一种四氮唑类化合物及其应用的制作方法

1.本发明属于药化领域，具体涉及一种四氮唑类化合物及其应用，尤其涉及一种活性高的四氮唑类化合物及其应用。


背景技术：

2.前列腺癌(pca)是男性癌症相关死亡的主要原因。雄激素受体(ar)是核受体家族的成员，在pca的发展中起着关键作用。pca是一种涉及雄激素过多和ar介导的信号通路过度表达的病症，pca细胞的增殖和存活严重依赖于ar信号。因此，ar已成为治疗pca的主要治疗靶点，手术或化学阉割的雄激素剥夺疗法是标准治疗方法，大多数患者会得到缓解。不幸的是，这种疾病通常会发展到无法治愈的阶段，称为去势抵抗性前列腺癌(crpc)，而ar持续或重新激活的信号通路加重了病情发展。大多数患者最初受益于第二代疗法，如恩杂鲁胺、阿帕鲁胺和达洛鲁胺，但最终会对它们产生二次耐药。因此，需要新的治疗策略来对抗ar信号通路。
3.cn111655249a公开了一种雄激素受体信号传导途径的抑制剂和p38抑制剂的药物组合，其用于治疗个体中的前列腺癌，其中前列腺肿瘤细胞表达ar-v7变体雄激素受体蛋白，或用于预防在通过雄激素受体信号传导途径的抑制剂治疗的患有前列腺癌的患者中抵抗性的发生。该发明进一步涉及一种药物组合物，其包含恩杂鲁胺、阿比特龙或阿帕鲁胺和选自ly2228820和arry-614的p38抑制剂，以及至少一种药学上可接受的赋形剂。该发明还涉及p38抑制剂用于恢复在用雄激素受体信号传导途径的抑制剂治疗后已获得对雄激素剥夺疗法(adt)的抵抗性的患有前列腺癌的患者的对雄激素剥夺疗法(adt)的敏感性的用途，其中前列腺肿瘤细胞表达ar-v7变体雄激素受体蛋白。
4.cn110327465a公开了一种复方抗前列腺癌药物，所述的药物由多甲氧基黄酮类药物和雄激素受体抑制剂药物组成。多甲氧基黄酮类药物和雄激素受体抑制剂药物的质量比为1：1。其中，所述的多甲氧基黄酮类药物为川陈皮素，所述的雄激素受体抑制剂药物为比卡鲁胺。本发明提供通过将多甲氧基黄酮类药物和雄激素受体抑制剂类抗癌药联合使用，药效明显优于单独用药，对抑制前列腺癌和阻止前列腺癌向恶性发展具有良好的抑制效果；本发明提供的药物使用剂量低，降低单独用药的浓度，从而减少药物的毒副作用，减少对人体的伤害；通过混合使用进一步减小了患者的经济负担，并起到比单独使用更好的效果。
5.由于目前患者接受第二代疗法后最终导致二次耐药，影响后续治疗。因此，如何提供一种全新的ar信号通路抑制剂，成为了亟待解决的问题。


