钙BOPTA配合物的制作方法

钙bopta配合物
技术领域
1.本发明一般地涉及呈盐形式的(4rs)(4-羧基-5,8,11-三(羧基甲基)-1-苯基-2-氧杂-5,8,11-三氮杂十三烷-13-酸根离子基(5-))五氢(bopta，(4rs)(4-羧基-5,8,11-三(羧基甲基)-1-苯基-2-氧杂-5,8,11-三氮杂十三烷-13-酸)的钙配合物，其制备和其在制备包含其的药物组合物中的用途。
2.发明背景
3.金属螯合的配合物、更一般地与钙(ca
2
)和锌(zn
2
)螯合的配合物在药物领域已知用于治疗重金属、包括金属离子和放射性核素。例如，文献1(wax,p.m.,j.med.toxicol.2013,9:303-307)报告建议用作捕获剂的目前fda批准销售的螯合剂。
4.钙配合物的实例描述于文献2(us9447053(b2)-bayer intellectual property gmbh)，和文献3(ep1210353)或文献4(us5876695-schering ag)。
5.申请人现已发现新的钙配位化合物，亦即(4rs)-[4-羧基-5,8,11-三(羧基甲基)-1-苯基-2-氧杂-5,8,11-三氮杂十三烷-13-酸根离子基(5-)]五氢螯合配体(还称为bopta)的钙配位化合物。申请人也已发现新的合成程序，其允许所述化合物的有利制备和分离。
[0006]
事实上，申请人观察到制备二葡甲胺钆贝酸盐(gd-bopta，钆贝葡胺)的固体形式的已知制备方法(参见例如文献5(wo2016012386))并不能用于ca-bopta的有效制备。
[0007]
申请人现已出乎意料地发现，用适当的操作条件能够作为盐以固体的且可方便过滤的物理形式获得bopta的钙配合物。
[0008]
因此，申请人首次提出制备固体形式的ca-bopta盐的方法，其适于药物用途。所提出的方法允许获得固体产物，其能够有利地用于制备药物溶液，原因是其良好的溶解度、良好的流动性、良好的收率和高品质。
发明概要
[0009]
本发明一般地涉及(4rs)(4-羧基-5,8,11-三(羧基甲基)-1-苯基-2-氧杂-5,8,11-三氮杂十三烷-13-酸根离子基(5-))五氢(bopta)的钙配合物及其盐，其制备和其在制备包含它们的药物组合物中的用途。
[0010]
在优选的方面，本发明涉及作为式(i)盐的bopta的钙配合物：
[0011][0012]
其中x

代表一价阳离子，优选选自碱金属，包括钠(na

)或钾(k

)，和铵(nh
4
)，更优选na

。
[0013]
本发明的又一方面涉及用于制备式i化合物的固体形式的方法。
[0014]
在又一方面，本发明涉及包含式i化合物和与之混合的一种或多种生理学上可接受的载体、稀释剂和制剂赋形剂的药物组合物。
[0015]
发明详述
[0016]
在本说明书和权利要求中，术语bopta是指螯合剂式(iii)的(4rs)-[4-羧基-5,8,11-三(羧基甲基)-1-苯基-2-氧杂-5,8,11-三氮杂十三烷-13-酸根离子基(5-)]五氢：
[0017][0018]
或式(iii’)的其阴离子形式：
[0019][0020]
或其任何部分阴离子形式。
[0021]
在本说明书和权利要求中，措辞螯合剂和配体可互换地使用。
[0022]
如本文定义，bopta的钙配合物(阴离子形式)是式(ii)化合物：
[0023][0024]
术语"配合物"具有其在化学领域中的常规含义。它一般地指包含与一个或多个配体配位的中心金属原子或离子的任何金属配合物，所述配体是含有能够与金属共享的一个或多个电子对的离子或分子。
[0025]
本发明的式ii配合物包含钙离子(也即ca
2
)作为配位中心和bopta作为螯合剂。根据本发明优选的是bopta单钙配位化合物，具有与bopta配体配合的单个钙。bopta配体能够呈完全或部分的离子形式。
[0026]
在本说明书和权利要求中，式ii的bopta钙配合物可互换地称为ca-bopta或ca-bopta配合物或bopta的钙配合物。
