一种提高仔猪初生重及降低死胎率的饲料

1.本发明涉及畜禽养殖技术领域，特别是涉及一种提高仔猪初生重及降低死胎率的饲料。


背景技术：

2.每头母猪每年所产断奶仔猪数(pigs weaned per sow per year,psy)是猪场常用的衡量母猪生产性能的指标。由全球各国养猪协会联合制作的interpig全球养猪报告指出，在2018年世界各国养猪成绩中，丹麦与荷兰psy均在30以上，美国、巴西、德国等发达国家psy也均在25以上，而全国猪业大数据显示我国2019年行业psy平均水平仅为19.49，距世界水平仍有很大的提升空间。随着我国养猪业的快速发展，遗传选育技术与饲养管理优化越来越成熟，母猪的总产仔数也在不断增加，但与发达国家相比，效率仍十分低下。
3.现有技术实际养殖生产过程中，母猪妊娠期间往往会采用限制饲喂来控制妊娠期能量的摄入，从而防止母猪脂肪沉积过多而不利于繁殖效率。但在现今一味追求psy的养殖环境下，妊娠期母猪限制饲喂通常会导致母体内胎猪通过胎盘所摄取的营养物质严重不足，进而出现大量低出生重仔猪，甚至会导致死胎率大幅度提高，最终影响母猪繁殖性能。
4.与此同时，随着母猪总产仔数的增加，所面临的问题是低初生重仔猪(low birth weight,lbw)的数量也随之增加，研究表明低初生重仔猪会伴随着更高的死胎率及断奶前死亡率，在养殖过程中低初生重仔猪的出生率甚至可高达25％。
5.为了增加养猪生产中的psy指标，提高仔猪初生重，从而提升养猪效率，在母猪妊娠日粮中添加适宜的营养调控物是较为理想的选择。然而现有技术中不同类型和水平的营养调控物对于母猪的繁殖性能的影响效果也不尽相同。为此筛选并确定适宜水平的日粮营养调控物对提高仔猪初生重，降低死胎率，提高繁殖性能具有重要的现实意义。


技术实现要素：

6.本发明的目的是提供一种提高仔猪初生重及降低死胎率的饲料,以解决仔猪初生重低和死胎率高的的技术问题，为实现上述目的，本发明提供了如下方案：
7.技术方案一：一种提高仔猪初生重及降低其死胎率的饲料，所述饲料为质量百分比为99.9％的全价日粮和0.1％的腺苷或腺苷酸。
8.进一步地，所述全价日粮的组分为：玉米、米糠粕、碎米、豆粕、黑小麦、石粉、碳酸氢钙、赖氨酸、苏氨酸、食盐、氯化胆碱、脱霉剂、防腐剂和预混料。
9.进一步地，按质量百分比计，所述全价日粮组分间的比例为：34.68％玉米、10％米糠粕、16.67％碎米、14.5％豆粕、20％黑小麦、0.1％腺苷或腺苷酸、1.1％石粉、0.96％碳酸氢钙、0.1％赖氨酸、0.05％苏氨酸、0.4％食盐、0.13％氯化胆碱、0.08％脱霉剂、0.05％防腐剂和1.18％预混料。
10.进一步地，所述预混料包括以下组分：维生素a、维生素d3、维生素c、维生素e、维生素k、维生素b1、维生素b2、维生素b6、维生素b12、泛酸、烟酸、叶酸、生物素、铜、铁、锌、锰、碘
以及钴。
11.进一步地，所述的全价日粮为1kg时，所述的预混料包括如下用量的组分：维生素a 12000iu、维生素d34800iu、维生素c200mg、维生素e 205mg、维生素k 3.6mg、维生素b13.6mg、维生素b212mg、维生素b67.2mg、维生素b
12
0.048mg、泛酸30.0mg、烟酸48.0mg、叶酸8.6mg、生物素0.6mg、铜10.0mg、铁130mg、锌60mg、锰45mg、碘0.3mg以及钴0.1mg。。
12.技术方案二：所述的饲料在提高仔猪初生重及降低死胎率中的应用。
13.技术方案三：所述饲料的配套饲喂方法，其特征在于，包括以下步骤：
14.(1)妊娠65-100天，每头母猪的日饲料摄入量为2kg；
15.(2)妊娠100天至分娩前3天，每头母猪的日饲料摄入量为2.5kg；
16.(3)分娩前2天至分娩，每头母猪的日饲料摄入量为2kg。
17.进一步地，其中步骤(1)和步骤(2)中所述日饲料一次性进行饲喂，步骤(3)中所述日饲料分2次进行饲喂。
