一种超细内径毛细管整体柱及其制备和应用

技术特征：
1.一种用于单细胞分析的超细内径毛细管整体柱，其特征在于：以烯基三甲(乙)氧基硅烷类化合物和仲胺基桥联三甲(乙)氧基硅烷类化合物作为硅烷化前体，采用溶胶凝胶反应在内径为10-30μm的毛细管中原位制备仲氨基桥联整体材料；然后通过硫醇和烯基的化学反应修饰功能基团制备所得。2.一种权利要求1所述超细内径毛细管整体柱的制备方法，其特征在于：1)由烯基三甲(乙)氧基硅烷类化合物、仲胺基桥联三甲(乙)氧基硅烷类化合物、表面活性剂、醇和水组成的预聚溶液，通入内径为10-30μm的毛细管中，基于溶胶凝胶反应原位制备仲氨基桥联杂化整体材料基质；2)将由烷基硫醇、偶氮类引发剂和溶剂配成的反应液通入制备的整体材料基质中，基于巯基和基质表面烯基的点击化学反应修饰功能基团。3.按照权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤1)所述烯基三甲(乙)氧基硅烷类化合物包括乙烯基三甲氧基硅烷、丙烯基三甲氧基硅烷、乙烯基三乙氧基硅烷和丙烯基三乙氧基硅烷中的一种或二种以上；仲胺基桥联三甲(乙)氧基硅烷类化合物包括双(3-三甲氧基甲硅烷基丙基)胺和双(3-乙氧基甲硅烷基丙基)胺中的一种或二种；烯基三甲(乙)氧基硅烷类化合物和仲胺基桥联三甲(乙)氧基硅烷类化合物两者的体积比例为1/1-3/1，两者总体积之和占预聚溶液总体积的20％-40％。4.按照权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤1)所述表面活性剂作为致孔剂，包括十六烷基三甲基溴化铵(ctab)、十六烷基三甲基氯化铵(ctac)中的一种或二种，其质量占预聚溶液质量的1％-30％。所述醇和水作为溶剂，醇包括甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇中的一种或二种以上，醇与水的体积比为9/1-12/1。5.按照权利要求2所述的方法，其特征在于：将配制的预聚溶液灌入预处理的内径为10-30μm毛细管中，通过一步溶胶凝胶反应形成多孔整体材料；反应温度为30-50℃，反应时间为6-24h。6.按照权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤2)所述溶剂包括甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇中的一种或二种以上；烷基硫醇为1-辛硫醇、1-癸硫醇、1-十二烷硫醇、1-十八硫醇中的一种或二种以上，于溶剂中的摩尔浓度为0.05-1mol/l；偶氮类引发剂为偶氮二异丁腈、偶氮二异戊腈中的一种或二种，于溶剂中的摩尔浓度为0.02-0.05mol/l；反应温度为50-80℃，反应时间为6-24h。7.一种权利要求1所述的超细内径毛细管整体柱的应用，是在单细胞酶解肽段分离鉴定中的应用。8.按照权利要求7所述的应用，其特征在于：将单细胞进行原位预处理，然后将制得的单细胞酶解肽段上样到毛细管整体柱上，与质谱联用，进行分离鉴定。

技术总结
本发明涉及一种用于单细胞分析的超细内径毛细管整体柱及其制备方法。所述的超细内径毛细管整体柱是在内径为10-30μm的毛细管中通过烯基三甲(乙)氧基硅烷类和仲胺基桥联三甲(乙)氧基硅烷类的溶胶凝胶反应原位制备仲氨基桥联杂化整体材料基质，然后通过“硫巯-烯”点击化学反应修饰功能基团制备而得。此超细内径毛细管整体柱具有以下优点：(1)与填充的方法相比，基于原位溶胶凝胶反应和表面化学反应的方法制备超细内径毛细管柱简单易行；(2)与超细内径填充柱相比，此超细内径毛细管整体柱通透性好，反压小；(3)骨架结构上的仲胺基可有效抑制残留硅羟基的非特异性吸附，从而提高了单细胞蛋白质组样品分离的峰容量和分析的灵敏度。析的灵敏度。析的灵敏度。


技术研发人员：张丽华 梁玉 王超 杨开广 戴忠鹏 梁振 张玉奎
受保护的技术使用者：中国科学院大连化学物理研究所
技术研发日：2020.11.30
技术公布日：2022/6/4