可作为T细胞活化剂的经取代双环化合物的制作方法

可作为t细胞活化剂的经取代双环化合物
1.交叉引用
2.本技术主张2019年12月23日申请的印度临时申请no.201911053552的权益，其全文并入本文中。
技术领域
3.本发明大体上涉及活化t细胞、促进t细胞增殖和/或呈现抗肿瘤活性的经取代双环化合物。本文提供经取代双环化合物、包含此类化合物的组合物及其使用方法。本发明进一步关于包含至少一种根据本发明的化合物的药物组合物，其可用于治疗诸如癌症的增殖性病症，及病毒感染。


背景技术：

4.人类癌症具有许多基因改变及表观遗传改变，其产生可被免疫系统潜在识别的新抗原(sjoblom等人,(2006)science 314:268-74)。由t及b淋巴球构成的适应性免疫系统具有强大的抗癌潜能，对不同肿瘤抗原作出反应的能力广泛且特异性敏锐。另外，免疫系统展现相当大的可塑性及记忆分量。成功驾驭适应性免疫系统的所有这些特性将使得免疫疗法在所有癌症治疗模式当中成为独一无二的。然而，尽管在临床前模型及患者中观测到针对癌症的内源免疫反应，但此反应的效率低，且已建立的癌症被免疫系统视为“自体”且被容忍。肿瘤可以利用若干不同机制主动地破坏抗肿瘤免疫，促进此容忍状态。这些机制包括功能异常t细胞信号传导(mizoguchi等人,(1992)science 258:1795-98)、抑制性调控细胞(facciabene等人,(2012)cancer res.72:2162-71)，及拉拢内源“免疫检查点”，其用于下调适应性免疫反应强度且保护正常组织以防肿瘤躲避免疫摧毁而带来的间接伤害(topalian等人,(2012)curr.opin.immunol.24:1-6；mellman等人(2011)nature 480:480-489)。
5.二酰基甘油激酶(diacylglycerol kinase；dgk)为脂质激酶，其介导二酰基甘油转化为磷脂酸，由此终止经由tcr信号传导路径传播的t细胞功能。因此，dgk充当细胞内检查点且预计抑制dgk可增强t细胞信号传导途径及t细胞活化。支持证据包括dgkα或dgkζ的基因剔除小鼠模型，其显示高应答性t细胞表型且改良抗肿瘤免疫活性(riese m.j.等人,journal of biological chemistry,(2011)7:5254-5265；zha y等人,nature immunology,(2006)12:1343；olenchock b.a.等人,(2006)11:1174-81)。此外，观测到自人类肾细胞癌患者分离的肿瘤浸润性淋巴球过度表达dgkα，此造成t细胞功能抑制(prinz,p.u.等人,j immunology(2012)12:5990-6000)。因此，dgkα及dgkζ视为癌症免疫疗法的目标(riese m.j.等人,front cell dev biol.(2016)4:108；chen,s.s.等人,front cell dev biol.(2016)4:130；avila-flores,a.等人,immunology and cell biology(2017)95:549-563；noessner,e.,front cell dev biol.(2017)5:16；krishna,s.,等人,front immunology(2013)4:178；jing,w.等人,cancer research(2017)77:5676-5686)。
6.仍需要能够用作dgkα及dgkζ中之一或两者的抑制剂的化合物。另外，仍需要能够
用作dgkα与dgkζ中之一或两者的抑制剂的化合物，所述化合物对dgkα及dgkζ的选择性超过其他二酰基甘油激酶、蛋白激酶和/或其他脂质激酶。
7.因此，在恢复t细胞活化、降低抗原临限值、增强抗肿瘤功能和/或克服一种或多种内源免疫检查点(诸如pd-1、lag-3及tgfβ)的抑制效果方面安全且有效的药剂对于治疗患有增殖性病症(诸如癌症)以及病毒感染的患者而言将具有重要的相加作用。