18.进一步地，所述母猪为杜长大三元杂初产母猪。
19.本发明公开了以下技术效果：
20.本发明提供的提高仔猪初生重，降低死胎率的母猪妊娠饲料饲喂方法，对母猪妊娠阶段进行动态饲喂，契合母猪妊娠后期至分娩的营养能量需求，在分娩前两天实行分次饲喂，能缓解母猪难产情况，有效降低死胎率。
21.与对照组相比，本发明提供的提高仔猪初生重，降低死胎率的母猪妊娠饲料提高胎盘中腺苷和腺苷酸及其代谢产物含量，明显促进胎盘的血管生成，显著提高仔猪初生重，降低死胎率，改善母猪繁殖性能。
22.本发明研究了妊娠日粮添加0.1％腺苷或腺苷酸对母猪繁殖性能的影响，为实际生产提高母猪繁殖性能的饲料提供数据支持及理论指导。
附图说明
23.为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
24.图1为妊娠日粮添加0.1％的腺苷或腺苷酸对母猪繁殖性能的影响，其中，a为仔猪初生重；b为死胎率；c为胎盘效率；死胎率采用卡方检验，其余数据均以平均值 标准误表示；*p＜0.05，**p＜0.01；
25.图2为妊娠日粮添加0.1％的腺苷或腺苷酸对母猪胎盘组织中腺苷，腺苷酸及其代谢产物的影响结果分析图，其中，a为腺苷、b为腺嘌呤、c为黄嘌呤、d为次黄嘌呤；所有数据均以平均值 标准误表示，n＝6；*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001，****p＜0.0001；
26.图3为妊娠日粮添加0.1％的腺苷或腺苷酸对母猪胎盘组织中腺苷，腺苷酸及其代谢产物的影响结果分析图，a为腺苷酸、b为s-腺苷-同型半胱氨酸、c为肌苷、d为尿酸；所有数据均以平均值 标准误表示，n＝6；*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001，****p＜0.0001；
27.图4为对照组、添加0.1％的腺苷和添加0.1％腺苷酸母猪胎盘血管密度h&e染色分析图；
28.图5为妊娠日粮添加0.1％的腺苷或腺苷酸对母猪胎盘血管生成的影响结果分析图；所有数据均以平均值
±
标准误表示，n＝6；*p＜0.05，**p＜0.01；
29.图6为妊娠日粮添加0.1％的腺苷或腺苷酸对母猪胎盘血管生成的影响结果分析图；其中，a为pigf的mrna相对表达量；b为vegf-a的mrna相对表达量；c为vegf-b的mrna相对表达量；d为vegf-c的mrna相对表达量；e为vegf-d的mrna相对表达量；所有数据均以平均值
±
标准误表示，n＝6；*p＜0.05，**p＜0.01；
30.图7为母猪胎盘血管生成中，0.1％腺苷和腺苷酸组的vegf-a蛋白表达量变化图；
31.图8为对照组、添加0.1％的腺苷和添加0.1％腺苷酸母猪的血管内生长因子分析图，所有数据均以平均值
±
标准误表示，n＝6；*p＜0.05，**p＜0.01。
具体实施方式
32.现详细说明本发明的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本发明的限制，而应理解为是对本发明的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。
33.应理解本发明中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本发明。另外，对于本发明中的数值范围，应理解为还具体公开了该范围的上限和下限之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本发明内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。
