通过LC-MS/MS测定人血浆中多西拉敏的方法与流程

技术特征：
1.一种通过lc-ms/ms测定人血浆中多西拉敏的方法，其特征在于，包括以下步骤：人血浆样品前处理；采用液相色谱-质谱联用检测，其中，液相色谱条件为色谱柱：gemini 5μ c18 110a，2.0
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100mm；预柱：gemini-c18；流动相a：甲醇；流动相b：20mm乙酸铵溶液，其中含有0.2％甲酸；自动进样器温度：4℃，进样量为2.0μl；柱温：30℃；梯度洗脱，流速为0.6ml/min，分析时间2.70min；质谱条件为离子化方式：电喷雾离子源(esi)，正离子化；监测方式：多重反应监测(mrm)；离子化电压：5500v；雾化器压力(gas1)：50psi；辅助加热气(gas2)：50psi；辅助加热气温度(gas temp)：600℃；碰撞气(cad)：medium；扫描方式；多反映监测。2.如权利要求1所述的通过lc-ms/ms测定人血浆中多西拉敏的方法，其特征在于，所述梯度洗脱具体如下：时间(min)流动相a(体积％)流动相b(体积％)0.0033.067.01.2095.05.02.0095.05.02.1033.067.02.7033.067.0。3.如权利要求1所述的通过lc-ms/ms测定人血浆中多西拉敏的方法，其特征在于，所述方法的检测浓度范围为0.500-200ng/ml，lloq为0.500ng/ml。4.如权利要求1所述的通过lc-ms/ms测定人血浆中多西拉敏的方法，其特征在于，所述人血浆样品前处理的步骤为：向人血浆样品中加入内标工作溶液和蛋白沉淀剂，涡旋并离心后，取上清液稀释。5.如权利要求4所述的通过lc-ms/ms测定人血浆中多西拉敏的方法，其特征在于，所述内标工作溶液中的内标为琥珀酸多西拉敏-d5，其配制方法为：精密称取琥珀酸多西拉敏-d5标准品，用70％甲醇溶解稀释，获得浓度为1.00mg/ml的多西拉敏-d5储备液；再用70％甲醇稀释得到浓度为200ng/ml的内标工作溶液。6.如权利要求4所述的通过lc-ms/ms测定人血浆中多西拉敏的方法，其特征在于，所述蛋白沉淀剂选自乙腈，所述稀释剂选自90％乙腈。7.如权利要求4-6任一项所述的通过lc-ms/ms测定人血浆中多西拉敏的方法，其特征在于，所述人血浆样品前处理的步骤，具体为：取100μl人血浆样品，加入20μl内标工作溶液和300μl蛋白沉淀剂，涡旋并离心后取50μl上清液，再将上清液与150μl稀释剂混合，即获得待测样品。8.如权利要求7所述的通过lc-ms/ms测定人血浆中多西拉敏的方法，其特征在于，所述涡旋并离心的参数为：以2500rpm涡旋混匀2min，10000g离心10min。

技术总结
本发明公开了一种通过LC-MS/MS测定人血浆中多西拉敏的方法，该方法主要步骤包括：人血浆样品前处理；采用液相色谱-质谱联用检测，其中，液相色谱条件主要为流动相A：甲醇；流动相B：20mM乙酸铵溶液，其中含有0.2％甲酸；自动进样器温度：4℃，进样量为2.0μL；柱温：30℃；梯度洗脱，流速为0.6mL/min，分析时间2.70min；质谱条件为离子化方式：电喷雾离子源(ESI)，正离子化；监测方式：多重反应监测(MRM)；扫描方式；多反映监测。该方法灵敏度高，能够定量的最低浓度可达0.500ng/mL，可实现人血浆中多西拉敏准确、快速、灵敏测定。灵敏测定。灵敏测定。


技术研发人员：张文 胡静静 张峰 赵胜龙 许龙 曹阳 黄顺旺 曹明成
受保护的技术使用者：合肥创新医药技术有限公司
技术研发日：2022.04.18
技术公布日：2022/7/29