具有抗菌及免疫调节活性的可注射水凝胶及其制备方法和应用与流程

1.本发明涉及医用生物材料技术领域，特别是涉及一种具有抗菌及免疫调节活性的可注射水凝胶及其制备方法和应用。


背景技术：

2.牙菌斑是由积聚在牙龈周围牙齿上的细菌生物膜组成，它是牙周炎的首要致病因素。牙周袋在受到细菌长期感染后，导致牙齿周围支撑牙齿的软组织产生慢性炎症，它可能会进一步导致牙周胶原蛋白和牙槽骨被破坏吸收。
3.传统治疗牙周炎的方法是洗牙和牙根规划(srp)。srp是以机械方式去除病原生物膜并延迟与牙周炎相关的微生物的重新繁殖。然而，由于对居住在牙周袋深处的微生物的接触有限以及牙齿的解剖结构复杂，单独使用srp无法完全清除病原体。
4.现有采用srp与抗菌药物联合使用以进一步增强治疗效果的手段，抗菌药物是目前治疗牙周炎最常用的药物，例如四环素、强力霉素和米诺环素等。这些抗菌药物的给药方式成为治疗牙周炎的关键。全身给药和局部给药都是有效的给药方式。但是全身给药可能会导致菌群失调以及药物分布性差等问题。局部给药则可以在牙周袋中直接发挥药效，但是其在实际临床应用上还存在不完善，在这些不完善的治疗方法基础上，开发出更有效且易于使用的牙周炎治疗药物仍是临床应用的迫切要求。


技术实现要素：

5.基于此，本发明的目的在于，提供一种具有抗菌及免疫调节活性的可注射水凝胶，其包括温敏型水凝胶基质以及靶向载药纳米粒子，所述靶向载药纳米粒子包括抗菌剂以及载体，所述载体为叶酸修饰的介孔生物活性玻璃纳米粒子。
6.本发明所述具有抗菌及免疫调节活性的可注射水凝胶，其使用温敏型水凝胶作为基质，其处于低温时呈液体状态，可直接注射至所需使用区域的软组织，并随着温度升高在原位呈现凝胶状态，实现精准给药，有效提高药效，避免全身给药可能导致的体内菌群失调及药物分布性差的问题；同时，相对于传统的纳米粒子溶液，使用温敏型水凝胶对靶向载药纳米粒子进行包封可以使其在原位实现长时间停留，可明显减少给药次数并有效避免了纳米粒子可能存在的体内循环毒性问题；
7.抗菌剂用以赋予所述可注射水凝胶抗菌活性，以有效避免牙周组织进一步受细菌感染；使用叶酸修饰的介孔生物活性玻璃纳米粒子作为靶向药物载体，利用介孔结构负载药物可提高载药量，且能够达到长效缓释的目的，达到长效抗菌的效果；同时利用生物活性玻璃纳米粒子具有良好的生物相容性、骨传导性和骨再生性，应用于牙周可有效抑制牙槽骨的损伤并进一步帮助牙槽骨的修复和再生，且叶酸修饰使得所述靶向载药纳米粒子能够精准靶向牙周部位的巨噬细胞，赋予所述可注射凝胶免疫调节活性，进而对巨噬细胞进行免疫调节，从而改善牙周部位的炎症状况。
8.进一步地，所述温敏型水凝胶基质包括壳聚糖接枝普朗尼克；所述抗菌剂为盐酸多西环素。壳聚糖其具有良好的官能性和生物相容性，其通过与含羟基聚合物普朗尼克进行接枝反应，得到具有温度敏感性的水凝胶，其在生理ph以及室温下保持溶液状态，具备可注射性，其在温度上升至体温(37℃)时可迅速形成凝胶，实现原位长时间停留。
9.另外，本发明还提供一种具有抗菌及免疫调节活性的可注射水凝胶的制备方法，其包括以下具体操作步骤：
10.1)壳聚糖接枝普朗尼克(cp)的制备：
11.将普朗尼克、丁二酸酐、4-二甲氨基吡啶、三乙胺溶解于干燥的二氧六环中，室温下搅拌24～26h；随后除去溶剂，并在乙醚中沉淀两次以提纯残留物，干燥后得到单羧基普朗尼克(mp)粉末；
12.将壳聚糖溶解于ph 4.5的磷酸盐缓冲盐水(pbs缓冲液)中，室温搅拌1～2h；随后向混合液中加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐，以500～800rpm的转速搅拌15～20min后，加入n羟基琥珀酰亚胺，继续搅拌15～20min后，加入单羧基普朗尼克粉末，室温下搅拌24～26h；
