一种利用Daudi细胞膜囊制备细胞因子诱导杀伤细胞的方法与流程

技术特征：
1.一种利用daudi细胞膜囊制备细胞因子诱导杀伤细胞的方法,其特征在于：利用daudi细胞膜囊泡活化cik细胞。2.根据权利要求1所述的一种利用daudi细胞膜囊制备细胞因子诱导杀伤细胞的方法，其特征在于，包括如下步骤：s1、获取daudi细胞膜囊泡；s2、收集、培养单个核细胞，且培养过程中加入daudi细胞膜囊泡；s3、细胞收集及继续培养：培养至第7天时，补液并加入daudi细胞膜囊泡后继续培养1-2周。3.根据权利要求2所述的一种利用daudi细胞膜囊制备细胞因子诱导杀伤细胞的方法，其特征在于：所述步骤s1中，通过将daudi细胞肿胀，破碎、离心的方式收集daudi细胞膜囊泡。4.根据权利要求2所述的一种利用daudi细胞膜囊制备细胞因子诱导杀伤细胞的方法，其特征在于，所述步骤s2中，包括如下步骤：a1、获取单个核细胞；a2、培养单个核细胞：将单个核细胞悬浮于培养基中，调整细胞终浓度后加入daudi细胞膜囊泡；a3、补液培养。5.根据权利要求4所述的一种利用daudi细胞膜囊制备细胞因子诱导杀伤细胞的方法，其特征在于：所述单个核细胞数与daudi细胞膜囊泡个数之比为1：(1-5)。6.根据权利要求4所述的一种利用daudi细胞膜囊制备细胞因子诱导杀伤细胞的方法，其特征在于：所述步骤a2中，细胞终浓度为(1-3)
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106/ml。7.根据权利要求4所述的一种利用daudi细胞膜囊制备细胞因子诱导杀伤细胞的方法，其特征在于：所述步骤a2中，并加入自体血浆，il-2和il-15，置于37℃，5％co2，95％湿度下培养。8.根据权利要求4所述的一种利用daudi细胞膜囊制备细胞因子诱导杀伤细胞的方法，其特征在于：所述步骤a3中，待原培养基变黄后再补充新鲜培养基。9.根据权利要求2所述的一种利用daudi细胞膜囊制备细胞因子诱导杀伤细胞的方法，其特征在于：补液至总体积2.5-5％的自体血浆，il-2至终浓度为500-1000u/ml，il-15至终浓度为50ng/ml。10.根据权利要求2所述的一种利用daudi细胞膜囊制备细胞因子诱导杀伤细胞的方法，其特征在于：培养时间为2周。

技术总结
本发明涉及细胞培养的技术领域，尤其涉及一种利用Daudi细胞膜囊制备细胞因子诱导杀伤细胞的方法，利用Daudi细胞膜囊泡活化CIK细胞；本发明采用Daudi细胞膜囊泡活化CIK细胞，降低了滋养细胞培养免疫细胞的潜在致瘤性及EBV病毒感染风险，提高了细胞治疗的安全性。另外，获得的CIK细胞群中含有较多的CD3


技术研发人员：郭子宽 李金艳 吴晓杰 马晓萌 王金
受保护的技术使用者：北京科霖恩生物科技有限公司
技术研发日：2022.09.13
技术公布日：2022/10/25