一种鳄鱼油的精制方法与流程

1.本发明属于化妆品原料制备技术领域，具体涉及一种鳄鱼油的精制方法。


背景技术：

2.鳄鱼油是从鳄鱼体内提取出来的油，成分主要有不饱和脂肪酸、微量元素等营养物质。鳄鱼油是一种重要的化妆品原料。其理化特性与人体脂肪特别相近，因而具有良好的渗透性，极易被人体接纳与吸收；鳄鱼油被皮肤吸收后能够很快刺激人体细胞分泌出细胞重组因子，分解衰老残损细胞，促进新陈代谢，增强细胞活力，迅速增值，使伤口缺损逐渐愈合平复。同时，鳄鱼油还具有显著的药用价值，具有促进血液循环、舒筋活络、消除疲劳的疗效，对筋骨痉痛、组织挫伤、青紫瘀肿、冻疮、头痛、胃脘痛、蚊虫叮咬、皮肤风疹等具有显著的治疗效果。因此，鳄鱼油已广泛应用于化妆品、药品以及保健产品中。
3.鳄鱼体内粗脂肪含量为3.5％-7.0％，鳄鱼油含不饱和脂肪酸高达71.5％，其中主要为亚油酸和花生四烯酸。鳄鱼油脂肪酸组成有深海鱼油的特点，二十碳五烯酸(eicosopentaenoic acid，epa)和二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid，dha)含量较高。鳄鱼油的精制过程是鳄鱼油加工中重要的环节。传统方法中，鳄鱼油的精制大多采用有机溶剂，以及乙醇或者酸碱反复洗涤，该过程不仅会使鳄鱼油中残留有机溶剂，为鳄鱼油在化妆品和医药领域的应用带来较多风险；而且反复的乙醇、酸碱洗涤会导致鳄鱼油中核心成分流失，如epa、dha，使最终成品收率低(79％左右)，鳄鱼油中epa、dha的含量仅能达到0.1％-0.2％左右。
4.因此，亟需提供一种鳄鱼油的精制方法，能够减少有机溶剂或酸碱的使用，且鳄鱼油收率高，鳄鱼油中epa、dha的含量高。


技术实现要素：

5.本发明旨在至少解决上述现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提出一种鳄鱼油的精制方法，能够减少有机溶剂或酸碱的使用，且鳄鱼油收率高，鳄鱼油中epa、dha的含量高。
6.本发明提供了一种鳄鱼油的精制方法。
7.具体地，一种鳄鱼油的精制方法，包括以下步骤：
8.(1)向鳄鱼脂肪中加入姜，破碎得到鳄鱼脂肪糜；
9.(2)向所述鳄鱼脂肪糜中加入中性蛋白酶进行酶解，过滤收集滤液，得到鳄鱼油粗提取液；
10.(3)向所述鳄鱼油粗提取液中依次加入抗氧化剂和磷酸溶液，得到脱胶处理的鳄鱼油；
11.(4)向所述脱胶处理的鳄鱼油中加入氯化钠溶液进行第一次盐水清洗，然后加入碱液脱酸，再加入氯化钠溶液进行第二次盐水清洗，得到第二次盐水清洗的鳄鱼油；
12.(5)向所述第二次盐水清洗的鳄鱼油中加乙醇溶液，进行萃取，然后于真空条件下
除臭，制得精制的鳄鱼油。
13.优选地，在步骤(1)之前还包括对所述鳄鱼脂肪进行清洗与焯水的过程。
14.具体地，所述清洗与焯水的过程为：向鳄鱼脂肪中加入去离子水清洗，然后过滤去除水，再加入去离子水和姜，加热到75-85℃保持，去除表面浮沫，最后过滤去除水。
15.优选地，在步骤(1)中，所述姜的添加量为所述鳄鱼脂肪的质量的0.5％-8％；进一步优选地，在步骤(1)中，所述姜的添加量为所述鳄鱼脂肪的质量的1％-5％。
