一株具有预防和缓解过敏性哮喘症状的罗伊氏乳杆菌及其应用的制作方法

1.本发明属于益生菌筛选与应用技术领域，具体涉及一株具有预防和缓解过敏性哮喘症状的罗伊氏乳杆菌及其应用。


背景技术：

2.过敏性哮喘是一种累及下呼吸道的具有异质性的临床综合征。根据流行病学调查研究结果显示，中国的哮喘患者大约为2000万人，患病率正不断升高。哮喘临床表现为致敏后再次接触过敏原后显示出持续性或间歇性过敏症状，如喘息、咳嗽、呼吸困难和粘液增加等，病理表现为以嗜酸性粒细胞增多以及th2型免疫反应相关的细胞因子增多。临床治疗上糖皮质激素、β2受体激动剂是治疗哮喘的主要药物，但药物毒性和依从性差等问题一直困扰患者。因此，寻找哮喘的新型治疗方案成为亟需解决的问题。
3.近二十年来，科学界对肠道菌群的研究呈现出爆发性增长。研究发现益生菌可以帮助消化吸收，促进肠道菌群平衡，维护人体健康。越来越多的证据表明，益生菌对于人体的健康影响不仅局限于肠道，还有更广泛的作用范围，如内分泌平衡调节、免疫平衡调节、神经系统调节、呼吸系统调剂等。因此，通过服用益生菌来预防和缓解过敏性哮喘这种与免疫调节相关的多因性疾病成为治疗哮喘的一种新思路。
4.公开号为cn 109628359 a的中国发明专利公开了一株可缓解过敏性哮喘的罗伊氏乳杆菌及其应用，经动物试验表明灌胃该菌株6周可缓解小鼠哮喘症状。公开号为cn 110643542 a的中国发明专利公开了一株可缓解过敏性哮喘的罗伊氏乳杆菌及其应用，经动物试验表明灌胃该菌株6周可缓解小鼠哮喘症状。但是现有预防和缓解过敏性症状的益生菌存在作用效果机制不明、见效慢和作用效果弱等问题。因此，亟需找到一株作用机制明确，作用效果显著，能快速针对预防和缓解过敏性哮喘，缓解肺部炎症及恢复th1/th2型免疫反应平衡的新益生菌株。


技术实现要素：

5.本发明的目的是提供一株新的罗伊氏乳杆菌(lactobacillus reuteri)及其应用；所提供的罗伊氏乳杆菌分离自健康哺乳期妇女的母乳，能够调节免疫，改善人体免疫功能，有效预防和缓解过敏性哮喘症状。
6.本发明所提供的罗伊氏乳杆菌，为罗伊氏乳杆菌(lactobacillus reuteri)vhprobi m07株，已于2019年10月08日保藏于位于中国武汉的武汉大学的中国典型培养物保藏中心，其保藏号为cctcc no：m2019779。
7.m07菌株的rapd指纹图谱如图2所示，rep-pcr指纹图谱如图3所示。
8.本发明所提供的罗伊氏乳杆菌vhprobi m07株，其16s rdna序列为seq id no:1。
9.本发明所提供的罗伊氏乳杆菌在制备用于预防和治疗过敏性哮喘的制品中的应用。
10.本发明还提供一种用于预防和治疗过敏性哮喘的功能性食品，其中包含有的罗伊氏乳杆菌vhprobi m07菌株。
11.本发明提供的罗伊氏乳杆菌vhprobi m07可以作为一种食品原料来源使用，长期服用不会有副作用及过量的风险。本发明提供的罗伊氏乳杆菌vhprobi m07能够有效预防和缓解过敏性哮喘症状，单独使用该菌株且无需与益生元和/或其它益生菌复配即可对过敏性哮喘有预防和缓解功效，具有重要的应用价值。
附图说明
12.图1为m07菌株riboprinter指纹图谱；
13.图2为m07菌株的rapd指纹图谱；
14.图3为m07菌株的rep-pcr指纹图谱；
15.图4为各组别小鼠白细胞分类计数结果图；
16.图5为各组别小鼠细肺泡灌洗液细胞因子测定结果图；
17.图6为各组别小鼠肺部组织病理染色结果图。
具体实施方式
18.本发明所述筛选方法并不局限于实施例所述，已知的能够达到筛选目的的方法均可以，实施例的筛选说明只是对本发明的说明，并不是对本发明保护范围的限制。在不背离本发明精神和实质的情况下，对本发明方法、步骤或条件所作的修改或替换，均属于本发明的范围。
19.下面结合具体实施例对本发明做详细的描述。
20.实施例1罗伊氏乳杆菌vhprobi m07的分离筛选