34.除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本发明所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本发明仅描述了优选的方法和材料，但是在本发明的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。本说明书中提到的所有文献通过引用并入，用以公开和描述与所述文献相关的方法和/或材料。在与任何并入的文献冲突时，以本说明书的内容为准。
35.在不背离本发明的范围或精神的情况下，可对本发明说明书的具体实施方式做多种改进和变化，这对本领域技术人员而言是显而易见的。由本发明的说明书得到的其他实施方式对技术人员而言是显而易见得的。本发明说明书和实施例仅是示例性的。
36.关于本文中所使用的“包含”、“包括”、“具有”、“含有”等等，均为开放性的用语，即意指包含但不限于。
37.除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。
38.除非特别说明，本发明所用试剂和材料均为市购，其中，0.1％腺苷与腺苷酸购买于杭州凯朋生物公司。防腐剂为苯甲酸钠、脱霉剂为：双乙酸钠。
39.实施例中的饲料组分“预混料”，当饲料为1kg全价日粮时，预混料包括如下质量的组分：
40.维生素a 12000iu、维生素d34800iu、维生素c200mg、维生素e 205mg、维生素k 3.6mg、维生素b13.6mg、维生素b212mg、维生素b67.2mg、维生素b
12
0.048mg、泛酸30.0mg、烟酸48.0mg、叶酸8.6mg、生物素0.6mg、铜10.0mg、铁130mg、锌60mg、锰45mg、碘0.3mg以及钴0.1mg。。
41.本技术实施例中所用到的豆粕的蛋白质含量均≥43％。
42.实施例1
43.母猪妊娠饲料配方
44.本发明下述实施例中妊娠母猪的日粮配方，以普通商品日粮作为对照，分别在普通商品日粮中添加质量百分比为0.1％的腺苷或0.1％的腺苷酸，具体采食量和营养组分见表2和表3，深入探究妊娠日粮添加0.1％腺苷或腺苷酸对母猪死胎率，仔猪初生重，胎盘血管生成及繁殖性能的影响。
45.表1是妊娠日粮添加0.1％的腺苷或腺苷酸对母猪体重、背膘的影响，所有数据均以平均值标准误表示。
46.表1妊娠日粮添加0.1％腺苷或腺苷酸对母猪体重、背膘的影响
[0047][0048]
表2母猪妊娠阶段采食量(kg/d)
[0049][0050][0051]
表3母猪妊娠饲料成分和营养水平
[0052][0053][0054]
实施例2
[0055]
妊娠期日粮添加0.1％腺苷或腺苷酸对母猪繁殖性能和仔猪生长性能的影响，为了验证本发明的效果，将0.1％腺苷或腺苷酸组母猪的繁殖性能和仔猪生长性能进行比较
分析。
[0056]
1.试验动物
[0057]
试验动物为健康杜长大三元杂初产母猪，试验地点为江西省上饶市万年县鑫星农牧股份有限公司山家寨养殖场。
[0058]
2.试验处理与分组
[0059]
在母猪妊娠65天，按体重、背膘选取135头母猪分组，随机分为3个组别，分别为空白对照组、0.1％腺苷组、0.1％腺苷酸组。每组45头母猪，每头母猪1个重复，单栏饲喂。试验日粮饲喂阶段为妊娠65天-分娩(饲喂饲料原料组成见表3，饲喂模式见表2)。
[0060]
3.数据处理与分析
[0061]
135头母猪计入数据分析。每头母猪为一个重复进行统计分析。试验数据用excel软件进行整理后，以spss程序进行单因素方差分析，其中仔猪生长性能采用混合模型方差进行数据分析。所有数据均检验其正态性，不符合正态分布采用kruskal-wallis进行检验分析。差异显著者进行duncan氏法多重比较，死胎率用卡方检验。结果以平均值
±
标准误表示，0.05＜p＜0.10表示具有统计学上的变化趋势，*p＜0.05表示差异显著，**p＜0.01表示差异极显著。作图由graphpad prism 8软件来完成。
