氨基环丁烷作为单酰基甘油脂肪酶调节剂的制作方法

neurosci.，2004年9月15日，24(37):8068-74)中。与野生型对照相比，mgl表达的基因消融引起大脑2-ag水平增加10倍而不影响花生四烯乙醇胺浓度(schlosburg等人，nat neurosci.，2010年9月，13(9):1113-9)。
4.因此，mgl调节提供了一个令人关注的用于增强大麻素系统的策略。该方法的主要优点是，将只调节有效产生内源性大麻素的大脑区域，从而潜在地最大程度减少与外源性cb1激动剂相关的副作用。在动物中通过共价抑制剂所致mgl的药理学失活增加了大脑和外周组织中的2-ag含量，并且已发现会产生依赖于cb1和/或cb2受体的镇痛、抗焦虑和抗炎效果(long等人，nat chem biol.，2009年1月，5(1):37-44；ghosh等人，life sci.，2013年3月19日，92(8-9):498-505；bedse等人，biol psychiatry.，2017年10月1日，82(7):488-499；bernal-chico等人，glia.，2015年1月，63(1):163-76；patel等人，neurosci biobehav rev.，2017年5月，76(pt a):56-66；betse等人，transl psychiatry.，2018年4月26日，8(1):92)。除了mgl在终止2-ag信号传导方面的作用之外，mgl调节(包括mgl抑制)还促进对神经炎症的cb1/2非依赖性效应(nomura等人，science.，2011年11月11日，334(6057):809-13)。mgl调节(包括mgl抑制)导致患有以下疾病的动物模型中促炎性前列腺素信号传导减少：创伤性脑损伤(katz等人，j neurotrauma.，2015年3月1日，32(5):297-306；zhang等人，j cereb blood flow metab.，2015年3月31日，35(4):443-453)，神经退行性疾病，包括阿尔茨海默病(piro等人，cell rep.，2012年6月28日，1(6):617-23；wenzel等人，life sci.，2018年8月15日，207:314-322；chen等人，cell rep.，2012年11月29日，2(5):1329-39)、帕金森氏病(nomura等人，science，2011年11月11日，334(6057),809-13；pasquarelli等人，neurochem int.，2017年11月，110:14-24)、肌萎缩性脊髓侧索硬化症(pasquarelli等人，neuropharmacology，2017年9月15日，124:157-169)、多发性硬化症(hernadez-torres等人，angew chem int ed engl.，2014年12月8日，53(50):13765-70；bernal-chico等人，glia.，2015年1月，63(1):163-76)、亨廷顿氏舞蹈病(covey等人，neuropsychopharmacology,2018,43,2056-2063)、图雷特综合症和癫痫持续状态(terrone等人，epilepsia.，2018年1月，59(1)，79-91；von ruden等人，neurobiol dis.，2015年5月，77:238-45)。
5.因此，通过增强大麻素系统并减弱促炎级联反应，mgl调节(包括mgl抑制)为一大批复杂疾病的治疗提供了引人注目的治疗方法。重要的是，动物中的mgl调节(包括mgl抑制)不产生用δ
9-四氢大麻酚和其他cb1激动剂观察到的全面神经行为效应(tuo等人，j med chem.，2017年1月12日，60(1),4-46；mulvihill等人，life sci.，2013年3月19日，92(8-9),492-7)。
6.内源性大麻素低活性是治疗抑郁症、焦虑症和创伤后应激障碍的风险因素。人类使用大麻的数千年历史，以及人类用内源性大麻素拮抗剂利莫那班治疗的短暂时期为该假设提供了支持。患有重度抑郁症的个体中2-ag水平有所降低(hill等人，pharmacopsychiatry.，2008年3月，41(2):48
–
53；hill等人，psychoneuroendocrinology.，2009年9月，34(8):1257
–
1262.)。低循环2-ag水平预测抑郁发病率(hauer等人，rev neurosci.,2012,23(5-6):681-90)。已在患有创伤后应激障碍(ptsd)的患者中发现循环2-ag减少(hill等人，psychoneuroendocrinology,2013,38(12),2952-2961)。暴露于长期应激源的健康志愿者表现出循环2-ag水平逐渐降低，这与正面情绪量度开始减少相关联(yi
等人，progress in neuro-psychopharmacology and biological psychiatry,2016,67(3),92-97)。cb1受体反向激动剂/拮抗剂利莫那班由于严重抑郁症和自杀意念的高发生率已从市场上召回(christensen等人，the lancet,2007,370,1706-1713)。因此，mgl调节剂潜在地可用于治疗情绪障碍、焦虑、ptsd、自闭症谱系障碍和阿斯伯格综合症(asperger syndrome)(folkes等人，j clin invest.2020；130(4):1728-1742，jung等人，nature communications,2012,3,1080；wang等人，mol psychiatry，2018年8月，23(8):1798
–
1806)。
7.大麻素受体激动剂在临床上用于治疗疼痛、痉挛、呕吐和厌食症(di marzo等人，annu rev med.,2006,57:553-74；ligresti等人，curr opin chem biol.，2009年6月，13(3):321-31)。因此，mgl调节剂(包括mgl抑制剂)也可潜在地用于这些适应症。mgl在有毒化学品疼痛、炎性疼痛、热疼痛和神经性疼痛的动物模型中发挥cb1依赖性镇痛效应(guindon等人，br j pharmacol.，2011年8月，163(7):1464-78；kinsey等人，j pharmacol exp ther.，2009年9月，330(3):902-10；long等人，nat chem biol.，2009年1月，5(1):37-44)。mgl阻断减少了经受慢性压迫性坐骨神经损伤的小鼠中的机械性和丙酮诱导的冷触诱发痛(kinsey等人，j pharmacol exp ther.，2009年9月，330(3):902-10)。mgl抑制产生耐受性、便秘和拟大麻素副作用减弱的阿片节约事件(wilkerson等人，j pharmacol exp ther.，2016年4月，357(1):145-56)。mgl阻断在炎性肠病模型中是保护性的(alhouayek等人，faseb j.，2011年8月，25(8):2711-21)。mgl抑制还逆转化学疗法诱发的神经病变的小鼠模型中由紫杉醇诱发的伤害性感受行为和促炎标志物(curry等人，j pharmacol exp ther.，2018年7月，366(1):169-18)。mgl抑制剂还潜在地可用于治疗膀胱的慢性炎性病症如间质性膀胱炎(chinnadurai等人，2019年10月；131:109321)。
8.对2-ag水解的抑制产生抗增殖活性并降低前列腺癌细胞侵入性(nithipatikom等人，cancer res.，2004年12月15日，64(24):8826-30；nithipatikom等人，biochem biophys res commun.，2005年7月15日，332(4):1028-33；nithipatikom等人，prostaglandins other lipid mediat.，2011年2月，94(1-2):34-43)。mgl在攻击性人癌细胞和原发性肿瘤中上调，其中mgl具有提供游离脂肪酸的脂解来源以用于合成促进癌症攻击性的致癌信号传导脂质的独特作用。因此，除了mgl在介导的内源性大麻素信号传导中的生理作用之外，癌症中的mgl在调节用于在恶性人癌细胞中合成原致癌基因信号传导脂质的脂肪酸前体池方面起到独特的作用。
9.mgl阻断显示鼩鼱呕吐的氯化锂模型中的止吐和抗恶心效果(sticht等人，br j pharmacol.，2012年4月，165(8):2425-35)。
10.mgl调节剂(包括mgl抑制剂)可在调节对阿片类药物的药物依赖性方面具有效用。mgl阻断降低小鼠中纳络酮催促的吗啡戒断症状的强度。mgl阻断还减弱吗啡依赖性小鼠中的自然戒断体征(ramesh等人，j pharmacol exp ther.，2011年10月，339(1):173-85)。
11.mgl调节剂也潜在地可用于治疗眼部病症，包括但不限于青光眼和由于眼内压升高引起的疾病状态(miller等人，pharmaceuticals,2018,11,50)。


技术实现要素：

12.本发明的实施方案涉及化学实体、含有化学实体的药物组合物、制备和纯化化学
实体的方法以及使用化学实体治疗与mgl调节相关的疾病、障碍和病症的方法。本发明的附加实施方案是使用本发明的至少一种化学实体治疗患有或诊断有与mgl调节相关的疾病、障碍或病症的受试者的方法。
13.由以下具体实施方式和通过实施本发明，本发明的附加实施方案、特征和优点将显而易见。
14.本文描述了式(i)的化合物：
[0015][0016]
其中
[0017]
x为ch2或o；
[0018]
r1为h；
[0019]r2a
和r
2b
各自独立地选自h和c
1-4
烷基；
[0020]
r3选自：
[0021]
(i)苯基、苄基或单环杂芳基，其各自任选地被选自以下的一个、两个或三个取代基取代：卤素、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷基-oh、oc
1-6
烷基、oc
1-6
卤代烷基、sc
1-6
烷基、sf5、si(ch3)3、nrarb、c
3-6
环烷基、oc
3-6
环烷基、苯基、o-苯基和o-吡啶基，其中每个环烷基、苯基或吡啶基任选地被一个或两个c
1-4
烷基、c
1-4
卤代烷基或卤素基团取代；或苯基、苄基或单环杂芳基上的两个相邻环取代基与其所连接的原子合在一起形成稠合的单环c
5-6
环烷基或杂环烷基环，每个环任选地被一个或两个c
1-4
烷基、c
1-4
卤代烷基或卤素基团取代；
[0022]
其中ra和rb各自独立地为h或c
1-4
烷基；
[0023]
(ii)任选地被c
1-4
烷基或卤素取代的双环杂芳基；和
[0024]
(iii)任选地被c
1-4
烷基、c
1-4
卤代烷基或卤素取代的c
3-6
烷基或c
3-6
环烷基；
[0025]
r4为c
1-6
烷基；
[0026]
以及其药学上可接受的盐、同位素、n-氧化物、溶剂化物和立体异构体。
[0027]
在一些实施方案中为式(i)的化合物：
[0028][0029]
其中
[0030]
x为ch2或o；
[0031]
r1为h；
[0032]r2a
和r
2b
各自为h；
[0033]
r3选自：c
1-6
烷基(任选地c
3-6
烷基)；c
3-6
环烷基；苄基；苯基；被各自独立地选自以下的一个或两个成员取代的苯基：卤素、c
1-6
烷基、oc
1-6
烷基、c
3-6
环烷基和被ch3或cf3取代的c
3-6
环烷基；2,3-二氢-1h-茚-5-基；双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-3-基；以及5,6,7,8-四
氢萘-2-基；并且
[0034]
r4为c
1-6
烷基；
[0035]
以及其药学上可接受的盐、同位素、n-氧化物、溶剂化物和立体异构体。
具体实施方式
[0036]
如本文所用，术语“包括”、“含有”和“包含”是以其开放的、非限制性的意思使用。
[0037]
除非在具体使用实例中具体说明，否则术语“烷基”是指链中具有1至8个碳原子的直链或支链烷基基团。烷基基团的示例包括甲基(me)、乙基(et)、正丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基(tbu)、戊基、异戊基、叔戊基、己基、异己基以及根据本领域的普通技能和本文提供的教导会被认为与前述示例中的任何一者等同的基团。“c
1-6
烷基”是指链中具有1至6个碳原子的直链或支链烷基基团。“c
1-4
烷基”是指链中具有1至4个碳原子的直链或支链烷基基团。
[0038]
术语“环烷基”是指每个碳环具有3至12个环原子的饱和或部分饱和的单环、稠合多环或螺多环的碳环。环烷基基团的例示性示例包括以适当键合部分的形式出现的下述实体：
[0039][0040]
术语“卤素”或“卤代基”表示氯、氟、溴或碘。
[0041]
术语“卤代烷基”是指链中具有1至6个碳原子的直链或支链烷基基团，其任选地用卤素取代氢。如本文所用，术语“c
1-4
卤代烷基”是指链中具有1至4个碳原子的直链或支链烷基基团，其任选地用卤素取代氢。“卤代烷基”基团的示例包括三氟甲基(cf3)、二氟甲基(cf2h)、单氟甲基(ch2f)、五氟乙基(cf2cf3)、四氟乙基(chfcf3)、单氟乙基(ch2ch2f)、三氟乙基(ch2cf3)、四氟三氟甲基乙基(cf(cf3)2)，以及根据本领域普通技术人员和本文提供的教导内容将被认为等同于前述示例中的任一者的基团。
[0042]
如本文所用，术语“杂芳基”是指包含5至14个环原子的芳族单环或多环环系，其中环原子中的1至4个环原子独立地为o、n或s，并且其余的环原子为碳原子。在一个实施方案中，杂芳基基团具有5至10个环原子。在另一个实施方案中，杂芳基基团为单环并具有5或6个环原子。在另一个实施方案中，杂芳基基团为单环并具有5或6个环原子和至少一个氮环原子。杂芳基基团经由环碳原子接合，并且杂芳基的任何氮原子可任选地被氧化成对应的n-氧化物。术语“杂芳基”也涵盖如上定义的已稠合至苯环的杂芳基基团。
[0043][0044]
如本文所用，术语“杂环烷基”是指非芳族的环系，环原子中的1至4个环原子独立地为o、n或s，并且其余的环原子为碳原子，其可任选地稠合至另一个环(芳族或杂芳族的)。例示性杂环烷基的非限制性示例包括：
[0045]
术语“芳基”是指每个环(芳基基团中的碳原子为sp2杂交的)具有6个原子的单环
芳族碳环(环原子全部为碳的环结构)。
[0046]
术语“苯基”表示以下部分：
[0047]
术语“2,3二氢-1h-茚-5-基”表示以下部分：
[0048]
术语“双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-3-基”表示以下部分：
[0049]
术语“5,6,7,8-四氢萘-2-基”表示以下部分：
[0050]
本领域技术人员将认识到，上文列出或举例说明的杂芳基、杂环烷基、环烷基或芳基基团的物质并非穷举性的，并且还可选择在这些限定术语范围内的其他物质。
[0051]
术语“取代的”是指指定的基团或部分带有一个或多个取代基。术语“未取代的”是指指定的基团不带有取代基。术语“任选地取代的”是指特定的基团是未取代的或者被一个或多个取代基取代。如果术语“取代的”用于描述结构体系，则指取代在该体系上任何化合价允许的位置处发生。
[0052]
术语“可变连接点”意指允许基团连接在结构中的多于一个另选位置处。连接总是代替环原子中的一个环原子上的氢原子。换句话讲，键合的所有排列由单个示意图表示，如以下例证所示。
[0053][0054]
本领域技术人员将认识到，如果给定环存在多于一个此类取代基；则每个取代基的键合独立于所有其他取代基。上文列出或举例说明的基团并非穷举性的。
[0055]
术语“取代的”是指指定的基团或部分带有一个或多个取代基。术语“未取代的”是指指定的基团不带有取代基。术语“任选地取代的”是指特定的基团是未取代的或者被一个或多个取代基取代。如果术语“取代的”用于描述结构体系，则指取代在该体系上任何化合价允许的位置处发生。
[0056]
本文给出的任何式旨在表示具有该结构式所示的结构的化合物以及某些变型或形式。具体地，本文给出的任何式的化合物可具有不对称中心，因此以不同的对映体形式存在。具有通式的化合物的所有光学异构体和立体异构体以及它们的混合物均被认为是在此类式的范围内。本发明的化合物可具有一个或多个非对称中心；因此，此类化合物可作为单
独的(r)-或(s)-立体异构体或作为它们的混合物制备。因此，本文给出的任何式旨在表示外消旋体、其对映体形式中的一种或多种形式、其非对映体形式中的一种或多种形式、以及它们的混合物。另外，本文给出的任何式旨在还指此类化合物的水合物、溶剂化物和多晶型物中的任一者、以及它们的混合物，即使此类形式未明确列出。
[0057]
在立构中心处的术语“r”指明立构中心仅具有r-构型，如本领域中所定义；同样，术语“s”意指立构中心仅具有s-构型。如本文所用，术语“rs”是指以r-构型和s-构型的混合物存在的立构中心。
[0058]
含有未划有立体键标号的一个立构中心的化合物是2种对映体的混合物。含有均未划有立体键标号的2个立构中心的化合物为4种非对映体的混合物。具有均标记“rs”且划有立体键标号的2个立构中心的化合物为具有如所划的相对立体化学的2成分混合物。未划有立体键标号的未标记立构中心为r-构型和s-构型的混合物。对于划有立体键标号的未标记立构中心，绝对立体化学性是如所叙述的。
[0059]
本文中对化合物的提及代表着对以下任何一者的提及：(a)这种化合物的实际述及的形式，和(b)这种化合物在提到化合物时所考虑的该化合物所处介质中的任何形式。例如，本文中对化合物诸如r-cooh的提及涵盖对以下中的任一者的提及：例如，r-cooh(s)、r-cooh(sol)和r-coo-(sol)。在此示例中，r-cooh(s)是指固体化合物，其例如可以为片剂或某些其他固体药物组合物或制剂的形式；r-cooh(sol)是指化合物在溶剂中的未离解形式；而r-coo-(sol)是指化合物在溶剂中的离解形式，诸如化合物在含水环境中的离解形式，无论此类离解形式是衍生自r-cooh、其盐还是衍生自在所考虑介质中经解离后产生r-coo-的任何其他实体。在另一个示例中，诸如“使实体暴露于式r-cooh的化合物”的表述是指使该实体暴露于化合物r-cooh在发生该暴露的介质中所存在的一种或多种形式。在又一个示例中，诸如“使实体与式r-cooh的化合物反应”之类的表述是指使(a)这种实体(为这种实体在发生该反应的介质中所存在的一种或多种化学相关形式)与(b)化合物r-cooh在发生该反应的介质中所存在的一种或多种化学相关形式反应。就这一点而言，如果该实体例如处于含水环境中，则应理解化合物r-cooh是在该相同介质中，因此该实体正被暴露于诸如r-cooh(aq)和/或r-coo-(aq)之类的物质，其中下标“(aq)”根据其在化学和生物化学中的常规含义代表“含水”。在这些命名示例中选择了甲酸官能团；然而，此选择并非意图进行限定，而仅为举例说明。应当理解，可用其他官能团提供类似的示例，这些官能团包括但不限于羟基、碱性氮成员(如在胺中的那些)和任何其他在含有该化合物的介质中按照已知方式进行相互作用或转化的基团。此类相互作用和转化包括但不限于解离、缔合、互变异构、溶剂分解包括水解、溶剂化包括水合、质子化和去质子化。就这一点本文不提供进一步的示例，因为在给定介质中的这些相互作用和转化为本领域任何普通技术人员所知。
[0060]
本文给定的任何式还旨在表示化合物的未标记形式以及同位素标记形式。同位素标记的化合物具有本文给出式所描绘的结构，不同的是一个或多个原子被呈富集形式的具有选定的原子量或质量数的原子所代替。可以以超过天然丰度的形式掺入本发明化合物中的同位素的示例包括氢、碳、氮、氧、磷、氟、氯和碘的同位素，分别诸如2h(或化学符号d)、3h(或化学符号t)、
11
c、
13
c、
14
c、
15
n、
18
o、
17
o、
31
p、
32
p、
35
s、
18
f、
36
cl和
125
i。此类同位素标记的化合物可用于代谢研究(优选用
14
c标记)、反应动力学研究(例如用2h或3h标记)、检测或成像技术[诸如正电子发射断层扫描术(pet)或单光子发射电子计算机断层扫描术(spect)]，包括
药物或底物的组织分布测定法，或者可用于患者的放射治疗。具体地，
18
f或
11
c标记的化合物对于pet或spect研究可能是尤其优选的。此外，用较重的同位素如氘(即2h或d)进行置换可以提供由更大的代谢稳定性所带来的某些治疗优势，例如体内半衰期延长或需要的剂量减少。同位素标记的本发明的化合物通常可以通过用容易获得的同位素标记的试剂替代非同位素标记的试剂以执行下文描述的“方案”中或“实施例和制备”中所公开的程序来制备。
[0061]
当提及本文给出的任何式时，对于指定的变量，从可能的种类的列表中选择具体的部分并非意图限定此类变量在其他地方出现时要选择相同的种类。换句话讲，除非另外指明，否则当变量不止一次出现时，从指定列表中选择该种类与对式别处的同一变量选择该种类无关。
[0062]
术语c
n-m
烷基是指无论是直链还是支链的脂族链，其中链中碳成员的总数n满足n≤n≤m，并且m》n。
[0063]
当相同的多个取代基被指派给多个基团时，指派给此类基团中的每一个基团的具体单独的取代基指派意在相对于指派给其余基团的具体单独的取代基独立地选取。以举例的方式，但并非作为限制，如果基团q和r中的每一者可为h或f，则对q的h或f的选择独立于对r的h或f的选择来进行，因此除非另有明确说明，否则对q的指派的选择不确定或决定对r的指派的选择，或反之，对r的指派的选择不确定或决定对q的指派的选择。就这一点而言，例示性权利要求表述将理解为“q和r中的每一者独立地为h或f”，或者“q和r中的每一者独立地选自h和f”。
[0064]
除非另外指明，否则在说明书和权利要求中对特定化合物的描述或命名旨在包括其单独的对映体和混合物，所述混合物为外消旋混合物或其他混合物。立体化学的测定方法和立体异构体的分离方法是本领域熟知的。
[0065]
在另一个示例中，本文通过提及已知会形成两性离子的化合物而涵盖两性离子化合物，即使它未被明确以其两性离子形式提到。诸如一种或多种两性离子及其同义词两性离子化合物之类的术语是iupac认可的标准名称，这些名称是众所周知的，并且是经定义的科学名称的标准集的一部分。在这点上，两性离子这个名称被生物学关联化学实体数据库(chemical entities of biological inerest，chebi)的分子实体词典分配chebi:27369这个名称标识。众所周知，两性离子或两性离子化合物是具有相反符号的形式单位电荷的中性化合物。有时，这些化合物用术语“内盐”来称谓。其他资料称这些化合物为“偶极离子”，不过这个术语被另外的其他资料认为是误称。作为具体示例，氨基乙酸(氨基酸甘氨酸)具有式h2nch2cooh，并且它以两性离子