技术实现要素：

8.申请人已发现具有dgkα及dgkζ中之一或两者的抑制剂活性的化合物。另外，申请人已发现具有dgkα及dgkζ中之一或两者的抑制剂活性且选择性超过其他二酰基甘油激酶、蛋白激酶和/或其他脂质激酶的化合物。提供这些作为药品有用的化合物，其具有对于其成药性重要的所需稳定性、生物可用性、治疗指数及毒性值。
9.本发明提供经取代双环式(i)化合物，其适用作dgkα、dgkζ或dgkα及dgkζ两者的抑制剂，包含其盐及前药。
10.本发明亦提供药物组合物，其包含式(i)化合物和/或其药学上可接受的盐；及药学上可接受的载剂。
11.本发明亦提供一种治疗与dgkα、dgkζ或dgkα及dgkζ两者的活性有关的疾病或病症的方法，该方法包含向哺乳动物患者施用式(i)化合物和/或其药学上可接受的盐。
12.本发明亦提供用于制备式(i)化合物和/或其盐的方法及中间体。
13.本发明亦提供一种供疗法中使用的式(i)化合物和/或其药学上可接受的盐。
14.本发明亦提供一种式(i)化合物和/或其药学上可接受的盐的用途，其用于制造用于治疗增殖性病症(诸如癌症)及病毒感染的药剂。
15.式(i)化合物及包含式(i)化合物的组合物可以用于治疗、预防或治愈病毒感染及各种增殖性病症，诸如癌症。包含这些化合物的药物组合物在多个治疗领域中可用于治疗、预防或减缓疾病或病症(诸如病毒感染及癌症)进展。
16.本发明的这些及其他特征将随继续公开而以扩展形式阐述。
具体实施方式
17.本发明的第一方面提供至少一种式(i)的化合物：
[0018][0019]
或其盐，其中：
[0020]
x为cr6或n；
[0021]
y为cr3或n；
[0022]
l为-o-、-s-、-s(o)
2-、-nr
4c-或-nr
4d
c(o)-；
[0023]
r1为h、f、cl、br、-cn、经零至4个r
1a
取代的c
1-3
烷基、经零至4个r
1a
取代的c
3-4
环烷基、经零至4个r
1a
取代的c
1-3
烷氧基、-c(o)nrara、-nrara、-s(o)nre或-p(o)rere；
[0024]
各r
1a
独立地为f、cl、-cn、-oh、-och3或-nrara；
[0025]
各ra独立地为h或c
1-3
烷基；
[0026]
各re独立地为经零至4个r
1a
取代的c
3-4
环烷基或c
1-3
烷基；
[0027]
r2为h、经零至4个r
2a
取代的c
1-3
烷基、经零至4个r
2a
取代的c
2-3
烯基或经零至4个r
2a
取代的c
3-4
环烷基；
[0028]
各r
2a
独立地为f、cl、-cn、-oh、-o(c
1-2
烷基)、c
3-4
环烷基、c
3-4
烯基或c
3-4
炔基；
[0029]
r3为h、f、cl、br、-cn、c
1-3
烷基、c
1-2
氟烷基、c
3-4
环烷基、c
3-4
氟环烷基、-no2或经零至2个r
3a
取代的吡啶基；
[0030]
各r
3a
为卤基、-cn、c
1-3
烷基或c
1-3
烷氧基；
[0031]
r4为r
4a
、-ch2r
4a
或-ch2ch2r
4a
；
[0032]r4a
为c
3-6
环烷基、c
5-14
杂环基、c
6-10
芳基或c
5-14
杂芳基，各自经零至4个r
4b
取代；
[0033]
各r
4b
独立地为f、cl、br、-cn、-oh、c
1-6
烷基、c
1-3
氟烷基、c
1-4
羟烷基、-(ch2)
1-2
o(c
1-3
烷基)、c
1-4
烷氧基、-o(c
1-4
羟烷基)、-o(ch)
1-3
o(c
1-3
烷基)、c
1-3
氟烷氧基、-o(ch)
1-3
nrcrc、-och2ch＝ch2、-och2c≡ch、-c(o)(c
1-4
烷基)、-c(o)oh、-c(o)o(c
1-4
烷基)、-c(o)nh2、-c(o)nh(c
1-4
烷基)、-c(o)n(c
1-4
烷基)2、-nrcrc、-nras(o)2(c
1-3
烷基)、-nrac(o)(c
1-3
烷基)、-nrac(o)o(c
1-4
烷基)、-p(o)(c
1-3
烷基)2、-s(o)2(c
1-3
烷基)、-o(ch2)
1-2
(c
3-6
环烷基)、-o(ch2)
1-2
(吗啉基)、c
3-6
环烷基、氰基环丙基、甲基氮杂环丁烷基、乙酰基氮杂环丁烷基、三唑基、四氢吡喃基、吗啉基、噻吩基、甲基哌啶基或-crcrc(苯基)；
[0034]
各rc独立地为h或c
1-2
烷基；
[0035]r4c
为h、c
1-6
烷基或r
4a
；
[0036]r4d
为h或c
1-6
烷基；
[0037]
各r5独立地为f、cl、-cn、-oh、经零至4个rg取代的c
1-6
烷基、经零至4个rg取代的c
1-3
烷氧基、经零至4个rg取代的c
2-4
烯基、经零至4个rg取代的c
2-4
炔基、-(ch2)
1-2
(经零至4个rg取代的c
3-4
环烷基)、经零至4个rg取代的苯基、经零至3个rg取代的噁二唑基、经零至4个rg取代的吡啶基、-(ch2)
1-2
(经零至4个rg取代的杂环基)、-(ch2)
1-2
nrcc(o)(c
1-4
烷基)、-(ch2)
1-2
nrcc(o)o(c
1-4
烷基)、-o(ch2)
1-2
(经零至4个rg取代的杂环基)、-(ch2)
1-2
nrcs(o)2(c
1-4
烷基)、-c(o)(c
1-4
烷基)、-c(o)oh、-c(o)o(c
1-4
烷基)、-c(o)o(c
3-4
环烷基)、-c(o)nrara或-c(o)nra(c
3-4
环烷基)，或与同一碳原子连接的两个r5形成＝o；
[0038]
各rg独立地为f、cl、-cn、-oh、c
1-3
烷氧基、c
1-3
氟烷氧基、-o(ch2)
1-2
o(c
1-2
烷基)、c
3-5
环烷基或-nrcrc；
[0039]
各r6为h、f、cl、-cn、-ch3、-ch2f、-chf2、-cf3或-och3；
[0040]
r7为h或-ch3；
[0041]
m为零、1、2或3；及
[0042]
n为零、1或2。
[0043]
本发明的第二方面提供至少一种式(i)化合物：
[0044][0045]
或其盐，其中：
[0046]
x为cr6或n；
[0047]
y为cr3或n；
[0048]
l为-o-、-s-、-s(o)
2-、-nr
4c-或-nr
4d
c(o)-；
[0049]
r1为h、f、cl、br、-cn、经零至4个r
1a
取代的c
1-3
烷基、经零至4个r
1a
取代的c
3-4
环烷基、经零至4个r
1a
取代的c
1-3
烷氧基、-c(o)nrara、-nrara、-s(o)nre或-p(o)rere；
[0050]
各r
1a
独立地为f、cl、-cn、-oh、-och3或-nrara；
[0051]
各ra独立地为h或c
1-3
烷基；
[0052]
各re独立地为经零至4个r
1a
取代的c
3-4
环烷基或c
1-3
烷基；
[0053]
r2为h、经零至4个r
2a
取代的c
1-3
烷基、经零至4个r
2a
取代的c
2-3
烯基或经零至4个r
2a
取代的c
3-4
环烷基；
[0054]
各r
2a
独立地为f、cl、-cn、-oh、-o(c
1-2
烷基)、c
3-4
环烷基、c
3-4
烯基或c
3-4
炔基；
[0055]
r3为h、f、cl、br、-cn、c
1-3
烷基、c
1-2
氟烷基、c
3-4
环烷基、c
3-4
氟环烷基、-no2或经零至2个r
3a
取代的吡啶基；
[0056]
各r
3a
为卤基、-cn、c
1-3
烷基或c
1-3
烷氧基；
[0057]
r4为r
4a
、-ch2r
4a
或-ch2ch2r
4a
；
[0058]r4a
为c
3-6
环烷基、c
5-14
杂环基、c
6-10
芳基或c
5-14
杂芳基，各自经零至4个r
4b
取代；
[0059]
各r
4b
独立地为f、cl、br、-cn、-oh、c
1-6
烷基、c
1-3
氟烷基、c
1-4
羟烷基、-(ch2)
1-2
o(c
1-3
烷基)、c
1-4
烷氧基、-o(c
1-4
羟烷基)、-o(ch)
1-3
o(c
1-3
烷基)、c
1-3
氟烷氧基、-o(ch)
1-3
nrcrc、-och2ch＝ch2、-och2c≡ch、-c(o)(c
1-4
烷基)、-c(o)oh、-c(o)o(c
1-4
烷基)、-c(o)nh2、-c(o)nh(c
1-4
烷基)、-c(o)n(c
1-4
烷基)2、-nrcrc、-nras(o)2(c
1-3
烷基)、-nrac(o)(c
1-3
烷基)、-nrac(o)o(c
1-4
烷基)、-p(o)(c
1-3
烷基)2、-s(o)2(c
1-3
烷基)、-o(ch2)
1-2
(c
3-6
环烷基)、-o(ch2)
1-2
(吗啉基)、c
3-6
环烷基、氰基环丙基、甲基氮杂环丁烷基、乙酰基氮杂环丁烷基、三唑基、四氢吡喃基、吗啉基、噻吩基、甲基哌啶基或-crcrc(苯基)；
[0060]
各rc独立地为h或c
1-2
烷基；
[0061]r4c
为h、c
1-6
烷基或r
4a
；
[0062]r4d
为h或c
1-6
烷基；
[0063]
各r5独立地为f、-cn、-oh、经零至4个rg取代的c
1-6
烷基、经零至4个rg取代的c
1-3
烷氧基、经零至4个rg取代的c
2-4
烯基、经零至4个rg取代的c
2-4
炔基、经零至4个rg取代的c
3-4
环烷基、经零至4个rg取代的苯基、经零至3个rg取代的噁二唑基、经零至4个rg取代的吡啶基、-(ch2)
1-2
(经零至4个rg取代的杂环基)、-(ch2)
1-2
nrcc(o)(c
1-4
烷基)、-(ch2)
1-2
nrcc(o)o(c
1-4
烷基)、-(ch2)
1-2
nrcs(o)2(c
1-4
烷基)、-c(o)(c
1-4
烷基)、-c(o)oh、-c(o)o(c
1-4
烷基)、-c(o)o
(c
3-4
环烷基)、-c(o)nrara或-c(o)nra(c
3-4
环烷基)；
[0064]
各rg独立地为f、cl、-cn、-oh、c
1-3
烷氧基、c
1-3
氟烷氧基、-o(ch2)
1-2
o(c
1-2
烷基)、c
3-5
环烷基或-nrcrc；
[0065]
各r6为h、f、cl、-cn、-ch3、-ch2f、-chf2、-cf3或-och3；
[0066]
r7为h或-ch3；
[0067]
m为零、1、2或3；及
[0068]
n为零、1或2。
[0069]
在一个实施方案中，提供一种式(i)化合物或其盐，其中x为cr6；且y为cr3或n。此实施方案的化合物具有式(ii)的结构：
[0070][0071]
在一个实施方案中，提供一种式(i)化合物或其盐，其中x为cr6或n；且y为cr3。此实施方案的化合物具有式(iii)的结构：
[0072][0073]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中x为cr6且y为cr3。此实施方案的化合物具有式(iv)的结构：
[0074][0075]
此实施方案中包括如下的化合物，其中l为o。此外，此实施方案中包括如下的化合物，其中x为ch。另外，此实施方案中包括如下的化合物，其中各r6为h。
[0076]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中x为n且y为cr3。此实施方案的化
合物具有式(v)的结构：
[0077][0078]
此实施方案中包括如下的化合物，其中l为o。此外，此实施方案中包括如下的化合物，其中各r6为h。
[0079]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中x为cr6且y为n。此实施方案的化合物具有式(vi)的结构：
[0080][0081]
此实施方案中包括如下的化合物，其中l为o。此外，此实施方案中包括如下的化合物，其中x为ch。另外，此实施方案中包括如下的化合物，其中各r6为h。
[0082]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中x为n且y为n。此实施方案的化合物具有式(vii)的结构：
[0083][0084]
此实施方案中包括如下的化合物，其中l为o。此外，此实施方案中包括如下的化合物，其中各r6为h。
[0085]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中：
[0086]
r1为h、f、cl、br、-cn、经零至4个r
1a
取代的c
1-3
烷基、经零至3个r
1a
取代的环丙基、经零至3个r
1a
取代的c
1-3
烷氧基、-c(o)nrara、-nrara、-s(o)nch3或-p(o)(ch3)2；
[0087]
各r
1a
独立地为f、cl或-cn；
[0088]
各ra独立地为h或c
1-3
烷基；
[0089]
r2为h、经零至2个r
2a
取代的c
1-2
烷基或经零至2个r
2a
取代的c
2-3
烯基；
[0090]
各r
2a
独立地为f、cl、-cn、-oh、-o(c
1-2
烷基)、环丙基、c
3-4
烯基或c
3-4
炔基；
[0091]
r3为h、f、cl、br、-cn、c
1-2
烷基、c
1-2
氟烷基、c
3-4
环烷基、-no2或经零至1个r
3a
取代的吡啶基；
[0092]r4a
为c
3-6
环烷基、氧杂环丁基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、苯基、萘基、呋喃基、吡喃基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、异噁唑基、噁唑基、噁二唑基、三唑基、吲哚基、吲唑基、酞嗪基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、喹啉基、异喹啉基、喹喔啉基、喹唑啉基、萘啶基或二氢苯并[b][1,4]二氧杂卓基，各自经零至3个r
4b
取代；
[0093]
各r
4b
独立地为f、cl、br、-cn、-oh、c
1-6
烷基、c
1-2
氟烷基、c
1-3
羟烷基、-(ch2)
1-2
o(c
1-3
烷基)、c
1-4
烷氧基、-o(c
1-3
羟烷基)、-o(ch)
1-3
o(c
1-3
烷基)、c
1-2
氟烷氧基、-o(ch)
1-2
nrcrc、-c(o)(c
1-3
烷基)、-c(o)oh、-c(o)o(c
1-3
烷基)、-c(o)nh2、-c(o)nh(c
1-3
烷基)、-c(o)n(c
1-3
烷基)2、-nrcrc、-s(o)2(c
1-2
烷基)、c
3-6
环烷基或-crcrc(苯基)；
[0094]r4c
为h、c
1-4
烷基或r
4a
；
[0095]r4d
为h或c
1-4
烷基；
[0096]
各r5独立地为f、-cn、-oh、经零至4个rg取代的c
1-5
烷基、经零至3个rg取代的c
1-3
烷氧基、经零至4个rg取代的c
2-3
烯基、经零至4个rg取代的c
2-3
炔基、-(ch2)
1-2
(经零至4个rg取代的c
3-4
环烷基)、经零至3个rg取代的苯基、经零至3个rg取代的噁二唑基、经零至3个rg取代的吡啶基、-(ch2)
1-2
(经零至4个rg取代的杂环基)、-o(ch2)
1-2
(经零至4个rg取代的杂环基)、-(ch2)
1-2
nrcc(o)(c
1-4
烷基)、-(ch2)
1-2
nrcc(o)o(c
1-4
烷基)、-(ch2)
1-2
nrcs(o)2(c
1-4
烷基)、-c(o)(c
1-4
烷基)、-c(o)oh、-c(o)o(c
1-4
烷基)、-c(o)o(c
3-4
环烷基)、-c(o)nrara或-c(o)nra(c
3-4
环烷基)；
[0097]
各r6为h、f或-ch3；及
[0098]
r7为h或-ch3。此实施方案包括其中r7为h、d、-ch3或-cd3的化合物，。
[0099]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中：
[0100]
r1为h、f、cl、br、-cn、经零至4个r
1a
取代的c
1-3
烷基、经零至3个r
1a
取代的环丙基、经零至3个r
1a
取代的c
1-3
烷氧基、-c(o)nrara、-nrara、-s(o)nch3或-p(o)(ch3)2；
[0101]
各r
1a
独立地为f、cl或-cn；
[0102]
各ra独立地为h或c
1-3
烷基；
[0103]
r2为h、经零至2个r
2a
取代的c
1-2
烷基或经零至2个r
2a
取代的c
2-3
烯基；
[0104]
各r
2a
独立地为f、cl、-cn、-oh、-o(c
1-2
烷基)、环丙基、c
3-4
烯基或c
3-4
炔基；
[0105]
r3为h、f、cl、br、-cn、c
1-2
烷基、c
1-2
氟烷基、c
3-4
环烷基、-no2、甲基吡啶基或甲氧基吡啶基；
[0106]r4a
为c
3-6
环烷基、氧杂环丁基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、苯基、萘基、呋喃基、吡喃基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、异噁唑基、噁唑基、噁二唑基、三唑基、吲哚基、吲唑基、酞嗪基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、喹啉基、异喹啉基、喹喔啉基、喹唑啉基、萘啶基或二氢苯并[b][1,4]二氧杂卓基，各自经零至3个r
4b
取代；
[0107]
各r
4b
独立地为f、cl、br、-cn、-oh、c
1-6
烷基、c
1-2
氟烷基、c
1-3
羟烷基、-(ch2)
1-2
o(c
1-3
烷基)、c
1-4
烷氧基、-o(c
1-3
羟烷基)、-o(ch)
1-3
o(c
1-3
烷基)、c
1-2
氟烷氧基、-o(ch)
1-2
nrcrc、-c(o)(c
1-3
烷基)、-c(o)oh、-c(o)o(c
1-3
烷基)、-c(o)nh2、-c(o)nh(c
1-3
烷基)、-c(o)n(c
1-3
烷基)2、-nrcrc、-s(o)2(c
1-2
烷基)、c
3-6
环烷基或-crcrc(苯基)；
[0108]r4c
为h、c
1-4
烷基或r
4a
；
[0109]r4d
为h或c
1-4
烷基；
[0110]
各r5独立地为f、-cn、-oh、经零至4个rg取代的c
1-5
烷基、经零至3个rg取代的c
1-2
烷氧基、经零至4个rg取代的c
2-3
烯基、经零至4个rg取代的c
2-3
炔基、经零至4个rg取代的c
3-4
环烷基、经零至3个rg取代的苯基、经零至3个rg取代的噁二唑基、经零至3个rg取代的吡啶基、-(ch2)
1-2
(经零至4个rg取代的杂环基)、-(ch2)
1-2
nrcc(o)(c
1-4
烷基)、-(ch2)
1-2
nrcc(o)o(c
1-4
烷基)、-(ch2)
1-2
nrcs(o)2(c
1-4
烷基)、-c(o)(c
1-4
烷基)、-c(o)oh、-c(o)o(c
1-4
烷基)、-c(o)o(c
3-4
环烷基)、-c(o)nrara或-c(o)nra(c
3-4
环烷基)；及
[0111]
各r6为h、f或-ch3。此实施方案包括其中r7为h、d、-ch3或-cd3的化合物。
[0112]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中：
[0113]
x为ch且y为cr3；
[0114]
x为n且y为cr3；或
[0115]
x为n且y为n；
[0116]
l为-o-、-nh-、-n(ch3)-或-n(ch3)c(o)-；
[0117]
r1为f、cl、br、-cn、-och3或-c(o)nh2；
[0118]
r2为-ch3；
[0119]
r3为h、f、cl、br、-cn、-ch3、-no2、甲基吡啶基或甲氧基吡啶基；
[0120]
r4为r
4a
或-ch2r
4a
；
[0121]r4a
为环己基、苯基、吲唑基、酞嗪基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、喹啉基、喹喔啉基、喹唑啉基、1,7-萘啶基或二氢苯并[b][1,4]二氧杂卓基，各自经零至3个r
4b
取代；
[0122]
各r
4b
独立地为f、cl、br、-cn、-ch3、-ch2ch3、-ch2ch2ch3、-ch(ch3)2、-ch2ch2ch2ch3、-c(ch3)3、-ch2ch2ch2ch2ch3、-c(ch3)2ch2ch3、-chf2、-cf3、-och3、-och(ch3)2、-oc(ch3)3、-ocf3、-c(o)n(ch3)2、-s(o)2ch3、-ch2(苯基)、-c(ch3)2(苯基)、环丙基、环戊基或环己基；
[0123]
各r5独立地为氢、f、-oh、c
1-2
烷基、c
1-3
烷氧基、-ch2cf3、-och2ch2och3、-och2ch2n(ch3)2、-och2(环丙基)或-och2ch2(吗啉基)；及
[0124]
各r6为h。
[0125]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中：
[0126]
x为ch且y为cr3；
[0127]
x为n且y为cr3；或
[0128]
x为n且y为n；
[0129]
l为-o-或-nh-；
[0130]
r1为f、cl、br、-cn、-och3或-c(o)nh2；
[0131]
r2为-ch3；
[0132]
r3为h、f、cl、br、-cn、c
1-2
烷基、c
1-2
氟烷基、c
3-4
环烷基、-no2或经零至1个r
3a
取代的吡啶基；
[0133]
r4为r
4a
或-ch2r
4a
；
[0134]r4a
为苯基、吲唑基、酞嗪基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、喹啉基、喹喔啉基、喹唑啉基、1,7-萘啶基或二氢苯并[b][1,4]二氧杂卓基，各自经零至2个r
4b
取代；
[0135]
各r
4b
独立地为f、cl、br、-cn、-ch3、-ch2ch3、-ch2ch2ch3、-ch(ch3)2、-ch2ch2ch2ch3、-c(ch3)3、-ch2ch2ch2ch2ch3、-c(ch3)2ch2ch3、-cf3、-och3、-och(ch3)2、-oc(ch3)3、-ocf3、-c(o)n(ch3)2、-ch2(苯基)、-c(ch3)2(苯基)、环丙基、环戊基或环己基；
[0136]
各r5独立地为氢、f、-oh、c
1-2
烷基或c
1-2
烷氧基；
[0137]
各r6为h；及
[0138]
r7为h。此实施方案中包括如下的化合物，其中r7为d。
[0139]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中：
[0140]
x为ch且y为cr3；
[0141]
x为n且y为cr3；或
[0142]
x为n且y为n；
[0143]
l为-o-；
[0144]
r1为f、cl、br、-cn、-och3或-c(o)nh2；
[0145]
r2为-ch3；
[0146]
r3为h、f、cl、br、-cn、-ch3、-no2、甲基吡啶基或甲氧基吡啶基；
[0147]
r4为r
4a
或-ch2r
4a
；
[0148]r4a
为环己基、苯基、吲唑基、酞嗪基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、喹啉基、喹喔啉基、喹唑啉基、1,7-萘啶基或二氢苯并[b][1,4]二氧杂卓基，各自经零至3个r
4b
取代；
[0149]
各r
4b
独立地为f、cl、br、-cn、-ch3、-ch2ch3、-ch2ch2ch3、-ch(ch3)2、-ch2ch2ch2ch3、-c(ch3)3、-ch2ch2ch2ch2ch3、-c(ch3)2ch2ch3、-chf2、-cf3、-och3、-och(ch3)2、-oc(ch3)3、-ocf3、-c(o)n(ch3)2、-s(o)2ch3、-ch2(苯基)、-c(ch3)2(苯基)、环丙基、环戊基或环己基；
[0150]
各r5独立地为氢、f、-oh、c
1-2
烷基、c
1-3
烷氧基、-ch2cf3、-och2ch2och3、-och2ch2n(ch3)2、-och2(环丙基)或-och2ch2(吗啉基)；及
[0151]
各r6为h；及
[0152]
r7为h或-ch3。此实施方案包括其中r7为h、d、-ch3或-cd3的化合物。
[0153]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中：
[0154]
x为ch且y为cr3；
[0155]
x为n且y为cr3；或
[0156]
x为n且y为n；
[0157]
l为-o-；
[0158]
r1为f、cl、br、-cn、-och3或-c(o)nh2；
[0159]
r2为-ch3；
[0160]
r3为h、f、cl、br、-cn、-ch3、-no2、甲基吡啶基或甲氧基吡啶基；
[0161]
r4为r
4a
或-ch2r
4a
；
[0162]r4a
为苯基、吲唑基、酞嗪基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、喹啉基、喹喔啉基、喹唑啉基、1,7-萘啶基或二氢苯并[b][1,4]二氧杂卓基，各自经零至2个r
4b
取代；
[0163]
各r
4b
独立地为f、cl、br、-cn、-ch3、-ch2ch3、-ch2ch2ch3、-ch(ch3)2、-ch2ch2ch2ch3、-c(ch3)3、-ch2ch2ch2ch2ch3、-c(ch3)2ch2ch3、-cf3、-och3、-och(ch3)2、-oc(ch3)3、-ocf3、-c(o)n(ch3)2、-ch2(苯基)、-c(ch3)2(苯基)、环丙基、环戊基或环己基；
[0164]
各r5独立地为氢、f、-oh、c
1-2
烷基或c
1-2
烷氧基；
[0165]
各r6为h；及
[0166]
r7为h。此实施方案中包括如下的化合物，其中r7为d。
[0167]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中：x为ch且y为cr3；l为-o-；r1为f、cl、br、-cn、-och3或-c(o)nh2；r2为-ch3；r3为h、f、cl、br、-cn、-ch3、-no2、甲基吡啶基或甲氧基吡啶基；r4为r
4a
或-ch2r
4a
；r
4a
为环己基、苯基、吲唑基、酞嗪基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、喹啉基、喹喔啉基、喹唑啉基、1,7-萘啶基或二氢苯并[b][1,4]二氧杂卓基，各自经零至3个r
4b
取代；各r
4b
独立地为f、cl、br、-cn、-ch3、-ch2ch3、-ch2ch2ch3、-ch(ch3)2、-ch2ch2ch2ch3、-c(ch3)3、-ch2ch2ch2ch2ch3、-c(ch3)2ch2ch3、-chf2、-cf3、-och3、-och(ch3)2、-oc(ch3)3、-ocf3、-c(o)n(ch3)2、-s(o)2ch3、-ch2(苯基)、-c(ch3)2(苯基)、环丙基、环戊基或环己基；各r5独立地为氢、f、-oh、c
1-2
烷基、c
1-3
烷氧基、-ch2cf3、-och2ch2och3、-och2ch2n(ch3)2、-och2(环丙基)或-och2ch2(吗啉基)；及r7为h。此实施方案中包括如下的化合物，其中r7为d。
[0168]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中：x为ch且y为cr3；l为-o-；r1为f、cl、br、-cn、-och3或-c(o)nh2；r2为-ch3；r3为h、f、cl、br、-cn、-ch3、-no2、甲基吡啶基或甲氧基吡啶基；r4为r
4a
或-ch2r
4a
；r
4a
为苯基、吲唑基、酞嗪基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、喹啉基、喹喔啉基、喹唑啉基、1,7-萘啶基或二氢苯并[b][1,4]二氧杂卓基，各自经零至2个r
4b
取代；各r
4b
独立地为f、cl、br、-cn、-ch3、-ch2ch3、-ch2ch2ch3、-ch(ch3)2、-ch2ch2ch2ch3、-c(ch3)3、-ch2ch2ch2ch2ch3、-c(ch3)2ch2ch3、-cf3、-och3、-och(ch3)2、-oc(ch3)3、-ocf3、-c(o)n(ch3)2、-ch2(苯基)、-c(ch3)2(苯基)、环丙基、环戊基或环己基；各r5独立地为氢、f、-oh、c
1-2
烷基或c
1-2
烷氧基；各r6为h；及r7为h。此实施方案中包括如下的化合物，其中r7为d。
[0169]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐、其中：x为n且y为cr3；l为-o-；r1为f、cl、br、-cn、-och3或-c(o)nh2；r2为-ch3；r3为h、f、cl、br、-cn、-ch3、-no2、甲基吡啶基或甲氧基吡啶基；r4为r
4a
或-ch2r
4a
；r
4a
为苯基、吲唑基、酞嗪基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、喹啉基、喹喔啉基、喹唑啉基、1,7-萘啶基或二氢苯并[b][1,4]二氧杂卓基，各自经零至2个r
4b
取代；各r
4b
独立地为f、cl、br、-cn、-ch3、-ch2ch3、-ch2ch2ch3、-ch(ch3)2、-ch2ch2ch2ch3、-c(ch3)3、-ch2ch2ch2ch2ch3、-c(ch3)2ch2ch3、-cf3、-och3、-och(ch3)2、-oc(ch3)3、-ocf3、-c(o)n(ch3)2、-ch2(苯基)、-c(ch3)2(苯基)、环丙基、环戊基或环己基；各r5独立地为氢、f、-oh、c
1-2
烷基或c
1-2
烷氧基；各r6为h；及r7为h。此实施方案中包括其中r7为d的化合物。
[0170]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中：x为n且y为n；l为-o-；r1为f、cl、br、-cn、-och3或-c(o)nh2；r2为-ch3；r3为h、f、cl、br、-cn、-ch3、-no2、甲基吡啶基或甲氧基吡啶基；r4为r
4a
或-ch2r
4a
；r
4a
为苯基、吲唑基、酞嗪基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、喹啉基、喹喔啉基、喹唑啉基、1,7-萘啶基或二氢苯并[b][1,4]二氧杂卓基，各自经零至2个r
4b
取代；各r
4b
独立地为f、cl、br、-cn、-ch3、-ch2ch3、-ch2ch2ch3、-ch(ch3)2、-ch2ch2ch2ch3、-c(ch3)3、-ch2ch2ch2ch2ch3、-c(ch3)2ch2ch3、-cf3、-och3、-och(ch3)2、-oc(ch3)3、-ocf3、-c(o)n(ch3)2、-ch2(苯基)、-c(ch3)2(苯基)、环丙基、环戊基或环己基；各r5独立地为氢、f、-oh、c
1-2
烷基或c1-2
烷氧基；各r6为h；及r7为h。此实施方案中包括如下的化合物，其中r7为d。
[0171]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中l为-o-。
[0172]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中l为-s-或-s(o)
2-。
[0173]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中l为-s-。
[0174]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中l为-s(o)
2-。
[0175]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中l为-nr
4c-或-nr
4d
c(o)-。
[0176]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中l为-nr
4c-。此实施方案中包括如下的化合物，其中r
4c
为h或c
1-4
烷基。此外，此实施方案中包括如下的化合物，其中r
4c
为r
4a
。
[0177]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中l为-nr
4d
c(o)-。此实施方案中包括如下的化合物，其中r
4d
为h或c
1-2
烷基。
[0178]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中r1为h、f、cl、br、-cn、经零至4个r
1a
取代的c
1-3
烷基、经零至4个r
1a
取代的c
3-4
环烷基、经零至4个r
1a
取代的c
1-3
烷氧基、-c(o)nrara、-nrara、-s(o)nre或-p(o)rere。此实施方案包括如下的化合物，其中r1为h、f、cl、br、-cn、经零至4个r
1a
取代的c
1-3
烷基、经零至3个r
1a
取代的环丙基、经零至3个r
1a
取代的c
1-3
烷氧基，-c(o)nrara、-nrara、-s(o)nch3或-p(o)(ch3)2。此外，此实施方案中包括如下的化合物，其中r1为h、f、cl、br、-cn、经零至4个r
1a
取代的c
1-2
烷基、经零至1个r
1a
取代的环丙基、经零至3个r
1a
取代的c
1-3
烷氧基、-c(o)nrara、-nrara、-s(o)nch3或-p(o)(ch3)2。另外，此实施方案中包括如下的化合物，其中r1为f、cl、br、-cn、-och3或-c(o)nh2。
[0179]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中各r
1a
独立地为f、cl、-cn、-oh或-och3。此实施方案中包括如下的化合物，其中各r
1a
独立地为f、cl、-cn或-och3。此外，此实施方案中包括如下的化合物，其中各r
1a
独立地为f、cl或-cn。
[0180]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中各ra独立地为h或c
1-2
烷基。此实施方案中包括如下的化合物，其中各ra独立地为h或-ch3。
[0181]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中r2为h、经零至3个r
2a
取代的c
1-3
烷基或经零至2个r
2a
取代的c
3-4
环烷基。此实施方案包括如下的化合物，其中r2为h或经零至2个r
2a
取代的c
1-2
烷基。此外，此实施方案中包括如下的化合物，其中r2为h或-ch3。另外，此实施方案中包括如下的化合物，其中r2为-ch3。
[0182]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中各r
2a
独立地为f、cl、-cn、-oh、-o(c
1-2
烷基)、环丙基、c
3-4
烯基或c
3-4
炔基。此实施方案中包括如下的化合物，其中各r
2a
独立地为f、cl、-cn、-oh、-och3或环丙基。
[0183]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中r3为h、f、cl、br、-cn、c
1-3
烷基、c
1-2
氟烷基、c
3-4
环烷基、-no2或经零至2个r
3a
取代的吡啶基。此实施方案中包括如下的化合物，其中r3为h、f、cl、br、-cn、c
1-2
烷基、c
1-2
氟烷基、c
3-4
环烷基、-no2或经零至1个r
3a
取代的吡啶基。此外，此实施方案中包括如下的化合物，其中r3为h、f、cl、br、-cn、-ch3、-no2、甲基吡啶基或甲氧基吡啶基。另外，此实施方案中包括如下的化合物，其中r3为h、f、cl、br、-cn、-ch3或-no2。
[0184]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中x为cr6或n；y为cr3；r1为cl；及r3为-cn。此实施方案中包括如下的化合物，其中x为cr6且y为cr3。此外，此实施方案中包括如下的化合物，其中x为n且y为cr3。
[0185]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中x为cr6或n；y为cr3；r1为br；及r3为-cn。此实施方案中包括如下的化合物，其中x为cr6且y为cr3。此外，此实施方案中包括如下的化合物，其中x为n且y为cr3。
[0186]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中x为cr6或n；y为cr3；r1为-cn；及r3为h。此实施方案中包括如下的化合物，其中x为cr6且y为cr3。此外，此实施方案中包括如下的化合物，其中x为n且y为cr3。
[0187]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中x为cr6或n；y为cr3；r1为f；及r3为-no2。此实施方案中包括如下的化合物，其中x为cr6且y为cr3。此外，此实施方案中包括如下的化合物，其中x为n且y为cr3。
[0188]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中x为cr6或n；y为cr3；r1为-och3；及r3为-cn。此实施方案中包括如下的化合物，其中x为cr6且y为cr3。此外，此实施方案中包括如下的化合物，其中x为n且y为cr3。
[0189]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中x为cr6或n；y为cr3；r1为-cn；及r3为-cn。此实施方案中包括如下的化合物，其中x为cr6且y为cr3。此外，此实施方案中包括如下的化合物，其中x为n且y为cr3。
[0190]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中x为cr6或n；y为cr3；r1为-cn；及r3为-no2。此实施方案中包括如下的化合物，其中x为cr6且y为cr3。此外，此实施方案中包括如下的化合物，其中x为n且y为cr3。
[0191]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中x为cr6或n；y为cr3；r1为-c(o)nh2；及r3为h。此实施方案中包括如下的化合物，其中x为cr6且y为cr3。此外，此实施方案中包括如下的化合物，其中x为n且y为cr3。
[0192]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中x为cr6或n；y为cr3；r1为-cn；及r3为-ch3。此实施方案中包括如下的化合物，其中x为cr6且y为cr3。此外，此实施方案中包括如下的化合物，其中x为n且y为cr3。
[0193]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中x为cr6或n；y为cr3；r1为-cn；及r3为f。此实施方案中包括如下的化合物，其中x为cr6且y为cr3。此外，此实施方案中包括如下的化合物，其中x为n且y为cr3。
[0194]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中x为cr6或n；y为cr3；r1为-cn；及r3为cl。此实施方案中包括如下的化合物，其中x为cr6且y为cr3。此外，此实施方案中包括如下的化合物，其中x为n且y为cr3。
[0195]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中x为cr6或n；y为cr3；r1为-cn；及r3为br。此实施方案中包括如下的化合物，其中x为cr6且y为cr3。此外，此实施方案中包括如下的化合物，其中x为n且y为cr3。此实施方案中包括如下的化合物，其中x为cr6且y为cr3。此外，此实施方案中包括如下的化合物，其中x为n且y为cr3。
[0196]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中x为cr6或n；y为cr3；r1为cl；及r3为h。此实施方案中包括如下的化合物，其中x为cr6且y为cr3。此外，此实施方案中包括如下的化合物，其中x为n且y为cr3。
[0197]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中r4为r
4a
或-ch2r
4a
。此实施方案中包括如下的化合物，其中r4为r
4a
。此实施方案中亦包括如下的化合物，其中r
4a
为c
3-6
环烷基、
氧杂环丁基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、苯基、萘基、呋喃基、吡喃基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、异噁唑基、噁唑基、噁二唑基、三唑基、吲哚基、吲唑基、酞嗪基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、喹啉基、异喹啉基、喹喔啉基、喹唑啉基、萘啶基或二氢苯并[b][1,4]二氧杂卓基，各自经零至3个r
4b
取代。
[0198]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中r4为r
4a
或-ch2r
4a
。此实施方案中包括如下的化合物，其中r4为r
4a
。此外，此实施方案中包括如下的化合物，其中r4为-ch2r
4a
。此外，此实施方案中包括如下的化合物，其中r
4a
为c
3-6
环烷基、氧杂环丁基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、苯基、萘基、呋喃基、吡喃基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、异噁唑基、噁唑基、噁二唑基、三唑基、吲哚基、吲唑基、酞嗪基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、喹啉基、异喹啉基、喹喔啉基、喹唑啉基、萘啶基或二氢苯并[b][1,4]二氧杂卓基，各自经零至3个r
4b
取代。
[0199]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中r4为r
4a
；及r
4a
为c
3-6
环烷基、氧杂环丁基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、苯基、萘基、呋喃基、吡喃基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、异噁唑基、噁唑基、噁二唑基、三唑基、吲哚基、吲唑基、酞嗪基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、喹啉基、异喹啉基、喹喔啉基、喹唑啉基、萘啶基或二氢苯并[b][1,4]二氧杂卓基，各自经零至3个r
4b
取代。此实施方案中包括如下的化合物，其中r
4a
为环己基、苯基、吲唑基、酞嗪基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、喹啉基、喹喔啉基、喹唑啉基、1,7-萘啶基或二氢苯并[b][1,4]二氧杂卓基，各自经零至3个r
4b
取代；及各r
4b
独立地为f、cl、br、-cn、-ch3、-ch2ch3、-ch2ch2ch3、-ch(ch3)2、-ch2ch2ch2ch3、-c(ch3)3、-ch2ch2ch2ch2ch3、-c(ch3)2ch2ch3、-chf2、-cf3、-och3、-och(ch3)2、-oc(ch3)3、-ocf3、-c(o)n(ch3)2、-s(o)2ch3、-ch2(苯基)、-c(ch3)2(苯基)、环丙基、环戊基或环己基。
[0200]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中r4为r
4a
；及r
4a
为c
3-6
环烷基、氧杂环丁基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、苯基、萘基、呋喃基、吡喃基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、异噁唑基、噁唑基、噁二唑基、三唑基、吲哚基、吲唑基、酞嗪基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、喹啉基、异喹啉基、喹喔啉基、喹唑啉基、萘啶基或二氢苯并[b][1,4]二氧杂卓基，各自经零至3个r
4b
取代。此实施方案中包括如下的化合物，其中r
4a
为苯基、吲唑基、酞嗪基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、喹啉基、喹喔啉基、喹唑啉基、1,7-萘啶基或二氢苯并[b][1,4]二氧杂卓基，各自经零至2个r
4b
取代；及各r
4b
独立地为f、cl、br、-cn、-ch3、-ch2ch3、-ch2ch2ch3、-ch(ch3)2、-ch2ch2ch2ch3、-c(ch3)3、-ch2ch2ch2ch2ch3、-c(ch3)2ch2ch3、-cf3、-och3、-och(ch3)2、-oc(ch3)3、-ocf3、-c(o)n(ch3)2、-ch2(苯基)、-c(ch3)2(苯基)、环丙基、环戊基或环己基。
[0201]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中r4为r
4a
、-ch2r
4a
或-ch2ch2r
4a
；及r
4a
为c
3-6
环烷基、氧杂环丁基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、苯基、萘基、呋喃基、吡喃基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、异噁唑基、噁唑基、噁二唑基、三唑基、吲哚基、吲唑基、酞嗪基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、喹啉基、异喹啉基、喹喔啉基、喹唑啉基、萘啶基或二氢苯并[b][1,4]二氧杂卓基，各自经零至3个r
4b
取代。此实施方案中包括如下的化合物，其中r
4a
为环己基、苯基、吲唑基、酞
cn、-oh、经零至4个rg取代的c
1-5
烷基、经零至3个rg取代的c
1-2
烷氧基、经零至4个rg取代的c
2-3
烯基、经零至4个rg取代的c
2-3
炔基、经零至4个rg取代的c
3-4
环烷基、经零至3个rg取代的苯基、经零至3个rg取代的噁二唑基、经零至3个rg取代的吡啶基、-(ch2)
1-2
(经零至4个rg取代的杂环基)、-(ch2)
1-2
nrcc(o)(c
1-4
烷基)、-(ch2)
1-2
nrcc(o)o(c
1-4
烷基)、-(ch2)
1-2
nrcs(o)2(c
1-4
烷基)、-c(o)(c
1-4
烷基)、-c(o)oh、-c(o)o(c
1-4
烷基)、-c(o)o(c
3-4
环烷基)、-c(o)nrara或-c(o)nra(c
3-4
环烷基)。此实施方案中包括如下的化合物，其中各r5独立地为氢、f、-cn、-oh、经零至4个rg取代的c
1-2
烷基，或c
1-2
烷氧基。此外，此实施方案中包括如下的化合物，其中各r5独立地为氢、f、-oh、c
1-2
烷基或c
1-2
烷氧基。
[0208]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中m为1或2；及各r5独立地为氢、f、-oh、c
1-2
烷基、c
1-3
烷氧基、-ch2cf3、-och2ch2och3、-och2ch2n(ch3)2、-och2(环丙基)或-och2ch2(吗啉基)。此实施方案中包括如下的化合物，其中各r5独立地为f、-oh、c
1-2
烷基、c
1-3
烷氧基、-ch2cf3、-och2ch2och3、-och2ch2n(ch3)2、-och2(环丙基)或-och2ch2(吗啉基)。
[0209]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中m为1；及r5为氢、f、-oh、c
1-2
烷基、c
1-3
烷氧基、-ch2cf3、-och2ch2och3、-och2ch2n(ch3)2、-och2(环丙基)或-och2ch2(吗啉基)。此实施方案中包括如下的化合物，其中各r5独立地为f、-oh、c
1-2
烷基、c
1-3
烷氧基、-ch2cf3、-och2ch2och3、-och2ch2n(ch3)2、-och2(环丙基)或-och2ch2(吗啉基)。
[0210]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中m为1或2；及各r5独立地为氢、f、-oh、c
1-2
烷基或c
1-2
烷氧基。此实施方案中包括如下的化合物，其中各r5独立地为f、-oh、c
1-2
烷基或c
1-2
烷氧基。
[0211]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中m为1；及r5为氢、f、-oh、c
1-2
烷基或c
1-2
烷氧基。此实施方案中包括如下的化合物，其中r5为f、-oh、c
1-2
烷基或c
1-2
烷氧基。
[0212]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其具有选自以下的结构：
[0213][0214]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其具有选自以下的结构：
[0215]
[0216][0217]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中该化合物为：6-氟-4-(4-(3-氟-5-甲基苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-3-硝基喹啉-2(1h)-酮(1)；6-氟-4-(4-(4-异丙基苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-3-硝基喹啉-2(1h)-酮(2)；6-氟-1-甲基-3-硝基-4-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)喹啉-2(1h)-酮(3)；6-氟-1-甲基-3-硝基-4-(4-(间甲苯氧基)哌啶-1-基)喹啉-2(1h)-酮(4)；4-(4-((1h-吲唑-4-基)氧基)哌啶-1-基)-6-氟-1-甲基-3-硝基喹啉-2(1h)-酮(5)；3-((1-(6-氟-1-甲基-3-硝基-2-氧代-1,2-二氢喹啉-4-基)哌啶-4-基)氧基)苯甲腈(6)；4-(4-(3-氯苯氧基)哌啶-1-基)-6-氟-1-甲基-3-硝基喹啉-2(1h)-酮(7)；6-氟-4-(4-(2-甲氧基-5-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-3-硝基喹啉-2(1h)-酮(8)；6-氟-4-(4-(3-氟苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-3-硝基喹啉-2(1h)-酮(9)；或4-(4-(4-(叔丁基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢喹啉-6-甲腈(53)。
[0218]
一个实施方案提供一种式(i)化合物或其盐，其中该化合物为：4-((2s,5s)-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2,5-二甲基哌啶-1-基)-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(243及246)；4-((2r,5r)-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2,5-二甲基哌啶-1-基)-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(244-245)；4-((2r,5s)-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2,5-二甲基哌啶-1-基)-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(248-249)；4-((2s,5r)-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2,5-二甲基哌啶-1-基)-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(247及250)；4-((2r,5s)-2,5-二甲基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(251及253)；4-((2s,5r)-2,5-二甲基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(252及254)；4-((2r,5r)-2,5-二甲基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(256-257)；4-((2s,5s)-2,5-二甲基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(255及258)；(
±
)-反式-6-氯-4-(3-羟基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1h)-酮(271-272)；(
±
)-反式-4-(3-羟基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(273-274)；6-氯-4-((3r,4r)-3-甲氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1h)-酮(275)；(
±
)-反式-4-(3-羟基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(276-277)；4-((3r,4r)-3-乙氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(278-279)；6-氯-4-((2s,4r,5r)-5-乙基-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,
甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(123)；8-((3r,4r)-4-(2-氟-6-(三氟甲基)苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(124)；8-((3r,4r)-4-(2,6-二氟苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(125-127)；8-((3r,4r)-4-(4-氟苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(128-130)；5-甲基-8-((3r,4r)-3-甲基-4-(2,4,6-三氟苯氧基)哌啶-1-基)-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(131)；8-((3r,4r)-4-((3,4-二氢-2h-苯并[b][1,4]二氧杂环庚-6-基)氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(132)；5-甲基-8-((3r,4r)-3-甲基-4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(133-135)；5-甲基-8-((3r,4r)-3-甲基-4-(间甲苯氧基)哌啶-1-基)-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2,7-二甲腈(136)；8-((3r,4r)-3-乙基-4-(3-异丙基苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(137-139)；8-((3r,4r)-3-乙基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(140-142)；8-((3r,4r)-3-乙基-4-(4-异丙基苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(143-145)；8-((3r,4r)-3-乙基-4-(4-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(146-148)；8-((3r,4r)-3-乙基-4-(4-(叔戊基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(149-151)；8-((3r,4r)-4-(4-(叔丁基)苯氧基)-3-乙基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(152-154)；8-((3r,4r)-4-(3-环丙基苯氧基)-3-乙基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(155-157)；8-((3r,4r)-4-(4-(叔丁氧基)苯氧基)-3-乙基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(158-160)；8-((3r,4r)-3-乙基-4-(4-异丙氧基苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(161)；8-((3r,4r)-3-乙基-4-(3-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(162-163)；8-((3r,4s)-3-乙基-4-(3-异丙基苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(164)；8-((3r,4s)-4-(3-(叔丁基)苯氧基)-3-乙基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(165-167)；5-甲基-8-((3r,4s)-3-甲基-4-(4-(叔戊基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(169-171)；8-((3r,4s)-4-(4-(叔丁氧基)苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(172-174)；8-((3r,4s)-4-(4-(叔丁基)苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(175)；8-((3r,4s)-4-(4-异丙基苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(176-178)；8-((3r,4s)-4-(3-环丙基苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(179-181)；8-((3r,4s)-4-(4-异丙基苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(182-184)；( /-)5-甲基-8-((3r,4s)-3-甲基-4-(4-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲酰胺(185)；( /-)5-甲基-8-((3r,4s)-3-甲基-4-(4-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(186)；5-甲基-8-((3r,4s)-3-甲基-4-(4-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(187)；5-甲基-8-((3r,4s)-3-甲基-4-(4-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(188)；5-甲基-8-((3r,4s)-3-甲基-4-(4-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2,7-二甲
腈(189-191)；8-((3r,4r)-3-乙基-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(192-194)；8-((3r,4r)-3-乙基-4-(4-氟-3-丙基苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(195)；8-((3r,4r)-4-(3-(叔丁基)苯氧基)-3-乙基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(196-198)；8-((3r,4r)-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(199-201)；8-((3r,4s)-3-乙基-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(202-204)；8-((3r,4s)-4-((5-异丙基吡啶-2-基)氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(205-207)；8-((3r,4s)-4-((5-(二氟甲基)吡啶-2-基)氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(208-210)；8-((3r,4s)-4-((4-异丙基吡啶-2-基)氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(211-213)；8-((3r,4s)-4-((6-异丙基吡啶-2-基)氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(214-216)；5-甲基-8-((3r,4s)-3-甲基-4-(嘧啶-2-基氧基)哌啶-1-基)-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(217)；8-((3r,4s)-4-((4-甲氧基嘧啶-2-基)氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(218)；5-甲基-8-((3r,4s)-3-甲基-4-((5-丙基嘧啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(219)；5-甲基-8-((3r,4s)-3-甲基-4-((2-甲基嘧啶-4-基)氧基)哌啶-1-基)-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(220)；8-((3r,4s)-4-((5-乙基嘧啶-2-基)氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(221)；5-甲基-8-((3r,4s)-3-甲基-4-((5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(222)；8-((3r,4s)-4-((5-环丙基嘧啶-2-基)氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(223)；8-((3r,4s)-4-((5-环丙基吡啶-2-基)氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(224)；5-甲基-8-((3r,4s)-3-甲基-4-((5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(225-227)；( /-)8-((3r,4s)-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(228)；( /-)5-甲基-8-((3r,4r)-3-甲基-4-(4-(叔戊基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2,7-二甲腈(229)；5-甲基-8-((3r,4r)-3-甲基-4-(4-(叔戊基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2,7-二甲腈(230)；5-甲基-8-((3r,4r)-3-甲基-4-(4-(叔戊基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2,7-二甲腈(231)；( /-)8-(4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3,3-二甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(232)；8-(4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3,3-二甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(233)；8-(4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3,3-二甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(234)；( /-)5-甲基-8-((3r,4s)-3-甲基-4-((4-(三氟甲氧基)苯甲基)氧基)哌啶-1-基)-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(235)；( /-)5-甲基-8-((3r,4s)-3-甲基-4-((4-(三氟甲氧基)苯甲基)氧基)哌啶-1-基)-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲酰胺(236)；7-氟-5-甲基-6-氧代-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(237)；7-氯-5-甲基-6-氧代-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(238)；7-溴-5-甲基-6-氧代-8-(4-(4-(三氟甲氧
基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(239)；7-(6-甲氧基吡啶-3-基)-5-甲基-6-氧代-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(240)；7-(2-甲氧基吡啶-4-基)-5-甲基-6-氧代-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(241)；( /-)6-溴-1-甲基-4-((3r,4r)-3-甲基-4-(4-(叔戊基)苯氧基)哌啶-1-基)-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-3-甲腈(242)；8-((2s,5s)-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2,5-二甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(243及246)；8-((2r,5r)-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2,5-二甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(244-245)；4-((2r,5s)-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2,5-二甲基哌啶-1-基)-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(248-249)；4-((2s,5r)-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2,5-二甲基哌啶-1-基)-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(247及250)；4-((2r,5s)-2,5-二甲基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(251及253)；4-((2s,5r)-2,5-二甲基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(252及254)；4-((2r,5r)-2,5-二甲基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(256-257)；8-((2s,5s)-2,5-二甲基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(255及258)；(
±
)-反式-8-(3-羟基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(259-260)；(
±
)-反式-8-(3-甲氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(261-262)；8-((3r,4r)-3-乙氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(263-264)；(
±
)-顺式-8-(3-氟-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(265-266)；(
±
)-反式-8-(3-羟基-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(267-268)；(
±
)-反式-8-(4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3-甲氧基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(269-270)；8-((2s,5r)-4-((5-甲氧基吡啶-2-基)氨基)-2,5-二甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(280-281)；n-((2s,5r)-1-(6-氰基-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-4-基)-2,5-二甲基哌啶-4-基)-4-氟-n-甲基苯甲酰胺(282-283)；n-(1-(6-氰基-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-4-基)-3-甲基哌啶-4-基)-4-氟-n-甲基苯甲酰胺(284-287)；n-(1-(3,6-二氰基-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-4-基)-3-甲基哌啶-4-基)-n-甲基-4-(三氟甲基)苯甲酰胺(288-293)；8-((2s,4s,5s)-5-乙基-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(294)；8-((2r,4s,5s)-5-乙基-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(295)；8-((2s,4r,5r)-5-乙基-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(296)；8-((2r,4r,5r)-5-乙基-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(297)；8-((2r,4s,5r)-5-乙基-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(298)；8-((2s,4s,5r)-5-乙基-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈
364)；8-((3s,4s)-3-乙氧基-4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(365-366)；反式-8-(3-乙氧基-4-((5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(367-368)；顺式-8-(3-乙氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(369-370)；顺式-8-(3-乙氧基-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(371-372)；反式-8-4-(苯并[d]噻唑-2-基氧基)-3-乙氧基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(373-374)；8-((3s,4s)-3-乙氧基-4-((6-异丙氧基哒嗪-3-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(375-376)；8-((3s,4s)-3-乙氧基-4-((5-异丙氧基吡嗪-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(377-378)；8-((3s,4s)-3-乙氧基-4-((5-异丙氧基嘧啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(379-380)；8-((3s,4s)-3-乙氧基-4-((3-(三氟甲基)苯甲基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(381-382)；8-((3s,4s)-3-乙氧基-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)甲氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(383-384)；8-((3r,4r)-3-(2-(二甲氨基)乙氧基)-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(385-386)；8-((3r,4r)-3-(环丙基甲氧基)-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(387-388)；8-((3r,4r)-3-(2-甲氧基乙氧基)-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(389-390)；5-甲基-8-((3r,4r)-3-(2-n-吗啉基乙氧基)-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(391-392)；5-甲基-6-氧代-8-((3r,4r)-3-(2,2,2-三氟乙氧基)-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(393-394)；反式-8-(3-异丙氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(395-396)；或反式-8-(4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3-乙氧基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(397-398)。
[0220]
本发明可在不背离其精神或基本特质的情况下以其他特定形式来实施。本发明涵盖本文所提及的本发明方面和/或实施方案的所有组合。应理解，本发明的任何及所有实施方案可结合任何其他一个或多个实施方案来描述额外实施方案。亦应理解，实施方案的各个别要素意欲与来自任何实施方案的任何及所有其他要素组合以描述额外实施方案。
[0221]
定义
[0222]
一般本领域技术人员在阅读以下实施方式后可更容易地理解本发明的特征及优点。应了解，为了清楚起见，在单独实施方案的内容背景中在上文及下文中所描述的本发明的某些特征亦可组合以形成单个实施方案。相反地，为简洁起见，描述于单个实施方案的内容背景中的本发明的各种特征亦可如此组合以形成其子组合。本文中鉴别为例示性或优选的实施方案意欲具说明性而非限制性。
[0223]
除非本文中另外具体说明，否则以单数形式的指代亦可包括复数形式。举例而言，“一(a/an)”可指一个，或一个或多个。
[0224]
如本文所用，词组“化合物和/或其盐”是指至少一种化合物、所述化合物的至少一种盐，或其组合。举例而言，式(i)化合物和/或其盐包括式(i)化合物；两种式(i)化合物；式
(i)化合物的盐；式(i)化合物及式(i)化合物的一种或多种盐；以及式(i)化合物的两种或更多种盐。
[0225]
除非另外指示，否则具有不饱和价数的任何原子假定具有足以使价数饱和的氢原子。
[0226]
本文所阐述的定义优先于以引用的方式并入本文中的任何专利、专利申请案和/或专利申请公开案中所阐述的定义。
[0227]
下文列举用于描述本发明的各种术语的定义。这些定义适用于术语，因为其在整篇说明书中个别地或作为较大群组的一部分使用(除非其在特定情况下以其他方式被限制)。
[0228]
在整篇说明书中，本领域技术人员可以选择基团及其取代基以得到稳定的部分及化合物。
[0229]
根据本领域所使用的惯例，
[0230][0231]
在本文的结构式中用于描绘作为部分或取代基与核心或主链结构的连接点的键。
[0232]
如本文所用，术语“卤基”及“卤素”是指f、cl、br及i。
[0233]
术语“氰基”是指基团-cn。
[0234]
术语“氨基”是指基团-nh2。
[0235]
术语“氧代”是指基团＝o。
[0236]
如本文所用，术语“烷基”是指含有例如1至12个碳原子、1至6个碳原子及1至4个碳原子的分支链及直链饱和脂族烃基。烷基的实施例包括(但不限于)甲基(me)、乙基(et)、丙基(例如正丙基及异丙基)、丁基(例如正丁基、异丁基、二级丁基及叔丁基)及戊基(例如正戊基、异戊基、新戊基)、正己基、2-甲基戊基、2-乙基丁基、3-甲基戊基及4-甲基戊基。当数字以下标形式出现在符号“c”后时，下标以较多特异性定义特定基团可含有的碳原子的数目。举例而言，“c
1-4
烷基”表示具有一至四个碳原子的直链及分支链烷基。
[0237]
如本文所用，术语“氟烷基”意欲包括经一个或多个氟原子取代的分支链与直链饱和脂族烃基。举例而言，“c
1-4
氟烷基”意欲包括经一个或多个氟原子取代的c1、c2、c3及c4烷基。氟烷基的代表性实例包括(但不限于)-cf3及-ch2cf3。
[0238]
术语“羟烷基”包括经一个或多个羟基取代的分支链与直链饱和烷基。举例而言，“羟烷基”包括-ch2oh、-ch2ch2oh及c
1-4
羟烷基。
[0239]
术语“烯基”是指含有2至12个碳原子及至少一个碳碳双键的直链或分支链烃基。例示性此类基团包括乙烯基或烯丙基。举例而言，“c
2-6
烯基”表示具有二至六个碳原子的直链及分支链烯基。
[0240]
术语“炔基”是指含有2至12个碳原子及至少一个碳碳三键的直链或分支链烃基。例示性此类基团包括乙炔基。举例而言，“c
2-6
炔基”表示具有二至六个碳原子的直链及分支链炔基。
[0241]
如本文所用，术语“环烷基”是指通过自饱和环碳原子移除一个氢原子而衍生自非芳族单环或多环烃分子的基团。环烷基的代表性实例包括(但不限于)环丙基、环戊基及环己基。当数字以下标形式出现在符号“c”之后时，下标更具体地定义特定环烷基可含有的碳
原子数目。举例而言，“c
3-6
环烷基”表示具有三至六个碳原子的环烷基。
[0242]
如本文所用，术语“氟环烷基”意欲包括经一个或多个氟原子取代的环烷基。
[0243]
如本文所用，术语“烷氧基”是指经由氧原子与母分子部分连接的烷基，例如甲氧基(-och3)。举例而言，“c
1-3
烷氧基”表示具有一至三个碳原子的烷氧基。
[0244]
术语“氟烷氧基”及
“‑
o(氟烷基)”表示经由氧键(-o-)连接的如上文所定义的氟烷基。举例而言，“c
1-4
氟烷氧基”意欲包括c1、c2、c3及c4氟烷氧基。
[0245]
术语“碳环(carbocyclo)”、“碳环(carbocyclic)”或“碳环基”可互换地使用且指具有至少一个饱和或部分饱和非芳族环的环状基团，其中所有环的所有原子为碳。碳环基环可未经取代或在价态允许时可含有一个或多个取代基。因此，该术语包括非芳族环，诸如环烷基、环烯基及环炔基环。例示性双环碳环基包括茚烷基、茚基、二氢萘基、四氢萘基、六氢萘基、八氢萘基、十氢萘基、双环庚烷基、双环辛烷基及双环壬烷基。
[0246]
如本文所用，术语“芳基”是指通过移除键合于芳环的一个氢而自含有芳环的分子衍生的原子基团。芳基的代表性实例包括(但不限于)苯基及萘基。芳环可未经取代或在价态允许时可含有一个或多个取代基。
[0247]
如本文所用，术语“苯甲基”是指一个氢原子经苯基置换的甲基。苯环可未经取代或在价态允许时可含有一个或多个取代基。
[0248]
术语“杂原子”是指氧(o)、硫(s)及氮(n)。
[0249]
术语“杂环(hetero环)”、“杂环(heterocyclic)”或“杂环基”可互换使用且指具有至少一个饱和或部分饱和非芳族环的环状基团，且其中一个或多个环具有至少一个杂原子(o、s或n)，含该杂原子的环优选具有1至3个独立地选自o、s和/或n的杂原子。含有杂原子的此类基团的环可以含有一或两个氧或硫原子和/或一至四个氮原子，其限制条件为各环中的杂原子总数目为四或更小，且另一限制条件为该环含有至少一个碳原子。氮及硫原子可任选氧化且氮原子可任选季铵化。杂环基可在任一可用氮或碳原子处连接。杂环环可未经取代或在价态允许时可含有一个或多个取代基。
[0250]
例示性单环杂环基包括吡咯烷基、咪唑啉基、噁唑啶基、异噁唑啉基、噻唑啶基、异噻唑啶基、四氢呋喃基、哌啶基、哌嗪基、2-氧代哌嗪基、2-氧代哌啶基、2-氧代吡咯烷基、2-氧代氮杂卓基、氮杂卓基、4-哌啶酮基、四氢吡喃基、吗啉基、噻吗啉基、噻吗啉基亚砜、噻吗啉基砜、1,3-二氧杂环戊烷、四氢-1,1-二氧代噻吩基、二氢异吲哚基及四氢喹啉基。
[0251]
术语“杂芳基”是指在至少一个环中具有至少一个杂原子(o、s或n)的未经取代及经取代芳族基，该含杂原子环优选地具有1、2或3个独立地选自o、s和/或n的杂原子。含有杂原子的杂芳基的各环可含有一或两个氧或硫原子和/或一至四个氮原子，其限制条件为各环中杂原子的总数为四个或更少且各环具有至少一个碳原子。5至14员杂芳基包括5或6元单环杂芳基、9或10元双环杂芳基及11至14元三环杂芳基。包含双环基团及三环杂芳基的稠环为芳族的且可仅含有碳原子。氮及硫原子可任选氧化且氮原子可任选季铵化。双环及三环杂芳基必须仅包括芳环。杂芳基可在任一环的任何可用氮或碳原子处连接。杂芳基环系统可未经取代或可含有一个或多个取代基。
[0252]
例示性单环杂芳基包括吡咯基、吡唑基、吡唑啉基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、噻二唑基、异噻唑基、呋喃基、噻吩基、噁二唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基及三嗪基。
[0253]
例示性双环杂芳基包括吲哚基、苯并噻唑基、苯并间二氧杂环戊烯基、苯并噁唑基、苯并噻吩基、喹啉基、四氢异喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、苯并吡喃基、吲哚嗪基、苯并呋喃基、色酮基、香豆素基、苯并吡喃基、啉基、喹喏啉基、吲唑基及吡咯并吡啶基。
[0254]
例示性三环杂芳基包括吖啶基、苯并喹啉基、苯并异喹啉基及苯并萘啶基。
[0255]
词组“药学上可接受”在本文中用于指在合理医学判断范围内，适用于与人类及动物的组织接触而无过度毒性、刺激、过敏反应或其他问题或并发症，与合理益处/风险比相匹配的那些化合物、材料、组合物和/或剂型。
[0256]
式(i)化合物可以形成亦属于本发明范围内的盐。除非另外指示，否则提及本发明化合物应理解为包括提及其一种或多种盐。术语“盐”表示与无机和/或有机酸及无机和/或有机碱形成的酸性和/或碱性盐。另外，术语“盐”可包括两性离子(内盐)，例如当式(i)化合物含有碱性部分(诸如胺或吡啶或咪唑环)与酸性部分(诸如羧酸)时。药学上可接受的(亦即生理学上可接受的无毒)盐为优选的，诸如可接受的金属及胺盐，其中阳离子不会明显促进盐的毒性或生物活性。然而，其他盐可适用于例如分离或纯化步骤中，其可在制备期间得以采用，且因此涵盖在本发明的范围内。式(i)化合物的盐例如可通过使式(i)化合物与一定量(诸如等量)的酸或碱在介质(诸如使盐沉淀的介质)中或在水性介质中反应，继而冻干来形成。
[0257]
例示性酸加成盐包括乙酸盐(诸如用乙酸或三卤乙酸(例如三氟乙酸)形成的那些盐)、己二酸盐、褐藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、柠檬酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙烷磺酸盐、反丁烯二酸盐、葡糖庚酸盐、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、盐酸盐(用盐酸形成)、氢溴酸盐(用溴化氢形成)、氢碘酸盐、顺丁烯二酸盐(用顺丁烯二酸形成)、2-羟基乙烷磺酸盐、乳酸盐、甲烷磺酸盐(用甲烷磺酸形成)、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、乙二酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯丙酸盐、磷酸盐、苦味酸盐、特戊酸盐、丙酸盐、水杨酸盐、丁二酸盐、硫酸盐(诸如用硫酸形成的那些盐)、磺酸盐(诸如本文中提及的那些盐)、酒石酸盐、硫氰酸盐、甲苯磺酸盐(toluenesulfonate)(诸如甲苯磺酸盐(tosylate))、十一烷酸盐及其类似盐。
[0258]
例示性碱性盐包括铵盐；碱金属盐，诸如钠、锂及钾盐；碱土金属盐，诸如钙及镁盐；钡、锌及铝盐；与有机碱(例如有机胺)形成的盐，有机碱诸如三烷基胺(诸如三乙胺)、普鲁卡因(procaine)、二苯甲基胺、n-苯甲基-β-苯乙胺、1-二苯羟甲胺、n,n'-二苯甲基亚乙基二胺、脱氢松香胺、n-乙基哌啶、苯甲胺、二环己胺，或药学上可接受的类似胺，及与氨基酸(诸如精氨酸、赖氨酸及其类似者)形成的盐。碱性含氮基团可用药剂季铵化，诸如低碳数烷基卤化物(例如甲基、乙基、丙基及丁基氯化物、溴化物及碘化物)、二烷基硫酸盐(例如二甲基、二乙基、二丁基及二戊基硫酸盐)、长链卤化物(例如癸基、月桂基、肉豆蔻基及硬脂基氯化物、溴化物及碘化物)、芳烷基卤化物(例如苯甲基及苯乙基溴化物)及其他药剂。优选盐包括单盐酸盐、硫酸氢盐、甲烷磺酸盐、磷酸盐或硝酸盐。
[0259]
式(i)化合物可以非晶形固体或晶体固体形式提供。可采用冻干，以得到呈固体状的式(i)化合物。
[0260]
应进一步理解，式(i)化合物的溶剂合物(例如水合物)亦在本发明的范围内。术语“溶剂合物”意谓式(i)化合物与一个或多个溶剂分子(无论有机还是无机)的物理性结合。
此物理性结合包括氢键合。在某些情况下，例如当一个或多个溶剂分子并入晶体固体的晶格时，溶剂合物将能够分离。“溶剂合物”涵盖溶液相及可分离溶剂合物两者。例示性溶剂合物包括水合物、乙醇合物、甲醇合物、异丙醇合物、乙腈溶剂合物及乙酸乙酯溶剂合物。溶剂化方法在本领域已知。
[0261]
前药的各种形式为本领域熟知的且描述于rautio,j.等人,nature review drug discovery,17,559-587(2018)中。
[0262]
另外，式(i)化合物在其制备后可经分离及纯化，以得到式(i)化合物含量等于或大于99重量％的组合物(“实质上纯的”)，其接着如本文所描述使用或调配。本文中亦涵盖此类“实质上纯的”式(i)化合物作为本发明的一部分。
[0263]“稳定化合物”及“稳定结构”意指足够稳固能经受自反应混合物分离至适用纯度且调配成有效治疗剂的化合物。本发明意欲体现稳定化合物。
[0264]“治疗有效量”意欲包括有效充当dgkα和/或dgkζ抑制剂或有效治疗或预防病毒感染及增殖性病症(诸如癌症)的单独的本发明化合物的量，或所主张的化合物组合的量，或本发明化合物与其他活性成分组合的量。
[0265]
如本文所用，“治疗(treating/treatment)”涵盖治疗哺乳动物，尤其人类的疾病病况，且其包括：(a)预防哺乳动物出现该疾病病况，尤其在此类哺乳动物倾向于患上该疾病病况但尚未诊断为患有该疾病病况时；(b)抑制该疾病病况，亦即遏制其产生；和/或(c)缓解该疾病病况，亦即使得疾病病况消退。
[0266]
本发明化合物意欲包括存在于本发明化合物中的原子的所有同位素。同位素包括具有相同原子数但质量数不同的那些原子。作为一般实例且非限制性地，氢同位素包括氘(d)及氚(t)。碳同位素包括
13
c及
14
c。本发明的同位素标记化合物一般可通过本领域技术人员已知的常规技术或通过类似于本文所描述的方法，使用经适当同位素标记的试剂代替原来使用的未经标记的试剂来制备。
[0267]
根据式(i)的化合物和/或其药学上可接受的盐可通过适合于欲治疗的病状的任何方式施用，其可取决于位点特异性治疗的需要或欲递送的式(i)化合物的量。
[0268]
本发明内亦涵盖药物组合物类别，该类药物组合物包含式(i)化合物和/或其药学上可接受的盐；及一种或多种药学上可接受的无毒性载剂和/或稀释剂和/或佐剂(在本文中统称为“载剂”材料)及必要时的其他活性成分。式(i)化合物可通过任何适合途径施用，优选以适于此类途径的药物组合物形式且以预期治疗有效的剂量施用。本发明的化合物及组合物可例如以含有药学上可接受的常规载剂、佐剂及媒剂的剂量单位制剂形式，经口、黏膜或非经肠(包括血管内、静脉内、腹膜内、皮下、肌肉内及胸骨内)施用。举例而言，药物载剂可含有甘露糖醇或乳糖与微晶纤维素的混合物。混合物可含有额外组分，诸如润滑剂，例如硬脂酸镁；及崩解剂，诸如交联聚维酮(crospovidone)。可将载剂混合物填入明胶胶囊中或压缩为片剂。药物组合物可以例如口服剂型或输注形式施用。
[0269]
对于经口施用，药物组合物可呈例如片剂、胶囊、液体胶囊、悬浮液或液体形式。药物组合物优选以含有特定量活性成分的剂量单位形式制备。举例而言，药物组合物可以包含约0.1至1000mg，优选约0.25至250mg，且更优选约0.5至100mg范围内的量的活性成分的片剂或胶囊形式提供。用于人类或其他哺乳动物的适合日剂量可能视患者的病状及其他因素而广泛变化，但可使用常规方法判定。
[0270]
本文中涵盖的任何药物组合物均可例如经由任何可接受且适合的口服制剂经口递送。例示性口服制剂包括(但不限于)例如，片剂、糖衣片、口含片、水性及油性悬浮液、可分散散剂或颗粒剂、乳液、硬及软胶囊、液体胶囊、糖浆及酏剂。意欲经口施用的药物组合物可根据本领域已知的任何方法制备以便制造意欲经口施用的药物组合物。为了提供药学上适口的制剂，根据本发明的药物组合物可含有至少一种选自以下的药剂：甜味剂、调味剂、着色剂、缓和剂、抗氧化剂及防腐剂。
[0271]
片剂可例如通过混合至少一种式(i)化合物和/或至少一种其药学上可接受的盐与至少一种药学上可接受的适于制备片剂的无毒赋形剂来制备。例示性赋形剂包括(但不限于)例如惰性稀释剂，诸如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙及磷酸钠；粒化剂及崩解剂，诸如微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、玉米淀粉及褐藻酸；黏合剂，诸如淀粉、明胶、聚乙烯-吡咯烷酮及阿拉伯胶；及润滑剂，诸如硬脂酸镁、硬脂酸及滑石。另外，片剂可为未包覆包衣或通过已知技术包覆包衣以掩蔽口味不佳药物的不良味道，或延迟活性成分在胃肠道中的崩解及吸收，从而使活性成分的作用持续较长时间。例示性水溶性味道掩蔽材料包括(但不限于)羟丙基甲基纤维素及羟丙基纤维素。例示性延迟材料包括(但不限于)乙基纤维素及乙酸丁酸纤维素。
[0272]
硬明胶胶囊可例如通过混合至少一种式(i)化合物和/或其至少一种盐与至少一种惰性固体稀释剂(诸如碳酸钙；磷酸钙；及高岭土)制备。
[0273]
软明胶胶囊可例如通过混合至少一种式(i)化合物和/或至少一种其药学上可接受的盐与至少一种水溶性载剂(诸如聚乙二醇)；及至少一种油介质(诸如花生油、液体石蜡及橄榄油)制备。
[0274]
可例如通过混合至少一种式(i)化合物和/或至少一种其药学上可接受的盐与至少一种适于制备水性悬浮液的赋形剂制备水性悬浮液。适用于制备水性悬浮液的例示性赋形剂包括(但不限于)例如悬浮剂，诸如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟基丙基甲基-纤维素、褐藻酸钠、褐藻酸、聚乙烯-吡咯烷酮、黄蓍胶及阿拉伯胶；分散剂或润湿剂，诸如天然产生的磷脂，例如卵磷脂；环氧烷与脂肪酸的缩合产物，诸如聚氧乙烯硬脂酸酯；环氧乙烷与长链脂族醇的缩合产物，诸如十七亚乙基-氧基十六醇；环氧乙烷与衍生自脂肪酸及己糖醇的偏酯的缩合产物，诸如聚氧乙烯山梨糖醇单油酸酯；及环氧乙烷与衍生自脂肪酸及己糖醇酸酐的偏酯的缩合产物，诸如聚乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯。水性悬浮液亦可含有至少一种防腐剂，诸如对羟基苯甲酸乙酯及对羟基苯甲酸正丙酯；至少一种着色剂；至少一种调味剂；和/或至少一种甜味剂，包括(但不限于)例如蔗糖、糖精及阿斯巴甜(aspartame)。
[0275]
油性悬浮液可例如通过使至少一种式(i)化合物和/或至少一种其药学上可接受的盐悬浮于植物油(诸如花生油；橄榄油；芝麻油；及椰子油)；或矿物油(诸如液体石蜡)中制备。油性悬浮液亦可含有至少一种增稠剂，诸如蜂蜡；硬石蜡；及鲸蜡醇。为了提供适口的油性悬浮液，可向油性悬浮液中添加上文已描述的至少一种甜味剂和/或至少一种调味剂。油性悬浮液可另外含有至少一种防腐剂，包括(但不限于)例如抗氧化剂，诸如丁基化羟基大茴香醚及α-生育酚。
[0276]
可分散散剂及颗粒剂可例如通过混合至少一种式(i)化合物和/或至少一种其药学上可接受的盐与至少一种分散剂和/或润湿剂、至少一种悬浮剂和/或至少一种防腐剂来制备。适合的分散剂、润湿剂及悬浮剂已如上文所描述。例示性防腐剂包括(但不限于)例如
抗氧化剂，例如抗坏血酸。此外，可分散散剂及颗粒剂亦可含有至少一种赋形剂，包括(但不限于)例如甜味剂、调味剂及着色剂。
[0277]
至少一种式(i)化合物和/或其至少一种药学上可接受的盐的乳液可以例如水包油乳液形式制备。包含式(i)化合物的乳液的油相可由已知成分以已知方式构成。油相可由(但不限于)例如以下各者提供：植物油，诸如橄榄油及花生油；矿物油，诸如液体石蜡；及其混合物。虽然该相可仅包含乳化剂，但其亦可包含至少一种乳化剂与脂肪或油或脂肪与油的混合物。适合乳化剂包括(但不限于)例如天然产生的磷脂，例如大豆卵磷脂；衍生自脂肪酸及己糖醇酸酐的酯或偏酯，诸如脱水山梨糖醇单油酸酯；及偏酯与环氧乙烷的缩合产物，诸如聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯。优选地，包括亲水性乳化剂以及充当稳定剂的亲脂性乳化剂。优选亦包括油与脂肪。乳化剂与稳定剂一起或不与稳定剂一起构成所谓的乳化蜡，且蜡与油及脂肪一起构成所谓的乳化软膏基剂，其形成乳膏制剂的油性分散相。乳液亦可含有甜味剂、调味剂、防腐剂和/或抗氧化剂。适合用于本发明制剂中的乳化剂及乳液稳定剂包括例如tween 60、span 80、鲸蜡硬脂醇、肉豆寇醇、单硬脂酸甘油酯、月桂基硫酸钠、单独或含蜡的二硬脂酸甘油酯，或本领域所熟知的其他材料。
[0278]
式(i)化合物和/或至少一种其药学上可接受的盐亦可例如静脉内、皮下和/或肌肉内经由任何药学上可接受且适合的可注射形式递送。示例性可注射形式包括(但不限于)例如包含可接受的媒剂及溶剂的无菌水溶液，所述媒剂及溶剂为诸如水、林格氏溶液(ringer's solution)及等张氯化钠溶液；无菌水包油微乳液；及水性或油性悬浮液。
[0279]
用于非经肠施用的制剂可呈水性或非水性等张无菌注射溶液或悬浮液形式。这些溶液及悬浮液可使用用于口服制剂的所提及载剂或稀释剂中之一或多者或通过使用其他适合的分散剂或润湿剂及悬浮剂、由无菌散剂或颗粒剂制备。化合物可溶解于水、聚乙二醇、丙二醇、乙醇、玉米油、棉籽油、花生油、芝麻油、苯甲醇、氯化钠、黄蓍胶和/或各种缓冲液中。其他佐剂及施用模式为药物技术中众所周知的。活性成分亦可通过以具有适合载剂(包括盐水、右旋糖或水)或具有环糊精(亦即captisol)、共溶剂增溶(亦即丙二醇)或微胞增溶(亦即tween 80)的组合物形式注射来施用。
[0280]
无菌可注射制剂亦可为于无毒非经肠可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液或悬浮液，例如于1,3-丁二醇中的溶液。在可接受的媒剂及溶剂中，可使用的为水、林格氏溶液及等张氯化钠溶液。另外，无菌不挥发性油常规作溶剂或悬浮介质。出于此目的，可采用任何温和非挥发性油，包括合成单甘油酯或二甘油酯。另外，诸如油酸的脂肪酸可用于制备可注射剂。
[0281]
无菌可注射水包油微乳液可例如如下制备：1)使至少一种式(i)化合物溶解于油相，诸如大豆油与卵磷脂的混合物中；2)将含有油相的式(i)与水及甘油混合物组合；及3)处理该组合以形成微乳液。
[0282]
无菌水性或油性悬浮液可根据本领域已知的方法制备。举例而言，无菌水性溶液或悬浮液可用非经肠可接受的无毒稀释剂或溶剂(诸如1,3-丁二醇)制备；且无菌油性悬浮液可用可接受的无菌无毒溶剂或悬浮介质(诸如无菌不挥发性油(例如合成单甘油酯或二甘油酯)及脂肪酸(诸如油酸))制备。
[0283]
可用于本发明的药物组合物中的药学上可接受的载剂、佐剂及媒剂包括(但不限于)离子交换剂；氧化铝；硬脂酸铝；卵磷脂；自乳化药物递送系统(sedds)，诸如d-α-生育酚
聚乙二醇1000丁二酸酯；用于药物剂型中的表面活性剂，诸如吐温、聚乙氧基化蓖麻油(诸如cremophor表面活性剂(basf))或其他类似聚合递送基质；血清蛋白质，诸如人类血清白蛋白；缓冲物质，诸如磷酸盐；甘氨酸；山梨酸；山梨酸钾；饱和植物脂肪酸的偏甘油酯混合物；水；盐或电解液，诸如鱼精蛋白硫酸盐；磷酸氢二钠；磷酸氢钾；氯化钠；锌盐；胶态二氧化硅；三硅酸镁；聚乙烯吡咯烷酮；基于纤维素的物质；聚乙二醇；羧甲基纤维素钠；聚丙烯酸酯；蜡；聚乙烯-聚氧化丙烯-嵌段聚合物；聚乙二醇及羊毛脂。环糊精(诸如α-环糊精、β-环糊精及γ-环糊精)或经化学修饰的衍生物(诸如羟烷基环糊精，包括2-羟丙基-环糊精及3-羟丙基-环糊精)或其他溶解的衍生物亦可有利地用于增强本文所描述式的化合物的递送。
[0284]
本发明的药学活性化合物可根据常规制药方法处理以制造用于施用患者(包括人类及其他哺乳动物)的药剂。药物组合物可进行诸如灭菌的常规药物操作和/或可含有常规佐剂，诸如防腐剂、稳定剂、润湿剂、乳化剂、缓冲剂等。另外，片剂及丸剂可用肠溶衣来制备。此类组合物亦可包含佐剂，诸如润湿剂、甜味剂、调味剂及芳香剂。
[0285]
化合物施用量及用本发明的化合物和/或组合物治疗疾病病状的给药方案视多种因素而定，包括个体的年龄、体重、性别、医学病状；疾病类型；疾病严重程度；给药途径及频率；及所采用的特定化合物。因此，给药方案可广泛变化，但可常规地使用标准方法判定。每公斤体重约0.001至100mg的日剂量可为适当的，优选在每公斤体重约0.0025与约50mg之间且最佳在每公斤体重约0.005至10mg之间。日剂量可以每天一至四次剂量施用。其他给药时程包括每周一次剂量及每两天一次剂量的循环。
[0286]
出于治疗目的，本发明的活性化合物通常与一种或多种适合于指定给药途径的佐剂组合。若经口施用，则可将化合物与乳糖、蔗糖、淀粉粉末、烷酸的纤维素酯、纤维素烷基酯、滑石、硬脂酸、硬脂酸镁、氧化镁、磷酸及硫酸的钠盐及钙盐、明胶、阿拉伯树胶、褐藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮和/或聚乙烯醇混合且接着制片或囊封以方便施用。此类胶囊或片剂可含有控制释放型制剂，其可以活性化合物于羟丙基甲基纤维素中的分散液形式提供。
[0287]
本发明的药物组合物包含至少一种式(i)化合物和/或其药学上可接受的至少一种盐，及任选存在的选自药学上可接受的任何载剂、佐剂及媒剂的另一种药剂。本发明的替代组合物包含本文所描述的式(i)化合物或其前药及药学上可接受的载剂、佐剂或媒剂。
[0288]
效用
[0289]
式(i)化合物可用于治疗癌症。
[0290]
在另一实施方案中，本发明提供一种式(i)化合物和/或其药学上可接受的盐、其立体异构体或其互变异构体与额外治疗剂的组合制剂，其同时、分开或依序用于治疗和/或预防与t细胞中的dgk目标抑制有关的多种疾病或病症。
[0291]
在另一方面中，本发明提供一种治疗罹患或易患与t细胞中的dgk目标抑制有关的医学病状的患者的方法。可治疗多种医学病状。该方法包含向该患者施用治疗有效量的组合物，该组合物包含式(i)化合物和/或其药学上可接受的盐、其立体异构体或其互变异构体。举例而言，本文所描述化合物可以用于治疗或预防病毒感染及增殖性疾病，诸如癌症。
[0292]
式(i)化合物及包含至少一种式(i)化合物的药物组合物可用于治疗或预防与t细胞中的dgk目标抑制有关的任何疾病或病状。这些疾病包括病毒感染及其他感染(例如皮肤感染、gi感染、泌尿道感染、泌尿生殖器感染、全身感染)及增殖性疾病(例如癌症)。式(i)化
合物及包含至少一种式(i)化合物的药物组合物可以施用动物，优选哺乳动物(例如驯养动物、猫、狗、小鼠、大鼠)，且更优选施用人类。任何给药方法可用于向患者递送化合物或药物组合物。在某些实施方案中，式(i)化合物或至少包含式(i)化合物的药物组合物经口施用。在其他实施方案中，式(i)或至少包含式(i)化合物的药物组合物为非经肠施用。
[0293]
式(i)化合物可抑制二酰基甘油激酶α及ξ(diacylglycerol kinase alpha and zeta；dgkα/ζ)的活性。举例而言，式(i)化合物可用于抑制细胞或个体中的dgkα及dgkζ的活性，该个体需要通过施用抑制量的式(i)化合物或其盐来调节dgkα及dgkζ。
[0294]
本发明进一步提供治疗与个体(例如患者)中的dgkα及dgkζ的活性或表达(包括异常活性和/或过度表达)有关的疾病的方法，其通过向需要此类治疗的个体施用治疗有效量或剂量的式(i)化合物或其药物组合物。疾病实例可包括与dgkα及dgkζ酶的表达或活性(诸如过度表达或异常活性)直接或间接有关的任何疾病、病症或病状。dgkα及dgkζ相关疾病亦可包括可通过调节dgkα及dgkζ酶活性来预防、改善或治愈的任何疾病、病症或病状。dgkα及dgkζ相关疾病的实例包括癌症及病毒感染，诸如hiv感染、b型肝炎及c型肝炎。
[0295]
在一个方面中，式(i)化合物依序地在免疫-肿瘤学药剂施用之前施用。在另一方面中，式(i)化合物与免疫-肿瘤学药剂同时施用。在又另一方面中，式(i)化合物依序地在施用免疫-肿瘤学药剂之后施用。
[0296]
在另一方面中，式(i)化合物可以与免疫-肿瘤学药剂共调配。
[0297]
免疫-肿瘤学药剂包括例如小分子药物、抗体或其他生物制剂或小分子。生物免疫-肿瘤学药剂的实例包括(但不限于)癌症疫苗、抗体及细胞因子。在一个方面中，抗体为单克隆抗体。在另一方面中，单克隆抗体为人源化抗体或人类抗体。
[0298]
在一个方面中，免疫-肿瘤学药剂为(i)刺激(包括共刺激)受体的激动剂或(ii)t细胞上的抑制(包括共抑制)信号的拮抗剂，此两者均导致抗原特异性t细胞反应扩大(常称为免疫检查点调节剂)。
[0299]
某些刺激及抑制分子为免疫球蛋白超家族(igsf)成员。与共刺激或共抑制受体结合的膜结合配体的一个重要家族为b7家族，其包括b7-1、b7-2、b7-h1(pd-l1)、b7-dc(pd-l2)、b7-h2(icos-l)、b7-h3、b7-h4、b7-h5(vista)及b7-h6。与共刺激或共抑制受体结合的另一膜结合配体家族为与同源tnf受体家族成员结合的分子的tnf家族，其包括cd40及cd40l、ox-40、ox-40l、cd70、cd27l、cd30、cd30l、4-1bbl、cd137(4-1bb)、trail/apo2-l、trailr1/dr4、trailr2/dr5、trailr3、trailr4、opg、rank、rankl、tweakr/fn14、tweak、baffr、edar、xedar、taci、april、bcma、ltβr、light、dcr3、hvem、vegi/tl1a、tramp/dr3、edar、eda1、xedar、eda2、tnfr1、淋巴毒素α/tnfβ、tnfr2、tnfα、ltβr、淋巴毒素α1β2、fas、fasl、relt、dr6、troy、ngfr。
[0300]
在一个方面中，t细胞反应可通过式(i)化合物与以下中之一或多者的组合来刺激：(i)抑制t细胞活化的蛋白质的拮抗剂(例如免疫检查点抑制剂)，诸如ctla-4、pd-1、pd-l1、pd-l2、lag-3、tim-3、半乳糖凝集素9、ceacam-1、btla、cd69、半乳糖凝集素-1、tigit、cd113、gpr56、vista、2b4、cd48、garp、pd1h、lair1、tim-1及tim-4；及(ii)刺激t细胞活化的蛋白质的激动剂，诸如b7-1、b7-2、cd28、4-1bb(cd137)、4-1bbl、icos、icos-l、ox40、ox40l、gitr、gitrl、cd70、cd27、cd40、dr3及cd28h。
[0301]
可与式(i)化合物组合以治疗癌症的其他药剂包括nk细胞上的抑制受体的拮抗剂
或nk细胞上的活化受体的激动剂。举例而言，式(i)化合物可以与kir拮抗剂(诸如利瑞路单抗(lirilumab))组合。
[0302]
用于组合疗法的又其他药剂包括抑制或耗乏巨噬细胞或单核球的药剂，包括(但不限于)：csf-1r拮抗剂，诸如csf-1r拮抗剂抗体，包括rg7155(wo11/70024、wo11/107553、wo11/131407、wo13/87699、wo13/119716、wo13/132044)或fpa-008(wo11/140249、wo13169264、wo14/036357)。
[0303]
在另一方面中，式(i)化合物可与以下中的中之一或多者一起使用：连接阳性共刺激受体的激动剂；经由抑制受体减弱信号传导的阻断剂；拮抗剂；及全身性增加抗肿瘤t细胞频率的一种或多种药剂；克服肿瘤微环境内的不同免疫抑制途径(例如阻断抑制性受体接合(例如pd-l1/pd-1相互作用)、耗乏或抑制treg(例如使用抗cd25单克隆抗体(例如达利珠单抗(daclizumab))或通过离体抗cd25珠粒耗乏)、抑制代谢酶(诸如ido)，或逆转/阻止t细胞惰能或耗竭的药剂，及在肿瘤位点触发先天免疫活化和/或发炎的药剂。
[0304]
在一个方面中，免疫-肿瘤学药剂为ctla-4拮抗剂，诸如拮抗ctla-4抗体。适合的ctla-4抗体包括例如yervoy(伊匹单抗(ipilimumab))或曲美单抗(tremelimumab)。
[0305]
在另一方面中，免疫-肿瘤学药剂为pd-1拮抗剂，诸如拮抗pd-1抗体。适合的pd-1抗体包括例如opdivo(尼沃单抗(nivolumab))、keytruda(帕博利珠单抗(pembrolizumab))或medi-0680(amp-514；wo2012/145493)。免疫-肿瘤学药剂亦可包括皮立珠单抗(pidilizumab)(ct-011)，尽管其对pd-1结合的特异性已受到质疑。靶向pd-1受体的另一方法为由pd-l2的胞外域(b7-dc)与igg1的fc部分融合而构成的重组蛋白，称作amp-224。
[0306]
在另一方面中，免疫-肿瘤学药剂为pd-l1拮抗剂，诸如拮抗pd-l1抗体。适合的pd-l1抗体包括例如mpdl3280a(rg7446；wo2010/077634)、德瓦鲁单抗(durvalumab)(medi4736)、bms-936559(wo2007/005874)及msb0010718c(wo2013/79174)。
[0307]
在另一方面中，免疫-肿瘤学药剂为lag-3拮抗剂，诸如拮抗lag-3抗体。适合的lag3抗体包括例如bms-986016(wo10/19570、wo14/08218)或imp-731或imp-321(wo08/132601、wo09/44273)。
[0308]
在另一方面中，免疫-肿瘤学药剂为cd137(4-1bb)激动剂，诸如促效cd137抗体。适合的cd137抗体包括例如优瑞路单抗(urelumab)及pf-05082566(wo12/32433)。
[0309]
在另一方面中，免疫-肿瘤学药剂为gitr激动剂，诸如促效gitr抗体。适合的gitr抗体包括例如bms-986153、bms-986156、trx-518(wo06/105021、wo09/009116)及mk-4166(wo11/028683)。
[0310]
在另一方面中，免疫-肿瘤学药剂为ido拮抗剂。适合的ido拮抗剂包括例如incb-024360(wo2006/122150、wo07/75598、wo08/36653、wo08/36642)、因多莫得(indoximod)、bms-986205，或nlg-919(wo09/73620、wo09/1156652、wo11/56652、wo12/142237)。
[0311]
在另一方面中，免疫-肿瘤学药剂为ox40激动剂，诸如促效ox40抗体。适合的ox40抗体包括例如medi-6383或medi-6469。
[0312]
在另一方面中，免疫-肿瘤学药剂为ox40l拮抗剂，诸如拮抗ox40抗体。适合的ox40l拮抗剂包括例如rg-7888(wo06/029879)。
[0313]
在另一方面中，免疫-肿瘤学药剂为cd40激动剂，诸如促效cd40抗体。在又另一实施方案中，免疫-肿瘤学药剂为cd40拮抗剂，诸如拮抗cd40抗体。适合的cd40抗体包括例如
鲁卡木单抗(lucatumumab)或达西珠单抗(dacetuzumab)。
[0314]
在另一方面中，免疫-肿瘤学药剂为cd27激动剂，诸如促效cd27抗体。适合的cd27抗体包括例如瓦里木单抗(varlilumab)。
[0315]
在另一方面中，免疫-肿瘤学药剂为mga271(针对b7h3)(wo11/109400)。
[0316]
组合疗法意欲包括依序施用这些治疗剂，亦即其中各治疗剂在不同时间施用，以及这些治疗剂或至少两种治疗剂实质上同时施用。实质上同时施用可例如通过向个体施用具有固定比率的各治疗剂的单一剂型或针对各治疗剂的多种单一剂型来达成。依序或实质上同时施用各治疗剂可通过任何适当途径实现，包括(但不限于)经口途径、静脉内途径、肌肉内途径，及经由黏膜组织直接吸收。治疗剂可通过相同途径或通过不同途径施用。举例而言，选定组合中的第一治疗剂可通过静脉内注射施用，而组合中的其他治疗剂可经口施用。替代地，例如，所有治疗剂可经口施用或所有治疗剂可通过静脉内注射施用。组合疗法亦可涵盖如上文所描述的治疗剂另外与其他生物活性成分及非药物疗法(例如手术或辐射治疗)组合施用。在组合疗法进一步包含非药物治疗的情况下，非药物治疗可在任何适合的时间进行，只要治疗剂与非药物治疗的组合的共同作用达成有益效果即可。举例而言，在适当情况下，当非药物治疗暂时自治疗剂施用中移除(可能隔数天或甚至数周)时，仍达成有益效果。
[0317]
如本文所用，术语“细胞”意指体外、离体或体内的细胞。在一些实施方案中，离体细胞可为自生物体(诸如哺乳动物)切除的组织样本的一部分。在一些实施方案中，体外细胞可为细胞培养物中的细胞。在一些实施方案中，体内细胞系存活于生物体(诸如哺乳动物)中的细胞。
[0318]
如本文所用，术语“接触”是指使指定部分汇集于体外系统或体内系统中。举例而言，dgkα及dgkζ酶与式(i)化合物“接触”包括将本发明化合物施用至具有dgkα及dgkζ的个体或患者，诸如人类，以及例如将式(i)化合物引入包含含有dgkα及dgkζ酶的细胞或纯化制剂的样本中。
[0319]
术语“dgkα及dgkζ抑制剂”是指能够抑制t细胞中的二酰基甘油激酶α和/或二酰基甘油激酶ξ(dgkα及dgkζ)的活性、从而引起t细胞刺激的药剂。dgkα及dgkζ抑制剂可为可逆或不可逆的dgkα及dgkζ抑制剂。“可逆的dgkα及dgkζ抑制剂”为在催化位点或在非催化位点处可逆地抑制dgkα及dgkζ酶活性的化合物，且“不可逆的dgkα及dgkζ抑制剂”为通过与酶形成共价键而不可逆地破坏dgkα及dgkζ酶活性的化合物。
[0320]
可用式(i)化合物治疗的癌症类型包括(但不限于)脑癌、皮肤癌、膀胱癌、卵巢癌、乳腺癌、胃癌、胰腺癌、前列腺癌、结肠癌、血液癌、肺癌及骨癌。此类癌症类型的实例包括神经母细胞瘤、肠癌(诸如直肠癌、结肠癌、家族性腺瘤多发性息肉癌及遗传性非多发性息肉大肠直肠癌)、食道癌、唇癌、喉癌、下咽癌、舌癌、唾液腺癌、胃癌、腺癌、髓质甲状腺癌、乳头状甲状腺癌、肾癌、肾实质癌、卵巢癌、子宫颈癌、子宫体癌、子宫内膜癌、绒毛膜癌、胰腺癌、前列腺癌、睪丸癌、乳腺癌、泌尿癌、黑色素瘤、脑瘤(诸如神经胶母细胞瘤、星形细胞瘤、脑膜瘤、神经管胚细胞瘤及周边神经外胚层肿瘤)、霍奇金氏淋巴瘤(hodgkin lymphoma)、非霍奇金氏淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、急性淋巴性白血病(all)、慢性淋巴性白血病(cll)、急性骨髓性白血病(aml)、慢性骨髓性白血病(cml)、成人t细胞白血病淋巴瘤、弥漫性大b细胞淋巴瘤(dlbcl)、肝细胞癌、胆囊癌、支气管癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、多发性骨髓瘤、基
底癌、畸胎瘤、视网膜母细胞瘤、脉络膜黑色素瘤、精原细胞瘤、横纹肌肉瘤、颅咽管瘤、骨肉瘤、软骨肉瘤、肌肉瘤、脂肪肉瘤、纤维肉瘤、尤文氏肉瘤(ewing sarcoma)及浆细胞瘤。
[0321]
一种或多种额外药物剂或治疗方法，诸如抗病毒剂、化学治疗剂或其他抗癌剂、免疫增强剂、免疫抑制剂、辐射、抗肿瘤及抗病毒疫苗、细胞因子疗法(例如il2及gm-csf)和/或酪氨酸激酶抑制剂，可以任选与式(i)化合物组合使用以治疗dgkα及dgkζ相关疾病、病症或病状。所述药剂可以与本发明化合物合并成单一剂型，或所述药剂可作为各别剂型同时或依序施用。
[0322]
适合的化学治疗剂或其他抗癌剂包括例如烷基化剂(包括(但不限于)氮芥(nitrogen mustard)、乙烯亚胺衍生物、磺酸烷基酯、亚硝基脲及三氮烯)，诸如尿嘧啶氮芥、氮芥(chlormethine)、环磷酰胺异环磷酰胺、美法仑(melphalan)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、哌泊溴烷(pipobroman)、三亚乙基-三聚氰胺、三亚乙基硫代磷胺、白消安(busulfan)、卡莫司汀(carmustine)、洛莫司汀(lomustine)、链脲霉素(streptozocin)、达喀尔巴嗪(dacarbazine)及替莫唑胺(temozolomide)。
[0323]
治疗黑色素瘤时，适合与式(i)化合物组合使用的药剂包括：达喀尔巴嗪(dtic)，任选与其他化学疗法药物(诸如卡莫司汀(bcnu)及顺铂(cisplatin))一起；“达特茅斯疗法(dartmouth regimen)”，其由dtic、bcnu、顺铂及他莫昔芬(tamoxifen)组成；顺铂、长春碱(vinblastine)及dtic、替莫唑胺或yervoy
tm
的组合。式(i)化合物亦可与免疫疗法药物(包括细胞因子，诸如干扰素α、介白素2及肿瘤坏死因子(tnf))组合，以用于治疗黑色素瘤。
[0324]
式(i)化合物亦可与疫苗疗法组合使用，以治疗黑色素瘤。抗黑色素瘤疫苗在一些方面类似于用于预防由病毒引起的疾病(诸如脊髓灰质炎、麻疹及腮腺炎)的抗病毒疫苗。可将弱化的黑色素瘤细胞或称为抗原的黑色素瘤细胞的一部分注射至患者中以刺激身体免疫系统来破坏黑色素瘤细胞。
[0325]
局限于臂或腿的黑色素瘤亦可使用高温隔离肢体灌注技术、用包括一种或多种式(i)化合物的药剂组合来治疗。此治疗方案使所涉及肢体的循环与身体其余部分暂时隔离，且向供给该肢体的动脉中注射高剂量的化学疗法，因此在不使内脏暴露于这些剂量(否则其可能引起严重副作用)的情况下向肿瘤区域提供高剂量。通常，将流体升温至38.9℃至40℃。美法仑为最常用于此化学疗法程序中的药物。其可与称为肿瘤坏死因子(tnf)的另一种药剂一起给与。
[0326]
适合的化学治疗剂或其他抗癌剂包括例如抗代谢物(包括(但不限于)叶酸拮抗剂、嘧啶类似物、嘌呤类似物及腺苷脱胺酶抑制剂)，诸如甲胺喋呤(methotrexate)、5-氟尿嘧啶、氟尿苷(floxuridine)、阿糖胞苷(cytarabine)、6-巯基嘌呤、6-硫代鸟嘌呤、磷酸氟达拉滨(fludarabine phosphate)、喷司他丁(pentostatine)及吉西他滨(gemcitabine)。
[0327]
适合的化学治疗剂或其他抗癌剂进一步包括例如某些天然产物及其衍生物(例如长春花生物碱(vinca alkaloid)、抗肿瘤抗生素、酶、淋巴因子及表鬼臼毒素(epipodophyllotoxin))，诸如长春碱、长春新碱(vincristine)、长春地辛(vindesine)、博莱霉素(bleomycin)、放线菌素d(dactinomycin)、道诺霉素(daunorubicin)、小红莓(doxorubicin)、表柔比星(epirubicin)、伊达比星(idarubicin)、阿糖胞苷(ara-c)、太平洋紫杉醇(paclitaxel)(taxol)、光神霉素(mithramycin)、脱氧柯福霉素(deoxycoformycin)、丝裂霉素-c(mitomycin-c)、l-天冬酰胺酶、干扰素(尤其ifn-a)、依托
泊苷(etoposide)及替尼泊苷(teniposide)。
[0328]
其他细胞毒性剂包括诺维本(navelbene)、cpt-11、阿那曲唑(anastrazole)、来曲唑(letrazole)、卡培他滨(capecitabine)、瑞洛萨芬(reloxafine)及着洛萨芬(droloxafine)。
[0329]
亦适合的为细胞毒性剂，诸如表叶毒素；抗瘤形成酶；拓朴异构酶抑制剂；丙卡巴肼(procarbazine)；米托蒽醌(mitoxantrone)；铂配位复合物，诸如顺铂及卡铂(carboplatin)；生物学反应调节剂；生长抑制剂；抗激素治疗剂；甲酰四氢叶酸(leucovorin)；喃氟啶(tegafur)；及造血生长因子。
[0330]
其他抗癌剂包括抗体治疗剂，诸如曲妥珠单抗(trastuzumab)针对共刺激分子(诸如ctla-4、4-1bb及pd-1)的抗体或针对细胞因子(il-1o或tgf-β)的抗体。
[0331]
其他抗癌剂亦包括阻断免疫细胞迁移的那些抗癌剂，诸如针对趋化因子受体(包括ccr2及ccr4)的拮抗剂。
[0332]
其他抗癌剂亦包括增强免疫系统的那些抗癌剂，诸如佐剂或接受性t细胞转移。
[0333]
抗癌疫苗包括树突状细胞、合成肽、dna疫苗以及重组病毒。
[0334]
本发明的药物组合物可任选包括至少一种信号转导抑制剂(sti)。“信号转导抑制剂”为选择性抑制癌细胞正常功能中的信号传导路径中的一个或多个重要步骤，由此引起细胞凋亡的药剂。适合的sti包括(但不限于)：(i)bcr/abl激酶抑制剂，诸如sti 571(ii)表皮生长因子(egf)受体抑制剂，诸如激酶抑制剂(ssi-774)及抗体(imclone：c225[goldstein等人,clin.cancer res.,1:1311-1318(1995)]及abgenix：abx-egf)；(iii)her-2/neu受体抑制剂，诸如法呢基转移酶抑制剂(fti)，诸如l-744,832(kohl等人,nat.med.,1(8):792-797(1995))；(iv)akt家族激酶或akt路径的抑制剂，诸如雷帕霉素(rapamycin)(参见例如sekulic等人,cancer res.,60:3504-3513(2000))；(v)细胞周期激酶抑制剂，诸如夫拉平度(flavopiridol)及ucn-o1(参见例如sausville,curr.med.chem.anti-canc.agents,3:47-56(2003))；及(vi)磷脂酰基肌醇激酶抑制剂，诸如ly294002(参见例如vlahos等人,j.biol.chem.,269:5241-5248(1994))。替代地，至少一种sti及至少一种式(i)化合物可以在单独的药物组合物中。在本发明之一具体实施方案中，至少一种式(i)化合物及至少一种sti可以同时或依序施用至患者。换言之，首先可以施用至少一种式(i)化合物，首先可以施用至少一种sti，或至少一种式(i)化合物与至少一种sti可以同时施用。另外，当使用超过一种式(i)化合物和/或sti时，可以任何次序施用所述化合物。
[0335]
本发明进一步提供用于治疗患者的慢性病毒感染的药物组合物，其在药学上可接受的载剂中包含至少一种式(i)化合物、任选存在的至少一种化学治疗药物及任选存在的至少一种抗病毒剂。
[0336]
亦提供一种用于治疗患者的慢性病毒感染的方法，其通过施用有效量的上述药物组合物来进行。
[0337]
在本发明之一具体实施方案中，至少一种式(i)化合物与至少一种化学治疗剂同时或依序施用至患者。换言之，可首先施用至少一种式(i)化合物，可首先施用至少一种化
学治疗剂，或可同时施用至少一种式(i)化合物及至少一种sti。另外，当使用超过一种式(i)化合物和/或化学治疗剂时，所述化合物可以任何次序施用。类似地，任何抗病毒剂或sti亦可在相较于施用式(i)化合物的任何时点施用。
[0338]
可以使用本发明组合疗法治疗的慢性病毒感染包括(但不限于)由以下引起的疾病：c型肝炎病毒(hcv)、人类乳头状瘤病毒(hpv)、细胞巨大病毒(cmv)、单纯性疱疹病毒(hsv)、埃-巴二氏病毒(epstein-barr virus，ebv)、水痘带状疱疹病毒、科沙奇氏病毒(coxsackie virus)、人类免疫缺乏病毒(hiv)。值得注意的是，寄生虫感染(例如疟疾)亦可通过上文方法来治疗，其中任选添加已知治疗寄生虫病状的化合物来代替抗病毒剂。
[0339]
预期与式(i)化合物组合使用的适合抗病毒剂可以包含核苷及核苷酸逆转录酶抑制剂(nrti)、非核苷逆转录酶抑制剂(nnrti)、蛋白酶抑制剂以及其他抗病毒药。
[0340]
适合的nrti的实施例包括齐多夫定(zidovudine)(azt)；地达诺新(didanosine)(ddl)；扎西他滨(zalcitabine)(ddc)；司他夫定(stavudine)(d4t)；拉米夫定(lamivudine)(3tc)；阿巴卡韦(abacavir)(1592u89)；阿丹弗酯(adefovir dipivoxil)[双(pom)-pmea]；洛布卡韦(lobucavir)；bch-i0652；艾米特宾(emitricitabine)[(-)-ftc]；β-l-fd4(也称为β-l-d4c且命名为β-l-2',3'-双脱氧-5-氟-胞嘧啶核苷)；dapd((-)-β-d-2,6-二氨基-嘌呤二氧杂环戊烷)；及洛德诺新(lodenosine)(fdda)。典型的适合nnrti包括奈韦拉平(nevirapine)(bi-rg-587)；地拉韦啶(delaviradine)(bhap、u-90152)；依法韦仑(efavirenz)(dmp-266)；pnu-142721；ag-1549；mkc-442(1-(乙氧基-甲基)-5-(1-甲基乙基)-6-(苯基甲基)-(2,4(1h,3h)-嘧啶二酮)；以及( )-四环香豆素a(calanolide a)(nsc-675451)及四环香豆素b。典型的适合蛋白酶抑制剂包括沙奎那韦(saquinavir)(ro 31-8959)；利托那韦(ritonavir)(abt-538)；茚地那韦(indinavir)(mk-639)；奈非那韦(nelfnavir)(ag-1343)；安普那韦(amprenavir)(141w94)；拉西那韦(lasinavir)；dmp-450；bms-2322623；abt-378；及ag-1549。其他抗病毒剂包括羟基脲、利巴韦林(ribavirin)、il-2、il-12、潘它夫西地(pentafuside)及yissum项目第11607号。
[0341]
本发明亦包括适用于例如治疗或预防dgkα及dgkζ相关疾病或病症及本文所提及的其他疾病的药物试剂盒，其包括一个或多个容器，该一个或多个容器含有包含治疗有效量的式(i)化合物的药物组合物。如对本领域技术人员显而易见的是，必要时，此类试剂盒可进一步包括多种常规药物试剂盒组件中之一或多者，诸如具有一种或多种药学上可接受的载剂的容器、额外容器。试剂盒中亦可包括呈插页或呈标签形式的说明书，其指示所施用组分的量、给药指南和/或用于混合组分的指南。
[0342]
组合疗法意欲包括依序施用这些治疗剂，亦即其中各治疗剂在不同时间施用，以及这些治疗剂或至少两种治疗剂实质上同时施用。实质上同时施用可例如通过向个体施用具有固定比率的各治疗剂的单一剂型或针对各治疗剂的多种单一剂型来达成。依序或实质上同时施用各治疗剂可通过任何适当途径实现，包括(但不限于)经口途径、静脉内途径、肌肉内途径，及经由黏膜组织直接吸收。治疗剂可通过相同途径或通过不同途径施用。举例而言，选定组合中的第一治疗剂可通过静脉内注射施用，而组合中的其他治疗剂可经口施用。替代地，例如，所有治疗剂可经口施用或所有治疗剂可通过静脉内注射施用。组合疗法亦可涵盖如上文所描述的治疗剂与其他生物活性成分及非药物疗法(例如手术或辐射治疗)进一步组合施用。在组合疗法进一步包含非药物治疗的情况下，非药物治疗可在任何适合的
时间进行，只要治疗剂与非药物治疗的组合的共同作用达成有益效果即可。举例而言，在适当情况下，当非药物治疗暂时自治疗剂施用中移除(可能隔数天或甚至数周)时，仍达成有益效果。
[0343]
本发明亦提供药学上可接受的组合物，其包含与一种或多种药学上可接受的载剂(添加剂)和/或稀释剂一起调配的治疗有效量的一种或多种式(i)化合物且任选包含一种或多种上文所描述的额外治疗剂。
[0344]
本发明化合物可通过任何适合手段施用，以用于本文所描述的任何用途，例如经口，诸如片剂、胶囊(其各自包括持续释放或定时释放制剂)、丸剂、散剂、颗颗粒剂、酏剂、酊剂、悬浮液(包括纳米悬浮液、微米悬浮液、喷雾干燥分散液)、糖浆及乳液；舌下；经颊；非经肠，诸如通过皮下、静脉内、肌肉内或胸骨内注射，或输注技术(例如作为无菌可注射水溶液或非水溶液或悬浮液)；鼻，包括施用鼻膜，诸如通过吸入喷雾；体表，诸如以乳霜或软膏形式；或直肠，诸如以栓剂形式。其可单独施用，但一般将与基于所选给药途径及标准药物实践而选择的药物载剂一起施用。
[0345]
如本文所用，词组“药学上可接受的载剂”意谓涉及将本发明化合物自身体的一个器官或部分载运或传输至身体的另一器官或部分的药学上可接受的材料、组合物或媒剂，诸如液体或固体填充剂、稀释剂、赋形剂、制造助剂(例如润滑剂、滑石、硬脂酸镁、硬脂酸钙或硬脂酸锌，或硬脂酸)，或溶剂囊封材料。各种载剂就与制剂中的其他成分兼容而言必须为“可接受的”，包括亦即佐剂、赋形剂或媒剂，诸如稀释剂、防腐剂、填充剂、流动调节剂、崩解剂、润湿剂、乳化剂、悬浮剂、甜味剂、调味剂、芳香剂、抗细菌剂、抗真菌剂、润滑剂及分散剂，此视给药模式及剂型的性质而定；且对患者无害。
[0346]
术语“药物组合物”意谓包含本发明化合物与至少一种额外药学上可接受的载剂组合的组合物。
[0347]
药学上可接受的载剂根据一般本领域技术人员见识内的许多因素来调配。这些包括(但不限于)：所调配的活性剂的类型及性质；含有药剂的组合物所施用的个体；组合物的预期施用途径；以及所靶向的治疗适应症。药学上可接受的载剂包括水性及非水性液体介质，以及各种固体及半固体剂型。此类载剂可包括除活性剂之外的许多不同成分及添加剂，此类额外成分出于一般本领域技术人员熟知的多种原因包括于制剂中，例如稳定活性剂、黏合剂等。药学上可接受的适合载剂的描述及涉及其选择的因素可见于多种容易获得的来源中，诸如allen,l.v.jr.等人remington:the science and practice of pharmacy(第2卷),第22版(2012),pharmaceutical press。
[0348]
本发明化合物的给药方案当然将视已知因素而变化，诸如特定药剂的药力学特征及其给药模式及途径；接受者的物种、年龄、性别、健康状况、医学条件及体重；症状的性质及程度；同时发生的治疗的种类；治疗频率；给药途径、患者的肾功能及肝功能以及所需效果。
[0349]
借助于一般导引，各活性成分在用于指定效果时的每日口服剂量将在每天约0.001至约5000mg之间，优选每天约0.01至约1000mg之间，且最佳每天约0.1至约250mg之间的范围内。静脉内施用时，在恒定速率输注期间最佳剂量将在每分钟约0.01至约10mg/kg的范围内。本发明化合物可以单次日剂量形式施用，或每日总剂量可分成每日两次、三次或四次分次剂量施用。
[0350]
化合物通常以与针对预期给药形式(例如口服片剂、胶囊、酏剂及糖浆)适当选择且与常规药物实践相符的适合药物稀释剂、赋形剂或载剂(在本文中统称为药物载剂)的混杂物形式施用。
[0351]
适合于施用的剂型(药物组合物)可含有每剂量单位约1毫克至约2000毫克的活性成分。在这些药物组合物中，按组合物的总重量计，活性成分通常以约0.1-95重量％的量存在。
[0352]
用于经口施用的典型胶囊含有至少一种本发明化合物(250mg)、乳糖(75mg)及硬脂酸镁(15mg)。使混合物穿过60目筛且装入l号明胶胶囊中。
[0353]
通过将本发明化合物中的至少一者(250mg)无菌置入小瓶中，无菌冷冻-干燥及密封来制造典型可注射制剂。对于使用，将小瓶的内含物与2ml生理食盐水混合以产生可注射制剂。
[0354]
本发明范围内包括药物组合物，其包含治疗有效量的本发明化合物中的至少一者(单独或与药物载剂组合)作为活性成分。任选地本发明化合物可单独使用，与本发明其他化合物组合使用或与一种或多种其他治疗剂(例如抗癌剂或其他药物活性材料)组合使用。
[0355]
不论所选施用途径如何，通过本领域技术人员已知的常规方法，将可以适合水合形式使用的本发明化合物和/或本发明的药物组合物调配成药学上可接受的剂型。
[0356]
可改变本发明药物组合物中的活性成分的实际剂量水平以便获得一定量的活性成分，该量的活性成分对于特定患者、组合物及给药模式有效地达成治疗反应，而对患者无毒。
[0357]
所选剂量水平将视多种因素而定，包括所用的特定本发明化合物或其酯、盐或酰胺的活性、施用途径、施用时间、所用特定化合物的排泄或代谢速率、吸收速率及程度、治疗持续时间、与所用特定化合物组合使用的其他药物、化合物和/或材料、所治疗的患者的年龄、性别、体重、病状、一般健康及先前病史及医学技术中熟知的类似因素。
[0358]
具有本领域普通技术知识的医师或兽医可容易判定及开具所需药物组合物的有效量。举例而言，医师或兽医开始可以低于为达成所要治疗作用所需的水平给与药物组合物中所用的本发明化合物，且逐渐增加剂量直至达成该效果。
[0359]
一般而言，本发明化合物的适合日剂量是有效产生治疗作用的最低剂量的化合物量。此有效剂量将一般视上述因素而定。一般而言，本发明化合物用于患者的口服、静脉内、脑室内及皮下剂量在每公斤体重每日约0.01mg至约50mg范围内。
[0360]
必要时，活性化合物的有效日剂量可以两次、三次、四次、五次、六次或更多次子剂量施用，所述子剂量任选以单位剂型在一天内以适当时间间隔单独施用。在本发明的某些方面中，给药为每天给药一次。
[0361]
虽然本发明化合物可能单独施用，但该化合物优选以药物制剂(组合物)形式施用。
[0362]
当与本发明化合物组合使用时，上述其他治疗剂可例如以physicians'desk reference(pdr)中所指示或如一般本领域技术人员以其他方式测定的那些量使用。在本发明的方法中，此类其他治疗剂可在本发明化合物施用之前、同时或之后施用。
[0363]
制备方法
[0364]
本发明化合物可通过有机化学领域技术人员可利用的多种方法合成。下文描述用
于制备本发明化合物的通用合成流程。这些流程具说明性且不意欲限制本领域技术人员可用于制备本文所公开的化合物的可能技术。制备本发明化合物的不同方法对于本领域技术人员是显而易见的。下文所描述的实施例章节中提供通过通用流程所描述方法制备的本发明化合物的实施例。纯手性实例的制备可通过本领域技术人员已知的技术来进行。举例而言，纯手性化合物可通过手性相制备型hplc分离外消旋产物或非对映异构体来制备。替代地，实施例化合物可通过已知得到对映异构性或非对映异构性富集产物的方法制备。
[0365]
此章节中描述的反应及技术在适于所用试剂及材料的溶剂中进行且适合于所进行的转化。另外，在下文指定的合成方法的说明中，应了解所提出的所有反应条件(包括溶剂选择、反应氛围、反应温度、实验持续时间及处理程序)均选择本领域技术人员应容易识别的该反应的标准条件。有机合成领域技术人员应了解，分子的各个部分上所存在的官能性须与所提出的试剂及反应相容。对与反应条件兼容的取代基的此类限制为本领域技术人员显而易见的，当存在不兼容取代基时需要替代方案。有时需要作出判断以修改合成步骤次序或选择一种特定方法流程而非另一种，从而获得本发明化合物。亦认识到，在本领域中，任何合成途径的规划中的另一主要考虑因素为审慎选择用于保护本发明所描述化合物中存在的反应性官能基的保护基。向经培训的从业者描述许多替代方案的权威性说明为wuts及greene,greene's protective groups in organic synthesis,第四版,wiley and sons(2007)。
[0366]
在其他实施方案中，本发明的中间体及实施例可使用本领域已知的立体选择性方法制备，所述方法的实施例显示于以下流程中。
[0367]
流程1
[0368][0369]
可使所描绘类型的手性噁唑烷酮的两种对映体与酰氯在低温下反应，得到n-酰基
衍生物。这些可转化成相关硼烯醇化物且与2-(2-烷基-1,3-二氧杂环戊-2-基)乙醛缩合，得到具有已知立体化学的4-苯甲基-3-(2-烷基-3-羟基-4-(2-烷基-1,3-二氧杂环戊-2-基)丁酰基)噁唑烷酮。使用例如含氯化铁的丙酮对产物二氧杂环戊烷进行去保护，可得到1-(4-苯甲基-2-氧代噁唑啶-3-基)-2-烷基-3-羟烷基-1,5-二酮。之后使用苯甲胺对例如三乙酰氧基硼氢化钠进行还原胺化，可得到4-苯甲基-3-(5-(苯甲基氨基)-2-烷基-3-羟基烷酰基)噁唑烷酮的非对映异构混合物。所得胺可通过在微波条件下在meoh中加热而分子内环化，得到可色谱分离的1-苯甲基-3-烷基-4-羟基-6-烷基哌啶-2-酮。之后用例如硼烷或lah对产物哌啶酮进行还原，可得到n-苯甲基-2-烷基-4-羟基-5-烷基哌啶。在氢解条件下在二碳酸二-叔丁酯存在下移除苯甲基部分，可允许得到4-羟基-2,5-二烷基哌啶-1-甲酸叔丁酯，其为合成本发明的实施例中的适用中间体。在另一步骤中，这些及相关中间体中的4-羟基部分的立体化学可使用标准光延条件(mitsunobu condition)，用对硝基苯甲酸进行逆转，得到酯，通过碱催化水解可自所述酯释放所需醇。用适当功能化的噁唑烷酮及醛，采用这些方法，可得到具有已知立体化学的中间体。利用此类化合物来得到本发明的额外实施方案的实施例显示在概述于以下流程中的方法中。
[0370]
流程2
[0371][0372]
在这些情况下，n-boc保护的2,5-二烷基-4-羟基哌啶可首先在标准条件下去保护，且接着与适合衍生的1-烷基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1h)-酮或1-烷基-1,5-萘啶-2(1h)-酮反应，得到随后可在任一种光延条件下反应的产物醇；或在snar条件下与所选择杂环反
应，得到本发明的实施例。替代地，n-boc保护的2,5-二烷基-4-羟基哌啶可首先在光延条件下与适当功能化的苯酚反应，或在snar条件下与所选择杂环反应，得到上文所描绘的类型的额外中间体。随后与适当功能化的吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1h)-酮或萘啶-2(1h)-酮反应，可得到额外实施例。在一些情况下，可使2,5-二烷基-4-羟基哌啶或其相关醚与4,6-二氯-1-烷基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1h)-酮或4,6-二氯-1-烷基-1,5-萘啶-2(1h)-酮反应，得到相关4-n-哌啶基衍生物，因此促进在双环杂环的6位处引入额外官能性，例如腈基，其为本发明的其他实施方案。
[0373]
实施例
[0374]
以下实施例说明本发明的特定及优选实施方案且不限制本发明的范围。除非另外规定，否则化学缩写及符号以及科学缩写及符号具有其常见及惯用含义。本技术案中的实施例及别处所用的其他缩写如上文所定义。常见中间体一般适用于制备超过一个实施例且依序标识(例如中间体1、中间体2等)且缩写为int.1或i1、int.2或i2等。实施例的化合物通过制备其的实施例及步骤标识(例如“1-a”表示实施例1步骤a)，或仅通过其中化合物为实施例的标题化合物的实施例标识(例如“1”表示实施例1的标题化合物)。在一些情况下，描述中间体或实施例的替代制备。合成领域的化学家常可基于如下一个或多个考虑因素设计可能适宜的替代制备，诸如：较短反应时间、较廉价的起始材料、操作或分离的简易性、改良的产率、能够催化、避免毒性试剂、专用仪器的可用性及减少线性步骤的数目。描述替代制法的意图进一步使得能够制备本发明的实施例。在一些情况下，所概述实施例及权利要求书中的一些官能基可经本领域已知的熟知生物电子等排替代物置换，例如用四唑或磷酸酯部分置换羧酸基团。氘代二甲亚砜中所收集的1h nmr数据在数据处理时使用水抑制。所报导的频谱未对于水抑制效应进行校正。邻近于水抑制频率3.35ppm的质子呈现减弱的信号强度。
[0375]
在实施例中，使用散列楔形键隐含相对立体化学。化合物名称前的“( /-)”标示指示外消旋混合物。“(rel)”标示指示化合物的所有立体化学标示是相对的且非绝对的。在手性中心处使用非散列键隐含未知的相对立体化学。在下文表中，实施例的立体化学显示于“stereo.chem.”标记列中，其中标示“a”表示“非手性”，标示“r”表示外消旋混合物，且标示“h”表示纯手性材料。
[0376]
缩写
[0377]
ac
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
乙酰基
[0378]
anhyd.
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
无水
[0379]
aq.
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
水性
[0380]
bop
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
六氟磷酸苯并三唑-1-基氧基三-(二甲氨基)-鏻
[0381]
bu
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
丁基
[0382]
dcm
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
二氯甲烷
[0383]
dea
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
二乙胺
[0384]
diea或dipea
ꢀꢀꢀ
二异丙基乙胺
[0385]
dmf
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
二甲基甲酰胺
[0386]
dmso
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
二甲亚砜
[0387]
dppf
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁
[0388]
et
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
乙基
[0389]
etoac
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
乙酸乙酯
[0390]
etoh
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
乙醇
[0391]
h，hours或hrs 小时
[0392]
hcl
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
盐酸
[0393]
hplc
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
高压液相色谱
[0394]
lc
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
液相色谱
[0395]
lcms
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
液相色谱质谱法
[0396]mꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
摩尔
[0397]
mm
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
毫摩尔
[0398]
me
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
甲基
[0399]
meoh
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
甲醇
[0400]
mesyl-cl
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
甲磺酰氯
[0401]
mhz
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
百万赫兹
[0402]
mins
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
分钟
[0403]m 1
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
(m h)

