结合EGFR、HER2及HER3的结合部分的组合的制作方法

技术特征：
1.一种包括两个或更多个结合部分的组合物，其中所述结合部分中的每一个结合部分包括结合至egfr的细胞外部分的可变结构域；并且其中所述结合部分中的第一结合部分包括结合至her2的细胞外部分的可变结构域，并且所述结合部分中的第二结合部分包括结合至her3的细胞外部分的可变结构域。2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述两个或更多个结合部分中的至少一个结合部分以及优选地至少两个结合部分是抗体。3.根据权利要求1或权利要求2所述的组合物，其中所述两个或更多个结合部分中的至少一个结合部分以及优选地至少两个结合部分是igg。4.根据权利要求2或权利要求3所述的组合物，其中第一和/或第二抗体的重链的ch3区被工程化以促进带有结合egfr的可变结构域的重链与带有结合her2的可变结构域的重链的异二聚体化和/或结合egfr的可变结构域与带有结合her3的可变结构域的重链的异二聚体化。5.根据权利要求2至4中任一项所述的组合物，其中所述两个或更多个抗体中的至少一个抗体以及优选地至少两个抗体是双特异性抗体。6.根据权利要求2至5中任一项所述的组合物，其中所述第一和第二抗体的结合至egfr的细胞外部分的可变结构域包括基本上相同的重链可变区。7.根据权利要求2至6中任一项所述的组合物，其中结合至egfr的细胞外部分的所述可变结构域结合egfr的结构域i或结构域iii，优选地结构域iii。8.根据权利要求2至7中任一项所述的组合物，其中结合至her2的细胞外部分的所述可变结构域结合her2的结构域i或结构域iv，优选地结构域iv。9.根据权利要求2至8中任一项所述的组合物，其中结合至her3的细胞外部分的所述可变结构域结合her3的结构域iii。10.根据权利要求6至9中任一项所述的组合物，其中结合至egfr的细胞外部分的所述可变结构域结合egfr的结构域i或结构域iii，优选地结构域iii；其中结合至her2的细胞外部分的所述可变结构域结合her2的结构域i或结构域iv，优选地结构域iv；并且其中结合至her3的细胞外部分的所述可变结构域结合her3的结构域iii。11.根据权利要求9或权利要求10所述的组合物，其中结合至her3的细胞外部分的所述可变结构域至少结合至her3的结构域iii的r426。12.根据权利要求9至11中任一项所述的组合物，其中结合至her3的细胞外部分的所述可变结构域对于结合至her3阳性sk-br-3细胞(htb-30
tm
)的亲和力(kd)低于或等于2.0nm，优选地为2.0至0.1nm。13.根据权利要求1至12中任一项所述的组合物，其中结合egfr的所述可变结构域对egfr的结合封阻egf对egfr的结合和/或其中结合her3的所述可变结构域对her3的结合封阻神经调节蛋白-1(nrg)对her3的结合。14.根据权利要求1至13中任一项所述的组合物，其中结合至egfr的细胞外部分的所述可变结构域包括包含cdr1序列nyamn、cdr2序列winantgdptyaqgftg以及cdr3序列erflewlhfdy的重链可变区，或者所述重链可变区的包括在所述cdrs中取代、删除和/或插入1、2或3个氨基酸的变异体。
15.根据权利要求1至14中任一项所述的组合物，其中结合至her2的细胞外部分的所述可变结构域包括包含cdr1序列sygmh、cdr2序列visydgsnkyyadsvkg以及cdr3序列dyyrrtaragfdy的重链可变区，或者所述重链可变区的包括在所述cdrs中取代、删除和/或插入1、2或3个氨基酸的变异体。16.根据权利要求1至15中任一项所述的组合物，其中结合至her3的细胞外部分的所述可变结构域包括包含cdr1序列gyymh、cdr2序列winpnsggtnyaqkfqg以及cdr3序列dhgsrhfwsywgfdy的重链可变区，或者所述重链可变区的包括在所述cdrs中取代、删除和/或插入1、2或3个氨基酸的变异体。17.根据权利要求1至16中任一项所述的组合物，-其中结合至egfr的细胞外部分的所述可变结构域包括包含cdr1序列nyamn、cdr2序列winantgdptyaqgftg以及cdr3序列erflewlhfdy的重链可变区，或者所述重链可变区的包括在所述cdrs中取代、删除和/或插入1、2或3个氨基酸的变异体；-其中结合至her2的细胞外部分的所述可变结构域包括包含cdr1序列sygmh、cdr2序列visydgsnkyyadsvkg以及cdr3序列dyyrrtaragfdy的重链可变区，或者所述重链可变区的包括在所述cdrs中取代、删除和/或插入1、2或3个氨基酸的变异体；以及-其中结合至her3的细胞外部分的所述可变结构域包括包含cdr1序列gyymh、cdr2序列winpnsggtnyaqkfqg以及cdr3序列dhgsrhfwsywgfdy的重链可变区，或者所述重链可变区的包括在所述cdrs中取代、删除和/或插入1、2或3个氨基酸的变异体。18.一种根据权利要求1至17中任一项所述的组合物，其用于治疗。19.一种根据权利要求18所述的组合物，其用于癌症，优选地胃癌、肺癌或食道癌的治疗。20.一种药物组合物，其包括根据权利要求1至17中任一项所述的组合物。21.两个或更多个结合部分，所述两个或更多个结合部分各自包括结合至egfr的细胞外部分的可变结构域；其中所述结合部分中的第一结合部分包括结合至her2的细胞外部分的可变结构域，并且所述结合部分中的第二结合部分包括结合至her3的细胞外部分的可变结构域，所述两个或更多个结合部分用于癌症，优选地胃癌、肺癌或食道癌的治疗。22.