一种基于Lpp引导序列靶向呈递和高效表达外源抗原的重组沙门菌构建方法

技术特征：
1.一种基于lpp引导序列靶向呈递和高效表达外源抗原的重组沙门菌的重组表达质粒ps-lpp-saoa，其特征在于，所述重组表达质粒ps-lpp-saoa包括大肠杆菌lpp引导序列，载体为ps-saoa质粒。2.根据权利要求1所述的一种基于lpp引导序列靶向呈递和高效表达外源抗原的重组沙门菌构建方法，其特征在于，所述方法步骤如下：s1：构建重组表达质粒ps-lpp-saoa；s2：利用重组表达质粒ps-lpp-saoa构建表达saoa蛋白的重组猪霍乱沙门菌载体rsc0016/ps-lpp-saoa株。3.根据权利要求2所述的一种基于lpp引导序列靶向呈递和高效表达外源抗原的重组沙门菌构建方法，其特征在于，所述s1的具体步骤如下：以大肠杆菌lpp引导序列为模板，设计合成lpp引导序列；利用同源重组方法将大肠杆菌lpp引导序列引入到ps-saoa质粒中，形成重组表达质粒ps-lpp-saoa。4.根据权利要求2所述的一种基于lpp引导序列靶向呈递和高效表达外源抗原的重组沙门菌构建方法，其特征在于，所述s2的具体步骤如下：在猪霍乱沙门菌载体菌株rsc0016中引入ps-lpp-saoa质粒，形成表达saoa蛋白的重组猪霍乱沙门菌载体rsc0016/ps-lpp-saoa株。

技术总结
本发明公开一种基于Lpp引导序列靶向呈递和高效表达外源抗原的重组沙门菌构建方法，利用同源重组方法将大肠杆菌Lpp引导序列引入到本实验室前期构建的pS-SaoA质粒中，形成重组表达质粒pS-Lpp-SaoA，在猪霍乱沙门菌载体菌株rSC0016中引入pS-Lpp-SaoA质粒，形成重组猪霍乱沙门菌rSC0016（pS-Lpp-SaoA）；外源抗原SaoA在该菌株及其OMVs中可以高效表达和靶向呈递，免疫小鼠后可产生强大的体液免疫和细胞免疫，并产生高水平的细胞因子，保护小鼠免受猪链球菌致死剂量的攻击；本发明为无佐剂OMVs疫苗平台提供了一种有前景的通用策略，具有较大的市场应用潜力和潜在的经济效益。大的市场应用潜力和潜在的经济效益。大的市场应用潜力和潜在的经济效益。


技术研发人员：石火英 李权 周国栋 费霞 田一辰
受保护的技术使用者：扬州大学
技术研发日：2022.08.16
技术公布日：2022/11/15