h3nch2coo-形式存在于一些介质中(在这种情况下是在中性介质中)。两性离子、两性离子化合物、内盐和偶极离子这些术语按其已知和公认的含义落入本发明的范围内，如本领域普通技术人员在任何情况下均如此理解的。由于不必命名本领域普通技术人员会认识到的每一个实施方案，因此本文中没有明确给出与本发明化合物相关联的两性离子化合物的结构。但是，其为本发明实施方案的一部分。在这点上，本文中没有提供更多的示例，因为在给定介质中导致产生给定化合物的各种形式的相互作用和转化是本领域任何普通技术人员已知的。
[0066]
当提及本文给出的任何式时，对于指定的变量，从可能的种类的列表中选择具体的部分并非意图限定所述变量在其他地方出现时要选择相同的种类。换句话讲，除非另外指明，否则当变量不止一次出现时，从指定列表中选择该种类与对式别处的同一变量选择
该种类无关。
[0067]
借助于取代基术语的第一个示例，如果取代基s
1实施例
是s1和s2中的一者，并且取代基s
2实施例
是s3和s4中的一者，则这些指派是指根据以下选择给出的本发明的实施方案：s
1实施例
是s1且s
2实施例
是s3；s
1实施例
是s1且s
2实施例
是s4；s
1实施例
是s2且s
2实施例
是s3；s
1实施例
是s2且s
2实施例
是s4；以及此类选择中的每一者的等同物。较短的术语“s
1实施例
是s1和s2中的一者，并且s
2实施例
是s3和s4中的一者”因此在本文中为了简洁起见使用，但不是以限制的方式使用。上述以通用术语陈述的关于取代基术语的第一个示例，是旨在举例说明本文描述的不同取代基指派。
[0068]
此外，当对任何成员或取代基给出多于一种指派时，本发明的实施方案包括可从所列举的指派独立选取而作出的多种分组，及其等同物。借助于取代基术语的第二个示例，如果本文描述取代基s
实施例
是s1、s2和s3中的一者，则该列表是指本发明的实施方案，其中s
实施例
是s1；s
实施例
是s2；s
实施例
是s3；s
实施例
是s1和s2中的一者；s
实施例
是s1和s3中的一者；s
实施例
是s2和s3中的一者；s
实施例
是s1、s2和s3中的一者；以及s
实施例
是这些选择中的每一者的任何等同物。较短的术语“s
实施例
是s1、s2和s3中的一者”因此在本文中为了简洁起见使用，但不是以限制的方式使用。上述以通用术语陈述的关于取代基术语的第二个示例，是旨在举例说明本文描述的不同取代基指派。
[0069]
其中j》i的命名“c
i-c
j”，当在本文中应用于一类取代基时，意在指这样的本发明实施方案：从i到j(包括i和j在内)的碳成员数目中的各个和每一个都是独立实现的。以举例的方式，术语c
1-c3独立地指具有一个碳成员的实施方案(c1)、具有两个碳成员的实施方案(c2)和具有三个碳成员的实施方案(c3)。
[0070]“药学上可接受的盐”旨在表示由式(i)表示的化合物的酸或碱的盐，该盐为无毒的、生物学上可耐受的或换句话讲在生物学上适于施用于受试者。一般参见以下文献：s.m.berge等人，“pharmaceutical salts”,j.pharm.sci.,1977,66:1-19,and handbook of pharmaceutical salts,properties,selection,and use,stahl和wermuth编辑，wiley-vch and vhca,zurich,2002。优选的药学上可接受的盐是那些药理学有效且适于与患者组织接触而不会有不当毒性、刺激或过敏反应的盐。
[0071]
式(i)的化合物可具有足够酸性的基团、足够碱性的基团或这两种类型的官能团，并因此与多种无机碱或有机碱以及无机酸和有机酸反应以形成药学上可接受的盐。
[0072]
药学上可接受的盐的示例包括硫酸盐、焦硫酸盐、硫酸氢盐、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、磷酸盐、磷酸一氢盐、磷酸二氢盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸盐、丙酸盐、癸酸盐、辛酸盐、丙烯酸盐、甲酸盐、异丁酸盐、己酸盐、庚酸盐、丙炔酸盐、草酸盐、丙二酸盐、琥珀酸盐、辛二酸盐、癸二酸盐、富马酸盐、马来酸盐、丁炔-1,4-二酸盐、己炔-1,6-二酸盐、苯甲酸盐、氯代苯甲酸盐、甲基苯甲酸盐、二硝基苯甲酸盐、羟基苯甲酸盐、甲氧基苯甲酸盐、邻苯二甲酸盐、磺酸盐、二甲苯磺酸盐、苯乙酸盐、苯丙酸盐、苯丁酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、γ-羟丁酸盐、乙醇酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、丙磺酸盐、萘-1-磺酸盐、萘-2-磺酸盐和扁桃酸盐。
[0073]
式(i)的化合物可包含至少一种具有碱性的氮，因此可通过本领域可用的任何合适方法来制备期望的药学上可接受的盐，例如，用下述酸处理游离碱：无机酸，诸如盐酸、氢溴酸、硫酸、氨基磺酸、硝酸、硼酸、磷酸等；或者有机酸，诸如乙酸、苯乙酸、丙酸、硬脂酸、乳酸、抗坏血酸、马来酸、羟基马来酸、羟乙磺酸、琥珀酸、戊酸、延胡索酸、丙二酸、丙酮酸、草
酸、乙醇酸、水杨酸、油酸、棕榈酸、月桂酸、吡喃糖苷酸(诸如葡糖醛酸或半乳糖醛酸)、α-羟基酸(诸如扁桃酸、柠檬酸或酒石酸)、氨基酸(诸如天冬氨酸或谷氨酸)、芳族酸(诸如苯甲酸、2-乙酰氧基苯甲酸、萘甲酸或肉桂酸)、磺酸(诸如月桂基磺酸、对甲苯磺酸、甲磺酸、乙磺酸)、诸如本文作为示例给出的那些酸的任何相容混合物，以及视为等同物的任何其他酸及其混合物。
[0074]
式(i)的化合物可含有甲酸部分，可通过任何合适的方法来制备期望的药学上可接受的盐，例如用下述无机碱或有机碱处理游离酸：诸如胺(伯胺、仲胺或叔胺)、碱金属氢氧化物、碱土金属氢氧化物、诸如本文作为示例给出的那些碱的任何相容混合物，以及本领域普通技术人员视为等同物或可接受替代物的任何其他碱及其混合物。合适的盐的例示性示例包括衍生自下述物质的有机盐：氨基酸(诸如甘氨酸和精氨酸)、氨、碳酸盐、碳酸氢盐、伯胺、仲胺、叔胺和环胺(诸如苄胺、吡咯烷、哌啶、吗啉、哌嗪、n-甲基葡糖胺和氨基丁三醇)，以及衍生自下列物质的无机盐：钠、钙、钾、镁、锰、铁、铜、锌、铝和锂。
[0075]
本发明的化合物，包括本发明的其药学上可接受的盐，无论是单独的还是组合的(统称为“活性剂”)可用作本发明方法中的mgl调节剂。用于调节mgl的此类方法包括使用治疗有效量的本发明的至少一种化学实体。
[0076]
在一些实施方案中，mgl调节剂是抑制剂并用于诊断有或患有与mgl受体活性相关的疾病、障碍或病症(诸如本文所述的那些)的受试者。症状或疾病状态旨在包括在“疾病、障碍或病症”的范围内。
[0077]
因此，本发明涉及使用本文所述的活性剂治疗诊断有或患有与mgl受体活性相关的疾病、障碍或病症的受试者的方法。本文所用的术语“治疗”意在指将本发明的活性剂或组合物施用给受试者，目的是通过调节mgl受体活性实现治疗或预防有益效果。治疗包括逆转、改善、减轻与mgl调节相关的疾病、障碍或病症或者此类疾病、障碍或病症的一种或多种症状，抑制其进展，减轻其严重程度，或者加以预防。术语“受治疗者”是指需要此类治疗的哺乳类患者，例如人。
[0078]
术语“组合物”是指包括治疗有效量的规定成分的产品，以及直接或间接地由规定量的规定成分的组合产生的任何产品。
[0079]
术语“mgl抑制剂”旨在涵盖与mgl相互作用以显著降低或消除其催化活性，从而增加其底物浓度的化合物。术语“mgl调节的”用来指受mgl酶调节影响的病症，包括受mgl酶抑制影响的病症。本公开涉及通过向有需要的受试者施用治疗有效量的mgl调节剂来治疗、改善和/或预防与疼痛(包括炎性疼痛)相关的疾病、病症或障碍以及精神障碍、神经障碍、癌症和眼部病症的方法。
[0080]
术语“调节剂”包括抑制剂和激活剂两者，其中“抑制剂”是指会降低、预防、去活、减敏或下调mgl表达或活性的化合物，而“激活剂”是指会提高、激活、促进、致敏或上调mgl表达或活性的化合物。
[0081]
除非另外指明，否则如本文所用，术语“影响”或“受影响的”(当涉及疾病、病症或障碍时，是受mgl抑制影响的)包括所述疾病、病症或障碍的一种或多种症状或临床表现的频率和/或严重程度的降低；并且/或者包括预防疾病、病症或障碍的发展或者所述疾病、病症或障碍的一种或多种症状或临床表现的发展。
[0082]
在根据本发明的治疗方法中，将治疗有效量的根据本发明的至少一种活性剂施用
给患有或被诊断为具有此类疾病、障碍或病症的受试者。“治疗有效量”是指足以总体上在需要对指定疾病、障碍或病症进行此类治疗的受试者中产生期望的治疗或预防有益效果的量或剂量。本发明的活性剂的有效量或剂量可通过诸如建模、剂量递增研究或临床试验的常规方法探知，并且通过考虑常规因素来探知，例如施用或药物递送的方式或途径，试剂的药代动力学，疾病、障碍或病症的严重程度和病程，受试者之前进行或现在进行的疗法，受试者的健康状况和对药物的响应，以及主治医师的判断。对于70kg的人，合适剂量的例示性范围是以单剂量单位或多剂量单位(例如，bid、tid、qid或根据疗法的需要)计，约1mg/天至1000mg/天。
[0083]
一旦受试者的疾病、障碍或病症出现改善，就可将剂量调整为预防性或维持性的治疗。例如，施用的剂量或频次或者这两方面可根据症状而降低到能维持期望的治疗或预防作用的水平。当然，如果症状已减轻到适当的水平，可停止治疗。然而，受试者可能因症状的任何复发而需要长期的间歇性治疗。
[0084]
此外，还设想本发明化合物单独地，与本发明的一种或多种其他化合物组合，或与附加活性成分组合用于治疗下文所述的病症。附加活性成分可单独与本发明的至少一种化合物共同施用，与本发明的活性剂共同施用，或者与此类试剂一起包括在根据本发明的药物组合物中。在一个例示性实施方案中，附加活性成分是已知或发现有效治疗与mgl调节相关的病症、障碍或疾病的那些活性成分，诸如另一种mgl抑制剂或者对与该特定病症、障碍或疾病相关的另一个靶有活性的化合物。该组合可有助于提高功效(例如，通过在该组合中包括强化根据本发明活性剂的效能或有效性的化合物)，减少一种或多种副作用，或者减少根据本发明的活性剂的所需剂量。
[0085]
当涉及抑制靶时，“有效量”意指足以影响mgl调节的量。
[0086]
设想本发明的活性剂单独使用或与一种或多种附加活性成分组合使用以配制本发明的药物组合物。本发明的药物组合物包含治疗有效量的根据本发明的至少一种活性剂。
[0087]
药物组合物中常用的药学上可接受的赋形剂是无毒的、生物学上可耐受的并且换句话讲在生物学上适于施用于受试者的物质，诸如惰性物质，其被添加到药物组合物中或换句话讲用作媒介物、载体或稀释剂以促进试剂的施用并与其相容。此类赋形剂的示例包括碳酸钙、磷酸钙、多种糖和多类淀粉、纤维素衍生物、明胶、植物油和聚乙二醇。
[0088]
含有一个或多个剂量单位的活性剂的药物组合物的递送形式可使用本领域技术人员已知的或可利用的药学上可接受的赋形剂和配混技术进行制备。该组合物在本发明方法中可通过合适的递送途径施用，例如通过口服途径、肠胃外途径、直肠途径、局部途径或眼部途径施用，或者通过吸入施用。
[0089]
制剂可为片剂、胶囊、囊剂、糖衣丸剂、散剂、颗粒剂、锭剂、重构用散剂、液体制剂或栓剂的形式。该组合物可被配制用于多种给药途径中的任一种途径，诸如静脉输注、局部给药或口服给药。优选地，所述组合物可被配制用于口服。
[0090]
对于口服给药，本发明的活性剂可以片剂或胶囊剂的形式提供，或者作为溶液、乳液或混悬剂提供。为了制备口服组合物，可配制活性剂以例如对于70kg人而言，产生以单剂量单位或多剂量单位计约1mg/天至1000mg/天的剂量作为合适剂量的例示性范围。
[0091]
口服片剂可包括与相容的药学上可接受的赋形剂诸如稀释剂、崩解剂、粘合剂、润
滑剂、甜味剂、矫味剂、着色剂和防腐剂混合在一起的一种或多种活性成分。合适的惰性填充剂包括碳酸钠和碳酸钙、磷酸钠和磷酸钙、乳糖、淀粉、糖、葡萄糖、甲基纤维素、硬脂酸镁、甘露糖醇、山梨醇等。示例性液态口服赋形剂包括乙醇、甘油、水等。淀粉、聚乙烯吡咯烷酮(pvp)、羟乙酸淀粉钠、微晶纤维素和藻酸是示例性的崩解剂。粘结剂可包括淀粉和明胶。润滑剂(当存在时)可为硬脂酸镁、硬脂酸或滑石粉。如果需要，片剂可用材料诸如甘油单硬脂酸酯或甘油二硬脂酸酯进行包衣，以延迟在胃肠道中的吸收，或者可用肠溶衣进行包衣。
[0092]
用于口服的胶囊剂包括硬明胶胶囊和软明胶胶囊或(羟丙基)甲基纤维素胶囊。为制备硬明胶胶囊剂，可将一种或多种活性成分与固体、半固体或液体稀释剂混合。口服施用的液体可为悬浮液、溶液、乳液或糖浆的形式，或者可冻干或作为干燥产品呈现，供使用前用水或其他合适的媒介物进行重构。此类液体组合物可任选地包含：药学上可接受的赋形剂，诸如悬浮剂(例如，山梨醇、甲基纤维素、海藻酸钠、明胶、羟乙基纤维素、羧甲基纤维素、硬脂酸铝凝胶等)；非水性媒介物，例如油类(例如杏仁油或分级椰子油)、丙二醇、乙醇或水；防腐剂(例如对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯或山梨酸)；润湿剂，例如卵磷脂；以及(如果需要)矫味剂或染色剂。
[0093]
本发明的活性剂还可以通过非口服途径施用。例如，组合物可配制成栓剂、灌肠剂或泡沫供直肠给药。对于胃肠外使用，包括静脉内、肌肉内、腹膜内或皮下途径，本发明的活性剂可提供在缓冲至适当的ph和等渗度的无菌水溶液剂或混悬剂中，或者提供在胃肠外可接受的油中。合适的含水媒介物包括林格氏溶液和等渗氯化钠。此类形式可以单位剂型(如安瓿或一次性注射装置)呈现，以可从中抽取适当剂量的多剂量形式(如小瓶)呈现，或者以可用来制备可注射制剂的固体形式或预浓缩物呈现。例示性输注剂量范围为约1至1000μg/kg/分钟的与可药用载体混合的活性剂，时间为几分钟到几天。
[0094]
对于局部施用而言，可将活性剂与药用载体以药物对媒介物约0.01％至约20％、优选地0.1％至10％的浓度混合。另一种施用本发明活性剂的方式可利用贴剂制剂来实现透皮递送。
[0095]
另选地，在本发明方法中活性剂可经由鼻内或口服途径通过吸入来施用，例如以还含有合适的载体的喷雾制剂形式施用。
[0096]
在另一个实施方案中，本发明涉及治疗患有或诊断有与mgl调节相关的疾病、障碍或病症的受试者的方法，该方法包括向需要此类治疗的受试者施用治疗有效量的活性剂。
[0097]
式(i)的化合物在用于治疗、改善和/或预防受mgl抑制影响的疾病、病症或障碍的方法中是有用的。此类方法包括向受试者施用治疗有效量的式(i)的化合物或其对映体、非对映体、溶剂化物或药学上可接受的盐，该受试者包括需要此类治疗、改善和/或预防的动物、哺乳动物和人。
[0098]
具体地，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、同位素、n-氧化物、溶剂化物和立体异构体可用于治疗、改善和/或预防引起疼痛、精神障碍、神经障碍、癌症和眼睛病症的疾病、病症或障碍。更具体地，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、同位素、n-氧化物、溶剂化物和立体异构体可用于治疗、改善和/或预防炎性疼痛、重度抑郁症、难治性抑郁症、焦虑性抑郁症或双相障碍，方法是向有需要的受试者施用治疗有效量的如本文所定义的式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、同位素、n-氧化物、溶剂化物或立体异构体。
[0099]
1)疼痛
[0100]
炎性疼痛的示例包括但不限于由于疾病、病症、障碍或疼痛状态引起的疼痛，包括炎性肠病、内脏痛、偏头痛、术后疼痛、骨关节炎、类风湿性关节炎、背部疼痛、下背疼痛、关节疼痛、腹痛、胸痛、劳累、肌骨骼疾病、皮肤病、牙痛、发热病、烧伤、晒伤、蛇咬、毒蛇咬伤、蜘蛛咬伤、昆虫叮咬、神经源性膀胱、间质性膀胱炎、尿道感染、鼻炎、接触性皮炎/超敏反应、瘙痒、湿疹、咽炎、粘膜炎、肠炎、肠易激综合征、胆囊炎、胰腺炎、乳房切除术后疼痛综合征、月经疼痛、子宫内膜异位症、身体创伤引起的疼痛、头痛、窦性头痛、紧张性头痛或蛛网膜炎。
[0101]
一种类型的炎性疼痛是炎性痛觉过敏/超敏反应。炎性痛觉过敏的示例包括疾病、病症、障碍或疼痛状态，包括炎症、骨关节炎、类风湿性关节炎、背部疼痛、关节疼痛、腹痛、肌骨骼疾病、皮肤疾病、术后疼痛、头痛、牙痛、烧伤、晒伤、昆虫叮咬、神经源性膀胱、尿失禁、间质性膀胱炎、尿道感染、咳嗽、哮喘、慢性阻塞性肺疾病、鼻炎、接触性皮炎/超敏反应和/或皮肤过敏、瘙痒、湿疹、咽炎、肠炎、肠易激综合征、炎性肠疾病(包括克隆氏病)、溃疡性结肠炎、良性前列腺肥大和鼻超敏反应。
[0102]
在一个实施方案中，本发明涉及一种用于治疗、改善和/或预防其中存在增强的内脏应激性的炎性内脏痛觉过敏的方法，该方法包括以下步骤、由以下步骤组成和/或基本上由以下步骤组成：向需要此类治疗的受试者施用治疗有效量的式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、同位素、n-氧化物、溶剂化物或立体异构体。在另一个实施方案中，本发明涉及一种用于治疗其中存在对热、机械和/或化学刺激的超敏反应的炎性躯体痛觉过敏的方法，该方法包括向需要此类治疗的受试者施用治疗有效量的式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、同位素、n-氧化物、溶剂化物或立体异构体。
[0103]
本发明的另一个实施方案涉及一种用于治疗、改善和/或预防神经性疼痛的方法。神经性疼痛的示例包括由于疾病、病症、障碍或疼痛状态引起的疼痛，包括癌症、神经障碍、脊柱与周围神经手术、脑肿瘤、外伤性脑损伤(tbi)、脊髓创伤、慢性疼痛综合征、纤维肌痛、慢性疲劳综合征、狼疮、结节病、周围神经病变、双侧周围神经病变、糖尿病性神经病变、中枢性疼痛、与脊髓损伤相关的神经病变、中风、肌萎缩性脊髓侧索硬化症(als)、帕金森病、多发性硬化症、坐骨性神经炎、下颌关节神经痛、周围神经炎、多发性神经炎、残肢痛、假肢痛、骨折、口腔神经性病痛、夏科氏疼痛、i型和ii型复杂性区域疼痛综合征(crps i/ii)、神经根病变、格-巴二氏综合征、感觉异常性股痛、灼口综合征、视神经炎、发热后神经炎、游走性神经炎、节段性神经炎、贡博氏神经炎、神经元炎、颈臂神经痛、脑神经痛、膝状神经节神经痛、舌咽神经痛、神经性偏头痛、特发性神经痛、肋间神经痛、乳腺神经痛、莫顿神经痛、鼻睫部神经痛、枕神经痛、带状疱疹后遗神经痛、灼痛、红神经痛、斯路德氏神经痛、蝶腭节神经痛、眶上神经痛、三叉神经痛、外阴痛、翼管神经痛或化疗诱导的神经病变。
[0104]
一种类型的神经性疼痛是神经性冷触诱发痛，其特征可在于存在神经病变相关的异常疼痛状态，其中存在对冷刺激的超敏反应。神经性冷触诱发痛的示例包括由于疾病、病症、障碍或疼痛状态引起的触诱发痛，包括神经性疼痛(神经痛)、由脊柱与周围神经手术或创伤引起的疼痛、外伤性脑损伤(tbi)、三叉神经痛、带状疱疹后遗神经痛、灼痛、周围神经病变、糖尿病性神经病变、中枢性疼痛、中风、周围神经炎、多发性神经炎、i型和ii型复杂性区域疼痛综合征(crps i/ii)和神经根病变。
[0105]
在另一个实施方案中，本发明涉及一种用于治疗、改善和/或预防其中存在对冷刺
激的超敏反应的神经性冷触诱发痛的方法，该方法包括向需要此类治疗的受试者施用治疗有效量的式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、同位素、n-氧化物、溶剂化物或立体异构体。
[0106]
2)精神障碍
[0107]
精神障碍的示例包括但不限于焦虑症诸如社交焦虑症、创伤后应激障碍、恐惧症、社交恐惧症、特殊恐惧症、恐慌症、强迫症、急性应激障碍、分离焦虑症和广泛性焦虑障碍，以及抑郁症诸如重度抑郁症、双相障碍、季节性情感障碍、产后抑郁症、躁郁症和双相抑郁症，可根据本发明治疗的情绪障碍和情绪情感障碍包括但不限于i型双相障碍抑郁、轻度躁狂、躁狂和混合形式；ii型双相性精神障碍；抑郁性障碍，诸如单一抑郁症或复发性重度抑郁症、轻度抑郁症、难治性抑郁症、焦虑性抑郁症、双相障碍、产后发作抑郁症、伴有精神性症状的抑郁症；持续性情绪障碍，诸如循环性精神失调、心境恶劣、情感正常；月经前焦虑障碍；精神异常；以及发育障碍，诸如自闭症谱系障碍和阿斯伯格综合征。
[0108]
3)神经障碍
[0109]
神经障碍的示例包括但不限于震颤、运动障碍、肌张力障碍、痉挛状态、图雷特综合症；视神经脊髓炎、帕金森病；阿尔茨海默病；老年性痴呆；亨廷顿氏舞蹈病；癫痫症/癫痫障碍和睡眠障碍。
[0110]
4)癌症
[0111]
癌症的示例包括但不限于良性皮肤肿瘤、前列腺肿瘤、卵巢肿瘤和脑肿瘤(胶质母细胞瘤、髓上皮瘤、髓母细胞瘤、成神经细胞瘤、胚胎性起源肿瘤、星形细胞瘤、星形母细胞瘤、室管膜瘤、少突神经胶质瘤、神经上皮瘤、骨骺肿瘤、室管膜母细胞瘤、恶性脑膜瘤、肉瘤病、恶性黑素瘤、神经鞘瘤)。
[0112]
5)眼睛病症
[0113]
眼睛病症的示例包括但不限于眼内高压、青光眼、视网膜神经节细胞和神经视网膜细胞的变性和凋亡。
[0114]
本发明的其他实施方案提供了一种用于调节mgl受体活性的方法，包括在此类受体存在于受试者体内时进行调节，该方法包括将mgl受体暴露于治疗有效量的至少一种选自本发明化合物的化合物。
[0115]
在式(i)的一些实施方案中，x为ch2。在一些实施方案中，x为o。
[0116]
在一些实施方案中，r3为叔丁基。在一些实施方案中，r3为在一些实施方案中，r3为在一些实施方案中，r3为苄基、苯基或被各自独立地选自以下的一个或两个成员取代的苯基：f、ch3、ch2ch3、ch(ch3)2、c(ch3)3、och3、环丙基、被cf3取代的环丙基、以及环丁基。在一些实施方案中，r3为
[0117][0118]
在一些实施方案中，r3为3,5-二甲基苯基、3-乙基-5-甲基苯基、4-乙基-3-甲基苯基、3-异丙基苯基或3-叔丁基苯基。
[0119]
在一些实施方案中，r3为苯基；或被各自独立地选自以下的一个、两个或三个成员取代的苯基：cl、f、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c(ch3)2oh、oc
1-6
烷基、oc
1-6
卤代烷基、sch3、si(ch3)3、sf5、n(ch3)2、c
3-6
环烷基、被ch3取代的c
3-6
环烷基、oc
3-6
环烷基、苯基、o-苯基和o-吡啶基。在一些实施方案中，r3为被各自独立地选自以下的一个、两个或三个成员取代的苯基：卤基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、oc
1-6
烷基、oc
1-6