[0404]
ms
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
质谱法
[0405]
n或n
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
正(常)
[0406]
nh4oac
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
乙酸铵
[0407]
nm
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
纳摩尔
[0408]
nmp
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
n-甲基吡咯烷酮
[0409]
pd2(dba)3ꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
三-(二亚苄基丙酮)二钯
[0410]
pet ether
ꢀꢀꢀꢀꢀ
石油醚
[0411]
ph
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
苯基
[0412]
pocl3ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
氧氯化磷
[0413]
rt或ret time
ꢀꢀ
保留时间
[0414]
sat.
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
饱和
[0415]
tea
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
三乙胺
[0416]
tfa
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
三氟乙酸
[0417]
thf
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
四氢呋喃
[0418]
合成适用于制备本发明的实施例的中间体中可采用的方法显示于以下流程中。
[0419]
所显示类型的苯并噁嗪-2,4(1h)-二酮可用强碱及诸如碘甲烷的甲基化试剂处理，得到1-甲基-2h-苯并[d][1,3]噁嗪-2,4(1h)-二酮。这些可用例如硝基乙酸盐处理，得到1-甲基-3-硝基喹啉-2,4(1h,3h)-二酮。此类化合物转而可转化成相关4-氯衍生物，其可与多种官能化的哌啶反应，得到本发明的实施例。
[0420]
在其他方法中，吡啶甲酸可在标准条件下经酯化且接着用例如乙酸酐处理，得到3-乙酰胺基吡啶甲酸乙酯。这些可在标准条件下经烷基化且随后用过氧化氢与三氟乙酸酐的混合物处理，得到相关n-氧化物，例如2-(乙氧羰基)-3-(n-甲基乙酰胺基)吡啶1-氧化物。在本领域已知的条件下，这些中间体可转化成6-氰基-3-(n-甲基乙酰胺基)吡啶甲酸
酯，用碱处理，其可进行环化，得到1,5-萘啶-2,4(1h,3h)-二酮。此类型的化合物可以复数种方式进行衍生化，得到多种适用中间体。举例而言，在标准硝化条件下处理可产生相关1-甲基-3-硝基-1,5-萘啶-2,4(1h,3h)-二酮，其在标准条件下可转化成4-氯-或4-三氟甲烷磺酸酯中间体，所述中间体可与多种官能化的哌啶反应，得到本发明的额外实施例。替代地，在溴化条件(例如含n-溴丁二酰亚胺的dmf)下处理可产生相关3-溴衍生物，当如上文所描述进行衍生化时其允许在杂环的4位处引入多种哌啶以及在萘啶的3位处进一步衍生化。举例而言，可经由偶合本领域已知的化学物质而在此载体处引入芳族及杂芳族部分。
[0421]
在额外方法中，自相关3-氨基-吡啶甲酸乙酯产生的3-氨基-6-溴吡啶甲酸乙酯可如上文所描述进行处理，得到6-溴-1-甲基-1,5-萘啶-2,4(1h,3h)-二酮，其允许在萘啶杂环的6位处引入多种部分，一个例子为如流程1中所示，在此位置处引入氰基官能基。
[0422]
流程1
[0423][0424]
可用于合成本发明的中间体的额外方法显示于以下流程中。
[0425]
3-氨基-6-溴吡啶甲酸乙酯用2-氰乙酰氯处理可进行环化，得到6-溴-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢-1,5-萘啶-3-甲腈。这些可在n1标准条件下进行烷基化且随后转化成适用于制备其他实施例的相关三氟甲烷磺酸6-溴-3-氰基-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-4-基酯。替代地，依序用pocl3及含hcl的二噁烷处理，得到亦呈适用中间体的4,6-二氯-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-3-甲腈。
[0426]
流程2
[0427][0428]
可适用于在本发明的实施例的6位处引入氰基模体的其他合成方法可能涉及在钯催化条件下用锌及氰化锌对6-溴-3-(2-氰基乙酰胺基)吡啶甲酸乙酯中间体进行处理，得到3-(2-氰基乙酰胺基)-6-氰基吡啶甲酸乙酯。这些可使用如先前所描述的方法进行衍生化，得到4-氯-6-异氰基-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-3-甲腈，其可与多种官能化的哌啶反应，得到多种本发明的实施例。
[0429]
额外适用的中间体可通过使适当官能化的萘啶酮及喹啉酮杂环与不同地官能化的哌啶缩合来制备，如以下流程中所指示。此类中间体可通过使用例如光延或sn
ar
反应，用适当官能化的芳族或杂芳族偶合搭配物进一步加工来转化成本发明的实施例。
[0430]
流程3
[0431][0432]
用于制备适用哌啶中间体及额外实施例的方法显示于以下流程中。
[0433]
流程4
[0434][0435]
在这些情况下，n-保护的顺式-4-羟基-3-烷基哌啶可例如在光延条件下用羧酸处理，得到反式-4-苯甲酰氧基-3-烷基哌啶。随后，这些可进行水解，得到可用于类似于先前论述的方法中的相关反式-4-羟基-3-烷基哌啶，由此随后进行去保护且使中间体反式4-羟基-3-烷基哌啶与适当官能化的萘啶酮或喹啉酮进行缩合，得到反式-4-羟基-3-烷基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶或相关喹啉酮中间体，其可在光延或sn
ar
条件下再次进行反应得到本发明的其他实施例。
[0436]
在其他情况下，可能倾向于制备中间体哌啶醚，该中间体随后可与适当官能化的萘啶酮及喹啉酮反应，得到额外实施例。一些说明性实例显示于以下流程中。在此方法中，所显示类型的n-保护的烷基哌啶-4-酮可通过本领域已知的方法进行还原，得到n-保护的3-烷基哌啶-4-醇。
[0437]
流程5
[0438][0439]
烷基及羟基取代基的相对立体化学可通过多种方法来控制，一些实施例为同时用磷酸及硼氢化钠处理得到占优势地反式-产物，或如所显示的使用含三仲丁基硼氢化锂(l-selectride)的thf得到占优势地顺式-产物。在sn
ar
条件下用强碱及适当官能化的杂环对这些中间体进行进一步处理，可导致合成n-保护的顺式-或反式-3-烷基-4-(杂芳基氧基)哌啶。可使这些去保护的中间体与适当官能化的萘啶酮或喹啉酮反应，得到多种本发明的实施例。
[0440]
中间体1
[0441]
( /-)反式-1-苯甲基-3-甲基哌啶-4-醇
[0442]
[0443]
在-10℃下，向1-苯甲基-3-甲基哌啶-4-酮(7.5g，36.9mmol)于水(50ml)及甲醇(25ml)中的溶液中逐滴添加磷酸(85％，4.25g，36.9mmol)。接着逐份添加硼氢化钠(2.79g，73.8mmol)，且在添加后将所得混合物升温至室温且继续搅拌隔夜。通过添加5m氢氧化钠溶液将溶液的ph调整至～9。所得混合物用乙酸乙酯(3
×
15ml)萃取，且经合并的萃取物用盐水洗涤，经mgso4干燥，过滤且真空浓缩，得到呈黏稠黄色油状的产物(4.65g，22.65mmol，61.4％产率)。lcms(m/z):(m h)

＝206.3,1h nmr(500mhz,氯仿-d)δ7.52-7.12(m,5h),3.71-3.40(m,2h),3.22-3.10(m,1h),2.93-2.86(m,1h),2.85-2.79(m,1h),2.11-1.99(m,1h),1.97-1.87(m,1h),1.76-1.56(m,3h),1.54-1.39(m,1h),1.05-0.86(m,3h)。
[0444]
中间体2
[0445]
( /-)反式-4-羟基-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯
[0446][0447]
对( /-)(反式)-1-苯甲基-3-甲基哌啶-4-醇(2.5g，12.18mmol)及boc-酸酐(3.11ml，13.39mmol)于甲醇(50ml)中的溶液进行脱气，且用氮气(2
×
)冲洗。接下来，添加10％pd-c(1.2g，1.128mmol)，且再次对混合物抽真空且用氮气(2
×
)冲洗，之后抽真空且在1个大气压(气球)下填充氢气。在氢气氛围下剧烈搅拌反应混合物2天。接着，其经由硅藻土过滤，且滤液用甲醇洗涤且将洗涤液与初始滤液合并。真空浓缩经合并的溶液，得到呈黏稠黄色油状的产物(1.71g，7.94mmol，65.2％产率)。lcms：(m/z)(m-tbu acn h)

＝201.2。1h nmr(500mhz,氯仿-d)δ4.10-3.85(m,2h),3.40-3.24(m,1h),2.93-2.71(m,1h),2.62-2.34(m,1h),1.99-1.87(m,1h),1.50-1.46(m,11h),1.57-1.40(m,12h),1.06-0.99(m,3h)。
[0448]
中间体3
[0449]
( /-)5-异丙氧基-2-((反式-3-甲基哌啶-4-基)氧基)吡啶
·
tfa
[0450][0451]
向( /-)反式-4-羟基-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(120mg，0.557mmol)于thf(4ml)中的溶液中，逐滴添加双(三甲基硅基)酰胺钾(1.393ml，1.393mmol)于thf中的1.0m溶液。在室温下搅拌反应混合物30min，接着添加2-氟-5-异丙氧基吡啶(0.100ml，0.836mmol)。接着在60℃下加热反应混合物隔夜。接着，通过添加水来淬灭反应物，且所得混合物用乙酸乙酯萃取。分离有机层，用盐水洗涤，经mgso4干燥，过滤且减压蒸发，得到呈黄色油状的粗产物。通过制备型反相hplc，使用ch3cn-h2o-tfa系统作为洗脱剂，来纯化此材料。合并均质级分(fraction)且减压浓缩。接着，残余材料在室温下用tfa(0.5ml)于dcm(2ml)中的混合物处理3h。接着真空浓缩所得混合物，得到呈棕色油状的产物(40mg，0.110mmol，19.70％产
率)。
[0452]
中间体4
[0453]
( /-)2-((反式-3-乙基哌啶-4-基)氧基)-5-异丙氧基吡啶
[0454][0455]
向( /-)反式-3-乙基-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(100mg，0.436mmol)于thf(2ml)中的溶液中，逐滴添加双(三甲基硅基)酰胺钾(1.090ml，1.090mmol)于thf中的1.0m溶液。在室温下搅拌混合物30min，接着添加含2-氟-5-异丙氧基吡啶(0.078ml，0.654mmol)的thf(1ml)，且在氮气下于60℃下加热反应混合物5小时。将反应混合物冷却至室温，添加水，且所得混合物用乙酸乙酯(3
×
)萃取。合并有机层，用盐水洗涤且接着经mgso4干燥，过滤且减压蒸发，得到呈黏稠黄色油状的粗产物。通过硅胶急骤色谱，使用20％乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂纯化此材料。合并均质级分且真空蒸发，得到呈黏稠无色油状的产物。此物质在室温下直接用含tfa(1ml)的dcm(3ml)处理隔夜。接着，真空浓缩所得混合物，得到呈棕色油状的标题化合物的tfa盐(153mg，0.311mmol，71.3％产率)。lcms：(m/z)265:(m h)

＝265.25。
[0456]
中间体5
[0457]
( /-)5-异丙基-2-((顺式-3-甲基哌啶-4-基)氧基)吡啶
[0458][0459]
向( /-)顺式-4-羟基-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(150mg，0.697mmol)于thf(2ml)中的溶液中，逐份添加氢化钠(60％，于矿物油中)(69.7mg，1.742mmol)。在室温下搅拌反应混合物10min，接着添加含2-氯-5-异丙基吡啶(163mg，1.045mmol)的thf(1ml)。接着在60℃下加热反应混合物隔夜。接着，通过添加水来淬灭反应物，且所得混合物用乙酸乙酯(3
×
)萃取。收集有机层，用盐水洗涤，经mgso4干燥，过滤且减压蒸发，得到黏稠棕色油。通过制备型反相hplc，使用ch3cn-h2o-tfa系统，纯化粗产物。合并均质级分且真空蒸发，且残余物在室温下用含tfa(1ml)的dcm(2ml)处理3h。真空压缩所得溶液，得到呈黄色油状的标题化合物的tfa盐(58.3mg，0.126mmol，18.10％产率)。lcms：(m/z):235.1:(m h)

。
[0460]
中间体6
[0461]
( /-)5-异丙氧基-2-((顺式-3-甲基哌啶-4-基)氧基)吡啶
[0462][0463]
向顺式-及反式-叔丁基-4-羟基-3-甲基哌啶-1-甲酸酯的9:1混合物(120mg，0.557mmol)于thf(4ml)中的溶液中，逐滴添加双(三甲基硅基)酰胺钾(1.393ml，1.393mmol)于thf中的1.0m溶液。在室温下搅拌混合物30min，接着添加2-氟-5-异丙氧基吡啶(0.100ml，0.836mmol)，且在60℃下加热反应混合物隔夜。接着，通过添加水来淬灭反应物，且所得混合物用乙酸乙酯(3
×
)萃取。合并萃取物，用盐水洗涤，经mgso4干燥，过滤且减压蒸发，得到呈黄色油状的粗产物。通过反相制备型hplc，使用ch3cn-h2o-tfa系统，纯化粗产物。合并均质级分，且减压浓缩隔夜。接着，将残余物溶解于二氯甲烷(2ml)中，且添加0.5ml tfa。在室温下搅拌溶液3小时。接着，真空蒸发混合物，得到呈黏稠棕色油状的标题化合物的tfa盐(40mg，0.110mmol，19.70％产率)。lcms：(m/z):(m h)

＝251.3。
[0464]
中间体7
[0465]
( /-)2-((3,3-二甲基哌啶-4-基)氧基)-5-异丙氧基吡啶
[0466][0467]
向4-羟基-3,3-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(80mg，0.349mmol)于thf(2ml)中的溶液中，逐滴添加双(三甲基硅基)酰胺钾(0.872ml，0.872mmol)于thf中的1.0m溶液。在室温下搅拌反应混合物30min，接着添加2-氟-5-异丙氧基吡啶(0.062ml，0.523mmol)。在室温下搅拌反应混合物隔夜，且接着通过添加水来淬灭。所得混合物用乙酸乙酯(3
×
)萃取，且经合并的萃取物用盐水洗涤，经mgso4干燥，过滤且真空蒸发，得到呈棕色油状的粗产物。通过反相制备型hplc，使用ch3cn-h2o-tfa系统，纯化产物。收集均质级分且减压浓缩。接着，将残余物溶解于dcm(3ml)中，且在室温下用tfa(1ml)处理4小时。接着，真空浓缩溶液，得到呈黏稠棕色油状的标题化合物的tfa盐(24mg，0.063mmol，18.18％产率)。(m/z):(m h)

＝251.3。
[0468]
中间体8
[0469]
( /-)5-(二氟甲基)-2-((顺式-3-甲基哌啶-4-基)氧基)吡啶
[0470][0471]
向顺式-4-羟基-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(120mg，0.557mmol)于thf(2ml)中的溶液中，逐滴添加双(三甲基硅基)酰胺钾(1.393ml，1.393mmol)于thf中的1.0m溶液。在室温下搅拌反应混合物30min，接着添加含2-氯-5-(三氟甲基)吡啶(137mg，0.836mmol)的thf(1ml)，且在60℃下加热混合物隔夜。通过添加水来淬灭反应物，且所得混合物用乙酸乙酯萃取。经合并的萃取物用盐水洗涤，经mgso4干燥，过滤且真空浓缩，得到呈黄色油状的粗产物。接着，通过反相制备型hplc，使用ch3cn-h2o-tfa系统，纯化粗产物。合并均质级分且减压浓缩。接着，将残余物溶解于二氯甲烷(1ml)中，且在室温下用tfa(0.5ml)处理3h。接着，真空蒸发混合物，得到呈黏稠棕色油状的标题化合物的tfa盐(160mg，0.340mmol，61.0％产率)。lcms：(m/z):(m h)

＝243.3。
[0472]
中间体9
[0473]
( /-)2-异丙基-6-((顺式-3-甲基哌啶-4-基)氧基)吡啶
[0474][0475]
向( /-)顺式-4-羟基-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(150mg，0.697mmol)于无水thf(2ml)中的溶液中，逐份添加氢化钠(69.7mg，1.742mmol)(60％，于矿物油中)。添加后，在室温下搅拌反应混合物10min，接着添加含2-氯-6-异丙基吡啶(163mg，1.045mmol)的thf(1ml)，且在氮气下在60℃下加热混合物隔夜。接着，通过添加水来淬灭反应物，且所得混合物用乙酸乙酯(3
×
)萃取。合并萃取物，用盐水洗涤，经mgso4干燥，过滤且减压蒸发，得到呈黏稠棕色油状的粗产物。通过制备型反相hplc，使用ch3cn-h2o-tfa系统，纯化产物。合并均质级分且减压浓缩。将残余物溶解于dcm(2ml)中且添加tfa(1ml)，且在室温下搅拌所得混合物3小时，之后真空浓缩，得到呈黄色黏稠油状的标题化合物的tfa盐(53mg，0.115mmol，16.45％产率)。lcms：(m/z):(m h)
.
＝235.1。
[0476]
中间体10
[0477]
( /-)2-((顺式-3-甲基哌啶-4-基)氧基)-5-(三氟甲基)吡啶
[0478][0479]
向( /-)顺式-4-羟基-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(150mg，0.697mmol)于无水thf(2ml)中的溶液中，添加氢化钠(69.7mg，1.742mmol)(60％，于矿物油中)。在室温下搅拌混合物10min，接着添加含2-氯-5-(三氟甲基)吡啶(190mg，1.045mmol)的thf(1ml)，且在60℃下加热反应混合物3h，之后通过添加水来淬灭。接着，使用乙酸乙酯(3
×
)萃取混合物，合并萃取物且用盐水洗涤，经mgso4干燥，过滤且减压蒸发，得到呈黏稠棕色油状的粗产物。使用反相制备型hplc，使用ch3cn-h2o-tfa系统，纯化产物。合并均质级分且真空浓缩。接着，将残余物溶解于二氯甲烷(2ml)中，添加tfa(1ml)，且在室温下搅拌所得混合物3h，之后真空浓缩，得到呈白色固体状的标题化合物的tfa盐(157mg，0.419mmol，60.2％产率)。lcms：(m/z):(m h)

＝260.9。
[0480]
中间体11
[0481]
( /-)4-异丙基-2-((顺式-3-甲基哌啶-4-基)氧基)吡啶
[0482][0483]
向( /-)顺式-4-羟基-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(150mg，0.697mmol)于thf(2ml)中的溶液中，逐滴添加双(三甲基硅基)酰胺钾(1.742ml，1.742mmol)于thf中的1.0m溶液。在室温下搅拌反应混合物30min，接着添加含2-氯-4-异丙基吡啶(163mg，1.045mmol)的thf(1ml)，且在氮气下在60℃下加热所得混合物隔夜。接着通过添加水来淬灭反应物。接着，使用乙酸乙酯(3
×
)萃取混合物，合并萃取物且用盐水洗涤，经mgso4干燥，过滤且减压蒸发，得到呈黏稠棕色油状的粗产物。使用反相制备型hplc，使用ch3cn-h2o-tfa系统，纯化产物。合并均质级分且真空浓缩。接着，将残余物溶解于二氯甲烷(1ml)中，添加tfa(0.5ml)，且在室温下搅拌所得混合物3h，之后真空浓缩，得到呈黏稠黄色油状的标题化合物的tfa盐(42mg，0.091mmol，13.04％产率)。lcms：(m/z):(m h)

＝235.0。
[0484]
中间体12
[0485]
( /-)5-环丙基-2-((顺式-3-甲基哌啶-4-基)氧基)吡啶
[0486][0487]
向( /-)顺式-4-羟基-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(100mg，0.464mmol)于无水thf(2ml)中的溶液中，逐滴添加双(三甲基硅基)酰胺钾(1.161ml，1.161mmol)于thf中的1.0m溶液。在室温下搅拌混合物30min。接下来，接着添加含2-氯-5-环丙基吡啶(107mg，0.697mmol)的thf(1ml)，且在60℃下加热反应混合物隔夜。通过添加水来淬灭反应物。所得混合物用乙酸乙酯(3
×
)萃取，且合并萃取物，用盐水洗涤，经mgso4干燥，过滤且减压蒸发，得到呈黏稠黄色油状的粗产物。使用反相制备型hplc，使用ch3cn-h2o-tfa系统，纯化产物。合并均质级分且真空浓缩。接着，将残余物溶解于二氯甲烷(1ml)中，添加tfa(0.5ml)，且在室温下搅拌所得混合物3h，之后真空浓缩，得到呈黏稠黄色油状的标题化合物的tfa盐(10mg，0.043mmol，9.27％产率)。lcms：(m/z):(m h)

＝232.55。
[0488]
其他相关中间体可通过下文流程中所显示的方法来制备，该流程涉及具有氯-嘧啶的无保护的羟基哌啶的钾烷氧化物盐的反应。
[0489]
中间体13
[0490]
( /-)2-((顺式-3-甲基哌啶-4-基)氧基)嘧啶
[0491][0492]
向( /-)顺式-3-甲基哌啶-4-醇(104mg，0.901mmol)于thf(2ml)中的溶液中添加双(三甲基硅基)酰胺钾(0.901ml，0.901mmol)，且在室温下搅拌混合物30min。氨基醇并不完全溶解于thf中，且始终观测到悬浮液，即使在添加碱后。接着添加2-氯嘧啶(86mg，0.751mmol)于thf(1ml)的溶液，且在60℃下搅拌混合物隔夜。接着，将反应混合物蒸发至干燥，且粗残余物用于随后实验中。lcms：起始b％：0，最终b％：100。梯度时间：3.00min。终止时间：3.50min。流速：1.0ml/min。波长1：220nm。溶剂对：aa s174/s175。溶剂a：a1＝10mm nh4oac/ch3cn:水(5:95)s174。溶剂b：b1＝10mm nh4oac/ch3cn:水(95:5)s175。柱，id：3，名称：3(aa scp 3min)acquity beh c18 1.7μm 2.1
×
50mm。保留时间＝1.213min。(m/z):(m h)

＝194.2。
[0493]
以类似方式，制备以下中间体。
[0494][0495]
表1
[0496]
[0497]
中间体20
[0498]
6-氟-1-甲基-2h-苯并[d][1,3]噁嗪-2,4(1h)-二酮
[0499][0500]
向6-氟-1h-苯并[d][1,3]噁嗪-2,4-二酮(2g，11.04mmol)于dmf(10ml)中的溶液中，逐份添加氢化钠(0.530g，13.25mmol)于矿物油中的60％分散液。在室温下搅拌反应混合物30min，接着逐滴添加碘甲烷(0.829ml，13.25mmol)。在室温下搅拌反应混合物隔夜。通过添加水来淬灭反应物，且分离出黄色固体，通过过滤收集该黄色固体。将固体悬浮于乙酸乙酯中，且过滤所得混合物，且真空浓缩滤液，得到呈黄色固体状的产物(395mg，2.024mmol，18.33％产率)。lcms：(m/z):(m h)

＝196。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.83-7.74(m,2h),7.55-7.46(m,1h)。
[0501]
中间体21
[0502]
6-氟-1-甲基-3-硝基喹啉-2,4(1h,3h)-二酮
[0503][0504]
向在0℃下的圆底烧瓶中的2-硝基乙酸乙酯(293mg，2.198mmol)于nmp(5ml)中的溶液中，逐份添加氢化钠(96mg，2.398mmol)于矿物油中的60％分散液。在0℃下搅拌反应混合物5分钟，接着在室温下搅拌15分钟。接着，添加6-氟-1-甲基-1h-苯并[d][1,3]噁嗪-2,4-二酮(390mg，1.998mmol)，且在120℃下加热反应混合物2小时。lc/ms显示反应完成。通过添加冰-水来淬灭反应物。混合物用1n hcl溶液酸化。添加乙醚，且产生呈黄色固体状的6-氟-1-甲基-3-硝基喹啉-2,4(1h,3h)-二酮(140mg，0.588mmol，29.4％产率)。lcms：(m/z):(m h)

＝239。
[0505]
中间体22
[0506]
4-氯-6-氟-1-甲基-3-硝基喹啉-2(1h)-酮
[0507][0508]
在密封管中，添加6-氟-1-甲基-3-硝基喹啉-2,4(1h,3h)-二酮(140mg，0.588mmol)及氧氯化磷(3ml，32.2mmol)。在95℃下加热反应混合物4小时。将混合物倒入冰-水中，用饱和nahco3溶液中和，且用二氯甲烷(2
×
20ml)萃取。合并有机层，经干燥(mgso4)且浓缩，得到呈橙色固体状的4-氯-6-氟-1-甲基-3-硝基喹啉-2(1h)-酮(140mg，0.546mmol，93％产率)。lcms：(m/z)257(mh

)。
[0509]
中间体23
[0510]
3-氨基吡啶甲酸乙酯
[0511][0512]
经由1l加料漏斗历时60min，向在0-5℃下的3-氨基吡啶甲酸(150g，1086mmol)于乙醇(1500ml)中的搅拌悬浮液中添加h2so4(463ml，8688mmol)。在完成添加之后，使透明棕色溶液在90℃下回流24h。接着，将反应混合物冷却至室温，之后在顶部搅拌的情况下倒至10l烧杯中的冰丸上。使用nh4oh溶液(需要约2l)将混合物碱化至ph～9，且在室温下搅拌另外60min。观测到烧杯中出现固体材料，经由buchner漏斗过滤，用水(1l)洗涤且在真空管下干燥，得到60g呈淡黄色固体状的产物。使用dcm(3
×
1000ml)萃取滤液，且经合并的萃取物用盐水(1
×
1.5l)洗涤，经na2so4干燥，过滤且减压浓缩，得到3-氨基吡啶甲酸乙酯(116g，691mmol，63.6％产率)。lcms：m/z＝167.2(m/z):(m h)；rt 0.78min；方法：柱-kinetex-xb-c18(75
×
3mm-2.6μm)；移动相a：10mm甲酸铵/水:乙腈(98:2)；移动相b：10mm甲酸铵/水:乙腈(2:98)；梯度：20-100％b历时4分钟，流速1.0ml/min，接着在100％b保持0.6分钟，流速1.5ml/min；接着梯度：100-20％b历时0.1分钟，流速1.5ml/min。
[0513]
中间体24
[0514]
3-乙酰胺基吡啶甲酸乙酯
[0515][0516]
在室温下，向3-氨基吡啶甲酸乙酯(115g，692mmol)于thf(1000ml)中的搅拌溶液中，添加ac2o(588ml，6228mmol)。在氮气氛围下将反应混合物加热至60℃持续约7至8h。将反应混合物冷却至室温，且在真空管下在水浴温度(约50℃)下蒸发挥发物，随后在50℃下在高真空下移除乙酸，得到灰白色固体。固体用石油醚(500ml)湿磨，在室温下搅拌30min，接着经由buchner漏斗过滤且用石油醚(500ml)洗涤。在室温下真空干燥滤液3h，得到呈灰白色固体状的3-乙酰胺基吡啶甲酸乙酯(139g，641mmol，93％产率)。lcms：m/z＝209.3(m/z):(m h)；rt 0.76min；lc-ms方法：柱-kinetex-xb-c18(75
×
3mm-2.6μm)；移动相a：10mm甲酸铵/水:乙腈(98:2)；移动相b：10mm甲酸铵/水:乙腈(2:98)；梯度：20-100％b历时4分钟，流速1.0ml/min，接着在100％b保持0.6分钟，流速1.5ml/min；接着梯度：100-20％b历时0.1分钟，流速1.5ml/min。
[0517]
中间体25
[0518]
3-(n-甲基乙酰胺基)吡啶甲酸乙酯
[0519][0520]
在室温下，向3-乙酰胺基吡啶甲酸乙酯(75g，360mmol)及碳酸铯(176g，540mmol)于dmf(750ml)中的经搅拌浅棕色悬浮液中添加碘甲烷(36.0ml，576mmol)(观测到稍微放热)。在室温下搅拌所得部分棕色混合物约8h。反应物用水(1500ml)淬灭[观测到稍微放热]且用dcm(3
×
1000ml)萃取。经合并的萃取物用水(2
×
1000ml)洗涤，且水层用dcm(2
×
500ml)再萃取。合并的有机溶液用盐水(2
×
1000ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤且在约50℃下浓缩，且接着在约60℃下真空干燥，得到棕色溶液(含有一些dmf)。在高真空下在58℃下干燥材料25min，以移除dmf，得到棕色固体，将该棕色固体溶解于石油醚(1000ml)中，在室温下搅拌30min，经由buchner漏斗过滤，在过滤后用石油醚(500ml)洗涤，在真空管下干燥8h，得到呈棕色固体状的3-(n-甲基乙酰胺基)吡啶甲酸乙酯(70g，302mmol，84％产率)；lcms：m/z＝223.2(m/z):(m h)；rt 0.64min；lc-ms方法：柱-kinetex-xb-c18(75
×
3mm-2.6μm)；移动相a：10mm甲酸铵/水:乙腈(98:2)；移动相b：10mm甲酸铵/水:乙腈(2:98)；梯度：20-100％b历时4分钟，流速1.0ml/min，接着在100％b保持0.6分钟，流速1.5ml/min；接着梯度：100-20％b历时0.1分钟，流速1.5ml/min。
[0521]
中间体26
[0522]
2-(乙氧羰基)-3-(n-甲基乙酰胺基)吡啶1-氧化物
[0523][0524]
向在0-5℃下的3-(n-甲基乙酰胺基)吡啶甲酸乙酯(70g，315mmol)于dcm(700ml)中的经搅拌的透明棕色溶液中添加过氧化脲(44.4g，472mmol)，随后历时40min经由100ml加料漏斗缓慢添加三氟乙酸酐(66.7ml，472mmol)。在三氟乙酸酐添加期间，反应混合物凝固。在完成添加之后，在室温下搅拌反应混合物约2h。用10％nahco3溶液(700ml)来淬灭反应物。用dcm(3
×
500ml)萃取反应混合物。经合并的有机层用盐水溶液(2
×
500ml)洗涤，经na2so4干燥且浓缩，得到呈浅黄色固体状的2-(乙氧羰基)-3-(n-甲基乙酰胺基)吡啶1-氧化物(70g，285mmol，90％产率)；lcms：m/z＝239.0(m/z):(m h)；rt 0.48min；lc-ms方法：柱-kinetex-xb-c18(75
×
3mm-2.6μm)；移动相a：10mm甲酸铵/水:乙腈(98:2)；移动相b：10mm甲酸铵/水:乙腈(2:98)；梯度：20-100％b历时4分钟，流速1.0ml/min，接着在100％b保持0.6分钟，流速1.5ml/min；接着梯度：100-20％b历时0.1分钟，流速1.5ml/min。
[0525]
中间体27
[0526]
6-氰基-3-(n-甲基乙酰胺基)吡啶甲酸乙酯
[0527][0528]
向在室温下的2-(乙氧羰基)-3-(n-甲基乙酰胺基)吡啶1-氧化物(50g，210mmol)于dcm(500ml)中的经搅拌淡黄色溶液中，添加氰化三甲基硅基(39.4ml，294mmol)。搅拌反应混合物10min，且接着使其冷却至-10℃。经由50ml加料漏斗历时15min添加苯甲酰氯(34.1ml，294mmol)，随后经由50ml加料漏斗历时20min缓慢添加tea(41.0ml，294mmol)。在tea添加期间，观测到放热反应。反应混合物变得混浊(tea盐)，且在相同温度下继续搅拌2.5h。通过添加10％nahco3溶液(500ml)来淬灭反应物。用dcm(3
×
300ml)萃取混合物。经合并的有机溶液用盐水(2
×
250ml)洗涤，接着经na2so4干燥且浓缩，得到浅黄色粗材料。粗材料经由正相redisep二氧化硅柱、使用ea/石油醚作为洗脱剂来纯化。通过65-70％ea/石油醚分离产物，浓缩级分，得到呈浅棕色液体状的6-氰基-3-(n-甲基乙酰胺基)吡啶甲酸乙酯(43g，83％产率)；lcms：m/z＝248.0(m/z):(m h)；rt 1.26min；lc-ms方法：柱-kinetex-xb-c18(75
×
3mm-2.6μm)；移动相a：10mm甲酸铵/水:乙腈(98:2)；移动相b：10mm甲酸铵/水:乙腈(2:98)；梯度：20-100％b历时4分钟，流速1.0ml/min，接着在100％b保持0.6分钟，流速1.5ml/min；接着梯度：100-20％b历时0.1分钟，流速1.5ml/min。
[0529]
中间体28
[0530]
8-羟基-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈
[0531][0532]
在-78℃下，历时10min向6-氰基-3-(n-甲基乙酰胺基)吡啶甲酸乙酯(0.9g，3.64mmol)于四氢呋喃(10ml)中的搅拌溶液中添加khmds(4.80ml，4.37mmol)。搅拌反应混合物15min。历时30min将反应混合物缓慢升温至室温且接着搅拌另外90min。将反应混合物冷却至0℃。通过添加饱和碳酸氢钠溶液(70ml)来淬灭反应物。用乙酸乙酯(2
×
100ml)稀释混合物。收集水层且用1.5n hcl酸化以将ph调整至约3.0。搅拌混合物15分钟以形成固体块，经由buchner漏斗过滤，产生呈棕色固体状的8-羟基-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(550mg，75％产率)。lcms：m/z＝202.0(m/z):(m h)；rt 0.36min；lc-ms方法：柱-kinetex-xb-c18(75
×
3mm-2.6μm)；移动相a：10mm甲酸铵/水:乙腈(98:2)；移动相b：10mm甲酸铵/水:乙腈(2:98)；梯度：20-100％b历时4分钟，流速1.0ml/min，接着在100％b保持0.6分钟，流速1.5ml/min；接着梯度：100-20％b历时0.1分钟，流速1.5ml/min。
[0533]
中间体29
[0534]
8-氯-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈
羟基-5-甲基-7-硝基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(0.805g，65.1％产率)；lcms：m/z＝247.2:(m h)；rt 1.19min。lc-ms方法：柱-kinetex-xb-c18(75
×
3mm-2.6μm)；移动相a：10mm甲酸铵/水:乙腈(98:2)；移动相b：10mm甲酸铵/水:乙腈(2:98)；梯度：20-100％b历时4分钟，流速1.0ml/min，接着在100％b保持0.6分钟，流速1.5ml/min；接着梯度：100-20％b历时0.1分钟，流速1.5ml/min。
[0545]
中间体32
[0546]
8-氯-5-甲基-7-硝基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈
[0547][0548]
将8-羟基-5-甲基-7-硝基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(192mg，0.780mmol)溶解于乙腈(3.1ml)及diea(0.272ml，1.560mmol)的混合物中，得到黄色溶液。接着添加pocl3(0.131ml，1.404mmol)，且在室温下在氮气下搅拌混合物1h。添加氯化苯甲基三乙铵(200mg，0.878mmol)，且在65℃下加热混合物1h。真空浓缩混合物，且将残余物溶解于乙酸乙酯中且将所得溶液倒至冰上。保持此大致1h，之后转移至分液漏斗。收集有机层，且用额外乙酸乙酯萃取水溶液。经合并的有机层依序用1.5m k2hpo4溶液、饱和nahco3溶液且接着盐水洗涤。接着混合物经mgso4干燥，过滤且接着真空蒸发，得到棕色晶体固体(204mg，90％产率)。lcms：(m/z):(m h)