[0027]
本发明的一个方面涉及呈药学上可接受的盐形式的式ii的ca-bopta配合物。术语"药学上可接受的盐"如本文所用是指ca-bopta配合物，其中bopta的并不涉及与钙离子配合的至少一个羧酸基团以离子形式(也即-coo-)存在并且与生理学上相容的碱的相应阳离子相互作用。所述游离羧酸基团的真实数量可以例如取决于含有所述配合物的溶液ph。
[0028]
能够用来制备ca-bopta盐的适宜阳离子的实例是无机(一价)阳离子。优选的阳离
子包含碱离子比如钾(k

)和钠(na

)，或铵离子(nh
4
)的组。
[0029]
在优选的实施方式中，本发明涉及作为式ia三钠盐的bopta的钙配合物：
[0030][0031]
式ia化合物还能够称为(4rs)-[4-羧基-5,8,11-三(羧基甲基)-1-苯基-2-氧杂-5,8,11-三氮杂十三烷-13-酸根离子基(5-)]钙(3-)三钠。
[0032]
措辞"式ia的钙配合物三钠盐"和"式ia"化合物在本说明书和权利要求中可互换地使用。
[0033]
本发明的又一方面涉及制备式i化合物的固体形式的方法，其包括：
[0034]
a)通过在含水溶剂中混合包含钙离子的化合物、配体bopta和包含阳离子x的化合物获得式i化合物的水溶液；
[0035]
b)任选地调节在步骤a)获得的溶液的ph；
[0036]
c)向所获得的溶液加入乙醇，以实现式i化合物的固体形式的沉淀；
[0037]
d)收集所获得的式i钙配合物的固体形式。
[0038]
本发明方法允许分离出式i化合物的结晶固体形式，其有利地符合国际官方机构对药物化合物规定的质量标准。
[0039]
步骤a)
[0040]
本发明方法步骤a)包括通过在含水溶剂中混合包含钙离子的化合物、配体bopta和包含阳离子x的化合物获得式i化合物的水溶液。
[0041]
所述含水溶剂优选选自高极性溶剂的组，所述溶剂包括水、盐水溶液和高极性有机溶剂，及其适宜的混合物。更优选所述含水溶剂包含水。
[0042]
措辞"包含钙离子(ca
2
)的化合物"、简称"钙化合物"如本文所用是指由钙阳离子和阴离子的离子组装物质组成的电中性化合物(不存在净电荷)。适宜的钙化合物包括氢氧化钙(ca(oh)2)，碳酸钙(caco3)，乙酸钙(ca(ch3coo)2)，氧化钙(cao2)和氯化钙(cacl2)。根据本发明，包含钙离子的化合物优选是氢氧化钙或碳酸钙。
[0043]
在本发明的实施方式中，步骤a)的包含阳离子x的化合物是碱，优选无机碱，其中所述碱的阳离子能够与bopta的游离羧酸基团形成盐。
[0044]
适宜无机碱的实例包含例如碱金属的氢氧化物或碳酸盐比如碳酸钾(k2co3)、碳酸氢钾(khco3)、氢氧化钾(koh)、碳酸钠(na2co3)、碳酸氢钠(nahco3)、氢氧化钠(naoh)，以及铵的氢氧化物或碳酸盐比如碳酸铵((nh4)2co3)、碳酸氢铵((nh4)hco3)和氢氧化铵(nh4oh)。优选步骤a)的碱是氢氧化钠(也即naoh)。
[0045]
如申请人所观察，为了获得例如作为葡甲胺或钙盐的ca-bopta配合物在步骤a)加入有机碱或碱土金属碱获得了令人不满意的结果(例如最终产物呈结块的粘性固体形式)。
[0046]
在本发明的实施方式中，在步骤a)将包含阳离子x的化合物与包含钙离子的化合
物和配体bopta作为水溶液混合。
[0047]
在备择实施方式中，在步骤a)将包含阳离子x的化合物与包含钙离子的化合物和配体bopta作为固体形式混合。
[0048]
在本发明的优选实施方式中，在步骤a)在bopta与包含阳离子x的化合物之间的摩尔比优选是1:1.5至1:3mol/mol，更优选1:2.5至1:3mol/mol，还更优选是1:2.5mol/mol。
[0049]
步骤a)导致获得式i化合物的水溶液：通过在含水溶剂中混合包含钙离子的化合物、配体bopta和包含阳离子x的化合物，并且搅拌所获得的混合物0.5至24小时、优选2至20小时、更优选4小时。
[0050]
根据本发明，在步骤a)期间ca
2
