角蛋白酶突变体及与胆汁酸的复配制剂和在添加剂的应用的制作方法

技术特征：
1.角蛋白酶突变体，其特征在于，所述角蛋白酶突变体为角蛋白酶突变体km，其氨基酸序列如seq id no：3所示、或者如seq id no：5所示、或者如seq id no：7所示。2.根据权利要求1所述的角蛋白酶突变体，其特征在于，所述角蛋白酶突变体km具体为由氨基酸序列为seq id no：1的角蛋白酶的第191位的天冬酰胺变为天冬氨酸获得的角蛋白酶突变体km1；由氨基酸序列为seq id no：1的角蛋白酶的第191位的天冬酰胺变为天冬氨酸和第149位的缬氨酸变为丙氨酸获得的角蛋白酶突变体km2；由氨基酸序列为seq id no：1的角蛋白酶的第191位的天冬酰胺变为天冬氨酸和第232位的甘氨酸变为谷氨酸获得的角蛋白酶突变体km3。3.一种编码基因，其特征在于，所述编码基因为权利要求1所述的角蛋白酶突变体km的编码基因，其核苷酸序列如seq id no：4所示、或者如seq id no：6所示、或者如seq id no：8所示。4.一种重组表达载体，其特征在于，其包含权利要求3所述的编码基因。5.一种重组工程菌，其特征在于，其包含权利要求3所述的编码基因。6.一种含胆汁酸的复配制剂，其特征在于，所述复配制剂中同时包含权利要求1所述的角蛋白酶突变体km和胆汁酸。7.根据权利要求6所述的复配制剂，其特征在于，所述复配制剂是由含角蛋白酶突变体km的重组工程菌经发酵、过滤干燥制得的粉制剂与胆汁酸以1:1~5的质量体积比混合而成的。8.角蛋白酶突变体或者复配制剂在用于酶解动物角蛋白中的应用，其特征在于，所述角蛋白酶突变体为权利要求1所述的角蛋白酶突变体km；所述复配制剂为权利要求6所述的含胆汁酸的复配制剂。9.角蛋白酶突变体或者复配制剂在用于制备降低动物腹泻的动物饲料添加剂中的应用，所述角蛋白酶突变体为权利要求1所述的角蛋白酶突变体km；所述复配制剂为权利要求6所述的含胆汁酸的复配制剂。10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述角蛋白酶突变体km或复配制剂的用量为100 g/t动物饲料~500 g/t动物饲料。

技术总结
本发明提供了角蛋白酶突变体及与胆汁酸的复配制剂和在添加剂的应用。本发明使用易错PCR方法对Bacillus licheniformis来源的角蛋白酶基因进行突变，筛选获得角蛋白酶突变体KM1、KM2、KM3，突变体在30℃反应条件下，酶活力分别是原始角蛋白酶的1.5、2.05、2.9倍。本发明还利用含角蛋白酶突变体KM的工程菌经发酵、过滤干燥制得的酶制剂与胆汁酸进行复配，不仅其具有很好的酶解豆粕抗原蛋白的效果，而且用于禽畜养殖中，能够明显起到防腹泻作用，并保护动物的肠胃，具有良好的工业价值和市场应用前景。景。景。


技术研发人员：娄倩倩 张西雷 曹爱智
受保护的技术使用者：山东龙昌动物保健品有限公司
技术研发日：2022.06.20
技术公布日：2022/7/22