16.优选地，在步骤(2)中，所述中性蛋白酶的添加量为所述鳄鱼脂肪的质量的0.1％-3％；进一步优选地，在步骤(2)中，所述中性蛋白酶的添加量为所述鳄鱼脂肪的质量的0.5％-2％。采用中性蛋白酶对所述鳄鱼脂肪糜进行处理，分解脂肪后提取油脂的效率更高，相比于其他酶，或酸性和碱性蛋白酶，酶解后损失更小，有利于提高鳄鱼油收率高。
17.优选地，在步骤(2)中，所述中性蛋白酶的酶活力为3-8万u/g；进一步优选地，在步骤(2)中，所述中性蛋白酶的酶活力为4-6万u/g。
18.优选地，在步骤(2)中，所述酶解的温度为45-55℃，所述酶解的时间为5-10小时；进一步优选地，在步骤(2)中，所述酶解的温度为48-52℃，所述酶解的时间为5-10小时。
19.在步骤(3)中，选择在酶解后、脱胶前加入抗氧化剂，有利于控制鳄鱼油中单脂肪酸的酸败、发臭，有利于提高鳄鱼油的收率以及epa和dha的含量。
20.优选地，在步骤(3)中，所述抗氧化剂为2,6-二叔丁基对甲酚和/或生育酚乙酸酯。
21.进一步优选地，所述抗氧化剂为2,6-二叔丁基对甲酚和生育酚乙酸酯。通过控制2,6-二叔丁基对甲酚与生育酚乙酸酯的比例，可以最大的除去腥味和杂质，提高最终鳄鱼油的品质和产率。
22.优选地，所述2,6-二叔丁基对甲酚的添加量为所述鳄鱼脂肪的质量的0.3％-1.5％；进一步优选地，所述2,6-二叔丁基对甲酚的添加量为所述鳄鱼脂肪的质量的0.5％-1.0％。
23.优选地，所述2,6-二叔丁基对甲酚与所述生育酚乙酸酯的质量比为(5-15):1；进一步优选地，所述2,6-二叔丁基对甲酚与所述生育酚乙酸酯的质量比为(8-12):1。
24.优选地，在步骤(3)中，所述磷酸溶液的质量浓度为30％-48％；进一步优选地，在步骤(3)中，所述磷酸溶液的质量浓度为40％-45％。
25.优选地，在步骤(3)中，所述磷酸溶液的添加量为所述鳄鱼脂肪的质量的0.1％-1％；进一步优选地，在步骤(3)中，所述磷酸溶液的添加量为所述鳄鱼脂肪的质量的0.3％-0.8％。
26.优选地，在步骤(4)中，所述氯化钠溶液的质量浓度为5％-15％；进一步优选地，所述氯化钠溶液的质量浓度为8％-12％。采用氯化钠溶液进行清洗，能够除去潜在的微生物，避免染菌；同时可以减少氢氧化钠和其他有机溶剂的使用。
27.优选地，在步骤(4)中，所述氯化钠溶液的添加量为所述鳄鱼脂肪的质量的10％-20％；进一步优选地，所述氯化钠溶液的添加量为所述鳄鱼脂肪的质量的12％-16％。
28.优选地，在步骤(4)中，所述第一次盐水清洗和所述第二次盐水清洗的过程各进行2-4次。
29.优选地，在步骤(4)中，所述碱液为氢氧化钠溶液或氢氧化钾溶液。
30.优选地，所述氢氧化钠溶液的质量浓度为5％-15％；进一步优选地，所述氢氧化钠
溶液的质量浓度为8％-12％。
31.优选地，所述氢氧化钾溶液的质量浓度为5％-15％；进一步优选地，所述氢氧化钾溶液的质量浓度为8％-12％。
32.优选地，在步骤(4)中，所述碱液为氢氧化钠溶液或氢氧化钾溶液的添加量为所述鳄鱼脂肪的质量的0.5％-2％；进一步优选地，在步骤(4)中，所述碱液为氢氧化钠溶液或氢氧化钾溶液的添加量为所述鳄鱼脂肪的质量的0.5％-1.2％。
33.优选地，在步骤(5)中，在加入乙醇溶液进行萃取前，先加入脱色剂进行脱色处理。
