一种改善稳定性的眼科制剂及其制备方法

1.本发明属于药物制剂领域，具体涉及一种提高存储稳定性和组分黏附性的固体眼用制剂及其制备方法。


背景技术：

2.市场上对于缓解眼部疲劳以及改善干眼症症状（干眼症尤其是泪液缺乏型干眼症通常具有眼表干涩症状）的产品，除了可滴加的眼药水类和仪器、眼贴类，还包括洗眼液。在眼科领域中，眼部清洗是缓解干眼症的有效手段。但是目前的洗眼液通常为液态形式制剂，或者包括液态组分，不仅随身携带不方便，而且缺乏有效的眼部营养组分，无法营养眼部及改善眼部疲劳，仅能缓解干涩感。
3.由于眼部密布毛细血管微循环，当用眼疲劳时除了感到眼部疼痛、酸胀、发干、视力模糊等不适感，还有可能导致流泪等症状，说明眼部微循环系统失去平衡。 采用合适的氨基酸等营养组分可以有效改善这种症状，但是洗眼液即使含有有效组分，由于浓度低、黏附性等原因也难以有效吸收利用。
4.cn 111202746 a公开了一种眼用复合制剂，其包含固态组分a及作为缓冲等渗液的组分b。其中，组分a 包括硫酸软骨素交联修饰的羧基化β-环糊精载体，以及负载其上的组分玻璃酸钠、海藻糖、甜菜碱及丙氨酰谷胺酰胺基质。其中，作为缓冲等渗 液的组分b包括聚维酮、牛磺酸、甘油和/或氯化 钠等渗剂、抑菌剂、ph调节剂，以及注射用水。
5.cn 112043823 a涉 及一种用于眼底黄斑症预防和改善的制剂，由冻干粉、溶媒液构成。所述冻干粉包括透明质酸钠、叶黄素、核黄素、吡哆素、氰钴铵、乳铁蛋 白、寡肽-1、寡肽-5、甘露糖醇、硫酸软骨素钠、氢 化卵磷脂、去离子水。所述溶媒液包括牛磺酸、甜茶碱、甘草酸二钾、聚山梨醇酯-80、氯化钠、溶菌酶、去离子水。
6.上述眼用冲洗液尽管含有多种有益组分，但是均需要配套液体部分使用，同样存在存储稳定差、携带不便的问题；而且同样存在有效组分难以有效在眼部停留吸附的问题、另外，尽管通过化学交联可以增加黏附性，但是交联过程不可避免地存在交联剂等化学试剂残留，这明显是不期望的。
7.具体地，现有技术的洗眼液存在如下主要缺陷：1）相比较滴眼液，洗眼液由于浓度较低等原因，内含有益组分含量低且具有较差的生物黏附性，无法长时间与眼部接触，降低了接触部位的吸收和利用。加上泪液分泌，导致洗眼液利用率极低（吸收量远低于组分含量）。而采用交联法得到的接枝衍生物例如环糊精类接枝物虽然能一定程度上提高组分的黏附性，但是通常交联度较低，环糊精等组分含量过高，且交联方法通常复杂，并带有无法完全去除的交联剂等化学物质残留。
8.2）现有的洗眼液黏度低，无法像凝胶滴眼液一样可以在眼表发生相转化成膜，更无法形成缓释载体，无法提高药物利用率。 且现有洗眼液通常为水溶性组分，无法添加有益的脂溶性组分（缺乏合适的眼用包裹及缓释载体）。
9.3）由于现有洗眼液通常为液体形式或含有配套的液体组分（例如等渗组分），导致
了存储稳定性差（通常无法满足在室温下稳定储存至少24个月的要求），且体积较大、携带不便。研究表明，对于洗眼液而言，其对渗透压的要求低于凝胶类滴眼液产品，在合适组分搭配的前提下可以减少甚至避免使用等渗调节组分。