13.将所得反应液置于透析袋中，在去离子水中透析3天以除去未反应的化合物；最后将反应液以9000～10000rpm的转速离心2～5min，收集上清液，-80℃冷冻后置于冷冻干燥机中，冻干，得到产物壳聚糖接枝普朗尼克，并将其置于-20℃保存备用；
14.2)介孔生物活性玻璃纳米粒子(mbg)的制备：
15.将十六烷基三甲基溴化铵溶解于去离子水中，30℃以下搅拌至完全溶解后，加入乙酸乙酯，继续搅拌至形成微乳滴，加入浓度为5mol/l的氨水，搅拌15～20min后，每隔30min依次加入正硅酸四乙酯、磷酸三乙酯和四水合硝酸钙；强力搅拌4～5h，使溶液逐渐变为不透明，形成白色沉淀；离心收集白色沉淀，用无水乙醇和去离子水分别洗涤3次，并在60℃下干燥24～26h，最后焙烧除去有机物和硝酸盐，得到介孔生物活性玻璃纳米粒子；
16.3)介孔生物活性玻璃纳米粒子的叶酸接枝改性：
17.将步骤2)获得的介孔生物活性玻璃纳米粒子分散于无水甲苯中，加入3-氨丙基三乙氧基硅烷，80℃下搅拌回流12～14h；离心收集沉淀，并用甲苯洗涤若干次，80℃下真空干燥后得到氨基改性的介孔生物活性玻璃纳米粒子；
18.将1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐溶解于冰冷的叶酸水溶液中，然后再加入氨基改性后的介孔生物活性玻璃纳米粒子，将上述反应液在室温下搅拌24～26h，离心收集沉淀，用去离子水洗涤若干次，最后冻干48h得到叶酸修饰的介孔生物活性玻璃纳米粒子(mbg-fa)；
19.4)靶向载药纳米粒子的制备：
20.将盐酸多西环素溶解于磷酸盐缓冲盐水中，随后将步骤3)获得的叶酸修饰的介孔生物活性玻璃纳米粒子在盐酸多西环素的磷酸盐缓冲盐水溶液中浸泡，并在室温下搅拌24～26h；最后离心完全去除上清液，得到负载有负载有盐酸多西环素的叶酸修饰的介孔生物活性玻璃纳米粒子(mbg@doxycycline-fa)，即所述靶向载药纳米粒子。
21.5)可注射凝胶(cp/mbg@doxycycline-fa)的制备：
22.将步骤1)制备得到的壳聚糖接枝普朗尼克溶解于磷酸盐缓冲盐水中，混合均匀后向溶液中加入步骤4)制得的负载有盐酸多西环素的叶酸修饰的介孔生物活性玻璃纳米粒
子，混合均匀后即得所述具有抗菌及免疫调节活性的可注射水凝胶。
23.本发明实施例所述具有抗菌及免疫调节活性的可注射水凝胶的制备方法，其制备步骤安排合理，操作性强，且对设备及条件要求低，能够有效降低临床应用难度。
24.进一步地，步骤1)中为使用旋转蒸发仪除去溶剂二氧六环；所用透析袋的截留分子量为8000-14000da。
25.进一步地，步骤1)中壳聚糖以及单羧基普朗尼克使用量的重量份数比为0.2～0.3。
26.进一步地，步骤2)中为在空气下以1℃
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的升温速率升温至600℃后焙烧5h以除去有机物和硝酸盐。
27.进一步地，步骤3)中每100mg介孔生物玻璃纳米粒子对应添加1ml 3-氨丙基三乙氧基硅烷进行氨基改性。
28.进一步地，步骤3)中叶酸水溶液的浓度为500μg/ml，1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐为按照0.15mol/l的浓度溶解于叶酸水溶液中，氨基改性后的介孔生物活性玻璃纳米粒子为按照9mg/ml的浓度溶解于叶酸水溶液中。
29.进一步地，步骤5)中壳聚糖接枝普朗尼克为按照20％的质量体积比溶解于磷酸盐缓冲盐水中，负载有盐酸多西环素的叶酸修饰的介孔生物活性玻璃纳米粒子为按照2mg/ml的浓度比例加入至溶液中。
30.另外，本发明还提供了所述具有抗菌及免疫调节活性的可注射水凝胶在控制牙周炎症、促进牙槽骨的修复和再生的应用。
