一种用于培养间充质干细胞的培养基的制作方法

1.本发明属于培养基技术领域，具体的说是一种用于培养间充质干细胞的培养基。


背景技术：

2.间充质干细胞是一种具有可塑性的成体干细胞，其广泛存在于骨髓、胎盘、脐带以及羊水中。
3.现有技术在进行间充质干细胞的培养时，需要于培养基中加入多种营养物质以模拟间充质干细胞于生命体中的生长环境。
4.现有用于培养间充质干细胞的培养基在制备时，需要对加入多种营养物质的培养基进行混合均匀，而传统的混匀方式一般只能通过转动进行，而传统方式的转动以一定的速度以及方向进行旋转，未必能够对培养基内的成分进行混匀，进而导致培养基的培养效果较差；为此，本发明提出的一种用于培养间充质干细胞的培养基。


技术实现要素：

5.为了弥补现有技术的不足，解决传统的混匀方式一般只能通过转动进行，而传统方式的转动以一定的速度以及方向进行旋转，未必能够对培养基内的成分进行混匀，进而导致培养基的培养效果较差的问题，本发明提出的一种用于培养间充质干细胞的培养基。
6.本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种用于培养间充质干细胞的培养基，包括基础培养基、胰岛素类似物、胆固醇、透皮多肽、玻色因、重组人转铁蛋白、脱脂紫苏籽蛋白、二苯乙烯苷、白藜芦醇衍生物以及银杏叶提取物；
7.以培养基的终浓度计，各组分的用量分别为：胰岛素类似物6.7-8.9mg/l；胆固醇1.7-3.6mg/l、透皮多肽22.5-24.6μg/l、玻色因15.7-17.1μg/l、重组人转铁蛋白8.1-12.1mg/l、脱脂紫苏籽蛋白5.2-7.8mg/l、二苯乙烯苷8.7-9.3μg/l、白藜芦醇衍生物6.0-8.3μg/l、银杏叶提取物7.6-8.9μg/l。
8.优选的，所述基础培养基为dmem/f12培养基。
9.优选的，所述间充质干细胞为胎盘中获取的胎盘间充质干细胞。
10.优选的，所述培养间充质干细胞的培养基的制备方法包括以下步骤：
11.s1：向基础培养基中加入胰岛素类似物、胆固醇透皮多肽、玻色因、重组人转铁蛋白、脱脂紫苏籽蛋白、二苯乙烯苷、白藜芦醇衍生物以及银杏叶提取物；
12.s2：将加入各种原材料的基础培养基放置在摇匀机构上，并启动摇匀机构，使基础培养基内部液体混合均匀；
13.s3：经步骤s2，对基础培养基混合均匀后，过滤除菌后制得用于培养间充质干细胞的无血清培养基。
14.优选的，所述s3中，过滤除菌采用滤膜进行过滤，且所述滤膜的孔径为0.20-0.25μm。
15.优选的，所述摇匀机构由底座、固定盘、驱动组件、活动盘以及拨动组件组成；所述
固定盘固接在底座上；所述活动盘设置在固定盘上，且所述活动盘经驱动组件转动在固定盘上；所述驱动组件设置在底座中，且所述拨动组件设置在固定盘与活动盘之间；所述底座上开设有门槽，且所述门槽内固接有限位块，同时，在固定盘与活动盘之间的拨动组件，会间接作用在活动盘上，进而使得活动盘产生速度的变化，有利于改变培养基内部营养成分的移动轨迹，进而有利于混匀，布置在底座上的门槽用于放置门板，而门槽内的限位块用于对门板进行限位。
16.优选的，所述驱动组件由电机、双联齿轮、转轴以及联动齿轮组成；所述电机设置在底座中，且所述联动齿轮固接在电机的输出轴上；所述转轴的一端贯穿底座且固接在所述活动盘的中部；所述转轴的另一端固接双联齿轮，且所述双联齿轮与所述联动齿轮啮合，转轴转动则会间接带动活动盘转动在固定盘上，因此实现带动活动盘上的培养基转动，有利于培养基内的营养成分混匀。
