一种抑菌组合物及其应用的制作方法

1.本发明涉及一种抑菌组合物，具体涉及一种包含水杨酸和透明质酸锌的抑菌组合物，该组合物可以用于抑制痤疮丙酸杆菌，还涉及一种皮肤外用制剂，属于化妆品或药品技术领域。


背景技术：

2.痤疮是常见的毛囊皮脂腺的慢性炎症性疾病。其发病因素可归纳为以下四点：(1)在雄激素作用下皮脂腺活跃，皮脂腺分泌增加，皮肤油腻；(2)毛囊皮脂腺角化异常，致上皮细胞和皮脂积聚于毛囊口，从而引发痤疮；(3)毛囊皮脂腺内的痤疮丙酸杆菌(p.acnes)大量繁殖；(4)化学和细胞的介质导致炎症。其中，p.acnes的致病机制可以概括为诱导炎症反应、促进毛囊皮脂腺上皮角化及促进皮脂腺分泌。因此，针对p.acnes的治疗成为治疗中、重度痤疮的重要方面。但是无论是外用还是口服抗生素，均有可能引起痤疮丙酸杆菌和非痤疮丙酸杆菌的耐药性，导致药物疗效降低，抗生素使用周期延长。人们期待安全有效的抗痤疮护肤品出现，高效抗p.acnes功效成分的开发必不可少。
3.水杨酸是一种多功能天然活性成分，存在于许多植物中，如柳树皮，属于非甾体类抗炎物质，具有抗炎、广谱抗菌能力，低浓度下双向调节角质细胞、高浓度具有松懈剥脱角质细胞能力以及美白的作用(抑制酪氨酸酶活性)。水杨酸被广泛应用于抗痤疮护肤品。夏栩琼等(夏栩琼，徐慧，陆雯丽，等.30％超分子水杨酸治疗寻常痤疮的疗效观察[j].中国皮肤性病学杂志，2019，33(5)：616-619)研究了30％超分子水杨酸治疗寻常痤疮的疗效，通过与果酸(aha)进行功效对比，结果显示30％超分子水杨酸疗效等同于aha，且更适合于炎症性皮疹，如脓包、结节等的治疗。
[0004]
透明质酸锌是透明质酸的锌盐，通过锌离子与透明质酸盐羧基上的金属离子进行离子交换制得，在医学上主要应用于皮肤伤口的愈合、消化性溃疡、抗氧化等，其具有安全性好，疗效好等特点。
[0005]
目前，针对透明质酸锌与水杨酸协同抑制痤疮丙酸杆菌的研究还未发现。


技术实现要素：

[0006]
为了解决上述课题，本发明人进行了认真研究，结果发现，水杨酸和透明质酸锌对痤疮丙酸杆菌均有抑制作用，且抑制效果与浓度成正向依赖关系。通过对水杨酸和透明质酸锌进行不同比例的复配，发现在一定的配比范围内两者具有显著的协同增效性。基于此研究结果，本发明提供了一种抑菌组合物，该组合物具有高效抑制痤疮丙酸杆菌的功效，且可以较大地降低水杨酸及透明质酸锌的用量，对皮肤的刺激性更小，成本更低，帮助痤疮患者减轻了对于口服或者外用抗生素的依赖。
[0007]
本发明具体技术方案如下：
[0008]
一种抑菌组合物，包含水杨酸和透明质酸锌。
[0009]
进一步的，所述抑菌组合物中，所述水杨酸和透明质酸锌的质量比大于0.1：1。
[0010]
进一步的，所述抑菌组合物中，所述水杨酸的含量为0.01～2wt％。
[0011]
进一步的，所述抑菌组合物中，所述透明质酸锌的含量为0.001～5wt％。
[0012]
一种皮肤外用制剂，包含上述抑菌组合物。
[0013]
上述抑菌组合物或皮肤外用制剂在制备抑制痤疮丙酸杆菌的产品中的应用。
[0014]
进一步的，上述应用中，所述抑菌组合物或皮肤外用制剂用于抑制痤疮形成。
[0015]
上述抑菌组合物或皮肤外用制剂在祛痘中的应用。
[0016]
本发明技术效果如下：
[0017]
本发明经过试验发现了透明质酸锌与水杨酸协同抑菌的增效作用，可较大量降低透明质酸锌与水杨酸的用量，既可降低成本又可降低水杨酸可能带来的刺激。而且，透明质酸锌和水杨酸区别于抗生素，痤疮患者可以在日常护肤中安全使用，不会产生依赖性，安全性更高，本发明水杨酸和透明质酸锌的组合为治疗痤疮的皮肤外用产品提供了新的思路。
具体实施方式
[0018]