技术实现要素：

6.针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种四氮唑类化合物及其应用，尤其提供一种活性高的四氮唑类化合物及其应用。本发明提供的四氮唑类化合物能够有效抑制雄激素受体，抑制效果好，具备潜在的前列腺癌治疗效果。
7.为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：
8.第一方面，本发明提供了一种四氮唑类化合物，所述四氮唑类化合物的结构如式i所示：
[0009][0010]
其中ar1选自取代或未取代的苯环、取代或未取代的c4-c7的杂环，ar2选自选自中任意一种。
[0011]
y选自c、o或n中任意一种，z选自卤素。
[0012]
环a选自取代或未取代的苯环、取代或未取代的c4-c7的杂环、取代或未取代的c3-c7脂肪环。
[0013]
所述卤素选自氟、氯、溴或碘中任意一种。
[0014]
所述杂环选自噻吩、吡啶或吡唑中任意一种。
[0015]
所述c3-c7脂肪环选自环丙烷、环丁烷、环戊烷、环己烷或环庚烷中任意一种。
[0016]
所述c4-c7的杂环选自哒嗪、吡啶或噻吩中任意一种。
[0017]
上述特定结构的化合物能够有效抑制雄激素受体，具有显著的抑制效果。
[0018]
优选地，所述取代的取代基选自卤素、卤素取代或未取代的c1-c6烷基、卤素取代或未取代的c1-c6烷氧基中任意一种。
[0019]
所述c1-c6烷基例如可以是甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、正戊基或正己基等，c1-c6烷氧基例如可以是甲氧基、乙氧基、丙氧基或异丙氧基等。
[0020]
优选地，所述取代的取代基选自卤素。
[0021]
优选地，所述ar1选自取代或未取代的苯环。
[0022]
优选地，所述ar1选自取代的苯环。
[0023]
优选地，所述y选择o。
[0024]
优选地，所述ar2选自选自中任意一种，其中y、z、环a具有和上述相同的限定范围。
[0025]
优选地，所述四氮唑类化合物选自优选地，所述四氮唑类化合物选自
中任意一种。
[0026]
当y选自o时，所述四氮唑类化合物可以示例性的由包括以下步骤的方法制备得到：将化合物与honh2盐酸盐反应，得到化合物之后在盐酸条件下于乙腈溶液中与n-氯代丁二酰亚胺反应，得到化合物接着在苯中与nan3反应得到化合物之后与ch3cocl在苯中反应得到中间体最后将中间体分别与
反应，得到所述四氮唑类化合物。
[0027]
当y选自n时，所述四氮唑类化合物可以示例性的由包括以下步骤的方法制备得到：化合物在碳酸钠条件下，于水中与羟胺磺酸反应，得到化合物之后分别与反应，得到所述四氮唑类化合物。
[0028]
其中ar1、z、环a具有与如上所述相同的范围。
[0029]
第二方面，本发明提供了如上所述的四氮唑类化合物在制备雄激素受体抑制剂中的应用。
[0030]
第三方面，本发明还提供了如上所述的四氮唑类化合物在制备前列腺癌治疗药物中的应用。
[0031]
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
[0032]
本发明提供了一种特定结构的四氮唑类化合物，其对于雄激素受体具有显著的抑制效果，能够用于制备雄激素受体抑制剂以及前列腺癌治疗药物。
具体实施方式
[0033]
为更进一步阐述本发明所采取的技术手段及其效果，以下结合本发明的优选实施例来进一步说明本发明的技术方案，但本发明并非局限在实施例范围内。
[0034]
实施例1
[0035]
本实施例提供了一种四氮唑类化合物1，具体结构如下：
[0036][0037]
制备步骤如下：
[0038]
(1)取盐酸羟胺(10.42g，150mmol)加入到搅拌着的4-氯苯甲醛(7.0g，50mmol)、乙酸钠(24.6g，150mmol)和无水乙醇(300ml)混合物中，然后回流加热2小时。减压除去溶剂，将残余物倒入水中，用乙酸乙酯萃取。有机相用无水硫酸钠干燥。减压除去溶剂，得到(e)-4-氯苯甲醛肟(7.7g，49.5mmol，99％)；
[0039]
(2)在搅拌的(e)-4-氯苯甲醛肟(7.7g，49.5mmol)的40ml乙腈(含有5滴浓盐酸)混合溶液中，以保持在每次后续添加之前蓝绿色褪色的速率，分批加入n-氯代琥珀酰亚胺，将溶液静置30分钟。加入80ml水，用苯(2
×
40ml)萃取。将合并的有机相干燥、过滤，得到alpha-4-二氯苯甲醛肟；
[0040]
(3)叠氮化钠(6.5g，0.1mol)溶于水(35ml)中，缓慢加入到在冰浴下搅拌的alpha-4-二氯苯甲醛肟的苯溶液中。混合物在室温下搅拌48小时。将有机相用水洗涤(2
×
100ml)，用硫酸钠干燥并迅速用于下一步反应(得到alpha-叠氮基-4-氯苯甲醛肟)；
[0041]
(4)将含有alpha-叠氮基-4-氯苯甲醛肟的苯溶液缓慢加入到在冰浴下搅拌的含过量乙酰氯(20ml)的苯(20ml)溶液中。添加完成后，将反应混合物缓慢升温至室温并静置48小时。将混合物部分蒸发(至30ml)，用水(10ml)小心稀释，并在60℃下搅拌2小时。将所得混合物冷却至室温，加入冰水(100ml)稀释，用乙醚(100ml)萃取。将有机相用水洗涤，然后用饱和碳酸氢钠(2
×
100ml)萃取。合并碳酸氢钠萃取液，用浓盐酸酸化至ph＝1。过滤得固体，滤饼用水洗涤并干燥，得到5-(4-氯苯基)-1-羟基四氮唑；
[0042]
(5)将5-(4-氯苯基)-1-羟基四氮唑(500mg，2.55mmol)、1-(溴甲基)-4-氯苯(498mg，2.42mmol)、碳酸钾(769mg，5.86mol)加入到乙腈(10ml)中，在室温下搅拌过夜。旋干溶剂，向残余物中加入水(20ml)，用乙酸乙酯(3
×
50ml)萃取。合并有机相，用饱和食盐水(20ml)洗涤，干燥并蒸发。将粗物质通过色谱法在硅胶上提纯，接着用dcm和石油醚重结晶，得到化合物1，产率82％。
[0043]
表征数据如下：
[0044]
m.p.216℃。
[0045]1hnmr(400mhz,cdcl-d6)7.18(2h,d,j 8.44hz,arh),7.44(2h,d,j 8.6hz,arh),7.18(2h,d,j 8.4hz,arh),7.06
–
7.23(2h,d,j 8.48,arh),5.39(2h,benzylic ch2)。
13
cnmr(150mhz,dmso-d6)155.09,151.60,141.04,137.16,133.06,129.29,128.50,126.83,123.88,123.33,119.36,113.16,53.83,44.10,42.10,35.95,13.09,11.55。hrms(esi):m/z calcd for c
20h24
n5o
232
s:398.1651[m h]

