一种水培箭叶淫羊藿的方法

1.本发明涉及植物无土栽培领域，尤其涉及一种药用植物箭叶淫羊藿的水培方法。


背景技术：

2.箭叶淫羊藿(epimedium sagittatum(sieb.et zucc)maxim)为小檗科(berberidaceae)淫羊藿属(epimedium)的多年生草本植物，生长在林下、沟边灌丛中或山坡阴湿处；海拔为650
–
3500m，不耐高温和强光。全草供药用，含淫羊藿苷、淫羊藿次苷ⅰ、箭藿苷a、箭藿苷b、箭藿苷c等；具有抑制破骨细胞、促进成骨细胞生长，镇静、抗抑郁，增强免疫功能，保护心脑血管系统，抗氧化、抗衰老和抗肿瘤等功效，市场需求量日益增加。
3.长期以来，箭叶淫羊藿的利用主要依赖于野生资源，随着市场需求量的增加，其野生资源的蕴藏量逐年锐减，并面临枯竭；人们开始试种和繁殖该物种。剑叶淫羊藿的繁殖方式包括无性繁殖和有性繁殖。无性繁殖通常是挖取野生植株进行分蔸播种，但繁殖系数低，并对自然环境造成破坏。有性繁殖也由于种子苗生长缓慢，不能满足市场对淫羊藿种苗和总生物量(原料)的需求。