＝264.9.1h nmr(氯仿-d)δ8.03(d,j＝8.8hz,1h),7.89-7.97(m,1h),3.82(s,3h)。
[0549]
中间体33
[0550]
三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-3-硝基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-4-基酯
[0551][0552]
在氮气氛围下，在0℃下，向8-羟基-5-甲基-7-硝基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(0.25g，1.016mmol)于无水dcm(10ml)中的悬浮液中添加tea(0.212ml，1.523mmol)，随后添加三氟甲烷磺酸酐(0.183ml，1.117mmol)。搅拌反应混合物3h。反应混合物用dcm稀释，用水洗涤，有机层经na2so4干燥，过滤且减压蒸发，得到呈浅棕色固体状的三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-3-硝基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-4-基酯(0.25g，48.8％产率)；lcms：m/z＝379.2(m/z):(m h)；rt 1.66min。lc-ms方法：柱-aquity uplc beh c18(3.0
×
50mm)1.7μm；移动相a：缓冲液:乙腈(95:5)；移动相b：缓冲液:乙腈(5:95)，缓冲液：10mm乙酸铵；梯度：20-100％b历时2.0分钟，接着在100％b保持0.2分钟，流速0.7ml/min。
[0553]
中间体34
[0554]
7-溴-8-羟基-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈
[0555][0556]
向8-羟基-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(1000mg，4.97mmol)于无水dmf(10ml)中的搅拌溶液中添加nbs(973mg，5.47mmol)。在室温下搅拌反应混合物3h。减压移除溶剂，得到残余物。将残余物溶解于水中且搅拌10min。过滤固体材料，且用石油醚洗涤，得到呈灰白色固体状的7-溴-8-羟基-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(0.8g，56.9％产率)；lcms：m/z＝282:(m h)；rt 1.60min。方法：柱-kinetex-xb-c18(75
×
3mm-2.6μm)；移动相a：10mm甲酸铵/水:乙腈(98:2)；移动相b：10mm甲酸铵/水:乙腈(2:98)；梯度：20-100％b历时4分钟，流速1.0ml/min，接着在100％b保持0.6分钟，流速1.5ml/min；接着梯度：100-20％b历时0.1分钟，流速1.5ml/min。
[0557]
中间体35
[0558]
三氟甲烷磺酸3-溴-6-氰基-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-4-基酯
[0559][0560]
在0℃下，向7-溴-8-羟基-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(0.175g，0.625mmol)及tea(0.131ml，0.937mmol)于无水dcm(10ml)中的搅拌溶液中添加三氟甲烷磺酸酐(0.137ml，0.812mmol)。在室温下搅拌反应混合物3h。反应混合物用dcm稀释且用水洗涤，随后用盐水洗涤，有机层经无水na2so4干燥，过滤且减压蒸发，得到呈淡黄色固体状的三氟甲烷磺酸3-溴-6-氰基-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-4-基酯(190mg，53.9％产率)；lcms：m/z＝414(m/z):(m h)；rt 1.61min。方法：柱-aquity uplc beh c18(3.0
×
50mm)1.7μm；移动相a：缓冲液:乙腈(95:5)；移动相b：缓冲液:乙腈(5:95)，缓冲液：10mm乙酸铵；梯度：20-100％b历时2.0分钟，接着在100％b保持0.3分钟，流速0.7ml/min。
[0561]
中间体36
[0562]
3-氨基-6-溴吡啶甲酸乙酯
[0563][0564]
在配备有机械搅拌器、加料漏斗及热电偶温度探针的250ml三颈圆底烧瓶中，将3-氨基吡啶甲酸乙酯(8.0g，48.1mmol)悬浮于水(66ml)中。缓慢添加硫酸(1.7ml，31.9mmol)及乙酸(3.31ml，57.8mmol)，同时将烧瓶浸没于室温水浴中以控制温度。在环境温度下，在剧烈搅拌下，历时15分钟将溴(2.5ml，48.5mmol)于乙酸(17.5ml，306mmol)中的溶液添加至反应混合物中，同时维持反应混合物的内部温度低于23℃。移除水浴且在环境温度下搅拌反应混合物2小时。过滤反应悬浮液且用少量水冲洗，且接着在室温下真空干燥，得到呈黄
色固体状的3-氨基-6-溴吡啶甲酸乙酯(9.305g)。lcms：柱：waters acquity uplc beh c18，2.1
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：100％水 0.05％三氟乙酸；移动相b：100％乙腈 0.05％三氟乙酸；温度：40℃；梯度：2-98％b历时1.5分钟，接着在98％b保持0.5分钟；流速：0.8ml/min；检测：uv，220nm。保留时间0.94min；加合物观测值：[m h]；质量观测值：245.0。1h nmr(dmso-d6)δ7.44(d,j＝8.8hz,1h),7.21(d,j＝8.7hz,1h),6.88(br.s.,2h),4.29(q,j＝7.1hz,2h),1.31(t,j＝7.1hz,3h)。
[0565]
中间体37
[0566]
3-乙酰胺基-6-溴吡啶甲酸乙酯
[0567][0568]
将3-氨基-6-溴吡啶甲酸乙酯(1.31g，5.35mmol)溶解于thf(6ml)中，随后添加乙酸酐(1.6ml，16.96mmol)。反应混合物为悬浮液/部分溶液。将反应混合物置放在氮气氛围下且加热至回流。反应混合物在15分钟内变得均质。使反应混合物回流4小时。使用旋转式蒸发器真空移除反应挥发物。添加少量乙酸乙酯至反应残余物中且滤出接近无色的固体且真空干燥，得到3-乙酰胺基-6-溴吡啶甲酸乙酯(787mg)。lcms：柱：waters acquity uplc beh c18，2.1
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：100％水 0.05％三氟乙酸；移动相b：100％乙腈 0.05％三氟乙酸；温度：40℃；梯度：2-98％b历时1.5分钟，接着在98％b保持0.5分钟；流速：0.8ml/min；检测：uv，220nm。保留时间0.98min；加合物观测值：[m h]；质量观测值：287.0。1h nmr(dmso-d6)δ10.40(s,1h),8.32(d,j＝8.7hz,1h),7.83(d,j＝8.8hz,1h),4.33(q,j＝7.1hz,2h),2.12(s,3h),1.32(t,j＝7.2hz,3h)。自滤液移除溶剂，得到额外695mg产物(87％纯)。
[0569]
中间体38
[0570]
6-溴-3-(n-甲基乙酰胺基)吡啶甲酸乙酯
[0571][0572]
通过将3-乙酰胺基-6-溴吡啶甲酸乙酯(5g，17.41mmol)溶解于dmf(100ml)中来制备溶液。接着，添加碳酸铯(8.15g，25.01mmol)及碘甲烷(1.75ml，28.0mmol)。将反应混合物置放在氮气氛围下且在室温下搅拌2小时40分钟。使用旋转式蒸发器/真空泵浦组合来真空移除溶剂。将乙酸乙酯及dcm与氯仿及甲苯一起添加至反应残余物中。混合物经由硅藻土垫过滤以移除盐。使用旋转式蒸发器再次真空移除溶剂。再次将反应残余物溶解于氯仿及甲苯中且经由硅藻土床过滤以移除仍存在的痕量不溶物。真空移除溶剂，得到5.35g呈橙色油状的产物。lcms；柱：waters acquity beh 2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：10:90乙腈:水 0.1％tfa；移动相b：90:10乙腈:水 0.1％tfa；温度：40℃；梯度0％b至100％b历时2分
钟，接着在100％b保持1分钟；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射体积：1μl。保留时间1.07min；加合物观测值：[m h]；质量观测值：301.1。质子nmr显示受限旋转(旋转异构体)的特征；1h nmr(500mhz,氯仿-d)δ7.72(d,j＝8.4hz,0.8h),7.66(d,j＝8.4hz,0.2h),7.51(d,j＝8.4hz,0.8h),7.45(d,j＝8.4hz,0.2h),4.50-4.36(m,2.0h),3.37(s,0.6h),3.19(s,2.4h),2.24(s,0.6h),1.82(s,2.5h),1.43-1.36(m,3.1h)。
[0573]
中间体39
[0574]
6-溴-4-羟基-1-甲基-1,5-萘啶-2(1h)-酮
[0575][0576]
将khmds(4.3ml，2.150mmol)(0.5m，于甲苯中)装入25ml圆底烧瓶中，置放在氮气下且冷却至-78℃。历经大致3分钟，向khmds溶液中缓慢添加6-溴-3-(n-甲基乙酰胺基)吡啶甲酸乙酯(215mg，0.714mmol)于thf(2.5ml)中的溶液。使反应混合物升温至室温且添加乙酸乙酯与水的1:1混合物以填充60ml分液漏斗。允许分离各相。水相用2.5ml 1n盐酸酸化且在使用真空泵的旋转式蒸发器上浓缩。使粗残余物在具有7ml水的锥形瓶(erlenmeyer flask)中涡旋。收集黄色固体，且真空干燥，得到标题化合物(130.2mg，72％)。lcms：柱：waters acquity uplc beh c18 2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：100水 0.05％tfa；移动相b：100乙腈 0.05％tfa；温度：40℃；梯度2％b至98％b历时1.5分钟，接着在100％b保持1min；流速：0.8ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射体积：3μl。保留时间0.8min；加合物观测值：[m h]；质量观测值：254.9，256.9。
[0577]
中间体40
[0578]
三氟甲烷磺酸6-溴-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-4-基酯
[0579][0580]
在圆底烧瓶中，将6-溴-1-甲基-1,5-萘啶-2,4(1h,3h)-二酮(200mg，0.784mmol)与dmap(9.58mg，0.078mmol)、dipea(0.205ml，1.176mmol)及dcm(20ml)合并。在0℃下，向所得悬浮液中逐滴添加三氟甲磺酸酐(0.141ml，0.863mmol)于二氯甲烷(2ml)中的溶液。搅拌溶液3小时。lc/ms分析指示反应完成。减压移除溶剂且粗物质通过在24g硅胶柱上用1:1己烷:乙酸乙酯色谱来纯化，得到呈白色固体状的产物(260mg，86％)。分析型lc/ms条件：注射体积＝1μl，起始0％b，最终100％b，梯度时间2分钟，流速1ml/min，波长220nm，溶剂对：乙腈/水/tfa，溶剂a：10％乙腈/90％水/0.1％tfa，溶剂b：90％乙腈/10％水/0.1％tfa，柱：acquity beh c18 21.
×
50mm 1.7μm，烘箱温度＝40℃。lc\ms结果；保留时间1.5分钟，质量观测值386.7，388.7(m

)。
[0581]
中间体41
[0582]
2-氰基乙酰氯
[0583][0584]
向2-氰基乙酸(500mg，5.88mmol)于ch2cl2(5ml)中的溶液中添加几滴dmf。接着，逐滴添加2m乙二酰氯(3.23ml，6.47mmol)于二氯甲烷中的溶液。在室温下搅拌反应混合物2小时且浓缩。
[0585]
中间体42
[0586]
6-溴-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢-1,5-萘啶-3-甲腈
[0587][0588]
向3-氨基-6-溴吡啶甲酸乙酯(1.3g，5.30mmol)于dcm(10ml)中的溶液中，添加dipea(2.78ml，15.91mmol)。接着，缓慢添加含2-氰基乙酰氯(0.609g，5.88mmol)的dcm(10ml)。在室温下搅拌反应混合物10min。lc/ms显示形成6-溴-3-(2-氰基乙酰胺基)吡啶甲酸乙酯(ms在312)。用水淬灭反应物，且用二氯甲烷萃取所得混合物。分离有机层，用盐水洗涤，干燥(mgso4)且浓缩，得到微棕色稠油作为粗产物。粗产物用乙酸乙酯/己烷湿磨，得到黄色固体。1hnmr确认其结构为与dipea的环化产物。产物用1n hcl溶液洗涤，且产生呈灰白色固体状的6-溴-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢-1,5-萘啶-3-甲腈(650mg，2.443mmol，46.1％产率)。1h nmr(dmso-d6)。lcms：(m/z)》90％纯，266，268(mh

)。
[0589]
中间体43
[0590]
6-溴-1-甲基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢-1,5-萘啶-3-甲腈
[0591][0592]
向6-溴-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢-1,5-萘啶-3-甲腈(250mg，0.940mmol)于dmf(5ml)中的溶液中，逐份添加含60％氢化钠(113mg，2.82mmol)的矿物油。在室温下搅拌反应混合物30min，且添加碘甲烷(0.176ml，2.82mmol)。在室温下搅拌反应混合物隔夜。
[0593]
中间体44
[0594]
三氟甲烷磺酸6-溴-3-氰基-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-4-基酯
[0595][0596]
在0℃下，向6-溴-1-甲基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢-1,5-萘啶-3-甲腈(0.6g，2.14mmol)于dcm(8ml)中的搅拌溶液中，添加tea(0.896ml，6.43mmol)及dmap(0.026g，
0.214mmol)，随后添加三氟甲烷磺酸酐(0.724ml，4.28mmol)。使反应混合物缓慢升温至室温且搅拌3h。通过添加水(50ml)来淬灭反应物。用dcm(3
×
100ml)稀释反应混合物。经合并的有机层经无水硫酸钠干燥，过滤且减压蒸发，得到棕色固体。粗化合物用dcm及己烷(1:4)湿磨，得到呈棕色固体状的三氟甲烷磺酸6-溴-3-氰基-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-4-基酯(700mg，79％产率)；lcms：m/z＝414.1(m/z):(m h)；rt 0.65min。lc-ms方法：柱-aquity uplc beh c18(3.0
×
50mm)1.7μm；移动相a：缓冲液:乙腈(95:5)；移动相b：缓冲液:乙腈(5:95)，缓冲液：10mm乙酸铵；梯度：20-100％b历时2.0分钟，接着在100％b保持0.3分钟，流速0.7ml/min。
[0597]
中间体45
[0598]
6-溴-4-氯-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-3-甲腈
[0599][0600]
向装有含6-溴-1-甲基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢-1,5-萘啶-3-甲腈(2.50g，8.93mmol)的乙腈(89ml)的500ml圆底烧瓶中添加diea(9.4ml，53.8mmol)，且搅拌混合物2min，在此期间其变得均质。接着添加pocl3(3.3ml，35.4mmol)，随后添加氯化苯甲基三乙铵(2.68g，11.77mmol)，且在室温下在氮气下搅拌反应混合物隔夜。接着，最初在真空管下浓缩混合物，接着在高真空下浓缩。接着将残余物倒至冰与1.5m k2hpo4溶液的混合物上。在30min之后，使用氯仿(3
×
)萃取混合物。经合并的萃取物依序用k2hpo4溶液、1n hcl溶液且接着盐水洗涤。接着有机溶液经na2so4干燥，过滤且真空浓缩，得到呈棕色固体状的粗产物(3.1g)。通过硅胶急骤色谱，使用2％乙酸乙酯/dcm作为洗脱剂，来纯化产物。合并均质级分且减压蒸发，得到1.922g呈黄色固体状的产物(产率72％)。lcms：(m/z):(m h)

＝298.05。1h nmr(500mhz,氯仿-d)δ7.83(d,j＝8.8hz,1h),7.68(d,j＝9.0hz,1h)。
[0601]
中间体46
[0602]
4,6-二氯-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-3-甲腈
[0603][0604]
向干燥玻璃压力管中的6-溴-4-氯-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-3-甲腈(1g，3.35mmol)中，添加hcl于二噁烷(20ml，80mmol)中的4m溶液。将反应混合物密封且在85℃下加热4天。接着使混合物冷却且真空浓缩。残余物用甲醇湿磨，且通过过滤收集固体且真空干燥，得到呈棕色固体状的标题化合物的盐酸盐(0.78g，2.68mmol，80％产率)。(lcms：(m/z):(m h)

＝254.15,1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.29(d,j＝9.0hz,1h),8.00(d,j＝9.0hz,1h),3.66(s,3h)。
[0605]
中间体47
[0606]
6-溴-3-(2-氰基乙酰胺基)吡啶甲酸乙酯
[0607][0608]
向3-氨基-6-溴吡啶甲酸乙酯(2.0g，8.16mmol)于dmf(15ml)中的搅拌溶液中，添加2-氰基乙酸(1.388g，16.32mmol)及tea(2.84ml，20.40mmol)，随后添加1-丙烷膦酸酐(10.78ml，17.95mmol)。在室温下搅拌反应混合物16小时，且接着通过小心添加水(100ml)淬灭。搅拌所得混合物15min，在此期间分离出固体，通过过滤收集该固体，得到呈黄色固体状的产物(2.45g，7.85mmol，96％产率)。
[0609]
中间体48
[0610]
6-氰基-3-(2-氰基乙酰胺基)吡啶甲酸乙酯
[0611][0612]
在氮气下，向6-溴-3-(2-氰基乙酰胺基)吡啶甲酸乙酯(200mg，0.641mmol)于nmp(8ml)中的搅拌溶液中，添加锌(8.38mg，0.128mmol)及氰化锌(150mg，1.282mmol)。用氮气吹扫混合物3min，其后添加dppf(21.31mg，0.038mmol)及pd2(dba)3(58.7mg，0.064mmol)，且继续吹扫另外3min。接着历时5min将反应混合物加热至80℃，且搅拌混合物额外一小时，之后使其冷却至室温。接着通过添加水来淬灭反应物，且经由硅藻土床过滤所得混合物。使用乙酸乙酯(3
×
100ml)萃取滤液，且经合并的萃取物用盐水溶液(50ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤且减压浓缩，得到棕色油。通过硅胶急骤色谱，使用34％-39％乙酸乙酯/石油醚作为洗脱剂，来纯化粗产物。合并均质级分且真空蒸发，得到呈棕色固体状的产物(70mg，0.271mmol，42.3％产率)，lcms方法；缓冲液：10mm乙酸铵，用hcooh调整至ph-5，移动相a：缓冲液:acn(95:5)，移动相b：缓冲液:acn(5:95)，描述：方法：％b：omin-5％:1.1min-95％:1.7min-95％，柱名称：acquity beh c18(2.1
×
50mm)1.7μm，方法：c:\masslynx\bms_2013。流速：0.8ml/min lcms rt＝1.10min(m-h)-＝257.2。
[0613]
中间体49
[0614]
6,8-二氧代-5,6,7,8-四氢-1,5-萘啶-2,7-二甲腈
[0615][0616]
向6-氰基-3-(2-氰基乙酰胺基)吡啶甲酸乙酯(70mg，0.271mmol)于dcm(5ml)中的搅拌溶液中，添加三乙胺(0.113ml，0.813mmol)。将反应混合物升温至45℃且接着搅拌3小时。减压浓缩混合物，且残余物用乙酸乙酯湿磨15min。过滤所得悬浮液，且减压干燥滤液，得到呈棕色固体状的产物(54mg，0.255mmol，94％产率)。lcms：(m/z):(m h)

＝213.2
[0617]
中间体50
[0618]
5-甲基-6,8-二氧代-5,6,7,8-四氢-1,5-萘啶-2,7-二甲腈
[0619][0620]
在0℃下，向6,8-二氧代-5,6,7,8-四氢-1,5-萘啶-2,7-二甲腈(50mg，0.236mmol)于dmf(3ml)中的搅拌溶液中，添加nah(28.3mg，0.707mmol)。接着将经搅拌混合物升温至室温。添加碘甲烷(0.044ml，0.707mmol)，且继续在氮气氛围下搅拌3h。通过添加水(10ml)来淬灭反应物。使用1.5n hcl将混合物的ph调整至约6。搅拌所得混合物15min，在此期间分离出固体，通过过滤收集该固体，且接着减压干燥，得到呈棕色固体状的产物(20mg，0.088mmol，37.5％产率)。lc-ms：方法信息：柱-ascentis express c8(50
×
2.1mm-2.7μm)，移动相a：(2％acn-98％h2o-10mm nh4cooh)，移动相b：(98％acn-2％h2o-10mm nh4cooh)，流速＝1ml/min，时间b％：(0.0 0.0)，(1.5100.0)，(3.2 100.0)。lc-ms rt＝1.301min(m/z):(m h)

＝225.0。
[0621]
中间体51
[0622]
8-氯-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2,7-二甲腈
[0623][0624]
将起始材料5-甲基-6,8-二氧代-5,6,7,8-四氢-1,5-萘啶-2,7-二甲腈的盐酸盐在90℃下真空干燥隔夜，之后进行反应。向5-甲基-6,8-二氧代-5,6,7,8-四氢-1,5-萘啶-2,7-二甲腈(10g，38.1mmol)于乙腈(100ml)中的搅拌悬浮液中，添加dipea(19.95ml，114mmol)。使所得混浊棕色溶液冷却至0-5℃，且历时约20min缓慢添加pocl3(40.8ml，438mmol)，其后将混合物加热至90℃持续约1h。将反应混合物冷却至室温，且接着在高真空下浓缩，得到淡棕色残余物。添加冰丸且搅拌浆液约15min，在此期间形成自由流动性固体。通过添加nahco3饱和溶液中和混合物，且使用dcm(4
×
500ml)萃取产物。经合并的萃取物用盐水(1
×
500ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤且真空浓缩，得到呈棕色固体状的粗产物。此物质用丙酮(50ml)湿磨，且通过过滤收集产物且真空干燥，得到6g固体。浓缩滤液且残余物再次用丙酮湿磨，得到额外2.4g固体。合并固体，得到呈棕色固体状的标题化合物(8.4g，33.8mmol，89％产率)。
[0625]
中间体52
[0626]
6-氯-4-(4-羟基哌啶-1-基)-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-3-甲腈
[0627][0628]
向4,6-二氯-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-3-甲腈盐酸盐(300mg，1.033mmol)及三乙胺(0.720ml，5.16mmol)于dmf(5ml)中的溶液中，添加哌啶-4-醇(110mg，1.084mmol)。在室温下搅拌反应混合物隔夜，之后通过添加水来淬灭。搅拌后，分离出黄色固体且通过过滤收集且接着真空干燥，得到呈黄色固体状的标题化合物(325mg，1.020mmol，99％产率)。lcms:(m/z):(m h)

＝319.08,1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.04(d,j＝9.2hz,1h),7.77(d,j＝9.2hz,1h),4.72(d,j＝4.4hz,1h),4.14-3.99(m,2h),3.87(br dd,j＝8.1,4.0hz,1h),3.59(ddd,j＝13.0,9.4,3.3hz,2h),3.53(s,3h),1.98(ddd,j＝9.4,5.7,2.9hz,2h),1.70(td,j＝8.4,4.4hz,2h)。
[0629]
中间体53
[0630]
( /-)6-溴-4-(顺式-4-羟基-3-甲基哌啶-1-基)-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-3-甲腈
[0631][0632]
向6-溴-4-氯-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-3-甲腈(1.0g，3.35mmol)于dmf(8ml)中的溶液中，添加( /-)顺式-3-甲基哌啶-4-醇(0.405g，3.52mmol)及三乙胺(1.167ml，8.37mmol)。在室温下搅拌反应混合物2h。接着添加水且分离出橙色固体，通过过滤收集该橙色固体。粗产物用甲醇/二氯甲烷湿磨，且通过过滤获得呈黄色固体状的最终产物(0.82g，2.174mmol，64.9％产率)。lcms：(m/z):(m h)

＝376.9。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.97-7.87(m,1h),8.02-7.79(m,1h),4.79-4.64(m,1h),3.91-3.71(m,4h),3.51(s,3h),3.45(br dd,j＝12.3,10.1hz,1h),2.06(ddd,j＝9.7,6.5,3.2hz,1h),1.87(br d,j＝3.9hz,2h),0.91(d,j＝6.8hz,3h)。
[0633]
实施例49
[0634]
( /-)6-溴-1-甲基-4-(反式-3-甲基-4-(4-(叔戊基)苯氧基)哌啶-1-基)-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-3-甲腈
[0635][0636]
向4-(叔戊基)苯酚(65.3mg，0.398mmol)于thf(8ml)中的溶液中，添加于固体载体上的三苯基膦(194mg，0.583mmol)。在室温下搅拌反应混合物5min。接着，添加(e)-二氮烯-1,2-二甲酸二-叔丁酯(98mg，0.424mmol)及( /-)6-溴-4-(顺式-4-羟基-3-甲基哌啶-1-基)-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-3-甲腈(100mg，0.265mmol)。在室温下搅拌反应混合物6天。接着过滤反应混合物且真空浓缩滤液，得到黄色固体。使用反相制备型hplc柱，使用ch3cn-h2o-tfa溶剂系统作为洗脱剂，来纯化产物。收集均质级分且真空浓缩，得到呈浅黄色固体状的标题化合物的tfa盐(31mg，0.049mmol，18.34％产率)。lcms：(m/z):(m h)

＝523.0。1h nmr(400mhz,丙酮)δ7.98(d,j＝9.0hz,1h),7.86(d,j＝9.0hz,1h),7.30(d,j＝8.8hz,2h),7.01(d,j＝8.8hz,2h),4.40-4.32(m,2h),4.31-4.23(m,1h),3.77(ddd,j＝13.4,10.9,2.8hz,1h),3.63(s,3h),3.35(dd,j＝13.2,9.8hz,1h),2.54-2.42(m,1h),2.37(ddd,j＝12.6,6.2,2.9hz,1h),1.97-1.78(m,1h),1.15(d,j＝6.6hz,3h),0.69(t,j＝7.5hz,3h)。因为溶剂杂质混淆了某些化合物相关峰，所以未完整定出。
[0637]
中间体55
[0638]
8-氯-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2,7-二甲腈
[0639][0640]
向8-羟基-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2,7-二甲腈盐酸盐(10g，38.1mmol)于乙腈(100ml)中的搅拌悬浮液中，添加dipea(19.95ml，114mmol)。使混浊棕色溶液冷却至0-5℃。接着经由滴液漏斗历时约20min缓慢添加pocl3(40.8ml，438mmol)。将所得混合物加热至90℃持续1min且接着使其冷却至室温。在高真空下浓缩混合物，得到淡棕色残余物。添加冰丸且搅拌所得混合物约15min，在此期间形成自由流动性固体。使用nahco3饱和溶液中和混合物且接着用dcm(4
×
500ml)萃取。经合并的萃取物用盐水溶液(1
×
500ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤且接着浓缩，得到棕色材料。产物用丙酮(50ml)湿磨，且通过过滤收集固体，真空干燥该固体，得到呈棕色固体状的标题化合物(6g)。蒸发滤液且残余物再次用丙酮湿磨，且获得额外产物。真空干燥经合并的滤液，得到呈棕色固体状的标题化合物(8.4g，33.8mmol，89％产率)。lcms：(m h h2o)

＝262.0。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ8.49-8.37(m,2h),3.72-3.61(m,3h)。
[0641]
中间体56
[0642]
8-(4-羟基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈
[0643][0644]
向在50ml圆底烧瓶中的乙腈(18.00ml)及n-乙基-n-异丙基丙-2-胺(0.95ml，5.45mmol)的混合物中，添加三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-4-基酯(0.600g，1.800mmol)及4-羟基哌啶(0.266g，2.63mmol)。在80℃下加热混合物持续1h。接着使非均质混合物在0℃冰浴中冷却，且通过过滤收集所得黄色沉淀且接着真空干燥，得到呈黄色固体状的产物(473mg，92％)。1h nmr(500mhz,氯仿-d)δ7.80(d,j＝8.7hz,0.9h),7.70(d,j＝8.7hz,0.9h),6.23(s,0.9h),4.02(br s,1.0h),3.94-3.85(m,2.0h),3.64(s,3.0h),3.27(ddd,j＝12.5,9.1,3.3hz,2.0h),2.15-2.07(m,1.9h),1.87-1.76(m,2.0h)。
[0645]
中间体57
[0646]
( /-)4-(顺式-4-羟基-3-甲基哌啶-1-基)-6-氰基-1-甲基-1,5-萘啶-2(1h)-酮
[0647][0648]
向三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-4-基酯(100mg，0.300mmol)及休尼格氏碱(hunig's base)(0.105ml，0.600mmol)于dmf(4ml)中的溶液中，添加顺式-3-甲基哌啶-4-醇(34.6mg，0.300mmol)。在85℃下加热混合物隔夜。在高真空下移除溶剂且将残余物溶解于etoac中。所得溶液用水(2
×
)洗涤且用盐水洗涤一次。接着混合物经mgso4干燥，过滤且真空浓缩，得到89mg黄色固体(100％)。lcms：r
t
＝1.01(m/z):(m h)

＝299.03。1h nmr(400mhz,)δ8.02(d,j＝7.8hz,1h),7.85(d,j＝7.8hz,1h),5.88(s,1h),3.72(dddd,j＝4.5,4.2,3.5,3.4hz,1h),3.65(s,3h),3.36(dd,j＝3.1,-12.2hz,1h),3.35(ddd,j＝12.1,3.1,-12.2hz,1h),2.88(dd,j＝12.2,4.5hz,1h),2.88(dd,j＝12.2,11.8hz,1h),2.12(dqt,j＝11.8,6.6,4.5hz,1h),1.78(dddd,j＝12.1,3.4,3.1,-13.5hz,1h),1.72(ddd,j＝3.5,3.1,-13.5hz,1h),0.98(d,j＝6.6hz,3h)。
[0649]
中间体58
[0650]
( /-)顺式-4-羟基-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯
[0651][0652]
向( /-)顺式-3-甲基哌啶-4-醇(1g，8.68mmol)及三乙胺(1.452ml，10.42mmol)于dcm(15ml)中的悬浮液中，添加boc-酸酐(2.419ml，10.42mmol)。在室温下搅拌反应混合物隔夜，且接着用dcm稀释且用1n hcl溶液酸化至ph约6。分离有机层，用盐水洗涤，经mgso4干燥，过滤且减压蒸发溶剂，得到微黄色油。接着通过急骤色谱，使用乙酸乙酯/己烷(10-40％)作为洗脱剂，来纯化粗产物。收集均质级分且减压蒸发，得到呈无色黏稠油状的产物(1.35g，6.27mmol，72.2％产率)。lcms：216(m/z):(m h)

＝216。1h nmr(500mhz,氯仿-d)δ3.98-3.81(m,1h),3.69-3.52(m,2h),3.42-3.25(m,1h),3.16-2.96(m,1h),1.86-1.64(m,3h),1.48(s,9h),0.96(d,j＝7.0hz,3h)。
[0653]
中间体59
[0654]
( /-)反式-4-(苯甲酰氧基)-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯
[0655][0656]
向( /-)顺式-4-羟基-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.982g，4.56mmol)于thf(8ml)中的溶液中，添加三苯基膦(1.675g，6.39mmol)及苯甲酸(0.780g，6.39mmol)。接下来，在0℃下逐滴添加含(e)-二氮烯-1,2-二甲酸二-叔丁酯(1.470g，6.39mmol)的thf，且使混合物温热且在室温下搅拌隔夜。接着减压浓缩反应混合物，且通过急骤色谱，使用乙酸乙酯/己烷(10-30％)作为洗脱剂，来纯化残余物。合并均质级分且真空蒸发，得到呈黏稠无色油状的产物(0.77g，2.411mmol，52.9％产率)。1h nmr(500mhz,氯仿-d)δ8.07(d,j＝7.6hz,2h),7.66-7.53(m,1h),7.51-7.40(m,2h),4.94-4.73(m,1h),4.10-3.94(m,2h),3.21-2.99(m,1h),2.89-2.58(m,br,1h),2.22-2.03(m,1h),1.99-1.86(m,1h),1.69-1.60(m,1h),1.50(s,9h),1.01(d,j＝6.6hz,3h)。
[0657]
中间体60
[0658]
( /-)反式-4-羟基-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯
[0659][0660]
向( /-)反式-4-(苯甲酰氧基)-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.761g，2.383mmol)于meoh(10ml)中的溶液中，添加氢氧化钠(0.476g，11.91mmol)，且在室温下搅拌反应混合
物2h。接着减压浓缩混合物，且将残余物分配于乙酸乙酯与水之间。接着分离有机层，依序用水及盐水洗涤，接着经mgso4干燥，过滤且真空蒸发，得到呈黏稠无色油状的产物(446mg，2.072mmol，87％产率)。1h nmr(500mhz,氯仿-d)δ4.16-3.88(m,2h),3.37-3.19(m,1h),2.93-2.75(m,1h),2.67-2.34(m,br,1h),2.00-1.84(m,1h),1.55-1.40(m,11h),1.02(d,j＝6.6hz,3h)。
[0661]
中间体61
[0662]
( /-)反式-3-甲基哌啶-4-醇
[0663][0664]
向( /-)反式-4-羟基-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(440mg，2.044mmol)于dcm(3ml)中的溶液中添加tfa(1ml，12.98)，且在室温下搅拌反应混合物隔夜。真空浓缩混合物，得到呈无色黏稠油状的标题化合物的tfa盐。
[0665]
中间体62
[0666]
( /-)8-(反式-4-羟基-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈
[0667][0668]
向三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-4-基酯(487mg，1.460mmol)及休尼格氏碱(1.275ml，7.30mmol)于dmf(5ml)中的溶液中，添加( /-)反式-3-甲基哌啶-4-醇
·
三氟乙酸盐(468mg，2.044mmol)。在85℃下加热反应混合物隔夜。用水稀释混合物，且分离出黄色固体，通过过滤收集该黄色固体且真空干燥，得到呈固体状的产物(385mg，1.290mmol，88％产率)。lcms：(m/z):(m h)

＝299。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.16(d,j＝8.9hz,1h),8.07(d,j＝8.9hz,1h),6.07(s,1h),4.72(d,j＝5.5hz,1h),4.08-3.96(m,1h),3.94-3.85(m,1h),3.53(s,3h),3.25-3.14(m,1h),3.00-2.88(m,1h),2.72-2.62(m,1h),1.97-1.83(m,1h),1.70-1.49(m,2h),0.98(d,j＝6.6hz,3h)。
[0669]
中间体63
[0670]
6-氰基-1-甲基-4-(5-甲基-3,6-二氢吡啶-1(2h)-基)-1,5-萘啶-2(1h)-酮
[0671][0672]
向装配有隔膜的干燥20ml闪烁瓶中装入3mmol/g三苯基膦(聚合物负载的)(2.212ml，0.664mmol)，且接着抽真空且用氮气冲洗。接着添加thf(2ml)，随后在约1min之后，添加4-(三氟甲氧基)苯酚(0.039ml，0.302mmol)。将所得混合物进行简单混合，其后经由一次性注射器添加(e)-二氮烯-1,2-二甲酸二-叔丁酯(111mg，0.483mmol)于thf(1ml)中的溶液。在定轨振荡器上搅动混合物3min，其后一次性添加8-(反式-4-羟基-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(90mg，0.302mmol)于thf(2ml)中的溶液。接着小瓶在室温下振荡隔夜。随后过滤反应混合物，且蒸发至干燥。将残余物溶解于2ml dmf中，且经由条件为以下的制备型lc/ms分级分离所得溶液：柱：xbridge c18，200mm
×
19mm，5μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；梯度：在31％b保持0分钟，31-71％b历时25分钟，接着在100％b保持5分钟；流速：20ml/min；柱温度：25℃。通过uv信号触发级分收集。合并含有产物的级分且经由离心蒸发干燥。产物产量为32.9mg，且其根据lcms分析的估计纯度为100％。使用分析型lc/ms测定纯度。注射1条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射1结果：纯度：100.0％；质量观测值：281.11；保留时间：1.86min。注射2条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.1％三氟乙酸；移动相b：95:5乙腈:水 0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射2结果：纯度：100.0％；质量观测值：281.11；保留时间：1.69min。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.19-8.12(m,1h),8.10-8.02(m,1h),6.08-6.02(m,1h),5.65-5.56(m,1h),3.77-3.73(m,2h),3.69-3.64(m,2h),3.56-3.51(m,2h),2.32-2.22(m,2h),1.76-1.66(m,3h)。
[0673]
中间体64
[0674]
( /-)顺式-3-乙基-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯
[0675][0676]
在-78℃下，向3-乙基-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.5g，11.00mmol)于thf(10ml)中的溶液中，逐滴添加三仲丁基硼氢化锂(16.50ml，16.50mmol)于thf中的1m溶液。在氮气
下搅拌反应混合物2h，随后在相同温度下依序添加etoh(2ml)、水(5ml)及1m naoh溶液(5ml)。接着将反应混合物升温至0℃，且逐滴添加30％h2o2水溶液(5ml)。移除冷浴且在室温下搅拌反应混合物2h，其后其用etoac稀释。沉淀出不可溶白色固体，通过过滤移除该白色固体沉淀。收集滤液，依序用nahco3饱和溶液及盐水洗涤，且接着经mgso4干燥，过滤且减压蒸发，得到无色黏稠油。使用硅胶急骤色谱，使用10-30％etoac/己烷作为洗脱剂，分级分离此混合物。收集均质级分且真空蒸发，得到呈无色油状的产物(1.6g，6.98mmol，63.4％产率)。lcms：(m-(t-bu) acn h)

＝215.35。1h nmr(500mhz,氯仿-d)。所有信号均非常宽。
[0677]
中间体65
[0678]
( /-)顺式-3-乙基哌啶-4-醇
·
tfa盐
[0679][0680]
向顺式-3-乙基-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.6g，6.98mmol)于dcm(5ml)中的溶液中，添加tfa(2ml，26.0mmol)。在室温下搅拌反应混合物隔夜，其后其经减压浓缩，得到呈黏稠淡黄色油状的产物tfa盐(1.65g，6.78mmol，97％产率)。1h nmr(500mhz,氯仿-d)δ9.03-8.82(m,1h),8.82-8.60(m,1h),4.19-4.02(m,1h),3.38-3.20(m,2h),3.17-2.99(m,2h),2.08-1.97(m,2h),1.90-1.80(m,1h),1.52-1.40(m,1h),1.40-1.29(m,1h),1.02-0.94(m,3h)。
[0681]
中间体66
[0682]
( /-)反式-4-(苯甲酰氧基)-3-乙基哌啶-1-甲酸叔丁酯
[0683][0684]
向( /-)顺式-3-乙基-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.5g，6.54mmol)于thf(10ml)中的溶液中，添加三苯基膦(2.402g，9.16mmol)及苯甲酸(1.118g，9.16mmol)。在0℃下逐份添加(e)-二氮烯-1,2-二甲酸二-叔丁酯(2.109g，9.16mmol)。使反应混合物升温至室温且在氮气下搅拌隔夜。接着减压浓缩反应混合物，且通过急骤色谱，使用乙酸乙酯/己烷(0-20％)作为洗脱剂，来纯化残余物。合并均质级分且真空蒸发，得到呈黏稠无色油状的产物(1.70g，5.10mmol，78％产率)。
[0685]
中间体67
[0686]
( /-)反式-3-乙基-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯
[0687][0688]
向( /-)反式-4-(苯甲酰氧基)-3-乙基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.7g，5.10mmol)于meoh(15ml)中的溶液中，添加氢氧化钠(1.020g，25.5mmol)。在室温下搅拌反应混合物3h。接着减压浓缩混合物，且将残余物分配于乙酸乙酯与水之间。接着分离有机层，依序用水及盐水洗涤，接着经mgso4干燥，过滤且真空蒸发，得到呈黏稠油状的粗产物。用硅胶急骤色谱，使用10-30％乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂，来分级分离混合物。合并均质级分且减压蒸发，得到呈黏稠无色油状的反式-3-乙基-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.68g，2.97mmol，58.2％产率)。1h nmr(500mhz,氯仿-d)δ3.95(br d,j＝12.6hz,1h),3.46(br d,j＝0.9hz,1h),3.05-2.87(m,1h),1.97-1.87(m,1h),1.75(br d,j＝1.6hz,1h),1.51-1.40(m,11h),1.40-1.30(m,1h),1.25-1.15(m,1h),0.99(t,j＝7.4hz,3h)。频谱为宽峰且不能完整定出。
[0689]
中间体68
[0690]
( /-)反式-3-乙基哌啶-4-醇
·
tfa
[0691][0692]
向( /-)反式-3-乙基-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.3g，1.308mmol)于二氯甲烷(3ml)中的溶液中，添加1ml tfa。在室温下搅拌反应混合物3h。真空浓缩混合物。
[0693]
中间体69
[0694]
( /-)8-(顺式-3-乙基-4-羟基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈
[0695][0696]
向三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-4-基酯(1.370g，4.11mmol)及休尼格氏碱(2.87ml，16.45mmol)于dmf(8ml)中的溶液中，添加( /-)顺式-3-乙基哌啶-4-醇tfa盐(1.2g，4.93mmol)。在氮气下在85℃下加热反应混合物隔夜。所得混合物用水稀释且接着用乙酸乙酯萃取。合并有机层，用盐水洗涤且接着经mgso4干燥，过滤且减压蒸发，得到呈橙色固体状的粗产物。产物用甲醇湿磨，且通过过滤收集残余固体及风干，得到呈浅黄色固体状的产物(520mg，1.665mmol，40.5％产率)。接着在以下条件下纯化一部分滤液：柱：xbridge c18，200mm
×
19mm，5μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；
移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；梯度：在10％b保持0分钟，在10-50％b历时22分钟，接着在100％b保持4分钟；流速：20ml/min；柱温度：25℃。通过ms及uv信号触发级分收集。合并含有产物的级分且经由离心蒸发干燥。使用分析型lc/ms测定最终纯度。注射1条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射1结果：纯度：98.5％；质量观测值：313.15；保留时间：1.17min。注射2条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.1％三氟乙酸；移动相b：95:5乙腈:水 0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射2结果：纯度：99.3％；质量观测值：313.13；保留时间：1.22min。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.17-8.10(m,1h),8.10-8.02(m,1h),6.11-6.01(m,1h),4.70-4.62(m,1h),3.91-3.84(m,1h),3.75-3.66(m,1h),3.31-3.22(m,1h),3.14-3.05(m,1h),1.87-1.71(m,2h),1.71-1.60(m,1h),1.49-1.36(m,1h),1.34-1.21(m,1h),1.00-0.86(m,3h)。因为使用了水抑制技术，因此未完整定出完全频谱。
[0697]
中间体70
[0698]
4-(3-氯苯氧基)哌啶.
[0699][0700]
向4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(100mg，0.497mmol)及3-氯苯酚(63.9mg，0.497mmol)于thf(5ml)中的溶液中，添加三苯基膦(156mg，0.596mmol)。在0℃下搅拌反应混合物15min，其后逐滴添加diad(0.116ml，0.596mmol)。接着使反应混合物升温至室温且在氮气下搅拌隔夜。通过添加水来淬灭反应物，且所得混合物用乙酸乙酯(2
×
20ml)萃取。合并有机层，干燥(mgso4)，过滤且真空浓缩，得到呈黄色固体状的粗产物。将此材料溶解于dcm(5ml)中，且添加3ml tfa。在室温下搅拌混合物2h且接着浓缩，得到黄色黏稠油。用反相制备型hplc，使用ch3oh-h2o-tfa缓冲液系统，来纯化混合物。合并均质级分且减压蒸发，得到呈白色固体状的标题化合物的tfa盐(101.5mg，0.312mmol，62.7％产率)。lcms：(m/z):(m h)

＝212.0。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ7.30(t,j＝8.2hz,1h),7.08-7.06(m,1h),7.03-6.99(m,1h),6.98-6.94(m,1h),4.96-4.87(m,1h),4.79-4.66(m,1h),3.48-3.37(m,2h),3.28-3.15(m,2h),2.25-2.11(m,2h),2.11-1.96(m,2h)。
[0701]
中间体71
[0702]
4-(3-氟-5-甲基苯氧基)哌啶
[0703][0704]
将于固体载体上的三苯基膦(3mmol/g)(289mg，1.1mmol)添加至干燥的20ml闪烁
瓶，接着加盖且用氮气冲洗。将树脂悬浮于dcm(3ml)中，且将反应瓶置于定轨振荡器上2min。接着一次性添加3-氟-5-甲基苯酚(0.081ml，0.745mmol)，且另外简单搅动混合物，其后添加(e)-二氮烯-1,2-二甲酸二-叔丁酯(183mg，0.795mmol)。接着将混合物振荡另外3min，且接着添加4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(100mg，0.497mmol)，且在室温下搅动所得混合物隔夜。过滤悬浮液，且用dcm洗涤树脂。将洗涤液及滤液合并且减压蒸发。残余物用6ml dcm与tfa的1:1混合物处理30min，且将所得混合物蒸发至干燥。将残余物溶解于dcm中且添加5n naoh溶液。使用dcm萃取混合物。合并萃取物，经mgso4干燥，过滤且真空浓缩，得到呈无色油状的产物(63mg，61％)。lcms：(m/z):(m h)

＝210.10。
[0705]
中间体72
[0706]
( /-)顺式-3-甲基-4-(4-(三氟甲基)苯氧基)哌啶.tfa.
[0707][0708]
向顺式-4-羟基-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(100mg，0.464mmol)于thf(2ml)中的溶液中，添加双(三甲基硅基)酰胺钾(1.161ml，1.161mmol)于thf中的1.0m溶液。在室温下搅拌反应混合物30min，接着添加含1-氟-4-(三氟甲基)苯(114mg，0.697mmol)的thf(1ml)。接着在60℃下加热反应混合物4h。接着用水淬灭反应物。用乙酸乙酯萃取所得混合物。分离有机层，用盐水洗涤，经mgso4干燥，过滤且减压蒸发，得到油。用制备型hplc，使用ch3cn-h2o-tfa系统作为洗脱剂，来分级分离产物。合并均质级分且减压浓缩24h。将残余物溶解于dcm(3ml)中且添加1ml tfa。在室温下搅拌反应混合物隔夜，且接着真空浓缩，得到呈白色固体状的标题化合物的tfa盐(120mg，0.321mmol，69.2％产率)。lcms：(m/z):(m h)

＝260。1h nmr(cd3od):1h nmr(500mhz,甲醇-d4)δ7.63(br d,j＝8.5hz,2h),7.19(d,j＝8.5hz,2h),4.77-4.73(m,1h),3.28-3.12(m,4h),2.33-2.18(m,2h),2.08-1.93(m,1h),1.11(d,j＝6.9hz,3h)。
[0709]
使用以下方法(方法a)来制备以下多种本发明的实施例。
[0710]
实施例1
[0711]
6-氟-4-(4-(3-氟-5-甲基苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-3-硝基喹啉-2(1h)-酮
[0712]
[0713]
向4-氯-6-氟-1-甲基-3-硝基喹啉-2(1h)-酮(20.44mg，0.080mmol)及休尼格氏碱(0.028ml，0.159mmol)于dmf中的溶液中，添加4-(3-氟-5-甲基苯氧基)哌啶(20mg，0.096mmol)，且在室温下搅拌所得混合物隔夜。接着过滤粗反应混合物，随后经由制备型lc/ms使用以下条件来纯化：柱：xbridge c18，19
×
200mm，5μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；梯度：41-81％b历时25分钟，接着在100％b保持6分钟；流速：20ml/min。合并含有产物的级分且经由离心蒸发干燥。产物产量为22.1mg，且其根据lcms分析的估计纯度为100％。使用分析型lc/ms测定最终纯度。注射1条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.75min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射1结果：纯度：100.0％；质量观测值：429.94；保留时间：2.34min。注射2条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.1％三氟乙酸；移动相b：95:5乙腈:水 0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.75min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射2结果：纯度：100.0％；质量观测值：429.95；保留时间：2.33min。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ7.76-7.57(m,3h),6.75-6.62(m,2h),6.64-6.55(m,1h),4.68(dt,j＝7.7,3.9hz,1h),3.66(s,3h),3.45-3.31(m,2h),2.30(s,3h),2.22-2.10(m,2h),1.97-1.81(m,2h)。因为nmr实验中采用水抑制技术，所以无法实现频谱中所有峰的完整定出。
[0714]
根据方法b制备以下实施例。
[0715]
实施例2
[0716]
6-氟-4-(4-(4-异丙基苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-3-硝基喹啉-2(1h)-酮
[0717][0718]
将于固体载体上的三苯基膦3mmol/g(82.0mg，0.313mmol)添加至干燥的20ml闪烁瓶。在氮气下，将树脂悬浮于无水dcm(3ml)中2min时段。添加4-异丙基苯酚(12.72mg，0.093mmol)，且随后在5min之后添加(e)-二氮烯-1,2-二甲酸二-叔丁酯(22.93mg，0.100mmol)。在定轨振荡器上搅动所得悬浮液3min，且一次性添加6-氟-4-(4-羟基哌啶-1-基)-1-甲基-3-硝基喹啉-2(1h)-酮(20mg，0.062mmol)。在室温下继续振荡隔夜。接着真空浓缩反应混合物，且用2ml dmf湿磨残余物。接着过滤悬浮液且使用制备型lc/ms，用以下条件分级分离粗产物：柱：xbridge c18，19
×
200mm，5μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；梯度：53-93％b历时20分钟，接着在100％b保持6分钟；流速：20ml/min。合并含有产物的级分且经由离心蒸发干燥。产物产量为8.8mg，且其
根据lcms分析的估计纯度为100％。使用分析型lc/ms测定最终纯度。注射1条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.1％三氟乙酸；移动相b：95:5乙腈:水 0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.75min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射1结果：纯度：100.0％；质量观测值：440.16；保留时间：2.56min。注射2条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.75min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射2结果：纯度：100.0％；质量观测值：440.18；保留时间：2.54min。1h nmr(600mhz,dmso-d6)δ7.74-7.67(m,2h),7.63(dd,j＝9.4,2.0hz,1h),7.16(br d,j＝8.4hz,2h),6.93(br d,j＝8.8hz,2h),4.62(br s,1h),3.64(s,3h),3.14-3.07(m,1h),2.87-2.77(m,1h),2.19-2.07(m,2h),1.93-1.83(m,2h),1.17(d,j＝7.0hz,6h)。与哌嗪环相关的一些峰被获取频谱中所使用的水抑制技术遮蔽。
[0719]
以类似方式，制备以下实施例。
[0720]
方法a：
[0721][0722]
方法b：
[0723][0724]
表2
[0725][0726]
使用方法a来制备以下多种实施例。
[0727]
实施例10
[0728]
6-氯-4-(4-(3-甲氧基苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-3-甲腈
[0729][0730]
向4,6-二氯-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-3-甲腈盐酸盐(15mg，0.052mmol)于dmf(1.5ml)中的溶液中，添加4-(3-甲氧基苯氧基)哌啶盐酸盐(13.84mg，0.057mmol)及三乙胺(0.036ml，0.258mmol)。在室温下搅拌反应混合物2h。其接着用甲醇(2ml)稀释，过滤，且经由制备型lc/ms用以下条件纯化粗混合物：柱：xbridge c18，19
×
200mm，5μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；梯度：38-78％b历时20分钟，接着在100％b保持4分钟；流速：20ml/min。合并含有产物的级
分且经由离心蒸发干燥。产物产量为16.5mg，且其根据lcms分析的估计纯度为100％。使用分析型lc/ms测定最终纯度。注射1条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.75min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射1结果：纯度：100.0％；质量观测值：425.06；保留时间：2.05min。注射2条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.1％三氟乙酸；移动相b：95:5乙腈:水 0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.75min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射2结果：纯度：100.0％；质量观测值：425.1；保留时间：2.09min。1h nmr(600mhz,dmso-d6)δ8.07(br d,j＝8.8hz,1h),7.81(br d,j＝8.8hz,1h),7.20(t,j＝8.3hz,1h),6.65-6.49(m,3h),4.78(dt,j＝7.4,3.8hz,1h),4.09-3.97(m,2h),3.77-3.69(m,4h),2.19(td,j＝6.1,2.9hz,2h),1.99-1.79(m,2h)。因为在获取频谱中使用水抑制技术，所以未定出完全频谱。
[0731]
使用以下方法(方法b)来制备以下多种本发明的实施例。
[0732]
实施方案11
[0733]
6-氯-1-甲基-2-氧代-4-(4-(2-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,2-二氢-1,5-萘啶-3-甲腈
[0734][0735]
向2-(三氟甲基)苯酚(30.5mg，0.188mmol)于dcm(2ml)中的溶液中，添加三苯基膦(49.4mg，0.188mmol)。在室温下搅拌混合物5min，接着添加6-氯-4-(4-羟基哌啶-1-基)-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-3-甲腈(15mg，0.047mmol)，且搅拌反应混合物15min，之后一次性添加diad(0.037ml，0.188mmol)。在氮气下在室温下搅拌所得混合物隔夜。接着对其进行真空浓缩，且将残余物溶解于can与dmf的1:1混合物(1.8ml)中。接着经由制备型lc/ms使用以下条件来纯化此粗混合物：柱：xbridge c18，19
×
200mm，5μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；梯度：41-81％b历时20分钟，接着在100％b保持5分钟；流速：20ml/min。合并含有产物的级分且经由离心蒸发干燥。产物产量为8.0mg，且其通过lcms分析所估计的纯度为100％。使用分析型lc/ms测定最终纯度。注射1条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.75min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射1结果：纯度：100.0％；质量观测值：463.02；保留时间：2.20min。注射2条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.1％三氟乙酸；移动相b：95:5乙腈:水 0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.75min；流速：1ml/
min；检测：ms及uv(220nm)。注射2结果：纯度：100.0％；质量观测值：463.01；保留时间：2.24min。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.08(d,j＝8.8hz,1h),7.82(d,j＝8.9hz,1h),7.65(br d,j＝7.0hz,2h),7.42(br d,j＝8.5hz,1h),7.11(t,j＝7.6hz,1h),5.03(br s,1h),4.01-3.94(m,2h),3.86-3.79(m,2h),3.54(s,3h),2.24(br d,j＝12.2hz,2h),1.96(br d,j＝6.4hz,2h)。
[0736]
以类似于前述两种方法的方式，可制备以下实施例。
[0737]
方法c：
[0738][0739]
方法d：
[0740][0741]
表3
[0742]
[0743]
[0744]
[0745][0746]
实施方案47
[0747]
6-溴-1-甲基-2-氧代-4-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,2-二氢-1,5-萘啶-3-甲腈
[0748][0749]
向6-溴-4-氯-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-3-甲腈(50mg，0.167mmol)于dmf(4ml)中的溶液中，添加4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶(48.1mg，0.184mmol)及三乙胺(0.093ml，0.670mmol)。在室温下搅拌反应混合物2h，且接着通过添加水来淬灭。分离出白色固体且通过过滤收集，85mg。将20mg此材料溶解于dmf与甲醇的1:1混合物中，且经由制备型lc/ms用以下条件来纯化此溶液：柱：xbridge c18，19
×
200mm，5μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；梯度：41-81％b历时15分钟，接着在100％b保持5分钟；流速：20ml/min。合并含有产物的级分且经由离心蒸发干燥。产物产量为9.5mg，且其根据lcms分析的估计纯度为99％。使用分析型lc/ms测定最终纯度。注射1条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.75min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射1结果：纯度：98.7％；质量观测值：523.02；保留时间：2.34min。注射2条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.1％三氟乙酸；移动相b：95:5乙腈:水 0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.75min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射2结果：纯度：98.8％；质量观测值：523.03；保留时间：2.36min。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ7.97-7.92(m,1h),7.91-7.87(m,1h),7.30(br d,j＝8.5hz,2h),7.14(br d,j＝8.9hz,2h),4.80(br d,j＝3.4hz,1h),4.12-3.99(m,2h),3.72(br t,j＝10.1hz,1h),2.19(br s,2h),1.95-1.80(m,2h)。因为在获取频谱中使用水抑制技术，所以未定出完全频谱。
[0750]
实施方案48
[0751]
6-甲氧基-1-甲基-2-氧代-4-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,2-二氢-1,5-萘啶-3-甲腈
[0752][0753]
将6-溴-1-甲基-2-氧代-4-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,2-二氢-1,5-萘啶-3-甲腈(30mg，0.057mmol)、5-[二(1-金刚烷基)膦基]-1',3',5'-三苯基-1'h-[1,4']联吡唑(3.80mg，5.73μmol)、碳酸铯(18.68mg，0.057mmol)及pd(oac)2(0.644mg，2.87μmol)负载至干燥小瓶中，随后将小瓶密封，抽真空且用氮气冲洗。接着添加乙腈(2ml)及甲醇(0.1ml)，且在80℃下加热反应混合物隔夜。经由制备型lc/ms，用以下条件来纯化粗材料：柱：xbridge c18，200mm
×
19mm，5μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；梯度：在41％b保持0分钟，41-81％b历时25分钟，接着在100％b保持4分钟；流速：20ml/min；柱温度：25℃。通过ms及uv信号触发级分收集。合并含有产物的级分且经由离心蒸发干燥。产物产量为14.4mg，且其通过lcms分析所估计的纯度为100％。使用分析型lc/ms测定最终纯度。注射1条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.1％三氟乙酸；移动相b：95:5乙腈:水 0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.75min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射1结果：纯度：100.0％；质量观测值：475.04；保留时间：2.24min。注射2条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.75min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射2结果：纯度：100.0％；质量观测值：475.05；保留时间：2.18min。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.02(br d,j＝9.2hz,1h),7.31(br d,j＝8.5hz,2h),7.25(d,j＝9.2hz,1h),7.15(br d,j＝8.9hz,2h),4.78(br s,1h),4.14(br d,j＝12.5hz,2h),3.92(s,3h),3.79(br t,j＝9.6hz,2h),2.22(br s,2h),1.91(br d,j＝8.2hz,2h)。
[0754]
实施例50
[0755]
5-甲基-6-氧代-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氢-1,5-萘啶-2,7-二甲腈
[0756][0757]
将6-溴-1-甲基-2-氧代-4-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,2-二氢-1,5-萘啶-3-甲腈(50mg，0.096mmol)、锌(1.249mg，0.019mmol)、氰化锌(6.73mg，0.057mmol)及1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(ii)二氯甲烷错合物(7.80mg，9.55μmol)负载至干燥微波小瓶中，将微波小瓶密封，抽真空且接着用氮气冲洗。添加nmp(4ml)，且在75℃下于微波中照射所得混合物4.5小时。接着将反应混合物冷却至室温，用乙腈稀释且过滤。使用反相制备型hplc，使用ch3cn-h2o-tfa系统，来分级分离滤液。合并均质级分，用nahco3饱和溶液中和且接着真空浓缩。得到呈黄色固体状的产物(22.5mg，0.048mmol，50.2％产率)。lcms：(m/z)(方法2)rt＝4.39min。(m/z):(m h)

