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一种米根霉固态发酵培养基及其制备方法与流程

2022-11-09 21:30:52 来源:中国专利 TAG:

技术特征:
1.一种米根霉固态发酵培养基,其特征在于:所述固态发酵培养基由碳源、氮源、无机盐、添加剂、酵母提取物、琼脂组成;所述碳源为葡萄糖、马铃薯蔗糖、麦芽汁中的任意一种;所述氮源为蛋白胨、尿素、硫酸铵中的任意一种或多种组合;所述无机盐为七水硫酸镁、七水硫酸锌、磷酸氢二钾、磷酸二氢钠、碳酸钙、硫酸铵、硫酸镁、硫酸锌、碳酸钙、氯化铁、氯化镁、氯化钙、氯化钾、氯化钠、碳酸氢钠中的任意一种或多种组合;所述添加剂为l-半胱氨酸s-硫酸钠钠倍半水合物。2.根据权利要求1所述的一种米根霉固态发酵培养基,其特征在于:所述培养基的各组分如下:葡萄糖、七水硫酸镁、七水硫酸锌、磷酸氢二钾、硫酸铵、碳酸钙、氯化铁、蛋白胨、尿素、琼脂、l-半胱氨酸s-硫酸钠钠倍半水合物、酵母提取物。3.根据权利要求2所述的一种米根霉发酵用培养基,其特征在于:所述培养基由以下成分组成:葡萄糖60-75g/l、七水硫酸镁0.2-0.45g/l、七水硫酸锌0.04-0.07g/l、磷酸氢二钾0.2-0.45g/l、硫酸铵0.1-0.75g/l、碳酸钙40-60g/l、氯化铁0.005-0.011g/l、蛋白胨4-5g/l、尿素1.2-2.2g/l、琼脂12-15g/l、l-半胱氨酸s-硫酸钠钠倍半水合物2.5-3.5g/l、酵母提取物5.5-6.5g/l。4.根据权利要求3所述的一种米根霉发酵用培养基,其特征在于:所述培养基由以下成分组成:葡萄糖70g/l、七水硫酸镁0.25g/l、七水硫酸锌0.05g/l、磷酸氢二钾0.3g/l、硫酸铵0.4g/l、碳酸钙47g/l、氯化铁0.01g/l、蛋白胨4g/l、尿素1.6g/l、琼脂13g/l、l-半胱氨酸s-硫酸钠钠倍半水合物2.8g/l、酵母提取物6.1g/l。5.根据权利要求1所述的一种米根霉固态发酵培养基,其特征在于:所述固态发酵培养基为圆柱体;所述培养基的直径为70-150mm,厚度为7-15mm。6.一种米根霉固态发酵培养基的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:1)取葡萄糖、蛋白胨,搅拌均匀,加入七水硫酸镁、七水硫酸锌、磷酸氢二钾、硫酸铵、碳酸钙、尿素、氯化铁,混合均匀,加入琼脂,在温度为120-125℃、压力为0.11-0.14mpa条件下高温高压灭菌,取出放入摇床中,处理3-5min,制得混合液;2)向步骤1)制得的混合液中加入添加剂l-半胱氨酸s-硫酸钠钠倍半水合物、酵母提取物,搅拌均匀,冷却至25-40℃,静置至琼脂完全凝固,制得米根霉固态发酵培养基。7.根据权利要求6所述的一种米根霉固态发酵培养基的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:1)取葡萄糖、蛋白胨,搅拌均匀,在温度为50-60℃条件下,加入七水硫酸镁、七水硫酸锌、磷酸氢二钾、硫酸铵、碳酸钙、尿素、氯化铁,混合均匀,加入琼脂,在温度为120-125℃、压力为0.11-0.14mpa条件下高温高压灭菌60-80min,取出放入摇床中,控制转速为200-250r/min、温度为35-37℃,处理3-5min,制得混合液;2)向步骤1)制得的混合液中加入添加剂l-半胱氨酸s-硫酸钠钠倍半水合物、酵母提取物,搅拌均匀,控制温度为95-105℃、压力为0.08-0.12mpa条件下,冷却至25-40℃,静置至琼脂完全凝固,制得米根霉固态发酵培养基。8.根据权利要求7所述的一种米根霉固态发酵培养基的制备方法,其特征在于:所述米根霉固态发酵培养基应在避光、干燥、环境温度为15-25℃条件下保存,备用。
9.根据权利要求1-8中任意一项所述的米根霉固态发酵培养基的应用,其特征在于:所述固态发酵培养基可用于培养发酵米根霉;所述固态发酵培养发酵米根霉的步骤如下:取米根霉菌株接种到种子培养基上,获得米根霉种子培养液;将米根霉种子培养液接种到上述制备得到的固态发酵培养基中,控制温度为32-37℃,ph为7.0-9.0条件下,发酵培养24-48h,得到发酵产物乳酸。

技术总结
本发明公开了一种米根霉固态发酵培养基及其制备方法。固态发酵培养基由以下成分组成:葡萄糖60-75g/L、七水硫酸镁0.2-0.45g/L、七水硫酸锌0.04-0.07g/L、磷酸氢二钾0.2-0.45g/L、硫酸铵0.1-0.75g/L、碳酸钙40-60g/L、氯化铁0.005-0.011g/L、蛋白胨4-5g/L、尿素1.2-2.2g/L、琼脂12-15g/L、L-半胱氨酸S-硫酸钠钠倍半水合物2.5-3.5g/L、酵母提取物5.5-6.5g/L。通过合理选择碳源、氮源、无机盐的种类,调整各类物质的配比,为米根霉提供了最佳的生长环境,利于米根霉的高效繁殖及生长。本发明制备得到的米根霉固态发酵培养基方便移动,高效便捷,相比于传统的液态培养基,该固态培育环境对液体的需求量大大减少,对资源和能源的消耗量减少,制备成本降低。制备成本降低。


技术研发人员:克里斯蒂安
受保护的技术使用者:苏州星寰生物科技有限公司
技术研发日:2022.09.16
技术公布日:2022/11/8
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