离子和bopta之间发生配合反应。该配合反应的产物是式ii的ca-bopta配合物。
[0051]
在步骤a)在ca
2
离子和bopta之间的理论化学计量比率是2至0.5，优选0.95至1.05，还更优选是1。
[0052]
在备择实施方式中，在步骤a)终点能够混合额外量的包含钙离子的化合物或bopta。所述额外量允许获得式i化合物的水溶液，其不包含游离配体或游离ca
2
，或另选包含小过量的游离ca
2
或游离bopta。
[0053]
在优选的实施方式中，在步骤a)终点，式i化合物的水溶液含有过量的游离ca
2
，其中所述过量相对ca-bopta低于0.09摩尔当量(也即9％mol/mol)，更优选低于0.05摩尔当量(也即5％mol/mol)，低至0.9x10-4
摩尔当量(0.009％mol/mol)。
[0054]
如申请人所观察，用高于10％mol/mol的过量ca
2
制备ca-bopta三钠盐可以导致获得更不适于药物应用的最终产物。出乎意料地，在所述方法终点用约2％mol/mol的过量钙离子则获得ca-bopta三钠的适宜固体形式，具有良好的特性和良好的收率也即94.5％。
[0055]
步骤b)
[0056]
本发明方法的任选步骤b)包括调节在步骤a)获得的式i化合物水溶液的ph，优选通过加碱进行。
[0057]
在步骤a)溶液ph不在希望范围的情况下步骤b)是必需的。
[0058]
在本发明的优选实施方式中，在步骤b)将ph调节至6.5至9.5，更优选7.0至8.5，和甚至更优选接近至7.5。
[0059]
如申请人所观察，式i(尤其是式ia)化合物的水溶液具有更低的ph值例如6.1，导致形成粘性结块的最终产物。类似地，ph值高于9.5则导致块状固体形式的最终产物。在这两种情况下，在所述方法的终点获得更不适于药物应用的最终产物。
[0060]
在本发明的实施方式中，在步骤b)的ph通过加碱优选无机碱来调节，其中所述碱的阳离子能够与bopta的游离羧酸基团形成盐。
[0061]
根据本发明，在步骤b)的适宜无机碱的实例包含例如碱金属的氢氧化物或碳酸盐，比如碳酸钾(k2co3)、碳酸氢钾(khco3)、氢氧化钾(koh)、碳酸钠(na2co3)、碳酸氢钠(nahco3)、氢氧化钠(naoh)，以及铵的氢氧化物或碳酸盐，比如碳酸铵((nh4)2co3)、碳酸氢铵((nh4)hco3)和氢氧化铵(nh4oh)。
[0062]
在本发明的优选实施方式中，步骤b)的碱与步骤a)的碱相同。在还更优选的实施方式中，步骤b)的碱是氢氧化钠。
[0063]
在本发明的备择实施方式中，步骤b)的碱包含的阳离子不同于步骤a)的碱阳离
子。在该备择实施方式中，在步骤b)终点以混合的盐形式获得式ii的ca-bopta配合物的溶液。
[0064]
在本说明书中，措辞"混合的盐"指式ii的ca-bopta配合物的药学上可接受的盐，其中bopta的以离子形式存在(也即coo-)且不通过钙离子正电荷平衡的羧酸基团可以与生理学相容碱的至少两种不同的相应阳离子相互作用。所述游离羧酸基团的真实数量可以例如取决于含有配合物的溶液的ph，原因是取决于ph值它们可以呈其各自的质子化形式。
[0065]
在本发明的实施方式中，所述方法的步骤a)和步骤b)在0℃至100℃，优选10℃至80℃，还更优选15℃至60℃的反应温度进行。
[0066]
在本发明的优选实施方式中，在步骤b)终点获得式i化合物的溶液，其中所述化合物的浓度是30％至80％，优选40％至75％，还更优选45％至70％(w/w相对溶液总重量)。
[0067]
优选，在步骤b)终点蒸馏所述式i化合物的水溶液以浓缩溶液和，获得具有上文定义浓度的式i化合物的溶液。
[0068]
所述蒸馏过程优选在50℃至100℃，更优选50℃至70℃，还更优选50℃至60℃的温度进行。
[0069]
所述蒸馏过程优选在大气压(也即101325pa)进行，或更优选在降低的压力例如0至2.0x10
4 pa、优选2.5
×
103至1.5
×
104pa、更优选5.0
×
103至1.0