下面，通过具体实施例对本发明进行进一步的阐述和说明，下述实施例仅为示例性，并不对其内容进行限定。
[0019]
除非另外定义，本说明书中有关技术的和科学的术语与本领域内的技术人员所通常理解的意思相同。虽然在实验或实际应用中可以应用与此间所述相似或相同的方法和材料，本文还是在下文中对材料和方法做了描述。在相冲突的情况下，以本说明书包括其中定义为准，另外，材料、方法和例子仅供说明，而不具限制性。以下结合具体实施例对本技术作进一步的说明，但不用来限制本技术的范围。
[0020]
本技术提供了一种抑菌组合物，该组合物包含水杨酸和透明质酸锌。
[0021]
水杨酸是一种脂溶性的有机酸，化学式为c7h6o3，存在于自然界的柳树皮、白珠树叶及甜桦树中。水杨酸具有去角质、清理毛孔的能力，可以淡化色素斑、缩小毛孔、去除细小皱纹及改善日晒引起的老化等效果。但是，高浓度水杨酸具有一定的伤害性，比如皮肤刺激性。
[0022]
透明质酸锌是透明质酸的锌盐，通过锌离子与透明质酸盐羧基上的金属离子进行离子交换制得。透明质酸锌用于预防和治疗溃疡，促进皮肤伤口愈合，具有安全性好，疗效高等特点。透明质酸锌具有一定的抑菌作用，理论上透明质酸锌的含量越高抑菌效果越好，但是透明质酸锌本身具有一定粘度，高添加量会呈现凝胶状态，因此在护肤品中的添加量一般不超过5％；此外，透明质酸锌价格较高，考虑成本要求也不会添加高剂量的透明质酸锌。
[0023]
在本技术的一些实施方式中，所述抑菌组合物中水杨酸和透明质酸锌的质量比大于0.1：1，优选为(0.1-100)：1，进一步优选为(0.5-80)：1，例如，水杨酸和透明质酸锌的质量比可以是0.1：1、0.2：1、0.3：1、0.4：1、0.5：1、0.6：1、0.7：1、0.8：1、0.9：1、1：1、2：1、3：1、4：1、5：1、6：1、7：1、8：1、9：1、10：1、15：1、20：1、25：1、30：1、35：1、40：1、45：1、50：1、55：1、60：1、65：1、70：1、75：1、80：1、85：1、90：1、95：1、100：1、200：1、300：1、400：1、500：1、600：1、700：1、800：1、900：1、1000：1或其之间的任意范围。
[0024]
在本技术中，所述透明质酸锌可以是单一分子量的透明质酸锌，也可以是不同分子量的透明质酸锌的混合物。无论是单一分子量的透明质酸锌还是混合的透明质酸锌，其
分子量均可以从现有技术中公开的可以用于化妆品中的透明质酸锌的分子量中任意选择，各分子量段的透明质酸锌与水杨酸搭配后增效效果类似。例如分子量可以从≤300万的范围中选择，可以从≤150万的范围中选择，可以从≤80万的范围中选择，可以从≤50万的范围中选择，可以从≤10万的范围中选择，可以从≤1万的范围中选择。
[0025]
在本发明某一具体实施方式中，所述透明质酸锌是单一分子量的透明质酸锌，透明质酸锌的分子量选自≤150万道尔顿，例如0.3万da、0.5万da、1万da、3万da、5万da、10万da、20万da、30万da、40万da、50万da、80万da、100万da、120万da、130万da、140万da、150万da或其之间的任意范围。
[0026]
在本发明某一具体实施方式中，所述透明质酸锌是两种或两种以上的不同分子量的透明质酸锌的混合物，透明质酸锌的分子量均选自≤150万道尔顿，例如0.3万da、0.5万da、1万da、3万da、5万da、10万da、20万da、30万da、40万da、50万da、80万da、100万da、120万da、130万da、140万da、150万da或其之间的任意范围。
[0027]