31.为了更好地理解和实施，下面结合附图详细说明本发明。
附图说明
32.图1为本发明实施例2步骤1)制得壳聚糖接枝普朗尼克的红外谱图；
33.图2为本发明实施例2步骤1)制得壳聚糖接枝普朗尼克的核磁共振谱图；
34.图3为本发明实施例2步骤2)制得介孔生物活性玻璃纳米粒子的tem图像；
35.图4为本发明实施例2步骤2)制得介孔生物活性玻璃纳米粒子的sem图像。
具体实施方式
36.为了使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面通过本发明的具体实施方式做详细的说明。
37.在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明，但是本发明还可以采用其他不同于本发明在此描述的其他方式来实施，本领域技术人员可以在不为违背本发明内涵的情况下做类似推广，因此本发明不受以下公开的实施例的限制。
38.实施例1
39.本发明实施例1提供一种具有抗菌及免疫调节活性的可注射水凝胶，其包括温敏型水凝胶基质以及靶向载药纳米粒子，所述靶向载药纳米粒子包括抗菌剂以及叶酸修饰的介孔生物活性玻璃纳米粒子；具体地，所述温敏型水凝胶基质包括壳聚糖接枝普朗尼克；所述抗菌剂为盐酸多西环素。
40.实施例2
41.本发明实施例2提供一种具有抗菌及免疫调节活性的可注射水凝胶的制备方法，其包括以下具体操作步骤：
42.1)壳聚糖接枝普朗尼克(cp)的制备：
43.将7.62g普朗尼克、90mg丁二酸酐、110mg 4-二甲氨基吡啶、120mg三乙胺溶解于60ml干燥的二氧六环中，室温下搅拌24h；随后除去溶剂，并在20ml乙醚中沉淀两次以提纯残留物，干燥后得到单羧基普朗尼克(mp)粉末；
44.将0.4g壳聚糖溶解于120ml ph 4.5的磷酸盐缓冲盐水(pbs缓冲液)中，室温搅拌2h；随后向混合液中加入0.5g 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐，以600rpm的转速搅拌15min后，加入0.276g n羟基琥珀酰亚胺，继续搅拌15min后，加入2g单羧基普朗尼克粉末，室温下搅拌24h，在本实施例中壳聚糖以及单羧基普朗尼克使用量的重量份数比为0.2；
45.将所得反应液置于透析袋中，在去离子水中透析3天以除去未反应的化合物；最后将反应液以10000rpm的转速离心5min，收集上清液，-80℃冷冻后置于冷冻干燥机中，冻干，得到产物壳聚糖接枝普朗尼克，并将其置于-20℃保存备用；
46.普朗尼克，其是泊咯沙姆的商品名，是一种由中部疏水的聚氧丙烯(多(丙烯氧化物))链侧面连接两段亲水聚氧乙烯(多(氧化乙烯))构成的非离子式三嵌段共聚物，在本发明实施例中所使用的普朗尼克具体型号为pf-127；
47.2)介孔生物活性玻璃纳米粒子(mbg)的制备：
48.将0.7g十六烷基三甲基溴化铵溶解于33ml去离子水中，30℃以下搅拌至完全溶解后，加入10ml乙酸乙酯，继续搅拌至形成微乳滴，加入7ml浓度为5mol/l的氨水，搅拌15min后，每隔30min依次加入3.6ml正硅酸四乙酯、0.36ml磷酸三乙酯和2.277g四水合硝酸钙；强力搅拌4h，使溶液逐渐变为不透明，形成白色沉淀；离心收集白色沉淀，用无水乙醇和去离子水分别洗涤3次，并在60℃下干燥24h，最后在空气下以1℃
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的升温速率升温至600℃后焙烧5h以除去有机物和硝酸盐，得到介孔生物活性玻璃纳米粒子；
49.3)介孔生物活性玻璃纳米粒子的叶酸接枝改性：
50.将100mg步骤2)获得的介孔生物活性玻璃纳米粒子分散于50ml无水甲苯中，加入1ml 3-氨丙基三乙氧基硅烷，80℃下搅拌回流12h；离心收集沉淀，并用甲苯洗涤若干次，80℃下真空干燥后得到氨基改性的介孔生物活性玻璃纳米粒子；