[0062]
4.试验结果
[0063]
母猪各阶段有效样本量统计如表4所示。从65到妊娠109天，各组因母猪疾病、空怀流产等原因分别淘汰了1、0、2头母猪。
[0064]
表4母猪各阶段有效样本量统计信息表
[0065][0066][0067]
由表5可知，与对照组相比妊娠日粮添加0.1％腺苷组显著提高仔猪初生重，降低了死胎率(p《0.05)；妊娠日粮添加0.1％腺苷组和0.1％腺苷酸组极显著的提高了仔猪活力和胎盘效率(p《0.01)。但妊娠日粮添加0.1％腺苷组的窝间变异系数极显著增大(p《0.01)。
[0068]
表5妊娠日粮添加0.1％腺苷或腺苷酸对母猪繁殖性能的影响
[0069][0070]
实施例3
[0071]
添加0.1％腺苷或腺苷酸的妊娠母猪饲料营养物质含量
[0072]
1.试验动物
[0073]
试验动物为实施例2中的健康杜长大三元杂初产母猪，试验地点、方法(饲料及饲喂量)同实施例2。
[0074]
2.样品收集及试验方法
[0075]
选取有代表性的原始样品不少于1000g。按四分法缩分到250g，风干或以60℃烘干，用植物样品粉碎机碾细，过0.42mm试验筛。封入样品袋,放在阴凉处保存，以备测定。
[0076]
分析测定饲料样中的粗蛋白质(cp)、粗纤维(cf)和中性洗涤纤维(ndf)的含量，方法参照《饲料分析及饲料质量检测技术》(第3版)。
[0077]
3.数据处理与分析
[0078]
试验数据用excel软件进行整理后，以spss程序进行单因素方差分析。所有数据均检验其正态性，不符合正态分布采用kruskal-wallis进行检验分析。差异显著者进行duncan氏法多重比较。结果以平均值
±
标准误表示，0.05＜p＜0.10表示具有统计学上的变化趋势，*p＜0.05表示差异显著，**p＜0.01表示差异极显著。
[0079]
4.试验结果
[0080]
由表6可知，妊娠期添加0.1％腺苷或腺苷酸对饲料粗蛋白质(cp)、粗纤维(cf)和中性洗涤纤维(ndf)含量无显著影响(p《0.05)。
[0081]
表6妊娠母猪日粮营养物质含量
[0082][0083]
实施例4
[0084]
妊娠期添加0.1％腺苷或腺苷酸对母猪胎盘组织中腺苷、腺苷酸及其代谢产物的影响
[0085]
1.试验动物
[0086]
试验动物为实施例2中的健康杜长大三元杂初产母猪，试验地点、方法(饲料及饲喂量)同实施例2。
[0087]
2.样品收集及试验方法
[0088]
在母猪分娩期间，初生仔猪的脐带用一条短棉线系住，每条棉线都被标上一个编号标签，以确保每头仔猪与他们的胎盘相匹配。待母猪排出胎盘，称量胎盘重量后，采集部分胎盘放入液氮中快速冷冻。
[0089]
将收集的胎盘组织样品在干冰或冰上剪切，称重40mg，质量偏差小于10％；组织样本 磁珠 400μl超纯水，匀浆频率30次/秒，2min，重复三次；吸取200μl匀浆液到无菌无酶离心管中，加入800μl meoh甲醇/can乙腈(v:v,1:1)(提前-20预冷30min)，涡旋30s，4℃水浴超声10min；-20℃孵育1h后14500rpm，4℃离心15min，取上清1000μl，氮气吹干；加200μl甲醇/h2o水(v:v,1:1)复溶。涡旋30s，4℃水浴超声10min，14500rpm，4℃离心15min。上清过0.22μm有机滤膜转移溶液置于进样瓶(带有内衬管)中，-80℃储藏。
[0090]
3.数据处理与分析
[0091]
试验数据用excel软件进行整理后，以spss程序进行单因素方差分析。所有数据均检验其正态性，不符合正态分布采用kruskal-wallis进行检验分析。差异显著者进行duncan氏法多重比较。结果以平均值
±
标准误表示，*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001，****p＜0.0001。作图由graphpad prism 8软件来完成。