在本技术的一些实施方式中，以所述抑菌组合物总重量为100％计，水杨酸的含量为0.01～2wt％，例如0.01wt％、0.02wt％、0.05wt％、0.06wt％、0.08wt％、0.1wt％、0.2wt％、0.3wt％、0.4wt％、0.5wt％、0.6wt％、0.7wt％、0.8wt％、0.9wt％、1.0wt％、2.0wt％。优选的，水杨酸在抑菌组合物中的含量为0.05～1wt％，更优选为0.1～0.8wt％。
[0028]
在本技术的一些实施方式中，以所述抑菌组合物总重量为100％计，透明质酸锌的含量为0.001～5wt％，例如0.001wt％、0.002wt％、0.005wt％、0.008wt％、0.01wt％、0.02wt％、0.05wt％、0.06wt％、0.08wt％、0.1wt％、0.2wt％、0.3wt％、0.4wt％、0.5wt％、0.6wt％、0.7wt％、0.8wt％、0.9wt％、1.0wt％、2.0wt％、3.0wt％、4.0wt％、5.0wt％。优选的，透明质酸锌在抑菌组合物中的含量为0.005～1.0wt％，更优选为0.01～0.4wt％。其中，透明质酸锌指的是所有透明质酸锌的总和。
[0029]
在本技术的一些实施方式中，本技术提供一种皮肤外用制剂，其包含上述抑菌组合物。
[0030]
在本技术的一些实施方式中，所述皮肤外用制剂中，还包括其他功能性成分，进一步的，所述功能性成分包括抑菌成分、祛痘成分、保湿成分、美白成分、修护成分、舒敏成分中的至少一种。
[0031]
在本技术的一些实施方式中，所述抑菌产品还包括制成各种剂型所需的辅料。例如，所述辅料可以为溶剂、增稠剂、增溶剂、助溶剂、稳定剂、柔顺剂、气雾剂溶剂、防腐剂、表面活性剂、控释剂、缓释剂、芳香剂、调色剂、促渗剂、保湿剂、乳化剂、塑形剂、珠光剂等中的一种或者多种。
[0032]
在本技术的一些实施方式中，所述抑菌组合物或皮肤外用制剂为药品或化妆品。当为药品时，可以根据现有技术的方法制成各种可行的外用剂型，例如乳膏剂、溶液剂等。当为化妆品时，可以为洁面类产品、面膜、化妆水、精华液、乳液、膏霜、粉底等各种类型。
[0033]
在本技术的一些实施方式中，上述抑菌组合物或上述皮肤外用制剂在制备抑制痤疮丙酸杆菌的产品中的应用。
[0034]
进一步地，所述抑菌组合物或皮肤外用制剂用于抑制痤疮形成。
[0035]
在本技术的一些实施方式中，上述抑菌组合物或上述皮肤外用制剂在祛痘中的应用。
[0036]
下述实施例中，所用原料均能从市场中买到，其中透明质酸锌来自华熙生物科技股份有限公司，水杨酸来自biogenics,inc.,型号为sa-200,该原料中水杨酸的含量为40wt％,为了增加水杨酸的水溶性该原料还有辅料成分：黄原胶、支链淀粉及糊精。
[0037]
下述实施例中，如无特别说明，所述浓度均为质量百分浓度。
[0038]
实施例1
[0039]
组合物配方见下表1，成分为：分子量为3-5万的透明质酸锌0.01％,sa-200 0.5％(以水杨酸计含量为0.2％)，水补足100％。
[0040]
组合物配制方法为：将去离子水加热至85-90℃，保温25分钟，然后冷却至室温待用；取0.01g分子量为3-5万的透明质酸锌及0.5g sa-200(水杨酸净含量0.2g),加上述的去离子水至100g，搅拌至完全溶解，即得。
[0041]
实施例2-23
[0042]
按照下表1的配方改变有效成分透明质酸锌和水杨酸的情况，配制一系列不同的组合物，组合物配制方法参考实施例1。
[0043]
表1
[0044][0045]
对比例1-17
[0046]
按照下表2的配方改变有效成分透明质酸锌和水杨酸的情况，配制一系列不同的组合物，组合物配制方法参考实施例1。
[0047]
表2