10.4）尽管凝胶类产品具有长时间与眼部发生紧密接触、提高吸收利用率的优点，从而可以克服在眼部存在停留时间短等问题，但是由于凝胶形成需要一定浓度，用于低浓度的洗眼液中无法形成半固体状态。导致现有的洗眼液较少有采用凝胶组分。因此，有必要开发合适的凝胶体系，以稀溶液状态给药后仍可以在用药部位形成非化学交联的膜状（要求具有较高的吸附性能），从而克服传统眼科洗眼液制剂存在的组分停留时间短问题。
11.因此，有必要开发新的眼用冲洗液剂型，以克传统的眼睛冲洗液上述缺陷尤其是存储稳定性差以及有效组分黏附性差的缺陷。


技术实现要素：

12.为了改善传统的洗眼液组分尤其是小分子组分的低黏附性，并克服传统的洗眼液体积较大、携带不便、溶液存储稳定性差的缺陷，本发明提供一种眼用固体制剂及其制备方法， 主要用于缓解和/或改善视疲劳及干眼症。相比较现有的含有液体制剂的冲洗液，本发明的眼用固体制剂可以实现无液化存储，显著提升了存储稳定性和使用便利性；且与其他固体制剂相比，使用时无需采用特定的缓冲液或等渗液进行溶解。
13.具体地，本发明技术方案如下。
14.第一个方面，本发明提供一种眼用固体制剂，其包含复合亲水性聚合物包合的游离氨基酸提取物、维生素a酯、糖胺聚糖、羧甲基壳聚糖和氨基乙磺酸基本组分，以及多聚谷氨酸与黄精多糖组成的凝胶基质组分。
15.其中，所述复合亲水性聚合物由至少包括磺丁基醚-β-环糊精在内的一种或多种亲水性聚合物组成；相比较其他环糊精，磺丁基醚-β-环糊精尤其适合包含氮含量较高的氨基酸分子。
16.优选地，所述复合亲水性聚合物由磺丁基醚-β-环糊精和聚乙烯醇组成。更优选地，按质量比计，磺丁基醚-β-环糊精:聚乙烯醇=10:1-3。
17.本发明中，复合亲水性聚合物优选掺杂的少量聚乙烯醇(pva)，尤其利于氨基酸组分的包合，这是由于富含表面羟基的聚乙烯醇有利于协助磺丁基醚-β-环糊精对氨基酸的包合性，其通过氢键、范德华力等分子间作用力可显著增强与磺丁基醚-β-环糊精与氨基酸之间的亲和性，具有类似桥梁作用的连粘性。上述亲水性聚合物复合物即使在眼部冲洗这种局部使用环境中，也能够有效锁住包合的氨基酸分子，从而增强在眼部的黏附性。
18.本发明中，所述游离氨基酸提取物为从菊花（优选野菊花或杭白菊）、灯盏花、三七（三七根）组成的复合药材组中提取分离得到的以游离氨基酸为主的复合提取物，且其中游离氨基酸含量在80%以上。
19.上述菊花、灯盏花、三七复合提取物不仅主要含有包含田七氨酸在内的多种有益的游离氨基酸营养组分，也含有少量多糖、皂苷等活性组分；均有利于改善视疲劳和营养眼部的作用。研究表明，上述包含田七氨酸等游离氨基酸和多糖的复合提取物对眼部的毛细血管通透性增加、炎性反应有明显的抑制作用，具有降低血小板表面活性、改善微循环等作用，从而缓解充血性视疲劳、干眼症等眼部不适症状。
20.本发明中，所述维生素a酯为酯化的维生素a类化合物，例如视黄酸酯、视黄醇酯；优选视黄醇棕榈酸酯。优选地，采用羟丙基-β-环糊精包合的维生素a酯。
21.由于维生素a物质为脂溶性，难溶于水，采用羟丙基-β-环糊精包合可显著增强其水溶性，减少或避免在冲洗液中乳化剂或表面活性剂的添加使用。
22.可选地，维生素a酯还可以选择水溶性较高的维生素a酯接枝衍生物，例如接枝透明质酸的维生素a酯复合物，例如透明质酸-视黄酸酯。采用水溶性较高的维生素a酯接枝衍生物时，可以减少或不必用环糊精包合。
