法相同。
59.对比例2
60.本对比例的一种组合物b，与实施例1相比，不加入玉米低聚肽、大豆肽和牡蛎肽的肽类成分，采用等量蛹虫草提取物组分替代，其余组分含量及制备方法相同。
61.对比例3
62.本对比例的一种组合物c，与实施例1相比，不加入低聚果糖和菊粉的益生元组分，其余组分含量及制备方法相同。
63.实验例1
64.将上述制备的实施例1和对比例1-3进行实验验证，考察其效果。
65.1、实验动物：balb/c小鼠，18～22g，雄性，spf级。
66.2、实验分组：将小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、蛹虫草肽组合物高剂量组(0.3g/ml)、蛹虫草肽组合物低剂量组(0.1g/ml)、组合物a(0.3g/ml)、组合物b(0.3g/ml)和组合物c(0.3g/ml)，每组12只，各剂量组按0.1ml/10g灌胃，连续灌胃给药28天，正常组和模型组给予等体积的纯净水。
67.3、实验仪器：离心机、全波长酶标仪、生化分析仪、小鼠自主活动仪、游泳箱、束缚管。
68.4、实验方法：
69.4.1自主活动能力实验
70.造模分组前，先将小鼠置于小鼠自主活动仪中，记录每只小鼠5min内的活动次数，即爬行次数和站立次数。根据实验数据，将实验小鼠按体重、活动次数进行分层随机分组。
71.末次给药后第二天，将受试小鼠置于自主活动仪中，记录每只小鼠5min内的活动次数，即爬行次数和站立次数；同时把各组小鼠分别集中在同一个饲养笼中，拍摄短视频(3min)，对各组小鼠活动情况进行评分，比较各组差异。
72.4.2游泳力竭实验
73.末次给药后第二天，模型组和给药组小鼠尾根部负小鼠体重3％的铅丝，正常组小鼠尾部不负重，放入水温为(24
±
2)℃、水深35cm的游泳箱中。记录各组小鼠的力竭游泳时间(从小鼠进入游泳箱开始游泳到小鼠头部全部沉入水中8s不能再浮出水面的时间)，并及时取出动物。若动物负重游泳15min仍未力竭，力竭游泳时间记为15min。比较各组游泳时间差异。
74.4.3血清中尿素(urea)测定
75.游泳力竭实验结束后，各组小鼠摘眼球法采血，静置后离心(4℃，1200g，10min)，分离血清并保存待测。
76.5、实验结果
77.表1各组合物对小鼠的抗疲劳实验结果
[0078][0079]
注：与模型组相比，*p《0.05,**p《0.01。
[0080]
如上表所示，与模型组相比，蛹虫草肽组合物高剂量组和低剂量组的自主活动次数显著增加(p《0.01)，说明其可以恢复小鼠一定的精神状态和活跃程度；低剂量组的力竭游泳时间显著增加(p《0.01)，说明其可以增强机体抗疲劳的能力；低/高剂量组的urea含量明显下降(p《0.01)，说明其能减少尿素的产生，提升机体的代谢能力。由此可以判定蛹虫草肽组合物具有明显的抗疲劳作用。
[0081]
与模型组相比，组合物c的自主活动次数显著增加(p《0.05)，urea有显著的下降p《0.05)，说明有一定的抗疲劳作用；力竭游泳时间有上升趋势，但无显著性差异，其效果不如蛹虫草肽组。组合物a和b的自主次数、力竭游泳时间和urea均无显著性差异，有一定的变化趋势，但效果明显不如蛹虫草肽组合物。说明本发明蛹虫草提取物与肽类的组合在抗疲劳效果方面具有协同作用。
[0082]
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其它的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。