技术实现要素：

4.本发明所要解决的技术问题是如何进行箭叶淫羊藿的水培。
5.为解决上述技术问题，本发明提供了一种箭叶淫羊藿的水培方法，包括如下步骤：将一叶龄的箭叶淫羊藿幼苗栽种于营养液中，在温度为15℃，空气相对湿度为85％，光照强度为100.7μmol
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，每日光照14h、黑暗10h条件下水培，每3天通气一次；
6.所述营养液为以溶剂和溶质混合成的溶液，所述溶液的ph值为5，所述溶剂为水，所述溶质为ca(no3)2、kno3、kh2po4、mgso4·
7h2o、na
2-edta、feso4·
7h2o、h3bo3、mnso4、cuso4·
5h2o、znso4·
h2o和h2moo4；在该营养液中ca(no3)2的浓度为0.827g/l、kno3的浓度为0.5056g/l、kh2po4的浓度为0.2722g/l、mgso4·
7h2o的浓度为0.6162g/l、na
2-edta的浓度为0.00745g/l、feso4·
7h2o的浓度为0.00557g/l、h3bo3的浓度为0.00286g/l、mnso4的浓度为0.001015g/l、cuso4·
5h2o的浓度为0.000079g/l、znso4·
h2o的浓度为0.00022g/l、h2moo4的浓度为0.00009g/l。
7.上述方法中，所述水培的容器是设有直径为1.1cm小孔的的塑料离心管盒。
8.上述方法中，所述水培中，将一叶龄的箭叶淫羊藿幼苗栽种于去掉底部的1.5ml离心管中，将离心管插入与其配套的离心管盒中，培养液的液面高度低于离心管盒高度1cm。
9.实验结果表明，选择小孔直径为1.1cm的塑料离心管盒作为培养容器，箭叶淫羊藿幼苗在所配置的完全培养液(ph 5)、培养温度为15℃、相对湿度为85％和光照强度为100μmol
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中能正常的生长和发育；这些培养条件也适合随后的工厂化生产。本发明探明的箭叶淫羊藿溶液培养关键技术能够克服不利环境因子对幼苗生长发育的影响，为规模化种植提供大量的幼苗和为工厂化生产提供支撑技术。此外，本发明方法还具有操作简单、成本低廉、省时省力的特点。因此，本发明具有重要的应用推广价值。
附图说明
10.图1为本发明贮备液配置表。
11.图2为本发明培养液配置表。
12.图3为本发明一叶龄幼苗在15℃和28℃环境中生长90d的植株生长状态分析结果。图中数值为50株幼苗培养90d后三次重复的平均值
±
se。
13.图4为本发明一叶龄幼苗在15℃和28℃环境中生长90d的植株照片。图4的a图为15℃中培养的植株，图4的b图为28℃中培养的植株。
14.图5为本发明一叶龄幼苗在光照强度为100.7μmol
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和46μmol
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环境中生长90d的植株生长状态分析结果。图中数值为50株幼苗培养90d后三次重复的平均值
±
se。
15.图6为本发明一叶龄幼苗在光照强度为100.7μmol
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和46μmol
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环境中生长90d的植株照片。图6的a图为光照强度为100.7μmol
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培养的植株，图6的b图为光照强度为46μmol
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培养的植株。
16.图7为本发明一叶龄幼苗在不同ph值的营养液中生长90d的植株生长状态分析结果。图中数值为50株幼苗培养90d后三次重复的平均值
±
se。每一列数字后面的不同小写字母表示各处理间具有显著差异性(多重比较s-n-k，p＝0.05)。
17.图8为本发明一叶龄幼苗在不同ph值的营养液中生长90d的植株照片。
18.图9为本发明一叶龄幼苗在全营养液和1/2营养液中生长90d的植株生长状态分析结果。图中数值为50株幼苗培养90d后三次重复的平均值
±
se。
19.图10为本发明一叶龄幼苗在全营养液和1/2营养液中生长90d的植株照片。图10的a图为1/2营养液培养的植株，图10的b图为全营养液培养的植株。
具体实施方式
20.下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。以下提供的实施例可作为本技术领域普通技术人员进行进一步改进的指南，并不以任何方式构成对本发明的限制。
21.下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
22.下述实施例中的箭叶淫羊藿可市购获得。
23.下述实施例中的离心管及与其配套的离心管盒(水培容器)为江苏泰州市泰兴市万通医疗器械厂的产品。
24.实施例1
25.1、营养贮备液和培养液的配制
26.本实验所用的营养液为以溶剂和溶质混合成的溶液，所述溶剂为水，所述溶质为ca(no3)2、kno3、kh2po4、mgso4·
7h2o、na
2-edta、feso4·
7h2o、h3bo3、mnso4、cuso4·
5h2o、znso4·
h2o和h2moo4；在该营养液中ca(no3)2的浓度为0.827g/l、kno3的浓度为0.5056g/l、kh2po4的浓度为0.2722g/l、mgso4·
7h2o的浓度为0.6162g/l、na
2-edta的浓度为0.00745g/l、feso4·
7h2o的浓度为0.00557g/l、h3bo3的浓度为0.00286g/l、mnso4的浓度为0.001015g/
l、cuso4·
5h2o的浓度为0.000079g/l、znso4·
h2o的浓度为0.00022g/l、h2moo4的浓度为0.00009g/l。
27.本实验所用营养液在配制过程中，先按照图1在每种溶质中加入蒸馏水分别配制为不同的贮备液，再按照图2将各种贮备液逐一加入到500ml的蒸馏水中，每加入一种贮备液后，都应充分混匀以免产生沉淀，最后用蒸馏水定容至1l，得到营养液。
28.配好培养液后，再根据实验设计配制出不同浓度和不同ph的培养液。ph值用0.1mol/l hcl或者0.1mol/l naoh调节。