17.优选的，所述活动盘的表面上固接有固定壳，且所述固定壳的延长线上可拆卸连接有卡箍，活动盘上设置的固定壳用于固定培养基，且在固定壳延长线上布置的卡箍用于对培养基进行进一步的限位。
18.优选的，所述拨动组件由弹性板、弹性杆、连接轴、球体以及固定抵块组成；所述弹性杆固接在活动板的侧壁上，且所述弹性杆的另一端固接弹性板；所述弹性板设置六组，且六组所述弹性板圆周对称环绕在活动盘的侧壁上；所述连接轴固接在弹性板的内侧中部，且所述球体固接在连接轴的底端；所述固定抵块对应设置六组，且六组所述固定抵块圆周对称固接在固定盘上，而在球体进入凹槽和与凹槽分离时，会对活动盘产生一定程度的震荡，因此会导致培养基内的营养成分移动轨迹失稳，此时能够有效的将培养基内的营养成分混合均匀。
19.优选的，所述活动盘的内部设有多孔板，且所述多孔板的内部开设有对应于球体的凹槽，多孔板主要为多孔树脂结构，其能够在外力挤压下产生弹性形变，而开设在多孔板内的凹槽，则用于对球体进行限位。
20.本发明的技术效果和优点：
21.1.本发明提供的一种用于培养间充质干细胞的培养基，通过设置驱动组件带动活动盘活动在固定盘上，因此在电机带动联动齿轮转动时，可通过双联齿轮带动活动盘转动，使得位于固定壳内的培养基能够产生转动，进而使得其内部的营养成分混合，配合设置在活动盘与固定盘之间的拨动组件，使得活动盘转动时易受到固定抵块影响而减速，因此活动盘上的培养基其内部的营养成分会混合更为均匀。
22.2.本发明提供的一种用于培养间充质干细胞的培养基，通过设置在规定盘与活动盘之间的拨动组件，在活动盘转动时，固定抵块会与弹性板接触，进而使得弹性板向内收缩，同时弹性板内侧中部的球体会卡入多孔板内的凹槽内，在球体卡入多孔板以及分离多孔板的过程中，另活动盘上的培养基产生微动，进而令培养基中的营养成分混合更为均匀。
附图说明
23.下面结合附图对本发明作进一步说明。
24.图1是本发明中制备方法的流程图；
25.图2是本发明中摇匀机构的立体图；
26.图3是本发明中摇匀机构的俯视图；
27.图4是本发明中摇匀机构的侧视图；
28.图5是本发明中摇匀机构的剖视图；
29.图6是本发明中活动盘的正视图；
30.图7是图6的a部分结构放大示意图。
31.图中：1、底座；11、固定盘；111、固定抵块；12、门槽；13、限位块；21、活动盘；211、弹性板；212、弹性杆；213、多孔板；214、凹槽；215、连接轴；216、球体；22、固定壳；23、卡箍；24、转轴；25、双联齿轮；3、电机；31、联动齿轮。
具体实施方式
32.为了使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施方式，进一步阐述本发明。
33.如图1至图7所示，本发明所述的一种用于培养间充质干细胞的培养基，包括基础培养基、胰岛素类似物、胆固醇、透皮多肽、玻色因、重组人转铁蛋白、脱脂紫苏籽蛋白、二苯乙烯苷、白藜芦醇衍生物以及银杏叶提取物；
34.以培养基的终浓度计，各组分的用量分别为：胰岛素类似物7.6mg/l；胆固醇2.8mg/l、透皮多肽23.5μg/l、玻色因16.5μg/l、重组人转铁蛋白10.5mg/l、脱脂紫苏籽蛋白6.6mg/l、二苯乙烯苷8.9μg/l、白藜芦醇衍生物7.3μg/l、银杏叶提取物8.3μg/l。
35.作为本发明的一种实施方式，所述基础培养基为dmem/f12培养基。
36.作为本发明的一种实施方式，所述间充质干细胞为胎盘中获取的胎盘间充质干细胞。
37.作为本发明的一种实施方式，所述培养间充质干细胞的培养基的制备方法包括以下步骤：