51.将1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐按照0.15mol/l的浓度溶解于冰冷的浓度为500μg/ml叶酸水溶液中，然后再加入氨基改性后的介孔生物活性玻璃纳米粒子，其在叶酸水溶液中的浓度为9mg/ml，将上述反应液在室温下搅拌24h，离心收集沉淀，用去离子水洗涤若干次，最后冻干48h得到叶酸修饰的介孔生物活性玻璃纳米粒子(mbg-fa)；
52.4)靶向载药纳米粒子的制备：
53.将盐酸多西环素按照5mg/ml的浓度溶解于pbs缓冲液中，随后将20mg步骤3)获得的叶酸修饰的介孔生物活性玻璃纳米粒子按照1mg/ml的浓度比例加入至20ml盐酸多西环素的磷酸盐缓冲盐水溶液中浸泡，并在室温下搅拌24h；最后以8000rpm的转速离心15min完全去除上清液，得到负载有负载有盐酸多西环素的叶酸修饰的介孔生物活性玻璃纳米粒子(mbg@doxycycline-fa)。
54.5)可注射凝胶(cp/mbg@doxycycline-fa)的制备：
55.将步骤1)制备得到的壳聚糖接枝普朗尼克按照20％的质量体积比溶解于pbs缓冲液中，混合均匀后按照2mg/ml的浓度比例向溶液中加入步骤4)制得的负载有盐酸多西环素的叶酸修饰的介孔生物活性玻璃纳米粒子，混合均匀后即得所述具有抗菌及免疫调节活性的可注射水凝胶。
56.实施例3
57.本发明实施例3提供一种具有抗菌及免疫调节活性的可注射水凝胶的制备方法，其包括以下具体操作步骤：
58.1)壳聚糖接枝普朗尼克(cp)的制备：
59.将7.80g普朗尼克、100mg丁二酸酐、120mg 4-二甲氨基吡啶、140mg三乙胺溶解于70ml干燥的二氧六环中，室温下搅拌26h；随后除去溶剂，并在20ml乙醚中沉淀两次以提纯残留物，干燥后得到单羧基普朗尼克(mp)粉末；
60.将0.6g壳聚糖溶解于ph 4.5的pbs缓冲液中，室温搅拌2h；随后向混合液中加入0.7g1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐，以800rpm的转速搅拌20min后，加入0.300g n羟基琥珀酰亚胺，继续搅拌20min后，加入2g单羧基普朗尼克粉末，室温下搅拌26h，在本实施例中壳聚糖以及单羧基普朗尼克使用量的重量份数比为0.3；
61.将所得反应液置于透析袋中，在去离子水中透析3天以除去未反应的化合物；最后将反应液以9000rpm的转速离心2min，收集上清液，-80℃冷冻后置于冷冻干燥机中，冻干，得到产物壳聚糖接枝普朗尼克，并将其置于-20℃保存备用；
62.2)介孔生物活性玻璃纳米粒子的制备：
63.将0.7g十六烷基三甲基溴化铵溶解于33ml去离子水中，30℃以下搅拌至完全溶解后，加入10ml乙酸乙酯，继续搅拌至形成微乳滴，加入7ml浓度为5mol/l的氨水，搅拌20min后，每隔30min依次加入3.6ml正硅酸四乙酯、0.36ml磷酸三乙酯和2.277g四水合硝酸钙；强力搅拌5h，使溶液逐渐变为不透明，形成白色沉淀；离心收集白色沉淀，用无水乙醇和去离子水分别洗涤3次，并在60℃下干燥26h，最后在空气下以1℃
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min-1
的升温速率升温至600℃后焙烧5h以除去有机物和硝酸盐，得到介孔生物活性玻璃纳米粒子；
64.3)介孔生物活性玻璃纳米粒子的叶酸接枝改性：
65.将100mg步骤2)获得的介孔生物活性玻璃纳米粒子分散于50ml无水甲苯中，加入1ml 3-氨丙基三乙氧基硅烷，80℃下搅拌回流14h；离心收集沉淀，并用甲苯洗涤若干次，80℃下真空干燥后得到氨基改性的介孔生物活性玻璃纳米粒子；