×
104pa进行。
[0070]
在本发明的实施方式中，所述蒸馏过程在50至60℃的温度和在5.0x103至1.0
×
104pa的降低的压力进行。
[0071]
步骤c)
[0072]
根据本发明，所述方法的步骤c)包括向所获得的ca-bopta盐溶液加入乙醇以实现式i化合物(优选式ia化合物)的固体形式的沉淀。
[0073]
为了沉淀ca-bopta三钠盐申请人测试了数种溶剂，包括丙酮和数种短链醇比如1-丙醇、2-丙醇、1-丁醇和2-丁醇。然而，这些分离ca-bopta三钠的初步尝试导致令人不满意的结果，比如油状产物或具有无法接受的特性的固体(例如胶状、粘性或玻璃状固体)；在某些情况下(也即甲醇)，甚至未实现沉淀。
[0074]
从而申请人令人惊讶地发现可能通过向ca-bopta三钠盐溶液加入乙醇获得ca-bopta三钠盐的适宜固体形式。
[0075]
在本说明书当中，措辞"适宜的固体形式"指适于药物应用的ca-bopta三钠的可过滤固体形式，具有适宜的物理化学特性，比如高溶解度、高溶解速率、高纯度和高流动性。
[0076]
根据本发明的优选实施方式，所述方法的步骤c)包括向ca-bopta三钠盐的水溶液加入乙醇以实现式ia化合物的固体形式的沉淀。
[0077]
根据本发明的备择实施方式，所述方法的步骤c)能够通过将水溶液加至乙醇来进行。
[0078]
在本发明的实施方式中，在bopta与乙醇之间的重量比优选是1:4至1:30w/w，更优选1:5至1:15w/w，还更优选1:7和1:12w/w。
[0079]
在本发明的优选实施方式中，在所述式ia钙配合物溶液的浓度是30％至80％、优选40％至75％、还更优选45％至70％的情况下获得在步骤c)的ca-bopta三钠的沉淀。
[0080]
例如，申请人观察到在式ia化合物浓度低于40％的情况下不发生沉淀，而在水溶液具有比70％更高的浓度时很粘稠并且导致形成难以过滤和干燥的很细小的固体。
[0081]
步骤c)优选在20至80℃，更优选40至70℃，还更优选50至60℃的温度进行。
[0082]
根据本发明的又一实施方式，在所述方法的步骤c)终点将沉淀的ca-bopta三钠盐的悬浮液冷却至低于30℃、更优选低于20℃、还更优选10℃的温度。
[0083]
步骤d)
[0084]
根据本发明，所述方法的步骤d)包括收集所获得的式i钙配合物(优选式ia的钙配合物)的固体形式。
[0085]
在本说明书和权利要求中，措辞"分离程序"具有其在化学领域中的常规含义；其指旨在从混合物分离物质和从而除去视为杂质的物质的任何过程。
[0086]
适宜的分离程序的实例是过滤和离心。
[0087]
在本发明的优选实施方式中，式ia的ca-bopta三钠盐的固体形式通过过滤分离。
[0088]
根据本发明的备择实施方式，在分离之后，ca-bopta三钠盐用乙醇洗涤和在优选0至2.0x 104pa、更优选2.5x 103至1.5x 104pa、还更优选5.0x103至1.0x10
4 pa的降低的压力，且在至少高于30℃、优选30℃至100℃、更优选50℃至70℃、还更优选50℃至60℃的温度干燥。
[0089]
以该方式制备的ca-bopta三钠盐的特征是很高的品质。所述盐的固体形式无色且可溶于水和具有97.0％或更高、在某些批次中99.5％或更高的纯度。
[0090]
tg-ir、dsc、ir和元素分析与所述式ia化合物相符。
[0091]
整个过程的特征是高重现性和可使用性。如实施例中详述，总收率达到约94％。
[0092]
本发明的又一方面涉及药物组合物，包含有效量的式i化合物、优选式ia化合物，和一种或多种药学上可接受的载体、制剂稀释剂和赋形剂，其有利地用作捕获剂，用于限制或防止重金属在活生物体的器官或组织中保留。
[0093]
所述药物组合物能够根据文献中已知的方法制备，其中将本发明的钙配合物盐溶于含水介质，使用制剂配制剂中一般使用的添加剂，然后任选将溶液灭菌。适宜的添加剂是例如生理学缓冲剂，电解质和抗氧化剂。
[0094]