38.s1：向基础培养基中加入胰岛素类似物、胆固醇透皮多肽、玻色因、重组人转铁蛋白、脱脂紫苏籽蛋白、二苯乙烯苷、白藜芦醇衍生物以及银杏叶提取物；
39.s2：将加入各种原材料的基础培养基放置在摇匀机构上，并启动摇匀机构，使基础培养基内部液体混合均匀；
40.s3：经步骤s2，对基础培养基混合均匀后，过滤除菌后制得用于培养间充质干细胞的无血清培养基。
41.作为本发明的一种实施方式，所述s3中，过滤除菌采用滤膜进行过滤，且所述滤膜的孔径为0.22μm。
42.作为本发明的一种实施方式，所述摇匀机构由底座1、固定盘11、驱动组件、活动盘21以及拨动组件组成；所述固定盘11固接在底座1上；所述活动盘21设置在固定盘11上，且所述活动盘21经驱动组件转动在固定盘11上；所述驱动组件设置在底座1中，且所述拨动组件设置在固定盘11与活动盘21之间；所述底座1上开设有门槽12，且所述门槽12内固接有限位块13。
43.工作时，在对培养基中的营养成分进行混合时，人为将培养基固定在活动盘21上，随后启动驱动组件，利用驱动组件带动活动盘21与固定盘11之间产生相对活动关系，在活动盘21转动时，其上布置的培养基内部的营养成分会随着活动盘21转动的速度以及方向产
生离心效果，进而能够实现混匀的效果，同时，在固定盘11与活动盘21之间的拨动组件，会间接作用在活动盘21上，进而使得活动盘21产生速度的变化，有利于改变培养基内部营养成分的移动轨迹，进而有利于混匀，布置在底座1上的门槽12用于放置门板，而门槽12内的限位块13用于对门板进行限位。
44.作为本发明的一种实施方式，所述驱动组件由电机3、双联齿轮25、转轴24以及联动齿轮31组成；所述电机3设置在底座1中，且所述联动齿轮31固接在电机3的输出轴上；所述转轴24的一端贯穿底座1且固接在所述活动盘21的中部；所述转轴24的另一端固接双联齿轮25，且所述双联齿轮25与所述联动齿轮31啮合。
45.工作时，驱动组件在工作时，由电机3驱动联动齿轮31转动，而联动齿轮31转动时，其能够通过与双联齿轮25的啮合来带动转轴24转动，转轴24转动则会间接带动活动盘21转动在固定盘11上，因此实现带动活动盘21上的培养基转动，有利于培养基内的营养成分混匀。
46.作为本发明的一种实施方式，所述活动盘21的表面上固接有固定壳22，且所述固定壳22的延长线上可拆卸连接有卡箍23。
47.工作时，活动盘21上设置的固定壳22用于固定培养基，且在固定壳22延长线上布置的卡箍23用于对培养基进行进一步的限位。
48.作为本发明的一种实施方式，所述拨动组件由弹性板211、弹性杆212、连接轴215、球体216以及固定抵块111组成；所述弹性杆212固接在活动板的侧壁上，且所述弹性杆212的另一端固接弹性板211；所述弹性板211设置六组，且六组所述弹性板211圆周对称环绕在活动盘21的侧壁上；所述连接轴215固接在弹性板211的内侧中部，且所述球体216固接在连接轴215的底端；所述固定抵块111对应设置六组，且六组所述固定抵块111圆周对称固接在固定盘11上。