＝470.1。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.28(d,j＝8.8hz,1h),8.17(d,j＝8.8hz,1h),7.31(br d,j＝8.8hz,2h),7.16(d,j＝9.0hz,2h),4.83(dt,j＝7.4,4.0hz,1h),4.18-4.02(m,2h),3.78(br t,j＝9.5hz,2h),3.55(s,3h),2.29-2.16(m,2h),2.02-1.84(m,2h)。
[0758]
实施例51
[0759]
5-甲基-7-硝基-6-氧代-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈
[0760][0761]
向8-氯-5-甲基-7-硝基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(15mg，0.057mmol)于dmf(1.5ml)中的溶液中，添加4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶(16.29mg，0.062mmol)及三乙胺(0.024ml，0.170mmol)。在室温下搅拌反应混合物过周末。经由制备型hplc，用以下条件来纯化所得溶液：柱：xbridge c18，19
×
200mm，5μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；梯度：38-78％b历时20分钟，接着在100％b保持4分钟；流速：20ml/min。合并含有产物的级分且经由离心蒸发干燥。产物产量为19.1mg，且其根据lcms分析的估计纯度为99％。使用分析型lc/ms测定最终纯度。注射1条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.1％三氟乙酸；移
动相b：95:5乙腈:水 0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.75min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射1结果：纯度：100.0％；质量观测值：490.09；保留时间：2.3min。注射2条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.75min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射2结果：纯度：99.1％；质量观测值：490.1；保留时间：2.25min。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.43-8.12(m,1h),7.43-7.03(m,2h),4.90-4.59(m,1h),3.70-3.48(m,2h),2.25-2.12(m,1h),1.97-1.85(m,1h)。因为在获取频谱中使用水抑制技术，所以未定出完全频谱。
[0762]
使用以下方法(方法a)来制备以下多种本发明的实施例。
[0763]
实施例52
[0764]
5-甲基-6-氧代-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈
[0765][0766]
将8-氯-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(22mg，0.100mmol)溶解于一打兰压力小瓶中所含的dmf(1ml)中。添加4-[4-三氟甲氧基)苯氧基]哌啶(32mg，0.122mmol)与碳酸钾(40mg，0.289mmol)，且将反应容器抽真空，用氮气冲洗，密封且接着在90℃油浴中加热5h。使反应混合物冷却，之后通过添加乙腈及两滴水稀释至2ml的体积。过滤此混合物，且经由制备型lc/ms，用以下条件来纯化粗物质溶液：柱：xbridge c18，200mm
×
19mm，5μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；梯度：在33％b保持0分钟，33-73％b历时25分钟，接着在100％b保持4分钟；流速：20ml/min；柱温度：25℃。通过ms及uv信号触发级分收集。合并含有产物的级分且经由离心蒸发干燥。产物产量为26.1mg，且其通过lcms分析所估计的纯度为100％。使用分析型lc/ms测定最终纯度。注射1条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.75min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射1结果：纯度：100.0％；质量观测值：445.12；保留时间：2.19min。注射2条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.1％三氟乙酸；移动相b：95:5乙腈:水 0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.75min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射2结果：纯度：100.0％；质量观测值：445.14；保留时间：2.12min。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.10-7.96(m,1.9h),7.25(br d,j＝8.2hz,1.9h),
7.08(br d,j＝8.9hz,2.0h),6.12(s,0.9h),4.65(br s,0.9h),3.75(br d,j＝7.6hz,1.2h),3.51(s,2.6h),3.33(br t,j＝9.2hz,1.9h),2.09(br s,2.1h),1.83-1.68(m,2.0h)。所报告化学位移未针对水抑制作用进行校正。
[0767]
使用以下方法(方法b)来制备以下多种本发明的实施例。
[0768]
实施例53
[0769]
4-(4-(4-(叔丁基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢喹啉-6-甲腈
[0770][0771]
将三苯基膦树脂(56.6mg，0.217mmol)(70mg，在约3mmol/g下)置于经烘干真空冷却之一打兰小瓶中)且在氮气下悬浮于nmp(0.5ml)中，且使混合物静置2min。接着添加4-叔丁基苯酚(23.0mg，0.153mmol)及偶氮二甲酸二-叔丁酯(43mg，0.187mmol)，且使混合物振荡另外5min。添加8-(4-羟基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈于n-甲基-2-吡咯烷酮(1.0ml，28mg，0.098mmol)中的溶液，且将所得悬浮液维持在氮气下且在室温下搅动隔夜。接着过滤混合物，且通过添加更多nmp将滤液的体积调整至2ml。粗材料经由使用以下条件的制备型lc/ms纯化：柱：xbridge c18，200mm
×
19mm，5μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；梯度：在42％b保持0分钟，42-82％b历时20分钟，接着在100％b保持7分钟；流速：20ml/min；柱温度：25℃。通过ms及uv信号触发级分收集。合并含有产物的级分且经由离心蒸发干燥。产物产量为0.6mg，且其根据lcms分析的估计纯度为96％。使用分析型lc/ms测定最终纯度。注射1条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射1结果：纯度：100.0％；质量观测值：417.18；保留时间：2.31min。注射2条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.1％三氟乙酸；移动相b：95:5乙腈:水 0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射2结果：纯度：96.4％；质量观测值：417.06；保留时间：2.27min。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.16(d,j＝8.9hz,1.0h),8.08(d,j＝8.9hz,1.0h),7.29(br d,j＝8.5hz,1.9h),6.92(br d,j＝8.5hz,1.9h),6.14(s,1.0h),4.66-4.55(m,1.0h),3.82-3.71(m,2.0h),3.54(s,1.8h),2.16-2.02(m,2.0h),1.88-1.73(m,1.9h),1.25(s,9.0h)。
[0772]
以类似方式，可制备以下实施例。
[0773]
方法a：
[0774][0775]
方法b：
[0776][0777]
表4
[0778][0779][0780]
使用以下方法(方法a)来制备以下多种本发明的实施例。
[0781]
实施例66
[0782]
8-(4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈
[0783][0784]
在干燥一打兰小瓶中，在氮气下，将8-(4-羟基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(29mg，0.102mmol)溶解于nmp(1.0ml)中。接着添加氢化钠(10.6mg，0.265mmol)，且搅拌混合物3min，其后添加2-氟-5-异丙氧基吡啶(17μl，0.142mmol)。继续在室温下搅拌隔夜。接着通过添加乙酸淬灭反应物，且通过添加nmp将体积调整至1.8ml。过滤此混合物，且接着经由制备型lc/ms，用以下条件来纯化：柱：xbridge c18，200mm
×
19mm，5μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；梯度：在30％b保持0分钟，30-70％b历时20分钟，接着在100％b保持4分钟；流速：20ml/min；柱温度：25℃。通过ms信号触发级分收集。合并含有产物的级分且经由离心蒸发干燥。产物产量为9.3mg，且其根据lcms分析的估计纯度为97％。使用分析型lc/ms测定最终纯度。注射1条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射1结果：纯度：97.3％；质量观测值：420.07；保留时间：1.95min。注射2条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.1％三氟乙酸；移动相b：95:5乙腈:水 0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射2结果：纯度：98.8％；质量观测值：420.32；保留时间：1.85min。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.11(s,1.0h),8.07-8.00(m,1.0h),7.79(d,j＝3.1hz,1.0h),7.36(dd,j＝8.9,3.1hz,1.0h),6.74(d,j＝9.2hz,1.0h),6.13(s,1.0h),5.18-5.04(m,1.0h),4.49(dt,j＝12.1,6.0hz,1.0h),3.85-3.71(m,1.7h),3.30(br t,j＝9.6hz,1.8h),2.18-2.04(m,2.0h),1.87-1.71(m,2.0h),1.23(d,j＝5.8hz,6.0h)。在3.57ppm下的水抑制减小相邻信号的强度。
[0785]
以类似方式，可制备以下实施例。
[0786][0787]
表5
[0788]
[0789][0790]
实施例79
[0791]
( /-)6-氰基-1-甲基-4-(反式-3-甲基-4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,5-萘啶-2(1h)-酮
[0792][0793]
向装配有隔膜的干燥20ml闪烁瓶中装入3mmol/g三苯基膦(聚合物负载的)(2.212ml，0.664mmol)，且接着抽真空且用氮气冲洗。接着添加thf(2ml)，随后在约1min之后，添加4-(三氟甲氧基)苯酚(0.039ml，0.302mmol)。将所得混合物进行简单混合，其后经
由一次性注射器添加(e)-二氮烯-1,2-二甲酸二-叔丁酯(111mg，0.483mmol)于thf(1ml)中的溶液。在定轨振荡器上搅动混合物3min，其后一次性添加8-(顺式-4-羟基-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(90mg，0.302mmol)于thf(2ml)中的溶液。接着小瓶在室温下振荡隔夜。随后过滤反应混合物，且蒸发至干燥。将残余物溶解于2ml dmf中，且经由制备型lc/ms在以下条件下分级分离所得溶液：柱：xbridge c18，200mm
×
19mm，5μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；梯度：在31％b保持0分钟，31-71％b历时25分钟，接着在100％b保持5分钟；流速：20ml/min；柱温度：25℃。通过uv信号触发级分收集。合并含有产物的级分且经由离心蒸发干燥。产物产量为13.3mg，且其通过lcms分析所估计的纯度为100％。使用分析型lc/ms测定纯度。注射1条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射1结果：纯度：100.0％；质量观测值：459.09；保留时间：2.44min。注射2条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.1％三氟乙酸；移动相b：95:5乙腈:水 0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射2结果：纯度：100.0％；质量观测值：459.08；保留时间：2.28min。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.21-8.13(m,1h),8.18-8.04(m,2h),8.12-8.04(m,1h),7.33-7.24(m,2h),7.15-7.08(m,2h),6.17-6.11(m,1h),4.27(br d,j＝3.7hz,1h),4.04-3.87(m,2h),3.59-3.51(m,3h),3.39(br d,j＝4.9hz,1h),3.23-3.12(m,1h),3.00(br t,j＝11.3hz,1h),2.24-1.99(m,2h),1.73-1.58(m,1h),1.07(br d,j＝6.4hz,3h)。
[0794]
通过手性sfc分离法解析上文外消旋混合物。将大致10.1mg之外消旋体解析至收集于ipa w/0.1％dea中的两个峰中。基于下文制备型色谱估计分离物的手性纯度。
[0795]
分离物
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
手性纯度
[0796]
第1洗脱峰
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
》95％
[0797]
第2洗脱峰
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
》95％
[0798]
制备型色谱条件：
[0799]
仪器：waters 100prep sfc
[0800]
柱：chiral ad，30
×
250mm，5微米
[0801]
移动相：75％co2/25％ipa w/0.1％dea
[0802]
流动条件：100ml/min
[0803]
检测波长：220nm
[0804]
注射细节：1500μl 10.1mg，溶解于4ml meoh中
[0805]
分析型色谱条件(在制备型之前)：
[0806]
仪器：shimadzu nexera uc sfc
[0807]
柱：chiralpak ad，4.6
×
100mm，5微米
[0808]
移动相：75％co2/25％ipa w/0.1％dea
[0809]
流动条件：2ml/min
[0810]
检测波长：220nm
[0811]
实施例80：分离物1：第一洗脱峰
[0812]
实施例81：分离物2：第二洗脱峰
[0813]
实施例80
[0814]
6-氰基-1-甲基-4-(反式-3-甲基-4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,5-萘啶-2(1h)-酮(rel)
[0815][0816]
使用分析型lc/ms测定纯度。注射1条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射1结果：纯度：98.7％；质量观测值：458.95；保留时间：2.2min。注射2条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.1％三氟乙酸；移动相b：95:5乙腈:水 0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射2结果：纯度：96.3％；质量观测值：459.1；保留时间：2.26min。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.32-7.90(m,2h),7.33-7.02(m,4h),6.13(s,1h),4.31-4.18(m,1h),4.03-3.88(m,2h),3.57-3.51(m,3h),3.21-3.12(m,1h),3.04-2.93(m,1h),2.24-2.15(m,1h),2.11-2.00(m,1h),1.74-1.55(m,1h),1.10-1.02(m,3h)。
[0817]
实施例81
[0818]
6-氰基-1-甲基-4-(反式-3-甲基-4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,5-萘啶-2(1h)-酮(rel)
[0819][0820]
使用分析型lc/ms测定纯度。注射1条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射1结果：纯度：99.3％；质量观测值：459.08；保留时间：2.2min。注射2条件：
柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.1％三氟乙酸；移动相b：95:5乙腈:水 0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射2结果：纯度：97.8％；质量观测值：459.24；保留时间：2.26min。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.19-8.00(m,2h),7.32-7.05(m,4h),6.13(s,1h),4.32-4.20(m,1h),4.02-3.88(m,2h),3.57-3.52(m,3h),3.21-3.10(m,1h),3.05-2.90(m,1h),2.24-2.14(m,1h),2.11-2.00(m,1h),1.72-1.57(m,1h),1.09-1.02(m,3h)。
[0821]
使用类似方法及纯化技术，制备以下实施例。
[0822][0823]
表6
[0824]
[0825]
[0826]
[0827][0828]
使用与先前流程及表中呈现的方法相关的方法且在光延反应中采用( /-)8-(顺式-4-羟基-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2,7-二甲腈作为偶合搭配物以及适当官能化的苯酚，可制备以下实施例。可使用如上文所描述的制备型hplc技术达成特定对映异构体的分离。
[0829][0830]
表7
[0831][0832]
使用相关方法且在光延反应中采用( /-)8-(顺式-3-乙基-4-羟基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈作为偶合搭配物以及适当官能化的苯酚，可制备以下实施例。可使用如上文所描述的制备型hplc技术达成特定对映异构体的分离。
[0833][0834]
表8
[0835]
[0836]
[0837][0838]
使用与先前表中呈现的方法相关的方法且在光延反应中采用( /-)8-(反式-3-乙基-4-羟基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈作为偶合搭配物以及适当官能化的苯酚，可制备以下实施例。使用如上文所描述的制备型hplc技术达成特定对映异构体的分离。
[0839][0840]
表9
[0841][0842]
使用与先前表中呈现的方法相关的方法且在光延反应中采用( /-)8-(反式-4-羟基-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈作为偶合搭配物以及适当官能化的苯酚，可制备以下实施例。使用如上文所描述的制备型hplc技术达成特定对映异构体的分离。
[0843][0844]
表10
[0845]
[0846][0847]
实施例185
[0848]
( /-)5-甲基-8-(顺式-3-甲基-4-(4-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲酰胺
[0849][0850]
在氮气下，在80℃下加热氢化钠(3.54mg，0.074mmol)及( /-)8-(顺式-4-羟基-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(20mg，0.067mmol)于dmf(2ml)中的悬浮液15分钟。接着一次性添加1-氟-4-(三氟甲基)苯(9.36μl，0.074mmol)，且继续加热隔夜，且将反应混合物保持在室温下48h。粗材料经由使用以下条件的制备型lc/ms纯化：柱：xbridge c18，200mm
×
19mm，5μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；梯度：在24％b保持0分钟，24-64％b历时20分钟，接着在100％b保持5分钟；流速：20ml/min；柱温度：25℃。通过uv信号触发级分收集。合并含有产物的级分且经由离心蒸发干燥。产物产量为14.1mg，且其根据lcms分析的估计纯度为92％。使用分析型lc/ms测定最终纯度。注射1条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射1结果：纯度：98.2％；质量观测值：317.13；保留时间：1.29min。注射2条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.1％三氟乙酸；移动相b：95:5乙腈:水 0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射2结果：纯度：91.8％；质量观测值：317.14；保留时间：1.12min。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.21-8.14(m,1h),8.08-8.01(m,1h),7.82-7.74(m,1h),7.51-7.46(m,1h),6.07-6.02(m,1h),3.84-3.75(m,1h),3.57-3.50(m,1h),3.19-3.07(m,1h),2.06-1.95(m,1h),1.90-1.71(m,2h),0.97-0.85(m,3h)。因为水抑制，所以并未定出全部信号。外消旋。
[0851]
实施例186
[0852]
( /-)5-甲基-8-(顺式-3-甲基-4-(4-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈
[0853][0854]
向三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-4-基酯(30mg，0.090mmol)及休尼格氏碱(0.047ml，0.270mmol)于dmf(1.5ml)中的溶液中，添加( /-)顺式-3-甲基-4-(4-(三氟甲基)苯氧基)哌啶的tfa盐(40.3mg，0.108mmol)，且在85℃下加热反应混合物隔夜。经由制备型lc/ms，用以下条件纯化粗材料：柱：xbridge c18，200mm
×
19mm，5μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.1％三氟乙酸；移动相b：95:5乙腈:水 0.1％三氟乙酸；梯度：在40％b保持0分钟，40-80％b历时20分钟，接着在100％b保持4分钟；流速：20ml/min；柱温度：25℃。通过ms信号触发级分收集。合并含有产物的级分且经由离心蒸发干燥。使用分析型lc/ms测定最终纯度。注射1条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射1结果：纯度：99.3％；质量观测值：442.98；保留时间：2.3min。注射2条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.1％三氟乙酸；移动相b：95:5乙腈:水 0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射2结果：纯度：100.0％；质量观测值：443.21；保留时间：2.33min。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.20-8.11(m,1h),8.11-8.02(m,1h),7.72-7.57(m,2h),7.32-7.12(m,2h),6.21-6.06(m,1h),4.84-4.63(m,1h),2.36-2.21(m,1h),2.10-1.90(m,2h),1.12-0.91(m,3h)。因为采用水抑制技术，所以未定出完全频谱。
[0855]
使用sfc-手性色谱，进一步分级分离外消旋产物。得到以下两种对映异构体且对其进行表征。
[0856]
实施例187
[0857]
5-甲基-8-(顺式-3-甲基-4-(4-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(rel)
[0858][0859]
使用分析型lc/ms测定最终纯度。注射1条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射1结果：纯度：97.5％；质量观测值：442.84；保留时间：2.25min。注射2条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.1％三氟乙酸；移动相b：95:5乙腈:水 0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射2结果：纯度：99.4％；质量观测值：443.07；保留时间：2.25min。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.22-8.12(m,1h),8.12-8.01(m,1h),7.69-7.58(m,2h),7.28-7.17(m,2h),6.23-6.09(m,1h),4.84-4.66(m,1h),2.39-2.19(m,1h),2.13-1.92(m,2h),1.12-0.88(m,3h)。因为采用水抑制技术，所以未定出完全频谱。
[0860]
实施例188
[0861]
5-甲基-8-(顺式-3-甲基-4-(4-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(rel)
[0862][0863]
使用分析型lc/ms测定最终纯度。注射1条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射1结果：纯度：96.4％；质量观测值：443.09；保留时间：2.26min。注射2条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.1％三氟乙酸；移动相b：95:5乙腈:水 0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射2结果：纯度：98.6％；质量观测值：443.07；保留时间：2.25min。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.23-8.11(m,
1h),8.11-8.02(m,1h),7.78-7.55(m,2h),7.31-7.15(m,2h),6.21-6.05(m,1h),4.82-4.62(m,1h),2.37-2.12(m,1h),2.06-1.92(m,2h),1.06-0.92(m,3h)。因为采用水抑制技术，所以未定出完全频谱。
[0864]
使用与先前表中呈现的方法相关的方法且采用三氟甲烷磺酸3,6-二氰基-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-4-基酯作为偶合搭配物以及适当官能化的( /-)顺式-3-甲基-4-芳基氧基哌啶中间体，制备以下实施例。使用如上文所描述的制备型hplc技术达成特定对映异构体的分离。
[0865][0866]
表11
[0867][0868]
使用与先前表中呈现的方法相关的方法且采用三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-4-基酯作为偶合搭配物以及适当官能化的( /-)反式-3-乙基-4-芳基氧基哌啶中间体，制备以下实施例。可使用如上文所描述的制备型hplc技术达成特定对映异构体的分离。
[0869][0870]
表12
[0871][0872][0873]
使用与先前表中呈现的方法相关的方法且采用三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-4-基酯作为偶合搭配物以及适当官能化的( /-)反式-3-甲基-4-芳基氧基哌啶中间体，制备以下实施例。可使用如上文所描述的制备型hplc技术达成特定对映异构体的分离。
[0874][0875]
表13
[0876][0877]
使用与在先前表中呈现的方法相关的方法且在sn
ar
反应中采用三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-4-基酯作为偶合搭配物以及适当官能化的( /-)顺式-3-乙基-4-芳基氧基哌啶中间体，可制备以下实施例。
[0878]
可使用如上文所描述的制备型hplc技术达成特定对映异构体的分离。
[0879][0880]
表14
[0881][0882]
使用与先前表中呈现的方法相关的方法且采用三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-4-基酯作为偶合搭配物以及适当官能化的( /-)顺式-3-甲基-4-芳基氧基哌啶中间体，制备以下实施例。可使用如上文所描述的制备型hplc技术达成特定对映异构体的分离。
[0883][0884]
表15
[0885]
[0886][0887]
实施例228
[0888]
( /-)8-(顺式-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈
[0889][0890]
向( /-)8-(顺式-4-羟基-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(30mg，0.101mmol)于无水n-甲基-2-吡咯烷酮(1.0ml)中的溶液中，添加氢化钠(60％于矿物油中，10.05mg，0.251mmol)。在室温下搅拌反应混合物5分钟，且接着添加2-氟-5-异丙氧基吡啶(0.018ml，0.151mmol)，且继续在室温下搅拌隔夜。反应物通过添加乙
酸(0.014ml，0.251mmol)淬灭，用乙腈稀释且接着过滤。经由制备型lc/ms，用以下条件纯化滤液：柱：xbridge c18，200mm
×
19mm，5μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 乙酸铵；梯度：在26％b保持0分钟，26-66％b历时30分钟，接着在100％b保持0分钟；流速：20ml/min；柱温度：25℃。通过ms及uv信号触发级分收集。合并含有产物的级分且经由离心蒸发干燥。产物产量为6.8mg，且其通过lcms分析所估计的纯度为100％。使用分析型lc/ms测定纯度。注射1条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射1结果：纯度：100％；质量观测值：434.20；保留时间：2.08min。注射2条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.1％三氟乙酸；移动相b：95:5乙腈:水 0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射2结果：纯度：100％；质量观测值：434.13；保留时间：2.04min。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.23-8.15(m,1h),8.14-8.03(m,1h),7.88-7.78(m,1h),7.46-7.35(m,1h),6.88-6.70(m,1h),6.19-6.08(m,1h),5.28-5.18(m,1h),4.60-4.47(m,1h),3.64-3.45(m,3h),2.40-2.28(m,1h),2.11-2.01(m,1h),2.01-1.89(m,1h),1.35-1.23(m,6h),1.10-0.94(m,3h)。外消旋。因为采用水抑制技术，所以未完全定出频谱。
[0891]
实施例229
[0892]
( /-)5-甲基-8-(反式-3-甲基-4-(4-(叔戊基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2,7-二甲腈
[0893][0894]
在微波管中，添加( /-)6-溴-1-甲基-4-(反式-3-甲基-4-(4-(叔戊基)苯氧基)哌啶-1-基)-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-3-甲腈的tfa盐(31mg，0.049mmol)、锌(0.636mg，9.73μmol)、氰化锌(3.43mg，0.029mmol)及1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(ii)二氯甲烷错合物(3.97mg，4.86μmol)。将管密封，抽真空且接着用氮气冲洗。接着添加nmp(1.5ml)，且在80℃下加热反应混合物4h。接着使混合物冷却，之后通过添加乙腈稀释至2ml的体积。过滤所得混合物，且通过制备型lc/ms，用以下条件来纯化粗物质溶液：柱：xbridge c18，200mm
×
19mm，5μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；梯度：在52％b保持0分钟，52-92％b历时20分钟，接着在100％b保持4分钟；流速：20ml/min；柱温度：25℃。通过ms及uv信号触发级分收集。合并含有产物的级分且经由离心蒸发干燥。产物产量为10.2mg，且其根据lcms分析的估计纯度为98％.使用分析型lc/ms
测定最终纯度。注射1条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射1结果：纯度：98.5％；质量观测值：469.88；保留时间：2.62min。注射2条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.1％三氟乙酸；移动相b：95:5乙腈:水 0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射2结果：纯度：98.8％；质量观测值：470.17；保留时间：2.61min。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.26(d,j＝8.9hz,1h),8.15(d,j＝9.2hz,1h),7.24(br d,j＝8.5hz,2h),6.96(br d,j＝8.5hz,2h),4.32(br dd,j＝7.5,4.4hz,1h),4.26-4.14(m,1h),4.26-4.11(m,1h),3.77-3.60(m,1h),2.36-2.25(m,1h),2.23-2.11(m,1h),1.78-1.63(m,1h),1.62-1.53(m,2h),1.22(s,6h),1.04(br d,j＝6.7hz,3h),0.64(br t,j＝7.2hz,3h)。外消旋。因为使用水抑制技术，所以并未定出全部信号。
[0895]
使用sfc-手性色谱进一步纯化外消旋材料。获得两种对映异构体。
[0896]
实施例230
[0897]
5-甲基-8-(反式-3-甲基-4-(4-(叔戊基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2,7-二甲腈(rel)
[0898][0899]
使用分析型lc/ms测定最终纯度。注射1条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射1结果：纯度：96.6％；质量观测值：470.36；保留时间：2.61min。注射2条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.1％三氟乙酸；移动相b：95:5乙腈:水 0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射2结果：纯度：95.8％；质量观测值：470.33；保留时间：2.60min。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.26(d,j＝8.9hz,1h),8.15(d,j＝9.2hz,1h),7.24(br d,j＝8.9hz,2h),6.96(br d,j＝8.5hz,2h),4.32(td,j＝8.7,4.0hz,1h),4.25-4.12(m,2h),3.78-3.62(m,1h),2.31(br dd,j＝12.5,2.7hz,1h),2.20(br d,j＝5.5hz,1h),1.76-1.66(m,1h),1.58(q,j＝7.3hz,2h),1.22(s,6h),1.03(br d,j＝6.4hz,3h),0.63(t,j＝7.3hz,3h。因为采用水抑制技术，所以未定出完全频谱。
[0900]
实施例231
[0901]
5-甲基-8-(反式-3-甲基-4-(4-(叔戊基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2,7-二甲腈(rel)
[0902][0903]
使用分析型lc/ms测定最终纯度。注射1条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射1结果：纯度：98.2％；质量观测值：470.34；保留时间：2.61min。注射2条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.1％三氟乙酸；移动相b：95:5乙腈:水 0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射2结果：纯度：95.6％；质量观测值：470.32；保留时间：2.6min。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.25(d,j＝8.9hz,1h),8.14(d,j＝9.2hz,1h),7.23(br d,j＝8.5hz,2h),6.96(br d,j＝8.5hz,2h),4.32(dt,j＝9.3,4.5hz,1h),4.25-4.11(m,2h),3.77-3.61(m,1h),2.31(br d,j＝9.8hz,1h),2.22-2.08(m,1h),1.76-1.64(m,1h),1.58(br d,j＝7.3hz,2h),1.21(s,6h),1.03(br d,j＝6.4hz,3h),0.63(t,j＝7.3hz,3h)。因为采用水抑制技术，所以未定出完全频谱。
[0904]
实施例232
[0905]
( /-)8-(4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3,3-二甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈
[0906][0907]
向( /-)2-((3,3-二甲基哌啶-4-基)氧基)-5-异丙氧基吡啶的tfa盐(24mg，0.063mmol)及n-乙基-n-异丙基丙-2-胺(0.040ml，0.231mmol)于dmf(1.5ml)中的溶液中，添加三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-4-基酯(19.21mg，
0.058mmol)，且在70℃下加热反应混合物隔夜。使混合物冷却至室温，且接着用乙腈稀释至2ml的体积。过滤此溶液，且接着使用制备型lc/ms，用以下条件分级分离：柱：xbridge c18，200mm
×
19mm，5μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；梯度：在40％b保持0分钟，40-80％b历时20分钟，接着在100％b保持0分钟；流速：20ml/min；柱温度：25℃。通过ms信号触发级分收集。合并含有产物的级分且经由离心蒸发干燥。产物产量为16.4mg，且其通过lcms分析所估计的纯度为100％。使用分析型lc/ms测定最终纯度。注射1条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射1结果：纯度：100％；质量观测值：448.32；保留时间：2.33min。注射2条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.1％三氟乙酸；移动相b：95:5乙腈:水 0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射2结果：纯度：100％；质量观测值：448.17；保留时间：2.17min。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.20-8.13(m,1h),8.08(d,j＝8.8hz,1h),7.82(d,j＝3.1hz,1h),7.39(dd,j＝9.0,2.9hz,1h),6.79(d,j＝8.9hz,1h),6.14(s,1h),4.90(br dd,j＝9.2,3.7hz,1h),4.52(dt,j＝12.0,6.1hz,1h),3.80(br d,j＝12.5hz,1h),3.23-3.15(m,1h),3.05(br d,j＝13.1hz,1h),2.16-2.06(m,1h),1.86(br dd,j＝9.0,4.1hz,1h),1.26(d,j＝5.8hz,5h),1.16(s,3h),1.03(s,3h)。因为采用水抑制技术，所以未定出完全频谱。
[0908]
通过scp，使用sfc-手性色谱来进一步纯化外消旋材料。获得两种对映异构体。实施例232为第一洗脱异构体。
[0909]
实施例233
[0910]
8-(4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3,3-二甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(rel)
[0911][0912]
产物产量为4.2mg，且其纯度为96％。使用分析型lc/ms测定最终纯度。注射1条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射1结果：纯度：99.3％；质量观测值：448.36；保留时间：2.19min。注射2条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.1％三氟乙酸；移动相b：95:5乙腈:水 0.1％三氟乙酸；温度：
50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射2结果：纯度：96.4％；质量观测值：447.92；保留时间：2.04min。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.18-8.14(m,1h),8.08(d,j＝8.9hz,1h),7.82(d,j＝3.1hz,1h),7.39(dd,j＝9.2,3.1hz,1h),6.79(d,j＝8.9hz,1h),6.14(s,1h),4.90(dd,j＝8.7,3.8hz,1h),4.52(dt,j＝12.0,6.1hz,1h),3.80(br d,j＝11.9hz,1h),3.55(s,1h),3.23-3.12(m,1h),3.05(br d,j＝12.2hz,1h),2.17-2.09(m,1h),1.85(br dd,j＝9.0,4.1hz,1h),1.26(d,j＝6.1hz,6h),1.16(s,3h),1.03(s,3h)。因为采用水抑制技术，所以未定出完全频谱。实施例233为第二洗脱异构体。
[0913]
实施例234
[0914]
8-(4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3,3-二甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(rel)
[0915][0916]
产物产量为3.6mg，且其纯度为98％。使用分析型lc/ms测定最终纯度。注射1条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射1结果：纯度：100％；质量观测值：448.38；保留时间：2.19min。注射2条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.1％三氟乙酸；移动相b：95:5乙腈:水 0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射2结果：纯度：97.5％；质量观测值：447.90；保留时间：2.04min。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.21-8.13(m,1h),8.08(d,j＝8.9hz,1h),7.82(d,j＝2.7hz,1h),7.39(dd,j＝8.9,3.1hz,1h),6.78(d,j＝9.2hz,1h),6.14(s,1h),4.90(dd,j＝8.9,4.0hz,1h),4.52(dt,j＝12.1,6.0hz,1h),3.80(br d,j＝12.2hz,1h),3.55(s,1h),3.25-3.13(m,1h),3.05(br d,j＝12.2hz,1h),2.15-2.09(m,1h),1.90-1.80(m,1h),1.26(d,j＝5.8hz,6h),1.16(s,3h),1.03(s,3h)。因为采用水抑制技术，所以未定出完全频谱。
[0917]
实施例235
[0918]
( /-)5-甲基-8-(顺式-3-甲基-4-((4-(三氟甲氧基)苯甲基)氧基)哌啶-1-基)-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈
[0919][0920]
向( /-)8-(顺式-4-羟基-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(25mg，0.084mmol)于thf(5ml)中的悬浮液中，添加氢化钠(4.02mg，0.084mmol)。在氮气下在室温下搅拌反应混合物10min。一次性添加1-(溴甲基)-4-(三氟甲氧基)苯(0.013ml，0.084mmol)，且在室温下搅拌反应混合物隔夜。添加两滴冰乙酸，且过滤混合物且接着使用制备型lc/ms，用以下条件纯化：柱：xbridge c18，200mm
×
19mm，5μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；梯度：在40％b保持0分钟，40-80％b历时20分钟，接着在100％b保持5分钟；流速：20ml/min；柱温度：25℃。通过uv信号触发级分收集。合并含有产物的级分且经由离心蒸发干燥。产物产量为1.8mg，且其根据lcms分析的估计纯度为99％。使用分析型lc/ms测定最终纯度。注射1条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射1结果：纯度：99.3％；质量观测值：473.15；保留时间：2.49min。注射2条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.1％三氟乙酸；移动相b：95:5乙腈:水 0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射2结果：纯度：99.1％；质量观测值：473.09；保留时间：2.38min。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.16-8.11(m,1h),8.08-8.03(m,1h),7.51(br d,j＝8.2hz,2h),7.38-7.32(m,2h),6.10-6.07(m,1h),4.64(br d,j＝12.2hz,1h),4.52(br d,j＝12.5hz,1h),3.71-3.64(m,1h),2.17(br s,1h),1.99(br s,1h),1.86-1.74(m,2h),1.03(br d,j＝6.7hz,3h)。因为在获取频谱中使用水抑制技术，所以未定出哌啶的全部质子。
[0921]
自相同粗材料中分离出额外组分实施例236。
[0922]
实施例236
[0923]
( /-)5-甲基-8-(顺式-3-甲基-4-((4-(三氟甲氧基)苯甲基)氧基)哌啶-1-基)-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲酰胺
[0924][0925]
经由制备型lc/ms，用以下条件，来纯化实施例235的粗材料：柱：xbridge c18，200mm
×
19mm，5μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；梯度：在40％b保持0分钟，40-80％b历时20分钟，接着在100％b保持5分钟；流速：20ml/min；柱温度：25℃。通过uv信号触发级分收集。合并含有产物的级分且经由离心蒸发干燥。产物产量为6.9mg，且其根据lcms分析的估计纯度为94％.使用分析型lc/ms测定最终纯度。注射1条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.1％三氟乙酸；移动相b：95:5乙腈:水 0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射1结果：纯度：96.2％；质量观测值：491.12；保留时间：2.03min。注射2条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射2结果：纯度：93.9％；质量观测值：491.15；保留时间：2.12min。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.22-8.14(m,1h),8.09-8.01(m,1h),7.83-7.74(m,1h),7.55-7.47(m,3h),7.41-7.30(m,2h),6.11-6.03(m,1h),4.73-4.62(m,1h),4.53-4.47(m,1h),3.73-3.64(m,1h),3.59-3.50(m,1h),3.43-3.32(m,1h),3.32-3.22(m,1h),2.27-2.15(m,1h),2.11-2.00(m,1h),1.03-0.93(m,3h)。因为在获取光谱中使用水抑制技术，所以未定出哌啶的全部质子。
[0926]
实施例237
[0927]
7-氟-5-甲基-6-氧代-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈
[0928]
[0929]
将5-甲基-6-氧代-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(25mg，0.056mmol)溶解于乙腈(0.4ml)与thf(0.2ml)的混合物中，且使所得混合物在氮气氛围下冷却至0℃。添加溶解于水与thf的1:1混合物(0.3ml)中的1-氯甲基-4-氟-1,4-二氮杂双环[2.2.2]辛烷双(四氟硼酸酯)(22.4mg，0.063mmol)，且使混合物升温至室温且继续搅拌2h。通过添加dmf将混合物稀释至1.8ml的体积，且经由制备型lc/ms，用以下条件，来纯化粗物质溶液：柱：xbridge c18，200mm
×
19mm，5μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；梯度：在40％b保持0分钟，40-80％b历时20分钟，接着在100％b保持5分钟；流速：20ml/min；柱温度：25℃。通过ms及uv信号触发级分收集。合并含有产物的级分且经由离心蒸发干燥。产物产量为12.6mg，且其通过lcms分析所估计的纯度为100％。使用分析型lc/ms测定最终纯度。注射1条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.75min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射1结果：纯度：100.0％；质量观测值：463.11；保留时间：2.26min。注射2条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.1％三氟乙酸；移动相b：95:5乙腈:水 0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.75min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射2结果：纯度：100.0％；质量观测值：463.11；保留时间：2.25min。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.18-8.13(m,1.0h),8.12-8.08(m,1.0h),7.28(br d,j＝8.2hz,2.0h),7.11(br d,j＝8.9hz,2.0h),4.69(dt,j＝7.6,3.5hz,1.0h),3.71(br d,j＝13.7hz,1.3h),3.60(s,0.5h),3.42(br j＝9.9hz,1.1h),2.18-2.07(m,2.0h),1.87-1.75(m,1.9h)。与水抑制频率相邻的信号呈现强度降低。所报告值未针对水抑制作用进行校正：质子解耦频谱中所观测到的
19
f信号：
19
f nmr(471mhz,dmso-d6)δ-57.23,-140.76ppm。
[0930]
实施例238
[0931]
7-氯-5-甲基-6-氧代-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈
[0932][0933]
将5-甲基-6-氧代-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(20mg，0.045mmol)溶解于无水dmf(0.4ml)中，且使溶液在氮气下冷却至0℃。接着添加ncs(9.4mg，0.070mmol)，且搅拌混合物5min，且接着加热至50℃持续2h。经由制备型lc/ms，用以下条件来纯化粗物质溶液：柱：xbridge c18，200mm
×
19mm，5μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；梯度：在41％b保持0分钟，
41-81％b历时25分钟，接着在100％b保持4分钟；流速：20ml/min；柱温度：25℃。通过ms及uv信号触发级分收集。合并含有产物的级分且经由离心蒸发干燥。产物产量为11.8mg，且其通过lcms分析所估计的纯度为100％。使用分析型lc/ms测定最终纯度。注射1条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.1％三氟乙酸；移动相b：95:5乙腈:水 0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.75min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射1结果：纯度：100.0％；质量观测值：479.08；保留时间：2.35min。注射2条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.75min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射2结果：纯度：100.0％；质量观测值：479.09；保留时间：2.39min。1h nmr(400mhz,氯仿-d)δ7.86-7.78(m,1.0h),7.76-7.70(m,1.0h),7.22-7.13(m,2.0h),7.03-6.93(m,2.0h),4.61(tt,j＝7.2,3.6hz,1.0h),3.90-3.78(m,2.1h),3.74(s,3.0h),3.57(ddd,j＝13.1,7.7,3.4hz,2.1h),2.28-2.18(m,2.0h),2.11-1.99(m,2.0h)。
[0934]
实施例239
[0935]
7-溴-5-甲基-6-氧代-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈
[0936][0937]
将5-甲基-6-氧代-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(20mg，0.045mmol)溶解于干燥一打兰小瓶中的dmf(0.45ml)中。添加nbs(9.1mg，0.051mmol)，且在氮气下在室温下搅拌混合物4h。接着添加一滴水，且通过添加乙腈将反应混合物稀释至1.8ml。经由制备型lc/ms，用以下条件来纯化此粗物质溶液：柱：xbridge c18，200mm
×
19mm，5μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；梯度：在45％b保持0分钟，45-85％b历时20分钟，接着在100％b保持5分钟；流速：20ml/min；柱温度：25℃。通过ms及uv信号触发级分收集。合并含有产物的级分且经由离心蒸发干燥。产物产量为14.3mg，且其根据lcms分析的估计纯度为95％。使用分析型lc/ms测定最终纯度。注射1条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.75min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射1结果：纯度：95.1％；质量观测值：523.03；保留时间：2.4min。注射2条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.1％三氟乙酸；移动相b：95:5乙腈:水 0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保
持0.75min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射2结果：纯度：96.2％；质量观测值：523.01；保留时间：2.4min。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.20-8.15(m,1.0h),8.15-8.09(m,1.0h),7.28(br d,j＝8.5hz,2.0h),7.13(br d,j＝8.9hz,2.0h),4.72(dt,j＝7.8,4.0hz,1.0h),3.72-3.60(m,1.6h),3.53-3.43(m,0.4h),2.14(br d,j＝10.1hz,2.0h),1.92-1.78(m,2.0h)。与3.57ppm的水抑制频率相邻的信号呈现强度降低。
[0938]
实施例240
[0939]
7-(6-甲氧基吡啶-3-基)-5-甲基-6-氧代-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈
[0940][0941]
在干燥一打兰小瓶中，置放双(三苯基膦)二氯化钯(ii)(3.9mg，5.56μmol)、氯化亚铜(i)(19.1mg，0.193mmol)、氯化锂(13mg，0.307mmol)及7-溴-5-甲基-6-氧代-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(25mg，0.048mmol)及2-甲氧基-5-(三丁基锡烷基)吡啶(34mg，0.085mmol)。添加无水dmso(0.48ml)，且将小瓶密封，抽真空且接着用氮气冲洗。接着在100℃下加热反应混合物隔夜。接着使其冷却且过滤，且通过添加dmf将体积调整至1.8ml。经由制备型lc/ms，用以下条件来纯化粗物质溶液：柱：xbridge c18，200mm
×
19mm，5μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；梯度：在45％b保持0分钟，45-85％b历时20分钟，接着在100％b保持4分钟；流速：20ml/min；柱温度：25℃。通过ms及uv信号触发级分收集。合并含有产物的级分且经由离心蒸发干燥。产物产量为15.1mg，且其根据lcms分析的估计纯度为96％.使用分析型lc/ms测定最终纯度。注射1条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.75min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射1结果：纯度：97.1％；质量观测值：552.13；保留时间：2.4min。注射2条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.1％三氟乙酸；移动相b：95:5乙腈:水 0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.75min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射2结果：纯度：96.0％；质量观测值：552.15；保留时间：2.28min。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.19-8.13(m,1.1h),8.12-8.07(m,1.0h),8.05(s,1.0h),7.65(br d,j＝9.2hz,1.1h),7.23(br d,j＝8.2hz,2.1h),7.04(br d,j＝8.9hz,2.1h),6.91(d,j＝8.5hz,1.0h),4.53(br s,1.0h),3.89(s,2.9h),3.59(s,0.3h),3.23(br d,j＝12.8hz,1.5h),2.82(br t,j＝10.2hz,1.9h),1.96(br d,j＝11.3hz,2.0h),1.76-1.64(m,2.1h)。所报告值未针对水抑制作用进行校正。
[0942]
实施例241
[0943]
7-(2-甲氧基吡啶-4-基)-5-甲基-6-氧代-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈
[0944][0945]
在干燥一打兰小瓶中，负载双(三苯基膦)二氯化钯(ii)(3.7mg，5.27μmol)、氯化亚铜(i)(19.0mg，0.192mmol)、氯化锂(13.2mg，0.311mmol)、3-溴-1-甲基-2-氧代-4-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,2-二氢喹啉-6-甲腈(25mg，0.048mmol)及2-甲氧基-4-(三丁基锡烷基)吡啶(32mg，0.080mmol)。添加无水dmso(0.48ml)，且将小瓶密封，抽真空且接着用氮气冲洗。接着在100℃下加热反应混合物隔夜。接着使其冷却且过滤，且通过添加dmf将体积调整至1.8ml。通过制备型lc/ms，用以下条件来纯化粗物质溶液：柱：xbridge c18，200mm
×
19mm，5μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；梯度：在44％b保持0分钟，44-84％b历时20分钟，接着在100％b保持4分钟；流速：20ml/min；柱温度：25℃。通过ms及uv信号触发级分收集。合并含有产物的级分且经由离心蒸发干燥。产物产量为12.7mg，且其根据lcms分析的估计纯度为97％.使用分析型lc/ms测定最终纯度。注射1条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.75min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射1结果：纯度：97.8％；质量观测值：552.14；保留时间：2.37min。注射2条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.1％三氟乙酸；移动相b：95:5乙腈:水 0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.75min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射2结果：纯度：96.6％；质量观测值：552.15；保留时间：2.14min。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.24-8.15(m,2.0h),8.13-8.07(m,1.0h),7.23(br d,j＝8.5hz,2.0h),7.04(br d,j＝8.9hz,2.1h),6.88(br d,j＝4.9hz,1.0h),6.74(s,1.0h),4.62-4.50(m,1.0h),3.88(s,2.7h),3.59-3.56(m,0.3h),3.25(br d,j＝13.7hz,1.3h),2.84(br t,j＝10.1hz,1.8h),1.97(br d,j＝10.7hz,2.0h),1.77-1.65(m,2.0h)。所报告值未针对水抑制作用进行校正。
[0946]
实施例242
[0947]
( /-)6-溴-1-甲基-4-(反式-3-甲基-4-(4-(叔戊基)苯氧基)哌啶-1-基)-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-3-甲腈
nh4oac:乙腈(95:5)；移动相b：10mm nh4oac:乙腈(5:95)，梯度＝20-90％b历时1.1分钟，接着在90％b保持0.6分钟；温度：50℃；流速：0.7ml/min；检测：uv，220nm。
[0958]
方法b：柱：ascentis express c18(2.1
×
50mm)，2.7μm；移动相a：10mm nh4oac:乙腈(95:5)，移动相b：10mm nh4oac:乙腈(5:95)，梯度＝0-100％b历时3分钟；温度：50℃；流速：1.1ml/min；检测：uv，220nm。
[0959]
方法c：柱：xbridge beh xp c18(50
×
2.1mm)，2.5μm；移动相a：95％水:5％乙腈 10mm乙酸铵；移动相b：5％水:95％乙腈 10mm乙酸铵；流速：1.1ml/min；温度：50℃；时间(min)：0-3；b％：0-100％)
[0960]
方法d：柱：kinetex xb-c18(3
×
75mm)2.6μm；移动相a：10mm甲酸铵:乙腈(98:2)，移动相b：10mm甲酸铵:乙腈(2:98)，梯度＝20-100％b历时4分钟，接着在100％b保持0.6分钟；温度：27℃；流速：1.0ml/min；检测：uv，220nm。
[0961]
中间体73
[0962]
3-((3-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)氨基)丁酸乙酯
[0963][0964]
在回流下加热3-氨基丁酸乙酯(25g，191mmol)、甲基丙烯酸甲酯(50ml，191mmol)、乙酸(1.5ml，26.2mmol)及乙醇(40ml)的混合物16h。将反应混合物冷却至室温且倒入含有乙醚(300ml)的烧杯中。分离出固体且用乙醚(50ml)洗涤。有机相用nahco3饱和溶液(2
×
50ml)、盐水(30ml)洗涤，经na2so4干燥且减压蒸发，得到呈黄色液体状的3-((3-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)氨基)丁酸乙酯。lcms：m/z，232.2(m h)；rt 1.42min；lcms方法：柱-kinetex xb-c18(75
×
3mm-2.6μm)；移动相a：水( 10mm nh4cooh):乙腈(98:2)，移动相b：水( 10mm nh4cooh):乙腈(2:98)，梯度＝20-100％b历时4.0分钟，流速：1.0ml；接着在100％b保持0.6分钟，流速：1.5ml；接着100-20％b历时0.1min，流速：1.5ml；接着在20％b保持0.3分钟，流速：1.5ml；检测：elsd。
[0965]
中间体73a及73b
[0966]
(
±
)-顺式叔丁基-2,5-二甲基-4-氧代哌啶-1-甲酸酯及(
±
)-反式叔丁基-2,5-二甲基-4-氧代哌啶-1-甲酸酯
[0967][0968]
将金属钠(2.98g，130mmol)溶解于二甲苯(100ml)中且加热至100℃，向溶液中缓慢添加3-氨基丁酸乙酯及3-((3-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)氨基)丁酸乙酯(30g，130mmol)于二甲苯(30ml)中的混合物。继续在140℃下加热2h。将反应混合物冷却至室温，且减压移除二甲苯，得到呈棕色固体状的粗物质3-(乙氧羰基)-2,5-二甲基-4-哌啶酮。在0℃下，在2h中，向此粗混合物中缓慢添加20％hcl(100ml)。在室温下搅拌反应混合物2h，且在100℃下回流16h。将反应混合物冷却至室温且减压蒸发，得到呈棕色固体状的粗物质。将残余物溶解于甲醇(450ml)中，且添加tea(50ml，359mmol)及boc-酸酐(50ml，215mmol)。将
反应混合物加热至回流持续2h，冷却至室温，且减压蒸发溶剂。将残余物溶解于乙醚(400ml)中，用水(2
×
50ml)、盐水(2
×
50ml)洗涤，经干燥且减压蒸发，得到棕色液体，通过硅胶色谱(elsd法)使用己烷/乙酸乙酯(80:20)作为洗脱剂来纯化，得到顺式-哌啶酮及反式-哌啶酮。
[0969]
中间体73a：(
±
)-顺式哌啶酮异构体(固体)：lcms：m/z，[(m-boc) h]172.2；rt 2.29min；lcms方法：柱-kinetex xb-c18(75
×
3mm-2.6μm)；移动相a：水( 10mm nh4cooh):乙腈(98:2)，移动相b：水( 10mm nh4cooh):乙腈(02:98)，梯度＝20-100％b历时4.0分钟，流速：1.0ml；接着在100％b保持0.6分钟，流速：1.5ml；接着100-20％b历时0.1min，流速：1.5ml；接着在20％b保持0.3分钟，流速：1.5ml；检测：elsd。1h nmr(cdcl3)δppm 4.87-4.52(m,1h),4.38-4.15(m,1h),2.84-2.82(m,1h),2.68(dd,j＝6.8hz,j＝13.6hz,1h),2.54-2.52(m,1h),2.25(dd,j＝2.0hz,j＝13.6hz,1h),1.51(s,9h),1.15(d,j＝6.8hz,3h),1.02(d,j＝6.4hz,3h)。
[0970]
中间体73b：(
±
)-反式哌啶酮异构体(黄色液体)：lcms：m/z，[(m-boc) h]172.2；rt 2.19min。lcms方法：柱-kinetex xb-c18(75
×
3mm-2.6μm)；移动相a：水( 10mm nh4cooh):乙腈(98:02)，移动相b：水( 10mm nh4cooh):乙腈(2:98)，梯度＝20-100％b历时4.0分钟，流速：1.0ml；接着在100％b保持0.6分钟，流速：1.5ml；接着100-20％b历时0.1min，流速：1.5ml；接着在20％b保持0.3分钟，流速：1.5ml；检测：elsd。1h nmr(cdcl3)δppm 4.60-4.56(m,1h),3.77(dd,j＝4.6hz,j＝13.8hz,1h),3.64(dd,j＝4.4hz,j＝13.8hz,1h),2.64(dd,j＝6.8hz,j＝15.2hz,1h),2.53-2.48(m,1h),2.09(dd,j＝3.6hz,j＝15.2hz,1h),1.47(s,9h),1.14(d,j＝7.2hz,3h),1.05(d,j＝6.4hz,3h)。
[0971]
中间体74
[0972]
(
±
)-顺式-叔丁基-4-羟基-2,5-二甲基哌啶-1-甲酸酯
[0973][0974]
向在0℃下的(
±
)-顺式-叔丁基-2,5-二甲基-4-氧代哌啶-1-甲酸酯(800mg，3.52mmol)于无水meoh(6.0ml)中的搅拌溶液中，添加硼氢化钠(333mg，8.80mmol)，且在室温下搅拌2h。用饱和碳酸氢钠溶液淬灭反应物。向混合物中添加乙酸乙酯且搅拌混合物10分钟。分离有机层，且用乙酸乙酯(2
×
50ml)萃取水层。经合并的有机层经硫酸钠干燥且减压蒸发，得到(
±
)-顺式-叔丁基-4-羟基-2,5-二甲基哌啶-1-甲酸酯的非对映异构混合物。lcms：m/z，230.2[m h]；rt 2.0min。lcms方法：柱-kinetex xb-c18(75
×
3mm-2.6μm)；移动相a：水( 10mm nh4cooh):乙腈(98:02)，移动相b：水( 10mm nh4cooh):乙腈(02:98)，梯度＝20-100％b历时4.0分钟，流速：1.0ml；接着在100％b保持0.6分钟，流速：1.5ml；接着100-20％b历时0.1min，流速：1.5ml；接着在20％b保持0.3分钟，流速：1.5ml；检测：elsd。
[0975]
中间体75
[0976]
(
±
)-顺式-叔丁基-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2,5-二甲基哌啶-1-甲酸酯
[0977][0978]
在氮气氛围下，向(
±
)-顺式-叔丁基-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2,5-二甲基哌啶-1-甲酸酯(500mg，2.18mmol)及2-氟-5-异丙氧基吡啶(338mg，2.18mmol)于dmso(15ml)中的混合物中，添加叔丁醇钾(294mg，2.62mmol)。在室温下搅拌反应混合物16h。反应混合物用乙醚稀释，用水洗涤，经硫酸钠干燥且减压蒸发，得到粗产物，通过硅胶色谱(elsd法)使用己烷/乙酸乙酯(80:20)作为洗脱剂来纯化该粗产物，得到(
±
)-顺式-(2s,5s)-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2,5-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯。lcms：m/z，365.2[m h]；rt 4.0min。lcms方法：柱-kinetex xb-c18(75
×
3mm-2.6μm)；移动相a：水( 10mm nh4cooh):乙腈(98:02)，移动相b：水( 10mm nh4cooh):乙腈(2:98)，梯度＝20-100％b历时4.0分钟，流速：1.0ml；接着在100％b保持0.6分钟，流速：1.5ml；接着100-20％b历时0.1min，流速：1.5ml；接着在20％b保持0.3分钟，流速：1.5ml；检测：elsd。
[0979]
中间体76
[0980]
(
±
)-顺式-2-(2,5)-二甲基哌啶-4-基)氧基)-5-异丙氧基吡啶
[0981][0982]
在室温下，向(
±
)-顺式-叔丁基-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2,5-二甲基哌啶-1-甲酸酯(350mg，0.96mmol)于dcm(5.0ml)中的溶液中，添加tfa(0.370ml，4.80mmol)。搅拌反应混合物4h。减压蒸发反应混合物，得到淡黄色液体(
±
)-顺式-2-(2,5)-二甲基哌啶-4-基)氧基)-5-异丙氧基吡啶。lcms：m/z，265.2[m h]；rt 1.58min。lcms方法：柱-kinetex xb-c18(75
×
3mm-2.6μm)；移动相a：水( 10mm nh4cooh):乙腈(98:2)，移动相b：水( 10mm nh4cooh):乙腈(2:98)，梯度＝20-100％b历时4.0分钟，流速：1.0ml；接着在100％b保持0.6分钟，流速：1.5ml；接着100-20％b历时0.1min，流速：1.5ml；接着在20％b保持0.3分钟，流速：1.5ml；检测：elsd。
[0983]
实施例243至246
[0984]
(
±
)-顺式-(-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2,5-二甲基哌啶-1-基)-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈
[0985][0986][0987]
向(
±
)-顺式-6-氯-4-(-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2,5-二甲基哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1h)-酮(50mg，0.11mmol)于thf(2.0ml)及水(1.0ml)中的搅拌溶液中，添加氰化锌(25.6mg，0.22mmol)。混合物用氩气吹扫5分钟，且在室温下添加氯[2-(二-叔丁基膦)-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯基][2-(2-胺乙基)苯基)]钯(ii),[2-(二-叔丁基膦)-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯基][2-(2-胺乙基)苯基)]氯化钯(ii)(tbuxphos-pd-g1)(0.750mg，1.09μmol)。在40℃下加热反应混合物24h。将反应混合物冷却至室温，减压浓缩，用二氯甲烷稀释，用水洗涤，经硫酸钠干燥，减压蒸发，得到粗产物，通过制备型hplc纯化粗产物，得到外消旋体混合物1及外消旋体混合物2。制备型hplc方法：柱：sunfire c-18(150mm
×
21.2mm id，5μm)，移动相a＝10mm乙酸铵/水，移动相b＝乙腈:meoh(1:1)，梯度：在60％b保持0分钟，72％b历时25分钟，流速：20ml/min。
[0988]
手性分离外消旋体混合物1，得到实施例243(rt＝8.24min)及实施例244(rt＝9.22min)。手性hplc方法：cellulose-5(250
×
21.2)mm-5μm，移动相a：乙腈( 0.1％dea):meoh(90:10)，移动相b：流速：22ml/min。
[0989]
手性分离上文外消旋体混合物2，得到实施例245(rt＝16.2min)及实施例246(rt＝20.0min)。手性hplc方法：cellulose-5(250
×
21.2)mm-5μm，移动相a：乙腈( 0.1％dea):meoh(90:10)，移动相b：流速：22ml/min。
[0990]
实施例243：lcms：m/z，449.2[m h]；rt 2.86min。lcms方法：柱：kinetex xb-c18(3
×
75mm)2.6μm；移动相a：10mm甲酸铵:乙腈(98:2)，移动相b：10mm甲酸铵:乙腈(2:98)，梯度＝20-100％b历时4分钟，接着在100％b保持0.6分钟；温度：27℃；流速：1.0ml/min；检测：uv，220nm。
[0991]
实施例244：lcms：m/z，449.2[m h]；rt 2.85min。lcms方法：柱：kinetex xb-c18(3
×
75mm)2.6μm；移动相a：10mm甲酸铵:乙腈(98:2)，移动相b：10mm甲酸铵:乙腈(2:98)，梯度
＝20-100％b历时4分钟，接着在100％b保持0.6分钟；温度：27℃；流速：1.0ml/min；检测：uv，220nm。
[0992]
实施例245：m/z，449.2[m h]；rt 2.91min。lcms方法：柱：kinetex xb-c18(3
×
75mm)2.6μm；移动相a：10mm甲酸铵:乙腈(98:2)，移动相b：10mm甲酸铵:乙腈(2:98)，梯度＝20-100％b历时4分钟，接着在100％b保持0.6分钟；温度：27℃；流速：1.0ml/min；检测：uv，220nm。
[0993]
实施例246：lcms：m/z，449.2[m h]；rt 2.91min。lcms方法：柱：kinetex xb-c18(3
×
75mm)2.6μm；移动相a：10mm甲酸铵:乙腈(98:2)，移动相b：10mm甲酸铵:乙腈(2:98)，梯度＝20-100％b历时4分钟，接着在100％b保持0.6分钟；温度：27℃；流速：1.0ml/min；检测：uv，220nm。
[0994]
根据相同通用程序，例如243至246，通过用适当哌啶异构体替代(
±
)-顺式-叔丁基-4-羟基-2,5-二甲基哌啶-1-甲酸酯，制备表16中的实施例。当反应得到非对映异构体混合物时，在最后阶段利用制备型手性色谱来分离混合物。在新形成的碳-氧键处不指定绝对立体化学。
[0995]
表16
[0996]
[0997][0998]
根据通用程序，例如243-246，通过用1-氟-3-(三氟甲基)苯替代2-氟-5-异丙氧基吡啶以及适当哌啶，制备表17中的实施例。当反应得到非对映异构体混合物时，在最后阶段利用制备型手性色谱来分离混合物。在新形成的碳-氧键处不指定绝对立体化学。
[0999]
表17
[1000]
[1001][1002]
根据通用程序，例如243-246，通过用1-氟-3-(三氟甲基)苯替代2-氟-5-异丙氧基吡啶，制备表18中的实施例。当反应得到非对映异构体混合物时，在最后阶段利用制备型手性色谱来分离混合物。在新形成的碳-氧键处不指定绝对立体化学。
[1003]
表18
[1004][1005]
中间体77及78
[1006]
(
±
)-反式-叔丁基-3-羟基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-甲酸酯(i-78)及(
±
)-反式-叔丁基-4-羟基-3-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-甲酸酯(i-79)
[1007][1008]
在室温下，向叔丁基-7-氧杂-3-氮杂双环[4.1.0]庚烷-3-甲酸酯(1.5g，7.53mmol)于乙醇(15ml)中的搅拌溶液中，添加k2co3(1.04g，7.53mmol)及3-(三氟甲基)苯酚(1.22g，7.53mmol)。将反应混合物加热至80℃持续3h。将反应混合物冷却至室温，经由硅藻土垫过滤，用过量etoh洗涤，且减压浓缩滤液，得到粗产物。粗残余物经由急骤色谱，使用24g硅胶柱且用30％etoac/石油醚洗脱来纯化，得到(
±
)-反式-叔丁基-4-羟基-3-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-甲酸酯及(
±
)-反式-叔丁基-3-羟基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-甲酸酯。
[1009]
中间体77：lcms：m/z，262.2(m-100)；rt 1.76min。(lcms方法：柱：waters acquity uplc beh c18(2.1
×
50mm)1.7μm，移动相a：10mm nh4oac:乙腈(95:5)；移动相b：10mm nh4oac:乙腈(5:95)，梯度＝20-100％b历时2分钟，接着在100％b保持0.3分钟；温度：50℃；流速：0.7ml/min；检测：uv，220nm)。
[1010]
中间体78：lcms：m/z，262.2(m-100)；rt 1.82min。(lcms方法：柱：waters acquity uplc beh c18(2.1
×
50mm)1.7μm，移动相a：10mm nh4oac:乙腈(95:5)；移动相b：10mm nh4oac:乙腈(5:95)，梯度＝20-100％b历时2分钟，接着在100％b保持0.3分钟；温度：50℃；流速：0.7ml/min；检测：uv，220nm)。
[1011]
中间体79
[1012]
(
±
)-反式-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-3-醇
·
hcl
[1013][1014]
在0℃下，向(
±
)-反式-叔丁基-3-羟基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-甲酸酯(170mg，0.47mmol)于dcm(5ml)中的搅拌溶液中，添加hcl(4m，于二噁烷中)(0.6ml，2.36mmol)。在室温下搅拌反应混合物3h。减压蒸发溶剂，得到(
±
)-反式-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-3-醇
·
hcl。lcms：m/z，262.2(m 1)；rt 1.01min。(lcms方法：柱：waters acquity uplc beh c18(2.1
×
50mm)1.7μm，移动相a：10mm nh4oac:乙腈(95:5)；移动相b：10mm nh4oac:乙腈(5:95)，梯度＝20-100％b历时2分钟，接着在100％b保持0.3分钟；温度：50℃；流速：0.7ml/min；检测：uv，220nm)。
[1015]
实施例259及260
[1016]
( /-)-反式-8-(3-羟基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈
[1017][1018]
向(
±
)-反式-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-3-醇
·
hcl(140mg，0.47mmol)于乙腈(5ml)中的搅拌溶液中，添加dipea(0.4ml，2.35mmol)，随后添加三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-4-基酯(188mg，0.56mmol)。在85℃下加热反应混合物隔夜。将反应混合物冷却至室温，且减压移除溶剂，得到粗产物，通过制备型hplc纯化该粗产物(柱：dad-1-cellulose-5(250
×
4.6mm)，5μm，移动相：10mm乙酸铵/meoh，流速：1.5ml/min，注射体积：8.0μl，运行时间：25min)。
[1019]
实施例259：lcms：m/z＝445.2(m h)；rt 1.75min；(lcms方法：waters xbridge c18，19
×
150mm，5μm粒子；移动相a：10mm乙酸铵；移动相b：乙腈；梯度：20-65％b历时20分钟，接着在100％b保持5分钟；流速：15ml/min)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.22-8.13(m,1h),8.11-7.98(m,1h),7.59-7.47(m,1h),7.36(br d,j＝4.9hz,2h),7.28(d,j＝7.8hz,1h),6.16(s,1h),4.50-4.46(m,2h),4.08(br dd,j＝3.8,12.8hz,1h),3.94-3.87(m,1h),3.81(dt,j＝4.4,8.3hz,1h),3.54(s,3h),3.34-3.22(m,1h),3.12(dd,j＝9.0,12.7hz,1h),2.26-2.17(m,1h)。
[1020]
实施例260：lcms：m/z＝445.2(m h)；rt 1.75min；(lcms方法：waters xbridge c18，19
×
150mm，5μm粒子；移动相a：10mm乙酸铵；移动相b：乙腈；梯度：20-65％b历时20分钟，接着在100％b保持5分钟；流速：15ml/min)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.22-8.14(m,1h),8.12-8.03(m,1h),7.58-7.47(m,1h),7.42-7.32(m,2h),7.28(d,j＝8.1hz,1h),6.16(s,1h),5.60-5.34(m,1h),4.53-4.42(m,1h),4.15-4.05(m,1h),3.96-3.86(m,1h),3.84-3.77(m,1h),3.54(s,3h),3.28(br s,1h),3.12(dd,j＝9.4,12.6hz,1h),2.26-2.18(m,1h)。
[1021]
中间体80
[1022]
(
±
)-反式-叔丁基-3-甲氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-甲酸酯
[1023][1024]
在0℃下，向(
±
)-反式-叔丁基-3-羟基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-甲酸酯(100mg，0.28mmol)于thf(5ml)中的搅拌溶液中，添加nah(60％，于矿物油中)(44.3mg，
c18，19
×
150mm，5μm粒子；移动相a：10mm乙酸铵；移动相b：乙腈；梯度：20-65％b历时20分钟，接着在100％b保持5分钟；流速：15ml/min。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝8.23-8.16(m,1h),8.13-8.07(m,1h),7.59-7.47(m,1h),7.44-7.34(m,2h),7.30(d,j＝7.8hz,1h),6.17(s,1h),4.71-4.58(m,1h),4.32-4.22(m,1h),3.75-3.65(m,1h),3.62-3.53(m,4h),3.41(s,3h),3.27-3.19(m,2h),2.27-2.16(m,1h),1.82-1.66(m,1h)。
[1034]
实施例262：lcms：m/z，459.2(m h)；rt 2.04min；lc/ms方法：柱：waters xbridge c18，19
×
150mm，5μm粒子；移动相a：10mm乙酸铵；移动相b：乙腈；梯度：20-65％b历时20分钟，接着在100％b保持5分钟；流速：15ml/min。1h nmr(400mhz,dmso-d6):δppm 8.23-8.15(m,1h),8.14-8.07(m,1h),7.60-7.48(m,1h),7.46-7.34(m,2h),7.30(d,j＝8.3hz,1h),6.17(s,1h),4.72-4.60(m,1h),4.32-4.20(m,1h),3.74-3.65(m,1h),3.64-3.55(m,1h),3.54(s,3h),3.41(s,3h),3.27-3.16(m,2h),2.27-2.16(m,1h),1.80-1.69(m,1h)。
[1035]
根据实施例259及260中所公开的通用程序，由适当烷基卤化物制备表19中的实施例。
[1036]
表19
[1037][1038]
中间体82
[1039]
(
±
)-反式-叔丁基-4-甲氧基-3-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-甲酸酯
[1040][1041]
在0℃下，向(
±
)-反式-叔丁基-4-羟基-3-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-甲酸酯(75mg，0.21mmol)于thf(3ml)中的搅拌溶液中，添加nah(60％，于矿物油中)(34mg，0.83mmol)。在5分钟之后，添加碘甲烷(0.03ml，0.41mmol)于thf(1ml)中的溶液，且在室温下搅拌反应混合物2h。将反应混合物冷却至0℃。用冰冷的水淬灭反应物，且用etoac(2
×
50ml)萃取反应混合物。经合并的有机萃取物用盐水洗涤，经na2so4干燥且浓缩，得到(
±
)-反式-叔丁基-4-甲氧基-3-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-甲酸酯。lcms：m/z，276.1(m-100)；rt 2.10min。(lcms方法：柱：waters acquity uplc beh c18(2.1
×
50mm)1.7μm，移动
相a：10mm nh4oac:乙腈(95:5)；移动相b：10mm nh4oac:乙腈(5:95)，梯度＝20-100％b历时2分钟，接着在100％b保持0.3分钟；温度：50℃；流速：0.7ml/min；检测：uv，220nm)。
[1042]
中间体83
[1043]
(
±
)-反式-4-甲氧基-3-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶
·
hcl
[1044][1045]
在0℃下，向(
±
)-反式-叔丁基-4-甲氧基-3-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-甲酸酯(75mg，0.20mmol)于dcm(5ml)中的搅拌溶液中，添加hcl(4m，于二噁烷中)(0.25ml，1.00mmol)。使反应混合物升温至室温且搅拌3h。减压蒸发溶剂，得到(
±
)-反式-4-甲氧基-3-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶
·
hcl。lcms：m/z，276.1(m 1)；rt 1.13min。(lcms方法：柱：waters acquity uplc beh c18(2.1
×
50mm)1.7μm，移动相a：10mm nh4oac:乙腈(95:5)；移动相b：10mm nh4oac:乙腈(5:95)，梯度＝20-100％b历时2分钟，接着在100％b保持0.3分钟；温度：50℃；流速：0.7ml/min；检测：uv，220nm)。
[1046]
实施例265及266
[1047]
(
±
)-顺式-8-(3-氟-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈
[1048][1049]
在-78℃下，向(
±
)-反式-8-(3-羟基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(130mg，0.29mmol)于dcm(2ml)中的搅拌溶液中，添加dast(0.05ml，0.35mmol)。在室温下搅拌反应混合物16h。用饱和nahco3溶液淬灭反应物。用dcm(2
×
50ml)萃取反应混合物。经合并的有机萃取物用水、盐水洗涤，经na2so4干燥且浓缩，得到粗产物，通过制备型hplc纯化该粗产物[方法：柱：waters xbridge c18，19
×
150mm，5μm粒子；移动相a：10mm乙酸铵；移动相b：乙腈；梯度：17-52％b历时19分钟，接着在20％b保持5分钟；流速：20ml/min]。
[1050]
实施例265：lcms：m/z，447.2(m h)；rt 1.92min；lc/ms方法：柱：waters xbridge c18，19
×
150mm，5μm粒子；移动相a：10mm乙酸铵；移动相b：乙腈；梯度：20-65％b历时20分钟，接着在100％b保持5分钟；流速：15ml/min。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝8.21-8.11(m,1h),8.05(d,j＝9.0hz,1h),7.62-7.46(m,1h),7.37-7.19(m,3h),5.83(s,1h),5.53-5.42(m,1h),5.30(d,j＝4.2hz,1h),4.95-4.72(m,1h),4.66-4.45(m,1h),3.79-3.68(m,1h),3.64-3.54(m,1h),3.52(s,3h),2.55-2.45(m,1h)2.26-2.12(m,1h)。
[1051]
实施例266：lcms：m/z，447.2(m h)；rt 2.01min；lc/ms方法：柱：waters xbridge c18，19
×
150mm，5μm粒子；移动相a：10mm乙酸铵；移动相b：乙腈；梯度：20-65％b历时20分钟，接着在100％b保持5分钟；流速：15ml/min。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δppm 8.24-8.17(m,1h),8.14-8.07(m,1h),7.61-7.50(m,1h),7.46-7.37(m,2h),7.33(d,j＝7.6hz,1h),6.25(s,1h),4.99-4.77(m,1h),4.32-4.19(m,1h),3.83-3.70(m,1h),3.55(s,3h),3.48(br dd,j＝5.1,13.4hz,1h),3.40-3.27(m,2h),2.35-2.19(m,1h),1.86-1.72(m,1h)。
[1052]
中间体84
[1053]
(
±
)-反式-叔丁基-3-羟基-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-甲酸酯
[1054][1055]
在室温下，向7-氧杂-3-氮杂双环[4.1.0]庚烷-3-甲酸叔丁酯(250mg，1.25mmol)于etoh(3ml)中的搅拌溶液中，添加k2co3(173mg，1.25mmol)及5-异丙氧基吡啶-2-醇(192mg，1.25mmol)。在80℃下加热反应混合物16h。将反应混合物冷却至室温，经由硅藻土垫过滤，用过量etoh洗涤，且减压浓缩滤液，得到粗产物。粗残余物经由24g硅胶柱急骤色谱且用30％etoac/石油醚洗脱来纯化，得到(
±
)-反式-叔丁基-3-羟基-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-甲酸酯。lcms：m/z，353.2(m 1)；rt 1.71min。(lcms方法：柱：waters acquity uplc beh c18(2.1
×
50mm)1.7μm，移动相a：10mm nh4oac:乙腈(95:5)；移动相b：10mm nh4oac:乙腈(5:95)，梯度＝20-100％b历时2分钟，接着在100％b保持0.3分钟；温度：50℃；流速：0.7ml/min；检测：uv，220nm)。
[1056]
中间体85
[1057]
(
±
)-反式-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-3-醇
·
hcl
[1058][1059]
在0℃下，向(
±
)-反式-叔丁基-3-羟基-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-甲酸酯(100mg，0.28mmol)于dcm(5ml)中的搅拌溶液中，添加hcl(4m，于二噁烷中)(0.35ml，1.42mmol)。在室温下搅拌反应混合物3h。减压蒸发溶剂，得到(
±
)-反式-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-3-醇
·
hcl。lcms：m/z，253.2(m 1)；rt 0.76min。(lcms方法：柱：waters acquity uplc beh c18(2.1
×
50mm)1.7μm，移动相a：10mm nh4oac:乙腈(95:5)；移动相b：10mm nh4oac:乙腈(5:95)，梯度＝20-100％b历时2分钟，接着在100％b保持0.3分钟；温度：50℃；流速：0.7ml/min；检测：uv，220nm)。
[1060]
实施例267及268
[1061]
(
±
)-反式-8-(3-羟基-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈
[1062][1063]
向(
±
)-反式-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-3-醇
·
hcl(80mg，0.277mmol)于乙腈(5ml)中的搅拌溶液中，添加dipea(0.25ml，1.38mmol)，随后添加三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-4-基酯(111mg，0.33mmol)。在85℃下加热反应混合物3h。将反应混合物冷却至室温，且减压移除溶剂，得到粗产物，通过制备型hplc纯化该粗产物[方法：柱：dad-1-cellulose-5(250
×
4.6mm)，5微米，移动相：10mm乙酸铵/meoh，流速：1.5ml/min，注射体积：2.0μl，运行时间：30min]。
[1064]
实施例267：lcms：m/z＝436.3(m h)；rt 1.57min；(lcms方法：waters xbridge c18，19
×
150mm，5μm粒子；移动相a：10mm乙酸铵；移动相b：乙腈；梯度：20-65％b历时20分钟，接着在100％b保持5分钟；流速：15ml/min)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝8.22-8.15(m,1h),8.12-8.03(m,1h),7.82(d,j＝3.2hz,1h),7.39(dd,j＝3.1,8.9hz,1h),6.77(d,j＝8.8hz,1h),6.15(s,1h),5.41-5.19(m,1h),4.93(dt,j＝4.5,8.4hz,1h),4.52(td,j＝6.0,12.2hz,1h),4.12-3.99(m,1h),3.90-3.76(m,2h),3.54(s,3h),3.23(brs,1h),3.11(dd,j＝8.9,12.6hz,1h),2.31-2.22(m,1h),1.70-1.54(m,1h),1.24(d,j＝6.1hz,6h)。
[1065]
实施例268：lcms：m/z＝436.2(m h)；rt 1.57min；(lcms方法：waters xbridge c18，19
×
150mm，5μm粒子；移动相a：10mm乙酸铵；移动相b：乙腈；梯度：20-65％b历时20分钟，接着在100％b保持5分钟；流速：15ml/min)。1h nmr(400mhz,dmso-d6):δppm 8.22-8.14(m,1h),8.12-8.02(m,1h),7.82(d,j＝3.2hz,1h),7.39(dd,j＝3.1,8.9hz,1h),6.77(d,j＝9.0hz,1h),6.15(s,1h),5.38-5.23(m,1h),4.98-4.86(m,1h),4.52(td,j＝6.0,12.2hz,1h),4.12-4.00(m,1h),3.90-3.74(m,2h),3.54(s,3h),3.23(br s,1h),3.11(dd,j＝8.9,12.6hz,1h),2.32-2.21(m,1h),1.70-1.56(m,1h),1.24(d,j＝6.1hz,6h)。
[1066]
中间体86
[1067]
(
±
)-反式-叔丁基-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3-甲氧基哌啶-1-甲酸酯
[1068][1069]
在0℃下，向(
±
)-反式-叔丁基-3-羟基-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-甲酸酯(100mg，0.28mmol)于thf(3ml)中的搅拌溶液中，添加nah(60％，于矿物油中)(45.4mg，1.14mmol)。在5分钟之后，添加碘甲烷(0.035ml，0.57mmol)于thf(1ml)中的溶液，且在室温下搅拌反应混合物3h。将反应混合物冷却至0℃。用冰冷的水淬灭反应物，且用etoac(2
×
50ml)萃取反应混合物。经合并的有机萃取物用盐水洗涤，经na2so4干燥且浓缩，
得到(
±
)-反式-叔丁基-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3-甲氧基哌啶-1-甲酸酯。lcms：m/z，367.3(m 1)；rt 2.08min。(lcms方法：柱：waters acquity uplc beh c18(2.1
×
50mm)1.7μm，移动相a：10mm nh4oac:乙腈(95:5)；移动相b：10mm nh4oac:乙腈(5:95)，梯度＝20-100％b历时2分钟，接着在100％b保持0.3分钟；温度：50℃；流速：0.7ml/min；检测：uv，220nm)。
[1070]
中间体87
[1071]
(
±
)-反式-5-异丙氧基-2-((3-甲氧基哌啶-4-基)氧基)吡啶
·
hcl
[1072][1073]
在0℃下，向(
±
)-反式-叔丁基-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3-甲氧基哌啶-1-甲酸酯(100mg，0.273mmol)于dcm(15ml)中的搅拌溶液中，添加hcl(4m，于二噁烷中)(0.35ml，1.364mmol)。在室温下搅拌反应混合物3h。减压蒸发溶剂，得到(
±
)-反式-5-异丙氧基-2-((3-甲氧基哌啶-4-基)氧基)吡啶
·
hcl。lcms：m/z，267.2(m 1)；rt 0.86min。(lcms方法：柱：waters acquity uplc beh c18(2.1
×
50mm)1.7μm，移动相a：10mm nh4oac:乙腈(95:5)；移动相b：10mm nh4oac:乙腈(5:95)，梯度＝20-100％b历时2分钟，接着在100％b保持0.3分钟；温度：50℃；流速：0.7ml/min；检测：uv，220nm)。
[1074]
实施例269及270
[1075]
(
±
)-反式-8-(4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3-甲氧基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈
[1076][1077]
向(
±
)-反式-5-异丙氧基-2-((3-甲氧基哌啶-4-基)氧基)吡啶
·
hcl(80mg，0.26mmol)于乙腈(5ml)中的搅拌溶液中，添加dipea(0.23ml，1.32mmol)。在室温下搅拌反应混合物5min，且接着添加三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-4-基酯(106mg，0.31mmol)。在85℃下加热反应混合物4h。将反应混合物冷却至室温，且减压移除溶剂，得到粗产物，通过制备型hplc纯化该粗产物(方法：柱：dad-1：cellulose-2(250
×
4.6mm)，5微米，dad-2：cellulose-4(250
×
4.6mm)，5微米，移动相：10mm乙酸铵/meoh，流速：2.0ml/min，注射体积：6.0μl，运行时间：20min)。
[1078]
实施例269：lcms：m/z，450.2(m h)；rt 1.82；lc/ms方法：柱：waters xbridge c18，19
×
150mm，5μm粒子；移动相a：10mm乙酸铵；移动相b：乙腈；梯度：20-65％b历时20分钟，接着在100％b保持5分钟；流速：15ml/min。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝8.22-8.16(m,
1h),8.13-8.05(m,1h),7.83(d,j＝2.9hz,1h),7.39(dd,j＝3.1,8.9hz,1h),6.79(d,j＝8.8hz,1h),6.16(s,1h),5.12-5.04(m,1h),4.53(quin,j＝6.0hz,1h),4.21-4.11(m,1h),3.58(br d,j＝3.2hz,1h),3.54(s,3h),3.41(s,3h),3.33-3.27(m,3h),2.31-2.22(m,1h),1.72(br dd,j＝4.3,8.4hz,1h),1.25(d,j＝6.1hz,6h)。
[1079]
实施例270：lcms 450.3(m h)；rt 1.82min；lc/ms方法：柱：waters xbridge c18，19
×
150mm，5μm粒子；移动相a：10mm乙酸铵；移动相b：乙腈；梯度：20-65％b历时20分钟，接着在100％b保持5分钟；流速：15ml/min。1h nmr(400mhz,dmso-d6):δppm 8.23-8.15(m,1h),8.14-8.06(m,1h),7.83(d,j＝2.9hz,1h),7.39(dd,j＝3.1,8.9hz,1h),6.79(d,j＝8.8hz,1h),6.16(s,1h),5.14-5.01(m,1h),4.52(td,j＝6.1,12.0hz,1h),4.24-4.08(m,1h),3.70-3.51(m,4h),3.41(s,3h),3.26(br dd,j＝5.4,13.2hz,3h),2.31-2.18(m,1h),1.76-1.65(m,1h),1.25(d,j＝5.9hz,6h)。
[1080]
实施例271及272
[1081]
( /-)-反式-6-氯-4-(3-羟基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1h)-酮
[1082][1083]
向(
±
)-反式-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-3-醇
·
hcl(600mg，2.02mmol)于乙腈(15ml)中的搅拌溶液中，添加dipea(1.8ml，10.08mmol)。在室温下搅拌反应混合物5min。接下来，添加4,6-二氯-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1h)-酮(556mg，2.42mmol)，且在85℃下加热反应混合物4h。将反应混合物冷却至室温，且减压移除溶剂，得到粗产物，该粗产物通过24g硅胶柱急骤色谱且用3％meoh/dcm洗脱来纯化，得到(
±
)-反式-6-氯-4-(3-羟基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1h)-酮。通过制备型hplc纯化产物[方法：柱：dad-1：cellulose-2(250
×
4.6mm)，5微米，dad-2：cellulose-4(250
×
4.6mm)，5微米，移动相：10mm乙酸铵/meoh，流速：2.0ml/min，注射体积：6.0μl，运行时间：20min。
[1084]
实施例271：lcms：m/z，455.1(m h)；rt 1.82min；lc/ms方法：柱：waters xbridge c18，19
×
150mm，5μm粒子；移动相a：10mm乙酸铵；移动相b：乙腈；梯度：20-65％b历时20分钟，接着在100％b保持5分钟；流速：15ml/min。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝7.95(d,j＝9.0hz,1h),7.81(d,j＝8.8hz,1h),7.52(d,j＝8.1hz,1h),7.38-7.32(m,2h),7.29(d,j＝7.8hz,1h),5.53-5.44(m,1h),4.85-4.72(m,1h),4.57-4.48(m,1h),3.87-3.76(m,1h),3.76-3.65(m,1h),3.45(s,3h),2.27-2.17(m,1h),1.68-1.56(m,1h)，
[1085]
实施例272：lcms：m/z,:455.1(m h)；rt 1.82min；lc/ms方法：柱：waters xbridge c18，19
×
150mm，5μm粒子；移动相a：10mm乙酸铵；移动相b：乙腈；梯度：20-65％b历时20分
钟，接着在100％b保持5分钟；流速：15ml/min。1h nmr(400mhz,dmso-d6):δppm 7.95(d,j＝9.0hz,1h),7.81(d,j＝9.0hz,1h),7.57-7.43(m,1h),7.40-7.32(m,2h),7.32-7.23(m,1h),5.54-5.45(m,1h),4.85-4.70(m,1h),4.57-4.48(m,1h),3.85-3.76(m,1h),3.74-3.69(m,1h),3.45(s,3h),2.27-2.18(m,1h),1.68-1.57(m,1h)。
[1086]
实施例273及274
[1087]
( /-)-反式-4-(3-羟基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈
[1088][1089]
向(
±
)-反式-6-氯-4-(3-羟基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1h)-酮(100mg，0.22mmol)于dmf(5ml)中的搅拌溶液中，添加锌(22mg，0.33mmol)、氰化锌(77mg，0.66mmol)及tea(0.12ml，0.88mmol)。将反应混合物脱气5min，且添加二氯[9,9-二甲基-4,5-双(二苯膦基)呫吨]钯(ii)(33.2mg，0.04mmol)。在90℃下加热反应混合物隔夜。使反应混合物冷却至室温，用乙酸乙酯稀释且经由硅藻土垫过滤。滤液用水、盐水洗涤，且有机层经无水na2so4干燥，过滤且减压蒸发，得到粗化合物。通过制备型hplc纯化粗产物[方法：柱：dad-1：cellulose-2(250
×
4.6mm)，5微米，dad-2：cellulose-4(250
×
4.6mm)，5微米，移动相：10mm乙酸铵/meoh；流速：2.0ml/min，注射体积：6.0μl，运作时间：20min]。
[1090]
实施例273：lcms：m/z，446.2(m h)；rt 1.65min；lc/ms方法：柱：waters xbridge c18，19
×
150mm，5μm粒子；移动相a：10mm乙酸铵；移动相b：乙腈；梯度：20-65％b历时20分钟，接着在100％b保持5分钟；流速：15ml/min。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝8.26(d,j＝8.8hz,1h),8.01(d,j＝8.8hz,1h),7.58-7.49(m,1h),7.40-7.32(m,2h),7.29(d,j＝7.3hz,1h),5.61-5.43(m,1h),4.94-4.66(m,1h),4.61-4.10(m,2h),3.97-3.81(m,1h),3.78-3.66(m,1h),3.46(s,3h),2.30-2.19(m,1h),1.79-1.48(m,1h)。
[1091]
实施例274：lcms：m/z,:446.2(m h)；rt 1.66min；lc/ms方法：柱：waters xbridge c18，19
×
150mm，5μm粒子；移动相a：10mm乙酸铵；移动相b：乙腈；梯度：20-65％b历时20分钟，接着在100％b保持5分钟；流速：15ml/min。1h nmr(400mhz,dmso-d6):δppm 8.26(d,j＝8.8hz,1h),8.01(d,j＝8.8hz,1h),7.58-7.49(m,1h),7.40-7.32(m,2h),7.29(d,j＝7.3hz,1h),5.61-5.43(m,1h),4.94-4.66(m,1h),4.61-4.10(m,2h),3.97-3.81(m,1h),3.78-3.66(m,1h),3.46(s,3h),2.30-2.19(m,1h),1.79-1.48(m,1h)。
[1092]
实施例275
[1093]
6-氯-4-((3r,4r)-3-甲氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1h)-酮
[1094][1095]
在0℃下，向(
±
)-反式-6-氯-4-(3-羟基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1h)-酮(125mg，0.275mmol)于dmf(3ml)中的搅拌溶液中，添加nah(60％，于矿物油中)(44.0mg，1.10mmol)。搅拌反应混合物5分钟。添加碘甲烷(0.04ml，0.55mmol)。使反应混合物升温至室温且在室温下搅拌3h。将反应混合物冷却至0℃。用冰冷的水淬灭反应物。用etoac(2
×
50ml)萃取反应混合物。经合并的有机萃取物用盐水洗涤，经na2so4干燥且浓缩，得到粗产物，通过急骤色谱，该粗产物使用硅胶12g柱且用5％meoh/chcl3洗脱来纯化，得到(
±
)-反式-6-氯-4-(3-甲氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1h)-酮。lcms：m/z，469.2(m 1)；rt 1.84min。(lcms方法：柱：waters acquity uplc beh c18(2.1
×
50mm)1.7μm，移动相a：10mm nh4oac:乙腈(95:5)；移动相b：10mm nh4oac:乙腈(5:95)，梯度＝20-100％b历时2分钟，接着在100％b保持0.3分钟；温度：50℃；流速：0.7ml/min；检测：uv，220nm)。
[1096]
实施例276及277
[1097]
(
±
)-反式-4-(3-羟基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈
[1098][1099]
向(
±
)-反式-6-氯-4-(3-甲氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1h)-酮(70mg，0.15mmol)于dmf(5ml)中的搅拌溶液中，添加锌(15mg，0.22mmol)、氰化锌(53mg，0.45mmol)及tea(0.08ml，0.60mmol)。反应混合物用氩气脱气5min，且添加二氯[9,9-二甲基-4,5-双(二苯膦基)呫吨]钯(ii)(23mg，0.03mmol)。在90℃下加热反应混合物隔夜。使反应混合物冷却至室温，用乙酸乙酯稀释且经由硅藻土垫过滤。滤液用水、盐水洗涤，且有机层经无水na2so4干燥，过滤且减压蒸发，得到粗化合物。通过制备型hplc纯化粗产物(方法：柱：dad-1-cellulose-5(250
×
4.6mm)，5微米，移动相：
100％b历时3分钟，接着在100％b保持0.75分钟；流速：1.0ml/min；检测：uv，220nm。
[1110]
方法5：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。
[1111]
中间体88及89
[1112]
n-(2,5-二甲基哌啶-4-基)-5-甲氧基吡啶-2-胺(88)及n-(2,5-二甲基哌啶-4-基)-5-甲氧基吡啶-2-胺(89)
[1113][1114]
向( /-)(2,5-反式)-2,5-二甲基-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(100mg，0.440mmol)于1,2-二氯乙烷(5ml)中的溶液中，添加5-甲氧基吡啶-2-胺(54.6mg，0.440mmol)及乙酸(0.025ml，0.440mmol)。在室温下搅拌反应混合物15min，其后添加三乙酰氧基硼氢化钠(112mg，0.528mmol)。在室温下搅拌反应混合物7天。用饱和nahco3溶液淬灭反应物。混合物用二氯甲烷萃取。合并有机层，用盐水洗涤，经mgso4干燥，过滤且减压蒸发，得到呈黏稠黄色油状的粗产物。使用制备型hplc，使用ch3cn-h2o-乙酸铵系统作为洗脱剂，来纯化粗产物。合并均质级分且减压冻干，得到两种非对映异构材料的混合物。将混合物溶解于二氯甲烷(2ml)中且用tfa(1ml)处理。在室温下搅拌反应混合物3h。减压浓缩混合物，得到呈黏稠黄色油状的两种标题化合物的双tfa盐(25mg，0.054mmol，12.26％产率)。未测定中间体88及89的绝对立体化学。结构表示与哌啶基环连接的取代基的相对取向。
[1115]
实施例280及281
[1116]
8-((2s,5r)-4-((5-甲氧基吡啶-2-基)氨基)-2,5-二甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(rel)
[1117][1118]
向n-((2,5-反式)-2,5-二甲基哌啶-4-基)-5-甲氧基吡啶-2-胺
·
双三氟乙酸盐(25mg，0.054mmol)及休尼格氏碱(0.039ml，0.225mmol)于乙腈(1.5ml)中的溶液中，添加三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-4-基酯(14.98mg，0.045mmol)。在60℃下加热反应混合物。接着，使用制备型lc/ms，用以下条件，来分级分离粗反应混合物：柱：xbridge c18，200mm
×
19mm，5μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:
5乙腈:水 10mm乙酸铵；梯度：在19％b保持0分钟，19-59％b历时20分钟，接着在100％b保持5分钟；流速：20ml/min；柱温度：25℃。通过ms及uv信号触发级分收集。合并含有产物的级分且经由离心蒸发干燥。
[1119]
实施例280(第1洗脱产物)：产物产量为1.4mg，且其通过lcms分析所估计的纯度为100％。使用分析型lc/ms测定最终纯度。注射1条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射1结果：纯度：100％；质量观测值：419.05；保留时间：1.7min。注射2条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.1％三氟乙酸；移动相b：95:5乙腈:水 0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射2结果：纯度：100％；质量观测值：419.07；保留时间：1.13min。1h nmr(600mhz,dmso-d6)δ7.98-7.94(m,1h),7.91-7.87(m,1h),7.50(d,j＝2.9hz,1h),6.91(dd,j＝8.8,2.9hz,1h),6.25(d,j＝9.2hz,1h),6.10(s,1h),5.86(d,j＝8.4hz,1h),3.56(dd,j＝12.5,4.0hz,1h),3.47(s,3h),3.35(s,1h),3.34-3.32(m,1h),3.39-3.25(m,1h),2.33(br dd,j＝12.1,10.3hz,1h),1.95(dt,j＝12.8,3.7hz,1h),1.73(br dd,j＝6.2,3.7hz,1h),1.56(s,1h),1.23-1.11(m,1h),0.86(d,j＝5.9hz,3h),0.67(d,j＝6.6hz,3h)。一些峰由于所用的水抑制技术而遮蔽。
[1120]
实施例281(第2洗脱产物)：产物产量为3.2mg，且其根据lcms分析的估计纯度为98％。使用分析型lc/ms测定最终纯度。注射1条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射1结果：纯度：99.1％；质量观测值：419.06；保留时间：1.74min。注射2条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.1％三氟乙酸；移动相b：95:5乙腈:水 0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射2结果：纯度：98.3％；质量观测值：419.05；保留时间：1.16min。1h nmr(600mhz,dmso-d6)δ8.17(d,j＝8.8hz,1h),8.07(d,j＝8.8hz,1h),7.73(d,j＝3.3hz,1h),7.13(dd,j＝8.8,2.9hz,1h),6.53(d,j＝9.2hz,1h),6.10(d,j＝7.7hz,1h),6.07(s,1h),4.81(br s,1h),4.27(ddt,j＝12.4,8.2,4.2hz,1h),3.69(s,2h),3.53(s,2h),2.55(s,6h),2.39(br d,j＝1.5hz,1h),2.18-2.07(m,1h),1.54(br d,j＝12.8hz,1h),1.18(d,j＝6.6hz,4h),0.96(d,j＝7.0hz,3h)。一些峰由于所用的水抑制技术而遮蔽。
[1121]
中间体90
[1122]
3-甲基-4-(甲氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
[1123][1124]
向3-甲基-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(1g，4.69mmol)于甲醇(10ml)中的溶液中，
添加甲胺(0.88ml，9.38mmol，于meoh中的33重量％溶液)。将反应混合物加热至65℃持续2h。将反应混合物冷却至室温。添加硼氢化钠(0.36g，9.38mmol)，且搅拌反应混合物12h。用饱和nh4cl淬灭反应物。将反应混合物溶解于etoac(100ml)中，用饱和nahco3(20ml)、水(20ml)、盐水(20ml)洗涤，经na2so4干燥且减压浓缩，得到3-甲基-4-(甲氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.95g，89％产率)。lcms：m/z＝229.3(m h)；保留时间0.64及0.92min。lc-ms方法：柱-aquity uplc beh c18(3.0
×
50mm)1.7μm；移动相a：缓冲液:乙腈(95:5)；移动相b：缓冲液:乙腈(5:95)，缓冲液：10mm乙酸铵；梯度：20-100％b历时2.0分钟，接着在100％b保持0.2分钟，流速0.7ml/min。
[1125]
中间体91
[1126]
4-(4-氟-n-甲基苯甲酰胺基)-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯
[1127][1128]
向4-氟苯甲酸(295mg，2.1mmol)及3-甲基-4-(甲氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(400mg，1.75mmol)于dmf(5ml)中的溶液中，添加hatu(799mg，2.1mmol)，随后添加dipea(0.92ml，5.26mmol)。在室温下搅拌反应混合物12h。用饱和nh4cl淬灭反应物。将反应混合物溶解于etoac(100ml)中，用饱和nahco3(20ml)、水(20ml)、盐水(20ml)洗涤，经na2so4干燥且减压浓缩，得到粗产物，通过硅胶色谱，使用0-10％meoh/chcl3作为洗脱剂，来纯化该粗产物。收集纯级分且浓缩，得到呈黄色液体状的4-(4-氟-n-甲基苯甲酰胺基)-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(500mg，81％产率)。lcms：m/z＝295.1[(m-t
bu) h)]；保留时间1.54min。lc-ms方法：柱-aquity uplc beh c18(3.0
×
50mm)1.7μm；移动相a：缓冲液:乙腈(95:5)；移动相b：缓冲液:乙腈(5:95)，缓冲液：10mm乙酸铵；梯度：20-100％b历时2.0分钟，接着在100％b保持0.2分钟，流速0.7ml/min。
[1129]
中间体93
[1130]
4-氟-n-甲基-n-(3-甲基哌啶-4-基)苯甲酰胺
·
tfa
[1131][1132]
向4-(4-氟-n-甲基苯甲酰胺基)-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.57mmol)于dcm(2ml)中的溶液中，添加tfa(0.44ml，5.71mmol)。搅拌反应混合物2h。减压浓缩反应混合物且与dcm(2
×
5ml)一起共蒸馏，得到4-氟-n-甲基-n-(3-甲基哌啶-4-基)苯甲酰胺
·
tfa(200mg，96％产率)。lcms：m/z＝251.2(m h)；保留时间0.56及0.58min。lc-ms方法：柱-aquity uplc beh c18(3.0
×
50mm)1.7μm；移动相a：缓冲液:乙腈(95:5)；移动相b：缓冲液:乙腈(5:95)，缓冲液：10mm乙酸铵；梯度：20-100％b历时2.0分钟，接着在100％b保持0.2分
7.38(m,2h),7.35-7.17(m,2h),6.20-6.02(m,1h),4.40-4.11(m,2h),4.08-3.95(m,1h),3.53(d,j＝9.0hz,3h),3.27-3.04(m,1h),2.90-2.74(m,3h),2.74-2.61(m,1h),2.40-2.29(m,1h),2.19-1.91(m,2h),1.87-1.68(m,1h),0.96-0.63(m,3h)。
[1141]
实施例286：(1.9mg，1％产率)；lcms：m/z＝434.2(m h)；保留时间＝1.58min。lcms方法：xbridge beh xp c18(50
×
2.1)mm，2.5μm；移动相a：10mm乙酸铵:乙腈(95:5)；移动相b：10mm乙酸铵:乙腈(5:95)；梯度＝0-100％b历时3分钟；温度：50℃；流速：1.1ml/min；检测：uv，220nm。
[1142]
实施例287：(2.0mg，1％产率)；lcms：m/z＝434.2(m h)；保留时间＝1.55min。lcms方法：xbridge beh xp c18(50
×
2.1)mm，2.5μm；移动相a：10mm乙酸铵:乙腈(95:5)；移动相b：10mm乙酸铵:乙腈(5:95)；梯度＝0-100％b历时3分钟；温度：50℃；流速：1.1ml/min；检测：uv，220nm。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δppm 8.21-8.14(m,1h),8.11-8.04(m,1h),7.53-7.43(m,2h),7.33-7.20(m,2h),6.12(s,1h),4.47-4.26(m,1h),4.16-4.07(m,1h),3.93-3.83(m,1h),3.53(s,3h),2.93-2.90(m,5h),2.39-2.26(m,2h),1.88-1.77(m,1h),1.58-1.56(m,1h),1.24-1.21(m,4h)。
[1143]
根据实施例284至287中所公开的通用程序，由适当哌啶、苯甲酸、萘啶衍生物制备表21中的实施例。
[1144]
表21
[1145]
[1146]
[1147][1148]
中间体95
[1149]
(r)-4-苯甲基-3-丁酰基噁唑啶-2-酮
[1150][1151]
在氮气下，在-78℃下，向(r)-4-苯甲基噁唑啶-2-酮(10g，56.4mmol)于thf(120ml)中的搅拌溶液中，逐滴添加正丁基锂(33.9ml，67.7mmol)。在添加碱期间出现橙色。添加后，维持搅拌30min，其后逐滴添加丁酰氯(8.76ml，85mmol)。在此过程期间，颜色变为淡黄色。使反应混合物升温至室温，且继续搅拌隔夜。接着，使用饱和nh4cl溶液淬灭反应物。使用etoac(3
×
)萃取所得混合物。经合并的萃取物用盐水洗涤，经硫酸钠脱水，过滤且蒸发，得到15g极淡的黄色油。使用硅胶急骤色谱，使用20％乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂，来分级分离粗产物。合并均质级分且真空蒸发，得到呈无色油状的产物(12.9g，92％)。1h nmr(500mhz,氯仿-d)δ7.43-7.12(m,5h),4.75-4.64(m,1h),4.26-4.12(m,2h),3.32(dd,j＝13.4,3.3hz,1h),3.05-2.84(m,2h),2.79(dd,j＝13.4,9.6hz,1h),1.76(ddd,j＝14.7,7.4,2.6hz,2h),1.04(t,j＝7.5hz,3h)。
[1152]
中间体96
[1153]
(r)-4-苯甲基-3-((2r,3s)-2-乙基-3-羟基-4-(2-甲基-1,3-二氧杂环戊-2-基)丁酰基)噁唑啶-2-酮
[1154][1155]
向在氩气下在-78℃下的(r)-4-苯甲基-3-丁酰基噁唑啶-2-酮(4.95g，20mmol)于dcm(40ml)中的搅拌溶液中，缓慢添加二丁基(((三氟甲基)磺酰基)氧基)硼烷(26.0ml，26.0mmol)，随后添加三乙胺(3.90ml，28.0mmol)，且继续搅拌30min。使反应混合物升温至0℃持续1h，且接着使其再冷却至-78℃。逐滴添加含2-(2-甲基-1,3-二氧杂环戊-2-基)乙醛(2.86g，22.00mmol)的dcm(10ml)。在30min之后，使反应混合物升温至0℃且搅拌3h。接下
来，添加ph 7缓冲溶液(100ml)、甲醇(30ml)及h2o2(30ml，30％水溶液)，且在室温下搅拌混合物1.5h。分离各层且用dcm萃取水层，且经合并的有机层经mgso4干燥，过滤，且真空蒸发溶剂，得到10.2g无色黏稠油。通过柱色谱，使用30-50％etoac:己烷混合物作为洗脱剂，来纯化此粗产物。合并均质级分且真空蒸发，得到呈无色黏稠油状的纯化产物(5.97g，75％)。lcms(方法a*)：r
t
＝1.321min。(m na)