23.优选地，所述维生素a酯接枝衍生物选自透明质酸-视黄酸酯接枝物，取代度为0.1％-1%。研究表明，透明质酸维生素a酯复合物可有效改善视疲劳尤其是免受由蓝光辐射引起的疲劳损伤。
24.透明质酸接枝衍生物是本领域常见的已知技术，因此其具体制备方法可参考透明质酸接枝衍生物的现有技术（例如wo2016/162809）。
25.示例性地，可以通过如下步骤制备：将透明质酸-tba铵盐与视黄酸按2-3:1重量比溶解于 dmf中，搅拌均匀然后加入交联剂（例如cdi），搅拌反应充分；添加氯化钠饱和溶液来停止反应，用95％体积乙醇进行沉淀，乙醇洗涤沉淀产物后在真空下干燥即得。
26.本发明中，糖胺聚糖优选选自透明质酸钠、硫酸软骨素钠中的一种。可选地，还可以选择其他可以眼部使用的其他糖胺聚糖。
27.第二个方面，本发明还提供一种制备上述眼用固体制剂的方法。 所述眼用固体制剂的制备方法包括如下步骤：s1：从菊花、灯盏花、三七组成的药材组中制备复合游离氨基酸提取物；s2：制备复合亲水性聚合物包合上述氨基酸提取物的胶束溶液，其中，所述复合亲水性聚合物至少包括磺丁基醚-β-环糊精；s3：制备包含维生素a酯、糖胺聚糖组分的拟泪液；s4：基于多聚谷氨酸、黄精多糖制备凝胶基质溶液；s5：制备原位凝胶并冻干处理得到所述眼用固体制剂。
28.具体地，所述眼用固体制剂各具体制备步骤如下。
29.步骤s1：制备复合游离氨基酸提取物，具体步骤如下：1）将经过清洗、烘干粉碎处理的菊花（优选野菊花或杭白菊）、灯盏花、三七根三种粉末按照10:3-8:1-5（优选10:3-5:1-3）的重量比例混合得到复合粉末，过60-100目筛，按照1:10-20的重量比加入去离子水，置于水浴振荡器中在80-90℃下浸泡2-3h，然后微沸煎煮0.5-1h；2）将煎煮液冷却，置于超声提取器中在50-60℃下超声提取15-30min，超声功率设定为100-300w；趁热抽滤并浓缩滤液，活性炭除杂脱色后高速离心，上清液过0.22μm微孔滤膜，得到水溶组分浓缩提取液，备用；3）将获得的水溶组分浓缩液上大孔硅胶树脂柱，吸附0.5-1h后，依次用去离子水、50%体积分数乙醇以5-10ml/min速率洗脱，根据氨基酸紫外信号监测仪收集含氨基酸组分的洗脱液，蒸发浓缩后真空干燥，得到游离氨基酸为主的复合提取物粉末，内含少量有益的多糖组分，其中游离氨基酸含量在80%以上。
30.所得提取物粉末经干热灭菌后备用。复合提取物收率可达5%以上（基于干燥粉末
重计），例如可高达7%甚至8%左右。
31.步骤s2：制备复合亲水性聚合物包合上述氨基酸提取物的胶束溶液，具体如下：1)按重量份计，称取10-15份复合亲水性聚合物（优选由磺丁基醚-β-环糊精、聚乙烯醇组成，质量比10:1-3）加入100份无菌去离子水中，充分搅拌至溶解均匀，得到聚合物溶液；2）另取1-1.5份上述复合游离氨基酸提取物溶于10-20份无菌水中，适当加热搅拌使其完全溶解得到游离氨基酸溶液；3）在100-200w超声条件下，将游离氨基酸溶液滴加入上述聚合物溶液中进行包合；滴加完毕后继续超声5-10min使得两溶液充分混合均匀，并缓慢搅拌10-15min进行充分包合，得到聚合物包合游离氨基酸的复合胶束溶液；示例性地，可标记为a液。
32.步骤s3：制备包含维生素a酯、糖胺聚糖组分的拟泪液：将维生素a酯、糖胺聚糖等组分溶于含有拟泪基液组分的拟泪基液中得到拟泪液（例如，可标记为b液）。