21.1、初筛
22.配制mrs(man rogosa sharpe)琼脂培养基：纯化水1000ml，蛋白胨10g，牛肉浸取物10g，酵母提取物5.0g,乙酸钠5g，葡萄糖5g，磷酸二氢钾2g，吐温80 1.0ml，柠檬酸二胺2.0g,碳酸钙20g，七水硫酸镁0.58g，七水硫酸锰0.25g，琼脂15g，调ph6.2-6.5，121℃高压灭菌15min。
23.依据2019版《人类遗传资源库伦理规范》，与样本提供者签订项目承诺书和知情同意书后，按照生物样本库标准操作规范，取1ml半年内未食用过益生菌制剂的哺乳期产妇的新鲜母乳，经无菌生理盐水稀释后放入无菌样品袋中，用匀浆仪拍打混匀；取100μl混匀液梯度稀释，涂布于mrs琼脂培养基后于37℃厌氧培养48h，待平板长出单菌落镜检。
24.根据镜检结果，申请人共筛选出7株潜在乳酸杆菌，分别命名为m01，m02，
……
m06，m07。
25.2、复筛
26.配制1l的mrs液体培养基121℃高压灭菌15min，待培养基冷却后加入3.2g猪粘膜胃蛋白酶，摇匀溶解，置37℃水浴摇床中温水浴1h制成耐酸性培养基。
27.将筛选得到的7株乳酸杆菌m01，m02，
……
m06，m07，按6％接种量分别接种于上述耐酸性培养基中，37℃条件下厌氧静置培养48h，取发酵液进行菌量计数。
28.结果显示，所述7株乳酸杆菌发酵液中活菌量的对数值分别为7.23、6.94、6.76、
7.56、6.33、5.39、8.78log cfu/ml，其中m07菌株经耐酸性培养基复筛后活菌量最多，对数值高达8.78log cfu/ml。从而说明m07号菌株耐酸能力最高。
29.实施例2菌株鉴定
30.1、菌落形态鉴定
31.将m07菌株接种于mrs琼脂培养基上，37℃厌氧培养24h后，可见m07单菌落呈乳白色，菌落直径在1.5-3mm左右，表面湿润，显微镜下末端呈圆形的弯曲杆菌。
32.2、生理生化特性鉴定
33.接种液的准备如下：在无菌条件下，取适量新鲜m07菌液，5000rpm/min离心5min，用pbs缓冲液洗2次，再用同体积pbs缓冲液重菌体后稀释50倍，作为接种液。
34.2.1、盐度耐受性试验
35.在无菌条件下，向96孔板中分别加入190μl盐浓度为1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％的bsm液体培养基，每个盐浓度做3个平行，然后再加入10μl接种液，不接菌的孔作为对照。每孔加入50μl高压灭菌过的石蜡油以防止培养过程中水分蒸发。置于37℃恒温培养，观察培养基是否变浑浊。
36.结果显示，m07菌株最大耐受盐浓度为1％。
37.2.2、过氧化氢酶实验
38.取新鲜菌液，滴一滴于干净的载玻片上，然后在其上滴加一滴3％过氧化氢溶液，观察到m07菌株不产生气泡，是阴性反应。
39.2.3、碳源代谢试验
40.本实施例中所用的基础培养基配方如下：
41.蛋白胨1.5g；酵母提取物0.6g；吐温80 0.1g；盐溶液0.5ml；酚红18mg；蒸馏水100ml；ph7.4
±
0.2。盐溶液成分：mgso4·
7h2o 11.5g，mnso4·
4h2o 2.8g，蒸馏水100ml。
42.配制10g/100ml的糖、醇和苷类碳水化合物溶液，并用0.22μm的无菌过滤器进行过滤。在无菌条件下，向96孔板中加入20μl除菌后的碳水化合物溶液，每种碳水化合物4个平行，然后加入170μl灭菌后含酚红的基础培养基，再加入10μl接种液，不接菌反应孔作为对照。每孔加入50μl液体石蜡以防止培养过程中水分蒸发。37℃厌氧培养，以酚红为指示剂，观察培养基颜色变化；具体结果见表1。
43.表1：m07菌株碳源代谢结果表
[0044][0045]
注：“ ”阳性反应；
“‑”
阴性反应。
[0046]
3分子生物学鉴定
[0047]
3.1 16s rdna基因序列分析
[0048]
3.1.1、基因组dna提取
[0049]