＝399.95。1h nmr(500mhz,氯仿-d)δ7.40-7.22(m,5h),4.74(ddt,j＝10.3,7.2,3.1hz,1h),4.23-4.13(m,3h),4.05-3.92(m,4h),3.62(d,j＝1.5hz,1h),3.37(dd,j＝13.2,3.3hz,1h),2.72(dd,j＝13.2,10.1hz,1h),1.99-1.86(m,3h),1.75(ddd,j＝13.7,7.5,4.5hz,1h),1.39(s,3h),1.00(t,j＝7.5hz,3h)。
[1156]
中间体97
[1157]
(2r,3s)-1-((r)-4-苯甲基-2-氧代噁唑啶-3-基)-2-乙基-3-羟基己烷-1,5-二酮
[1158][1159]
向(r)-4-苯甲基-3-((2r,3s)-2-乙基-3-羟基-4-(2-甲基-1,3-二氧杂环戊-2-基)丁酰基)噁唑啶-2-酮(276mg，0.731mmol)于丙酮(14ml)中的溶液中，添加5重量％于二氧化硅上的氯化铁(iii)(60mg，0.018mmol)。在氮气下在25℃下搅拌反应混合物30min，且接着过滤，添加至水中，且用乙酸乙酯萃取产物。经合并的萃取物经mgso4干燥，过滤且真空浓缩，得到呈无色油状的产物(220mg，90％)。lcms：(方法a*)r
t
＝1.242min，95％。(m na)

＝355.9。1h nmr(500mhz,氯仿-d)δ7.39-7.24(m,5h),4.75(ddt,j＝10.3,7.3,3.1hz,1h),4.41(ddt,j＝9.5,5.5,2.8hz,1h),4.26-4.15(m,2h),4.10(dt,j＝9.5,4.8hz,1h),3.37(dd,j＝13.2,3.3hz,1h),3.23(d,j＝3.0hz,1h),2.83-2.61(m,3h),2.21(s,3h),1.99-1.86(m,1h),1.77-1.66(m,1h),1.00(t,j＝7.5hz,3h)。
[1160]
中间体98a及98b
[1161]
(r)-4-苯甲基-3-((2r,3s,5r)-5-(苯甲基氨基)-2-乙基-3-羟基己酰基)噁唑啶-2-酮及(r)-4-苯甲基-3-((2r,3s,5s)-5-(苯甲基氨基)-2-乙基-3-羟基己酰基)噁唑啶-2-酮
[1162][1163]
在室温下，在氮气下，向(2r,3s)-1-((r)-4-苯甲基-2-氧代噁唑啶-3-基)-2-乙基-3-羟基己烷-1,5-二酮(4g，12.00mmol)于dce(40.0ml)中的溶液中，添加苯甲胺(1.350ml，12.36mmol)，且搅拌混合物30min。接着，使其冷却至0℃，且历时约10min逐份添加三乙酰氧基硼氢化钠(2.54g，12.00mmol)。接着，使混合物升温至室温，且继续搅拌隔夜。通过添加饱和nahco3水溶液淬灭反应物，且在室温下搅拌所得混合物15分钟。接着，用
etoac(3
×
)萃取此混合物，且经合并的萃取物依次用饱和nahco3水溶液及盐水洗涤，且接着经mgso4干燥，过滤且真空浓缩，得到呈黄色油状的粗产物。
[1164]
中间体99a及99b
[1165]
(3r,4s,6r)-1-苯甲基-3-乙基-4-羟基-6-甲基哌啶-2-酮及(3r,4s,6s)-1-苯甲基-3-乙基-4-羟基-6-甲基哌啶-2-酮
[1166][1167]
将(r)-4-苯甲基-3-((2r,3s,5r)-5-(苯甲基氨基)-2-乙基-3-羟基己酰基)噁唑啶-2-酮与(r)-4-苯甲基-3-((2r,3s,5s)-5-(苯甲基氨基)-2-乙基-3-羟基己酰基)噁唑啶-2-酮的混合物(1g)溶解于meoh(18ml)中，且在微波反应器中在90℃下照射3h。接着，减压蒸发所得溶液，得到油，使用制备型反相色谱，在以下条件下来分级分离该油：柱：biotage sfar c18 d 120g。洗脱剂：a：95％水 0.05％tfa，5％acn 0.05％tfa；b：5％水 0.05％tfa，95％acn 0.05％tfa。平衡：0％b 3cv，梯度：0-80％b 10cv，80-100％5cv，100-100％3cv。合并含有哌啶酮产物的级分且真空浓缩以移除acn。通过添加饱和nahco3溶液碱化所得混合物，且使用dcm(3
×
)萃取产物。经合并的萃取物经mgso4干燥，过滤且真空浓缩，得到无色油。通过急骤色谱，使用20-25％丙酮/己烷作为洗脱剂，进一步分级分离此材料。合并均质级分且减压蒸发，得到以下产物。较高rf级分：lcms(方法a)；r
t
＝1.380min，m/z＝247.90(m h)

。1h nmr(500mhz,氯仿-d)δ7.43-7.04(m,6h),5.35(d,j＝15.3hz,1h),4.14(d,j＝15.3hz,1h),3.96-3.81(m,1h),3.39(dt,j＝9.9,5.8hz,1h),2.39(dt,j＝9.1,4.6hz,1h),2.19(dt,j＝13.1,4.4hz,1h),2.08(td,j＝6.9,4.7hz,1h),1.95-1.85(m,1h),1.69-1.62(m,1h),1.26(d,j＝6.4hz,3h),1.01(t,j＝7.5hz,3h)。较低rf级分：lcms(方法a)；r
t
＝1.326min，m/z＝247.95(m h)

。1h nmr(500mhz,氯仿-d)δ7.42-7.13(m,5h),5.25(d,j＝15.3hz,1h),4.22-4.02(m,2h),3.63-3.52(m,1h),3.70-3.47(m,1h),2.50-2.28(m,1h),2.00-1.84(m,4h),1.22(d,j＝6.6hz,3h),1.02(t,j＝7.4hz,3h)。
[1168]
中间体100
[1169]
(2s,4s,5s)-1-苯甲基-5-乙基-2-甲基哌啶-4-醇
[1170][1171]
向(3r,4s,6s)-1-苯甲基-3-乙基-4-羟基-6-甲基哌啶-2-酮(425mg，1.718mmol)于thf(6ml)中的溶液中，添加bh3.thf(6.87ml，6.87mmol)，且在密封小瓶中在66℃下加热所得溶液3.5h。将反应混合物冷却至室温。通过依序添加水(5ml)，随后添加1m naoh(9ml)，
淬灭反应物。所得混合物用etoac(3
×
5ml)萃取，且经合并的有机层经mgso4干燥，过滤且接着真空浓缩，得到273mg粗产物。将此材料溶解于meoh中且在回流下加热45min。lcms(方法a)；rt＝0.958min，m/z＝233.95(m h)

。
[1172]
中间体101
[1173]
(2s,4s,5s)-5-乙基-4-羟基-2-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯
[1174][1175]
向(2s,4s,5s)-1-苯甲基-5-乙基-2-甲基哌啶-4-醇(400mg，1.714mmol)及二碳酸二-叔丁酯(0.438ml，1.886mmol)于乙酸乙酯(20ml)中的溶液中，添加pd-c(100mg，0.094mmol)。所得混合物依序经受降压且用氮气(3
×
)冲洗。对混合物再一次抽真空，且接着用氢气冲洗。在室温下剧烈搅拌所得悬浮液隔夜。接着，反应混合物在氮气保护下过滤，且减压浓缩滤液(水浴温度50℃)，得到呈无色油状的粗产物。将此产物吸附至硅胶上且使用急骤色谱采用20-40％etoac/己烷作为洗脱剂分级分离。合并均质级分且减压蒸发，得到93mg无色油。lcms(方法a)：rt＝1.668min，m/z＝166.00，(m-co
2-t-bu na)

。
[1176]
中间体102
[1177]
(2s,4s,5s)-5-乙基-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯
[1178][1179]
向(2s,4s,5s)-5-乙基-4-羟基-2-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(146mg，0.600mmol)于thf(6ml)中的溶液中，添加氢化钠(27.8mg，0.660mmol)，且在室温下搅拌所得悬浮液10min。接着添加2-氟-5-异丙氧基吡啶(93mg，0.600mmol)，且在63℃下搅拌混合物隔夜。使用制备型反相hplc分级分离粗产物。合并均质级分且真空蒸发，得到21mg呈无色油状的产物。lcms(方法a)：rt＝1.370min，m/z＝279.20，(m-co
2-t-bu h)

。
[1180]
中间体103
[1181]
2-(((2s,4s,5s)-5-乙基-2-甲基哌啶-4-基)氧基)-5-异丙氧基吡啶
[1182]
[1183]
向(2s,4s,5s)-5-乙基-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(60mg，0.159mmol)于dcm(5ml)中的溶液中，添加三氟乙酸(5ml，64.9mmol)，且在室温下搅拌所得混合物30min。接着，将溶液真空浓缩。
[1184]
中间体104
[1185]
(2r,4s,5s)-1-苯甲基-5-乙基-2-甲基哌啶-4-醇
[1186][1187]
向(3r,4s,6r)-1-苯甲基-3-乙基-4-羟基-6-甲基哌啶-2-酮(293mg，1.185mmol)于thf(5.9ml)中的溶液中，添加bh3.thf(4738μl，4.74mmol)。在密封小瓶中在66℃下加热所得溶液3.5h。将反应混合物冷却至室温。通过依序添加水(1ml)及1m naoh(3ml)淬灭反应物。混合物用etoac(3
×
5ml)萃取，且经合并的有机层经mgso4干燥，过滤且真空浓缩，得到80mg粗产物。将此粗产物溶解于meoh中，且在回流下加热所得溶液45min。接着，对其进行减压蒸发，且将残余物分配于水与乙酸乙酯之间。收集有机层，且水层用1n naoh溶液碱化且用乙酸乙酯萃取(2
×
)。经合并的萃取物经mgso4干燥，过滤且真空蒸发，得到71mg呈无色油状的产物。lcms(方法a)：rt＝0.995min，m/e＝234.00(m h)