34.优选地，所述脱色剂为白土。
35.优选地，所述白土的添加量为所述鳄鱼脂肪的1％-10％；进一步优选地，所述白土的添加量为所述鳄鱼脂肪的3％-8％；更优选地，所述白土的添加量为所述鳄鱼脂肪的4％-6％。
36.优选地，在步骤(5)中，所述乙醇溶液的质量浓度为95％-99.9％；进一步优选地，所述乙醇溶液的质量浓度为98％-99.9％；更优选地，所述乙醇溶液的质量浓度为99％-99.9％。
37.优选地，在步骤(5)中，所述乙醇溶液的添加量为所述鳄鱼脂肪的质量的10％-20％；进一步优选地，所述乙醇溶液的添加量为所述鳄鱼脂肪的质量的12％-18％；更优选地，所述乙醇溶液的添加量为所述鳄鱼脂肪的质量的15％。
38.优选地，在步骤(5)中，所述真空条件的真空度为-15至-5kpa；进一步优选地，所述真空条件真空度为-12至-8kpa。
39.优选地，在步骤(5)中，所述除臭的温度为45-55℃，除臭的时间为8-15小时。
40.更为具体地，一种鳄鱼油的精制方法，包括以下步骤：
41.(1)鳄鱼脂肪清洗与焯水
42.将鳄鱼脂肪解冻，加入去离子水清洗，过滤去除水，再加入去离子水和姜，加热到75-85℃，保持。去除表面浮沫，然后过滤去除水；
43.(2)鳄鱼脂肪破碎
44.将经过清洗和焯水的鳄鱼脂肪与干姜一同加入到绞肉机中绞碎，得到鳄鱼脂肪糜；
45.(3)鳄鱼油粗提取
46.将所述鳄鱼脂肪糜倒入反应罐中，在搅拌条件下加入中性蛋白酶，混合均匀，于45-55℃下酶解5-10小时。然后将反应液过滤，收集滤液制得鳄鱼油粗提取液；
47.(4)脱胶
48.向所述鳄鱼油粗提取液中加入抗氧化剂，然后加入质量浓度为30％-48％的磷酸溶液，混合，静置后去除磷酸溶液得到经脱胶处理的鳄鱼油；
49.(5)第一次盐水清洗
50.将脱胶处理的鳄鱼油保持55-65℃，加入质量浓度为5％-15％的氯化钠溶液，混合，静置后去除氯化钠溶液，得到第一次盐水清洗的鳄鱼油；
51.(6)脱酸
52.将经过第一次盐水清洗的鳄鱼油保持55-65℃，加入质量浓度为5％-15％的氢氧化钠溶液，混合，静置后去除氢氧化钠溶液，得到经过脱酸处理的鳄鱼油；
53.(7)第二次盐水清洗
54.将脱酸处理的鳄鱼油保持55-65℃，加入质量浓度为5％-15％的氯化钠溶液，混合，静置后去除氯化钠溶液，得到第二次盐水清洗的鳄鱼油；
55.(8)脱色
56.将经第二次盐水清洗的鳄鱼油加热至55-65℃，加入的白土，搅拌混合，然后过滤收集滤液，重复2-4次，得到脱色的鳄鱼油；
57.(9)乙醇萃取
58.向脱色的鳄鱼油中加入质量浓度为95％-99.9％的乙醇，混合，静置后去除乙醇溶液，得到经乙醇萃取的鳄鱼油；
59.(10)除臭
60.将经乙醇萃取的鳄鱼油加热至45-55℃，于搅拌条件下，在真空度为-15至-5kpa下保持8-15小时，制得精制的鳄鱼油。
61.相对于现有技术，本发明的有益效果如下：
62.本发明提供的鳄鱼油的精制方法，通过向鳄鱼脂肪中加入姜，经破碎、中性蛋白酶酶解制得鳄鱼油粗提取液；然后加入抗氧化剂后，加入磷酸溶液进行脱胶处理；再依次进行第一次盐水清洗、碱液脱酸、第二次盐水清洗；最后经过乙醇溶液萃取、真空除臭，制得精制的鳄鱼油。通过对精制过程的优化，步骤先后顺序的控制，能够减少有机溶剂或酸碱的使用，提高鳄鱼油的收率，其收率达到85％以上，提取效率更高；且精制的鳄鱼油中epa、dha的含量高，epa的含量达到0.5％，dha的含量达到1.0％。