卤代烷基、sch3、sf5、或si(ch3)3。在一些实施方案中，r3为苄基；叔丁基；环己基；被1-甲基环丙基或1-三氟甲基环丙基取代、或与环丁烯基或环己烯基环稠合的苯基；任选地被三氟甲基、氟或甲基取代的吡啶基；任选地被叔丁基取代的嘧啶基；或任选地被叔丁基取代的噁唑基。在一些实施方案中，r3为如本文所述任选取代的双环杂芳基。在一些实施方案中，r3为任选地如本文所述取代的苯基。
[0120]
在一些实施方案中，r3为
[0121][0122]
在一些实施方案中，r3为4-三氟甲基苯基、3-三氟甲氧基苯基、3-叔丁基苯基、4-叔丁基苯基或3-(1-甲基环丙基)苯基。
[0123]
在一些实施方案中，r
2a
为h，并且r
2b
为ch3。在其他实施方案中，r
2a
和r
2b
各自为ch3。在一些实施方案中，r
2a
和r
2b
各自为h。
[0124]
在一些实施方案中，x为o，并且r
2a
和r
2b
各自为h。在一些实施方案中，x为ch2，并且r2a
和r
2b
各自为h。在一些实施方案中，x为o并且r3为被各自独立地选自以下的一个或两个成员取代的苯基：f、c
1-6
烷基、och3、环丙基、被ch3或cf3取代的环丙基、以及环丁基。
[0125]
在一些实施方案中，r4为ch3或ch2ch3。
[0126]
本发明的另一个实施方案为如下表1中所示的化合物。
[0127]
表1：
[0128]
[0129]
[0130]
[0131][0132]
以及其药学上可接受的盐、同位素、n-氧化物、溶剂化物和立体异构体。
[0133]
本发明的另一个实施方案为选自以下的化合物：
[0134]
(2r,4s)-n-((1s,3s)-3-(3-(叔丁基)苯基)环丁基)-n-甲基-6-氧代-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺；
[0135]
(2s,4s)-n-((1s,3s)-3-(3,5-二甲基苯基)环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺；
[0136]
(2s,4s)-n-((1s,3s)-3-(3-异丙基苯基)环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺；
[0137]
(2s,4s)-n-((1s,3s)-3-(4-异丙基苯基)环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺；和
[0138]
(2s,4s)-n-((1s,3s)-3-(4-乙基苯基)环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺；
[0139]
以及其药学上可接受的盐、同位素、n-氧化物、溶剂化物和立体异构体。
[0140]
本发明的另一个实施方案为药物组合物，其包含：
[0141]
(a)治疗有效量的至少一种选自式(i)的化合物的化合物和该式(i)的化合物的药学上可接受的盐、同位素、n-氧化物、溶剂化物和立体异构体；和
[0142]
(b)至少一种药学上可接受的赋形剂。
[0143]
本发明的另一个实施方案为药物组合物，其包含治疗有效量的至少一种化合物，所述化合物选自表1中的化合物，包括表1化合物的药学上可接受的盐、同位素、n-氧化物、溶剂化物和立体异构体、表1化合物的药学上可接受的前药、以及表1的药学活性代谢物；和至少一种药学上可接受的赋形剂。
[0144]
本发明还涵盖式(i)的化合物的对映体和非对映体。本发明还涵盖式(i)的化合物的药学上可接受的盐、n-氧化物或溶剂化物。本发明还涵盖式(i)的化合物的药学上可接受的前药和式(i)的化合物的药学活性代谢物。
[0145]
本发明还涵盖式(i)的化合物的同位素变体，例如式(i)的氘化化合物。本发明还涵盖式(i)的化合物的同位素变体的药学上可接受的盐、n-氧化物或溶剂化物。本发明还涵盖式(i)的化合物的同位素变体的药学上可接受的前药和式(i)的化合物的同位素变体的药学活性代谢物。
[0146]
本发明的另一个实施方案为一种治疗患有或诊断有由mgl受体活性介导的疾病、障碍或病症的受试者的方法，该方法包括向需要此类治疗的受试者施用治疗有效量的至少
一种选自以下的化合物：式(i)的化合物、以及式(i)的化合物的药学上可接受的盐、同位素、n-氧化物、溶剂化物和立体异构体，包括式(i)的化合物的对映体和非对映体、式(i)的化合物的同位素变体、以及前述物质的全部药学上可接受的盐。本文还描述了式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、同位素、n-氧化物、溶剂化物或立体异构体在制备药物中的用途。在一些实施方案中，该药物用于治疗由mgl受体活性介导的疾病、障碍或病症。本文还描述了式(i)的化合物，或其药学上可接受的盐、同位素、n-氧化物、溶剂化物或立体异构体，其用于治疗由mgl受体活性介导的疾病、障碍或病症的方法中。
[0147]
现在将参考示例性合成方案来描述可用于本发明的方法中的例示性化合物，以用于下文的它们的一般性制备和后面的具体实施例。本领域技术人员将认识到，为获得本文的多种化合物，可适当地选择原料，使得在根据需要进行保护或不保护的情况下，在整个反应方案中将携带最终需要的取代基，以得到所期望的产物。另选地，可能需要或者希望采用合适的基团代替最终期望的取代基，所述合适的基团可经历整个反应方案，并且在适当情况下用所期望的取代基代替。除非另外指明，否则变量均如上文针对式(i)所定义。反应可在溶剂的熔点和回流温度之间进行，并且优选在介于0℃和溶剂的回流温度之间进行。可采用常规加热或微波加热来加热反应。反应还可在密闭压力容器中在高于溶剂的正常回流温度下进行。本文所用的缩写和首字母缩略词包括以下：
[0148]
表2：
[0149]
[0150][0151]
制备例
[0152]
现在将参考示例性合成方案来描述可用于本发明的方法中的例示性化合物，以用于下文的它们的一般性制备和后面的具体实施例。
[0153]
方案1
[0154][0155]
根据方案1，对式(v)的化合物(其中ra为c
1-4
烷基)用羟胺；使用添加剂，诸如乙酸钠(naoac)等；在合适的溶剂(诸如乙醇(etoh)等)中进行处理；得到式(vi)的化合物。
[0156]
式(vii)的化合物是使用氧化剂(诸如过氧化氢、过氧化脲等)由式(vi)的化合物；在活化剂(诸如三氟乙酸酐(tfaa)等)的存在下；在碱(诸如磷酸氢二钠等)的存在下；在溶剂(诸如乙腈(acn)等)中制备的。
[0157]
方案2
[0158][0159]
根据方案2，式(viiia)和(viiib)的化合物是通过在碱(诸如三乙胺(tea)等)的存在下使式(vii)的化合物(ra为c
1-4
烷基)与甲醛；在溶剂(诸如acn等)中来制备的。式(ix)的化合物是通过在催化剂(诸如碳载钯(pd/c)等)的存在下在氢气(h2)的气氛下使式(viiib)的化合物；在溶剂(诸如乙酸乙酯(etoac)、etoh等)中氢解来制备的。
[0160]
式(x)的化合物是通过式(ix)的化合物与三光气在碱(诸如tea等)的存在下；在溶剂(诸如四氢呋喃(thf)等)中进行反应制备的。式(xi)的化合物是通过在使用酸(诸如三氟乙酸(tfa)、hcl的二氧杂环己烷溶液等)的情况下式(x)的化合物的酸性去保护来制备的。
[0161]
方案3
[0162][0163]
根据方案3，式(xiia)和式(xiib)的化合物是通过式(vii)的化合物(其中ra为乙基)与丙烯酸甲酯；在碱(诸如1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(dbu)等)的存在下；在溶剂(诸如acn等)中的michael式反应来制备的。使用还原剂(诸如硼氢化钠(nabh4)等)；添加剂(诸如六水合氯化镍(ii)等)；在合适的溶剂(诸如甲醇(meoh)等)中使式(xiia)的化合物还原环合；得到式(xiii)的化合物(其中x为ch2)。
[0164]
方案4
[0165][0166]
根据方案4，使可商购获得或合成获得的式(xiv)的芳基卤化物(其中x为cl或br，并且r3为被以下适当取代的芳基基团：c
1-6
烷基、oc
1-6
烷基、c
3-6
环烷基和被cf3取代的c
3-6
环烷基；以及5,6,7,8-四氢萘-2-基；与镁金属在以下条件下反应：licl作为添加剂；在合适的溶剂诸如thf中，dibal-h；在范围为0℃至室温的温度下；采用如angew.chem.int.ed.2008,47,6802
–
6806中所述的条件，以得到式(xv)的化合物，其中m为mglicl。
[0167]
式(xv)的化合物(其中m为mg)通过用式(xiv)的化合物(其中x为cl或br，并且r3为被以下适当取代的芳基基团：c
1-6
烷基、oc
1-6
烷基、c
3-6
环烷基和被cf3取代的c
3-6
环烷基；以及5,6,7,8-四氢萘-2-基；采用iprmgcl；在合适的溶剂(诸如thf等)中；在约0℃的温度下进行镁-卤素交换；并持续2小时的时间段来制备。
[0168]
式(xv)的化合物(其中m为li)；通过用式(xiv)的化合物(其中x为cl或br，并且r3为适当取代的芳基基团)进行锂-卤素交换来制备；其通过用n-buli；在合适的溶剂(诸如thf等)中；在约-78℃的温度下处理并持续2小时的时间段来进行。
[0169]
方案5
[0170][0171]
根据方案5，使(3-氧代环丁基)氨基甲酸叔丁基甲酯与式(xv)的芳基金属卤化物化合物(其中x为i、cl或br，并且r3为被以下适当取代的芳基基团：c
1-6
烷基、oc
1-6
烷基、c
3-6
环烷基和被cf3取代的c
3-6
环烷基；和5,6,7,8-四氢萘-2-基)在合适的溶剂(诸如thf等)中；在范围为-78℃和室温的温度下反应；得到式(xvi)的化合物。式(xvi)的化合物采用本领域技术人员已知的条件进行后续的离子还原，诸如通过用三乙基硅烷；在合适的溶剂(诸如三氟乙酸或三氟乙酸和dcm的混合物)中处理；在介于0℃与室温之间的温度下处理)；提供式(xvii)的化合物(其中r4为ch3)。在观察到环丁基环的不完全还原的情况下，使用至多20小时的反应时间，过量的三乙基硅烷和tfa来提供式(xvii)的化合物(其中r4为ch3)。
[0172]
方案6
[0173][0174]
根据方案6，式(xvi)的化合物(其中r3为被以下适当取代的芳基基团：c
1-6
烷基、oc
1-6
烷基、c
3-6
环烷基和被cf3取代的c
3-6
环烷基；以及5,6,7,8-四氢萘-2-基)用三乙基硅烷；在合适的溶剂(诸如三氟乙酸或三氟乙酸和dcm的混合物)中处理；提供式(xviii)的化
合物。
[0175]
式(xviii)的化合物在本领域技术人员已知的或如先前所述的条件下氢化，以提供式(xvii)的化合物。例如，式(xviii)的化合物用10％pd/c；在h2(30巴)的气氛下；在溶剂(诸如meoh等)中；在50℃的温度下处理；并持续16小时的时间段以提供式(xvii)的化合物(其中r4为ch3)。如有必要，式(xvii)的化合物通过使用3步序列在本领域技术人员已知的条件下进一步纯化，所述3步序列涉及(1)n-boc保护，(2)使用硅胶快速柱色谱纯化，和(3)使用tfa的dcm溶液进行n-boc去保护。
[0176]
方案7
[0177][0178]
根据方案7，(3-氧代环丁基)氨基甲酸叔丁基甲酯使用nah作为碱；在合适的溶剂诸如dmso中，在80℃的温度下进行wittig烯化；并持续16小时的时间段；提供(3-亚苄基环丁基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯。(3-亚苄基环丁基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯的氢化，之后进行n-boc裂解是使用本领域技术人员熟知的或如先前所述的条件来实现的，以提供3-苄基-n-甲基环丁-1-胺。
[0179]
方案8
[0180][0181]
根据方案8，在存在tf2o、dma和2,4,6-三甲吡啶的情况下，使1-溴-3-甲基-5-乙烯基苯在甲醛烯酮[2 2]反应中反应，以得到中间体亚胺鎓盐，其被原位水解以提供3-(3-溴-5-甲基苯基)环丁-1-酮。随后，在suzuki交叉偶联反应中，使3-(3-溴-5-甲基苯基)环丁-1-酮与2,4,6-三甲基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三硼杂环己烷；钯催化剂(诸如[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(ii)(pdcl2(dtbpf))、四(三苯基膦)钯(0)(pd(pph3)4)、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(ii)(pdcl2(dppf))、双(三苯基膦)二氯化钯(ii)(pd(pph3)2cl2)、xphos-pd-g2预催化剂(氯(2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯基)[2-(2'-氨基-1,1'-联苯基)]钯(ii)等)；碱(诸如k3po4、na2co3水溶液、na2co3、cs2co3等)，在合适的溶剂(诸如1,2-二甲氧基乙烷、1,4-二氧戊环、dmf、水或它们的混合物)在范围为60℃至180℃的温度下，采用微波或常规加热来进行反应，并持续约30分钟至16小时的时间段，以提供式(xx)的化合物，其中r3为如权利要求1所述的适当取代的苯基。
[0182]
方案9
[0183][0184]
根据方案9，使式(xx)的化合物(其中r3为c
1-6
烷基、c
3-6
环烷基或如权利要求1所述的适当取代的苯基)在还原胺化条件下与合适的胺(诸如甲胺、n-二苯甲基乙胺等)；还原剂(诸如氰基硼氢化钠(nabh3cn)、nabh(oac)3、nabh4等)；在存在酸性添加剂(诸如异丙醇钛(iv)、乙酸等)的情况下；在合适的溶剂(诸如甲醇、dcm、1,2-二氯乙烷、thf或它们的混合物)中；在室温下；反应并持续14小时-24小时的时间段；得到式(xvii)的化合物。其中当将n-二苯甲基乙胺用于还原胺化，随后采用pd/c；合适的溶剂(诸如meoh和hcl水溶液的混合物)；在15psi的氢气气氛下；氢解时，提供式(xvii)的化合物，其中r4为ch2ch3。
[0185]
方案10
[0186][0187]
根据方案10，式(i)的化合物(其中r1为氢，并且x为ch2或o)是通过常规的酰胺键形成技术(诸如本领域的技术人员熟知的偶联反应(诸如hatu(1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1h-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐)、bop(苯并三唑-1-基氧基-三(二甲基氨基)鏻六氟磷酸盐)或酸转变为酰基氯))来制备的。例如，可商购获得的或合成获得的式(xvii)化合物(其中r3为c
1-6
烷基；苄基；苯基；被各自独立地选自以下的一个或两个成员取代的苯基：卤素、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-6
环烷基和被cf3取代的c
3-6
环烷基；以及5,6,7,8-四氢萘-2-基；与可合成获得的适当取代的式(xix)的甲酸(其包括式(xi)和(xiii)的化合物)反应；并且其中酸用适当的活化剂(例如碳二亚胺，诸如n,n'-二环己基碳二亚胺(dcc)或1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(edc、edac或edci))进行活化，其任选地在存在以下物质的情况下进行：羟基苯并三唑(hobt)和/或催化剂(诸如4-二甲基氨基吡啶(dmap))；卤代三氨基鏻盐(诸如(苯并三唑-1-基氧基)三(二甲基氨基)鏻六氟磷酸盐(bop))或溴代三吡咯烷基鏻六氟磷酸盐合适的吡啶鎓盐(诸如2-氯-1-甲基吡啶鎓氯化物)；或另一种合适的偶联剂(诸如n,n,n
′
,n
′‑
四甲基-o-(1h-苯并三唑-1-基)脲六氟磷酸盐(hbtu)、1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1h-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(hatu)、2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三膦烷-2,4,6-三氧化物等)。在合适的溶剂(诸如dcm、thf、dmf等)中，任选地在叔胺(诸如n-甲基吗啉、n-乙基二异丙基胺(dipea)或三乙胺(tea))的存在下，在范围为约0℃至室温的温度下进行偶联反应，以提供式(i)的化合物。
[0188]
如果根据本发明的化合物具有至少一个手性中心，则它们可以对映体形式相应地存在。如果化合物具有两个或更多个手性中心，则它们另外可以非对映体形式存在。应当理解，所有的此类异构体及其混合物涵盖在本发明的范围内。
[0189]
根据上述方案制备的化合物可以通过形式特异性合成或者通过拆分来作为单一形式，诸如单一对映体获得。作为另外一种选择，根据上述方案制备的化合物可作为各种形式的混合物，诸如外消旋混合物(1:1)或非外消旋混合物(非1:1)获得。在获得对映体的外消旋混合物和非外消旋混合物的情况下，可以使用本领域普通技术人员已知的常规分离方法(诸如手性层析、超临界流体色谱(sfc)、重结晶、非对映体盐形成法、衍生成非对映体加合物、生物转化或酶促转化)来分离单一对映体。在获得区域异构体混合物或非对映体混合物的情下，如适用，可以使用常规方法如层析法或结晶来分离单一异构体。
[0190]
提供如下具体实施例来进一步说明本发明和各种优选实施方案。
[0191]
实施例
[0192]
在获得下文实施例中描述的化合物和相应的分析数据时，除非另外指明，否则遵循以下实验和分析方案。
[0193]
除非另外指明，否则反应混合物均在室温(rt)和氮气氛围下进行磁力搅拌。在将溶液“干燥”的情况下，它们通常是经干燥剂(诸如na2so4或mgso4)进行干燥。在将混合物、溶液和提取物“浓缩”的情况下，它们通常是在旋转蒸发仪上进行减压浓缩。微波照射条件下的反应是在biotage initiator或cem(微波反应器)discover仪中进行的。
[0194]
对于在连续流动条件下进行的反应，除非另有说明，否则“流过ltf-vs混合器”是指使用通过1/16"ptfe管连接到ltf-vs混合器的chemyx fusion 100touch注射泵(little things factory gmbh(http://www.ltf-gmbh.com)。
[0195]
使用预充填管柱，在硅胶(sio2)上进行正相硅胶色谱法(fcc)。
[0196]
制备性反相高效液相色谱法(rp hplc)在以下设备中的任一个上进行：
[0197]
方法a.agilent hplc，其具有xterra prep rp18柱(5μm，30mm
×
100mm或50mm
×
150mm)或xbridge c18 obd柱(5μm，30mm
×
100mm或50mm
×
150mm)，并且使5％acn的20mm nh4oh溶液的流动相保持2分钟，然后保持5％-99％acn的梯度达15分钟，然后在99％acn下保持5分钟，其中流速为40ml/min或80ml/min。
[0198]
或者
[0199]
方法b.agilent hplc，其具有xterra prep rp18柱(5μm，30mm
×
100mm或50mm
×
150mm)或xbridge c18 obd柱(5μm，30mm
×
100mm或50mm
×
150mm)，并且使5％acn h2o(均具有0.05％tfa)的流动相保持2分钟，然后保持5％-99％acn的梯度达15分钟，然后在99％acn下保持5分钟，其中流速为40ml/min或80ml/min。
[0200]
或者
[0201]
方法c.accq prep hplc，其具有xbridge c18 obd柱(5μm，50x100)，使5％acn的h2o溶液(均具有0.05％tfa)的流动相保持1分钟，然后保持5％-95％acn的梯度达12分钟，然后在95％acn下保持2分钟，其中流速为80ml/min。
[0202]
或者
[0203]
方法d.制备型反相高效液相色谱，其使用phenomenex lux cellulose-1 150mm
×
4.6mm，5μm柱，流动相为40％甲醇 0.1％二乙胺和60％co2)，等度。
[0204]
使用以下进行制备型超临界-流体色谱(sfc)：
[0205]
方法e.在sfc仪器上进行，该仪器具有phenomenex lux cellulose-1 150mm
×
4.6mm，5μm柱，流动相为40％甲醇 0.1％二乙胺和60％co2)，等度。
[0206]
除非另外指明，否则质谱(ms)是在agilent系列1100msd上使用电喷雾电离(esi)，以正离子模式获得。计算的质量(calcd.)对应于精确质量。
[0207]
核磁共振(nmr)谱是在bruker光谱仪上获得的。对于1h光谱，所有化学位移均以百万分率(δ)为单位进行报告，并且分别是相对于cdcl3、cd3od和dmso-d6在7.26ppm、3.31ppm和2.50ppm处的残余信号的。多重度的定义如下：s＝单峰，d＝双重峰，t＝三重峰，q＝四重峰，m＝多重峰，br＝宽峰。应当理解，对于包含可交换质子的化合物而言，所述质子在nmr光谱中可能可见或可能不可见，这取决于用于进行nmr光谱的溶剂的选择以及溶液中化合物的浓度。
[0208]
使用chemdraw ultra 17.1(cambridgesoft corp.,cambridge,ma)或oemetachem v1.4.0.4(open eye)生成化学名。
[0209]
命名为r*或s*的化合物是绝对构型未确定的对映体纯化合物。
[0210]
中间体1：(2s,4s)-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酸。
[0211][0212]
步骤a：3-羟基亚氨基环丁烷甲酸叔丁酯。向3-氧代环丁烷-1-甲酸叔丁酯(100g，588mmol)于乙醇(etoh)(1.8l)中的溶液中加入乙酸钠(naoac)(192g，2340mmol)和盐酸羟胺(81g，1166mmol)。将反应混合物在回流下搅拌4小时，然后通过垫过滤，并将垫用etoh洗涤。蒸发合并的滤液，并且使残余物吸收在乙酸乙酯(etoac)中并用水和盐水洗涤。将有机层经硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到白色固体状标题化合物(108g，584mmol，99％收率)。ms(esi)：c9h
15
no3的质量计算值为185.1；m/z实测值为186.2[m h]