。1h nmr(500mhz,氯仿-d)δ7.74(d,j＝7.0hz,4h),7.49-7.22(m,11h),3.99(d,j＝13.6hz,1h),3.38(br dd,j＝9.7,5.5hz,1h),3.15(br d,j＝13.6hz,1h),2.86(dd,j＝11.0,2.7hz,1h),2.17-2.00(m,1h),1.91-1.77(m,1h),1.69-1.46(m,4h),1.11-1.03(m,11h),1.02-0.86(m,4h),0.73(t,j＝7.5hz,3h)。
[1188]
中间体105
[1189]
(2r,4s,5s)-5-乙基-4-羟基-2-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯
[1190][1191]
向(2r,4s,5s)-1-苯甲基-5-乙基-2-甲基哌啶-4-醇(247mg，1.058mmol)及二碳酸二-叔丁酯(0.270ml，1.164mmol)于乙酸乙酯(10ml)中的溶液中，添加pd-c(113mg，1.058mmol)。所得混合物依序经受降压且用氮气(3
×
)冲洗。对混合物再一次抽真空，且接着用氢气冲洗，且在室温下剧烈搅拌所得悬浮液隔夜。接着，反应混合物在氮气保护下过滤，且减压浓缩滤液(水浴温度50℃)，得到呈无色油状的粗产物。
[1192]
中间体106
[1193]
(2r,4s,5s)-5-乙基-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯
[1194][1195]
向(2r,4s,5s)-5-乙基-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(52mg，0.137mmol，12.29％产率)于thf(10ml)中的溶液中，添加氢化钠(51.8mg，1.230mmol)。在室温下搅拌混合物10min。添加2-氟-5-异丙氧基吡啶(173mg，1.118mmol)，且在63℃下加热所得混合物24h。使用制备型反相hplc分级分离粗产物。合并均质级分且真空蒸发，得到52mg呈无色油状的产物。lcms(方法a)：rt＝1.364min，m/z＝279.15，(m-co
2-t-bu h)

。
[1196]
中间体107
[1197]
2-(((2r,4s,5s)-5-乙基-2-甲基哌啶-4-基)氧基)-5-异丙氧基吡啶
[1198][1199]
向(2r,4s,5s)-5-乙基-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(75mg，0.198mmol)于dcm(5ml)中的溶液中，添加三氟乙酸(5ml，64.9mmol)。在室温下搅拌所得混合物30min。接着，将溶液真空浓缩。
[1200]
中间体108
[1201]
(2r,4s,5r)-5-乙基-2-甲基-4-((4-硝基苯甲酰基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
[1202][1203]
向(2r,4r,5r)-5-乙基-4-羟基-2-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(550mg，2.260mmol)于thf(15ml)中的溶液中，添加三苯基膦(830mg，3.16mmol)及4-硝基苯甲酸(529mg，3.16mmol)。接着，在0℃下逐份添加(e)-二氮烯-1,2-二甲酸二-叔丁酯(729mg，3.16mmol)，其后使反应混合物升温至室温且接着搅拌48h。接着，真空浓缩所得混合物，且通过硅胶急骤色谱，使用15％乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂来纯化残余物。收集均质级分且减压浓缩，得到呈白色固体状的产物(450mg，1.147mmol，50.7％产率)。lc/ms(方法a)2.423min，不存在
分子态离子。1h nmr(400mhz,氯仿-d)δ8.38-8.29(m,2h),8.27-8.16(m,2h),5.54-5.32(m,1h),4.64-4.32(m,1h),4.16-3.84(m,1h),3.13-2.85(m,1h),2.10-1.89(m,2h),1.78-1.61(m,1h),1.50(s,9h),1.44-1.30(m,2h),1.23(d,j＝7.1hz,3h),0.97(t,j＝7.4hz,3h)。
[1204]
中间体109
[1205]
(2r,4s,5r)-5-乙基-4-羟基-2-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯
[1206][1207]
向(2r,4s,5r)-5-乙基-2-甲基-4-((4-硝基苯甲酰基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(445mg，1.134mmol)于meoh(20ml)中的溶液中，添加氢氧化钠(227mg，5.67mmol)，且在室温下搅拌所得混合物3小时。接着，真空浓缩反应混合物，且将残余物分配于乙酸乙酯与水之间。接着，收集有机层，用盐水洗涤，经mgso4干燥，过滤且减压蒸发至干燥，得到呈白色固体状的粗产物。通过使用硅胶急骤色谱，使用5％-40％乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂，来纯化此粗产物。收集均质级分且真空浓缩，得到呈白色固体状的标题化合物(225mg，0.925mmol，82％产率)。lc/ms(方法b)1.719min，不存在分子态离子。1h nmr(400mhz,氯仿-d)δ4.44-4.26(m,1h),4.10-4.01(m,1h),3.89-3.74(m,1h),2.97-2.80(m,1h),1.89-1.72(m,2h),1.51-1.25(m,16h),0.99(t,j＝7.4hz,3h)。
[1208]
中间体110
[1209]
8-((2s,4r,5r)-5-乙基-4-羟基-2-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-[1210]
萘啶-2-甲腈
[1211][1212]
向(2s,4r,5r)-5-乙基-4-羟基-2-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(50mg，0.205mmol)于二氯甲烷(2ml)中的溶液中，添加tfa(1ml)，且在室温下搅拌混合物2h。接着，将其真空浓缩，得到黏稠油，将该黏稠油溶解于乙腈(3ml)中。向此溶液中添加三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-4-基酯(65.2mg，0.196mmol)及dipea(0.137ml，0.783mmol)，且在氮气下在65℃下加热所得混合物隔夜。接着，真空浓缩反应混合物，且使用制备型hplc，使用乙腈:水:乙酸铵溶液洗脱剂系统，来分级分离残余物。收集均质级分，合并且接着减压浓缩，得到呈浅黄色固体状的产物(35.8mg，0.110mmol，56.1％产率)。lc/ms(方法a)1.289min，327.05(mh

)。1h nmr(400mhz,氯仿-d)δ7.81(d,j＝8.7hz,1h),7.72(d,j＝8.8hz,1h),6.29(s,1h),4.13-3.98(m,1h),3.98-3.87(m,1h),3.78-3.70(m,1h),3.67(s,3h),2.99-2.73(m,1h),2.37-2.19(m,1h),1.86-1.63(m,3h),1.41-1.20(m,5h),
0.97(t,j＝7.4hz,3h)。
[1213]
使用上文方法，采用(r)-4-苯甲基-3-丁酰基噁唑啶-2-酮作为起始材料，制备以下中间体。
[1214]
表22
[1215]
[1216]
[1217]
[1218]
[1219][1220]
使用上文方法，使用(r)-4-苯甲基-3-丁酰基噁唑啶-2-酮及丙酰氯作为起始材料，制备以下中间体。
[1221]
表23
[1222]
[1223][1224]
中间体147
[1225]
8-((2r,4s,5s)-4-羟基-2,5-二甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈
[1226][1227]
在圆底烧瓶中，将(2r,4s,5s)-1-苯甲基-2,5-二甲基哌啶-4-醇(400mg，1.824mmol)及钯/碳(194mg，1.824mmol)在氮气下合并，且将其溶解于meoh(6ml)中。将反应混合物置于1个大气压的氢气下，且在室温下搅拌隔夜。lc/ms分析显示无残余起始材料。反应混合物用乙酸乙酯稀释，经由硅藻土过滤且在旋转式蒸发器处浓缩。在反应小瓶中，将粗还原产物与休尼格氏碱(0.956ml，5.47mmol)及含三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-4-基酯(729mg，2.189mmol)的乙腈(10ml)合并，且在80℃下加热隔夜。移除溶剂，且将粗物质再溶解于4ml dmf中且在具有用tfa缓冲的乙腈及水的redi-sep柱上进行色谱。合并均质级分且蒸发，得到标题化合物(300mg，0.960mmol，52.7％产率)。lcms：(方法a*)r
t
＝1.455min，94％。(m 2h2o h)

＝348.95。nmr:1h nmr(400mhz,氯仿-d)δ7.96-7.78(m,2h),6.56(s,1h),4.34-4.21(m,1h),3.95-3.84(m,1h),3.82-3.68(m,3h),3.53(dd,j＝13.0,6.0hz,1h),2.39-2.27(m,1h),2.17-1.96(m,1h),1.84-1.69(m,1h),1.41(d,j＝6.5hz,3h),1.15(d,j＝7.0hz,3h)。
[1228]
中间体148
[1229]
8-((2s,4s,5s)-4-羟基-2,5-二甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈
[1230][1231]
在圆底烧瓶中，将(2r,4s,5s)-1-苯甲基-2,5-二甲基哌啶-4-醇(670mg，3.05mmol)及钯/碳(194mg，1.824mmol)在氮气下合并，且将其溶解于meoh(6ml)中。将反应混合物置于1个大气压的氢气下，且在室温下搅拌隔夜。lc/ms分析显示无残余起始材料。反应混合物用乙酸乙酯稀释，经由硅藻土过滤且在旋转式蒸发器处浓缩。在反应小瓶中，将粗还原产物与休尼格氏碱(1.601ml，9.16mmol)及含三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-4-基酯(1222mg，3.67mmol)的乙腈(15ml)合并，且在80℃下加热隔夜。t移除溶剂，且将粗物质再溶解于4ml dmf中且在具有用tfa缓冲的乙腈及水的redi-sep柱上进行色谱。合并均质级分且蒸发，得到标题化合物。lcms：(方法a*)r
t
＝1.719min，87％。(m h)