33.其中，拟泪基液组分选自氨基乙磺酸、羧甲基壳聚糖中的一种或其组合。
34.优选地，拟泪基液组分由羧甲基壳聚糖和氨基乙磺酸混合组成，二者质量比优选为1:0.1-0.5。
35.具体地，s3步骤拟泪液的制备步骤如下：1）按重量份计，将0.5-1份维生素a酯适当加热使其恰好溶于乙醇，在50-60℃水浴、快速搅拌条件下滴加入100份10-30wt%羟丙基-β-环糊精溶液中进行包合；滴加完毕后超声5-10min使得溶液充分混匀，然后加热至65-70℃充分搅拌以挥发残留有机溶剂，从而得到聚合物包合的维生素a酯溶液。
36.或者，当维生素a酯为透明质酸-视黄酸酯时，可直接将0.5-1份透明质酸-视黄酸酯溶于100份无菌水中得到维生素a酯混悬液。
37.2）将拟泪基液组分按照0.1-0.5wt%的质量分数比例加入无菌水中混匀，得到拟泪基液。
38.3）将上述维生素a酯溶液与拟泪基液按照1:1-1.5的重量比（优选等质量比）进行混合并搅拌均匀得到混合液，然后基于混合液重量计加入0.1-0.5wt%的糖胺聚糖并在适当加热条件下充分搅拌溶解，得到拟泪液，可记为b液。
39.步骤s4：基于多聚谷氨酸、黄精多糖制备凝胶基质溶液，所述凝胶基质溶液由凝胶基质多聚谷氨酸（pga）与黄精多糖在分散助剂存在下溶于去离子水中溶胀得到。具体制备步骤如下：1）室温下，按重量份计，将0.5-1份多聚谷氨酸（pga）、1-2份黄精多糖（按本领域一般方法制备，优选高纯度级别）加入100份灭菌的去离子水中，加热至60-80℃保温15-30min进行充分溶胀；2）充分溶胀后加入0.05-0.1份聚乙二醇酯（优选聚乙二醇甘油酯、 聚乙二醇-胆固醇琥珀酸酯）进行搅拌溶解均匀，得到凝胶基质溶液。
40.步骤s5：制备原位凝胶并冻干处理得到所述眼用固体制剂，具体制备步骤如下：1）在水浴加热至50-60℃的均质乳化釜内，按照1:1-5的质量比（优选1:1-3）将上述制备的聚合物包合游离氨基酸的复合胶束溶液滴加入拟泪液中，均质处理至混合均匀，得到溶液c；
2）在搅拌条件下，按照1:2-5的质量比将上述溶液c缓慢加入到40-50℃预热处理的凝胶基质溶液中，搅拌至基本均匀，然后依次进行超声处理3-5min、涡旋处理30-60s，充分混合均匀，得到凝胶溶液；3）将所得凝胶溶液定量灌装或分装至分隔盘或开口瓶等无菌分装容器内，待自然降至室温后置于0-4℃或冰浴条件下静置6-12h得到原位凝胶；将分装容器放入真空冷冻干燥机内进行冷冻干燥，得到冻干的眼用固体制剂。进一步地，所得固体制剂依次经干热灭菌、辐照灭菌后，封装保存。
41.示例性地，控制每瓶固体制剂在0.1-1g。
42.第三个方面，本发明还包括基于上述眼用固体制剂制备眼用冲洗液的方法，步骤如下：在室温或不超过40℃下，将眼用固体制剂按1:100-1000的重量比溶于无菌水（优选蒸馏水）中，混合至均匀，即得到眼用冲洗液。优选地，眼用固体制剂与无菌水的比例为1:100-800。
43.即，眼用冲洗液中固体组分含量为1-10g/l。
44.示例性地，以配制1l眼用冲洗液为例，具体步骤如下：取上述灭菌后的眼用固体制剂1-10g（优选1-5g），在1l无菌水或蒸馏水的容量瓶中摇匀溶解；即得眼用冲洗液。配制过程简单快捷。
