修饰的Fc-区以增强抗体及其抗原结合片段的功能性亲和力的制作方法

技术特征：
1.一种修饰的igg1抗体或其抗原结合片段，其包含免疫球蛋白fc-区的一个或多个残基和结合区，其中将fc-区的一个或多个残基修饰为来自小鼠igg3抗体的相应残基并且其中与包含野生型fc-区残基的相应igg1抗体或其抗原结合片段相比，所述修饰的igg1抗体或其抗原结合片段具有增强的功能性亲和力。2.根据权利要求1所述的修饰的igg1抗体或其抗原结合片段，其特征在于，与包含野生型fc-区残基的相应igg1抗体或其抗原结合片段相比，所述修饰的iggl抗体或其抗原结合片段的功能性亲和力增强至少约10％。3.根据权利要求1至2中任一项所述的修饰的iggl抗体或其抗原结合片段，其特征在于，与包含野生型fc-区残基的相应iggl抗体或其抗原结合片段相比，所述修饰的igg1抗体或其抗原结合片段增强了直接细胞杀伤。4.根据权利要求3所述的修饰的igg1抗体或其抗原结合片段，其特征在于，与包含野生型fc-区残基的相应igg1抗体或其抗原结合片段相比，所述修饰的igg1抗体或其抗原结合片段的直接细胞杀伤增强至少约10％。5.根据任何前述权利要求所述的修饰的igg1抗体或其抗原结合片段，其特征在于，fc-区的一个或多个残基选自：q342、p343、e345、n361、q362、p374、d376。6.根据任何前述权利要求所述的修饰的igg1抗体或其抗原结合片段，其特征在于，fc-区的一个或多个修饰的残基选自：q342r、p343a、e345t、n361k、q362k、p374s、d376a。7.根据任何前述权利要求所述的修饰的igg1抗体或其抗原结合片段，其特征在于，fc-区的一个或多个残基选白：n286、k288、k290、q342、p343、e345、l351、t359、n361、q362、g371、p374、s375、d376、a378。8.根据任何前述权利要求所述的修饰的iggl抗体或其抗原结合片段，其特征在于，fc-区的一个或多个修饰的残基选自：n286t、k288w、k290q、q342r、p343a、e345t、l351i、t359s、n361k、q362k、g371n、p374s、s375e、d376a、a378s。9.根据任何前述权利要求所述的修饰的igg1抗体或其抗原结合片段，其特征在于，fc-区的一个或多个残基选自：n286、k288、k290、a339、q342、p343、r344、e345、l351、s354、d356、e357、l358、t359、n361、q362、k370、g371、y373、p374、s375、d376、a378。10.根据任何前述权利要求1所述的修饰的igg1抗体或其抗原结合片段，其特征在于，fc-区的一个或多个修饰的残基选白：n286t、k288w、k290q、a339p、q342r、p343a、r344q、e345t、l351i、s354p、d356e、e357q、l358m、t359s、n361k、q362k、k370t、g371n、y373f、p374s、s375e、d376a、a378s。11.根据任何前述权利要求所述的修饰的igg1抗体或其抗原结合片段，其特征在于，fc-区的一个或多个残基选自：n286、k288、k290、e294、y300、v305、a339、q342、p343、r344、e345、l351、s354、d356、e357、l358、t359、n361、q362、k370、g371、y373、p374、s375、d376、a378。12.根据任何前述权利要求所述的修饰的igg1抗体或其抗原结合片段，其特征在于，fc-区的一个或多个修饰的残基选自：n286t、k288w、k290q、e294a、y300f、v305a、a339p、q342r、p343a、r344q、e345t、l351i、s354p、d356e、e357q、l358m、t359s、n361k、q362k、k370t、g371n、y373f、p374s、s375e、d376a、a378s。13.一种增加igg1抗体或其抗原结合片段的直接细胞杀伤能力的方法，所述igg1抗体