。
[0213]
步骤b：3-硝基环丁烷甲酸叔丁酯。在-10℃下，历经1小时向过氧化脲(164g，1.74mol)于乙腈(mecn)(1l)中的悬浮液中逐滴加入三氟乙酸酐(tfaa)(245ml，1.75mol)于mecn(500ml)中的溶液。将反应混合物在室温下搅拌1小时。在80℃下，历经30分钟将溶液逐滴加入3-羟基亚氨基环丁烷甲酸叔丁酯(108g，0.584mol)和磷酸氢二钠(911g，6.42mol)于mecn(1l)中的溶液中。将反应混合物在80℃下搅拌30分钟，然后通过垫过滤，并将垫用mecn洗涤。将合并的滤液用etoac稀释。将混合物用水和盐水洗涤。将有机层经硫酸镁干燥，过滤并蒸发。将残余物通过硅胶快速柱色谱法(fcc)(0-20％etoac的庚烷溶液)纯化，得到黄色油状标题化合物(89.6g，445mmol，76％收率)，为1.3:1的顺式异构体/反式异构体的混合物。化合物不会在esi

lcms的情况下电离。
[0214]
步骤c：顺式-3-(羟甲基)-3-硝基-环丁烷甲酸叔丁酯。向3-硝基环丁烷甲酸叔丁酯(89.6g，445mmol)的acn(1l)溶液中加入甲醛(37重量％水溶液，73ml，971mmol)。在0℃下向反应混合物中逐滴加入tea(62ml，444mmol)，并且在室温下搅拌反应物2小时。减压蒸发反应混合物，并且将残余物通过硅胶上fcc(0-30％etoac的庚烷溶液)纯化，以得到白色粉末状标题化合物(38.2g，37％收率)。ms(esi)：c
10h17
no5的质量计算值为231.2；m/z实测值为
254.1[m na]

。形成反式-3-(羟甲基)-3-硝基环丁烷甲酸叔丁酯，但不分离。
[0215]
步骤d：顺式-3-氨基-3-(羟甲基)环丁烷甲酸叔丁酯。向顺式-3-(羟甲基)-3-硝基环丁烷甲酸叔丁酯(38.2g，165mmol)的etoac(600ml)溶液中加入10％pd/c(1.9g)。将反应混合物在h2(10巴)下在50℃下搅拌1小时。将反应混合物通过垫过滤。向滤液中加入10％pd/c(1.9g)。将反应混合物在h2(10巴)下在50℃下搅拌2小时。将反应混合物通过垫过滤，并用etoac洗涤将合并的滤液减压蒸发，并且将残余物用乙醚(et2o)研磨，以得到白色粉末状标题化合物(18.6g，55％收率)。ms(esi)：c
10h19
no3的质量计算值为201.1；m/z实测值为202.2[m h]

。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ5.26
–
3.98(m,1h),3.74
–
2.94(m,4h),2.70
–
2.57(m,1h),2.20
–
2.07(m,2h),1.97
–
1.82(m,2h),1.39(s,9h)。
[0216]
步骤e：顺式-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酸叔丁酯。向顺式-3-氨基-3-(羟甲基)环丁烷甲酸叔丁酯(18.6g，92.4mmol)的thf(300ml)溶液中加入tea(26ml，186mmol)。在-10℃下向混合物中逐滴加入三光气(9.6g，32.4mmol)的thf(200ml)溶液，并且在室温下搅拌1小时。将反应混合物倾注到饱和碳酸氢钠(nahco3)(600ml)中，并且用etoac萃取混合物。将合并的有机层经硫酸镁干燥、过滤并减压蒸发。用et2o研磨残余物，以得到白色粉末状标题化合物(17.7g，84％收率)。ms(esi)：c
11h17
no4的质量计算值为227.1；m/z实测值为228.2[m h]

。
[0217]
步骤f：(2s,4s)-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酸。在0℃下分批向tfa(180ml，235mmol)中加入顺式-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酸叔丁酯(17.7g，77.9mmol)。将反应混合物在室温下搅拌1小时。减压蒸发反应混合物，并且将残余物用et2o研磨，以得到白色粉末状标题化合物(12.9g，96％收率)。ms(esi)：c7h9no3的质量计算值为171.0；m/z实测值为172.1[m h]

。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ12.3(br s,1h),8.08(s,1h),4.34(s,2h),2.79
–
2.66(m,1h),2.43
–
2.29(m,4h)。
[0218]
中间体2：(2r4s)-6-氧代-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酸。
[0219][0220]
步骤a：3-硝基环丁烷甲酸乙酯。以类似于中间体1、步骤a-b的方式；在步骤a中使用3-氧代环丁烷-1-甲酸乙酯代替3-氧代环丁烷-1-甲酸叔丁酯来制备标题化合物。化合物不会在esi

lcms的情况下电离。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ5.02
–
4.70(m,1h),4.20(q,j＝7.2hz,2h),3.04
–
2.71(m,5h),1.29(t,j＝7.0hz,3h)。
[0221]
步骤b：顺式-3-(3-甲氧基-3-氧代-丙基)-3-硝基-环丁烷甲酸乙酯。向3-硝基环丁烷甲酸乙酯(16.6g，95.6mmol)的acn(145ml)溶液中加入丙烯酸甲酯(10.3ml，114mmol)。在0℃下向反应混合物中逐滴加入dbu(7.1ml，47.6mmol)，并且将反应混合物在0℃下搅拌1小时。用饱和氯化铵和etoac稀释反应混合物，并且分离各层。将有机层经硫酸镁干燥，过滤并减压蒸发。将残余物通过硅胶上fcc(0-15％etoac的庚烷溶液)纯化，以得到无色液体状标题化合物(13.6g，55％收率)。ms(esi)：c
11h17
no6的质量计算值为259.1；m/z实测值为282.1[m na]

。1h nmr(300mhz，氯仿-d)δ4.17(q,j＝7.1hz,2h),3.70(s,3h),3.12
–
2.79(m,3h),2.69
–
2.49(m,2h),2.48
–
2.21(m,4h),1.27(t,j＝7.1hz,3h)。
[0222]
步骤c：(2r,4s)-6-氧代-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酸。向顺式-3-(3-甲氧基-3-氧代-丙基)-3-硝基-环丁烷甲酸乙酯(13.6g，52.5mmol)的meoh(133ml)溶液中添加氯化镍(ii)六水合物(12.5g，52.6mmol)。在-10℃下向反应混合物中分小份加入nabh4(10g，264mmol)，并且将反应混合物在0℃下搅拌1小时。在0℃下向反应混合物中逐滴加入k2co3水溶液(47ml，141mmol，3m)(ph 10)，并且将反应混合物在0℃下搅拌1小时。将反应混合物通过垫过滤，并且将垫用etoh洗涤。将合并的滤液减压浓缩。在该阶段观察到粗酯与甲酸的皂化。将粗残余物通过用氯仿:甲醇:乙酸(100:0:0
→
9:1:1)洗脱的硅胶上fcc纯化，以得到灰白色粉末状标题化合物(4.8g，53％收率)。ms(esi)：c8h
11
no3的质量计算值为169.1；m/z实测值为170.1[m h]

。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ7.97(br s,1h),4.01
–
2.94(m,1h),2.82
–
2.65(m,1h),2.36
–
2.01(m,8h)。
[0223]
中间体3：3-(4-(叔丁基)苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐。
[0224][0225]
步骤a：(3-(4-(叔丁基)苯基)-3-羟基环丁基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯。将(4-(叔丁基)苯基)溴化镁(2m的thf溶液，376μl，753μmol)逐滴添加到0℃的(3-氧代环丁基)氨基甲酸叔丁基甲酯(100mg，502μmol)于四氢呋喃(thf)(1.7ml)中的搅拌溶液中。添加结束之后，去除冰浴，并将反应混合物在室温下搅拌。在30分钟之后，通过添加nh4cl饱和水溶液(10ml)淬灭反应混合物并用etoac(3
×
10ml)萃取所得含水混合物。将合并的有机萃取物经na2so4干燥并真空浓缩。通过硅胶上快速柱色谱(0-100％etoac/hex)纯化所得粗产物，得到黄色油状标题产物(107mg，321μmol，64％收率)，并且其为约4:1的顺式异构体和反式异构体的混合物，其无需进一步纯化即可用于步骤b中。ms(esi)：c
20h31
no3的质量计算值为333.2；m/z实测值为260.1[m-ch4h
8-oh]

。
[0226]
步骤b：3-(4-叔丁基)苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐。将(3-(4-(叔丁基)苯基)-3-羟基环丁基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(107mg，321μmol)溶解于三氟乙酸(tfa)(1.07ml)中，并将所得溶液在室温下搅拌5分钟。逐滴添加三乙基硅烷(369μl，2.25mmol)。添加结束后，将反应混合物在室温下剧烈搅拌1小时。随后真空去除溶剂，以得到粗标题产物，其无需进一步纯化即可使用。ms(esi)：c
15h23
n的质量计算值为217.2；m/z实测值为218.1[m h]

。
[0227]
中间体4：3-(3-(叔丁基)苯基)-n-甲基环丁-1-胺，tfa盐。
[0228][0229]
步骤a：(3-(叔丁基)苯基)溴化镁，氯化锂络合物。向小瓶中装入搅拌棒和氯化锂(112mg，2.64mmol)，用隔垫密封并且用热风枪在真空下干燥。将小瓶冷却至室温并用n2回填。然后快速添加镁屑(128mg，5.28mmol)，并且将小瓶再次抽空并用n2回填。添加thf
(5.3ml)，并将所得混合物在室温下剧烈搅拌，直到所有licl溶解(约5分钟)。逐滴添加二异丁基氢化铝(1m的thf溶液，21.1μl)，并将所得浅黄色溶液在室温下剧烈搅拌5分钟。将反应小瓶冷却至0℃并逐滴添加1-溴-3-(叔丁基)苯(363μl，2.11mmol)。去除冰浴，并将所得浅黄色混合物在室温下搅拌2小时。直接使用含有标题产物的所得棕色溶液，假设浓度为0.37m。
[0230]
步骤b：3-(3-叔丁基)苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐。以类似于中间体3的方式，在步骤a中使用(3-叔丁基)苯基)溴化镁，氯化锂络合物，代替4-(叔丁基)苯基)溴化镁来制备标题化合物。ms(esi)：c
15h23
n的质量计算值为217.2；m/z实测值为218.1[m h]

。
[0231]
中间体5：3-(3,5-二甲基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐。
[0232][0233]
步骤a：(3-(3,5-二甲基苯基)-3-羟基环丁基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯。将(3,5-二甲基苯基)溴化镁(0.5m的thf溶液，8.73ml，4.37mmol)逐滴添加到0℃的(3-氧代环丁基)氨基甲酸叔丁基甲酯(670mg，3.36μmol)于四氢呋喃(thf)(1.7ml)中的搅拌溶液中。添加结束之后，去除冰浴，并将反应混合物在室温下搅拌。1小时后，通过添加nh4cl饱和水溶液(10ml)淬灭反应混合物并用etoac(3x10ml)萃取所得含水混合物。将合并的有机萃取物经na2so4干燥并真空浓缩。通过硅胶上快速柱色谱(0-100％etoac/hex)纯化所得粗产物，得到黄色油状标题产物(646mg，2.12mmol，63％收率)，并且其无需进一步纯化即可用于步骤b中。ms(esi)：c
18h27
no3的质量计算值为305.2；m/z实测值为232.2[m-ch4h
8-oh]