45.第四个方面，本发明还提供所述眼用固体制剂制备的冲洗液冲洗眼部的方法。可选 地，所述方法可以借助洗眼器进行。
46.本发明的眼用固体制剂或其冲洗液用于缓解干眼症、轻度炎症及眼睛干涩、酸胀、痛痒等眼疲劳症状，还可用于营养补充剂。
47.与现有技术相比，本发明的有益效果在于： 1)与现有技术的溶液型眼睛冲洗液或含有溶液分装组分的复合冲洗液相比，本发明的眼用固体制剂可以实现无液化存储，显著提升了存储稳定性和使用便利性；且与其他固体制剂相比，使用时无需采用特定的缓冲液或等渗液进行溶解。
[0048] 2）本发明中复合亲水性聚合物优选掺杂少量聚乙烯醇(pva)的磺丁基醚-β-环糊精，有利于氨基酸组分的包合，这是由于聚乙烯醇通过氢键、范德华力等分子间作用力可显著增强磺丁基醚-β-环糊精与氨基酸之间的包合性，从而增强在眼部的黏附性。而其他聚合物则具有较差的包合性。
[0049]
作为亲水性聚合物，磺丁基醚-β-环糊精和聚乙烯醇有助于氨基酸等小分子透过眼部屏障，由于聚合物优秀的黏附性，使得聚合物-氨基酸载体系统具有长时间持续有效递送营养组分的效果，从而显著降低应激反应。
[0050]
另外，本发明采用羟丙基-β-环糊精包裹及缓释难溶于水的维生素a酯，配合高分子凝胶的二次包裹，可以有效地使脂溶性组分用作眼用制剂组分。 并具有良好眼表耐受性和组织相容性。
[0051]
3）本发明中所述游离氨基酸提取物为从菊花、灯盏花、三七组成的复合药材组中提取分离得到的以游离氨基酸为主的复合提取物，且其中游离氨基酸含量在80%以上，针对眼部所需药理活性进行设计。主要含有多种有益的游离氨基酸营养组分，也含有少量多糖、皂苷等活性组分；上述组分均有利于改善视疲劳和营养眼部的作用。上述包含田七氨酸等
游离氨基酸和多糖的复合提取物具有营养眼部、改善微循环等作用，从而缓解充血性视疲劳、干眼症等眼部不适症状。
[0052]
4）本发明利用生物相容性良好的聚氨基酸类聚合物及多糖聚合物作为凝胶载体，本身具有适用于眼部的理化特性，同时具有与水溶性聚合物联合协同改善眼部粘附性的作用。溶于水后不仅能够长期保持溶液澄清透明（室温静置4周无明显沉淀），而且对眼部基本不具有刺激性等优点，适合于长期的眼睛应用。
[0053]
另外，采用复合的天然组分作为凝胶骨架以及粘附承载体，相比较采用交联修饰的环糊精衍生物作为粘附性聚合物载体（例如采用硫酸软骨素等交联修饰），避免了交联过程中的少量强酸强碱、化学交联剂等化学物质残留带来的眼部刺激性和不适性，具有更好的生物安全性。
[0054]
本发明采用凝胶组分除了具有较好的生物黏附性、增强接触部位的吸收，还可以在眼表及眼角成膜，形成缓释载体，显著降低了现有技术中添加的众多有益组分容易被泪液冲走的弊端。
[0055] 5）现有技术中溶液型洗眼液为了提高制剂稳定性，通常需要采用等渗缓冲体系，或调整ph值以提高制剂的稳定性。溶液型洗眼液除了渗透压保护剂、营养剂外，还需要添加增稠保湿剂等多种组分，这使得还需要添加抑菌剂等额外的组分。而本发明固体制剂中则不含有渗透压保护剂、增稠剂、保湿剂、抑菌剂、ph调节剂等多种不必要组分，大大降低了眼部刺激性，同时显著增强了存储稳定性和携带方便性。且同样具有针对视疲劳及干眼病的眼部症状例如炎症、高渗压、眼表损伤等具有缓解效果。