；found:398.1657。
[0046]
实施例2
[0047]
本实施例提供了一种四氮唑类化合物2，具体结构如下：
[0048][0049]
制备步骤中除将步骤(5)中的1-(溴甲基)-4-氯苯替换为等量的1-(溴甲基)-3-氯苯外，其余与实施例1一致。
[0050]
最终得到化合物2，产率88％。
[0051]
表征数据如下：
[0052]1h nmr(400mhz,cdcl3)7.81-7.74(2h,m,arh),7.48-7.41(2h,m,arh),7.31-7.25(1h,m,arh),7.19-7.12(2h,m,arh),6.98-6.99(1h,m,arh),5.39(2h,s)。
13
c nmr(150mhz,cdcl3)146.76,138.26,134.91,132.81,130.51,130.35,130.24,129.44,129.33,128.23,120.38,82.63。hrms(esi):m/z calcd for c
14h10
cl2n4o:320.0232[m h]

；found:321.17。
[0053]
实施例3
[0054]
本实施例提供了一种四氮唑类化合物9a，具体结构如下：
[0055][0056]
制备步骤中除将步骤(5)中的1-(溴甲基)-4-氯苯替换为等量的1-(溴甲基)-4-氟苯外，其余与实施例1一致。
[0057]
最终得到化合物9a，产率51％。
[0058]
表征数据如下：
[0059]1h nmr(400mhz,cdcl3)7.81-7.79(2h,m,arh),7.49-7.42(2h,m,arh),7.19-7.11(2h,m,arh),6.91-6.85(2h,m,arh),5.41(2h,s)。
13
c nmr(150mhz,cdcl3)164.95,162.96,146.83,138.21,132.58,132.51,129.44,129.36,127.00,126.98,120.62,116.21,116.21,116.04,82.80。
19
f nmr spectrum for 9a(376mhz；cdcl3)109.49。hrms(esi):m/z calcd for c
14h10
clfn4o:304.0527[m h]