。
[0234]
步骤b：3-(3,5-二甲基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐。将(3-(3,5-二甲基苯基)-3-羟基环丁基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(670mg，2.19mmol)溶解于三氟乙酸(tfa)(7.3ml)中，并将所得溶液在室温下搅拌5分钟。逐滴添加三乙基硅烷(3.5ml，21.9mmol)。添加结束后，将反应混合物在室温下剧烈搅拌20小时。随后真空去除溶剂，以得到粗标题产物，其无需进一步纯化即可使用。ms(esi)：c
13h19
n的质量计算值为189.2；m/z实测值为190.2[m h]

。
[0235]
中间体6：3-(3-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐。
[0236][0237]
步骤a.(3-羟基-3-(3-异丙基苯基)环丁基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯。在圆底烧瓶中，在-78℃下，将n-buli(1.6m的己烷溶液，1.8mmol，1.2当量)逐滴添加到1-溴-3-异丙基苯(300mg，1.5mmol，1当量)的无水thf(10ml，7.7ml/mmol)溶液中。在-78℃下，将反应混合物搅拌40分钟。然后，逐滴添加n-甲基-n-(3-氧代环丁基)氨基甲酸叔丁酯(300mg，1.5mmol，1当量)的无水thf(2ml)溶液，并将反应混合物在相同温度下再搅拌1.5小时。将反应混合物升温至室温，用饱和nh4cl水溶液淬灭。将混合物用etoac萃取，并且将有机相用盐
水洗涤。将有机层经无水mgso4干燥、过滤，并在真空下去除溶剂，以得到棕色油状标题产物(480mg，粗制)，其无需进一步纯化即可用于步骤b中。ms(esi)：c
19h29
no3的质量计算值为319.2；m/z实测值为246.1[m-c4h
8-oh]

。
[0238]
步骤b.3-(3-异丙基苯基)-n-甲基环丁-2-烯-1-胺，tfa盐。在圆底烧瓶中，在室温下，将三氟乙酸(0.11ml，1当量)添加到(3-羟基-3-(3-异丙基苯基)环丁基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(480mg，1.5mmol，1当量)、三乙基硅烷(1.68ml，7当量)和二氯甲烷(8ml)的混合物中。将反应混合物在室温下搅拌3小时，然后将附加的三氟乙酸(0.78ml)添加到反应混合物中并在室温下搅拌16小时。随后真空去除溶剂，并且将过量的三氟乙酸与甲苯共蒸馏。由此获得的棕色油状粗标题产物(302mg，粗制)无需进一步纯化即可用于步骤c中。ms(esi)：c
14h19
n的质量计算值为201.2；m/z实测值为202.1[m h]

。
[0239]
步骤c.3-(3-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，tfa盐。在高压容器中，将碳载钯(10％，15质量/质量％)添加到3-(3-异丙基苯基)-n-甲基环丁-2-烯-1-胺，三氟乙酸盐(300mg，1.5mmol)的甲醇(50ml，33ml/mmol)溶液中。将容器密封，并装入氢气(30巴)，并在50℃下加热16小时。将系统冷却并且将反应混合物通过过滤。在真空下去除溶剂，得到浅棕色油状粗标题产物(300mg，粗制)，其无需进一步纯化即可使用。ms(esi)：c
14h21
n的质量计算值为203.2；m/z实测值为204.2[m h]

。
[0240]
中间体7：3-(3-甲氧基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐。
[0241][0242]
以类似于中间体6的方式，在步骤a中使用1-溴-3-甲氧基苯代替1-溴-3-异丙基苯并使用异丙基氯化镁代替n-buli来制备标题化合物。ms(esi)：c
12h17
n的质量计算值为191.1；m/z实测值为192.1[m h]

。
[0243]
中间体8：3-(4-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐。
[0244][0245]
步骤a.(3-羟基-3-(4-异丙基苯基)环丁基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯。在圆底烧瓶中，在-78℃下，将n-buli(1.6m的己烷溶液，784μl，1.26mmol，1.25当量)逐滴添加到1-溴-4-异丙基苯(200mg，1.00mmol，1当量)的无水thf(4ml)溶液中。在-78℃下，将反应混合物搅拌1小时。然后，逐滴添加n-甲基-n-(3-氧代环丁基)氨基甲酸叔丁酯(200mg，1.00mmol，1当量)的无水thf(4ml)溶液，并将反应混合物在相同温度下再搅拌2小时。将反应混合物升温至室温，用饱和nh4cl水溶液淬灭。将混合物用etoac萃取，并且将有机相用盐水洗涤。将有机层经无水mgso4干燥、过滤，并在真空下去除溶剂，以得到棕色油状标题产物(321mg，粗制)，其无需进一步纯化即可使用。ms(esi)：c
19h29
no3的质量计算值为319.2；m/z实测值为246.1[m-c4h
8-oh]

。
[0246]
步骤b.3-(4-异丙基苯基)-n-甲基环丁-2-烯-1-胺，三氟乙酸盐。在圆底烧瓶中，在室温下，将三氟乙酸(150μl，1当量)添加到(3-羟基-3-(4-异丙基苯基)环丁基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(641mg，2.01mmol，1当量)、三乙基硅烷(2.24ml，7当量)和二氯甲烷(10ml)的混合物中。将反应混合物在室温下搅拌3小时，然后将附加的三氟乙酸(1ml)添加到反应混合物中并在室温下搅拌16小时。随后真空去除溶剂，并且将过量的三氟乙酸与甲苯共蒸馏。由此获得的棕色油状粗标题产物(404mg，粗制)无需进一步纯化即可使用。ms(esi)：c
14h19
n的质量计算值为201.2；m/z实测值为202.1[m h]

。
[0247]
步骤c.3-(4-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐。在高压容器中，在n2气氛下，将碳载钯(10％，15质量/质量％)添加到3-(4-异丙基苯基)-n-甲基环丁-2-烯-1-胺，三氟乙酸盐(404mg)在甲醇(50ml)中的0℃溶液中。将容器密封，并装入氢气(30巴)，并在50℃下加热16小时。将系统冷却并且将反应混合物通过过滤。在真空下去除溶剂，得到浅棕色油状粗标题产物(408mg，粗制)，其无需进一步纯化即可用于步骤d。ms(esi)：c
14h21
n的质量计算值为203.2；m/z实测值为204.2[m h]

。
[0248]
步骤d.(3-(4-异丙基苯基)环丁基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯。将来自上述步骤c的3-(4-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐(408mg)重新溶解于二氯甲烷(9ml，4.5ml/mmol)中。依次添加dmap(123mg，1mmol，0.5当量)、三乙胺(420μl，3mmol，1.5当量)和二碳酸二叔丁酯(922μl，4mmol，2当量)。将反应混合物在室温下搅拌72小时。将混合物用dcm稀释，并用饱和nahco3水溶液和水洗涤。将有机层经mgso4干燥，过滤并减压浓缩。粗n-boc产物通过硅胶快速柱色谱法，使用庚烷/etoac(100:0至90:10)作为洗脱液纯化，以提供无色油状(3-(4-异丙基苯基)环丁基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(168mg，555μmol，28％收率)。ms(esi)：c
19h21
no2的质量计算值为303.2；m/z实测值为248.2[m-c4h8 h]

。
[0249]
步骤e.3-(4-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐。将来自上述步骤d的(3-(4-异丙基苯基)环丁基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(168mg，555μmol)重新溶解于dcm(3ml)中。添加三氟乙酸(494μl，6mmol，12当量)，并将反应混合物在室温下搅拌16小时。随后在真空下去除溶剂，并将过量的三氟乙酸与甲苯共蒸馏，以得到棕色油状标题产物。该产物无需进一步纯化即可使用。ms(esi)：c
14h21
n的质量计算值为203.2；m/z实测值为204.1[m h]

。
[0250]
中间体9：3-(3-(叔丁基)-4-氟苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐。
[0251][0252]
步骤a.(3-(3-叔丁基)-4-氟苯基)-3-羟基环丁基(甲基)氨基甲酸叔丁酯。在圆底烧瓶中，在-78℃下，将n-buli(1.6m的己烷溶液，588μl，941μmol，1.25当量)逐滴添加到4-溴-2-(叔丁基)-1-氟苯(174mg，753μmol，1当量)的无水thf(4ml)溶液中。在-78℃下，将反应混合物搅拌1小时。然后，逐滴添加n-甲基-n-(3-氧代环丁基)氨基甲酸叔丁酯(150mg，753μmol，1当量)的无水thf(4ml)溶液，并将反应混合物在相同温度下再搅拌2小时。将反应混合物升温至室温，用饱和nh4cl水溶液淬灭。将混合物用etoac萃取，并且将有机相用盐水洗涤。将有机层经无水mgso4干燥、过滤，并在真空下去除溶剂，以得到金色油状标题产物(265mg，粗制)，其无需进一步纯化即可用于步骤b中。ms(esi)：c
20h30
fno3的质量计算值为
351.2；m/z实测值为278.0[m-c4h
8-oh]

。
[0253]
步骤b.3-(3-(叔丁基)-4-氟苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐。在圆底烧瓶中，在室温下，将三氟乙酸(112μl，1当量)添加到(3-(3-(叔丁基)-4-氟苯基)-3-羟基环丁基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(529mg，1.51mmol，1当量)、三乙基硅烷(1.68ml，10.5mmol，7当量)和二氯甲烷(8ml)的混合物中。将反应混合物在室温下搅拌4小时，然后将附加量的三氟乙酸(800μl)添加到反应混合物中并在室温下搅拌72小时。随后真空去除溶剂，并且将过量的三氟乙酸与甲苯共蒸馏。由此获得的棕色油状粗标题产物(354mg，粗制)无需进一步纯化即可用于步骤c中。ms(esi)：c
15h22
fn的质量计算值为235.2；m/z实测值为236.2[m h]

。
[0254]
步骤c.(3-(3-(叔丁基)-4-氟苯基)环丁基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯。将如上述步骤b中制备的3-(3-叔丁基)-4-氟苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐(522mg)重新溶解于二氯甲烷(13ml)中。依次添加dmap(135mg，1.00mmol，0.5当量)、三乙胺(618μl，4.44mmol，2当量)和二碳酸二叔丁酯(1.02ml，4.44mmol，2当量)。将反应混合物在室温下搅拌16小时。将混合物用dcm稀释，并用饱和nahco3水溶液和水洗涤。将有机层经mgso4干燥，过滤并减压浓缩。粗n-boc产物通过硅胶快速柱色谱法，使用庚烷/etoac(100:0至90:10)作为洗脱液纯化，以提供无色油状(3-(4-异丙基苯基)环丁基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(744mg，775μmol，35％收率)。ms(esi)：c
20h30
fno2的质量计算值为335.2；m/z实测值为278.1[m-c4h8 h]

。
[0255]
步骤d.3-(3-叔丁基)-4-氟苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐。将来自上述步骤c的(3-(3-(叔丁基)-4-氟苯基)环丁基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(260mg，775μmol)重新溶解于dcm(4ml)中。添加三氟乙酸(1.4ml)，并将反应混合物在室温下搅拌16小时。随后在真空下去除溶剂，并将过量的三氟乙酸与甲苯共蒸馏，以得到棕色油状标题产物。该产物无需进一步纯化即可使用。ms(esi)：c
15h22
fn的质量计算值为235.2；m/z实测值为236.2[m h]

。
[0256]
中间体10：n-甲基-3-(3-(1-(三氟甲基)环丙基)苯基)环丁-1-胺，三氟乙酸盐。
[0257][0258]
步骤a.(3-羟基-3-(3-(1-(三氟甲基)环丙基)苯基)环丁基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯。在圆底烧瓶中，在-78℃下，将n-buli(1.6m的己烷溶液，784μl，1.26mmol，1.2当量)逐滴添加到1-溴-3-(1-(三氟甲基)环丙基)苯(266mg，1.00mmol，1当量)的无水thf(4ml)溶液中。在-78℃下，将反应混合物搅拌1小时。然后，逐滴添加n-甲基-n-(3-氧代环丁基)氨基甲酸叔丁酯(200mg，1.00mmol，1当量)的无水thf(4ml)溶液，并将反应混合物在相同温度下再搅拌2小时。将反应混合物升温至室温，用饱和nh4cl水溶液淬灭。将混合物用etoac萃取，并且将有机相用盐水洗涤。将有机层经无水mgso4干燥、过滤，并在真空下去除溶剂，以得到金色油状标题产物(480mg，粗制)，其无需进一步纯化即可用于步骤b中。ms(esi)：c
20h26
f3no3的质量计算值为385.2；m/z实测值为312.1[m-c4h
8-oh]

。
[0259]
步骤b.n-甲基-3-(3-(1-(三氟甲基)环丙基)苯基)环丁-2-烯-1-胺，三氟乙酸盐。在圆底烧瓶中，在室温下将三氟乙酸(149μl，1当量)添加到(3-羟基-3-(3-(1-(三氟甲基)环丙基)苯基)环丁基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(774mg，2.01mmol，1当量)、三乙基硅烷(2.24ml，7当量)和二氯甲烷(10ml)的混合物中。将反应混合物在室温下搅拌4小时，然后将
附加的三氟乙酸(1ml)添加到反应混合物中并在室温下搅拌16小时。随后真空去除溶剂，并且将过量的三氟乙酸与甲苯共蒸馏。由此获得的棕色油状粗标题产物(536mg，粗制)无需进一步纯化即可用于步骤c中。ms(esi)：c
15h16
f3n的质量计算值为267.1；m/z实测值为268.2[m h]

。
[0260]
步骤c.n-甲基-3-(3-(1-(三氟甲基)环丙基)苯基)环丁-1-胺，三氟乙酸盐。在高压容器中，将碳载钯(10％，15质量/质量％)添加到来自步骤b的中间体n-甲基-3-(3-(1-(三氟甲基)环丙基)苯基)环丁-2-烯-1-胺(530mg，2mmol)的甲醇(50ml，25ml/mmol)溶液中。将容器密封，并装入氢气(30巴)，并在50℃下加热16小时。将系统冷却，将反应混合物通过过滤。在真空下去除溶剂以得到浅棕色油状粗标题产物，n-甲基-3-(3-(1-(三氟甲基)环丙基)苯基)环丁-1-胺，三氟乙酸盐(540mg，2mmol，99％收率)，将其如下进行纯化：将粗标题产物重新溶解于二氯甲烷(9ml，4.5ml/mmol)中，依次添加dmap(122mg，1mmol，0.5当量)、三乙胺(0.42ml，3mmol，1.5当量)和二碳酸二叔丁酯(0.9ml，4mmol，2当量)。将反应混合物在室温下搅拌48小时。将混合物用dcm稀释，并用饱和nahco3水溶液和水洗涤。将有机层经mgso4干燥，过滤并减压浓缩。粗n-boc产物通过硅胶快速柱色谱法，使用庚烷/etoac(100:0至90:10)作为洗脱液纯化，以提供无色油状(3-(3-(1-(三氟甲基)环丙基)苯基)环丁基氨基甲酸叔丁基甲酯(186mg，0.5mmol，25％收率)，将其重新溶解于dcm(4ml)中。添加三氟乙酸(0.45ml，6mmol，12当量)，并将反应混合物在室温下搅拌16小时。随后在真空下去除溶剂，并将过量的三氟乙酸与甲苯共蒸馏，以得到棕色油状标题产物。该产物无需进一步纯化即可用于下一步骤中。ms(esi)：c
15h18
f3n的质量计算值为269.1；m/z实测值为270.1[m h]

。
[0261]
中间体11：n-甲基-3-(邻甲苯基)环丁-1-胺，三氟乙酸盐。
[0262][0263]
步骤a.(3-羟基-3-(邻甲苯基)环丁基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯。在圆底烧瓶中，在0℃下，将异丙基氯化镁(1.1ml，2.2mmol，2m，1.5当量)逐滴添加到2-碘甲苯(287μl，2.2mmol，1.5当量)的无水thf(15ml，7ml/mmol)溶液中。在0℃下，将反应混合物搅拌1小时。然后，逐滴添加n-甲基-n-(3-氧代环丁基)氨基甲酸叔丁酯(300mg，1当量)的无水thf(3ml)溶液，并将反应混合物在相同温度下再搅拌1.5小时。将反应混合物升温至室温，用饱和nh4cl水溶液淬灭。将混合物用etoac萃取并且将有机相用盐水洗涤。将有机层经无水mgso4干燥、过滤，并且在真空下去除溶剂，以得到粗标题产物(439mg)，其无需进一步纯化即可用于步骤b中。ms(esi)：c
17h25
no3的质量计算值为291.2；m/z实测值为218.1[m-c4h
8-oh]

。
[0264]
步骤b.n-甲基-3-(邻甲苯基)环丁-2-烯-1-胺，三氟乙酸盐。在圆底烧瓶中，在室温下，将三氟乙酸(112μl，1当量)添加到(3-羟基-3-(邻甲苯基)环丁基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(439mg，1.51mmol，1当量)、三乙基硅烷(1.68ml，7当量)和二氯甲烷(5ml)的混合物中。将反应混合物在室温下搅拌3小时，然后将附加的三氟乙酸(800μl)添加到反应混合物中并在室温下搅拌72小时。随后真空去除溶剂，并且将过量的三氟乙酸与甲苯共蒸馏。由此获得的棕色油状粗标题产物(261mg，粗制)无需进一步纯化即可用于步骤c中。ms(esi)：c
12h15n的质量计算值为173.1；m/z实测值为174.1[m h]

。
[0265]
步骤c.n-甲基-3-(邻甲苯基)环丁-1-胺，三氟乙酸盐。在高压容器中，将10％碳载钯(40mg，15质量/质量％)添加到n-甲基-3-(邻甲苯基)环丁-2-烯-1-胺，三氟乙酸盐(261mg，1.51mmol)的甲醇(50ml)溶液中。将容器密封，并装入氢气(30巴)，并在50℃下加热16小时。将系统冷却并且将反应混合物通过过滤。在真空下去除溶剂，得到棕色油状粗标题产物(264mg，粗制)，其无需进一步纯化即可使用。ms(esi)：c
12h17
n的质量计算值为175.1；m/z实测值为176.1[m h]

。
[0266]
中间体12：n-甲基-3-(间甲苯基)环丁-1-胺，三氟乙酸盐。
[0267][0268]
以类似于中间体6的方式，在步骤a中使用1-碘-3-甲基苯代替1-溴-3-异丙基苯并使用异丙基氯化镁代替n-buli来制备标题化合物。ms(esi)：c
12h17
n的质量计算值为175.1；m/z实测值为176.1[m h]

。
[0269]
中间体13：3-(3-乙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐。
[0270][0271]
以类似于中间体8的方式，在步骤a中使用1-溴-3-乙基苯代替1-溴-3-异丙基苯来制备标题化合物。ms(esi)：c
13h19
n的质量计算值为189.2；m/z实测值为190.2[m h]

。
[0272]
中间体14：3-(2，3-二甲基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐。
[0273][0274]
以类似于中间体8的方式，在步骤a中使用1-溴-2,3-二甲基苯代替1-溴-3-异丙基苯来制备标题化合物。ms(esi)：c
13h19
n的质量计算值为189.2；m/z实测值为190.2[m h]

。
[0275]
中间体15：3-(4-环丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐。
[0276][0277]
以类似于中间体9的方式，在步骤a中使用1-溴-4-环丙基苯代替1-溴-3-异丙基苯来制备标题化合物。ms(esi)：c
14h19
n的质量计算值为201.2；m/z实测值为202.2[m h]

。
[0278]
中间体16：3-(3,4-二甲基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐。
[0279][0280]
以类似于中间体8的方式，在步骤a中使用4-溴-1,2-二甲基苯代替1-溴-3-异丙基苯来制备标题化合物。ms(esi)：c
13h19
n的质量计算值为189.2；m/z实测值为190.1[m h]

。
[0281]
中间体17：3-(3-氟-4-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐。
[0282][0283]
步骤a.(3-(3-氟-4-异丙基苯基)-3-羟基环丁基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯。在圆底烧瓶中，在-78℃下，将n-buli(1.6m的己烷溶液，784μl，1.26mmol，1.25当量)逐滴添加到4-溴-2-氟-1-异丙基苯(218mg，1.00mmol，1当量)的无水thf(10ml)溶液中。在-78℃下，将反应混合物搅拌1小时。然后，逐滴添加n-甲基-n-(3-氧代环丁基)氨基甲酸叔丁酯(300mg，1.50mmol，1当量)的无水thf(4ml)溶液，并将反应混合物在相同温度下再搅拌2小时。然后，将反应混合物升温至室温，用饱和nh4cl水溶液淬灭。将混合物用etoac萃取，并且将有机相用盐水洗涤。将有机层经无水mgso4干燥、过滤，并在真空下去除溶剂，以得到棕色油状标题产物(480mg，粗制)，其无需进一步纯化即可用于步骤b中。ms(esi)：c
19h28
fno3的质量计算值为337.2；m/z实测值为264.1[m-c4h
8-oh]