在又一方面本发明涉及式i化合物、优选式ia化合物或包含其的药物组合物用作药物的用途，所述药物用于治疗或诊断应用。在实施方式中，医学应用是用作重金属捕获剂，例如防止、清除或减少其在活生物体中的任何已知或可能的保留或蓄积。可以用本发明钙螯合物处理(也即除去或减少)的金属包括二价和三价金属离子，其替代来自配合物的钙。适宜的实例包括铅；过渡金属比如铬、铁、镉、锰和汞；和镧系元素和锕系元素，包括分别在mri诊断和核医学中一般使用的顺磁金属离子和放射性核素。
[0095]
值得注意的是，本发明方法可以甚至以大规模方便地用来制备cabopta(三钠)盐，其期望在药物组合物的制备中用作捕获剂，用来降低或防止金属保留。
[0096]
下述实施例可以用来更佳地说明本发明。
实施例
[0097]
实施例1：通过直接沉淀制备ca-bopta三钠盐
[0098]
在配有机械搅拌器的1.5l反应器中，将氢氧化钙(68.20g，含量测定99.1％w/w，0.912mol)悬浮于750ml水。在20℃分批加载bopta(500.0g，含量测定91.39％，0.890mol)；然后在约1小时内滴加28％naoh溶液(317.8g)。
[0099]
将悬浮液搅拌4小时。在终点获得透明的溶液和加入28％naoh将ph调节至7.47。
[0100]
将溶液在50-60℃和降低的压力(50-100毫巴，也即5.0x10
3-1.0x104pa)部分蒸馏以达到64.9％w/w的产物浓度。然后将温度保持在40-50℃在2.5小时内加入乙醇(3.85kg)。
[0101]
在相同温度将所获得的悬浮液再搅拌0.5小时，然后在4小时内冷却至0℃和在该温度保持11小时。在终点过滤分离固体，用乙醇(750g，预先冷却至0℃)洗涤和在50℃减压(p《30毫巴，也即《3.0x10
3 pa)干燥36小时。
[0102]
获得575.8g的ca-bopta三钠(收率94.5％)。
[0103]
元素分析(样品tq)：
[0104]
元素chnocana 39.904.876.2027.386.048.58
[0105]
水(kf)：6.83％
[0106]
实施例2：通过反向沉淀制备ca-bopta三钠
[0107]
在配有机械搅拌器的2l反应器中，在25℃将naoh丸(80.28g，2.01mol)和bopta(450.0g，含量测定91.6％w/w，0.803mol)溶于1575ml水。然后保持搅拌在约1小时内分批加载caco3(80.36g，0.803mol)。
[0108]
将混合物在25℃保持1小时，然后加热至55℃再持续4小时以除去碳酸酐。在终点加入30％naoh将ph调节至7.05。
[0109]
将溶液在50-60℃和降低的压力(50-100毫巴，也即5.0x10
3-1.0x104pa)部分蒸馏以达到51.6％w/w的产物浓度。
[0110]
在5l反应器中加载4.92kg乙醇，和在20℃在2.5小时内加入浓缩的溶液。将所获得的悬浮液再搅拌1小时，然后过滤。在40℃减压(p《30毫巴，也即《3.0x10
3 pa)将湿固体干燥16小时。
[0111]
获得400.3g的ca-bopta三钠(收率80.7％)。
[0112]
实施例3-用2-丙醇制备ca-bopta三钠
[0113]
将按实施例2描述制备的ca-bopta三钠水溶液(200g，浓度51.8％)在45℃和降低的压力(50-100毫巴，也即5.0x10
3-1.0x10
4 pa)部分蒸馏以达到63％浓度。
[0114]
在相同温度在1.5小时内滴加2-丙醇(655.0g)。然后将悬浮液冷却至室温。获得油性粘性产物。
[0115]
实施例4-用丙酮制备ca-bopta三钠
[0116]
在配有机械搅拌器的1.5l反应器中，加载30％naoh溶液(297.4g)和水(238.4g)。在20℃分批加载bopta(500.0g，含量测定91.63％，0.890mol)。
[0117]
在完全溶解之后，加入氢氧化钙(66.1g，0.89mol)。
[0118]