具体实施方式
[0056]
下面通过具体的实施例对本发明进行详细说明，但这些例举性实施方式的用途和目的仅用来例举本发明，并非对本发明的实际保护范围构成任何形式的任何限定，更非将本发明的保护范围局限于此。
[0057]
制备例制备复合游离氨基酸提取物1）将经过清洗、烘干粉碎处理的杭白菊、灯盏花、三七根三种粉末过80目筛，按照10:5:2的重量比例混合得到干燥的复合粉末约350g，加入5l去离子水，置于水浴振荡器中在80-90℃下浸泡3h，然后微沸煎煮1h；2）将煎煮液冷却，置于超声提取器中在60℃下超声提取30min（分三次进行，每次间隔5min），超声功率设定为200w；趁热抽滤并浓缩滤液，活性炭除杂脱色后高速离心，上清液过0.22μm微孔滤膜，得到水溶组分浓缩提取液约200ml；3）将获得的上述浓缩液分批上大孔硅胶树脂柱，吸附0.5h后，依次用去离子水、50%体积分数乙醇以5-6ml/min速率洗脱，根据氨基酸紫外信号监测仪收集含氨基酸组分的洗脱液；将所有的洗脱液合并后蒸发浓缩，然后真空干燥，粉碎，得到游离氨基酸为主的复合提取物粉末约21.6g，根据茚三酮法得总游离氨基酸含量约88%。
[0058]
所得提取物粉末经干热灭菌后备用。
[0059]
实施例1制备眼用固体制剂1
s1：制备复合亲水性聚合物包合上述氨基酸提取物的胶束溶液，具体如下：1)按重量份计，称取12g复合亲水性聚合物（由磺丁基醚-β-环糊精、聚乙烯醇组成，质量比10:1）加入100ml无菌去离子水中，充分搅拌至溶解均匀，得到聚合物溶液；2）另取1g上述复合游离氨基酸提取物溶于20ml蒸馏水中，适当加热搅拌使其完全溶解得到游离氨基酸溶液；3）在100w超声条件下，将游离氨基酸溶液缓慢滴加入上述聚合物溶液中进行包合；滴加完毕后超声5min使得两溶液充分混合均匀，并缓慢搅拌10min进行充分包合，得到聚合物包合游离氨基酸的复合胶束溶液；记为a液。
[0060]
s2：制备包含维生素a酯、糖胺聚糖组分的拟泪液：1）将0.5g视黄醇棕榈酸酯溶于4ml乙醇中，适当加热使其恰好溶解，在50℃水浴、快速搅拌条件下滴加入100g羟丙基-β-环糊精溶液（12wt%）中进行包合；滴加完毕后超声10min使得溶液充分混匀，然后加热至65-70℃充分搅拌以挥发残留有机溶剂，从而得到聚合物包合的维生素a酯溶液。
[0061]
2）将羧甲基壳聚糖和氨基乙磺酸（1:0.3重量比）组成的拟泪基液组分0.5g，加入无菌水中混匀得到拟泪基液约100g。
[0062]
3）将上述维生素a酯溶液与拟泪基液按照1:1的重量比进行混合并搅拌均匀得到混合液约200g，然后加入1g的透明质酸钠并在适当加热条件下充分搅拌溶解，得到拟泪液，记为b液。
[0063]
s3：制备凝胶基质溶液1）室温下，按重量份计，将8g药用级高纯度多聚谷氨酸（pga）、12g黄精多糖加入1l灭菌的去离子水中，加热至70℃保温30min进行充分溶胀；2）充分溶胀后加入0.5g聚乙二醇甘油酯进行搅拌溶解均匀，得到凝胶基质溶液。
[0064]