。
[0284]
步骤b.3-(3-氟-4-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐。在圆底烧瓶中，在0℃下，将三氟乙酸(3.3ml，45mmol，45当量)逐滴添加到(3-(3-氟-4-异丙基苯基)-3-羟基环丁基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(339mg，1mmol，1当量)、三乙基硅烷(1.1ml，7mmol，7当量)的dcm(3.3ml，3.3ml/mmol)溶液中。将反应混合物在室温下搅拌2.5小时。然后，将溶剂在减压下去除，与甲苯共蒸馏，并且将过量的et3sih和tfa在高真空下去除并持续30分钟，以得到粗标题产物，其无需进一步纯化即可使用。ms(esi)：c
14h20
fn的质量计算值为221.2；m/z实测值为222.2[m h]

。
[0285]
中间体18：3-(4-氟-3-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐。
[0286][0287]
以类似于中间体17的方式，在步骤a中使用1-氟-4-碘-2-异丙基苯代替1-溴-3-异丙基苯来制备标题化合物。ms(esi)：c
14h20
fn的质量计算值为221.2；m/z实测值为222.2[m h]

。
[0288]
中间体19：3-(2,4-二甲基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐。
[0289][0290]
以类似于中间体17的方式，在步骤a中使用1-溴-2,4-二甲基苯代替1-溴-3-异丙基苯来制备标题化合物。ms(esi)：c
13h19
n的质量计算值为189.2；m/z实测值为190.2[m h]

。
[0291]
中间体20：3-(4-乙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐。
[0292][0293]
以类似于中间体17的方式，在步骤a中使用1-溴-4-乙基苯代替1-溴-3-异丙基苯来制备标题化合物。ms(esi)：c
13h19
n的质量计算值为189.2；m/z实测值为190.1[m h]

。
[0294]
中间体21：3-(4-乙基-3-甲基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐。
[0295][0296]
以类似于中间体17的方式，在步骤a中使用4-溴-1-乙基-2-甲基苯代替1-溴-3-异丙基苯来制备标题化合物。ms(esi)：c
14h21
n的质量计算值为203.2；m/z实测值为204.2[m h]

。
[0297]
中间体22：3-(3-环丁基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐。
[0298][0299]
以类似于中间体17的方式，在步骤a中使用1-溴-3-环丁基苯代替1-溴-3-异丙基苯来制备标题化合物。ms(esi)：c
15h21
n的质量计算值为215.2；m/z实测值为216.2[m h]

。
[0300]
中间体23：3-(4-环丙基-3-甲基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐。
[0301][0302]
以类似于中间体17的方式，在步骤a中使用4-溴-1-环丙基-2-甲基苯代替1-溴-3-异丙基苯来制备标题化合物。ms(esi)：c
15h21
n的质量计算值为215.2；m/z实测值为216.2[m h]

。
[0303]
中间体24：3-(3-环丙基-4-甲基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐。
[0304][0305]
以类似于中间体17的方式，在步骤a中使用4-溴-2-环丙基-1-甲基苯代替1-溴-3-异丙基苯来制备标题化合物。ms(esi)：c
15h21
n的质量计算值为215.2；m/z实测值为216.2[m h]

。
[0306]
中间体25：n-甲基-3-(5,6,7,8-四氢萘-2-基)环丁-1-胺，三氟乙酸盐。
[0307][0308]
以类似于中间体17的方式，在步骤a中使用6-溴-1,2,3,4-四氢化萘代替1-溴-3-异丙基苯来制备标题化合物。ms(esi)：c
15h21
n的质量计算值为215.2；m/z实测值为216.2[m h]

。
[0309]
中间体26：3-苄基-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐。
[0310][0311]
步骤a.(3-亚苄基环丁基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯。在圆底烧瓶中，在80℃下，将氢化钠(80mg，2.0mmol)的无水dmso(16ml)溶液搅拌20分钟。将混合物冷却至0℃，并且添加氯化苄基三苯基鏻(1.25g，3.2mmol)的无水dmso(7ml)溶液。将所得混合物在室温下搅拌30分钟。然后，添加(3-氧代环丁基)氨基甲酸叔丁基甲酯(400mg，2.0mmol)的无水dmso(7ml)溶液，并在80℃下将所得反应混合物搅拌16小时。将反应混合物用etoac稀释并用水洗涤。将有机层经mgso4干燥，过滤并减压浓缩，以得到深橙色油状物。通过快速柱色谱法使用庚烷/etoac(100:0至90:10)进行的纯化得到米色油状标题产物，其无需进一步纯化即可用于步骤b中。ms(esi)：c
17h23
no2的质量计算值为273.2；m/z实测值为218.1[m-c4h8 h]

。
[0312]
步骤b.(3-苄基环丁基)(甲基)氨基甲酸。在高压容器中，将碳载钯(10％，15质量/质量％)添加到(3-亚苄基环丁基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(296mg，1.08mmol)的甲醇(50ml)溶液中。将容器密封，并装入氢气(30巴)，并在50℃下加热16小时。将系统冷却并且将反应混合物通过过滤。在真空下去除溶剂，以得到浅棕色油状粗标题产物(299mg，粗制)，其无需进一步纯化即可用于步骤c中。ms(esi)：c
17h25
no2的质量计算值为219.1；m/z实测值为220.2[m h]

。
[0313]
步骤c.3-苄基-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐。在圆底烧瓶中，将三氟乙酸(1.9ml，24mmol，24当量)添加到(3-苄基-环丁基)-甲基-氨基甲酸叔丁酯(298mg，1mmol，1当量)的dcm(5.5ml，5.5ml/mmol)溶液中，并且在室温下将反应混合物搅拌16小时。在真空下去除溶剂，并且将过量的三氟乙酸与甲苯共蒸馏，以得到棕色油状(3-苄基-环丁基)-甲基-胺。该产物无需进一步纯化即可使用。ms(esi)：c
12h17
n的质量计算值为175.1；m/z实测值为176.2[m h]

。
[0314]
中间体27：3-(叔丁基)-n-甲基环丁-1-胺。
[0315][0316]
在圆底烧瓶中，在室温下在氮气下，将3-(叔丁基)环丁-1-酮(200mg，1.5mmol，1当量)、甲胺(7.53ml，2m的thf溶液，15.1mmol，10当量)、异丙醇钛(iv)(0.92ml，3.0mmol，2当量)和1,2-二氯乙烷(32ml，21ml/mmol)的混合物搅拌16小时。然后添加三乙酰氧基硼氢化钠(3.2g，15.0mmol，10当量)，并在室温下将反应混合物再搅拌16小时。将反应混合物用饱和nh4cl水溶液淬灭，并将产物用etoac萃取。将合并的有机萃取物用水和盐水洗涤，经mgso4干燥、过滤并减压浓缩，以得到米色固体，其通过硅胶快速柱色谱法使用dcm:meoh:nh3(100:0:0至98:2:0.1)作为洗脱液纯化，得到(3-叔丁基-环丁基)-甲基-胺，其为顺式异构体/反式异构体的混合物。ms(esi)：c9h
19
n的质量计算值为141.2；m/z实测值为142.2[m h]

。
[0317]
中间体28：3-(3-氯-5-甲基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐。
[0318][0319]
以类似于中间体17的方式，在步骤a中使用1-溴-3-氯-5-甲基苯代替4-溴-2-氟-1-异丙基苯来制备标题化合物。ms(esi)：c
12h16
cln的质量计算值为209.1；m/z实测值为210.1[m h]

。
[0320]
中间体29：(1s,3s)-3-(3,5-二甲基苯基)-n-乙基环丁-1-胺，hcl盐。
[0321][0322]
步骤a：3-(3-溴-5-甲基苯基)环丁-1-酮。将tf2o(3.73ml，22.1mmol)添加到由n,n-二甲基乙酰胺(2.06ml，22.2mmol)和1,2-二氯乙烷(8ml)组成的溶液中。在室温下将所得混合物搅拌30分钟，然后用由1-溴-3-甲基-5-乙烯基苯(3.35g，17.0mmol)、2,4,6-三甲吡啶(2.92ml，22.1mmol)和1,2-二氯乙烷(8ml)组成的溶液处理。在90℃下将反应混合物搅拌16小时，然后冷却至室温并用水(32ml)稀释。在90℃下将所得混合物再搅拌18小时，然后冷却至室温，将其倾注到h2o(100ml)中并用二氯甲烷(50ml
×
3)萃取。将合并的有机萃取物经无水na2so4干燥，过滤，并减压浓缩至干，所得残余物通过fcc(洗脱剂：石油醚:乙酸乙酯＝0:1至5:1)纯化，以得到黄色油状标题化合物(2.5g，62％)。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.26-7.23(m,2h),7.03(s,1h),3.67-3.57(m,1h),3.53-3.43(m,2h),3.28-3.18(m,2h),2.35(s,3h)。
[0323]
步骤b：3-(3,5-二甲基苯基)环丁-1-酮。将3-(3-溴-5-甲基苯基)环丁酮(1.00g，
4.18mmol)、2,4,6-三甲基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三硼杂环己烷(788mg，6.28mmol)、k2co3(1.73g，12.5mmol)、1,4-二氧戊环(10ml)和h2o(2.5ml)的混合物添加到20ml管中。将混合物用ar曝气5分钟，然后用pd(dppf)cl2·
ch2cl2(342mg，0.419mmol)处理。将反应混合物用ar再曝气5分钟，并且搅拌所得混合物，同时在90℃下加热2小时，然后冷却至室温，将其倾注到h2o(100ml)中，并用乙酸乙酯(50ml
×
3)萃取。将合并的有机萃取物经无水na2so4干燥，过滤，并减压浓缩至干，将所得残余物通过fcc(洗脱剂：石油醚：乙酸乙酯＝0:1至5:1)纯化，以得到黄色油状标题化合物(180mg，25％)。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ6.95-6.91(m,3h),3.67-3.58(m,1h),3.53-3.42(m,2h),3.30-3.20(m,2h),2.34(s,6h)。
[0324]
步骤c：(1s,3s)-n-二苯甲基-3-(3,5-二甲基苯基)-n-乙基环丁-1-胺。
[0325]
将nabh(oac)3(2.43g，11.5mmol)加入由3-(3,5-二甲基苯基)环丁酮(1.0g，5.7mmol)、n-二苯甲基乙胺(1.21g，5.73mmol)和二氯甲烷(10ml)组成的溶液中。然后，将acoh(0.25ml)添加到反应混合物中。在室温下将反应混合物搅拌12小时，然后将其倾注到饱和nahco3(20ml)中并用二氯甲烷(30ml
×
3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(20ml)洗涤，经无水na2so4干燥，过滤，并减压浓缩至干，将所得残余物通过fcc(洗脱剂：石油醚：乙酸乙酯＝1:0至5:1)纯化，以得到澄清油状的仍然不纯的产物(1.2g，粗制)。将后色谱产物与另一批次粗产物(由180mg的3-(3,5-二甲基苯基)环丁酮单独制备，之后进行与上文相同的程序)混合并且通过制备型hplc使用henomenex gemini nx-c18 150mm
×
40mm
×
5μm柱(洗脱液：85％至90％(体积/体积)ch3cn和h2o，其具有0.04％nh3 10mm nh4hco3)进一步纯化。将由此纯化的产物悬浮于水(10ml)中，使用干冰/丙酮冷冻混合物，然后冻干至干以提供标题产物(200mg)。ms(esi)：c
27h31
n的质量计算值为369.3；m/z实测值为370.3[m h]

。
[0326]
步骤d：(1s,3s)-3-(3,5-二甲基苯基)-n-乙基环丁-1-胺，hcl盐。将(1s,3s)-n-二苯甲基-3-(3,5-二甲基苯基)-n-乙基环丁-1-胺(200mg，0.541mmol)、甲醇(30ml)、干燥pd/c(100mg，10％干燥pd/c)和浓hcl(0.1ml)添加到100ml氢化瓶中。在室温下在h2(15psi)下，将所得混合物搅拌16小时。将悬浮液通过垫过滤，并且用甲醇(100ml)洗涤垫。将混合物减压浓缩至干，得到产物(200mg)，其无需进一步纯化即可用于下一步骤。lc-ms(esi)：r
t
＝0.77min，c
14h21
n的质量计算值为203.17，m/z实测值为204.3[m h]

。ms(esi)：c
14h21
n的质量计算值为203.2；m/z实测值为204.3[m h]

。
[0327]
中间体30：3-环己基-n-甲基环丁-1-胺。
[0328][0329]
以类似于中间体27的方式，使用3-环己基环丁-1-酮代替3-(叔丁基)环丁-1-酮来制备标题化合物。ms(esi)：c
11h21
n的质量计算值为167.2；m/z实测值为168.2[m h]

。
[0330]
中间体31：n-甲基-3-(4-(1-甲基环丙基)苯基)环丁-1-胺，三氟乙酸盐。
[0331][0332]
以类似于中间体17的方式，在步骤a中使用1-溴-4-(1-甲基环丙基)苯代替4-溴-2-氟-1-异丙基苯来制备标题化合物。ms(esi)：c
15h21
n的质量计算值为215.2；m/z实测值为216.2[m h]

。
[0333]
中间体32：n-甲基-3-(3-(1-甲基环丙基)苯基)环丁-1-胺，三氟乙酸盐。
[0334][0335]
以类似于中间体17的方式，在步骤a中使用1-溴-3-(1-甲基环丙基)苯代替4-溴-2-氟-1-异丙基苯来制备标题化合物。ms(esi)：c
15h21
n的质量计算值为215.2；m/z实测值为216.2[m h]

。
[0336]
中间体33：3-(3-乙基-5-甲基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐。
[0337][0338]
以类似于中间体17的方式，在步骤a中使用1-溴-3-乙基-5-甲基苯代替4-溴-2-氟-1-异丙基苯来制备标题化合物。ms(esi)：c
14h21
n的质量计算值为203.2；m/z实测值为204.1[m h]

。
[0339]
中间体34：3-(3-环丙基-5-甲基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐。
[0340][0341]
以类似于中间体17的方式，在步骤a中使用1-溴-3-环丙基-5-甲基苯代替4-溴-2-氟-1-异丙基苯来制备标题化合物。ms(esi)：c
15h21
n的质量计算值为215.2；m/z实测值为216.2[m h]

。
[0342]
中间体35：3-(3-异丙基-5-甲基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐。
[0343]
[0344]
步骤a：1-溴-3-甲基-5-(丙-1-烯-2-基)苯。使氮气(n2)鼓泡通入压力烧瓶中的1-溴-3-碘-5-甲基苯(1.0g，3.37mmol)的1,4-二氧戊环(7.5ml)和水(2.5ml)溶液并持续5分钟。在保持n2鼓泡的同时，依次添加4,4,5,5-四甲基-2-(丙-1-烯-2-基)-1,3,2-二杂氧戊硼烷(0.62ml，3.37mmol)、碳酸铯(2.37g，7.26mmol)和dppfpdcl2(404mg，495μmol)。再继续n2鼓泡5分钟，之后将压力帽用螺旋盖密封，并将反应混合物在90℃下搅拌。16小时之后，将反应混合物通过垫过滤。收集滤液，用etoac稀释，并且用水和盐水洗涤。将有机相分离并且经mgso4干燥、过滤并减压浓缩，所得残余物通过快速柱色谱法使用庚烷/etoac(100:0至90:10)作为洗脱剂纯化，以得到褐色油状标题化合物(382mg，1.81mmol)。1h nmr(300mhz,chloroform-d):7.39(s,1h),7.23(s,1h),7.18(s,1h),5.22(d,j＝73.9hz,2h),2.33(s,3h),2.11(s,3h)。
[0345]
步骤b：3-(3-异丙基-5-甲基苯基)-n-甲基环丁-1-胺。以类似于中间体17的方式，在步骤a中使用1-溴-3-甲基-5-(丙-1-烯-2-基)苯代替4-溴-2-氟-1-异丙基苯来制备标题化合物。ms(esi)：c
15h23
n的质量计算值为217.1；m/z实测值为218.2[m h]

。
[0346]
中间体36：3-(3-环丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐。
[0347][0348]
以类似于中间体17的方式，在步骤a中使用1-溴-3-环丙基苯代替4-溴-2-氟-1-异丙基苯来制备标题化合物。ms(esi)：c
14h19
n的质量计算值为201.2；m/z实测值为202.1[m h]

。
[0349]
中间体37：3-(2,3-二氢-1h-茚-5-基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐。
[0350][0351]
以类似于中间体17的方式，在步骤a中使用5-溴-2,3-二氢-1h-茚代替4-溴-2-氟-1-异丙基苯来制备标题化合物。ms(esi)：c
14h19
n的质量计算值为201.2；m/z实测值为202.2[m h]

。
[0352]
中间体38：3-(双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-3-基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐。
[0353][0354]
以类似于中间体17的方式，在步骤a中使用3-溴双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯代替4-溴-2-氟-1-异丙基苯来制备标题化合物。ms(esi)：c
13h17
n的质量计算值为187.1；m/z实测值为188.1[m h]

。
[0355]
实施例1：(2s,4s)-n-甲基-6-氧代-n-((1s,3s)-3-苯基环丁基)-7-氧杂-5-氮杂
螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0356][0357]
将三乙胺(110μl，794μmol)逐滴添加到n-甲基-3-苯基环丁-1-胺(约4:1顺式:反式混合物，40.0mg，248μmol)、(2s,4s)-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酸(中间体1，42.4mg，248μmol)和hatu(117mg，273μmol)在n,n-二甲基乙酰胺(2.5ml)中的搅拌的0℃混合物中。在室温下使反应混合物搅拌14小时，并随后用水(1ml)稀释。通过rp-hplc纯化(方法b，acn/h2o，0.05％tfa)得到分离收率为49％的标题产物和收率为9％的(2s,4s)-n-甲基-6-氧代-n-((1r,3r)-3-苯基环丁基)-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺(实施例2)。ms(esi)：c
18h22
n2o3的质量计算值为314.2；m/z实测值为315.1[m h]

。1h nmr(500mhz，甲醇-d4)δ7.36-7.11(m,5h),4.79-4.70(m,0.5h),4.52(s,1h),4.48(s,1h),4.45-4.34(m,0.5h),3.24-3.04(m,2h),2.95(m,3h),2.63-2.18(m,8h).
[0358]
实施例2：(2s,4s)-n-甲基-6-氧代-n-((1r,3r)-3-苯基环丁基)-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0359][0360]
从实施例1中分离出标题化合物。ms(esi)：c
18h22
n2o3的质量计算值为314.2；m/z实测值为315.1[m h]

。1h nmr(500mhz，甲醇-d4)δ7.38-7.13(m,5h),5.16-5.03(m,0.5h),4.69-4.54(m,0.5h),4.48(s,1h),4.45(s,1h),3.58-3.43(m,1h),3.14-2.99(m,4h),2.86-2.62(m,2h),2.58-2.31(m,5h)。
[0361]
实施例3：(2s,4s)-n-((1s,3s)-3-(3-环丁基苯基)环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0362][0363]
以类似于实施例10的方式，使用3-(3-环丁基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐(中间体22)代替3-(3-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺(中间体6)来制备标题化合物。ms(esi)：c
22h28
n2o3的质量计算值为368.2；m/z实测值为369.2[m h]