[0092]
4.试验结果
[0093]
图2和图3所示，如与对照组相比，0.1％腺苷和腺苷酸组的胎盘组织中腺苷、腺苷酸及其代谢产物显著提高。
[0094]
实施例5
[0095]
妊娠期添加0.1％腺苷或腺苷酸对母猪胎盘血管生成的影响
[0096]
1.试验动物
[0097]
试验动物为实施例2中的健康杜长大三元杂初产母猪，试验地点、方法(饲料及饲喂量)同实施例2。
[0098]
2.样品收集及试验方法
[0099]
在母猪分娩期间，初生仔猪的脐带用一条短棉线系住，每条棉线都被标上一个编号标签，以确保每头仔猪与他们的胎盘相匹配。待母猪排出胎盘，称量胎盘重量后，采集部
分胎盘放入液氮中快速冷冻。其余新鲜胎盘组织立即用4％多聚甲醛固定。
[0100]
(1)胎盘血管密度
[0101]
取新鲜胎盘组织，用4％多聚甲醛固定，石蜡包埋制成5μm厚切片，再进行苏木精-伊红染色。追踪胎盘组织占据的区域，并使用投射显微镜(奥林巴斯cx41，日本)追踪这些区域的胎盘血管。接下来，通过image j图像分析对胎盘血管面积进行量化，并评估每单位组织面积中胎盘血管的相对数量。
[0102]
(2)胎盘血管生成因子mrna表达量
[0103]
用ezb试剂(invitgen，carlsad，usa)从胎盘组织中提取总rna。使用primescript rt试剂盒(中国大连塔卡拉)进行cdna合成。pcr反应使用abi quantstudiotm 6flex system(应用生物系统公司，加利福尼亚州卡尔斯巴德)和sybr green试剂盒(genstar，中国，北京)进行。以18s rrna为对照基因，以目的基因与对照基因之比表示相关基因的表达。
[0104]
(3)胎盘血管生成因子蛋白表达量
[0105]
胎盘用含蛋白酶和磷酸酶抑制剂的ripa缓冲液(beyotime，中国，北京)裂解。根据制造商指南使用bca蛋白分析试剂盒(beyotime，中国，北京)测定蛋白质浓度，然后用sds-page分离，并将其印迹到pvdf膜上。接下来，将印迹在4℃中与以下一级抗体孵育过夜：vegf-a(proteintech，美国)，β-actin(cst，美国)。使用image j软件(美国国立卫生研究院，贝塞斯达，md)量化条带密度，然后将其归一化为β-actin。
[0106]
3、数据处理与分析
[0107]
试验数据用excel软件进行整理后，以spss程序进行单因素方差分析，其中仔猪生长性能采用混合模型方差进行数据分析。所有数据均检验其正态性，不符合正态分布采用kruskal-wallis进行检验分析。差异显著者进行duncan氏法多重比较。结果以平均值
±
标准误表示，0.05＜p＜0.10表示具有统计学上的变化趋势，*p＜0.05表示差异显著，**p＜0.01表示差异极显著。作图由graphpad prism 8软件来完成。
[0108]
4.试验结果
[0109]
(1)如图4和图5，与对照组相比，0.1％腺苷组与0.1％腺苷酸组的胎盘血管密度显著提高(p＜0.05)。
[0110]
(2)如图6所示，与对照组相比，0.1％腺苷组的vegf-a与vegf-d的mrna相对表达量显著提高；0.1％腺苷酸组的pigf与vegf-d的mrna相对表达量显著提高。
[0111]
(3)如图7和8所示，与对照组相比，0.1％腺苷和腺苷酸组的vegf-a蛋白表达量显著提高(p＜0.05)。
[0112]
以上实施例结果表明，妊娠日粮添加0.1％腺苷或腺苷酸显著提高胎盘中腺苷和腺苷酸及其代谢产物含量，明显促进胎盘的血管生成，显著提高仔猪初生重，降低死胎率，改善母猪繁殖性能。
[0113]
以上所述的实施例仅是对本发明的优选方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方案做出的各种变形和改进，均应落入本发明权利要求书确定的保护范围内。