；found:305.18。
[0060]
实施例4
[0061]
本实施例提供了一种四氮唑类化合物9b，具体结构如下：
[0062][0063]
制备步骤中除将步骤(5)中的1-(溴甲基)-4-氯苯替换为等量的1-(溴甲基)-3-氟苯外，其余与实施例1一致。
[0064]
最终得到化合物9b，产率27％。
[0065]
表征数据如下：
[0066]1h nmr(400mhz,cdcl3)7.89-7.81(2h,m,arh),7.49-7.43(2h,m,arh),7.29-7.21(1h,m,arh),7.05-6.97(1h,m,arh),6.96-6.85(2h,m,arh),5.43(2h,s)。
13
c nmr(150mhz,cdcl3)163.74,161.76,146.67,138.30,133.28,133.23,130.78,130.71,129.51,129.36,125.87,125.85,120.51,117.60,117.43,117.22,117.04,82.63。
19
f nmr spectrum for 9a(376mhz；cdcl3)111.38。hrms(esi):m/z calcd for c
14h10
clfn4o:304.0527[m h]

；found:305.19。
[0067]
实施例5
[0068]
本实施例提供了一种四氮唑类化合物9c，具体结构如下：
[0069][0070]
制备步骤中除将步骤(5)中的1-(溴甲基)-4-氯苯替换为等量的1-(溴甲基)-4-溴苯外，其余与实施例1一致。
[0071]
最终得到化合物9c，产率43％。
[0072]
表征数据如下：
[0073]1h nmr(400mhz,cdcl3)7.79-7.75(2h,m,arh),7.41-7.45(2h,m,arh),7.38-7.31
(2h,m,arh),7.02-6.97(2h,m,arh),5.39(2h,s)。
13
c nmr(150mhz,cdcl3)146.83,138.25,132.24,131.89,129.92,129.43,129.39,125.12,120.55,82.78。hrms(esi):m/z calcd for c
14h10
brcln4o:363.9727[m h]

；found:367.14。
[0074]
实施例6
[0075]
本实施例提供了一种四氮唑类化合物9d，具体结构如下：
[0076][0077]
制备步骤中除将步骤(5)中的1-(溴甲基)-4-氯苯替换为等量的1-(溴甲基)-3-溴苯外，其余与实施例1一致。
[0078]
最终得到化合物9d，产率46％。
[0079]
表征数据如下：
[0080]1h nmr(400mhz,cdcl3)7.75-7.85(2h,m,arh),7.49-7.42(3h,m,arh),7.34-7.31(1h,m,arh),7.12-7.08(1h,m,arh),7.07-7.01(1h,m,arh),5.39(2h,s)。
13
c nmr(150mhz,cdcl3)146.89,138.38,133.54,133.39,133.06,130.51,129.53,129.40,128.74,123.01,120.43,82.65。hrms(esi):m/z calcd for c
14h10
brcln4o:363.9727[m h]

；found:367.13。
[0081]
实施例7
[0082]
本实施例提供了一种四氮唑类化合物9e，具体结构如下：
[0083][0084]
制备步骤中除将步骤(5)中的1-(溴甲基)-4-氯苯替换为等量的1-(溴甲基)-3,4-二氯苯外，其余与实施例1一致。
[0085]
最终得到化合物9e，产率70％。
[0086]
表征数据如下：
[0087]1h nmr(400mhz,cdcl3)7.83-7.79(2h,m,arh),7.51-7.47(2h,m,arh),7.37-7.31(1h,m,arh),7.30-7.29(2h,m,arh),6.99-6.95(1h,m,arh),5.39(2h,s)。
13
c nmr(150mhz,cdcl3)146.87,138.49,135.04,133.37,132.21,131.03,130.99,129.51,129.37,129.27,120.31,81.96。hrms(esi):m/z calcd for c
14
h9cln4o:353.9842[m h]