。1h nmr(400mhz，甲醇-d4)δ7.29
–
7.13(m,1h),7.10
–
7.00(m,3h),4.82
–
4.68(m,0.5h),4.50(m,2h),4.45
–
4.32(m,0.5h),3.61
–
3.46(m,1h),3.25
–
3.03(m,2h),2.95(m,3h),2.63
–
1.97(m,13h),1.92
–
1.81(m,1h)。
3.03(m,2h),2.95(m,3h),2.65-2.43(m,6h),2.40-2.31(m,1h),2.28-2.17(m,1h),1.31(m,9h)。
[0373]
实施例7：(2r,4s)-n-((1s,3s)-3-(3-(叔丁基)苯基)环丁基)-n-甲基-6-氧代-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0374][0375]
以类似于实施例6的方式，使用(2r,4s)-6-氧代-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酸(中间体2)代替(2s,4s)-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酸(中间体1)来制备标题化合物。通过rp-hplc纯化(方法b，acn/h2o，0.05％tfa)得到标题产物。ms(esi)：c
23h32
n2o2的质量计算值为368.2；m/z实测值为369.2[m h]

。1h nmr(500mhz，甲醇-d4)δ7.29-7.18(m,3h),7.13-7.00(m,1h),4.76(m,0.5h),4.48-4.35(m,0.5h),3.28-3.09(m,2h),2.96(m,3h),2.65-2.54(m,2h),2.52-2.18(m,10h),1.31(m,9h)。
[0376]
实施例8：(2s,4s)-n-((1s,3s)-3-(3,5-二甲基苯基)环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0377][0378]
以类似于实施例1的方式，使用3-(3,5-二甲基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐(中间体5，顺式/反式混合物)代替n-甲基-3-苯基环丁-1-胺来制备标题化合物。通过rp-hplc纯化(方法b，acn/h2o，0.05％tfa)得到标题产物和(2s,4s)-n-((1r,3r)-3-(3,5-二甲基苯基)环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺(实施例9)。ms(esi)：c
20h26
n2o3的质量计算值为342.2；m/z实测值为343.2[m h]

。1h nmr(500mhz，甲醇-d4)δ6.90-6.77(m,3h),4.77-4.67(m,0.5h),4.50(m,2h),4.43-4.30(m,0.5h),3.23-3.04(m,2h),2.99-2.90(m,3h),2.61-2.40(m,6h),2.38-2.11(m,8h)。
[0379]
实施例9：(2s,4s)-n-((1r,3r)-3-(3,5-二甲基苯基)环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0380][0381]
从实施例8中分离出标题化合物。ms(esi)：c
20h26
n2o3的质量计算值为342.2；m/z实测值为343.1[m h]

。1h nmr(500mhz，甲醇-d4)δ6.93(s,2h),6.83(m,1h),5.08(m,0.5h),
4.61-4.40(m,2.5h),3.51-3.35(m,1h),3.15-3.01(m,4h),2.80-2.61(m,2h),2.59-2.21(m,12h)。
[0382]
实施例10：(2s,4s)-n-((1s,3s)-3-(3-异丙基苯基)环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0383][0384]
在圆底烧瓶中，将丙基膦酸酐etoac溶液(1ml，1.7mmol，50％，1.25当量)和dipea(655μl，3.7mmol，2.5当量)添加到(2s,4s)-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酸(中间体1，282mg，1.65mmol，1.2当量)的无水dmf(7.5ml，5ml/mmol)溶液中。在室温下将混合物搅拌10分钟，然后添加3-(3-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺(中间体6，300mg，1.5mmol，1当量)的dmf(1ml)溶液，并在室温下将反应混合物再搅拌16小时。将反应混合物用etoac和饱和nahco3水溶液稀释。将有机层经mgso4干燥、过滤并在真空下去除溶剂，得到深棕色油。粗产物通过快速柱色谱法(硅胶，dcm/meoh(9:1)的dcm溶液，0％至10％)纯化，以得到产物，其为顺式异构体/反式异构体的混合物。通过超临界流体色谱法(sfc)(方法d，等度模式：40％甲醇 0.1％二乙胺和60％co2)进一步纯化该混合物以产生顺式异构体，标题产物(52.3mg，0.15mmol，10％收率)。ms(esi)：c
21h28
n2o3的质量计算值为356.2；m/z实测值为357.2[m h]

。1h nmr(400mhz,cd3od)δ7.31
–
7.15(m,1h),7.14
–
6.99(m,3h),4.80
–
4.66(m,0.5h),4.50(m,2h),4.45
–
4.32(m,0.5h),3.26
–
3.01(m,2h),2.96(m,3h),2.93
–
2.81(m,1h),2.67
–
2.40(m,6h),2.43
–
2.28(m,1h),2.29
–
2.16(m,1h),1.24(m,6h)。
[0385]
实施例11：(2s,4s)-n-((1s,3s)-3-(3-甲氧基苯基)环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0386][0387]
以类似于实施例10的方式，使用3-(3-甲氧基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐(中间体7)代替3-(3-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺(中间体6)并且使用hbtu代替作为偶联试剂来制备标题化合物。通过sfc纯化(方法e)得到标题产物和(2s,4s)-n-((1r,3r)-3-(3-甲氧基苯基)环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺(实施例12)。ms(esi)：c
19h24
n2o4的质量计算值为344.2；m/z实测值为345.2[m h]

。1h nmr(400mhz，甲醇-d4)δ7.25-7.17(m,1h),6.87-6.81(m,1h),6.81-6.72(m,2h),4.79-4.69(m,0.5h),4.50(m,2h),4.45-4.31(m,0.5h),3.78(m,3h),3.22-3.00(m,2h),2.95(m,3h),2.63-2.42(m,6h),2.40-2.32(m,1h),2.27-2.16(m,1h)。
[0388]
实施例12：(2s,4s)-n-((1r,3r)-3-(3-甲氧基苯基)环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0389][0390]
从实施例11中分离出标题化合物。ms(esi)：c
19h24
n2o4的质量计算值为344.2；m/z实测值为345.1[m h]

。1h nmr(400mhz,cd3od)δ7.29
–
7.20(m,1h),6.95
–
6.87(m,2h),6.80
–
6.72(m,1h),5.13
–
5.04(m,0.5h),4.58-4.47(m,2.5h),3.80(m,3h),3.56
–
3.41(m,1h),3.17
–
3.04(m,4h),2.84
–
2.64(m,2h),2.57
–
2.32(m,6h)。
[0391]
实施例13：(2s,4s)-n-((1s,3s)-3-(4-异丙基苯基)环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0392][0393]
以类似于实施例10的方式，使用3-(4-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐(中间体8)代替3-(3-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺(中间体6)制备标题化合物。ms(esi)：c
21h28
n2o3的质量计算值为356.2；m/z实测值为357.2[m h]

。1h nmr(400mhz，甲醇-d4)δ7.17(m,4h),4.81
–
4.68(m,0.5h),4.50(m,2h),4.46
–
4.31(m,0.5h),3.25
–
2.81(m,6h),2.62
–
2.43(m,6h),2.41
–
2.28(m,1h),2.28
–
2.13(m,1h),1.23(m,6h)。
[0394]
实施例14：(2s,4s)-n-((1s,3s)-3-(3-叔丁基)-4-氟苯基)环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0395][0396]
以类似于实施例10的方式，使用3-(3-(叔丁基)-4-氟苯基)-n-甲基环丁烷-1-胺，三氟乙酸盐(中间体9)代替3-(3-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺(中间体6)来制备标题化合物。ms(esi)：c
22h29
fn2o3的质量计算值为388.2；m/z实测值为389.1[m h]

。1h nmr(400mhz，甲醇-d4)δ7.21
–
7.05(m,2h),7.04
–
6.89(m,1h),4.80
–
4.64(m,0.5h),4.50(m,2h),4.46
–
4.32(m,0.5h),3.26
–
3.00(m,2h),2.95(m,3h),2.68
–
2.39(m,6h),2.41
–
2.25(m,1h),2.27
–
2.09(m,1h),1.37(s,9h)。
[0397]
实施例15：(2s,4s)-n-甲基-6-氧代-n-((1s,3s)-3-(3-(1-(三氟甲基)环丙基)苯基)环丁基)-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0398][0399]
以类似于实施例10的方式，使用n-甲基-3-(3-(1-(三氟甲基)环丙基)苯基)环丁-1-胺，三氟乙酸盐(中间体10)代替3-(3-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺(中间体6)来制备标题化合物。通过sfc纯化(方法e)得到标题产物和(2s,4s)-n-甲基-6-氧代-n-((1r,3r)-3-(3-(1-(三氟甲基)环丙基)苯基)环丁基)-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺(实施例16)。ms(esi)：c
22h25
f3n2o3的质量计算值为422.2；m/z实测值为423.2[m h]

。1h nmr(400mhz，甲醇-d4)δ7.38
–
7.18(m,4h),4.77
–
4.67(m,0.5h),4.50(m,2h),4.47
–
4.32(m,0.5h),3.27
–
3.0.3(m,2h),2.95(m,3h),2.71
–
2.12(m,8h),1.38
–
1.27(m,2h),1.06(m,2h)。
[0400]
实施例16：(2s,4s)-n-甲基-6-氧代-n-((1r,3r)-3-(3-(1-(三氟甲基)环丙基)苯基)环丁基)-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0401][0402]
从实施例15中分离出标题化合物。ms(esi)：c
22h25
f3n2o3的质量计算值为422.1；m/z实测值为423.1[m h]

。1h nmr(400mhz，甲醇-d4)δ7.43(s,1h),7.39
–
7.26(m,3h),5.17
–
5.00(m,0.5h),4.67
–
4.51(m,1.5h),4.46(m,2h),3.66
–
3.43(m,1h),3.18
–
3.05(m,4h),2.92
–
2.65(m,2h),2.60
–
2.32(m,6h),1.42
–
1.29(m,2h),1.16
–
0.98(m,2h)。
[0403]
实施例17：(2s,4s)-n-甲基-6-氧代-n-((1s,3s)-3-(邻甲苯基)环丁基)-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0404][0405]
以类似于实施例10的方式，使用n-甲基-3-(邻甲苯基)环丁-1-胺，三氟乙酸盐(中间体11)代替3-(3-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺(中间体6)来制备标题化合物。通过sfc纯化(方法e)得到标题产物和(2s,4s)-n-甲基-6-氧代-n-((1r,3r)-3-(邻甲苯基)环丁基)-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺(实施例18)。ms(esi)：c
19h24
n2o3的质量计算值为328.2；m/z实测值为329.1[m h]

。1h nmr(400mhz，甲醇-d4)δ7.33
–
6.93(m,4h),4.84
–
4.71(m,0.5h),4.51(m,2h),4.46
–
4.35(m,0.5h),3.27
–
3.0.1(m,2h),2.94(m,3h),2.71
–
2.12(m,11h)。
[0406]
实施例18：(2s,4s)-n-甲基-6-氧代-n-((1r,3r)-3-(邻甲苯基)环丁基)-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0407][0408]
从实施例17中分离标题产物。ms(esi)：c
19h24
n2o3的质量计算值为328.2；m/z实测值为329.1[m h]

。1h nmr(400mhz，甲醇-d4)δ7.47(d,j＝7.6hz,1h),7.29
–
7.01(m,3h),5.15
–
4.95(m,0.5h),4.66
–
4.51(m,1h),4.46(m,2h),3.72
–
3.53(m,1h),3.17
–
3.04(m,4h),2.89
–
2.62(m,2h),2.60
–
2.25(m,6h),2.21(m,3h).
[0409]
实施例19：(2s,4s)-n-甲基-6-氧代-n-((1s,3s)-3-(间甲苯基)环丁基)-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0410][0411]
以类似于实施例10的方式，使用n-甲基-3-(间甲苯基)环丁-1-胺，三氟乙酸盐(中间体12)代替3-(3-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺(中间体6)来制备标题化合物。通过sfc纯化(方法e)，得到标题产物和(2s,4s)-n-甲基-6-氧代-n-((1r,3r)-3-(间甲苯基)环丁基)-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺(实施例20)。ms(esi)：c
19h24
n2o3的质量计算值为328.2；m/z实测值为329.1[m h]

。1h nmr(400mhz，甲醇-d4)δ7.23
–
7.08(m,1h),7.07
–
6.95(m,3h),4.78
–
4.67(m,0.5h),4.50(m,2h),4.45
–
4.32(m,0.5h),3.23
–
3.02(m,3h),2.95(m,3h),2.62
–
2.30(m,10h)。
[0412]
实施例20：(2s,4s)-n-甲基-6-氧代-n-((1r,3r)-3-(间甲苯基)环丁基)-7-氧杂-5-氮杂螺[34]辛烷-2-甲酰胺。
[0413][0414]
从实施例19中分离出标题化合物。ms(esi)：c
19h24
n2o3的质量计算值为328.2；m/z实测值为329.1[m h]

。1h nmr(400mhz，甲醇-d4)δ7.15
–
6.99(m,3h),6.96
–
6.88(m,1h),5.06
–
4.94(m,0.5h),4.54
–
4.43(m,0.5h),4.37(m,2h),3.45
–
3.28(m,1h),3.05
–
2.91(m,4h,2.75
–
2.53(m,2h),2.48
–
2.20(m,9h)。
[0415]
实施例21：(2s,4s)-n-((1s,3s)-3-(3-乙基苯基)环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0416][0417]
以类似于实施例10的方式，使用n-甲基-3-(间甲苯基)环丁-1-胺，三氟乙酸盐(中间体13)代替3-(3-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺(中间体6)来制备标题化合物。ms(esi)：c
20h26
n2o3的质量计算值为342.2；m/z实测值为343.2[m h]

。1h nmr(400mhz，甲醇-d4)δ7.30
–
7.09(m,1h),7.10
–
6.96(m,3h),4.79
–
4.67(m,0.5h),4.50(m,2h),4.47
–
4.30(m,0.5h),3.25
–
3.03(m,2h),2.95(m,3h),2.70
–
2.16(m,10h),1.22(m,3h)。
[0418]
实施例22：(2s,4s)-n-((1s,3s)-3-(2,3-二甲基苯基)环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0419][0420]
以类似于实施例10的方式，使用3-(2,3-二甲基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐(中间体14)代替3-(3-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺(中间体6)来制备标题化合物。通过sfc纯化(方法e)得到标题产物和(2s,4s)-n-((1r,3r)-3-(2,3-二甲基苯基)环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺(实施例23)。ms(esi)：c
20h26
n2o3的质量计算值为342.2；m/z实测值为343.2[m h]

。1h nmr(400mhz，甲醇-d4)δ7.14
–
7.02(m,2h),7.02
–
6.95(m,1h),4.81
–
4.71(m,0.5h),4.50(m,2h),4.46
–
4.34(m,0.5h),3.42
–
3.33(m,1h),3.28
–
3.14(m,0.5h),3.14
–
3.00(m,0.5h),2.91(m,3h),2.69
–
2.39(m,6h),2.39
–
2.28(m,1h),2.26(m,3h),2.17(m,4h)。
[0421]
实施例23：(2s,4s)-n-((1r,3r)-3-(2,3-二甲基苯基)环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0422][0423]
从实施例22中分离标题产物。ms(esi)：c
20h26
n2o3的质量计算值为342.2；m/z实测值为343.2[m h]

。1h nmr(400mhz，甲醇-d4)δ7.30(d,j＝7.6hz,1h),7.15
–
6.98(m,2h),5.04
–
4.92(m,0.5h),4.56
–
4.45(m,3h),3.73
–
3.57(m,1h),3.15
–
3.04(m,4h),2.87
–
2.74(m,1h),2.74
–
2.62(m,1h),2.59
–
2.27(m,9h),2.11(m,3h)。
[0424]
实施例24：(2s,4s)-n-((1s,3s)-3-(4-环丙基苯基)环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0425][0426]
以类似于实施例10的方式，使用3-(4-环丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐(中间体15)代替3-(3-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺(中间体6)来制备标题化合物。ms(esi)：c
21h26
n2o3的质量计算值为354.2；m/z实测值为355.2[m h]

。1h nmr(400mhz，甲醇-d4)δ7.17
–
7.05(m,2h),7.07
–
6.88(m,2h),4.81
–
4.67(m,0.5h),4.48(m,2h),4.42
–
4.30(m,0.5h),3.25
–
2.99(m,2h),2.95(m,3h),2.68
–
2.13(m,8h),1.96
–
1.77(m,1h),1.00
–
0.84(m,2h),0.71
–
0.52(m,2h)。
[0427]
实施例25：(2s,4s)-n-((1s,3s)-3-(3,4-二甲基苯基)环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0428][0429]
以类似于实施例10的方式，使用3-(3,4-二甲基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐(中间体16)代替3-(3-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺(中间体6)来制备标题化合物。ms(esi)：c
20h26
n2o3的质量计算值为342.2；m/z实测值为343.1[m h]

。1h nmr(400mhz，甲醇-d4)δ7.09
–
6.91(m,3h),4.81
–
4.63(m,0.5h),4.50(m,2h),4.44
–
4.30(m,0.5h),3.25
–
3.02(m,2h),2.95(m,3h),2.61
–
2.41(m,6h),2.40
–
2.09(m,10h)。
[0430]
实施例26：(2s,4s)-n-((1s,3s)-3-(3-氟-4-异丙基苯基)环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0431][0432]
以类似于实施例10的方式，使用3-(3-氟-4-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐，中间体17代替3-(3-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺(中间体6)来制备标题化合物。ms(esi)：c
21h27
fn2o3的质量计算值为374.2；m/z实测值为375.1[m h]

。1h nmr(400mhz，甲醇-d4)δ7.28-7.04(m,1h),7.09
–
7.04(m,1h),6.98(d,j＝11.8hz,1h),4.85
–
4.39(m,0.5h),4.56(m,2h),4.50
–
4.39(m,0.5h),3.30
–
3.12(m,3h),3.03
–
2.97(m,3h),2.68
–
2.49(m,6h),2.45
–
2.35(m,1h),2.32
–
2.22(m,1h),1.30(m,6h)。
[0433]
实施例27：(2s,4s)-n-((1s,3s)-3-(4-氟-3-异丙基苯基)环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0434][0435]
以类似于实施例10的方式，使用3-(4-氟-3-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐(中间体18)代替3-(3-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺(中间体6)来制备标题化合物。ms(esi)：c
21h27
fn2o3的质量计算值为374.2；m/z实测值为375.2[m h]

。1h nmr(400mhz，甲醇-d4)δ7.17
–
7.02(m,2h),7.01
–
6.88(m,1h),4.79
–
4.65(m,0.5h),4.50(m,2h),4.46
–
4.32(m,0.5h),3.26
–
3.02(m,3h),2.95(m,3h),2.65
–
2.13(m,8h),1.25(m,6h)。
[0436]
实施例28：(2s,4s)-n-((1s,3s)-3-(2,4-二甲基苯基)环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0437][0438]
以类似于实施例10的方式，使用3-(2,4-二甲基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐(中间体19)代替3-(3-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺(中间体6)来制备标题化合物。ms(esi)：c
20h26
n2o3的质量计算值为342.2；m/z实测值为343.2[m h]

。1h nmr(400mhz，甲醇-d4)δ7.16
–
7.05(m,1h),7.02
–
6.90(m,2h),4.81
–
4.69(m,0.5h),4.50(m,2h),4.46
–
4.33(m,0.5h),3.28
–
3.02(m,2h),2.92(m,3h),2.67
–
2.41(m,6h),2.36
–
2.09(m,8h)。
[0439]
实施例29：(2s,4s)-n-((1s,3s)-3-(4-乙基苯基)环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0440][0441]
以类似于实施例10的方式，使用3-(4-乙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐(中间体20)代替3-(3-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺(中间体6)来制备标题化合物。ms(esi)：c
20h26
n2o3的质量计算值为342.2；m/z实测值为343.1[m h]

。1h nmr(400mhz，甲醇-d4)δ7.19
–
7.11(m,4h),4.82
–
4.66(m,0.5h),4.50(m,2h),4.47
–
4.31(m,0.5h),3.24
–
3.01(m,2h),2.95(m,3h),2.69
–
2.13(m,10h),1.20(t,j＝7.6hz,3h)。
[0442]
实施例30：(2s,4s)-n-((1s,3s)-3-(4-乙基-3-甲基苯基)环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0443][0444]
以类似于实施例10的方式，使用3-(4-乙基-3-甲基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐(中间体21)代替3-(3-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺(中间体6)来制备标题化合物。ms(esi)：c
21h28
n2o3的质量计算值为356.2；m/z实测值为357.2[m h]