一种含有两个或更多个结合部分的产物，其中所述结合部分中的每个结合部分包括结合至egfr的细胞外部分的可变结构域；并且其中所述结合部分中的第一结合部分包括结合至her2的细胞外部分的可变结构域，并且所述结合部分中的第二结合部分包括结合至her3的细胞外部分的可变结构域，其在治疗癌症上作为同时、分开或依序使用的组合制剂，所述癌症优选地是胃癌、肺癌或食道癌。23.用于根据权利要求18-22中任一项所述的用途的组合物、药物组合物、结合部分或产物，其中所述癌症包括有带有egfr-突变的细胞，所述egfr-突变致使所述细胞对于利用酪氨酸激酶抑制剂(tki)的治疗具有抗性。24.用于根据权利要求18-23中任一项所述的用途的组合物、药物组合物、结合部分或产物，其中所述癌症包括有带有egfr r521k多型性的细胞。25.用于根据权利要求1-24中任一项所述的用途的组合物、结合部分或产物，其中所述癌症是胃癌。26.一种用于治疗具有癌症或者是存在癌症的复发或恶化的风险的个体的方法，所述
方法包括对需要所述治疗的个体施用治疗有效量的两个或更多个结合部分，其中所述结合部分中的每个结合部分包括结合至egfr的细胞外部分的可变结构域；并且其中所述结合部分中的第一结合部分包括结合至her2的细胞外部分的可变结构域，并且所述结合部分中的第二结合部分包括结合至her3的细胞外部分的可变结构域。27.一种用于生成根据权利要求1-19中任一项所述的组合物的方法，所述方法包括：提供包括下列的细胞
–
编码包括重链的多肽的核酸，所述重链能够与共同轻链配对以形成结合至egfr的细胞外部分的可变结构域；
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编码包括重链的多肽的核酸，所述重链能够与所述共同轻链配对以形成结合至her2的细胞外部分的可变结构域；
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编码包括重链的多肽的核酸，所述重链能够与所述共同轻链配对以形成结合至her3的细胞外部分的可变结构域；以及
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编码包括所述共同轻链的多肽的核酸；其中，任选地所述核酸中的两个或更多个核酸可以是物理连接的，并且其中所述核酸中的每一个核酸还包括表达调控序列以允许所述被编码的重链和轻链在所述细胞中的表达；以及培养所述细胞以允许所述重链和轻链的表达；任选地，回收所述两个或更多个结合部分。28.根据权利要求27所述的方法，其包括将所述核酸提供给多个细胞以及从集合选择带有所述重链和轻链的所期望的表达比例的细胞。29.根据权利要求27或权利要求28所述的方法，其中所述两个或更多个结合部分是抗体，优选地是双特异性抗体。30.根据权利要求27至29中任一项所述的方法，其中所述细胞生成基本上等摩尔数量的所述两个或更多个结合部分。31.根据权利要求27至30中任一项所述的方法，其中所述细胞生成所述两个或更多个结合部分中的第一结合部分要多于第二结合部分。32.一种包括下列的细胞：
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编码包括重链的多肽的核酸，所述重链连同共同轻链形成结合至egfr的细胞外部分的可变结构域；
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编码包括重链的多肽的核酸，所述重链连同所述共同轻链形成结合至her2的细胞外部分的可变结构域；
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编码包括重链的多肽的核酸，所述重链连同所述共同轻链形成结合至her3的细胞外部分的可变结构域；以及
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编码包括所述共同轻链的多肽的核酸；其中所述核酸中的两个或更多个核酸可以是或者不是物理连接的，并且其中所述核酸中的每一个核酸还包括表达调控序列以允许所述被编码的重链和轻链在所述细胞中的表达。33.一种包括核酸的容器，其包括：
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编码包括重链的多肽的核酸，所述重链能够与共同轻链配对以形成结合至egfr的细胞外部分的可变结构域；
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编码包括重链的多肽的核酸，所述重链能够与共同轻链配对以形成结合至her2的细胞外部分的可变结构域；
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编码包括重链的多肽的核酸，所述重链能够与共同轻链配对以形成结合至her3的细胞外部分的可变结构域；以及
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编码包括所述共同轻链的多肽的核酸；其中，任选地，所述核酸中的两个或更多个核酸可以是物理连接的，并且其中所述核酸中的每一个核酸还包括表达调控序列以允许所述被编码的重链和轻链在细胞中的表达。

技术总结
本发明涉及结合EGFR、HER2及HER3的结合部分的组合，更具体地提供一种包括两个或更多个结合部分的组合物，其中所述结合部分中的每一个结合部分包括结合至EGFR的细胞外部分的可变结构域；并且其中所述结合部分中的第一结合部分包括结合至HER2的细胞外部分的可变结构域，并且所述结合部分中的第二结合部分包括结合至HER3的细胞外部分的可变结构域。本发明还涉及用于生成组合物以及用所述组合物来治疗个体的装置和方法。个体的装置和方法。个体的装置和方法。


技术研发人员：塞西利亚
受保护的技术使用者：美勒斯公司
技术研发日：2020.02.13
技术公布日：2022/5/5