66.将1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐按照0.15mol/l的浓度溶解于冰冷的浓度为500μg/ml叶酸水溶液中，然后再加入氨基改性后的介孔生物活性玻璃纳米粒子，其在叶酸水溶液中的浓度为9mg/ml，将上述反应液在室温下搅拌26h，离心收集沉淀，用去离子水洗涤若干次，最后冻干48h得到叶酸修饰的介孔生物活性玻璃纳米粒子(mbg-fa)；
67.4)靶向载药纳米粒子的制备：
68.将盐酸多西环素按照5mg/ml的浓度溶解于pbs缓冲液中，随后将20mg步骤3)获得的叶酸修饰的介孔生物活性玻璃纳米粒子按照1mg/ml的浓度比例加入至20ml盐酸多西环素的磷酸盐缓冲盐水溶液中浸泡，并在室温下搅拌26h；最后以9000rpm的转速离心15min完全去除上清液，得到负载有负载有盐酸多西环素的叶酸修饰的介孔生物活性玻璃纳米粒子(mbg@doxycycline-fa)。
69.5)可注射凝胶(cp/mbg@doxycycline-fa)的制备：
70.将步骤1)制备得到的壳聚糖接枝普朗尼克按照20％的质量体积比溶解于pbs缓冲液中，混合均匀后按照2mg/ml的浓度比例向溶液中加入步骤4)制得的负载有盐酸多西环素的叶酸修饰的介孔生物活性玻璃纳米粒子，混合均匀后即得所述具有抗菌及免疫调节活性的可注射水凝胶。
71.实施例4
72.本发明实施例4提供一种具有抗菌及免疫调节活性的可注射水凝胶的制备方法，其包括以下具体操作步骤：
73.1)壳聚糖接枝普朗尼克(cp)的制备：
74.将7.62g普朗尼克、90mg丁二酸酐、110mg 4-二甲氨基吡啶、120mg三乙胺溶解于60ml干燥的二氧六环中，室温下搅拌25h；随后除去溶剂，并在20ml乙醚中沉淀两次以提纯残留物，干燥后得到单羧基普朗尼克(mp)粉末；
75.将0.5g壳聚糖溶解于ph 4.5的pbs缓冲液中，室温搅拌1h；随后向混合液中加入0.5g 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐，以500rpm的转速搅拌15min后，加入0.276g n羟基琥珀酰亚胺，继续搅拌15min后，加入2g单羧基普朗尼克粉末，室温下搅拌24h，在本实施例中壳聚糖以及单羧基普朗尼克使用量的重量份数比为0.25；
76.将所得反应液置于透析袋中，在去离子水中透析3天以除去未反应的化合物；最后将反应液以9000rpm的转速离心3min，收集上清液，-80℃冷冻后置于冷冻干燥机中，冻干，得到产物壳聚糖接枝普朗尼克，并将其置于-20℃保存备用；
77.2)介孔生物活性玻璃纳米粒子的制备：
78.将0.7g十六烷基三甲基溴化铵溶解于33ml去离子水中，30℃以下搅拌至完全溶解后，加入10ml乙酸乙酯，继续搅拌至形成微乳滴，加入7ml浓度为5mol/l的氨水，搅拌15～20min后，每隔30min依次加入3.6ml正硅酸四乙酯、0.36ml磷酸三乙酯和2.277g四水合硝酸钙；强力搅拌5h，使溶液逐渐变为不透明，形成白色沉淀；离心收集白色沉淀，用无水乙醇和去离子水分别洗涤3次，并在60℃下干燥24h，最后在空气下以1℃
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min-1
的升温速率升温至600℃后焙烧5h以除去有机物和硝酸盐，得到介孔生物活性玻璃纳米粒子；
79.3)介孔生物活性玻璃纳米粒子的叶酸接枝改性：
80.将100mg步骤2)获得的介孔生物活性玻璃纳米粒子分散于50ml无水甲苯中，加入1ml 3-氨丙基三乙氧基硅烷，80℃下搅拌回流12h；离心收集沉淀，并用甲苯洗涤若干次，80℃下真空干燥24h后得到氨基改性的介孔生物活性玻璃纳米粒子；