将获得的悬浮液搅拌1小时，加热至55℃和保持在搅拌下再持续4小时。在终点将混合物冷却至25℃h和保持在该温度过夜。然后加入30％naoh将ph调节至7.01。
[0119]
将该ca-bopta三钠水溶液的一部分(200g，浓度46.0％)在40℃和降低的压力(50-100毫巴，也即5.0x10
3-1.0x10
4 pa)部分蒸馏达到55.1％浓度。
[0120]
在相同温度加入丙酮(911.6g)。然后将悬浮液保持在40℃过夜。获得油性粘性产物。
[0121]
实施例5-用1-丙醇制备ca-bopta三钠
[0122]
在配有机械搅拌器的1.5l反应器中，将碳酸钙(90.93g，0.91mol)悬浮于212ml水。在25℃，在约8小时内分批交替加入bopta(500.0g，含量测定91.48％，0.89mol)和30％naoh溶液(317.8g)。
[0123]
在1小时内将悬浮液加热至50℃，在搅拌下保持3小时。然后在1h内将悬浮液冷却至25℃和保持在该温度过夜。在终点获得透明的溶液和加入30％naoh将ph调节至7.0。
[0124]
将该ca-bopta三钠水溶液的一部分(110g，浓度46.7％)在40℃加热。在相同温度加入1-丙醇(179.5g)。然后将获得的浑浊混合物加热至50℃，获得完全溶液，和在4小时内冷却至5℃。获得油性产物。
[0125]
实施例6-用ph 6.1的溶液制备ca-bopta三钠
[0126]
在配有机械搅拌器的1l反应器中，将氢氧化钙(20.26g，含量测定99.1％w/w，271mmol)悬浮于150ml水。在20℃分批加载bopta(150.0g，含量测定91.8％，268mmol)；然后在约1小时内滴加30％naoh溶液(89.37g)。
[0127]
将悬浮液搅拌16小时。在终点获得ph 6.07的透明溶液。
[0128]
将溶液在50-60℃和降低的压力(50-100毫巴，也即5.0x10
3-1.0x104pa)部分蒸馏以达到59.03％w/w的产物浓度。然后将温度保持在40℃在2.5小时内加入乙醇(1.06kg)。
[0129]
获得粘性结块产物。
[0130]
实施例7-用10％mol/mol过量的ca
2
制备ca-bopta三钠
[0131]
在配有机械搅拌器的1.5l反应器中，将氢氧化钙(17.64g，含量测定99.1％w/w，236mmol)悬浮于135ml水。在20℃分批加载bopta(120.0g，含量测定91.8％，215mmol)；然后在约1小时内滴加30％naoh溶液(71.50g)。
[0132]
将悬浮液搅拌16小时。在终点获得透明的溶液和加入30％naoh将ph调节至7.06。
[0133]
将溶液在50℃和降低的压力(50-100毫巴，也即5.0x10
3-1.0x10
4 pa)部分蒸馏以达到65.6％w/w的产物浓度。然后将温度保持在40-50℃在约2小时内加入乙醇(993g)。
[0134]
在相同温度将所获得的悬浮液再搅拌0.5小时，然后在4小时内冷却至0℃和在该温度保持16小时。
[0135]
所获得的固体是粘性的，在反应器壁上形成大团块和硬壳并且无法定量回收。
[0136]
实施例8-制备ca-bopta三葡甲胺
[0137]
在配有机械搅拌器的4l反应器中，将葡甲胺(174.2g，892mmol)溶于500ml水；在15-20℃分批加载bopta(250.0g，含量测定91.6％，446mmol)和氢氧化钙(34.22g，含量测定99.1％w/w，457mmol)。将混合物在20℃搅拌16小时。在终点获得透明的溶液和加入葡甲胺将ph调节至7.50。
[0138]
将溶液在50℃和降低的压力(50-100毫巴，也即5.0x10
3-1.0x10
4 pa)部分蒸馏以达到65.87％w/w的产物浓度。
[0139]
然后将温度保持在40-50℃在约2小时内加入乙醇(2.50kg)。
[0140]
在相同温度将所获得的悬浮液再搅拌0.5小时，然后在4小时内冷却至3℃和在该温度保持14小时。
[0141]
所获得的固体是粘性的并且形成大团块。