s4：制备原位凝胶并冻干处理得到所述眼用固体制剂：1）在水浴加热至55℃的均质乳化釜内，将上述制备的50g a液加入100g b液中，均质处理至混合均匀，得到溶液c；2）在搅拌条件下，将上述溶液c缓慢加入到50℃预热处理的410g凝胶基质溶液中，搅拌至基本均匀，然后进行超声处理5min、涡旋处理60s，充分混合均匀，得到凝胶溶液；3）将所得凝胶溶液用无菌注射器定量分装至带分隔空间格的无菌硅胶分装盘容器内，待自然降至室温后置于4℃条件下静置8h得到原位凝胶；将分装容器预冷冻处理后，于真空冷冻干燥机内进行冷冻干燥，得到冻干的眼用固体制剂，依次取出分装的固体制剂，经干热灭菌、辐照灭菌后，玻璃瓶中封装保存。
[0065]
示例性地，控制每瓶固体制剂在0.5g。
[0066]
实施例2制备眼用固体制剂2s1：制备a液，具体如下：1)按重量份计，称取15g复合亲水性聚合物（由磺丁基醚-β-环糊精、聚乙烯醇组成，质量比5:1）加入100ml无菌去离子水中，充分搅拌至溶解均匀，得到聚合物溶液；2）另取1.5g上述制备例得到的复合游离氨基酸提取物溶于20ml蒸馏水中，适当加热搅拌使其完全溶解得到游离氨基酸溶液；
3）在100w超声条件下，将游离氨基酸溶液缓慢滴加入上述聚合物溶液中进行包合；滴加完毕后超声5min使得两溶液充分混合均匀，并缓慢搅拌10min进行充分包合，得到聚合物包合游离氨基酸的复合胶束溶液；记为a液。
[0067]
s2：制备b液：1）将0.5g透明质酸-视黄酸酯加入100g蒸馏水内充分混匀，得到的维生素a酯溶液。
[0068]
2）将羧甲基壳聚糖和氨基乙磺酸（1:0.2重量比）组成的拟泪基液组分0.4g，加入无菌水中混匀得到拟泪基液100g。
[0069]
3）将上述维生素a酯溶液与拟泪基液进行混合并搅拌均匀得到混合液，然后加入1g的硫酸软骨素钠并在45℃加热条件下充分搅拌溶解，得到b液。
[0070]
s3：制备凝胶基质溶液1）室温下，按重量份计，将10g药用级高纯度多聚谷氨酸（pga）、18g黄精多糖加入1l灭菌的去离子水中，加热至70℃保温30min进行充分溶胀；2）充分溶胀后加入0.8g聚乙二醇-胆固醇琥珀酸酯进行搅拌溶解均匀，得到凝胶基质溶液。
[0071]
s4：制备原位凝胶并冻干处理得到所述眼用固体制剂：1）在水浴加热至60℃的均质乳化釜内，取上述制备的100g a液加入120g b液中，均质处理至混合均匀，得到溶液c；2）在搅拌条件下，将上述溶液c缓慢加入到50℃预热处理的550g凝胶基质溶液中，搅拌至均匀，然后进行超声处理5min、涡旋处理45s，得到凝胶溶液；3）将所得凝胶溶液用无菌注射器定量分装至一系列无菌玻璃瓶内，待自然降至室温后置于冰浴条件下静置6h得到原位凝胶；将分装容器预冷冻处理后，于真空冷冻干燥机内进行冷冻干燥，得到冻干的眼用固体制剂，取出分装的固体制剂，经干热灭菌、辐照灭菌后，直接加无菌盖进行封装保存。
[0072]
实施例3制备眼用冲洗液室温下，取上述2.5g眼用固体制剂1，加入500ml蒸馏水瓶中摇匀溶解，静置后即得均匀澄清的眼用冲洗液。
[0073]
实施例4制备眼用冲洗液室温下，取上述8g眼用固体制剂2，加入1l蒸馏水中震荡摇匀，静置后即得均匀澄清的眼用冲洗液。
[0074]
对比实施例将实施例1中的复合亲水性聚合物用等重量β-环糊精替代，并将聚谷氨酸用等重量海藻酸钠代替，其余组分和步骤按照实施例1的方法进行，从而实施得到作为对比例的眼用固体制剂及眼用冲洗液(冲洗液按照实施例3方法制得)。