；found:357.13。
[0088]
实施例8
[0089]
本实施例提供了一种四氮唑类化合物9f，具体结构如下：
[0090][0091]
制备步骤中除将步骤(5)中的1-(溴甲基)-4-氯苯替换为等量的1-溴甲苯外，其余与实施例1一致。
[0092]
最终得到化合物9f，产率58％。
二氯苯外，其余与实施例9一致。
[0113]
最终得到化合物9i，产率70％。
[0114]
表征数据如下：
[0115]1h nmr(400mhz,cdcl3)7.86(2h),7.31(1h),7.27(1h),7.15(2h),6.92(1h),5.48(2h)。
13
c nmr(125mhz,cdcl3)165.79,163.77,146.87,134.98,133.32,132.19,131.11,130.97,130.49,130.42,129.27,118.12,118.18,118.09,116.60,116.42,81.88。hrms(esi):m/z calcd for c
14
h9cl2fn4o:338.0137[m h]

；found:339.15。
[0116]
实施例12
[0117]
本实施例提供了一种四氮唑类化合物9j，具体结构如下：
[0118][0119]
制备步骤中除将步骤(1)中的4-氯苯甲醛替换为等量的3-氯苯甲醛外，其余与实施例1一致。
[0120]
最终得到化合物9j，产率32％。
[0121]
表征数据如下：
[0122]1h nmr(400mhz,cdcl3)7.84(1h),7.75(1h),7.52(1h),7.46(1h),7.21(2h),7.11(2h),5.48(2h)。
13
c nmr(125mhz,cdcl3)146.56,136.83,135.14,131.80,131.74,130.38,129.35,129.24,127.96,126.24,123.68,82.85。hrms(esi):m/z calcd for c
14h10
cl2n4o:320.0232[m h]

；found:321.16。
[0123]
实施例13
[0124]
本实施例提供了一种四氮唑类化合物9k，具体结构如下：
[0125][0126]
制备步骤中除将步骤(5)中的1-(溴甲基)-4-氯苯替换为等量的1-(溴甲基)-3-氯苯外，其余与实施例12一致。
[0127]
最终得到化合物9k，产率47％。
[0128]
表征数据如下：
[0129]1h nmr(400mhz,cdcl3)7.85(1h),7.76(1h),7.52(1h),7.46(1h),7.30(1h),7.18(2h),7.03(1h),5.48(2h)。
13
c nmr(125mhz,cdcl3)146.58,135.17,135.00,132.75,131.93,130.61,130.45,130.41,130.26,128.35,128.00,126.18,123.53,82.80。hrms(esi):m/z calcd for c
14h10
cl2n4o:320.0232[m h]

；found:321.10。
[0130]
实施例14
[0131]
本实施例提供了一种四氮唑类化合物9m，具体结构如下：
[0132]
[0133]
制备步骤中除将步骤(1)中的4-氯苯甲醛替换为等量的2,4-二氯苯甲醛、步骤(5)中的1-(溴甲基)-4-氯苯替换为等量的1-(溴甲基)-3-氯苯外，其余与实施例1一致。
[0134]
最终得到化合物9m，产率68％。
[0135]
表征数据如下：
[0136]1h nmr(400mhz,cdcl3)7.55(1h),7.30(2h),7.18(1h),7.03(2h),6.88(1h),5.48(2h)。
13
c nmr(125mhz,cdcl3)146.29,138.62,135.07,134.82,133.11,132.33,130.52,130.36,130.29,130.01,128.15,127.50,120.23,82.37。hrms(esi):m/z calcd for c
14
h9cl3n4o:353.9842[m h]