参照天根细菌基因组dna提取试剂盒(目录号：dp302)操作。
[0050]
3.1.2、16s rdna基因扩增
[0051]
1)引物序列:
[0052]
27f：agagtttgatcctggctca；
[0053]
1492r：ggttaccttgttacgactt。
[0054]
2)反应体系(50μl)
[0055]
表2：16s rdnapcr扩增体系表
[0056][0057]
3)电泳验证pcr产物核酸电泳结果为1500bp左右时符合要求。
[0058]
4)pcr产物测序
[0059]
通过测序获得m07菌株的16s rdna序列seq id no:1，并将该序列在ncbi数据库中进行比对，初步确定m07菌株为罗伊氏乳杆菌。
[0060]
3.2riboprinter指纹图谱
[0061]
用一根取菌棒从琼脂培养基平板上沾取已纯化好的单菌落，将其放入有缓冲液的样品管中，用手持搅拌器搅拌使其在缓冲液中悬浮，然后将样品架放入加热器中灭活后放入riboprinter系统中，样品经过dna制备、转膜、成像检测及数据处理后，得到细菌鉴定结果。鉴定结果显示，m07菌株为罗伊氏乳杆菌，其riboprinter指纹图谱结果如图1所示。
[0062]
3.3rapd和rep-pcr指纹图谱鉴定
[0063]
3.3.1、rapd指纹图谱鉴定
[0064]
1)引物序列：m13(5
’‑
gagggtggcggttct-3’)；
[0065]
2)rapd反应体系
[0066]
表3：rapd反应体系表
[0067]
[0068][0069]
3)电泳
[0070]
制备1.5％的琼脂糖凝胶板，dl2000 dnamarker作为结果对照，稳压100v电泳80min，最后利用凝胶成像系统检测电泳图。m07菌株的rapd指纹图谱如图2所示。3.3.2、rep-pcr指纹图谱
[0071]
1)rep-pcr引物
[0072]
ctacggcaaggcgacgctgacg。
[0073]
2)rep-pcr的反应体系
[0074]
表4：rep-pcr的反应体系表
[0075][0076]
3)电泳
[0077]
dl2000 dnamarker作为结果对照。电压100v，电泳时间80min检测扩增结果。m07菌株的rep-pcr指纹图谱如图3所示。
[0078]
综上，将m07菌株的菌落形态以及生理生化特性结果上传至网站http://www.tgw1916.net/bacteria_logare_desktop.html，同时结合文献de clerck e，et al.systematic and applied microbiology,2004,27(1)50公布的结果，进行比对。综合分子生物学的鉴定结果，可以得出结论，m07菌株为一株新型的罗伊氏乳杆菌，将其命名为罗伊氏乳杆菌vhprobi m07。
[0079]
实施例3罗伊氏乳杆菌vhprobi m07株对人工胃液和人工肠液的耐受性试验1人工胃液的配制
[0080]
分别称取蛋白胨5g、酵母提取物2.5g、葡萄糖1g和nacl 2g，加入1000ml蒸馏水，用稀盐酸调ph3.0，然后115℃灭菌20min。然后使用前加入3.2g猪粘膜胃蛋白酶，摇匀溶解，置37℃水浴摇床中温水浴1h，以模拟人体温度。
[0081]
2人工肠液的配制
[0082]
分别称取蛋白胨5g、酵母提取物2.5g、葡萄糖1g、kh2po
4 6.8g和牛胆盐3.0g，加入77ml的0.2mol/l的naoh溶液，定容至1000ml，用稀盐酸或者氢氧化钠溶液调ph6.8
±
0.1，115℃灭菌20min。然后使用前加入1g胰酶，摇匀溶解，置37℃水浴摇床中温水浴1h，以模拟人体温度。
[0083]
3试验方法
[0084]
取2ml新鲜菌液，5000rpm/min离心5min收集菌体，菌体用生理盐水洗涤3次，再用2ml生理盐水重悬，作为接种液。取1ml接种液，加入到24ml人工肠液中，置于37℃水浴摇床(200rpm/min)3h，取样1ml，检测活菌量。