[0075]
效果例1刺激性及药效试验按照cn 111202746 a中的方法进行兔眼的刺激性实验，即刺激方法采用30min间
隔多次给药法，生理 盐水作为空白对照；最后一次给药后每隔6h观察兔眼角膜、结膜、 虹膜及分泌物情况，观察24h。 结果表明，对兔眼应用实施例3-4中的冲洗液进行眼部冲洗之 后，角膜无浑浊，虹膜、结膜血管正常，眼部无水肿、无分泌物等异常，证明本发明的洗眼液无刺激性。
[0076]
同样按照cn 111202746 a中的方法干眼药效学试验（酚红棉检测法），即：将模型小鼠随机分为4组进行室温饲养：正常 组(正常小鼠，饲养于正常湿度环境)、空白组(即不经任何处理的干眼小鼠组，饲养于rh20％的低湿环境)、对照组(即采用对比实施例溶液治疗处理的干眼小鼠，饲养于rh20％的低湿环境)和试验组(采用实施例3溶液样品治疗处理的 干眼小鼠，饲养于rh20％的低湿环境)。每组4只小鼠，试验周期 一周，其中对照组和试验组每天进行4ml/眼的眼球冲洗，每天四次 (即洗眼间隔六小时)，持续处理一周。 于试验开始和结束后，采用本领域常用的酚红棉检测法对上述各组小鼠进行泪液分泌量测定，观察试验结束后的泪液分泌量增加程度（相对于试验开始时的改善度，即增加量/初始量的比值）。
[0077]
其中，干眼造模后小鼠泪液分泌量显著下降代表模型小鼠造模成功。
[0078]
结果显示，眼部冲洗给药一周后，相对于空白组（泪液分泌参数1.6mm，酚红棉检测法）几乎没有变化的情形，对照组和实验组的小鼠泪液分泌程度均显著提升。其中对照组小鼠泪液分泌程度提升65-68%，而实验组提升度达到110%以上甚至达到120%左右，已经接近正常组数值（平均3.8mm）。而且试验组数据具有显著性差异，证明采用本发明实施例样品的组分搭配，以及聚合物负载-凝胶吸附组合可以显著提高有效组分的黏附性进而提高吸收利用度。 为了进一步验证本发明产品的黏附性能，进行如下实验。
[0079]
效果例2氨基酸组分吸附性试验将1g制备例所得游离氨基酸按照实施例1方法制成固体样品，并将固体样品溶于蒸馏水配制成120ml溶液并置于10kda透析袋中(可容许游离氨基酸透过)，透析袋置于37℃恒温的1l蒸馏水中透析3h（透析过程中每隔一小时于摇床上轻微摇晃5-10min）；作为对照组的对比实施例样品按照同样方法透析处理。另取制备例中的1g游离氨基酸溶于1l蒸馏水中作为空白对照组（校对检测误差）。透析6h后根据茚三酮法检测透析袋外的水中总游离氨基酸浓度，记录从透析袋中逸出的游离氨基酸量。实验组和对照组每组3个重复，取平均值。
[0080]
结果表明，实施例1样品透析袋逸出的总游离氨基酸浓度约0.16g/l，远低于对比例的0.67g/l；证明了本发明眼科制剂中特定聚合物对游离氨基酸的包合处理，以及特定凝胶系统组分的二次吸附（pga具有优异的吸附能力），可以显著提高氨基酸组分的黏附性（不易流失）；同时，也显著提高了对糖胺聚糖、黄精多糖等其他大分子组分的吸附性。
[0081]
应当理解，这些实施例的用途仅用于说明本发明而非意欲限制本 发明的保护范围。本领域技术人员可以对本发明作各种改动、修改和 /或变型，所有的这些等价形式同样落于本技术所附权利要求书所限 定的保护范围之内。