具体实施方式
63.为了让本领域技术人员更加清楚明白本发明所述技术方案，现列举以下实施例进行说明。需要指出的是，以下实施例对本发明要求的保护范围不构成限制作用。
64.以下实施例中所用的原料、试剂或装置如无特殊说明，均可从常规商业途径得到，或者可以通过现有已知方法得到。
65.实施例1
66.一种鳄鱼油的精制方法，包括以下步骤：
67.(1)鳄鱼脂肪清洗与焯水
68.将200kg鳄鱼脂肪解冻后倒入500l容器中，加入室温200kg的去离子水，搅拌10分钟后，用滤网将水滤去。待水排干净后，再倒入200kg去离子水，加入6kg干姜，搅拌加热到80℃后，继续搅拌5分钟。再捞出表面浮沫，用滤网将水滤去，备用。
69.(2)鳄鱼脂肪破碎
70.准备干净的绞肉机，将经过清洗和焯水的鳄鱼脂肪与干姜一同加入到绞肉机中绞碎，得到鳄鱼脂肪糜，备用。
71.(3)鳄鱼油粗提取
72.将鳄鱼脂肪糜倒入反应罐中，开启搅拌(搅拌速度为120rpm)，搅拌条件下缓慢倒入2kg中性蛋白酶(酶活力值为5万u/g)，使蛋白酶和脂肪糜混合均匀，温度设定为50℃，酶解8小时。
73.(4)压滤机压滤收集滤液
74.反应结束后，将酶解后反应罐中的油从底部放出，收集反应液；然后将反应液加入到压滤机中过滤，收集滤液；重复过滤过程2次得滤液，即制得鳄鱼油粗提取液。
75.(5)添加抗氧化剂
76.将鳄鱼油粗提取液加入到反应罐中，加入1.5kg的1010(bht，2,6-二叔丁基对甲酚)和0.15kg的生育酚乙酸酯。将温度设置为60℃，开启搅拌(搅拌的转速为120rpm)，搅拌10分钟。
77.(6)脱胶
78.将添加抗氧化剂的鳄鱼油粗提取液进行脱胶处理，具体为：在保持温度60℃下，取1kg的磷酸溶液(85％)缓慢加入到1kg去离子水中，加入过程注意放热，同时注意磷酸溶液危险性，搅拌混合均匀。然后在搅拌条件下缓慢倒入鳄鱼油中，继续搅拌(搅拌转速为120rpm)5分钟后，静置10分钟。在反应罐底部放出无色的磷酸水溶液，得到经脱胶处理的鳄鱼油。
79.(7)第一次盐水清洗
80.盐水配制：取100kg的去离子水，加入10kg的氯化钠，搅拌至完全溶解。
81.盐水萃取3次：将脱胶处理的鳄鱼油保持60℃，倒入30kg的盐水，搅拌(搅拌的速度为120rpm)20分钟后，静置10分钟，在反应罐底部放出无色的水，待见到黄色鳄鱼油流出则关闭阀门，重复2次得到第一次盐水清洗的鳄鱼油。
82.(8)脱酸
83.配制10％氢氧化钠水溶液配制：取1kg的去离子水，加入0.1kg的氢氧化钠，搅拌至完全溶解。将经过第一次盐水清洗的鳄鱼油保持60℃，缓慢倒入1kg的10％氢氧化钠水溶液，搅拌(搅拌的转速为120rpm)20分钟后，静置10分钟，在反应罐底部放出无色的水，待见到黄色鳄鱼油流出则关闭阀门，得到经过脱酸处理的鳄鱼油。
84.(9)第二次盐水清洗
85.盐水配制：取100kg的去离子水，加入10kg的氯化钠，搅拌至完全溶解。