[0085]
活菌计数方法按照国标《gb4789.35-2016-食品微生物检验乳酸菌检验》测定菌量，该菌株经过人工肠液消化后的活菌量(log cfu/ml)见表5。
[0086]
表5：人工胃肠液消化后的活菌量表
[0087][0088]
从表5可知，本发明筛选到的罗伊氏乳杆菌vhprobi m07经人工胃液和人工肠液消化后，存活率仍能达到86.2％。从而说明该菌株对人工胃液和人工肠液具有很强耐受性。
[0089]
实施例4罗伊氏乳杆菌vhprobi m07的溶血性及抗生素耐受性实验
[0090]
1、溶血性实验
[0091]
(1)接种液制备：将冷冻保存的罗伊氏乳杆菌vhprobi m07菌株划线接种于mrs琼脂培养基中，在温度37℃培养24～48h，再经mrs液体培养基传代培养1次后，以5％的接种量把罗伊氏乳杆菌vhprobi m07接种到新鲜的mrs液体培养基中37℃培养24～48h，获得新鲜的菌液，作为接种液。
[0092]
(2)血细胞培养基准备：称取tbs基础培养基的各种组分，溶解，121℃高压灭菌15min，等培养基冷却到50℃的时候加入5％的无菌脱纤维绵羊血，混匀，倒平板。
[0093]
(3)划线培养：将测试菌株划线接种于准备好的血细胞平板，37℃培养箱培养，24～48h观察测试菌是否有溶血现象。
[0094]
结果显示：罗伊氏乳杆菌vhprobi m07不能生长，血细胞平板没有变化，说明罗伊氏乳杆菌vhprobi m07不产生溶血素，不能够溶解血细胞。
[0095]
2、抗生素耐受性实验
[0096]
(1)抗生素配制：氨苄青霉素、克林霉素、红霉素、庆大霉素、链霉素、四环素、万古霉素均配制成2048μg/ml的贮存液，-20℃保存备用。使用时将贮存液用bsm液体培养基进行2倍系列梯度稀释成使用液，梯度稀释浓度为1～1024μg/ml共11个梯度。
[0097]
(2)接种液制备：取适量新鲜菌液(24h，37℃培养)，5000rpm离心5min，用无菌生理盐水洗一次，再用同体积生理盐水重悬菌体后稀释50倍，作为接种液。
[0098]
(3)微量肉汤稀释法测定抗生素对罗伊氏乳杆菌vhprobi m07的最小抑菌浓度mic值
[0099]
a.96孔板第1列次加入不含抗生素的mrs液体培养基，作为阴性对照，向第2～12列依次加入190μl含不同浓度抗生素的mrs液体培养基，然后分别接种10μl上述接种液，做3个
平行孔，并以1个孔不加菌液作为空白。
[0100]
b.加入50μl石蜡油覆盖防止水分蒸发。
[0101]
c.将96孔板于37℃培养24h后取出，测定od
600
值，用24h的结果统计抗生素对菌株的mic值，具体结果见表6。
[0102]
表6：罗伊氏乳杆菌vhprobi m07的抗生素mic值(
μg
/ml)
[0103][0104]
从表6的结果可以看出，本发明提供的罗伊氏乳杆菌vhprobi m07对红霉素和氨苄西林等常见抗生素敏感，生物安全性良好。
[0105]
实施例5罗伊氏乳杆菌vhprobi m07的疏水性细胞表面测试
[0106]
1、待测菌液制备：挑取纯化好的罗伊氏乳杆菌vhprobi m07菌落接种于新配制的mrs液体培养基中，于37℃培养24～48h。再按1％(v/v)的接种量接至mrs液体培养基中于37℃继续培养24～48h后6000
×
g离心10min，收集菌体后用无菌生理盐水冲洗2次，再用灭菌0.1m kno
3 1ml溶液重悬菌体，作为待测菌液。
[0107]
2、表面疏水性测定：吸取50μl上述菌悬液加入2450μl的0.1m kno3并记录od600为a0,取1.5ml菌悬液与500μl二甲苯混匀后在室温下静置10min(此时形成两相体系)。将两相体系涡旋振荡2min后再静置20min,重新形成水相和有机相。小心吸取水相(不要吸到有机相)在600nm处测量吸光度a1。细胞疏水性按公式hydrophobicity％＝(a
