具有降血压功能的ACE抑制肽-ACEIP及其基因工程制备方法

技术特征：
1.用于表达降血压肽的大肠杆菌基因工程菌，其特征在于，带重组表达载体，所述重组表达载体携带编码串联小分子肽的基因，所述串联小分子肽是(wqvlpnavpak)6。2.根据权利要求1所述的用于表达降血压肽的大肠杆菌基因工程菌，其特征在于，所述重组表达载体是在pet30a( )的ndeⅰ和hindⅲ酶切位点之间连接编码组氨酸标签和肠激酶的基因、编码串联小分子肽的基因。3.根据权利要求2所述的用于表达降血压肽的大肠杆菌基因工程菌，其特征在于，编码组氨酸标签、肠激酶、串联小分子肽的基因如seq id no：1所示，添加酶切位点后如seq id no：2所示。4.根据权利要求1～3任一所述的用于表达降血压肽的大肠杆菌基因工程菌，其特征在于，所述大肠杆菌基因工程菌的宿主是e.coli bl21(de3)。5.降压肽，其特征在于，氨基酸序列是(wqvlpnavpak)6。6.权利要求1～4任一所述的大肠杆菌基因工程菌的构建方法，其特征在于，具体步骤包括：步骤一：人工合成seq id no.2所示的基因，克隆至载体puc中，将其转入到e.coli dh5α中，筛选出阳性转化子；步骤二：将步骤一中获得的阳性转化子经ndeⅰ和hindⅲ双酶切后获得的目的片段，与经过ndeⅰ和hindⅲ双酶切后的表达载体pet30a( )连接构建得到重组表达质粒；步骤三：将步骤二中获得的重组表达质粒转入大肠杆菌感受态细胞e.coli bl21(de3)感受态细胞中，采用含kana的lb抗性平板筛选出阳性工程菌pet30a-aceip，即为大肠杆菌基因工程菌。7.应用权利要求1～4任一所述的大肠杆菌基因工程菌制备降压肽的方法，其特征在于，包括以下步骤：挑取大肠杆菌pet30a-aceip阳性单菌落，接种于5ml的lb培养基中，37℃、200r/min培养过夜；按照1.5％的接种量接种于lb培养基中，于37℃、200r/min培养至od
600
0.6-0.8之间；加入终浓度为1mmol/l iptg在30℃诱导6h，离心收集菌体，将菌体破碎后，进行离心，收集沉淀，将沉淀溶解后，离心收集上清液，将上清液采用活化的ni柱亲和层析纯化获得降压肽。8.权利要求1～4任一所述的大肠杆菌基因工程菌在制备降压肽中的应用。9.权利要求5所述降压肽在制备降压产品中的应用。10.含有权利要求5所述降压肽的降压产品。

技术总结
本发明公开了具有降血压功能的ACE抑制肽-ACEIP及其基因工程制备方法，属于基因工程技术领域。本发明将小分子肽基因串联6次，然后在大肠杆菌中表达，能够克服短肽不易表达的问题，并通过优化表达条件来提高表达量。不仅能够使多肽能耐受菌体的酶系统，有效屏蔽宿主毒性，不易被降解，并且，获得的肽具有降血压功能，可为降血压肽的发展提供物质可能。可为降血压肽的发展提供物质可能。可为降血压肽的发展提供物质可能。


技术研发人员：江波 狄娜娜 陈静静 张涛
受保护的技术使用者：江南大学
技术研发日：2022.01.24
技术公布日：2022/4/29