或其抗原结合片段包含免疫球蛋白fc-区的一个或多个残基和结合区，其特征在于，所述方法包括用来自小鼠igg3 ch2和/或ch3结构域的一个或多个相应残基取代所述fc-区的ch2和/或ch3结构域的一个或多个残基。14.根据权利要求13所述的增加igg1抗体或其抗原结合片段的直接细胞杀伤能力的方法，其特征在于，所述方法包括修饰选白以下的fc-区的一个或多个残基：(a)q342、p343、e345、n361、q362、p374、d376，任选地，其中所述一个或多个修饰的残基选自：q342r、p343a、e345t、n361k、q362k、p374s、d376a；(b)n286、k288、k290、q342、p343、e345、l351、t359、n361、q362、g371、p374、s375、d376、a378，任选地，其中所述一个或多个修饰的残基选自：n286t、k288w、k290q、q342r、p343a、e345t、l351i、t359s、n361k、q362k、g371n、p374s、s375e、d376a、a378s；(c)n286、k288、k290、a339、q342、p343、r344、e345、l351、s354、d356、e357、l358、t359、n361、q362、k370、g371、y373、p374、s375、d376、a378，任选地，其中所述一个或多个修饰的残基选自：n286t、k288w、k290q、a339p、q342r、p343a、r344q、e345t、l351i、s354p、d356e、e357q、l358m、t359s、n361k、q362k、k370t、g371n、y373f、p374s、s375e、d376a、a378s；或(d)n286、k288、k290、e294、y300、v305、a339、q342、p343、r344、e345、l351、s354、d356、e357、l358、t359、n361、q362、k370、g371、y373、p374、s375、d376、a378，任选地，其中所述一个或多个修饰的残基选自：n286t、k288w、k290q、e294a、y300f、v305a、a339p、q342r、p343a、r344q、e345t、l351i、s354p、d356e、e357q、l358m、t359s、n361k、q362k、k370t、g371n、y373f、p374s、s375e、d376a、a378s。15.一种药物组合物，所述药物组合物包含根据权利要求1至12中任一项所述的修饰的igg1抗体或其抗原结合片段，以及药学上可接受的载体。16.根据权利要求15所述的药物组合物，所述药物组合物还包含至少一种其他治疗剂，任选地，其中附加剂是免疫调节剂。17.根据权利要求1至12中任一项所述的修饰的igg1抗体或其抗原结合片段或根据权利要求15或16中任一项所述的组合物用作药物的用途。18.根据权利要求1至12中任一项所述的修饰的igg1抗体或其抗原结合片段或根据权利要求15或16中任一项所述的组合物用于治疗癌症、自身免疫性疾病、炎性疾病或传染病的用途。19.一种治疗患有疾病的个体的方法，所述方法包括向所述个体施用药物有效量的根据权利要求1至12中任一项所述的修饰的igg1抗体或其抗原结合片段或根据权利要求15或16中任一项所述的组合物。20.根据权利要求19所述的治疗个体的方法，其特征在于，所述疾病选自由癌症、自身免疫性疾病、炎性疾病和传染病组成的组。21.根据权利要求19至20中任一项所述的治疗个体的方法，其特征在于，所述方法还包括对个体施用附加治疗剂，任选地，其中附加治疗剂是免疫调节剂。22.一种试剂盒，所述试剂盒包括根据权利要求1至12中任一项所述的修饰的igg1抗体或其抗原结合片段或根据权利要求15至16中任一项所述的组合物，其特征在于，所述修饰的igg1抗体或其抗原结合片段或组合物位于一个或多个容器，如小瓶中。23.根据权利要求22所述的试剂盒，其特征在于，所述修饰的igg1抗体或其抗原结合片
段或组合物在治疗中用于同时、分开或相继使用。24.根据权利要求1至12中任一项所述的修饰的igg1抗体或其抗原结合片段或根据权利要求15至16中任一项所述的组合物用于制造治疗疾病的药物的用途。25.根据权利要求24所述的用途，其特征在于，所述疾病是癌症、自身免疫性疾病、炎性疾病或传染病。

技术总结
本发明涉及鉴定小鼠IgG3抗体(MAB)内负责分子间协同性的关键残基，并将其转移到IgG1抗体中以增强其功能性亲和力和直接细胞杀伤。体中以增强其功能性亲和力和直接细胞杀伤。


技术研发人员：琳达
受保护的技术使用者：斯坎塞尔有限公司
技术研发日：2020.07.31
技术公布日：2022/7/12