0-a1)/a1×
％计算，测三次实验取平均值。
[0108]
结果显示：本发明提供的罗伊氏乳杆菌vhprobi m07细胞表面疏水性为64.48％，标准差为2.16％。
[0109]
实施例6罗伊氏乳杆菌vhprobi m07在缓解小鼠过敏性哮喘中的应用
[0110]
1.1实验材料
[0111]
1.1.1实验动物
[0112]
balb/c小鼠spf级，24只，雌性，8-9周，体重19～25g。由济南朋悦实验动物繁育有限公司提供，生产许可证号scxk(鲁)20140007。
[0113]
实验动物饲养管理的环境条件：室温20～26℃，日温差≤4℃，相对湿度40～70％，
[0114]
明暗交替时间为12/12h。动物饲养于标准小鼠笼具中，每笼6只。
[0115]
动物饲料、饮水：自由摄食、饮水。饲料为spf级大小鼠生长繁育饲料，由济南朋悦实验动物繁育有限公司(批号：20190905)提供。饮用水是经过高温消毒的城市自来水。
[0116]
1.1.2试剂耗材
[0117]
卵清蛋白(ova)(批号：s12016)：上海源叶生物科技有限公司；
[0118]
铝佐剂(批号：ul292268)：赛默飞世尔科技(中国)有限公司；
[0119]
il-5(批号：e20200605-20187b)试剂盒：上海酶联生物科技有限公司；
[0120]
il-10(批号：e20200605-20188b)试剂盒：上海酶联生物科技有限公司；
[0121]
il-13(批号：e20200601-20162b)试剂盒：上海酶联生物科技有限公司；
γ、eotaxin细胞因子浓度测定
[0144]
末次激发后与空白对照组比较，ova过敏模型组中嗜酸性粒细胞、中性粒细胞显著增加(p＜0.05)，证明模型构建成功。与ova模型组比较，益生菌预处理组嗜酸性粒细胞和中性粒细胞减少，具有显著性差异(p＜0.05)；益生菌后处理组中性粒细胞减少，具有显著性差异(p＜0.05)，嗜酸性粒细胞减少。各组小鼠肺泡灌洗液白细胞分类计数如下表7，比较结果如图4。
[0145]
表7：小鼠肺泡灌洗液中白细胞分类计数结果表
[0146][0147]
pbs:空白对照组，ova:ova过敏模型组，pre:益生菌预处理组，pos:益生菌后处理组。与空白对照组比较*，p＜0.05；与ova过敏模型组比较#，p＜0.05
[0148]
末次激发后与空白对照组比较，ova过敏模型组小鼠肺泡灌洗液中il-5、il-13、mcp-1、tnf-α、eotaxin细胞因子浓度升高且具有显著性差异(p《0.05)，il-10、inf-γ浓度降低且具有显著性差异(p《0.05),说明ova致小鼠过敏性哮喘模型构建成功。与ova过敏模型组比较，益生菌后处理组小鼠肺泡灌洗液中il-5、il-13、mcp-1、tnf-α、eotaxin浓度均降低且有显著性差异(p《0.05)，il-10、inf-γ浓度升高且有显著性差异(p《0.05)；益生菌预处理组肺泡灌洗液中il-5、il-13、mcp-1、tnf-α、eotaxin浓度均降低且有显著性差异(p《0.05)，il-10、inf-γ浓度升高且有显著性差异(p《0.05)。各组小鼠肺泡灌洗液中il-5、il-10、il-13、mcp-1、tnf-α、inf-γ、eotaxin细胞因子浓度数据如下表8，比较如图5所示。
[0149]
表8：各组小鼠肺泡灌洗液中细胞因子浓度检测结果比较表
[0150][0151]
pbs：空白对照组；ova：ova过敏模型组；pre：益生菌预处理组；pos：益生菌后处理组。与空白对照组比较：*p《0.05，**p《0.01；与ova模型组比较：
#
p《0.05，
##
p《0.01
[0152]
1.5.2组织病理学检查
[0153]