＝312.95。nmr:1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.21-8.11(m,1h),8.09-8.00(m,1h),6.02(s,1h),4.78(br s,1h),4.61(d,j＝5.9hz,1h),3.53(s,3h),3.48-3.38(m,2h),2.92(t,j＝12.5hz,1h),1.79(ddd,j＝12.7,4.6,2.0hz,1h),1.72-1.52(m,2h),1.18(d,j＝7.0hz,3h),1.01(d,j＝6.5hz,3h)。
[1232]
实施例294
[1233]
8-((2s,4s,5s)-5-乙基-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈
[1234][1235]
在65℃下加热休尼格氏碱(0.033ml，0.191mmol)、2-(((2s,4s,5s)-5-乙基-2-甲基哌啶-4-基)氧基)-5-异丙氧基吡啶2,2,2-三氟乙酸盐(25mg，0.064mmol)及三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-4-基酯(21.23mg，0.064mmol)于dmf(2ml)中的溶液隔夜。将粗反应混合物冷却至室温，过滤且接着使用制备型lc/ms使用以下条件分级分离：柱：xbridge c18，200mm
×
19mm，5μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.1％三氟乙酸；移动相b：95:5乙腈:水 0.1％三氟乙酸；梯度：在30％b保持0分钟，30-70％b历时25分钟，接着在100％b保持0分钟；流速：20ml/min；柱温度：25℃。通过ms及uv信号触发级分收集。合并含有产物的级分且经由离心蒸发干燥。产物产量为14.4mg，且其通过lcms分析所估计的纯
度为100％。使用分析型lc/ms测定最终纯度。注射1条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射1结果：纯度：100％；质量观测值：462.09；保留时间：2.4min。注射2条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.1％三氟乙酸；移动相b：95:5乙腈:水 0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射2结果：纯度：100％；质量观测值：462.05；保留时间：2.01min。在氘化dmso中获取质子nmr。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.16(d,j＝8.9hz,1h),8.10-8.05(m,1h),7.82(d,j＝3.0hz,1h),7.36(dd,j＝8.9,2.8hz,1h),6.73(d,j＝8.9hz,1h),6.07(s,1h),5.28-5.06(m,1h),4.71-4.57(m,1h),4.55-4.46(m,1h),4.04-3.86(m,1h),3.11-2.90(m,2h),2.10(br d,j＝11.8hz,1h),1.98-1.87(m,1h),1.82-1.57(m,2h),1.29(d,j＝7.0hz,3h),1.25(br d,j＝6.0hz,6h),0.97(t,j＝7.5hz,3h)。
[1236]
实施例295
[1237]
8-((2r,4s,5s)-5-乙基-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈
[1238][1239]
在65℃下加热休尼格氏碱(0.069ml，0.398mmol)、2-(((2r,4s,5s)-5-乙基-2-甲基哌啶-4-基)氧基)-5-异丙氧基吡啶2,2,2-三氟乙酸盐(52mg，0.133mmol)及三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-4-基酯(44.2mg，0.133mmol)于dmf(2ml)中的溶液隔夜。将粗反应混合物冷却至室温，过滤且接着使用制备型lc/ms用以下条件分级分离：柱：xbridge c18，200mm
×
19mm，5μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.1％三氟乙酸；移动相b：95:5乙腈:水 0.1％三氟乙酸；梯度：在30％b保持0分钟，30-70％b历时25分钟，接着在100％b保持0分钟；流速：20ml/min；柱温度：25℃。通过ms及uv信号触发级分收集。合并含有产物的级分且经由离心蒸发干燥。产物产量为14.4mg，且其通过lcms分析所估计的纯度为100％。使用分析型lc/ms测定最终纯度。注射1条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射1结果：纯度：100％；质量观测值：462.09；保留时间：2.4min。注射2条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.1％三氟乙酸；移动相b：95:5乙腈:水 0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，
接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射2结果：纯度：100％；质量观测值：462.05；保留时间：2.01min。在氘化dmso中获取质子nmr。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.18-8.12(m,1h),8.11-8.05(m,1h),7.83(br d,j＝1.2hz,1h),7.41-7.34(m,1h),6.81-6.70(m,1h),6.26-6.19(m,1h),4.98(br d,j＝3.6hz,1h),4.60-4.47(m,1h),4.15(br d,j＝4.1hz,1h),3.91-3.77(m,1h),3.10-2.88(m,2h),1.91(br d,j＝2.0hz,1h),1.68(dt,j＝13.5,6.8hz,1h),1.61-1.46(m,1h),1.40-1.30(m,1h),1.27-1.23(m,6h),1.18-1.13(m,3h),0.92-0.83(m,3h)。
[1240]
使用上文方法及中间体，可以类似方式制备以下实施例。
[1241]
[1242][1243]
实施例300
[1244]
6-氯-4-((2s,4r,5r)-5-乙基-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1h)-酮
[1245][1246]
向2-(((2s,4r,5r)-5-乙基-2-甲基哌啶-4-基)氧基)-5-异丙氧基吡啶2tfa(37mg，0.073mmol)于乙腈(5ml)中的溶液中，添加4,6-二氯-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1h)-酮(24.01mg，0.073mmol)及dipea(0.051ml，0.292mmol)。在70℃下加热反应混合物1小时。接着，减压浓缩反应混合物，且将残余物溶解于乙腈与dmf的混合物中。过滤该溶液，且接着使用制备型反相hplc在以下条件下分级分离：柱：xbridge c18，200mm
×
19mm，5μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；梯度：在42％b保持0分钟，42-82％b历时20分钟，接着在100％b保持0分钟；流速：20ml/min；柱温度：25℃。通过ms及uv信号触发级分收集。合并含有产物的级分且经由离心蒸发干燥，得到6-氯-4-((2s,4r,5r)-5-乙基-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1h)-酮(27.6mg，80％产率)。使用分析型lc/ms测定最终纯度。注射1条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.1％三氟乙酸；移动相b：95:5乙腈:水 0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射1结果：纯度：100％；质量观测值：472.02；保留时间：2.11min。注射2条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及
1.51(m,1h),1.29-1.10(m,5h),1.02(d,j＝6.0hz,6h),0.81-0.68(m,3h)。
[1251]
使用上文方法及中间体，以类似方式制备以下实施例。
[1252]
[1253]
[1254][1255]
实施例308
[1256]
8-((2s,4s,5r)-5-乙基-2-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈
[1257][1258]
向3-(三氟甲基)苯酚(23.84mg，0.147mmol)于thf(4ml)中的溶液中，添加于固体载体上的三苯基膦(71.9mg，0.216mmol)。在室温下搅拌反应混合物5min，其后添加(e)-二氮烯-1,2-二甲酸二-叔丁酯(36.1mg，0.157mmol)及8-((2s,4r,5r)-5-乙基-4-羟基-2-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(32mg，0.098mmol)。在氮气下在室温下搅拌反应混合物隔夜。接着过滤该反应混合物且真空浓缩，且将残余物溶解于dmf/ch3cn中，且过滤所得溶液且接着使用制备型反相hplc在以下条件下分级分离：柱：xbridge c18，200mm
×
19mm，5μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；梯度：在43％b保持0分钟，43-83％b历时20分钟，接着在100％b保持0分钟；流速：20ml/min；柱温度：25℃。通过ms信号触发级分收集。合并含有产物的级分且经由离心蒸发干燥，得到8-((2s,4s,5r)-5-乙基-2-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(0.8mg，1.700μmol，1.734％产率)。使用分析型lc/ms测定最终纯度。注射1条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射1结果：纯度：100％；质量观测值：471.09；保留时间：2.52min。注射2条件：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.1％三氟乙酸；移动相b：95:5乙腈:水 0.1％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在
100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。注射2结果：纯度：100％；质量观测值：471.06；保留时间：2.28min。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.23-8.03(m,2h),7.64-7.46(m,1h),7.43-7.23(m,3h),6.19(s,1h),5.13-4.88(m,1h),4.67-4.51(m,1h),3.61-3.52(m,4h),3.12-2.89(m,1h),2.27-2.14(m,1h),1.91-1.75(m,1h),1.59-1.31(m,3h),1.19(d,j＝6.6hz,3h),0.80(t,j＝7.2hz,3h)。
[1259]
使用上文光延条件，用适当中间体，制备以下实施例。
[1260]
[1261]
[1262][1263]
方法a：柱：waters acquity beh c18，2.1
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.05％tfa；移动相b：95:5乙腈:水 0.05％tfa；梯度：0-100％b历时3分钟，接着在100％b保持0.50分钟；流速：1.0ml/min；检测：uv，220nm。
[1264]
方法a*：柱：waters acquity beh c18，2.1
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 0.05％tfa；移动相b：95:5乙腈:水 0.05％tfa；梯度：0-100％b历时1.8分钟，接着在100％b保持0.2分钟；流速：1.0ml/min；检测：uv，220nm。
[1265]
方法b：柱：waters acquity beh c18，2.1
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；梯度：0％-100％b历时3分钟，接着在100％b下保持0.50分钟；流速：1.0ml/min；检测：uv，220nm。
[1266]
方法c：柱：waters xbridge c18，2.1mm
×
50mm，1.7μm粒子；移动相a：5:95乙腈:水 10mm乙酸铵；移动相b：95:5乙腈:水 10mm乙酸铵；温度：50℃；梯度：0％b至100％b历时3min，接着在100％b保持0.50min；流速：1ml/min；检测：ms及uv(220nm)。
[1267]
中间体149
[1268]
( /-)叔丁基-2,5-二甲基-4-((4-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-甲酸酯
[1269][1270]
在室温下，向( /-)叔丁基-2,5-二甲基-4-氧代哌啶-1-甲酸酯(600mg，2.64mmol)、4-(三氟甲基)苯胺(425mg，2.64mmol)于thf(10ml)中的混合物中，以逐滴方式添加ticl4(1.32ml，1.32mmol，1m溶液于thf中)。搅拌反应混合物另外30min，且添加三乙酰氧基硼氢化钠(727mg，3.43mmol)且搅拌12h。用饱和nh4cl溶液淬灭反应物。反应混合物用etoac(100ml)萃取，用水(20ml)、盐水(20ml)洗涤，经na2so4干燥且减压浓缩，得到粗产物。经由硅胶色谱(0-100％etoac/石油醚)纯化粗产物，得到( /-)叔丁基-2,5-二甲基-4-((4-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-甲酸酯(800mg，81％产率)。lcms：m/z＝317.3[(m-t
bu)
h)]；保留时间2.22min。lcms方法：柱：waters acquity uplc beh c18(3
×
50mm)1.7μm，移动相a：2.5mm乙酸铵:乙腈(95:5)；移动相b：2.5mm乙酸铵:乙腈(5:95)，梯度＝60-98％b历时1.1分钟，接着在98％b保持0.6分钟；温度：50℃；流速：0.7ml/min；检测：uv，220nm。
[1271]
中间体150
[1272]
( /-)2,5-二甲基-n-(4-(三氟甲基)苯基)哌啶-4-胺
[1273][1274]
向( /-)-叔丁基-2,5-二甲基-4-((4-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-甲酸酯(800mg，2.15mmol)于dcm(2ml)中的溶液中，添加tfa(1.66ml，21.48mmol)。在室温下搅拌反应混合物2h，减压浓缩，得到( /-)-2,5-二甲基-n-(4-(三氟甲基)苯基)哌啶-4-胺
·
tfa(800mg，96％产率)。lcms：m/z＝273.2(m h)；保留时间1.16及1.21min。lcms方法：柱：waters acquity uplc beh c18(3
×
50mm)1.7μm，移动相a：2.5mm乙酸铵:乙腈(95:5)；移动相b：2.5mm乙酸铵:乙腈(5:95)，梯度＝60-98％b历时1.1分钟，接着在98％b保持0.6分钟；温度：50℃；流速：0.7ml/min；检测：uv，220nm。
[1275]
实施例316a
[1276]
( /-)8-(2,5)-二甲基-4-((4-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈
[1277][1278]
向2,5-二甲基-n-(4-(三氟甲基)苯基)哌啶-4-胺
·
tfa(800mg，2.07mmol)于乙腈(6ml)中的溶液中，添加dipea(1.09ml，6.21mmol)及三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-4-基酯(828mg，2.49mmol)。在85℃下搅拌反应混合物16h，减压浓缩，得到粗产物。通过硅胶色谱(0-20％meoh/chcl3)纯化粗产物。收集纯级分且浓缩，得到呈黄色液体状的8-(2,5)-二甲基-4-((4-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(700mg，74％产率)。lcms：m/z＝456.2(m h)；保留时间＝1.91min。lcms方法：柱：waters acquity uplc beh c18(3
×
50mm)1.7μm，移动相a：2.5mm乙酸铵:乙腈(95:5)；移动相b：2.5mm乙酸铵:乙腈(5:95)，梯度＝90-98％b历时1.1分钟，接着在98％b保持0.6分钟；温度：50℃；流速：0.7ml/min；检测：uv，220nm。
[1279]
实施例316-319
[1280]
8-(2,5)-二甲基-4-(甲基(4-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(纯手性)
[1281][1282]
在室温下，向8-(2,5)-二甲基-4-((4-(三氟甲基)苯基)氨基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(150mg，0.33mmol)、甲醛(9.89mg，0.33mmol)于thf(2ml)中的混合物中，添加ticl4(0.17ml，0.17mmol，1m溶液于thf中)。在相同温度下继续搅拌30min。接着，添加三乙酰氧基硼氢化钠(91mg，0.428mmol)，且在室温下搅拌所得混合物隔夜。用饱和nh4cl溶液淬灭反应物。将反应混合物溶解于etoac(100ml)中，用水(20ml)、盐水(20ml)洗涤，经na2so4干燥且减压浓缩，得到呈浅黄色液体状的粗产物。通过硅胶色谱，通过使用0-10％meoh/chcl3作为洗脱剂，来纯化粗物质。收集纯级分且浓缩，得到异构体混合物，经由制备型sfc纯化异构体混合物(手性sfc方法：柱/尺寸：whelk(r,r)(250
×
30)mm，5μm，co2％：70％；共溶剂：15％的meoh，总流量：140.0g/min，温度：40℃，压力：100巴；uv：220nm)。
[1283]
第一洗脱异构体实施例294：保留时间＝5.33min；第二洗脱异构体实施例295：保留时间＝6.58min；第三洗脱异构体实施例296：保留时间＝9.48min；第四洗脱异构体实施例297：保留时间＝11.44min。
[1284]
实施例294：(1.5mg，1％产率)；lcms：m/z＝470.2(m h)；保留时间＝3.43min。lcms方法：柱：kinetex xb-c18(3
×
75mm)2.6μm；移动相a：10mm甲酸铵:乙腈(98:2)，移动相b：10mm甲酸铵:乙腈(2:98)，梯度＝20-100％b历时4分钟，接着在100％b保持0.6分钟；温度：27℃；流速：1.0ml/min；检测：uv，220nm。
[1285]
实施例295：(1.32mg，1％产率)；lcms：m/z＝470.2(m h)；保留时间＝3.42min。lcms方法：柱：kinetex xb-c18(3
×
75mm)2.6μm；移动相a：10mm甲酸铵:乙腈(98:2)，移动相b：10mm甲酸铵:乙腈(2:98)，梯度＝20-100％b历时4分钟，接着在100％b保持0.6分钟；温度：27℃；流速：1.0ml/min；检测：uv，220nm。
[1286]
实施例296：(2.0mg，1％产率)；lcms：m/z＝470.2(m h)；保留时间＝3.44min。lcms方法：柱：kinetex xb-c18(3
×
75mm)2.6μm；移动相a：10mm甲酸铵:乙腈(98:2)，移动相b：10mm甲酸铵:乙腈(2:98)，梯度＝20-100％b历时4分钟，接着在100％b保持0.6分钟；温度：27℃；流速：1.0ml/min；检测：uv，220nm。
[1287]
实施例297：(2.1mg，1.3％产率)；lcms：m/z＝470.2(m h)；保留时间＝3.44min。lcms方法：柱：kinetex xb-c18(3
×
75mm)2.6μm；移动相a：10mm甲酸铵:乙腈(98:2)，移动相b：10mm甲酸铵:乙腈(2:98)，梯度＝20-100％b历时4分钟，接着在100％b保持0.6分钟；温
度：27℃；流速：1.0ml/min；检测：uv，220nm。
[1288]
根据实施例294至297中所公开的通用程序，由3-(三氟甲基)苯胺制备表24中的实施例。
[1289]
表24
[1290][1291]
中间体152
[1292]
3-甲基-4-(甲氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
[1293][1294]
向3-甲基-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(500mg，2.344mmol)于甲醇(10ml)中的溶液中，添加甲胺(0.44ml，33％于meoh中，4.69mmol)，且将反应混合物加热至85℃持续2h。将反应混合物冷却至室温。添加硼氢化钠(177mg，4.69mmol)，且搅拌反应混合物12h。用饱和nh4cl淬灭反应物。将反应混合物溶解于etoac(100ml)中，用饱和nahco3(20ml)、水(20ml)、盐水(20ml)洗涤，经na2so4干燥且减压浓缩，得到3-甲基-4-(甲氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(330mg，62％产率)。lcms：m/z＝229.2(m h)；保留时间1.07min。lc-ms方法：柱-aquity uplc beh c18(3.0
×
50mm)1.7μm；移动相a：缓冲液:乙腈(95:5)；移动相b：缓冲液:乙腈(5:95)，缓冲液：10mm乙酸铵；梯度：20-100％b历时2.0分钟，接着在100％b保持0.2分钟，流速0.7ml/min。
[1295]
中间体153
[1296]
4-((4-氟苯甲基)(甲基)氨基)-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯
[1297][1298]
向3-甲基-4-(甲氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(330mg，1.45mmol)于乙腈(5ml)中的溶液中，添加1-(氯甲基)-4-氟苯(313mg，2.17mmol)、dipea(0.505ml，2.89mmol)及碘化钠(217mg，1.45mmol)，且在85℃加热持续4h。将反应混合物冷却至室温，用etoac(100ml)稀释且用水(20ml)、盐水(20ml)洗涤，经na2so4干燥且减压浓缩，得到粗产物，通过硅胶色谱，通过使用0-10％meoh/chcl3作为洗脱剂来纯化该粗产物。收集纯级分且浓缩，得到呈黄色液体状的4-((4-氟苯甲基)(甲基)氨基)-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(420mg，86％产率)。lcms：m/z＝337.2(m h)；保留时间2.12min。lc-ms方法：柱-aquity uplc beh c18(3.0
×
50mm)1.7μm；移动相a：缓冲液:乙腈(95:5)；移动相b：缓冲液:乙腈(5:95)，缓冲液：10mm乙酸铵；梯度：20-100％b历时2.0分钟，接着在100％b保持0.2分钟，流速0.7ml/min。
[1299]
中间体154
[1300]
n-(4-氟苯甲基)-n,3-二甲基哌啶-4-胺
·
tfa
[1301][1302]
向4-((4-氟苯甲基)(甲基)氨基)-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(400mg，1.19mmol)于ch2cl2(4ml)中的溶液中，添加tfa(0.916ml，11.89mmol)，且搅拌2h。减压浓缩反应混合物，得到n-(4-氟苯甲基)-n,3-二甲基哌啶-4-胺
·
tfa(400mg，96％产率)。lcms：m/z＝237.2(m h)；保留时间1.15min。lc-ms方法：柱-aquity uplc beh c18(3.0
×
50mm)1.7μm；移动相a：缓冲液:乙腈(95:5)；移动相b：缓冲液:乙腈(5:95)，缓冲液：10mm乙酸铵；梯度：20-100％b历时2.0分钟，接着在100％b保持0.2分钟，流速0.7ml/min。
[1303]
实施例322-325
[1304]
8-(4-((4-氟苯甲基)(甲基)氨基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2,7-二甲腈
[1305][1306]
向n-(4-氟苯甲基)-n,3-二甲基哌啶-4-胺
·
tfa(200mg，0.57mmol)于乙腈(3ml)中的溶液中，添加dipea(0.3ml，1.71mmol)及8-氯-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2,
7-二甲腈(209mg，0.856mmol)。在85℃下加热反应混合物16h。将反应混合物冷却至室温，减压浓缩，且通过硅胶色谱，使用0-10％meoh/chcl3作为洗脱剂来纯化。收集纯级分且浓缩，得到黄色液体，通过制备型hplc分离该黄色液体(柱：sunfire c-18(150mm
×
21.2mm id，5μm)；移动相a：10mm乙酸铵/水，ph 4.5；移动相b：乙腈，流速：20ml/min；梯度值：25至45％b历时20min)，得到非对映异构混合物1及非对映异构混合物2。
[1307]
通过手性sfc分离非对映异构混合物1(柱/尺寸：chiralpak ig(250
×
4.6)mm，5μm；共溶剂％：40％；共溶剂：0.2％dea/ipa 乙腈(1 1)；总流量：4g/min；背压：100巴；温度：30℃)，得到异构体1：实施例322，保留时间＝2.5min；及异构体2：实施例323，保留时间＝3.49min。
[1308]
通过手性sfc分离非对映异构混合物2(柱/尺寸：cellulose 4(250
×
4.6)mm，5μm；共溶剂％：50％；共溶剂：0.2％的含4m甲醇氨的甲醇；总流量：4g/min；背压：100巴；温度：30℃)，得到异构体3：实施例324，保留时间＝2.09min；及异构体4：实施例325，保留时间＝2.82min。
[1309]
实施例322：(9mg，3.5％产率)；lcms：m/z＝445.2(m h)；保留时间＝1.33min。lcms方法：柱：kinetex xb-c18(3
×
75mm)2.6μm；移动相a：10mm甲酸铵:乙腈(98:2)，移动相b：10mm甲酸铵:乙腈(2:98)，梯度＝20-100％b历时4分钟，接着在100％b保持0.6分钟；温度：27℃；流速：1.0ml/min；检测：uv，220nm。
[1310]
实施例323：(10mg，4％产率)；lcms：m/z＝445.4(m h)；保留时间＝1.24min。lcms方法：柱：kinetex xb-c18(3
×
75mm)2.6μm；移动相a：10mm甲酸铵:乙腈(98:2)，移动相b：10mm甲酸铵:乙腈(2:98)，梯度＝20-100％b历时4分钟，接着在100％b保持0.6分钟；温度：27℃；流速：1.0ml/min；检测：uv，220nm。
[1311]
实施例324：(11mg，4％产率)；lcms：m/z＝445.4(m h)；保留时间＝1.24min。lcms方法：柱：kinetex xb-c18(3
×
75mm)2.6μm；移动相a：10mm甲酸铵:乙腈(98:2)，移动相b：10mm甲酸铵:乙腈(2:98)，梯度＝20-100％b历时4分钟，接着在100％b保持0.6分钟；温度：27℃；流速：1.0ml/min；检测：uv，220nm。
[1312]
实施例325：(6mg，2.5％产率)；lcms：m/z＝445.3(m h)；保留时间＝1.32min。lcms方法：柱：kinetex xb-c18(3
×
75mm)2.6μm；移动相a：10mm甲酸铵:乙腈(98:2)，移动相b：10mm甲酸铵:乙腈(2:98)，梯度＝20-100％b历时4分钟，接着在100％b保持0.6分钟；温度：27℃；流速：1.0ml/min；检测：uv，220nm。
[1313]
根据实施例322至325中所公开的通用程序，由三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-4-基酯制备表25中的实施例。
[1314]
表25
[1315]
[1316]
[1317][1318]
中间体155
[1319]
(
±
)-(2s,5s)-4-羟基-2,4,5-三甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯
[1320][1321]
在氮气下，历时3min，向在-30℃下的(2s,5s)-2,5-二甲基-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(500mg，2.20mmol)于四氢呋喃(10ml)中的搅拌溶液中，逐滴添加含溴化甲基镁的乙醚(3.7ml，11.00mmol)。使反应混合物缓慢升温至室温且搅拌16h。用饱和氯化铵水溶液(100ml)淬灭反应物。用乙酸乙酯(3
×
100ml)稀释反应混合物。经合并的有机层经无水硫酸钠干燥，过滤且减压蒸发，得到粗产物，通过硅胶色谱(使用15％-20％乙酸乙酯/石油醚)纯化该粗产物，得到(2s,5s)-4-羟基-2,4,5-三甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(420mg，78％产率)。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ4.42-4.23(m,1h),3.81-3.59(m,1h),2.92-2.77(m,1h),1.78-1.66(m,1h),1.58-1.50(m,1h),1.49-1.44(m,10h),1.28(d,j＝7.2hz,3h),1.21-1.17(m,3h),0.95-0.87(m,3h)ppm。
[1322]
中间体156
[1323]
(
±
)(2s,5s)-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2,4,5-三甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯
[1324][1325]
向叔丁基-4-羟基-2,4,5-三甲基哌啶-1-甲酸酯(200mg，0.82mmol)于dmso(8ml)中的搅拌溶液中，添加在0℃下的nah(60％w/w，99mg，2.47mmol)以及2-氟-5-异丙氧基吡啶(191mg，1.23mmol)。在65℃下加热反应混合物20h。用水(50ml)淬灭反应物。用乙酸乙酯(3
×
100ml)萃取反应混合物。经合并的有机层经无水硫酸钠干燥，过滤且减压蒸发，得到粗产物，通过硅胶柱(10％-20％乙酸乙酯/石油醚)纯化该粗产物，得到(2s,5s)-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2,4,5-三甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(110mg，0.17mmol，20.86％产率)。lcms：m/z＝379.2(m h)；保留时间4.18min；lcms方法：柱：kinetex xb-c18(3
×
75mm)2.6μm；移动相a：10mm甲酸铵:乙腈(98:2)，移动相b：10mm甲酸铵:乙腈(2:98)，梯度＝20-100％b历时4分钟，接着在100％b保持0.6分钟；温度：27℃；流速：1.0ml/min；检测：uv，220nm。
[1326]
中间体157
[1327]
(
±
)5-异丙氧基-2-(((2s,5s)-2,4,5-三甲基哌啶-4-基)氧基)吡啶盐酸盐
[1328][1329]
向(
±
)(2s,5s)-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2,4,5-三甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(120mg，0.317mmol)于dcm(5ml)中的搅拌溶液中，添加含hcl的二噁烷(0.05ml，1.59mmol)。在室温下搅拌反应混合物2h。减压浓缩反应混合物，得到(
±
)5-异丙氧基-2-(((2s,5s)-2,4,5-三甲基哌啶-4-基)氧基)吡啶(80mg，91％产率)。lcms：m/z＝279.2(m h)；保留时间1.932min。lcms方法：柱：kinetex xb-c18(3
×
75mm)2.6μm；移动相a：10mm甲酸铵:乙腈(98:2)，移动相b：10mm甲酸铵:乙腈(2:98)，梯度＝20-100％b历时4分钟，接着在100％b保持0.6分钟；温度：27℃；流速：1.0ml/min；检测：uv，220nm。
[1330]
实施例335及336
[1331]
8-((2s,5s)-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2,4,5-三甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈
[1332][1333]
向6-氰基-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-4-基三氟甲烷磺酸酯(100mg，0.30mmol)于乙腈(8ml)中的搅拌溶液中，添加dipea(0.16ml，0.90mmol)及5-异丙氧基-2-(((2s,5s)-2,4,5-三甲基哌啶-4-基)氧基)吡啶
·
hcl(113mg，0.36mmol)。在85℃下加热反应混合物16h。用水(20ml)淬灭反应物。用乙酸乙酯(3
×
20ml)萃取反应混合物。经合并的有机层经无水硫酸钠干燥，过滤且减压蒸发，得到粗产物，通过制备型sfc[sfc条件：柱/尺寸：chiralcel oj-h(250
×
30)mm，5μm；co2％：85％；共溶剂％：15％meoh；总流量：100.0g/min；背压：100巴；温度：35℃；uv：227nm]来纯化该粗产物，得到实施例362(14mg，10％产率)及实施例363(13mg，10％产率)。
[1334]
实施例362：lcms：m/z＝462.3(m h)；保留时间2.416min；[lcms方法：柱：xbridge beh xp c18(50
×
2.1)mm，2.5μm；移动相a：10mm乙酸铵:乙腈(95:5)；移动相b：10mm乙酸铵:乙腈(5:95)；梯度＝0-100％b历时3分钟；温度：50℃；流速：1.1ml/min；检测：uv，220nm]。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.18-8.10(m,1h),8.09-7.99(m,1h),7.79(d,j＝2.9hz,1h),7.33-7.36(m,1h),6.72(d,j＝9.0hz,1h),6.04(s,1h),4.73-4.63(m,1h),4.49-4.54(m,1h),3.52(s,3h),3.39-3.44(m,2h),3.07-3.11(m,1h),2.01-1.90(m,1h),1.80-1.85(m,1h),1.51(s,3h),1.23-1.25(m,6h),1.09(d,j＝6.8hz,3h),1.03(d,j＝7.1hz,3h)。
[1335]
实施例363：lcms：m/z＝462.3(m h)；保留时间2.417min[lcms方法：柱：xbridge beh xp c18(50
×
2.1)mm，2.5μm；移动相a：10mm乙酸铵:乙腈(95:5)；移动相b：10mm乙酸铵:乙腈(5:95)；梯度＝0-100％b历时3分钟；温度：50℃；流速：1.1ml/min；检测：uv，220nm]。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.19-8.08(m,1h),8.08-7.96(m,1h),7.84-7.74(m,1h),7.32-7.35(m,1h),6.79-6.65(m,1h),6.10-5.97(m,1h),4.76-4.61(m,1h),4.48-4.54(m,1h),3.52(s,3h),3.42-3.36(m,2h),3.08-3.11(m,1h),2.01-1.90(m,1h),1.87-1.77(m,1h),1.51(d,j＝2.4hz,3h),1.27-1.21(m,6h),1.08-1.10(m,3h),1.02-1.08(m,3h)。
[1336]
根据实施例335及336中所公开的通用程序，由适当起始材料制备表26中的实施例。
[1337]
表26
[1338][1339][1340]
中间体158
[1341]
(
±
)-3-乙氧基-4,4-二甲氧基哌啶-1-甲酸叔丁酯
[1342][1343]
在0℃下，向(
±
)-3-羟基-4,4-二甲氧基哌啶-1-甲酸叔丁酯(8g，30.6mmol)于thf(80ml)中的搅拌溶液中，添加nah(60％，于矿物油中)(1.71g，42.9mmol，60％w/w)。在5分钟之后，添加碘乙烷(4.95ml，61.2mmol)的溶液，且在室温下搅拌反应混合物隔夜。将反应混合物冷却至0℃。用冰冷的水淬灭反应物。用etoac(2
×
50ml)萃取混合物。经合并的有机萃取物用盐水洗涤，经na2so4干燥且浓缩，得到粗产物，该粗产物经由急骤色谱，使用120g硅胶柱且用30％-50％etoac/石油醚洗脱来进行纯化，得到(
±
)-3-乙氧基-4,4-二甲氧基哌啶-1-甲酸叔丁酯(5g，56％产率)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δppm 4.02-4.21(m,1h),3.59-3.90(m,2h),3.11(s,3h),3.09(s,3h),2.54-2.93(m,3h),1.63-1.73(m,1h),1.46-1.61(m,1h),1.39(s,9h),1.02-1.18(m,3h)。
[1344]
中间体159
[1345]
(
±
)-3-乙氧基-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯
[1346][1347]
向3,4,4-三乙氧基哌啶-1-甲酸叔丁酯(9g，28.4mmol)于二氯甲烷(70ml)中的搅拌溶液中，逐滴添加tfa(10.9ml，142mmol)，且在50℃下加热反应混合物16h。将反应混合物冷却至室温，且减压移除溶剂，得到粗产物，将粗产物溶解于dcm(50ml)中。在室温下依序添加tea(19.8ml，142mmol)、boc2o(9.9ml，42.5mmol)，且搅拌隔夜。用dcm(2
×
100ml)萃取反应混合物。经合并的有机萃取物用盐水洗涤，经na2so4干燥且浓缩，得到粗产物，该粗产物经由急骤色谱，使用120g硅胶柱且用10-15％etoac/石油醚洗脱来进行纯化，得到(
±
)-3-乙氧基-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(5g，72％产率)。1h nmr(400mhz,氯仿-d)δppm 3.96-4.42(m,2h),3.64-3.89(m,2h),3.19-3.59(m,3h),2.47-2.65(m,2h),1.50(s,9h),1.25(t,j＝7.0hz,3h)。
[1348]
中间体160
[1349]
3-乙氧基-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯
[1350][1351]
在氮气下，在0℃下，向(
±
)-3-乙氧基-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(3g，12.3mmol)于meoh(20ml)中的溶液中，逐份添加硼氢化钠(0.93g，24.66mmol)。使反应混合物升温至室温且搅拌2h。将反应混合物冷却至0℃。逐滴用nh4cl饱和水溶液淬灭反应物。用etoac(3
×
100ml)萃取反应混合物。经合并的有机萃取物用盐水洗涤，经na2so4干燥且浓缩，得到叔丁
基-3-乙氧基-4-羟基哌啶-1-甲酸酯(2.5g，83％产率)。1h nmr 300mhz,dmso-d6)δppm 4.50-4.95(m,1h),3.38-3.74(m,5h),2.97-3.29(m,3h),1.42-1.80(m,2h),1.38(s,9h),1.04-1.16(m,3h)。
[1352]
中间体161
[1353]
3-乙氧基哌啶-4-醇
·
hcl盐
[1354][1355]
在0℃下，向3-乙氧基-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(3g，12.23mmol)于dcm(15ml)中的溶液中，添加含4m hcl的二噁烷(3.72ml，122mmol)。在室温下搅拌反应混合物2h，其后将其减压浓缩，得到3-乙氧基哌啶-4-醇
·
hcl盐(1.5g，84％产率)。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δppm 9.16-9.37(m,1h),8.47-8.70(m,1h),3.81-3.96(m,1h),3.42-3.76(m,5h),2.93-3.11(m,3h),1.53-1.86(m,2h),1.14(t,j＝7.0hz,3h)
[1356]
中间体161及162
[1357]
(
±
)顺式-8-(3-乙氧基-4-羟基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈及(
±
)反式-8-(3-乙氧基-4-羟基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈
[1358][1359]
在室温下，向3-乙氧基哌啶-4-醇
·
hcl盐(1.4g，9.64mmol)于乙腈(15ml)中的搅拌溶液中，添加dipea(5.1ml，28.9mmol)及三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-4-基酯(3.21g，9.64mmol)。在80℃下加热反应混合物12h。将反应混合物冷却至室温，且减压移除溶剂，得到粗产物，通过硅胶色谱(80-100％etoac/石油醚)纯化粗产物，得到8-(3-乙氧基-4-羟基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈的非对映异构混合物。lcms：m/z，329.2(m 1)；保留时间：0.79及0.82min。(lcms方法：柱：waters acquity uplc beh c18(2.1x50mm)1.7μm，移动相a：10mm乙酸铵:乙腈(95:5)；移动相b：10mm乙酸铵:乙腈(5:95)，梯度＝20-100％b历时2分钟，接着在100％b保持0.3分钟；温度：50℃；流速：0.7ml/min；检测：uv，220nm)。
[1360]
通过制备型sfc[柱：princeton diol(250
×
30)mm，5μm；co2％：90％；共溶剂％：10％的甲醇；总流量：150.0g/min；背压：100巴；温度：40℃；uv：226nm]来进一步纯化顺式/反式非对映异构体。
[1361]
中间体136：(
±
)顺式-8-(3-乙氧基-4-羟基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈；峰-1：(1.7g，52.1％产率)；lcms：m/z，329.2(m 1)；保留时间：
1.02min。(lcms方法：柱：kinetex xb-c18(3
×
75mm)2.6μm；移动相a：10mm甲酸铵:乙腈(98:2)，移动相b：10mm甲酸铵:乙腈(2:98)，梯度＝20-100％b历时4分钟，接着在100％b保持0.6分钟；温度：27℃；流速：1.0ml/min；检测：uv，220nm)。
[1362]
中间体137：(
±
)反式-8-(3-乙氧基-4-羟基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈：峰-2(反式-异构体/外消旋体)：(0.7g，20％产率)；lcms：m/z，329.2(m 1)；保留时间：1.25min。(lcms方法：柱：kinetex xb-c18(3
×
75mm)2.6μm；移动相a：10mm甲酸铵:乙腈(98:2)，移动相b：10mm甲酸铵:乙腈(2:98)，梯度＝20-100％b历时4分钟，接着在100％b保持0.6分钟；温度：27℃；流速：1.0ml/min；检测：uv，220nm)。
[1363]
实施例341及342
[1364]
反式-8-(3-乙氧基-4-苯氧基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈
[1365][1366]
在室温下，向(
±
)-顺式-8-(3-乙氧基-4-羟基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(100mg，0.30mmol)于thf(5ml)中的搅拌溶液中，依序添加三苯基膦(176mg，0.67mmol)、diad(0.12ml，0.61mmol)及苯酚(57.3mg，0.61mmol)。在60℃下加热反应混合物2h。将反应混合物冷却至室温，且减压移除溶剂，得到粗产物，通过制备型sfc(柱：luxcellulose-4(250
×
21.5)mm，5μm；co2％：70％；共溶剂％：30％的含4m甲醇氨的meoh；总流量：80.0g/min；背压：100巴；温度：30℃；uv：226nm)来纯化该粗产物。
[1367]
实施例341：(纯手性)：(6.2mg，5％产率)；lcms：m/z，405.2(m h)；保留时间：1.91；lc/ms方法：柱：waters xbridge c18，19
×
150mm，5μm粒子；移动相a：10mm乙酸铵；移动相b：乙腈；梯度：20-65％b历时20分钟，接着在100％b保持5分钟；流速：15ml/min。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.22-8.14(m,1h),8.12-8.01(m,1h),7.37-7.23(m,2h),7.04(d,j＝7.8hz,2h),6.94(t,j＝7.3hz,1h),6.14(s,1h),4.52-4.40(m,1h),4.21-4.11(m,1h),3.79-3.57(m,4h),3.54(s,3h),3.30-3.15(m,2h),2.27-2.15(m,1h),1.80-1.66(m,1h),1.07(t,j＝7.0hz,3h)。
[1368]
实施例342：(纯手性)：(3.2mg，2.5％产率)；lcms 405.3(m h)；保留时间：1.91min；lc/ms方法：柱：waters xbridge c18，19
×
150mm，5μm粒子；移动相a：10mm乙酸铵；移动相b：乙腈；梯度：20-65％b历时20分钟，接着在100％b保持5分钟；流速：15ml/min。1h nmr(400mhz,dmso-d6):δppm 8.22-8.14(m,1h),8.12-8.03(m,1h),7.36-7.24(m,2h),7.04(d,j＝7.8hz,2h),6.94(t,j＝7.3hz,1h),6.15(s,1h),4.47(td,j＝7.7,4.4hz,1h),4.20-4.10(m,1h),3.78-3.56(m,4h),3.54(s,3h),3.29-3.17(m,2h),2.27-2.18(m,1h),1.81-1.68(m,1h),1.07(t,j＝7.0hz,3h)。
[1369]
根据实施例341及342中所公开的通用程序，由适当起始材料制备表27中的实施例。
[1370]
表27
[1371]
[1372]
[1373]
[1374]
[1375]
[1376][1377]
实施例363及364
[1378]
反式-8-(3-乙氧基-4-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈
[1379][1380]
在室温下，向(
±
)-反式-8-(3-乙氧基-4-羟基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(100mg，0.30mmol)于dmso(3ml)中的搅拌溶液中，添加叔丁醇钾(68.3mg，0.61mmol)及2-氟-6-(三氟甲基)吡啶(75mg，0.46mmol)，且搅拌2h。用冰冷的水淬灭反应物。用etoac(2
×
10ml)萃取反应混合物。经合并的有机萃取物用盐水洗涤，经na2so4干燥且浓缩，得到粗产物，通过制备型sfc(柱：luxcellulose-4(250
×
30)mm，5μm；co2％：65％；共溶剂％：35％的含0.2％氨水的meoh；总流量：70.0g/min；背压：100巴；温度：30℃；uv：225nm)来纯化该粗产物。
[1381]
实施例363：(11mg，8％产率)；lcms：m/z，474.2(m h)；保留时间：2.06；lc/ms方法：柱：waters xbridge c18，19
×
150mm，5μm粒子；移动相a：10mm乙酸铵；移动相b：乙腈；梯度：20-65％b历时20分钟，接着在100％b保持5分钟；流速：15ml/min。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δppm8.16-8.21(m,1h),8.07-8.13(m,1h),7.95-8.01(m,1h),7.48-7.53(m,1h),7.16-7.21(m,1h),6.17(s,1h),5.13-5.20(m,1h),4.12-4.19(m,1h),3.54-3.78(7h),2.28-2.37(m,1h),1.75-1.85(m,1h),1.07(t,j＝7.0hz,3h)。
[1382]
实施例364：(10mg，7％产率)；lcms 474.2(m h)；保留时间：2.07min；lc/ms方法：柱：waters xbridge c18，19
×
150mm，5μm粒子；移动相a：10mm乙酸铵；移动相b：乙腈；梯度：20-65％b历时20分钟，接着在100％b保持5分钟；流速：15ml/min。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δppm 8.15-8.21(m,1h),8.06-8.13(m,1h),7.96-8.03(m,1h),7.46-7.53(m,1h),7.19(d,j＝8.3hz,1h),6.16(s,1h),5.11-5.20(m,1h),4.11-4.18(m,1h),3.52-3.79(m,7h),2.27-2.38(m,1h),1.73-1.85(m,1h),1.07(t,j＝7.0hz,3h)。
[1383]
根据实施例363及364中所公开的通用程序，由适当起始材料制备表28中的实施例。
[1384]
表28
[1385][1386]
实施例367及368
[1387]
反式-8-(3-乙氧基-4-((5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈
[1388][1389]
在室温下，向(
±
)-反式-8-(3-乙氧基-4-羟基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(60mg，0.18mmol)于dmf(3ml)中的搅拌溶液中，添加cs2co3(179mg，0.55mmol)及2-氯-5-(三氟甲基)吡啶(43.1mg，0.24mmol)。在100℃下加热反应混合物6h。将反应混合物冷却至室温，用水稀释且用etoac(2
×
10ml)萃取。经合并的有机萃取物用盐水洗涤，经na2so4干燥且浓缩，得到粗产物，通过制备型sfc(柱：cellulose-4(250
×
30)mm，5μm；co2％：50％；共溶剂％：50％的meoh；总流量：70.0g/min；背压：100巴；温度：30℃；uv：
225nm)来纯化该粗产物。
[1390]
实施例367：(3.4mg，4％产率)；lcms：m/z，474.2(m h)；保留时间：2.05min；lc/ms方法：柱：waters xbridge c18，19
×
150mm，5μm粒子；移动相a：10mm乙酸铵；移动相b：乙腈；梯度：20-65％b历时20分钟，接着在100％b保持5分钟；流速：15ml/min。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δppm 8.59-8.64(m,1h),8.18-8.24(m,1h),8.08-8.13(m,2h),7.07(d,j＝8.6hz,1h),6.18(s,1h),5.26-5.33(m,1h),4.21-4.29(m,1h),3.68-3.79(m,3h),3.54-3.63(m,4h),3.17-3.24(m,2h),2.29-2.36(m,1h),1.72-1.87(m,1h),1.07(t,j＝7.0hz,3h)。
[1391]
实施例368：(2mg，4％产率)；lcms 474.2(m h)；保留时间：2.14min；lc/ms方法：柱：waters xbridge c18，19
×
150mm，5μm粒子；移动相a：10mm乙酸铵；移动相b：乙腈；梯度：20-65％b历时20分钟，接着在100％b保持5分钟；流速：15ml/min。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δppm 8.59-8.62(m,1h),8.19(d,j＝9.0hz,1h),8.08-8.13(m,2h),7.06(d,j＝9.0hz,1h),6.18(s,1h),5.26-5.33(m,1h),4.22-4.29(m,1h),3.69-3.78(m,3h),3.54-3.63(m,4h),3.16-3.23(m,2h),2.27-2.32(m,1h),1.74-1.85(m,1h),1.07(t,j＝7.0hz,3h)。
[1392]
实施例369及370
[1393]
顺式-8-(3-乙氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈
[1394][1395]
在室温下，向(
±
)-反式-8-(3-乙氧基-4-羟基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈(70mg，0.21mmol)于thf(3ml)中的搅拌溶液中，依序添加三苯基膦(123mg，0.47mmol)、diad(0.08ml，0.43mmol)及3-(三氟甲基)苯酚(69mg，0.43mmol)。在60℃下加热反应混合物2h，接着冷却至室温，且减压移除溶剂，得到粗产物，通过制备型sfc(柱：luxcellulose-4(250
×
30)mm，5μ；co2％：65％；共溶剂％：35％的meoh；总流量：130.0g/min；背压：100巴；温度：40℃；uv：226nm)来纯化该粗产物。
[1396]
实施例369：(12mg，12％产率)；lcms：m/z，473.3(m h)；保留时间：2.20min；lc/ms方法：柱：waters xbridge c18，19
×
150mm，5μm粒子；移动相a：10mm乙酸铵；移动相b：乙腈；梯度：20-65％b历时20分钟，接着在100％b保持5分钟；流速：15ml/min。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δppm 8.18(d,j＝8.8hz,1h),8.06-8.11(m,1h),7.48-7.55(m,1h),7.33-7.40(m,2h),7.29(d,j＝7.6hz,1h),6.16(s,1h),4.59-4.65(m,1h),4.24-4.30(m,1h),3.64-3.77(m,3h),3.52-3.60(m,4h),3.12-3.23(m,2h),2.19-2.27(m,1h),1.72-1.82(m,1h),1.04(t,j＝7.0hz,3h)。
[1397]
实施例370：(10mg，10％产率)；lcms 473.2(m h)；保留时间：2.23min；lc/ms方法：柱：waters xbridge c18，19
×
150mm，5μm粒子；移动相a：10mm乙酸铵；移动相b：乙腈；梯度：
20-65％b历时20分钟，接着在100％b保持5分钟；流速：15ml/min。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δppm8.44(d,j＝8.8hz,1h),8.33-8.38(m,1h),7.75-7.82(m,1h),7.54-7.68(m,3h),6.42(s,1h),4.84-4.93(m,1h),4.50-4.58(m,1h),3.91-4.02(m,3h),3.79-3.86(m,4h),3.41-3.50(m,2h),2.46-2.55(m,1h),1.98-2.09(m,1h),1.30(t,j＝7.1hz,3h)。
[1398]
中间体163
[1399]
(
±
)-顺式-叔丁基-3-乙氧基-4-羟基哌啶-1-甲酸酯
[1400][1401]
在-78℃下，向f(
±
)-3-乙氧基-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(6.3g，25.9mmol)于thf(60ml)中的溶液中，逐滴添加三仲丁基硼氢化锂的溶液(38.8ml，38.8mmol，1m于thf中)。使反应混合物升温至室温且搅拌隔夜。将反应混合物冷却至0℃。逐滴用nh4cl饱和水溶液淬灭反应物。用etoac(3
×
100ml)萃取反应混合物。经合并的有机萃取物用盐水洗涤，经na2so4干燥且浓缩，得到粗产物，该粗产物经由急骤色谱，使用120g硅胶柱且用10-15％etoac/石油醚洗脱来进行纯化，得到(
±
)-顺式-叔丁基-3-乙氧基-4-羟基哌啶-1-甲酸酯(5.3g，83％产率)。1h nmr(400mhz,氯仿-d)δppm 3.86(br s,1h),3.63-3.74(m,1h),3.20-3.61(m,6h),2.37(br s,1h),1.75-1.85(m,1h),1.57-1.70(m,1h),1.45(s,9h),1.20(br t,j＝6.9hz,3h)。
[1402]
中间体164
[1403]
(
±
)-顺式-叔丁基-3-乙氧基-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-甲酸酯
[1404][1405]
在室温下，向(
±
)-顺式-叔丁基-3-乙氧基-4-羟基哌啶-1-甲酸酯(100mg，0.41mmol)于dmso(2ml)中的搅拌溶液中，添加叔丁醇钾(60mg，0.82mmol)及2-氟-5-异丙氧基吡啶(95mg，0.61mmol)，且搅拌2h。用冰冷的水淬灭反应物。用etoac(2
×
10ml)萃取反应混合物。经合并的有机萃取物用盐水洗涤，经na2so4干燥且浓缩，得到粗产物，经由急骤色谱(60-80％etoac/石油醚)纯化该粗产物，得到(
±
)-顺式-叔丁基-3-乙氧基-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-甲酸酯(120mg，80％产率)。lcms：m/z，381.3(m 1)；保留时间：2.07min。(lcms方法：柱：waters acquity uplc beh c18(2.1x 50mm)1.7μm，移动相a：10mm乙酸铵:乙腈(95:5)；移动相b：10mm乙酸铵:乙腈(5:95)，梯度＝20-100％b历时2分钟，接着在100％b保持0.3分钟；温度：50℃；流速：0.7ml/min；检测：uv，220nm)。
[1406]
中间体165
[1407]
(
±
)-顺式-2-((3-乙氧基哌啶-4-基)氧基)-5-异丙氧基吡啶
·
tfa
[1408][1409]
使(
±
)-顺式-3-乙氧基-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.1g，0.26mmol)于dcm(15ml)中的搅拌溶液冷却至0℃，且向其中添加tfa(0.1ml，1.31mmol)。在室温下搅拌反应混合物2h且减压浓缩，得到(
±
)-顺式-2-((3-乙氧基哌啶-4-基)氧基)-5-异丙氧基吡啶(90mg，90％产率)。lcms：m/z，281.3(m 1)；保留时间：1.01min。(lcms方法：柱：waters acquity uplc beh c18(2.1x50mm)1.7μm，移动相a：10mm乙酸铵:乙腈(95:5)；移动相b：10mm乙酸铵:乙腈(5:95)，梯度＝20-100％b历时2分钟，接着在100％b保持0.3分钟；温度：50℃；流速：0.7ml/min；检测：uv，220nm)。
[1410]
实施例371及372
[1411]
顺式-8-(3-乙氧基-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈
[1412][1413]
在室温下，向(
±
)-顺式-2-((3-乙氧基哌啶-4-基)氧基)-5-异丙氧基吡啶.tfa(70mg，0.25mmol)于乙腈(3ml)中的搅拌溶液中，添加dipea(0.13ml，0.75mmol)及三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-4-基酯(83mg，0.25mmol)。在80℃下加热反应混合物12h。将反应混合物冷却至室温，且减压移除溶剂，得到粗产物，通过制备型sfc[柱：luxcellulose-4(250
×
30)mm，5μm；co2％：60％；共溶剂％：40％的meoh；总流量：140.0g/min；背压：100巴；温度：40℃；uv：226nm]来纯化该粗产物。
[1414]
实施例371：(8.7mg，7％产率)；lcms：m/z，464.2(m h)；保留时间：1.81min；lc/ms方法：柱：waters xbridge c18，19
×
150mm，5μm粒子；移动相a：10mm乙酸铵；移动相b：乙腈；梯度：20-65％b历时20分钟，接着在100％b保持5分钟；流速：15ml/min。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δppm 8.14-8.22(m,1h),8.06-8.12(m,1h),7.79-7.85(m,1h),7.35-7.42(m,1h),6.78(d,j＝8.8hz,1h),6.15(s,1h),5.29-5.37(m,1h),4.52(dt,j＝12.0,6.1hz,1h),3.98-4.07(m,1h),3.82-3.87(m,1h),3.52-3.66(m,5h),3.34-3.50(m,3h),2.08-2.17(m,1h),1.85-1.95(m,1h),1.24(d,j＝6.1hz,6h),0.95(t,j＝6.8hz,3h)。
[1415]
实施例372：(12mg，11％产率)；lcms：m/z，464.2(m h)；保留时间：1.81min；lc/ms
方法：柱：waters xbridge c18，19
×
150mm，5μm粒子；移动相a：10mm乙酸铵；移动相b：乙腈；梯度：20-65％b历时20分钟，接着在100％b保持5分钟；流速：15ml/min。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δppm 8.15-8.21(m,1h),8.05-8.12(m,1h),7.78-7.84(m,1h),7.34-7.43(m,1h),6.78(d,j＝9.0hz,1h),6.15(s,1h),5.29-5.39(m,1h),4.48-4.56(m,1h),3.98-4.08(m,1h),3.81-3.89(m,1h),3.52-3.68(m,5h),3.35-3.49(m,3h),2.06-2.19(m,1h),1.85-1.96(m,1h),1.24(d,j＝6.1hz,6h),0.95(t,j＝7.0hz,3h)。
[1416]
中间体166
[1417]
(
±
)-反式-叔丁基-3-乙氧基-4-((4-硝基苯甲酰基)氧基)哌啶-1-甲酸酯
[1418][1419]
在室温下，向(
±
)-顺式-叔丁基-3-乙氧基-4-羟基哌啶-1-甲酸酯(2.0g，8.15mmol)于thf(20ml)中的搅拌溶液中，依序添加4-硝基苯甲酸(2.04g，12.2mmol)及三苯基膦(3.21g，12.23mmol)。将反应混合物冷却至0℃，且逐滴添加diad(3.2ml，16.31mmol)。使反应混合物升温至室温且搅拌隔夜。减压移除溶剂，得到粗产物，该粗产物经由急骤色谱使用40g硅胶柱且用10-15％etoac/石油醚洗脱来纯化，得到(
±
)-反式-叔丁基-3-乙氧基-4-((4-硝基苯甲酰基)氧基)哌啶-1-甲酸酯(2.3g，71％产率)。lcms：m/z，417.2(m 23)；保留时间：3.39min。(lcms方法：柱：kinetex xb-c18(3
×
75mm)2.6μm；移动相a：10mm甲酸铵:乙腈(98:2)，移动相b：10mm甲酸铵:乙腈(2:98)，梯度＝20-100％b历时4分钟，接着在100％b保持0.6分钟；温度：27℃；流速：1.0ml/min；检测：uv，220nm)。
[1420]
中间体167
[1421]
(
±
)-反式-3-乙氧基-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯
[1422][1423]
在0℃下，向(
±
)-反式-叔丁基-3-乙氧基-4-((4-硝基苯甲酰基)氧基)哌啶-1-甲酸酯(2.3g，5.83mmol)于thf(20ml)/水(5ml)中的搅拌溶液中，添加naoh(1.17g，29.2mmol)。使反应混合物升温至室温且搅拌隔夜。反应混合物用etoac(3
×
70ml)萃取，用水、盐水洗涤，经硫酸钠干燥且减压浓缩，得到粗产物，粗产物经由急骤色谱，使用40g硅胶柱且用20-30％etoac/石油醚洗脱来纯化，得到(
±
)-反式-叔丁基-3-乙氧基-4-羟基哌啶-1-甲酸酯(1.1g，77％产率)。1h nmr(400mhz,氯仿-d)δppm 4.16-4.49(m,1h),3.95-4.13(m,1h),3.67-3.83(m,1h),3.50-3.58(m,2h),3.01-3.14(m,1h),2.72-2.86(m,1h),2.39-2.62(m,2h),1.90-2.01(m,1h),1.49-1.53(m,1h),1.47(s,9h),1.23(t,j＝7.0hz,3h)。
[1424]
中间体168
[1425]
(
±
)-反式-叔丁基-4-(苯并[d]噻唑-2-基氧基)-3-乙氧基哌啶-1-甲酸酯
[1426][1427]
在0℃下，向(
±
)-反式-叔丁基-3-乙氧基-4-羟基哌啶-1-甲酸酯(100mg，0.41mmol)于thf或dmf(5ml)中的搅拌溶液中，添加nah(60％于矿物油中，33mg，0.82mmol，60％w/w)。在5分钟之后，添加2-溴苯并[d]噻唑(131mg，0.611mmol)于thf(2ml)中的溶液。使反应混合物升温至室温且搅拌3h。用冰冷的水淬灭反应物。用etoac(2
×
50ml)萃取混合物。经合并的有机萃取物用盐水洗涤，经na2so4干燥且浓缩，得到粗产物，该粗产物经由急骤色谱，使用12g硅胶柱且用30％-40％etoac/石油醚洗脱来进行纯化，得到(
±
)-反式-叔丁基-4-(苯并[d]噻唑-2-基氧基)-3-乙氧基哌啶-1-甲酸酯(120mg，78％产率)。lcms：m/z，379.2(m 1)；保留时间：3.16min。(lcms方法：柱：kinetex xb-c18(3
×
75mm)2.6μm；移动相a：10mm甲酸铵:乙腈(98:2)，移动相b：10mm甲酸铵:乙腈(2:98)，梯度＝20-100％b历时4分钟，接着在100％b保持0.6分钟；温度：27℃；流速：1.0ml/min；检测：uv，220nm)。
[1428]
中间体169
[1429]
(
±
)-反式-2-((3-乙氧基哌啶-4-基)氧基)苯并[d]噻唑
·
hcl
[1430][1431]
在0℃下，向(
±
)-反式-叔丁基-4-(苯并[d]噻唑-2-基氧基)-3-乙氧基哌啶-1-甲酸酯(0.12g，0.32mmol)于dcm(5ml)中的溶液中，添加含4m hcl的二噁烷(0.4ml，1.6mmol)。在室温下搅拌反应混合物2h，其后将其减压浓缩，得到(
±
)-反式-2-((3-乙氧基哌啶-4-基)氧基)苯并[d]噻唑
·
hcl(100mg，定量的)。lcms：m/z，279.2(m 1)；保留时间：1.28min。(lcms方法：柱：kinetex xb-c18(3
×
75mm)2.6μm；移动相a：10mm甲酸铵:乙腈(98:2)，移动相b：10mm甲酸铵:乙腈(2:98)，梯度＝20-100％b历时4分钟，接着在100％b保持0.6分钟；温度：27℃；流速：1.0ml/min；检测：uv，220nm)。
[1432]
实施例373及374
[1433]
反式-8-4-(苯并[d]噻唑-2-基氧基)-3-乙氧基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈
[1434][1435]
在室温下，向(
±
)-反式-2-(3-乙氧基哌啶-4-基)氧基)苯并[d]噻唑
·
hcl盐(100mg，0.36mmol)于乙腈(3ml)中的搅拌溶液中，添加dipea(0.2ml，1.1mmol)及三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-4-基酯(180mg，0.54mmol)。在80℃下加热反应混合物12h。将反应混合物冷却至室温，且减压移除溶剂，得到粗产物，通过制备型sfc[柱/尺寸：chiralpak ic(250
×
21)mm，5μm；co2％：70％；共溶剂％：30％acn:ipa(50:50)；总流量：90.0g/min；背压：100巴；温度：35℃；uv：220nm]来纯化该粗产物。
[1436]
实施例373：(2.3mg，1％产率)；lcms：m/z，462.2(m h)；保留时间：1.92min；lc/ms方法：柱：waters xbridge c18，19
×
150mm，5μm粒子；移动相a：10mm乙酸铵；移动相b：乙腈；梯度：20-65％b历时20分钟，接着在100％b保持5分钟；流速：15ml/min。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.17-8.22(m,1h),8.11(d,j＝9.0hz,1h),7.88-7.92(m,1h),7.70(d,j＝8.0hz,1h),7.38-7.45(m,1h),7.26-7.32(m,1h),6.20(s,1h),5.24-5.32(m,1h),4.29-4.36(m,1h),3.73-3.86(m,3h),3.59-3.67(m,1h),3.56(s,3h),3.21-3.30(m,1h),3.13-3.20(m,1h),2.40-2.47(m,1h),1.86-1.99(m,1h),1.10(t,j＝7.0hz,3h)
[1437]
实施例374：(3mg，2％产率)；lcms 462.0(m h)；保留时间：1.98min；lc/ms方法：柱：waters xbridge c18，19
×
150mm，5μm粒子；移动相a：10mm乙酸铵；移动相b：乙腈；梯度：20-65％b历时20分钟，接着在100％b保持5分钟；流速：15ml/min。1h nmr(400mhz,dmso-d6):8.17-8.22(m,1h),8.11(d,j＝9.0hz,1h),7.88-7.92(m,1h),7.70(d,j＝8.0hz,1h),7.38-7.45(m,1h),7.26-7.32(m,1h),6.20(s,1h),5.24-5.32(m,1h),4.29-4.36(m,1h),3.73-3.86(m,3h),3.59-3.67(m,1h),3.56(s,3h),3.21-3.30(m,1h),3.13-3.20(m,1h),2.40-2.47(m,1h),1.86-1.99(m,1h),1.10(t,j＝7.0hz,3h)。
[1438]
根据实施例373及374中所公开的通用程序，由适当起始材料制备表29中的实施例。
[1439]
表29
[1440]
[1441][1442]
根据实施例259及260中所公开的通用程序，由适当烷基卤化物制备表30中的实施例。
[1443]
表30
[1444]
[1445][1446]
中间体170
[1447]
(
±
)-反式-(3-乙酰氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
[1448][1449]
在0℃下，向(
±
)-反式-3-羟基-4-(3(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(650mg，1.80mmol)于吡啶(7ml)中的搅拌溶液中，添加ac2o(0.8ml，9.0mmol)。使反应混合物达到室温且搅拌16h。减压蒸发溶剂，得到粗产物。用etoac(2
×
50ml)萃取混合物。经合并的有机萃取物用盐水洗涤，经na2so4干燥且浓缩，得到(
±
)-反式-(3-乙酰氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(600mg，83％产率)。lcms：m/z，421.2(m 18)；保留时间：1.20min。(lcms方法：柱：waters acquity uplc beh c18(2.1x50mm)1.7μm，移动相a：10mm乙酸铵:乙腈(95:5)；移动相b：10mm乙酸铵:乙腈(5:95)，梯度＝20-100％b历时2分钟，接着
在100％b保持0.3分钟；温度：50℃；流速：0.7ml/min；检测：uv，220nm)。
[1450]
中间体171
[1451]
(
±
)-反式-3-(丙-1-烯-2-基氧基)-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
[1452][1453]
在-40℃下，向(
±
)-反式-叔丁基-3-乙酰氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-甲酸酯(600mg，1.49mmol)于thf(12ml)中的搅拌溶液中，添加吡啶(0.7ml，8.92mmol)，随后添加泰伯氏试剂(tebbe's reagent)(8.92ml，4.46mmol，0.5m溶液于甲苯中)。使反应混合物达到室温且搅拌隔夜。将反应混合物冷却至0℃。用1m naoh水溶液淬灭反应物。用etoac(2
×
100ml)萃取反应混合物。经合并的有机萃取物用盐水洗涤，经na2so4干燥且浓缩，得到粗产物，经由急骤色谱，使用12g硅胶柱且用25％-30％etoac/石油醚洗脱来纯化该粗产物，得到(
±
)-反式3-(丙-1-烯-2-基氧基)-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(300mg，50％产率)。1h nmr(300mhz,氯仿-d)δppm 7.36-7.44(m,1h),7.20-7.26(m,2h),7.10-7.16(m,1h),4.43-4.59(m,1h),4.05-4.12(m,1h),3.98(s,2h),3.76-3.92(m,1h),3.39-3.69(m,3h),2.07-2.20(m,1h),1.78-1.93(m,1h),1.75(s,3h),1.48(s,9h)。
[1454]
中间体172
[1455]
( /-)-反式-4-羟基-3-甲基哌啶-1-甲酸反式-叔丁酯
[1456][1457]
对(
±
)-反式3-(丙-1-烯-2-基氧基)-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(350mg，0.87mmol)于甲醇(10ml)中的溶液进行脱气，且用氮气(2
×
)冲洗。接下来，添加10％pd-c(37.1mg，0.35mmol)，且再次对混合物抽真空且用氮气(2
×
)冲洗，之后抽真空且在1个大气压(气球)下填充氢气。在氢气氛围下剧烈搅拌反应混合物隔夜。经由硅藻土过滤反应混合物，且滤液用甲醇洗涤且将洗涤液与初始滤液合并。真空浓缩所合并溶液，得到(
±
)-3-异丙氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-甲酸反式-叔丁酯(350mg，68％产率)。lcms：m/z，304.2(m-100 h)；保留时间：1.52min。(lcms方法：柱：waters acquity uplc beh c18(2.1x50mm)1.7μm，移动相a：10mm乙酸铵:乙腈(95:5)；移动相b：10mm乙酸铵:乙腈(5:95)，梯度＝20-100％b历时2分钟，接着在100％b保持0.3分钟；温度：50℃；流速：0.7ml/min；检测：uv，220nm)。
8.22(m,1h),8.10(d,j＝9.0hz,1h),7.49-7.55(m,1h),7.33-7.41(m,2h),7.26-7.31(m,1h),6.14(s,1h),4.53-4.62(m,1h),4.32-4.40(m,1h),3.80-3.88(m,1h),3.66-3.78(m,2h),3.55(s,3h),3.11-3.21(m,1h),2.98(dd,j＝12.3,9.3hz,1h),2.19-2.29(m,1h),1.71-1.85(m,1h),1.09(d,j＝6.0hz,3h),0.96(d,j＝6.0hz,3h)。
[1467]
实施例397：lcms：m/z，487.2(m h)；保留时间：2.46min；lc/ms方法：柱：waters xbridge c18，19
×
150mm，5μm粒子；移动相a：10mm乙酸铵；移动相b：乙腈；梯度：20-65％b历时20分钟，接着在100％b保持5分钟；流速：15ml/min。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δppm 8.16-8.20(m,1h),8.08-8.11(m,1h),7.49-7.55(m,1h),7.33-7.39(m,2h),7.28(d,j＝7.6hz,1h),6.15(s,1h),4.53-4.61(m,1h),4.31-4.39(m,1h),3.83(dt,j＝12.2,6.1hz,1h),3.65-3.76(m,2h),3.54(s,3h),3.11-3.20(m,1h),2.98(dd,j＝12.3,9.7hz,1h),2.20-2.27(m,1h),1.72-1.83(m,1h),1.09(d,j＝6.1hz,3h),0.95(d,j＝6.1hz,3h)。
[1468]
中间体174
[1469]
(
±
)-反式-叔丁基-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3-乙氧基哌啶-1-甲酸酯
[1470][1471]
在0℃下，向(
±
)-反式-叔丁基-3-羟基-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-甲酸酯(200mg，0.56mmol)于thf(5ml)中的搅拌溶液中，添加nah(60％于矿物油中)(68.1mg，1.70mmol)。在5分钟之后，添加碘乙烷(0.1ml，1.13mmol)于thf(1ml)中的溶液，且在室温下搅拌反应混合物3h。将反应混合物冷却至0℃。用冰冷的水淬灭反应物。用etoac(2
×
50ml)萃取反应混合物。经合并的有机萃取物用盐水洗涤，经na2so4干燥且浓缩，得到(
±
)-反式-叔丁基-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3-乙氧基哌啶-1-甲酸酯。lcms：m/z，381.3(m 1)；保留时间：1.23min。(lcms方法：柱：waters acquity uplc beh c18(2.1x50mm)1.7μm，移动相a：10mm乙酸铵:乙腈(95:5)；移动相b：10mm乙酸铵:乙腈(5:95)，梯度＝20-100％b历时2分钟，接着在100％b保持0.3分钟；温度：50℃；流速：0.7ml/min；检测：uv，220nm)。
[1472]
中间体175
[1473]
(
±
)-反式-5-异丙氧基-2-((3-乙氧基哌啶-4-基)氧基)吡啶.hcl
[1474][1475]
在0℃下，向(
±
)-反式-叔丁基-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3-甲氧基哌啶-1-甲酸酯(200mg，0.53mmol)于dcm(5ml)中的搅拌溶液中，添加hcl(4m于二噁烷中)(0.7ml，2.63mmol)。在室温下搅拌反应混合物3h。减压蒸发溶剂，得到(
±
)-反式-5-异丙氧基-2-((3-乙氧基哌啶-4-基)氧基)吡啶
·
hcl。lcms：m/z，281.2(m 1)；保留时间：1.28min。(lcms方法：柱：waters acquity uplc beh c18(2.1x50mm)1.7μm，移动相a：10mm乙酸铵:乙腈(95:5)；移动相b：10mm乙酸铵:乙腈(5:95)，梯度＝20-100％b历时2分钟，接着在100％b
保持0.3分钟；温度：50℃；流速：0.7ml/min；检测：uv，220nm)。
[1476]
实施例397及398
[1477]
反式-8-(4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3-乙氧基哌啶-1-基)-5-甲基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈
[1478][1479]
向(
±
)-反式-5-异丙氧基-2-((3-乙氧基哌啶-4-基)氧基)吡啶
·
hcl(190mg，0.60mmol)于乙腈(5ml)中的搅拌溶液中，添加dipea(0.5ml，2.63mmol)。在室温下搅拌反应混合物5min，且接着添加三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-1,5-萘啶-4-基酯(175mg，0.52mmol)。在85℃下加热反应混合物4h。将反应混合物冷却至室温，且减压移除溶剂，得到粗产物，通过制备型sfc(柱：cellulose-4(250
×
30)mm，5μm；co2％：50％；共溶剂％：50％的meoh；总流量：70.0g/min；背压：100巴；温度：30℃；uv：300nm)来纯化该粗产物。
[1480]
实施例397：lcms：m/z，464.3(m h)；保留时间：1.92min；lc/ms方法：柱：waters xbridge c18，19
×
150mm，5μm粒子；移动相a：10mm乙酸铵；移动相b：乙腈；梯度：20-65％b历时20分钟，接着在100％b保持5分钟；流速：15ml/min。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝8.22-8.14(m,1h),8.13-8.06(m,1h),7.83(d,j＝3.2hz,1h),7.39(dd,j＝3.1,8.9hz,1h),6.78(d,j＝8.8hz,1h),6.15(s,1h),5.05(dt,j＝4.4,7.9hz,1h),4.52(td,j＝6.1,12.0hz,1h),4.20-4.09(m,1h),3.77-3.55(m,4h),3.54(s,3h),3.29-3.15(m,2h),2.31-2.20(m,1h),1.76-1.63(m,1h),1.25(d,j＝5.9hz,6h),1.06(t,j＝7.0hz,3h)。
[1481]
实施例398：lcms 464.3(m h)；保留时间：1.92min；lc/ms方法：柱：waters xbridge c18，19
×
150mm，5μm粒子；移动相a：10mm乙酸铵；移动相b：乙腈；梯度：20-65％b历时20分钟，接着在100％b保持5分钟；流速：15ml/min。1h nmr(400mhz,dmso-d6):δppm 8.21-8.12(m,1h),8.11-8.05(m,1h),7.82(d,j＝3.2hz,1h),7.39(dd,j＝3.2,8.8hz,1h),6.78(d,j＝8.8hz,1h),6.15(s,1h),5.09-4.99(m,1h),4.52(td,j＝6.1,12.0hz,1h),4.21-4.10(m,1h),3.78-3.55(m,4h),3.54(s,3h),3.28-3.18(m,2h),2.34-2.18(m,1h),1.76-1.63(m,1h),1.25(d,j＝6.1hz,6h),1.06(t,j＝7.0hz,3h)。
[1482]
实施例399
[1483]
(
±
)-反式-6-氯-4-(3-乙氧基-4-((5-异丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1h)-酮
xbridge c18，19
×
150mm，5μm粒子；移动相a：10mm乙酸铵；移动相b：乙腈；梯度：20-65％b历时20分钟，接着在100％b保持5分钟；流速：15ml/min。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝8.26(d,j＝9.0hz,1h),8.02(d,j＝9.0hz,1h),7.83(d,j＝3.2hz,1h),7.40(dd,j＝9.0,3.2hz,1h),6.78(d,j＝9.0hz,1h),5.16-5.07(m,1h),4.94-4.70(m,1h),4.53(dt,j＝12.0,6.1hz,1h),4.43-3.81(m,3h),3.68-3.49(m,3h),3.46(s,3h),2.29-2.17(m,1h),1.74-1.62(m,1h),1.25(d,j＝6.1hz,6h),1.05-0.87(m,3h)。
[1491]
实施例401：lcms：m/z，465.2(m h)；保留时间：1.97min；lc/ms方法：柱：waters xbridge c18，19
×
150mm，5μm粒子；移动相a：10mm乙酸铵；移动相b：乙腈；梯度：20-65％b历时20分钟，接着在100％b保持5分钟；流速：15ml/min。1h nmr(400mhz,dmso-d6):δppm 8.27(d,j＝9.0hz,1h),8.03(d,j＝8.8hz,1h),7.84(d,j＝2.9hz,1h),7.41(dd,j＝8.9,3.1hz,1h),6.79(d,j＝9.0hz,1h),5.17-5.09(m,1h),4.96-4.81(m,1h),4.58-4.09(m,3h),3.91(br s,1h),3.67-3.51(m,3h),3.47(s,3h),2.28-2.20(m,1h),1.76-1.63(m,1h),1.26(d,j＝6.1hz,6h),0.97(br s,3h)。
[1492]
中间体176
[1493]
( /-)顺式-3-乙氧基哌啶-4-醇
·
hcl盐
[1494][1495]
向叔丁基-顺式-3-乙氧基-4-羟基哌啶-1-甲酸酯(2g，8.15mmol)于dcm(15ml)中的溶液中，添加hcl于二噁烷中的4n溶液(2.5ml，82mmol)。在室温下搅拌反应混合物2h，其后将其减压浓缩，得到顺式-3-乙氧基哌啶-4-醇
·
hcl盐。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δppm 8.58(br s,1h),8.28(br s,1h),3.77-3.90(m,1h),3.50-3.65(m,3h),2.88-3.18(m,4h),1.61-1.90(m,2h),1.14(t,j＝7.0hz,3h)。
[1496]
中间体177
[1497]
(
±
)-顺式-6-氯-4-(3-乙氧基-4-羟基哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1h)-酮
[1498][1499]
向(
±
)-顺式-3-乙氧基哌啶-4-醇(0.7g，4.82mmol)于乙腈(15ml)中的搅拌溶液中，添加dipea(2.5ml，14.5mmol)。在室温下搅拌反应混合物5min。接下来，添加4,6-二氯-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1h)-酮(1.1g，4.82mmol)，且在85℃下加热反应混合物4h。将反应混合物冷却至室温，且减压移除溶剂，得到粗产物，通过硅胶色谱(3％meoh/dcm)纯化该粗产物，得到(
±
)-顺式-6-氯-4-(3-乙氧基-4-羟基哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]
嘧啶-2(1h)-酮。lcms：m/z，339.2(m 1)；保留时间：0.83min。(lcms方法：柱：waters acquity uplc beh c18(2.1x50mm)1.7μm，移动相a：10mm乙酸铵:乙腈(95:5)；移动相b：10mm乙酸铵:乙腈(5:95)，梯度＝20-100％b历时2分钟，接着在100％b保持0.3分钟；温度：50℃；流速：0.7ml/min；检测：uv，220nm)。
[1500]
中间体178
[1501]
(
±
)-顺式-4-(3-乙氧基-4-羟基哌啶-1-基)-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈
[1502][1503]
向(
±
)-顺式-6-氯-4-(3-乙氧基-4-羟基哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1h)-酮(0.5g，1.48mmol)于dmf(5ml)中的搅拌溶液中，添加锌(0.15g，2.21mmol)、氰化锌(0.26g，2.21mmol)及tea(0.6ml，4.43mmol)。将反应混合物脱气5min，且添加二氯[9,9-二甲基-4,5-双(二苯膦基)呫吨]钯(ii)(0.11g，0.15mmol)。在90℃下加热反应混合物隔夜。使反应混合物冷却至室温，用乙酸乙酯稀释且经由硅藻土垫过滤。滤液用水、盐水洗涤，且有机层经无水na2so4干燥，过滤且减压蒸发，得到粗产物，通过硅胶色谱(3％meoh/dcm)纯化该粗产物，得到(
±
)-顺式-4-(3-乙氧基-4-羟基哌啶-1-基)-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈。lcms：m/z，329.2(m 1)；保留时间：0.71min。(lcms方法：柱：waters acquity uplc beh c18(2.1x50mm)1.7μm，移动相a：10mm乙酸铵:乙腈(95:5)；移动相b：10mm nh4oac:乙腈(5:95)，梯度＝20-100％b历时2分钟，接着在100％b保持0.3分钟；温度：50℃；流速：0.7ml/min；检测：uv，220nm)。
[1504]
实施例402及403
[1505]
反式-4-(3-乙氧基-4-苯氧基哌啶-1-基)-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈
[1506][1507]
在室温下，向(
±
)-顺式-4-(3-乙氧基-4-羟基哌啶-1-基)-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(100mg，0.30mmol)于thf(5ml)中的搅拌溶液中，依序添加三苯基膦(120mg，0.45mmol)、diad(0.12ml，0.61mmol)及苯酚(43mg，0.45mmol)。在60℃下
加热反应混合物2h。将反应混合物冷却至室温，且减压移除溶剂，得到粗产物，通过制备型sfc(柱：luxcellulose-4(250
×
21.5)mm，5μm；co2％：55％；共溶剂％：45％的meoh；总流量：140.0g/min；背压：100巴；温度：40℃；uv：220nm)来纯化该粗产物。
[1508]
实施例402：lcms：m/z，406.1(m h)；保留时间：1.69min；lc/ms方法：柱：waters xbridge c18，19
×
150mm，5μm粒子；移动相a：10mm乙酸铵；移动相b：乙腈；梯度：20-65％b历时20分钟，接着在100％b保持5分钟；流速：15ml/min。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.27(d,j＝9.0hz,1h),8.02(d,j＝9.0hz,1h),7.37-7.23(m,2h),7.08-6.99(m,2h),6.93-7.00(m,1h),4.53-4.59(m,1h),3.53-3.67(m,3h),3.47(s,3h),2.16-2.26(m,1h),1.65-1.77(m,1h),0.89-1.05(m,3h)。
[1509]
实施例403：lcms 406.1(m h)；保留时间：1.69min；lc/ms方法：柱：waters xbridge c18，19
×
150mm，5μm粒子；移动相a：10mm乙酸铵；移动相b：乙腈；梯度：20-65％b历时20分钟，接着在100％b保持5分钟；流速：15ml/min。1h nmr(400mhz,dmso-d6):δppm 8.27(d,j＝8.8hz,1h),8.02(d,j＝9.0hz,1h),7.37-7.24(m,2h),7.10-6.99(m,2h),6.99-6.88(m,1h),5.01-4.70(m,1h),4.61-4.51(m,1h),4.45-4.03(m,2h),3.92(s,1h),3.67-3.52(m,3h),3.46(s,3h),2.24-2.16(m,1h),1.76-1.63(m,1h),1.10-0.90(m,3h)。
[1510]
根据实施例402及403中所公开的通用程序，由适当苯酚制备表31中的实施例。
[1511]
表31
[1512][1513]
生物分析
[1514]
本发明化合物的药理学特性可通过多种生物分析确认。已对本发明化合物进行下文所例示的生物分析。
[1515]
分析1：体外dgk抑制分析——方法a
[1516]
使用挤出脂质体进行dgkα及dgkζ反应(dgkα及dgkζlipglo分析)。反应为在50mm mops ph 7.5、100mm nacl、10mm mgcl2、1μm cacl2及1mm dtt(分析缓冲液)中进行。对于挤出脂质体反应而言，脂质底物浓度为2mm ps、0.25mm dag及2.75mm pc。反应在150μm atp中进行。dgkα及dgkζ的酶浓度为5nm。
[1517]
化合物抑制研究如下进行：将各种测试化合物溶解于dmso中的50nl微滴(各种化合物的最高浓度为10mm，11点，3倍连续稀释)转移至白色1536孔盘(corning 3725)的各孔
中。通过将2.5ml 4
×
酶溶液(20nm dgkα或dgkζ(如下文所描述制备)，于分析缓冲液中)与2.5ml 4
×
脂质体溶液(下文所描述的组成)合并来制备2
×
最终反应浓度的5ml酶/底物溶液，且在室温下培育10分钟。接下来，将1μl 2
×
酶/底物溶液添加至含有测试化合物的孔中，且经由添加1μl 300μm atp来起始反应。使反应进行1小时，其后添加2μl glo试剂(promega v9101)且培育40分钟。接下来，添加4μl激酶检测试剂且培育30分钟。使用envision微量培养盘读取器记录发光。根据atp转化来计算抑制百分比，无酶对照反应所产生的atp转化对应于100％抑制且仅媒剂的反应对应于0％抑制。评价11种浓度的化合物以测定ic
50
。
[1518]4×
脂质体制剂
[1519]
脂质组成为5mol％dag(avanti 800811o)、40mol％ps(avanti 840035p)及55mol％pc(avanti 850457)，4
×
脂质体溶液的总脂质浓度为15.2mg/ml。将pc、dag及ps溶解于氯仿中，合并且真空干燥成薄膜。使脂质在50mm mops ph 7.5、100mm nacl、5mm mgcl2中水合至20mm，且冷冻-解冻五次。脂质悬浮液经由100nm聚碳酸酯过滤器挤出十一次。执行动态光散射以确认脂质体尺寸(50-60nm半径)。脂质体制剂在4℃下储存长达四周。
[1520]
人类dgkα及dgkζ的杆状病毒表达
[1521]
使用bac对bac杆状病毒表达系统(invitrogen)，根据制造商方案，产生人类dgk-α-tvmv-his-pfbgate及人类dgk-ξ-转录物变体-2-tvmv-his-pfbgate杆状病毒样本。用于表达dgk-α及dgk-ξ的dna分别具有seq id no:1及3。使用被感染的sf9细胞，以1:1500个病毒/细胞比率达成杆状病毒扩增，且在转染后，在27℃下生长65小时。
[1522]
在得自ge healthcare bioscience的cellbag 50l wave生物反应器系统20/50中，进行各种蛋白质的表达按比例扩大。esf921昆虫培养基(expression system)中所生长的12l sf9细胞(2
×
106个细胞/毫升)(expression system,davis,ca)以1:200个病毒/细胞比率用病毒原液感染，且在感染后，在27℃下生长66-68小时。通过在rc12bp离心机中、在4℃下以2000rpm离心20min，来收获经感染的细胞培养物。细胞集结粒(cell pellet)储存在-70℃下直至纯化。
[1523]
人类dgk-α及dgk-ξ纯化
[1524]
自sf9杆状病毒感染的昆虫细胞浆中纯化全长人类dgkα及dgkζ，其各自表达含有tvmv可裂解c端六his标签序列(分别为seq id no:2及4)且如上文所描述产生。利用氮气空化方法，使用氮气弹(parr instruments)溶解细胞，且通过离心澄清溶解物。在purifier plus系统上，使用三个连续柱色谱步骤将澄清的溶解物纯化至约90％均质性。三步柱色谱包括镍亲和树脂捕获(亦即，粗histrap ff，ge healthcare)，随后为尺寸排阻色谱(亦即，dgk-α为制备级hiload 26/600superdex 200，ge healthcare；且dgk-ξ为hiprep 26/600sephacryl s 300_hr，ge healthcare)。第三步骤为离子交换色谱，且对于两种同功异型物而言为不同的。使用q-琼脂糖阴离子交换色谱(ge healthcare)精制dgkα。使用sp琼脂糖阳离子交换色谱(ge healthcare)精制dgkζ。蛋白质递送浓度≥2mg/ml。两种蛋白质的调配缓冲液相同：50mm hepes ph 7.2、500mm nacl、10％v/v甘油、1mm tcep及0.5mm edta。
[1525]
分析2：体外dgk抑制分析——方法b
[1526]
使用任一种挤出脂质体进行dgkα及dgkζ反应(dgkα及dgkζlipglo分析)。反应为在50mm mops ph 7.5、100mm nacl、10mm mgcl2、1μm cacl2及1mm dtt(分析缓冲液)中进行。对
于挤出脂质体反应(5mm总脂质)而言，脂质底物浓度为2mm ps、0.25mm dag及2.75mm pc。反应在150μm atp中进行。dgkα及dgkζ的酶浓度为5nm。
[1527]
化合物抑制研究如下进行：将各种测试化合物溶解于dmso中的25nl微滴(各种化合物的最高浓度为10mm，11点，3倍连续稀释)转移至白色1536孔盘(corning 3725)的各孔中。通过将2.5ml 4
×
酶溶液(20nm dgkα或dgkζ(如下文所描述制备)，于分析缓冲液中)与2.5ml 4
×
清洁剂/脂质微胞溶液(下文所描述的组成)合并来制备2
×
最终反应浓度的5ml酶/脂质底物溶液，且在室温下培育10分钟。接下来，将1μl 2
×
酶/脂质底物溶液添加至含有测试化合物的孔中且经由添加1μl 300μm atp来起始反应。使反应进行2小时，其后添加2μl glo试剂(promega v9101)且培育40分钟。接下来，添加4μl激酶检测试剂且培育30分钟。使用envision微量培养盘读取器记录发光。根据atp转化来计算抑制百分比，无酶对照反应所产生的atp转化对应于100％抑制且仅媒剂的反应对应于0％抑制。评价11种浓度的化合物以测定ic
50
。
[1528]2×
脂质体制剂
[1529]
脂质组成为5mol％dag(avanti 800811o)、40mol％ps(avanti 840035p)及55mol％pc(avanti 850457)，脂质体溶液的总脂质浓度为7-8mg/ml。将pc、dag及ps溶解于氯仿中，合并且真空干燥成薄膜。使脂质在50mm mops ph 7.5、100mm nacl、5mm mgcl2中水合至20mm，且冷冻-解冻五次。脂质悬浮液经由100nm聚碳酸酯过滤器挤出10-12次。执行动态光散射以确认脂质体尺寸(50-60nm半径)。脂质体制剂在4℃下储存长达四周。
[1530]
几乎全长人类dgkα及全长dgkζ的杆状病毒表达
[1531]
使用bac对bac杆状病毒表达系统(invitrogen)，根据制造商方案，产生人类ma-hdgkα-(s9-s727)-ct-tvmv-his-pfbgate及全长人类dgk-ξ-转录物变体-2-tvmv-his-pfbgate杆状病毒样本(注意：dgkα试剂名称中的ma-指示添加在ser-9前的两个额外氨基酸)。用于表达dgk-α(9-727)及dgk-ζ的dna分别具有seq id no:5及3。使用被感染的sf9细胞，以1:1500个病毒/细胞比率达成杆状病毒扩增，且在转染后，在27℃下生长65小时。
[1532]
在2l烧瓶中进行几乎全长dgk-α(9-727)蛋白的表达按比例扩大，且使用得自ge healthcare bioscience的cellbag 50l wave生物反应器系统20/50进行全长dgkζ的表达按比例扩大。蛋白质以不同体积使用类似条件表达。对于dgkα(9-727)的表达，使用2
×
2l烧瓶，其各自含有0.8l最终体积的培养基，且使dgkζ以12l规模在50l细胞袋中生长。对于各者而言，将初始密度2
×
106个细胞/毫升sf9细胞(expression system,davis,ca)接种于esf921昆虫培养基(expression system)中，以1:200个病毒/细胞比率用病毒原液感染，且在感染后在27℃下生长66-68小时。通过在rc12bp离心机中、在4℃下以2000rpm离心20min，来收获经感染的细胞培养物。细胞集结粒储存在-80℃下直至纯化。
[1533]
人类dgk-α及dgk-ξ纯化
[1534]
自sf9杆状病毒感染的昆虫细胞浆中纯化人类dgkα(9-727)及全长dgkζ，其各自表达含有tvmv可裂解c端六his标签序列(分别为seq id no:2及4)且如上文所描述产生。将细胞浆解冻且悬浮于缓冲液(50mm hepes，ph 7.2，300mm nacl，10％v/v甘油，含有核酸酶及蛋白酶抑制剂的1mm tcep)中至1:10v/v初始培养物体积。利用氮气空化方法，使用氮气弹(parr instruments)溶解细胞，且通过高速离心澄清溶解物。在purifier plus系统上，分别使用两个或三个连续柱色谱步骤将澄清的溶解物纯化至约90％均质性。通过具
有咪唑梯度洗脱的镍亲和纯化(亦即，histrap ff，ge healthcare)，随后为尺寸排阻色谱(亦即，dgkα(9-727)为制备级hiload 26/600superdex 200，ge healthcare；且dgkξ为hiprep 26/600sephacryl s 300hr，ge healthcare)来纯化两种同功异型物。这些两个步骤产生纯度》90％的dgkα(9-727)。达成类似的全长dgkζ纯度需要第三步骤，采用阳离子交换色谱(sp琼脂糖凝胶ff，ge healthcare)且用nacl梯度洗脱。两种蛋白质的最终调配缓冲液类似，其中dgkα(9-727)制备于50mm hepes、ph 7.3、300mm nacl、10％v/v甘油及1mm tcep中，且全长dgkζ制备于50mm hepes、ph 7.3、500mm nacl、5％v/v甘油及1mm tcep中。将蛋白质浓缩至1-2mg/ml，急骤冷冻且保持在-80℃下进行长期储存。
[1535]
分析3：raji cd4 t细胞il2分析
[1536]
使用预活化的cd4 t细胞及raji细胞，以4μl体积进行1536孔il-2分析。在分析之前，通过分别为1.5μg/ml、1μg/ml及10μg/ml的α-cd3、α-cd28及pha处理而使cd4 t细胞预活化。用10,000ng/ml的葡萄球菌肠毒素b(seb)处理raji细胞。首先将连续稀释的化合物转移至1536孔分析盘(corning，#3727)中，随后添加2μl预活化的cd4 t细胞(最终密度为6000个细胞/孔)及2μl经seb处理的raji细胞(2000个细胞/孔)。在37℃/5％co2培育箱中培育24小时之后，将4μl il-2检测试剂添加至分析盘(cisbio，#64il2pec)中。在envision读取器上读取分析盘。为了评定化合物的细胞毒性，将raji或cd4 t细胞与连续稀释的化合物一起培育。在培育24小时之后，添加4μl cell titer glo(promega，#g7572)，且在envision读取器上读盘。使用四参数对数逻辑式y＝a ((b-a)/(1 ((c/x)^d)))计算50％有效浓度(ic
50
)，其中a及b分别表示最小及最大活化或抑制％，c为ic
50
，d为希尔斜率(hill slope)且x表示化合物浓度。
[1537]
分析4：celltiter-glo cd8 t细胞增殖分析
[1538]
使冷冻的原生人类cd8 t细胞解冻于rpmi 10％fbs中，在37℃培育2小时且计数。384孔组织培养盘在4℃下用20μl含有0.1μg/ml抗人类cd3的普通rpmi涂布隔夜，自培养盘移出，之后向各孔中添加每40μl 20k个cd8 t细胞与0.5μg/ml可溶性抗人类cd28。涂铺细胞之后，立即将化合物转至(echoed to)细胞盘中。在37℃培育箱中培育72h之后，向各孔中添加10μl celltiter-glo试剂(promega目录号g7570)。将培养盘剧烈振荡5分钟，在室温下再培育15分钟且在envision上读取以测定cd8 t细胞增殖。在分析中，0.1μg/ml抗cd3及0.5μg/ml抗cd28刺激的cd8t细胞信号为背景。使用3μm的参考化合物8-(4-(双(4-氟苯基)甲基)哌嗪-1-基)-5-甲基-7-硝基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈设定100％范围，且ec50为绝对50％以使数据标准化。
[1539]
分析5：dgk ap1-报导子分析
[1540]
使用得自sabiosciences的cignal lenti ap1报导子(luc)试剂盒(cls-011l)产生jurkat ap1-荧光素酶报导子。
[1541]
使用echo550仪将化合物自echo ldv盘转移至384孔盘(白色，实心底，不透明pe culturplate 6007768)的个别孔中。样本大小为每孔30nl；且每个源盘一个目的盘。通过将40ml细胞(2
×
20ml)转移至洁净的50ml锥形管中来制备细胞悬浮液。通过离心(1200rpm；5分钟；环境温度)浓缩细胞。移除上清液且将所有细胞悬浮于rpmi(gibco 11875) 10％fbs中以达成1.35
×
106个细胞/毫升浓度。使用多通道移液管，手动地将细胞(每孔30微升细胞悬浮液)添加至含有化合物的384孔tc盘中(每孔4.0
×
104个细胞)。在37℃及5％co2下培育
细胞盘20分钟。
[1542]
在培育期间，通过将3μl acd3(1.3mg/ml)与10ml培养基混合来制备抗cd3抗体(αcd3)溶液[最终浓度＝0.4μg/ml]。接下来，将1.5μl acd3(1.3mg/ml)与0.5ml培养基混合[最终浓度＝4μg/ml]。20分钟之后，将10μl培养基添加至第1列的所有孔(孔a至m)中，且在第1列、第n至p行中每孔添加10μlαcd3(4μg/ml)用作参考。接着使用多通道移液管，每孔添加10μlαcd3(0.4μg/ml)。经αcd3刺激 /-经化合物处理的细胞在37℃、5％co2下培育6小时。
[1543]
在此培育期期间，使steady-glo(promega e2520)试剂缓慢解冻至环境温度。接下来，使用多点combi分配器每孔添加20μl steady-glo试剂。通过离心(2000rpm，环境温度，10秒)移除气泡。在室温下培育细胞5分钟。通过使用envision读盘器仪器、依发光方案测量相对光单位(rlu)来表征样本。通过利用参考化合物8-(4-(双(4-氟苯基)甲基)哌嗪-1-基)-5-甲基-7-硝基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈来分析数据以使100％抑制标准化。
[1544]
分析6：鼠类细胞毒性t淋巴球分析
[1545]
开发抗原特异性溶胞t细胞(ctl)分析来评价dgkα及dgkζ抑制剂在功能上增强效应t细胞介导的肿瘤细胞杀伤活性的能力。自ot-1转殖基因小鼠分离的cd8 t细胞识别呈递卵白蛋白衍生肽siinfekl的抗原呈递细胞mc38。同源抗原的识别起始ot-1抗原特异性cd8 t细胞的溶胞活性。
[1546]
功能ctl细胞如下产生：自8-12周龄小鼠分离ot-1脾细胞且在1μg/ml的siinfekl肽及10u/ml的mil2存在下扩增。三天之后，添加含有mil2 u/ml的新鲜培养基。扩增第5天，分离cd8 t细胞且准备使用。活化的ctl细胞可以冷冻储存6个月。一百万个mc38肿瘤细胞在37℃下分别经1μg/ml siinfekl-ova肽脉冲3小时。用新鲜培养基洗涤细胞(3
×
)以移除过量肽。最后，将96孔u底盘中经dgk抑制剂预处理1小时的ctl细胞与载有抗原的mc38肿瘤细胞以1:10比率合并。接着，以700rpm使细胞离心5min且置放于37℃培育箱中隔夜。24小时之后，收集上清液以便通过购自perkin elmer的alphalisa分析ifn-γ细胞因子含量。
[1547]
分析7：pha增殖分析
[1548]
将来自冷冻原液的经植物凝血素(pha)刺激的母细胞(blast cell)在补充有10％胎牛血清(sigma aldrich,st.louis,mo)的rpmi培养基(gibco,thermofisher scientific,waltham,ma)中培育一小时，随后添加至384孔盘的个别孔中(每孔10,000个细胞)。将化合物转移至384孔盘的个别孔中，且将经处理的细胞维持在含有人类il2(20ng/ml)的培养基中37℃、5％co2下72h，随后使用mts试剂[3-(4,5-二甲基-2-基)-5-(3-羧基甲氧基苯基)-2-(4-磺苯基)-2h-四唑鎓]遵循制造商说明书(promega,madison,wi)测量生长。计算抑制百分比，比较经il2刺激(0％抑制)与未刺激的对照(100％抑制)之间的数值。基于对il2刺激处理与未刺激处理之间的诱导倍数的50％抑制来计算抑制浓度(ic
50
)测定值。
[1549]
分析8：人类cd8 t细胞ifn-γ分析
[1550]
将冷冻的原生人类cd8 t细胞解冻于aim-v培养基中，在37℃培育2h且计数。384孔组织培养盘在4℃下用20μl含有0.05μg/ml抗人类cd3的pbs涂布隔夜，自培养盘移出，之后向各孔中添加每40微升40,000个细胞(cd8 t细胞)与0.1μg/ml可溶性抗人类cd28。涂铺细胞之后，立即使用echo液体处置器将化合物转移至细胞盘中。在37℃培育箱中培育20小时
后，将每孔3微升上清液转移至新的384孔白色分析盘中以便测量细胞因子。
[1551]
使用alphlisa试剂盒(目录号al217)，如制造商手册(perkin elmer)所描述，定量干扰素-γ(ifn-γ)。将各孔计数转换成ifn-γ浓度(pg/ml)。通过将0.05μg/ml抗cd3加0.1μg/ml抗cd28设定为基线及将3μm参考化合物8-(4-(双(4-氟苯基)甲基)哌嗪-1-基)-5-甲基-7-硝基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈与抗cd3加抗cd28的共刺激设定为100％活化，来测定化合物ec
50
值。
[1552]
分析9：人类cd8 t细胞perk分析
[1553]
将冷冻的原生人类cd8 t细胞解冻于aim-v培养基中，在37℃培育2h且计数。cd8阳性t细胞于aim-v培养基中以每孔20,000个细胞添加至384孔组织培养盘中。向各孔中添加一种化合物，接着添加最终浓度为0.3μg/ml的珠粒结合的抗人类cd3及抗cd28 mab。在37℃下培育细胞10分钟。通过添加来自alphalisa surefire试剂盒(perkin elmer，目录号alsu-perk-a)的溶解缓冲液来终止反应。将溶解物(5微升/孔)转移至新的384孔白色分析盘中以便测量perk活化。
[1554]
通过将抗cd3加抗cd28设定为基线及将3μm 8-(4-(双(4-氟苯基)甲基)哌嗪-1-基)-5-甲基-7-硝基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈与抗cd3加抗cd28的共刺激设定为100％活化来测定化合物ec
50
。
[1555]
分析10：人类全血ifn-γ分析
[1556]
获自健康供体的人类静脉全血(每孔22.5μl)在加湿的95％空气/5％co2培育箱中、在37℃用化合物预处理一小时。血液在37℃下用最终浓度各为1μg/ml的2.5μl抗人类cd3及抗cd28 mab刺激24小时。使用alphlisa试剂盒(目录号al217)测量上清液中的ifn-γ。
[1557]
通过将抗cd3加抗cd28设定为基线及将3μm参考化合物8-(4-(双(4-氟苯基)甲基)哌嗪-1-基)-5-甲基-7-硝基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-2-甲腈与抗cd3加抗cd28的共刺激设定为100％活化来测定化合物ec
50
。
[1558]
分析11：dgk人类全血perk分析
[1559]
使用获自健康供体的人类静脉全血(与作为抗凝剂的肝素一起抽取)进行人类全血erk磷酸化分析。使用echo 550声波分配器(labcyte)，以每孔20nl向384孔盘中添加化合物于dmso中的连续稀释液(11点，3倍)，以达成分析中最终起始浓度为20μm。以每孔9μl向化合物盘中添加肝素化的人类全血，且在37℃加湿95％、空气/5％co2培育箱中培育一小时。化合物培育一小时之后，向孔中添加最终浓度为1μg/ml的1μl在交联抗体山羊抗小鼠igg(4μg/ml)存在下的人类抗cd3抗体(自产的)以刺激路径，且另外在37℃下培育15分钟。通过添加90μl固定/溶解缓冲液(bd 558049)终止刺激。洗涤细胞且在室温下用抗cd8 pe(bd 555635)抗体染色60分钟，再次洗涤，且使用perm iii缓冲液(bd 558050)在冰上渗透30分钟。接着，细胞用1:50稀释度的alexa647抗erk1/2phospho(thr202/tyr204)抗体(bioleged 675504)染色60分钟。洗涤样本且将其再悬浮于含有1％bsa的dpbs(dpbs，gibco 14190136；bsa，sigma-aldrich a9205)中。使用ique screener plus分析样本。通过cd8阳性群体内perk阳性群体的百分比来定量perk活化。基于20μm浓度下的内部化合物为100％活化且抗-cd3对照为0％活化来计算化合物效能。
[1560]
表a
[1561]
活性资料
[1562]
[1563]
[1564]
[1565]
[1566]
[1567]
[1568]
[1569]
[1570]
[1571]
[1572]
[1573]
[1574]
[1575]
[1576][1577]
表a列举dgkα及dgkζ脂质体(lipglo)分析中所测量的体外dgk抑制ic
50
活性值。
[1578]
本发明化合物具有dgkα及dgkζ酶中之一或两者的抑制剂活性，且因此可以用于治疗与dgkα及dgkζ活性抑制有关的疾病。
[1579]
编码hdgkα-(m1-s735)-ct-tvmv-his的核苷酸序列：
[1580][1581]
hdgkα-(m1-s735)-ct-tvmv-his的氨基酸序列：
[1582][1583]
编码hdgkζ-(m1-a928)-转录物变体-2ct-tvmv-his的核苷酸序列：
[1584]
[1585][1586]
hdgkζ-(m1-a928)-转录物变体-2ct-tvmv-his的氨基酸序列：
[1587]
[1588][1589]
编码ma-hdgkα-(s9-s727)-ct-tvmv-his的核苷酸序列：
[1590]
[1591][1592]
ma-hdgkα-(s9-s727)-ct-tvmv-his的氨基酸序列：
[1593]