一种无血清间充质干细胞培养基及干细胞培养方法与流程

技术特征：
1.一种无血清间充质干细胞培养基，其特征在于，包括dmem混合培养基，还包括以下组分及其浓度：10～20mg/l重组人胰岛素、4～6mg/l重组人转铁蛋白、0.5～1.5％v/v neaa、0.5～1.5％v/v维生素溶液、4～6mg/l异甜菊醇钠、10～30μg/l rh-bfgf、10～30μg/l rhegf、20～30mm l-谷氨酰胺、0.5～1μg/l亚硒酸钠和10～30μg/l多聚赖氨酸。2.根据权利要求1所述的无血清间充质干细胞培养基，其特征在于，包括dmem混合培养基，还包括以下组分及其浓度：15mg/l重组人胰岛素、5mg/l重组人转铁蛋白、1％v/v neaa、1％v/v维生素溶液、5mg/l异甜菊醇钠、20μg/l rh-bfgf、20μg/l rhegf、25mm l-谷氨酰胺、0.8μg/l亚硒酸钠和20μg/l多聚赖氨酸。3.根据权利要求1或2所述的无血清间充质干细胞培养基，其特征在于，所述的dmem混合培养基为dmem/f12培养基。4.根据权利要求3所述的无血清间充质干细胞培养基，其特征在于，所述的dmem/f12培养基为dmem培养基和f12培养基按1:1体积比混合。5.一种权利要求1-4任一项所述的无血清间充质干细胞培养基的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将重组人胰岛素、重组人转铁蛋白、neaa、维生素溶液、异甜菊醇钠、rh-bfgf、rhegf、l-谷氨酰胺、亚硒酸钠和多聚赖氨酸溶于dmem混合培养基，搅拌混匀，过滤除菌，得到无血清间充质干细胞培养基。6.权利要求1-4任一项所述的无血清间充质干细胞培养基在脐带间充质干细胞培养中的用途。7.一种脐带间充质干细胞的培养方法，其特征在于，是利用权利要求1-4任一项所述的无血清间充质干细胞培养基对脐带间充质干细胞进行培养。8.根据权利要求7所述的培养方法，其特征在于，所述的脐带间充质干细胞的接种密度是(0.1～10)
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104个/ml。9.根据权利要求7所述的培养方法，其特征在于，所述的脐带间充质干细胞是在5％co2、37℃的条件下培养。

技术总结
本发明公开了一种无血清间充质干细胞培养基。所述的无血清培养基是在DMEM/F12培养基的基础上添加了重组人胰岛素、重组人转铁蛋白、NEAA、维生素溶液、异甜菊醇钠、rh-bFGF、rhEGF、L-谷氨酰胺、亚硒酸钠和多聚赖氨酸。通过添加少量的异甜菊醇钠、L-谷氨酰胺、多聚赖氨酸，可显著提高脐带间充质干细胞的贴壁性能和增殖速率，解决了现有技术存在细胞贴壁性差、细胞增殖速率不够理想的问题。并且使用本发明的无血清培养基能有效保证脐带间充质干细胞生物学特性保持不变。本发明的无血清培养基成分明确，溶解性能好，可以提高实验的重复性、准确性和稳定性，原料易获取，有效降低无血清培养基的制备成本。清培养基的制备成本。清培养基的制备成本。


技术研发人员：何燕灵 肖明 刘嘉成 黄树堃 孙丽丽
受保护的技术使用者：广州美健生物技术有限公司
技术研发日：2022.06.02
技术公布日：2022/7/29