86.盐水萃取3次：将经过脱酸处理的鳄鱼油保持60℃，倒入30kg的盐水，搅拌(搅拌的速度为120rpm)20分钟后，静置10分钟，在反应罐底部放出无色的水，待见到黄色鳄鱼油流出则关闭阀门，重复2次得到经第二次盐水清洗的鳄鱼油。
87.(10)鳄鱼油脱色
88.将经第二次盐水清洗的鳄鱼油加热，保持温度为60℃，在搅拌(120rpm)的状态下缓慢倒入10kg的白土，搅拌(120rpm)20分钟。然后加入到压滤机中过滤，收集滤液，重复过滤过程两次后得到脱色的鳄鱼油。
89.(11)乙醇萃取
90.向脱色的鳄鱼油中加入30kg(99.5％)乙醇，于室温下搅拌(120rpm)5分钟，然后静置5分钟，在反应罐底部放出鳄鱼油，再重复上述乙醇萃取过程2次得到经乙醇萃取的鳄鱼油。
91.(12)除臭
92.将经乙醇萃取的鳄鱼油置于反应罐中，设定温度为50℃，密封，开启搅拌(转速120rpm)，开启真空(-10kpa)，保持12小时，制得精制的鳄鱼油。计算精制的鳄鱼油的收率为91.5％。
93.(13)灌装
94.将精制的鳄鱼油装桶，加入氮气保护，密封，保存。
95.实施例2
96.一种鳄鱼油的精制方法，包括以下步骤：
97.(1)鳄鱼脂肪清洗与焯水
98.将200kg鳄鱼脂肪解冻后倒入500l容器中，加入室温200kg的去离子水，搅拌10分钟后，用滤网将水滤去。待水排干净后，再倒入200kg去离子水，加入5kg干姜，搅拌加热到82℃后，继续搅拌5分钟。再捞出表面浮沫，用滤网将水滤去，备用。
99.(2)鳄鱼脂肪破碎
100.准备干净的绞肉机，将经过清洗和焯水的鳄鱼脂肪与干姜一同加入到绞肉机中绞碎，得到鳄鱼脂肪糜，备用。
101.(3)鳄鱼油粗提取
102.将鳄鱼脂肪糜倒入反应罐中，开启搅拌(搅拌速度为120rpm)，搅拌条件下缓慢倒入2kg中性蛋白酶(酶活力值为5万u/g)，使蛋白酶和脂肪糜混合均匀，温度设定为50℃，酶解8小时。(4)压滤机压滤收集滤液
103.酶解结束后，将酶解后反应罐中的油从底部放出，收集反应液；然后将反应液加入到压滤机中过滤，收集滤液；重复过滤过程2次得滤液，即制得鳄鱼油粗提取液。
104.(5)添加抗氧化剂
105.将鳄鱼油粗提取液加入到反应罐中，加入1.5kg的1010(bht，2,6-二叔丁基对甲酚)和0.10kg的生育酚乙酸酯。将温度设置为60℃，开启搅拌(搅拌的转速为120rpm)，搅拌10分钟。
106.(6)脱胶
107.将添加抗氧化剂的鳄鱼油粗提取液进行脱胶处理，具体为：在保持温度60℃下，取1kg的磷酸溶液(82％)缓慢加入到1kg去离子水中，加入过程注意放热，同时注意磷酸溶液危险性，搅拌混合均匀。然后在搅拌条件下缓慢倒入鳄鱼油中，继续搅拌(搅拌转速为120rpm)5分钟后，静置10分钟。在反应罐底部放出无色的磷酸水溶液，得到经脱胶处理的鳄鱼油。
108.(7)第一次盐水清洗
109.盐水配制：取100kg的去离子水，加入10kg的氯化钠，搅拌至完全溶解。
110.盐水萃取3次：将脱胶处理的鳄鱼油保持60℃，倒入30kg的盐水，搅拌(搅拌的速度为120rpm)20分钟后，静置10分钟，在反应罐底部放出无色的水，待见到黄色鳄鱼油流出则关闭阀门，重复2次得到第一次盐水清洗的鳄鱼油。
111.(8)脱酸