49.工作时，在活动盘21受到转轴24带动而转动时，其会转动在固定盘11内，而在活动盘21转动时，其侧壁上布置的弹性板211会与固定盘11上的固定抵块111接触，在固定抵块111与弹性板211接触时，弹性板211会产生收缩效果，同时在弹性板211与活动盘21之间的弹性杆212会产生弹性形变，用于提供对弹性板211的支撑效果，且在弹性板211向内收缩的过程中，其内侧中部的连接轴215会带动球体216向内移动在活动盘21内部，并使得球体216卡接在多孔板213内部的凹槽214内，当固定抵块111与弹性板211分离时，在弹性杆212的带动下，弹性板211复位，此时弹性板211将带动其中部的球体216与凹槽214分离；在固定抵块111与弹性板211接触时，活动盘21的速度会降低，而圆周对称布置的固定抵块111以及弹性板211，会使得活动盘21的速度均匀的降低再加速，因此使得活动盘21内固定的培养基，其内部的营养成分混合均匀，而在球体216进入凹槽214和与凹槽214分离时，会对活动盘21产生一定程度的震荡，因此会导致培养基内的营养成分移动轨迹失稳，此时能够有效的将培养基内的营养成分混合均匀。
50.作为本发明的一种实施方式，所述活动盘21的内部设有多孔板213，且所述多孔板213的内部开设有对应于球体216的凹槽214。
51.工作时，多孔板213主要为多孔树脂结构，其能够在外力挤压下产生弹性形变，而开设在多孔板213内的凹槽214，则用于对球体216进行限位。
52.工作原理：传统的混匀方式一般只能通过转动进行，而传统方式的转动以一定的
速度以及方向进行旋转，未必能够对培养基内的成分进行混匀，进而导致培养基的培养效果较差；
53.该装置在使用时，首先对培养基中的营养成分进行混合，人为将培养基固定在活动盘21上，随后启动驱动组件，利用驱动组件带动活动盘21与固定盘11之间产生相对活动关系，在活动盘21转动时，其上布置的培养基内部的营养成分会随着活动盘21转动的速度以及方向产生离心效果，进而能够实现混匀的效果，同时，在固定盘11与活动盘21之间的拨动组件，会间接作用在活动盘21上，进而使得活动盘21产生速度的变化，有利于改变培养基内部营养成分的移动轨迹，进而有利于混匀，其中，驱动组件在工作时，由电机3驱动联动齿轮31转动，而联动齿轮31转动时，其能够通过与双联齿轮25的啮合来带动转轴24转动，转轴24转动则会间接带动活动盘21转动在固定盘11上，因此实现带动活动盘21上的培养基转动，有利于培养基内的营养成分混匀；
54.在活动盘21受到转轴24带动而转动时，其会转动在固定盘11内，而在活动盘21转动时，其侧壁上布置的弹性板211会与固定盘11上的固定抵块111接触，在固定抵块111与弹性板211接触时，弹性板211会产生收缩效果，同时在弹性板211与活动盘21之间的弹性杆212会产生弹性形变，用于提供对弹性板211的支撑效果，且在弹性板211向内收缩的过程中，其内侧中部的连接轴215会带动球体216向内移动在活动盘21内部，并使得球体216卡接在多孔板213内部的凹槽214内，当固定抵块111与弹性板211分离时，在弹性杆212的带动下，弹性板211复位，此时弹性板211将带动其中部的球体216与凹槽214分离；在固定抵块111与弹性板211接触时，活动盘21的速度会降低，而圆周对称布置的固定抵块111以及弹性板211，会使得活动盘21的速度均匀的降低再加速，因此使得活动盘21内固定的培养基，其内部的营养成分混合均匀，而在球体216进入凹槽214和与凹槽214分离时，会对活动盘21产生一定程度的震荡，因此会导致培养基内的营养成分移动轨迹失稳，此时能够有效的将培养基内的营养成分混合均匀；
55.其中，多孔板213主要为多孔树脂结构，其能够在外力挤压下产生弹性形变，而开设在多孔板213内的凹槽214，则用于对球体216进行限位。
56.以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。