；found:355.07。
[0137]
实施例15
[0138]
本实施例提供了一种四氮唑类化合物9n，具体结构如下：
[0139][0140]
制备步骤中除将步骤(5)中的1-(溴甲基)-4-氯苯替换为等量的1-(溴甲基)-3-三氟甲基苯外，其余与实施例1一致。
[0141]
最终得到化合物9n，产率45％。
[0142]
表征数据如下：
[0143]1h nmr(400mhz,cdcl3)8.25(1h),7.86(2h),7.51(3h),7.27(2h),5.48(2h)。
13
c nmr(125mhz,cdcl3)146.73,138.41,133.43,132.02,131.96,131.70,131.44,131.18,129.66,129.51,129.40,129.26,127.20,127.04,126.72 124.56,122.39,120.31,120.23,82.57。hrms(esi):m/z calcd for c
15h10
clf3n4o:354.0495[m h]

；found:355.15。
[0144]
实施例16
[0145]
本实施例提供了一种四氮唑类化合物9q，具体结构如下：
[0146][0147]
制备步骤中除将步骤(1)中的4-氯苯甲醛替换为等量的4-甲氧基苯甲醛外，其余与实施例1一致。
[0148]
最终得到化合物9q，产率39％。
[0149]
表征数据如下：
[0150]1h nmr(400mhz,cdcl3)7.98(2h),7.26(1h),7.18(2h),7.02(2h),5.40(2h),3.91(2h)。
13
c nmr(125mhz,cdcl3)162.33,147.25,136.52,131.62,129.77,129.17,114.52,114.32,82.34,77.41,77.16,76.90,55.62。hrms(esi):m/z calcd for c
15h13
cln4o2:316.0727[m h]

；found:317.20。
[0151]
实施例17
[0152]
本实施例提供了一种四氮唑类化合物9r，具体结构如下：
[0153][0154]
制备步骤中除将步骤(5)中的1-(溴甲基)-4-氯苯替换为等量的1-(溴甲基)-3-氯苯外，其余与实施例16一致。
[0155]
最终得到化合物9r，产率30％。
[0156]
表征数据如下：
[0157]1h nmr(400mhz,cdcl3)7.89(2h),7.35(1h),7.29(1h),7.11(1h),7.01(2h),5.49(2h),3.91(2h)。
13
c nmr(125mhz,cdcl3)162.33,147.19,134.82,133.15,130.38,130.18,129.74,128.18,114.57,114.13,82.26,77.41,77.16,76.90,55.58。hrms(esi):m/z calcd for c
15h13
cln4o2:317.0827[m h]

；found:317.20。
[0158]
实施例18
[0159]
本实施例提供了一种四氮唑类化合物9t，具体结构如下：
[0160][0161]
制备步骤中除将步骤(5)中的1-(溴甲基)-4-氯苯替换为等量的2-(溴甲基)-5-氯噻吩外，其余与实施例1一致。
[0162]
最终得到化合物9t，产率53％。
[0163]
表征数据如下：
[0164]1h nmr(400mhz,cdcl3)7.82(2h),7.49(2h),6.18(1h),6.14(1h),5.51(2h)。
13
c nmr(125mhz,cdcl3)147.18,138.25,134.99,131.55,130.97,129.46,129.42,126.63,120.38,77.42,77.16,76.91,76.59。hrms(esi):m/z calcd for c
12
h8cl2n4o2s:326.9896[m h]

；found:327.10。
[0165]
实施例19
[0166]
本实施例提供了一种四氮唑类化合物9v，具体结构如下：
[0167][0168]
制备步骤中除将步骤(5)中的1-(溴甲基)-4-氯苯替换为等量的3-(溴甲基)-6-氯吡啶外，其余与实施例1一致。
[0169]
最终得到化合物9v，产率49％。
[0170]
表征数据如下：
[0171]1h nmr(500mhz,cdcl3)8.25(1h),7.86(2h),7.50(3h),7.25(1h),5.51(2h)。
13
c nmr(125mhz,cdcl3)153.68,150.93,146.43,140.19,138.57,129.68,129.24,126.01,124.68,120.22,79.66,77.41,77.16,76.91。hrms(esi):m/z calcd for c
13
h9cl2n5o:322.0284[m h]