112.配制10％氢氧化钠水溶液配制：取1kg的去离子水，加入0.1kg的氢氧化钠，搅拌至完全溶解。将经过第一次盐水清洗的鳄鱼油保持60℃，缓慢倒入1kg的10％氢氧化钠水溶液，搅拌(搅拌的转速为120rpm)20分钟后，静置10分钟，在反应罐底部放出无色的水，待见到黄色鳄鱼油流出则关闭阀门，得到经过脱酸处理的鳄鱼油。
113.(9)第二次盐水清洗
114.盐水配制：取100kg的去离子水，加入12kg的氯化钠，搅拌至完全溶解。
115.盐水萃取3次：将经过脱酸处理的鳄鱼油保持60℃，倒入30kg的盐水，搅拌(搅拌的速度为120rpm)20分钟后，静置10分钟，在反应罐底部放出无色的水，待见到黄色鳄鱼油流出则关闭阀门，重复2次得到经第二次盐水清洗的鳄鱼油。
116.(10)鳄鱼油脱色
117.将经第二次盐水清洗的鳄鱼油加热，保持温度为60℃，在搅拌(120rpm)的状态下缓慢倒入10kg的白土，搅拌(120rpm)20分钟。然后加入到压滤机中过滤，收集滤液，重复过滤过程两次后得到脱色的鳄鱼油。
118.(11)乙醇萃取
119.向脱色的鳄鱼油中加入30kg(97.5％)乙醇，于室温下搅拌(120rpm)5分钟，然后静置5分钟，在反应罐底部放出鳄鱼油，再重复上述乙醇萃取过程2次得到经乙醇萃取的鳄鱼油。
120.(12)除臭
121.将经乙醇萃取的鳄鱼油置于反应罐中，设定温度为50℃，密封，开启搅拌(转速120rpm)，开启真空(-12kpa)，保持12小时，制得精制的鳄鱼油。计算精制的鳄鱼油的收率为85.5％。
122.(13)灌装
123.将精制的鳄鱼油装桶，加入氮气保护，密封，保存。
124.对比例1
125.对比例1与实施例1的区别在于，将第一次盐水清洗和第二次盐水清洗的过程改为采用等量去离子水清洗，其余精制方法同实施例1，制得精制的鳄鱼油。计算精制的鳄鱼油的收率为78.0％。
126.对比例2
127.对比例2与实施例1的区别在于，将步骤(11)中乙醇萃取的步骤替换为采用等量的去离子水萃取，其余精制方法同实施例1，制得精制的鳄鱼油。计算精制的鳄鱼油的收率为54.0％。
128.产品效果测试
129.(1)外观与理化性质检测
130.对实施例1、2和对比例1-2精制的鳄鱼油的外观进行观察，并检测ph值、相对密度、折光率、菌落总数、霉菌和酵母菌数，测试结果见表1。
131.表1
[0132][0133]
由表1可知，采用本发明提供的精制方法制备的鳄鱼油，呈透明液体状，颜色为黄色，ph值为5-6左右，折光率在1.400-1.500，菌落总数、霉菌和酵母菌数均符合《化妆品安全技术规范》的要求。而对比文件1出现菌落总数超标，对比文件3的鳄鱼油出现些许浑浊。
[0134]
(2)对实施例1、2和对比例1-2精制的鳄鱼油中epa和dha的含量进行检测，检测方法如下：
[0135]
经检测，实施例1精制的鳄鱼油中epa和dha的含量分别为0.5％和1.0％；实施例2精制的鳄鱼油中epa和dha的含量分别为0.3％和0.8％；对比例1精制的鳄鱼油中epa和dha的含量分别为0.3％和0.5％；对比例1精制的鳄鱼油中epa和dha的含量分别为0.05％和0.1％。采用本发明提供的精制方法制备鳄鱼油，能够减少鳄鱼油中核心成分的流失，鳄鱼油中epa和dha的含量较高。