29.2、温度和光照对箭叶淫羊藿植株生长的影响
30.2.1温度
31.选择塑料离心管盒作为培养容器(6
×
12管，小孔直径为1.1cm)，加入全营养液并调节营养液的ph值为5。将一叶龄的箭叶淫羊藿幼苗分别栽种于去掉底部的塑料离心管(1.5ml，长度为1cm)中，将离心管插入离心管盒中。培养液的液面高度必须低于离心管盒高度1cm，保证空气中的o2能溶解于培养液中和便于培养过程中通气；幼苗的根系必需浸入培养液中，如果幼苗的根系不是足够长，在幼苗的两侧应插入滤纸条，帮助幼苗吸收水分和维持湿度。在整个培养过程中，每3d用金鱼泵通一次气，每1星期更换新的培养液。
32.将培养温度设置为15℃或者28℃，以及在相对湿度为85％，光照强度为100.7μmol
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，每日光照14h、黑暗10h的条件下培养。每种温度设3个重复，每个处理的每个重复培养50株幼苗，培养90d后分析植株的生长状态，结果见图3和图4。
33.结果表明，培养温度显著影响箭叶淫羊藿植株的生长，例如，在15℃下苗重和根重分别是28℃下的2.6倍和1.5倍(图3)。
34.2.2光照
35.光照强度对箭叶淫羊藿植株的生长也有非常显著的影响。
36.选择塑料离心管盒作为培养容器(6
×
12管，小孔直径为1.1cm)，加入全营养液并调节营养液的ph值为5。将一叶龄的箭叶淫羊藿幼苗分别栽种于去掉底部的塑料离心管(1.5ml，长度为1cm)中，将离心管插入离心管盒中。培养液的液面高度必须低于离心管盒高度1cm，保证空气中的o2能溶解于培养液中和便于培养过程中通气；幼苗的根系必需浸入培养液中，如果幼苗的根系不是足够长，在幼苗的两侧应插入滤纸条，帮助幼苗吸收水分和维持湿度。在整个培养过程中，每3d用金鱼泵通一次气，每1星期更换新的培养液。
37.将光照强度设计为100.7μmol
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或者46μmol
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，以及培养温度为15℃，相对湿度为85％，每日光照14h、黑暗10h的条件下培养。每种光强设3个重复，每个处理的每个重复培养50株幼苗，培养90d后分析植株的生长状态，结果见图5和图6。
38.结果表明，当光照强度为46μmol
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时，其植株的生长量仅为100.7μmol
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下的约1/4。
39.3、培养液ph对箭叶淫羊藿植株生长的影响
40.选择塑料离心管盒作为培养容器(6
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12管，小孔直径为1.1cm)，加入全营养液并调节营养液的ph值分别设为4、5、6、7。将一叶龄的箭叶淫羊藿幼苗分别栽种于去掉底部的塑料离心管(1.5ml，长度为1cm)中，将离心管插入离心管盒中。培养液的液面高度必须低于离心管盒高度1cm，保证空气中的o2能溶解于培养液中和便于培养过程中通气；幼苗的根系必需浸入培养液中，如果幼苗的根系不是足够长，在幼苗的两侧应插入滤纸条，帮助幼苗吸
收水分和维持湿度。在整个培养过程中，每3d用金鱼泵通一次气，每1星期更换新的培养液。
41.在培养温度为15℃，相对湿度为85％，光照强度为100.7μmol
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，每日光照14h、黑暗10h的条件下培养90d后分析植株的生长状态。每种ph值设3个重复，每个处理的每个重复培养50株幼苗；结果见图7和图8。
42.结果表明，ph值也显著影响箭叶淫羊藿植株的生长，最优的营养液ph值为5(图7和图8)。
43.4、营养液浓度对箭叶淫羊藿植株生长的影响
44.按照图1的浓度配制每种溶质的贮备液，以图2中贮备液的用量配制全营养液，调节ph值为5。
45.按照图1的浓度配制每种溶质的贮备液，以图2中贮备液用量的一半配制1/2营养液，调节ph值为5。
46.选择塑料离心管盒作为培养容器(6
×
12管，小孔直径为1.1cm)，加入全营养液或者1/2营养液。将一叶龄的箭叶淫羊藿幼苗分别栽种于去掉底部的塑料离心管(1.5ml，长度为1cm)中，将离心管插入离心管盒中。培养液的液面高度必须低于离心管盒高度1cm，保证空气中的o2能溶解于培养液中和便于培养过程中通气；幼苗的根系必需浸入培养液中，如果幼苗的根系不是足够长，在幼苗的两侧应插入滤纸条，帮助幼苗吸收水分和维持湿度。在整个培养过程中，每3d用金鱼泵通一次气，每1星期更换新的培养液。
47.在培养温度为15℃，相对湿度为85％，光照强度为100.7μmol
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，每日光照14h、黑暗10h的条件下培养90d后分析植株的生长状态。每种营养液设3个重复，每个处理的每个重复培养50株幼苗；结果见图9和图10。
48.结果表明，在培养温度为15℃，相对湿度为85％，光照强度为100.7μmol
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以及ph值5的条件下培养90d，在全培养液中箭叶淫羊藿的植株生长量是1/2培养液中的2倍。
49.综上所述，选择小孔直径为1.1cm的塑料离心管盒作为培养容器，利用所配置的完全培养液(ph 5)，在培养温度为15℃、相对湿度为85％和光照强度为100.7μmol
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(每日光照14h、黑暗10h)的条件下培养，箭叶淫羊藿幼苗能正常的生长和发育；这些培养条件也可能是随后工厂化生产的最适条件。
50.以上对本发明进行了详述。对于本领域技术人员来说，在不脱离本发明的宗旨和范围，以及无需进行不必要的实验情况下，可在等同参数、浓度和条件下，在较宽范围内实施本发明。虽然本发明给出了特殊的实施例，应该理解为，可以对本发明作进一步的改进。总之，按本发明的原理，本技术欲包括任何变更、用途或对本发明的改进，包括脱离了本技术中已公开的范围，而用本领域已知的常规技术进行的改变。按以下附带的权利要求的范围，可以进行一些基本特征的应用。