；found:322.08。
[0172]
实施例20
[0173]
本实施例提供了一种四氮唑类化合物9w，具体结构如下：
[0174][0175]
制备步骤中除将步骤(5)中的1-(溴甲基)-4-氯苯替换为等量的4-(溴甲基)-2-氯吡啶外，其余与实施例1一致。
[0176]
最终得到化合物9w，产率30％。
[0177]
表征数据如下：
[0178]1h nmr(400mhz,cdcl3)8.41(1h),7.91(2h),7.56(2h),7.29(1h),7.11(1h),5.51(2h)。
13
c nmr(125mhz,cdcl3)152.27,150.43,146.20,143.06,138.62,129.73,129.23,124.10,121.95,120.02,80.14,77.42,77.16,76.91。hrms(esi):m/z calcd for c
13
h9cl2n5o:322.1490[m h]

；found:322.18。
[0179]
实施例21
[0180]
本实施例提供了一种四氮唑类化合物11，具体结构如下：
[0181][0182]
制备方法如下：
[0183]
(1)将甲基溴化镁(3.0m乙醚溶液，12.05ml，37.5mmol)装入配备有磁力搅拌器的干燥和氮气保护的圆底烧瓶中。加入无水乙醚(10ml)，并将搅拌的混合物在冰水浴中冷却至0℃。将4-氯苯乙酮(2.63g，17.0mmol)的乙醚(10ml)溶液通过滴液漏斗逐滴加入。添加完成后，将反应混合物缓慢升温至室温。混合物搅拌过夜，用饱和氯化铵水溶液(30ml)和冰(5ml)淬灭。水相用乙醚(3
×
50ml)萃取。合并的有机相用硫酸钠干燥，旋干溶剂，得到2-(4-氯苯基)-2-丙醇(2.5g，86％)，为无色油状物，无需进一步纯化即可使用；
[0184]
(2)通过注射器将tfa(0.3ml)滴加至装有5-(4-氯苯基)-1-羟基四氮唑(495mg，2.52mmol，参考实施例1方法制得)和2-(4-氯苯基)-2-丙醇(430mg，2.52mmol)在无水1,2-二氯乙烷(12ml)混合溶液的玻璃封管。用聚四氟乙烯帽密封，并将反应物加热至80℃，搅拌16小时。将混合物转移至分液漏斗，用dcm冲洗，并用碳酸钠水溶液洗涤。收集有机相，用mgso4干燥，旋干。残余物通过硅胶柱纯化，得到化合物11(123mg，14％)，为白色固体。
[0185]
表征数据如下：
[0186]1h nmr(500mhz,cdcl-d6)8.43(2h,d,j 8.6hz,arh),7.50(2h,d,j 8.6hz,arh),7.35(2h,d,j 8.7hz,arh),7.25(2h,d,j 8.7,arh),2.16(6h,s,2ch3)。
[0187]
实施例22
[0188]
本实施例提供了一种四氮唑类化合物12a，具体结构如下：
[0189][0190]
制备步骤中除步骤(5)为：在0℃下，氮气保护，将5-(4-氯苯基)-1-羟基四氮唑(150mg,，0.84mmol)溶于无水dmf(3ml)中，加入到搅拌的nah(47mg，1.2mmol)的无水dmf(3ml)悬浮液中。一旦添加完成，将反应混合物缓慢升温至室温。将反应混合物在室温下搅拌15分钟并在冰水浴中重新冷却至0℃。逐滴加入溴二氟甲基苯(207mg，1mmol)的无水dmf(2ml)溶液。反应混合物在室温下搅拌过夜。加入饱和氯化铵水溶液(8ml)并用乙醚(40ml)萃取整个溶液。用水(2
×
10ml)洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，并在减压下蒸发。残余物通过硅胶色谱纯化，得到白色固体状化合物12a(产率35％)外，其余与实施例1一致。
[0191]
表征数据如下：
[0192]1h nmr(400mhz,cdcl3)7.97-7.94(2h,m,arh),7.68-7.64(3h,m,arh),7.59-7.55(4h,m,arh)。