81.将1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐按照0.15mol/l的浓度溶解于冰冷的浓度为500μg/ml叶酸水溶液中，然后再加入氨基改性后的介孔生物活性玻璃纳米粒子，其在叶酸水溶液中的浓度为9mg/ml，将上述反应液在室温下搅拌24h，离心收集沉淀，用去离子水洗涤若干次，最后冻干48h得到叶酸修饰的介孔生物活性玻璃纳米粒子(mbg-fa)；
82.4)靶向载药纳米粒子的制备：
83.将盐酸多西环素按照5mg/ml的浓度溶解于pbs缓冲液中，随后将20mg步骤3)获得的叶酸修饰的介孔生物活性玻璃纳米粒子按照1mg/ml的浓度比例加入至20ml盐酸多西环素的磷酸盐缓冲盐水溶液中浸泡，并在室温下搅拌24h；最后以8000rpm的转速离心15min完全去除上清液，得到负载有负载有盐酸多西环素的叶酸修饰的介孔生物活性玻璃纳米粒子
(mbg@doxycycline-fa)。
84.5)可注射凝胶(cp/mbg@doxycycline-fa)的制备：
85.将步骤1)制备得到的壳聚糖接枝普朗尼克按照20％的质量体积比溶解于pbs缓冲液中，混合均匀后按照2mg/ml的浓度比例向溶液中加入步骤4)制得的负载有盐酸多西环素的叶酸修饰的介孔生物活性玻璃纳米粒子，混合均匀后即得所述具有抗菌及免疫调节活性的可注射水凝胶。
86.对实施例2步骤1)制备得到的壳聚糖接枝普朗尼克进行取样，并利用红外光谱和核磁共振对其结构进行表征，获得的红外谱图如图1所示，核磁共振谱图如图2所示，并将壳聚糖接枝普朗尼克(cp)的红外谱图与普朗尼克(pf-127)、单羧基普朗尼克(mp)的红外谱图进行对比，如图所示，相对于单羧基普朗尼克(mp)的红外谱图在1733cm-1
处出现羧基吸收峰，壳聚糖接枝普朗尼克(cp)其在3471cm-1
以及1641cm-1
有明显吸收峰；对实施例2步骤2)制备得到的介孔生物活性玻璃纳米粒子(mbg)进行取样，并利用透射电子显微镜(tem)以及扫描电子显微镜(sem)对其进行扫描表征，获得的通过使用红外光谱仪对样品进行扫描分析，获得的图像分别如图3和图4所示。
87.本发明实施例所述具有抗菌及免疫调节活性的可注射水凝胶，其使用温敏型水凝胶作为基质，其处于低温时呈液体状态，可直接注射至所需使用区域的软组织，并随着温度升高在原位呈现凝胶状态，实现精准给药，有效提高药效，避免全身给药可能导致的体内菌群失调及药物分布性差的问题；同时，相对于传统的纳米粒子溶液，使用温敏型水凝胶对靶向载药纳米粒子进行包封可以使其在原位实现长时间停留，可明显减少给药次数并有效避免了纳米粒子可能存在的体内循环毒性问题。
88.抗菌剂用以赋予所述可注射水凝胶抗菌活性，以有效避免牙周组织进一步受细菌感染；使用叶酸修饰的介孔生物活性玻璃纳米粒子作为靶向药物载体，利用介孔结构负载药物可提高载药量，且能够达到长效缓释的目的，达到长效抗菌的效果；同时利用生物活性玻璃纳米粒子具有良好的生物相容性、骨传导性和骨再生性，应用于牙周可有效抑制牙槽骨的损伤并进一步帮助牙槽骨的修复和再生，且叶酸修饰使得所述靶向载药纳米粒子能够精准靶向牙周部位的巨噬细胞，赋予所述可注射凝胶免疫调节活性，进而对巨噬细胞进行免疫调节，从而改善牙周部位的炎症状况，其在控制牙周炎症、促进牙槽骨的修复和再生中具有极大应用前景。
89.本发明实施例所述具有抗菌及免疫调节活性的可注射水凝胶的制备方法，其制备步骤安排合理，操作性强，且其制备条件温和，避免引入对人体有害的试剂及其他有害物质，适用于医用生物技术领域的应用，对设备要求低，能够有效降低临床应用难度。
90.以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。