光学显微镜下可见，空白对照组肺内支气管各级分支被覆正常的呼吸道上皮，肺泡由i型和ii型肺泡细胞围成，并见各级支气管和肺泡之间的少量间质内及其血管周围，无炎性细胞浸润；ova模型组肺脏表现为终末细支气管周围套袖样的炎性增生，终末细支气管向较大支气管周围蔓延，肺泡巨噬细胞增多明显；益生菌预处理组肺脏的主要病理变化表现为除肺泡巨噬细胞增多外，未见其它明显炎性反应；益生菌后处理组肺脏的主要病理变
化表现为肺血管扩张，炎性细胞浸润、肺泡巨噬细胞增多等炎性反应；典型病理病变见图6。
[0154]
由上述结果可知，与ova过敏模型组相比，益生菌预处理组小鼠气道炎症减轻，嗜酸性粒细胞和中性粒细胞分别降低了77.0％和37.1％。th1/th2型免疫反应趋于平衡，il-5降低了26.8％，il-13降低了29.1％、mcp-1降低了14.7％、tnf-α降低了43.0％、eotaxin浓度降低了27.5％，il-10升高了17.2％、inf-γ浓度升高了10.8％；与ova过敏模型组相比，益生菌后处理组小鼠气道炎症减轻，嗜酸性粒细胞和中性粒细胞分别降低了72.3％和36.2％。th1/th2型免疫反应趋于平衡，il-5降低了20.7％，il-13降低了38.0％、mcp-1降低了13.2％、tnf-α降低了59.4％、eotaxin浓度降低了31.9％，il-10升高了34.5％、inf-γ浓度升高了11.7％；病理切片结果显示，益生菌预处理组小鼠的未见明显炎症反应，而益生菌后处理组小鼠炎性细胞浸润现象减轻。
[0155]
本发明提供的罗伊氏乳杆菌vhprobi m07对人工肠胃液具有很强的耐受性，在人工肠胃液中的存活率达到86.2％；该菌株对红霉素和氨苄西林等常见的抗生素敏感，不产生溶血素，不能够溶解血细胞。具有良好的生物安全性；最大耐受盐浓度为1％，过氧化氢酶反应呈阴性。
[0156]
罗伊氏乳杆菌vhprobi m07具有较好的预防和治疗过敏性哮喘的功效。使用本发明提供的罗伊氏乳杆菌vhprobi m07提前灌胃或建模中灌胃过敏性哮喘小鼠，其哮喘症状较ova过敏模型组小鼠显著减轻，白细胞计数结果和肺泡灌洗液中细胞因子水平接近于空白对照组小鼠，说明该菌株可以有效预防和缓解过敏性哮喘。
[0157]
罗伊氏乳杆菌vhprobi m07的使用使小鼠免疫反应th1/th2型免疫反应趋于平衡。与ova过敏模型组小鼠相比，在益生菌预处理组过敏性哮喘小鼠中，嗜酸性粒细胞降低了77.0％，中性粒细胞降低了37.1％。肺泡灌洗液中细胞因子il-5降低了26.8％，il-13降低了29.1％、mcp-1降低了14.7％、tnf-α降低了43.0％、eotaxin浓度降低了27.5％，il-10升高了17.2％、inf-γ浓度升高了10.8％；与ova过敏模型组小鼠相比，在益生菌后处理组过敏性哮喘小鼠中，嗜酸性粒细胞降低了72.3％，中性粒细胞降低了36.2％。肺泡灌洗液中细胞因子il-5降低了20.7％，il-13降低了38.0％、mcp-1降低了13.2％、tnf-α降低了59.4％、eotaxin浓度降低了31.9％，il-10升高了34.5％、inf-γ浓度升高了11.7％；从小鼠肺部组织he染色结果来看，益生菌预处理组过敏性哮喘小鼠除肺泡巨噬细胞增多外，未见其它明显炎性反应；益生菌后处理组过敏性哮喘小鼠肺脏的主要病理变化表现为肺血管扩张，炎性细胞浸润、肺泡巨噬细胞增多等炎性反应。
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综上所述，本发明提供的罗伊氏乳杆菌vhprobi m07对模拟人工肠胃液具有很强的耐受能力，这对于益生菌株顺利经过胃肠道在结肠处定植下来发挥益生功能奠定了基础。抗生素抗性试验证实罗伊氏乳杆菌vhprobi m07对常见抗生素敏感，不产溶血素，生物安全性良好。经动物实验证实，罗伊氏乳杆菌vhprobi m07能有效预防和缓解过敏性哮喘模型小鼠的炎症反应，在增强th1型细胞免疫反应的同时能抑制th2型免疫反应，降低机体的炎症状态，增强免疫力，这说明罗伊氏乳杆菌vhprobi m07在预防和治疗过敏性哮喘症状上具有潜在的应用价值。