[0193]
实施例23
[0194]
本实施例提供了一种四氮唑类化合物13a，具体结构如下：
[0195][0196]
制备步骤中除步骤(5)为：5-(4-氯苯基)-1-羟基四氮唑(150mg，0.83mmol)、t-buok(1m乙醚溶液，1.9ml，1.9mmol)和乙腈(10ml)的混合物在室温下搅拌5分钟。添加双(4-氯苯基)碘鎓三氟甲磺酸盐(665mg，1.9mmol)并将反应混合物在室温下搅拌过夜。减压蒸发溶剂。粗物质通过硅胶色谱法纯化(3％，乙酸乙酯在石油醚中)，得到化合物13a为浅棕色固体(产率18％)外，其余与实施例1一致。
[0197]
表征数据如下：
[0198]1h nmr(500mhz,cdcl3)8.05-8.94(2h,m,arh),7.55-7.53(2h,m,arh),7.38-7.35(2h,m,arh),6.92-6.89(2h,m,arh)。
[0199]
实施例24
[0200]
本实施例提供了一种四氮唑类化合物20，具体结构如下：
[0201][0202]
制备步骤如下：
[0203]
(1)将5-苯基四氮唑(500mg，3.42mmol)溶解在70℃碳酸钠水溶液(7.5％，150ml)中，并在剧烈搅拌下，分批加入羟胺-o-磺酸(1.16g，10.3mmol)。将反应混合物在70℃搅拌4小时。将反应混合物冷却至室温，并用ea(3
×
70ml)萃取。合并有机相，干燥并旋干。残余物
通过硅胶色谱纯化，得到1-氨基-5-苯基四氮唑(65mg，12％)为白色固体；
[0204]
(2)将1-氨基-5-苯基四氮唑(60mg，0.37mmol)、4-氯苯甲酰氯(65.5mg，0.37mmol)和吡啶(1.0ml)加入到密封管中，在120℃下加热6小时。将反应液冷却至室温，减压除去吡啶。残余物通过硅胶色谱纯化，得到化合物20(20mg，18％)，为白色固体。
[0205]
表征数据如下：
[0206]1h nmr(500mhz,meod)7.96(2h,d,j 8.05hz,arh),7.90(2h,d,j 7.3hz,arh),7.63-7.56(5h,m,arh)。
[0207]
抑制效果研究：
[0208]
测试实施例1-24化合物对具有arv7的crpc细胞(22rv1)(来自中科院上海细胞库)的生物活性。首先消化并铺板22rv1细胞于384孔板内，每孔细胞数1500个，体积20μl，在细胞培养箱培养。24h后加入化合物与细胞共同孵育。化合物母液浓度为10mm，3倍梯度稀释，10个浓度，对照组加入dmso。细胞培养箱培养72h后检测。检测时，384孔板中每孔加入celltiter-glo试剂(普洛麦格)，震板10min后在化学发光仪中检测读数。使用graphpad prism8软件计算拟合化合物增殖抑制曲线，计算ic
50
值，结果如下：
[0209][0210][0211]
以上结果显示本发明提供的化合物对于22rv1具有有效的生长抑制效果，显示出对于雄激素受体的抑制效果，同时比较结果也可以发现，在本发明优选的结构范围内，抑制效果更加明显，ic
50
能够达到nm级别。
[0212]
申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的四氮唑类化合物及其应用，但本发明并不局限于上述实施例，即不意味着本发明必须依赖上述实施例才能实施。所属
技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。
[0213]
以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。
[0214]
另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。