。1h nmr(400mhz，甲醇-d4)δ7.09
–
6.97(m,3h),4.78
–
4.65(m,0.5h),4.54
–
4.46(m,2h),4.42
–
4.30(m,0.5h),3.24
–
3.02(m,2h),2.95(m,3h),2.65
–
2.14(m,14h),1.17(m,3h)。
[0445]
实施例31：(2s,4s)-n-((1s,3s)-3-(4-环丙基-3-甲基苯基)环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0446][0447]
以类似于实施例10的方式，使用3-(4-环丙基-3-甲基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐(中间体23)代替3-(3-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺(中间体6)来制备标题化合物。通过快速柱色谱法使用dcm/meoh(100:0至98:2)纯化粗产物，然后通过反相色谱法使用方法d(25mm nh4hco
3 ph 8/acn:meoh(1:1)(59:41至17:83)作为洗脱剂)进一步纯化，以得到标题产物。ms(esi)：c
22h28
n2o3的质量计算值为368.2；m/z实测值为369.2[m h]

。1h nmr(400mhz，甲醇-d4)δ7.04
–
6.85(m,3h),4.80
–
4.65(m,0.5h),4.54
–
4.45(m,2h),4.42
–
4.26(m,0.5h),3.25
–
2.99(m,2h),2.95(m,3h),2.63
–
2.10(m,11h),1.97
–
1.74(m,1h),0.98
–
0.79(m,2h),0.63
–
0.45(m,2h)。
[0448]
实施例32：(2s,4s)-n-((1s,3s)-3-(3-环丙基-4-甲基苯基)环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0449][0450]
以类似于实施例10的方式，使用3-(3-环丙基-4-甲基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐(中间体24)代替3-(3-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺(中间体6)来制备标题化合物。ms(esi)：c
22h28
n2o3的质量计算值为368.2；m/z实测值为369.2[m h]

。1h nmr(400mhz，甲醇-d4)δ7.12
–
7.00(m,1h),7.02
–
6.93(m,1h),6.82(br s,1h),4.77
–
4.64(m,0.5h),4.50(m,2h),4.44
–
4.29(m,0.5h),3.25
–
2.99(m,2h),2.94(m,3h),2.60
–
2.10(m,11h),1.99
–
1.78(m,1h),1.00
–
0.81(m,2h),0.67
–
0.47(m,2h)。
[0451]
实施例33：(2s,4s)-n-甲基-6-氧代-n-((1s,3s)-3-(5,6,7,8-四氢萘-2-基)环丁
基)-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0452][0453]
以类似于实施例10的方式，使用n-甲基-3-(5,6,7,8-四氢萘-2-基)环丁-1-胺，三氟乙酸盐(中间体25)代替3-(3-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺(中间体6)来制备标题化合物。ms(esi)：c
22h28
n2o3的质量计算值为368.2；m/z实测值为369.2[m h]

。1h nmr(400mhz，甲醇-d4)δ6.99
–
6.86(m,4h),4.78
–
4.66(m,0.5h),4.50(m,2h),4.42
–
4.30(m,0.5h),3.26
–
3.00(m,2h),2.95(m,3h),2.79
–
2.67(m,4h),2.63
–
2.12(m,8h),1.85
–
1.71(m,4h)。
[0454]
实施例34：(2s,4s)-n-((1r,3s)-3-苄基环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0455][0456]
以类似于实施例10的方式，使用3-苄基-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐(中间体26)代替3-(3-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺(中间体6)来制备标题化合物。通过sfc纯化(方法e)得到标题产物和(2s,4s)-n-((1s,3r)-3-苄基环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺(实施例35)。ms(esi)：c
19h24
n2o3的质量计算值为328.2；m/z实测值为329.1[m h]

。1h nmr(400mhz，甲醇-d4)δ7.32
–
7.20(m,2h),7.20
–
7.06(m,3h),4.69
–
4.53(m,0.5h),4.48(m,2h),4.28
–
4.14(m,0.5h),3.19
–
2.99(m,1h),2.92
–
2.79(m,3h),2.72(t,j＝7.0hz,2h),2.59
–
2.34(m,4h),2.34
–
2.10(m,3h),2.08
–
1.90(m,1h),1.90
–
1.75(m,1h)。
[0457]
实施例35：(2s,4s)-n-((1s,3r)-3-苄基环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0458][0459]
从实施例34中分离标题产物。ms(esi)：c
19h24
n2o3的质量计算值为328.2；m/z实测值为329.1[m h]

。1h nmr(400mhz，甲醇-d4)δ7.37
–
7.08(m,5h),5.15
–
4.93(m,0.5h),4.48(m,2h),4.43
–
4.26(m,0.5h),3.17
–
2.76(m,6h),2.62
–
2.21(m,7h),2.11
–
1.81(m,2h)。
[0460]
实施例36：(2s,4s)-n-((1s,3s)-3-(叔丁基)环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0461][0462]
以类似于实施例10的方式，使用3-(叔丁基)-n-甲基环丁-1-胺(中间体27)代替3-(3-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺(中间体6)来制备标题化合物。通过sfc纯化(方法e)得到标题产物和(2s,4s)-n-((1r,3r)-3-(叔丁基)环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺(实施例37)。ms(esi)：c
16h26
n2o3的质量计算值为294.2；m/z实测值为295.2[m h]

。1h nmr(400mhz，甲醇-d4)δ4.60
–
4.43(m,2.5h),4.26
–
4.05(m,0.5h),3.24
–
2.96(m,1h),2.89(m,3h),2.61
–
2.35(m,4h),2.11
–
1.93(m,3h),1.92
–
1.78(m,2h),0.87(m,9h)。
[0463]
实施例37：(2s,4s)-n-((1r,3r)-3-(叔丁基)环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0464][0465]
从实施例36中分离标题产物。ms(esi)：c
16h26
n2o3的质量计算值为294.2；m/z实测值为295.1[m h]

。1h nmr(400mhz，甲醇-d4)δ4.93
–
4.78(m,0.5h),4.51
–
4.42(m,2h),4.40
–
4.23(m,0.5h),3.14
–
3.01(m,1h),2.99(m,3h),2.58
–
2.37(m,4h),2.37
–
2.26(m,1h),2.26
–
1.96(m,4h),0.90(m,9h)。
[0466]
实施例38：(2s,4s)-n-((1s,3s)-3-环己基环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0467][0468]
以类似于实施例11的方式，使用3-环己基-n-甲基环丁-1-胺(中间体30)代替3-(3-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺(中间体6)制备标题化合物。通过sfc纯化(方法：sfc-lux amylose-2、柱phenomenex lux amylose-2 150mm x 4.6mm、5μm、等度模式：13％乙醇 0.1％二乙胺和87％co2)得到标题产物和(2s,4s)-n-((1r,3r)-3-环己基环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺(实施例39)。ms(esi)：c
18h28
n2o3的质量计算值为320.2；m/z实测值为321.2[m h]

。1h nmr(400mhz，甲醇-d4):4.65
–
4.53(m,0.5h),4.48(d,j＝6.4hz,2h),4.24
–
4.13(m,0.5h),3.18
–
2.99(m,1h),2.88(d,j＝9.9hz,3h),2.58
–
2.39(m,4h),2.28
–
2.16(m,2h),1.91
–
1.81(m,1h),1.78
–
1.57(m,7h),1.27
–
1.09(m,4h),0.82(dd,j＝23.3,11.5hz,2h)。
[0469]
实施例39：(2s,4s)-n-((1r,3r)-3-环己基环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮
杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0470][0471]
从实施例38中分离标题产物。ms(esi)：c
18h28
n2o3的质量计算值为320.2；m/z实测值为321.2[m h]

。1h nmr(400mhz，甲醇-d4):4.95
–
4.85(m,0.5h),4.48(d,j＝5.5hz,2h),4.46
–
4.35(m,0.5h),3.14
–
3.00(m,1h),2.96(d,j＝7.6hz,3h),2.59
–
2.39(m,4h),2.39
–
2.28(m,1h),2.28
–
2.18(m,1h),2.13
–
1.95(m,2h),1.95
–
1.59(m,6h),1.43
–
1.08(m,4h),0.87
–
0.65(m,2h)。
[0472]
实施例40：(2s,4s)-n-甲基-n-((1s,3s)-3-(4-(1-甲基环丙基)苯基)环丁基)-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0473][0474]
以类似于实施例11的方式，使用n-甲基-3-(4-(1-甲基环丙基)苯基)环丁-1-胺，三氟乙酸盐(中间体31)代替3-(3-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺(中间体6)来制备标题化合物。通过制备型hplc纯化(方法：map4ac(25mm nh4hco3)/(mecn:meoh 1:1)；39/61至11/89)得到标题产物和(2s,4s)-n-((1s,3s)-3-(4-(仲丁基)苯基)环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺(实施例41)。ms(esi)：c
22h28
n2o3的质量计算值为368.2；m/z实测值为369.2[m h]

。1h nmr(400mhz，甲醇-d4):7.26
–
7.10(m,4h),4.80
–
4.68(m,0.5h),4.50(d,j＝14.4hz,2h),4.43
–
4.32(m,0.5h),3.24
–
3.02(m,2h),2.95(m,3h),2.62
–
2.43(m,6h),2.39
–
2.28(m,1h),2.26
–
2.15(m,1h),1.37(s,3h),0.84
–
0.78(m,2h),0.72
–
0.65(m,2h)。
[0475]
实施例41：(2s,4s)-n-((1s,3s)-3-(4-(仲丁基)苯基)环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0476][0477]
从实施例40中分离标题产物。ms(esi)：c
22h30
n2o3的质量计算值为370.2；m/z实测值为372.2[m h]

。1h nmr(400mhz，甲醇-d4):7.20
–
7.08(m,4h),4.79
–
4.68(m,0.5h),4.50(d,j＝14.9hz,2h),4.45
–
4.33(m,0.5h),3.24
–
3.03(m,2h),2.96(d,j＝7.0hz,3h),2.64
–
2.42(m,7h),2.35(m,1h),2.22(m,1h),1.68
–
1.51(m,2h),1.24
–
1.18(m,3h),0.84
–
0.75(m,
3h)。
[0478]
实施例42：(2s,4s)-n-甲基-n-((1s,3s)-3-(3-(1-甲基环丙基)苯基)环丁基)-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0479][0480]
以类似于实施例11的方式，使用n-甲基-3-(3-(1-甲基环丙基)苯基)环丁-1-胺，三氟乙酸盐(中间体32)代替3-(3-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺(中间体6)制备标题化合物。ms(esi)：c
22h28
n2o3的质量计算值为368.2；m/z实测值为369.2[m h]

。1h nmr(400mhz，甲醇-d4):7.24
–
7.17(m,1h),7.14
–
7.02(m,3h),4.80
–
4.68(m,0.5h),4.50(d,j＝15.5hz,2h),4.43
–
4.32(m,0.5h),3.23
–
3.02(m,2h),2.95(d,j＝7.2hz,3h),2.63
–
2.43(m,6h),2.41
–
2.30(m,1h),2.27
–
2.15(m,1h),1.38(s,3h),0.84
–
0.80(m,2h),0.73
–
0.68(m,2h)。
[0481]
实施例43：(2s,4s)-n-((1s,3s)-3-(3-乙基-5-甲基苯基)环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0482][0483]
以类似于实施例11的方式，使用3-(3-乙基-5-甲基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐(中间体33)代替3-(3-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺(中间体6)来制备标题化合物。ms(esi)：c
21h28
n2o3的质量计算值为356.2；m/z实测值为357.2[m h]

。1h nmr(400mhz，甲醇-d4):6.89
–
6.81(m,3h),4.80
–
4.67(m,0.5h),4.50(d,j＝15.0hz,2h),4.45
–
4.32(m,0.5h),3.25
–
3.02(m,2h),2.95(m,3h),2.65
–
2.39(m,8h),2.39
–
2.30(m,1h),2.29(d,j＝2.5hz,3h),2.26
–
2.14(m,1h),1.20(m,3h)。
[0484]
实施例44：(2s,4s)-n-((1s,3s)-3-(3-环丙基-5-甲基苯基)环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0485][0486]
以类似于实施例11的方式，使用3-(3-环丙基-5-甲基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐(中间体34)代替3-(3-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺(中间体6)来制备标题化合物。ms(esi)：c
22h28
n2o3的质量计算值为368.2；m/z实测值为369.2[m h]

。1h nmr(400mhz，甲醇-d4):6.83(m,1h),6.74(d,j＝4.0hz,1h),6.70(m,1h),4.79
–
4.67(m,0.5h),4.50(d,j＝
14.6hz,2h),4.42
–
4.31(m,0.5h),3.24
–
3.02(m,2h),2.95(m,3h),2.60
–
2.42(m,6h),2.38
–
2.28(m,1h),2.27(m,3h),2.24
–
2.14(m,1h),1.90
–
1.78(m,1h),0.97
–
0.85(m,2h),0.67
–
0.58(m,2h)。
[0487]
实施例45：(2s,4s)-n-((1s,3s)-3-(3-异丙基-5-甲基苯基)环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0488][0489]
以类似于实施例11的方式，使用3-(3-异丙基-5-甲基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐(中间体35)代替3-(3-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺(中间体6)来制备标题化合物。ms(esi)：c
22h30
n2o3的质量计算值为370.2；m/z实测值为371.2[m h]

。1h nmr(400mhz，甲醇-d4):6.87(m,3h),4.77
–
4.65(m,0.5h),4.50(d,j＝15.1hz,2h),4.45
–
4.29(m,0.5h),3.25
–
3.02(m,2h),2.95(m,3h),2.89
–
2.77(m,1h),2.62
–
2.42(m,6h),2.42
–
2.30(m,1h),2.30(m 3h),2.26
–
2.14(m,1h),1.22(m,6h)。
[0490]
实施例46：(2s,4s)-n-((1s,3s)-3-(3-氯-5-甲基苯基)环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[34]辛烷-2-甲酰胺。
[0491][0492]
以类似于实施例11的方式，使用3-(3-氯-5-甲基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐(中间体28)代替3-(3-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺(中间体6)来制备标题化合物。ms(esi)：c
19h23
cln2o3的质量计算值为362.1；m/z实测值为363.1[m h]

。1h nmr(400mhz，甲醇-d4):7.06
–
7.01(m,2h),7.00(m,1h),4.78
–
4.66(m,0.8h),4.50(d,j＝14.4hz,2h),4.46
–
4.33(m,0.5h),3.24
–
3.02(m,2h),2.94(d,j＝8.1hz,3h),2.64
–
2.41(m,6h),2.40
–
2.33(m,1h),2.32(m,3h),2.26
–
2.16(m,1h)。
[0493]
实施例47：(2s,4s)-n-((1s,3s)-3-(3-环丙基苯基)环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0494][0495]
以类似于实施例11的方式，使用3-(3-环丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐(中间体36)代替3-(3-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺(中间体6)来制备标题化合物。ms
(esi)：c
21h26
n2o3的质量计算值为354.2；m/z实测值为355.2[m h]

。1h nmr(400mhz，甲醇-d4):7.22
–
7.10(m,1h),7.07
–
6.98(m,1h),6.98
–
6.92(m,1h),6.92
–
6.83(m,1h),4.80
–
4.67(m,0.5h),4.50(d,j＝15.1hz,2h),4.46
–
4.30(m,0.5h),3.25
–
3.02(m,2h),2.95(m,3h),2.62
–
2.42(m,6h),2.40
–
2.29(m,1h),2.25
–
2.16(m,1h),1.95
–
1.83(m,1h),0.98
–
0.89(m,2h),0.72
–
0.59(m,2h)。
[0496]
实施例48：(2s,4s)-n-((1s,3s)-3-(2,3-二氢-1h-茚-5-基)环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0497][0498]
以类似于实施例11的方式，使用3-(2,3-二氢-1h-茚-5-基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐(中间体37)代替3-(3-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺(中间体6)来制备标题化合物。ms(esi)：c
21h26
n2o3的质量计算值为354.2；m/z实测值为355.2[m h]

。1h nmr(400mhz，甲醇-d4):7.18
–
7.03(m,2h),7.05
–
6.85(m,1h),4.81
–
4.67(m,0.5h),4.50(d,j＝14.5hz,2h),4.42
–
4.31(m,0.5h),3.27
–
3.02(m,2h),2.95(d,j＝7.5hz,3h),2.91
–
2.80(m,4h),2.63
–
2.41(m,6h),2.41
–
2.26(m,1h),2.26
–
2.12(m,1h),2.11
–
1.95(m,2h)。
[0499]
实施例49：(2s,4s)-n-((1s,3s)-3-(双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-3-基)环丁基)-n-甲基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0500][0501]
以类似于实施例11的方式，用3-(双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-3-基)-n-甲基环丁-1-胺，三氟乙酸盐(中间体38)代替3-(3-异丙基苯基)-n-甲基环丁-1-胺(中间体6)来制备标题化合物。ms(esi)：c
20h24
n2o3的质量计算值为340.2；m/z实测值为341.2[m h]

。1h nmr(400mhz，甲醇-d4):7.08
–
7.01(m,1h),6.98
–
6.91(m,2h),4.79
–
4.67(m,0.5h),4.50(d,j＝14.4hz,2h),4.43
–
4.32(m,0.5h),3.22
–
3.03(m,6h),2.95(d,j＝7.6hz,3h),2.61
–
2.41(m,6h),2.33(td,j＝10.0,2.8hz,1h),2.24
–
2.13(m,1h)。
[0502]
实施例50：(2s,4s)-n-((1s,3s)-3-(3,5-二甲基苯基)环丁基)-n-乙基-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酰胺。
[0503][0504]
将t3p(0.440ml，50％纯度的乙酸乙酯溶液，0.739mmol)添加到由(1s,3s)-3-(3,
5-二甲基苯基)-n-乙基环丁-1-胺，hcl盐(中间体29，200mg)、(2s,4s)-6-氧代-7-氧杂-5-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酸(中间体1，84.0mg，0.491mmol)、三乙胺(0.81ml，5.94mmol)和二氯甲烷(5ml)组成的0℃(冰/水)溶液中。将所得的混合物搅拌2小时，同时逐渐升温至室温，之后将其倒入水(50ml)中并用二氯甲烷(30ml
×
3)萃取。将合并的有机萃取物经无水na2so4干燥、过滤、并减压浓缩至干，以得到粗产物，将其通过制备型hplc使用boston prime c18 150mm
×
30mm
×
5μm柱(洗脱液：50％至80％(体积/体积)ch3cn3和h2o，其具有0.05％nh3 10mm nh4hco)纯化，以得到纯产物。将产物悬浮于水(10ml)中，使用干冰/丙酮冷冻混合物，然后将其冻干至干，以得到标题化合物(55.3mg，32％)。ms(esi)：c
21h28
n2o3的质量计算值为356.2；m/z实测值为357.2[m h]

。1h nmr(400mhz,chloroform-d):6.87(m,1h),6.82(m,2h),5.98(m,1h),4.70-4.59(m,0.5h),4.38(d,j＝9.8hz,2h),4.15-4.02(m,0.5h),3.54-3.42(m,1h),3.36-3.27(m,1h),3.21-2.96(m,2h),2.75-2.58(m,4h),2.56-2.46(m,2h),2.36-2.22(m,7h),2.17-2.06(m,1h),1.13(t,j＝6.9hz,3h)。
[0505]
生物学数据
[0506]
用于测量mgl体外活性的测定改编自用于另一种丝氨酸水解酶(faah)的测定，该测定描述于：wilson等人，2003(“a high-throughput-compatible assay for determining the activity of fatty acid amide hydrolase”。wilson sj、lovenberg tw、barbier aj.，anal biochem.，2003年7月15日；318(2):270-5.)。该测定包括将来自hela细胞的内源性表达的mgl与测试化合物合并，加入[甘油-1,3-3
h]-油酰甘油，孵育一小时，然后测量通过活性炭过滤器的裂解[1,3-3
h]-甘油的量。通过碳过滤器的裂解的氚化甘油的量与特定孔/测试条件下mgl酶的活性成比例。
[0507]
该测定的标准条件是将300nm[甘油-1,3-3
h]-油酰甘油与来自hela细胞的人mgl和测试化合物合并一小时，然后将反应物通过活性炭过滤，并测量通过流中的氚。筛选模式中的测试化合物浓度为10μm，而ic
50
测定中的最高化合物浓度根据经验确定。mgl是hela细胞/细胞匀浆中的主要水解酶。
[0508]
表3：
[0509]
[0510]
[0511][0512][0513]
nt是指未测试。