[0048][0049]
对比例18-19
[0050]
按照下表3的配方配制一系列不同的组合物，组合物配制方法参考实施例1。
[0051]
表3
[0052] 有效成分及含量水含量(％)对比例180.05％的透明质酸钠(20-40万da)补足至100对比例190.05％的透明质酸钠(20-40万da) 0.2％的水杨酸补足至100
[0053]
对比例20
[0054]
将sa-200去除水杨酸之后的辅料部分(即黄原胶、支链淀粉及糊精的混合物)1.0g加入水中，参照实施例1的方法配成浓度1％的组合物。
[0055]
对比例21
[0056]
将分子量为3-5万的透明质酸锌0.1g，sa-200去除水杨酸之后的辅料部分(即黄原胶、支链淀粉及糊精的混合物)1.0g加入水中，参照实施例1的方法配成组合物。
[0057]
试验例痤疮丙酸杆菌抑菌实验
[0058]
采用悬液定量法来测试上述各实施例和对比例制备的组合物的抑菌性能。
[0059]
试验菌种为痤疮丙酸杆菌atcc6919，严格按照操作规范，传代不超过5代，制备浓
度约为106个/ml的新鲜试验菌液。
[0060]
培养基为痤疮丙酸杆菌固体培养基，配方(g/l)：蛋白胨10.0，牛肉粉10.0，氯化钠5.0，酵母浸出粉3.0，葡萄糖5.0，乙酸钠3.0，可溶性淀粉1.0，l-半胱氨酸盐酸盐0.5，琼脂15.0。培养基配制后高压蒸汽灭菌，冷却至55-60℃倾注90mm无菌平板中，备用。
[0061]
试验步骤：
[0062]
1、吸取试验样品(各实施例和对比例的组合物)5.0ml放入灭菌试管中，20℃恒温5min。
[0063]
2、吸取试验菌液0.1ml加入到含5.0ml样品的试管中，迅速混匀，并立即计时。可根据抑菌成分及产品特点选择作用时间(如30分钟、1小时等)。
[0064]
3、作用至设定时间后，取试验菌与样品的混合液0.5ml，加入到含4.5ml经灭菌的0.03mol/l磷酸盐缓冲液(pbs)中，混匀。
[0065]
4、放置10分钟后，吸取0.1ml样液(或作适当稀释后，取其中2～3个稀释度的稀释液)在预制的痤疮丙酸杆菌培养基平板上涂布，涂布后的平板在37℃生化培养箱中厌氧培养2-3天后，做活菌菌落计数。
[0066]
5、以灭菌的pbs代替试验样品，同时按以上步骤操作，作为对照样品。
[0067]
实验重复3次，求其平均值。
[0068]
抑菌率(％)＝(i-ii)/i
×
100，i为对照样品菌落数，ii为试验样品菌落数。
[0069]
实验结果如下表4所示。
[0070]
表4各组合物对痤疮丙酸杆菌1h的抑制率
[0071]
[0072]
[0073][0074]
从上述实验结果可见，对比例1-17的测试结果表明，单独使用透明质酸锌或水杨酸抑制痤疮丙酸杆菌，抑菌率与含量均呈正相关性；更进一步地，同等剂量下，单一分子量的透明质酸锌和不同分子量的透明质酸锌的混合物抑菌效差异不大，不同分子量的单一透明质酸锌抑菌效差异也不大。
[0075]
实施例1-23的产品抑制痤疮丙酸杆菌的抑菌率明显高于对比例中相应的单独使用水杨酸加上单独使用透明质酸锌的抑菌率之和，可见透明质酸锌和水杨酸在抑制痤疮丙酸杆菌方面具有协同增效效果。对比例18-19的测试结果表明，透明质酸钠对痤疮丙酸杆菌没有抑制效果，与水杨酸也没有协同抑菌效果。
[0076]
由对比例20的结果可见，sa-200的辅料成分黄原胶、支链淀粉及糊精对痤疮丙酸杆菌没有抑制作用，所以虽然实施例应用的是sa-200，但是sa-200的抑菌功效来源于水杨
酸，由对比例21的结果可见，透明质酸锌与sa-200的辅料成分没有协同抑制痤疮丙酸杆菌的效果，透明质酸锌与sa-200的协同效果实际来源于透明质酸锌与水杨酸。