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鸡滑液囊支原体生物被膜的培育方法及其应用、筛选方法

2022-07-17 00:55:57 来源:中国专利 TAG:

技术特征:
1.一种鸡滑液囊支原体生物被膜的培育方法,其特征在于,所述培育方法包括以下步骤:将生长至对数生长期的鸡滑液囊支原体用液体培养基稀释至(0.9-1.5)
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6 cfu/ml,进行第一培育,生长至对数生长期,除去悬浮菌体,制得所述鸡滑液囊支原体生物被膜;所述液体培养基为改良frey氏液体培养基,所述生长至对数生长期的判断标准为所述改良frey氏液体培养基由红变黄;所述第一培育的培育温度为30-37℃。2.根据权利要求1所述的培育方法,其特征在于,所述鸡滑液囊支原体经过分离培养、传代培养和纯化培养所制得。3.根据权利要求1所述的培育方法,其特征在于,所述鸡滑液囊支原体还经过冻干保存与复苏,所述冻干保存的温度为0至-80℃。4.根据权利要求1所述的培育方法,其特征在于,所述第一培育的培育温度为32-34℃。5.根据权利要求1所述的培育方法,其特征在于,所述除去悬浮菌体的步骤为:使用缓冲液对培养基中的悬浮菌进行冲洗,所述缓冲液为磷酸盐缓冲液,所述磷酸盐缓冲液的ph为6.5-7.5、浓度为0.05-0.15 m。6.根据权利要求1所述的培育方法,其特征在于,所述鸡滑液囊支原体生物被膜还进行染色观察,所述染色观察的染色方法使用到刚果红。7.根据权利要求6所述的培育方法,其特征在于,所述染色方法包括以下步骤:(1)清洗:所述鸡滑液囊支原体生物被膜在缓冲液中清洗、自然干燥;(2)固定:将清洗后的所述鸡滑液囊支原体生物被膜固定5-20min、自然干燥;(3)染色:将固定完成后的所述鸡滑液囊支原体生物被膜放入刚果红染色液中染色10-20min;(4)冲洗:染色完成后的所述鸡滑液囊支原体生物被膜放入蒸馏水中清洗、自然干燥。8.一种药物筛选方法,其特征在于,所述药物筛选方法包括以下步骤:使用药物对权利要求1-7任一项所述的培育方法所制得的所述鸡滑液囊支原体生物被膜进行抗菌活性测试。9.根据权利要求8所述的药物筛选方法,其特征在于,所述药物包括恩诺沙星、多西环素、泰乐菌素、泰妙菌素中的至少一种。10.权利要求1-7任一项所述的培育方法和/或所述培养方法制备得到的所述鸡滑液囊支原体生物被膜在药物筛选中的应用。

技术总结
本发明涉及病原分离鉴定及病原培养技术领域,具体涉及一种鸡滑液囊支原体生物被膜的培育方法及其应用、筛选方法。该鸡滑液囊支原体生物被膜的培育方法,包括以下步骤:将生长至对数生长期的鸡滑液囊支原体用液体培养基稀释至(0.9-1.5)


技术研发人员:张楠 康天灏 周明虎 严秀 宋姝缇
受保护的技术使用者:佛山科学技术学院
技术研发日:2022.06.17
技术公布日:2022/7/15
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